세균 균주 악 티 노신 네마 프레티 오 숨 아종 프레티 오 숨 ATCC 31280 ( US 4 , 315 , 989 ) 및 악 티 노신 네마 미 룸 DSM 43827 ( KCC A - 0225 , Watanabe et al . , 1982 ) 을 성장 시키 는 데 이용 되 는 조건 은 특허 문헌 ( US 4 , 315 , 989 and US 4 , 187 , 292 ) 에 기술 되 어 있 다 . 진탕 인큐베이터 에서 시험관 또는 플라스크 중 의 브로 쓰 에 대한 배양 에 대해서 본원 에서 이용 된 방법 은 이 들 특허 들 로부터 변형 되 었 으며 하 기 와 같 고 , 공개 된 프로토콜 에 대한 변형 은 실시 예 에서 지시 된다 . 2 개 의 균주 를 ISP 2 한천 ( 배지 3 , Shirling , E . B . and Gottlieb , D . , 1966 ) 에서 2 내지 3 일 동안 28 ℃ 에서 성장 시켰으며 , 시드 배지 ( 배지 1 , 하 기 참조 , US 4 , 315 , 989 및 US 4 , 187 , 292 로 부터 변형 ) 에 접종 하 는 데 사용 하 였 다 . 이어서 , 접종 된 시드 배지 를 48 시간 동안 28 ℃ 에서 5 또는 2 . 5 cm 쓰 로우 , 200 내지 300 rpm 으로 진탕 시키 면서 인 큐 베이 션 하 였 다 . C 21 - 데 옥시 막베 신 유사 체의 생 성 에 대해 , 발효 배지 ( 배지 2 , 하 기 참조 , US 4 , 315 , 989 및 US 4 , 187 , 292 ) 를 2 . 5 % 내지 10 % 의 시드 배 양물 로 접종 시킨 후 , 처음 에 는 24 시간 동안 28 ℃ 에서 , 이어서 4 내지 6 일 동안 26 ℃ 에서 5 또는 2 . 5 cm 쓰 로우 , 200 내지 300 rpm 으로 진탕 시키 면서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 이어서 , 배 양물 을 추출 을 위해 수거 하 였 다 .