i ) 1 ml 의 균 배양액 을 1 . 5 ml 튜브 에 옮기 고 , 12 , 000 rpm 에서 5 분 간 원심 분리 하 는 단계 ; ii ) 상층 액 을 버린 후 , 펠 렛 에 467 ul 의 TE buffer 를 첨가 하 여 펠 렛 을 잘 현 탁 ( suspension ) 하 는 단계 ; iii ) 추가 로 30 ul 의 10 % SDS , 3 ul 의 proK ( 20 mg / ul ) 를 첨가 하 고 , 65 ℃ 에서 1 시간 반응 시키 는 단계 ; iv ) 25 : 24 : 1 의 페놀 / 클로로포름 / 아이소아밀알코올 ( 페놀 : 클로로포름 : 아이소아밀알코올 ) 500 ul 를 첨가 하 고 볼 텍 싱 ( vortex ) 을 수행 하 는 단계 ; v ) 상기 혼합액 을 12 , 000 rpm 에서 10 분 간 원심 분리 한 후 , 400 ul 의 상층 액 을 취하 여 새로운 1 . 5 ml 튜브 에 담 고 , 40 ul 의 3 M 소디 윰 아세테이트 ( sodium acetate ) 와 800 ul 의 100 % 에탄올 ( EtOH ) 을 첨가 하 여 혼합 하 는 단계 ; vi ) 상기 혼합액 을 12 , 000 rpm 에서 10 분 간 원심 분리 한 후 , 상층 액 을 버리 고 500 ul 의 75 % 에탄올 ( 75 % cold EtOH ) 를 첨가 하 는 단계 ; vii ) 상기 혼합액 을 12 , 000 rpm 에서 10 분 간 원심 분리 한 후 , 상층 액 을 제거 하 고 , 펠 렛 을 건조 하 는 단계 , 및 viii ) 150 ul 의 TE buffer 또는 멸 균수 를 넣 어 펠 렛 을 녹여 용출 ( elution ) 하 는 단계 를 포함 하 는 것 일 수 있 다 .