변형 된 IVT 방법 들 은 선행 기술 공정 들 을 사용 하 여 생성 되 는 바람직 하 지 않 은 하나 이상 의 오염 물질 들 이 없 는 매우 기능 적 인 RNA 의 RNA 제재 를 생성 하 기 위한 IVT 반응 에서 반응 매개변수 중 하나 이상 의 조작 을 포함 한다 . 조작 될 수 있 는 IVT 반응 내 하나 의 매개변수 는 반응 혼합물 에서 하나 이상 의 다른 뉴클레오티드 또는 뉴클레오티드 유사 체 들 과 비교 한 상대 양 ( 예컨대 , 이질 적 인 뉴클레오티드 양 또는 농도 ) 이 다 . 예 를 들 어 , IVT 반응 은 과량 의 뉴클레오티드 , 예컨대 , 뉴클레오티드 모노 포스 페이트 , 뉴클레오티드 다 이 포스 페이트 또는 뉴클레오티드 트라이 포스 페이트 및 / 또는 과량 의 뉴클레오티드 유사 체 및 / 또는 뉴클레오시드 유사 체 를 포함 할 수 있 다 . 상기 방법 들 은 종래 의 IVT 방법 들 에 의해 생성 된 생성물 들 보다 현저히 더 순수 한 고수 율 의 생성물 을 생성 한다 .