발굴 된 pHCP 7 , pHCP 51 플라스미드 들 의 복제 수 를 확인 하 기 위하 여 , 스크리닝 을 위해 사용 하 였 던 리포터 단백질 유전자 인 D - 타가토스 전환 효소 와 형광 단백질 의 복합 유전자 를 떼 어 내 고 목적 하 고자 하 는 D - 타가토스 전환 효소 를 삽입 하 여 복제 수 확인 에 사용 하 였 다 ( 도 5 a ) . 플라스미드 의 복제 수 를 확인 하 기 위해서 는 실시간 PCR 을 이용 하 여 지 놈 유전자 대비 정량 방법 을 실시 하 였 다 . 플라스미드 복제 수 를 확인 하 기 위해 사용 한 유전자 부위 는 대장균 의 p 15 A ori 부분 을 증폭 부위 로 이용 하 였 고 , 코리 네 박 테리 움 의 지 놈 유전자 의 SigB 유전자 부분 을 증폭 부위 로 이용 하 였 다 . pHCP 의 복제 수 에 비하 여 발굴 된 pHCP 7 , pHCP 51 은 각각 2 . 3 배 , 3 배 의 복제 수 를 가지 고 있 음 을 확인 하 였 다 ( 도 5 b ) . 이 는 본 출원 에서 제공 하 는 플라스미드 가 기존 pHCP 플라스미드 에 비하 여 더욱 더 많 은 복제 수 를 가진 향상 된 플라스미드 로서 사용 될 수 있 음 을 확인 할 수 있 었 다 .