실시 예 2 - 2 에서 수득 한 형질전환 체 를 100 ug / mL 의 앰 피 실린 을 포함 하 는 LB 배지 에서 OD 600 가 0 . 4 내지 0 . 5 정도 가 되 도록 배양 하 고 , 상기 배양액 을 15 ℃ 에서 30 분 간 방치 한 후 , 배양액 에 1 mM IPTG 를 첨가 하 여 다시 15 ℃ 에서 24 시간 동안 진탕 배양 하 였 다 . 상기 배양 된 상기 배 양물 을 5000 rpm 으로 5 분 간 원심 분리 하 여 세포 를 수득 하 고 , 이 를 용균 용 완충 용액 ( 100 mM Tris - HCl , 1 mM EDTA , 5 mM dithiothreitol , pH 7 . 4 ) 에 넣 고 , 초음파 분쇄 하 여 , 세포 를 파쇄 하 고 이 를 15 , 000 rpm 으로 1 시간 동안 원심 분리 하 여 단백질 분획 을 수득 하 였 다 .