IGF - 1 R HC * 및 LC * 를 인코딩 하 는 핵산 서열 을 각각 , 화학 적 합성 으로 합성 한 후 Geneart ( Regensburg , Germany ) 에서 pGA 4 클로닝 벡터 에 기초 를 둔 pPCRScript ( Stratagene ) 내 로 클로닝 하 였 다 . IGF - 1 R HC * 를 인코딩 하 는 발현 카세트 를 PvuII 및 BmgBI 제한 위치 를 통해 각각 의 대장균 플라스미드 내 로 라 이게 이 션 하 여 최종 벡터 DW 047 - pUC - HC *- IGF - 1 R 을 야기 하 였 고 ; 각각 의 IGF - 1 R LC * 를 인코딩 하 는 발현 카세트 를 PvuII 및 SalI 제한 위치 를 통해 각각 의 대장균 플라스미드 내 로 라 이게 이 션 하 여 최종 벡터 DW 048 - pUC - LC *- IGF - 1 R 을 야기 하 였 다 . 서브 클로닝 된 핵산 서열 을 DNA 서열 분석 으로 확인 하 였 다 . 일시 적 및 안정 적 트랜스펙션 을 위해서 , 형질 전환 된 대장균 배 양물 로부터 의 플라스미드 제조 에 의해 다량 의 플라스미드 를 제조 하 였 다 ( Nucleobond AX , Macherey - Nagel ) .