완전 배양 에서 얻 은 세포 는 원심 분리 ( 4 ℃, 18000 g , 30 분 ) 하 여 침전 시켰 다 . 파지 미드 입자 를 포함 하 는 상등 액 은 멸균 - 여과 ( 0 . 45 ㎛) 하고 , 1 / 4 부피 의 20 % w / v PEG 8000 , 15 % w / v NaCl 과 함께 인 큐 베이 션 하 고 , 적어도 2 시간 동안 얼음 위 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 원심 분리 ( 4 ℃, 18000 g , 30 분 ) 후 배 양물 1 L 에서 침전 된 파지 미드 입자 를 50 mM 벤 자미 딘 ( benzamidine , Sigma ) 및 페파 블럭 ( Pefabloc , Roth , Karlsruhe , Germany ) 1 ㎍/ mL 를 포함 하 는 30 mL 의 콜드 BBS / E ( 200 mM Na - 보레 이트 , 160 mM NaCl , 1 mM EDTA pH 8 . 0 ) 에서 용해 시켰 다 . 상기 용액 을 1 시간 동안 얼음 위 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 용해 되 지 않 은 성분 들 의 원심 분리 ( 4 ℃, 43000 g , 10 분 ) 후 , 각 상등 액 을 새로운 반응 용기 로 옮겼 다 .