purA 프로모터 변이 라이브러리 를 제작 하 기 위해 우선 서열 번호 1 의 purA 프로모터 를 포함 하 는 GFP ( green fluorescent protein ) 발현 벡터 를 제작 하 였 다 . PCR 은 코 리네 박 테리 움 스테이 셔 니스 ATCC 6872 의 게 노 믹 DNA 를 주형 으로 서열 번호 15 와 16 의 프라이머 를 이용 하 여 , 94 ℃ 에서 30 초 의 변성 ( denaturation ) , 55 ℃ 에서 30 초 의 어닐링 ( annealing ) , 및 72 ℃ 에서 2 분 의 연장 ( extension ) 과정 이 30 회 반복 수행 되 었 다 . 얻 어 진 DNA 단편 을 KpnI 과 EcoRV 으로 절단 한 후 , 동일 한 제한 효소 로 절단 된 p 117 - gfp 벡터 ( 대한민국 공개 특허 10 - 0620092 ) 에 클로닝 하 였 다 . 상기 방법 으로 제작 된 벡터 를 p 117 - PpurA - gfp 라 명명 하 였 다 .