HT 22 세포 내 의 Tat - CNRIP 1 융합 단백질 과 CNRIP 1 단백질 을 탐지 하 기 위해 세포 를 유리 커버 슬립 상 에 시드 하 고 Tat - CNRIP 1 융합 단백질 과 CNRIP 1 단백질 을 5 μ M 농도 로 1 시간 동안 처리 하 였 다 . 세포 를 PBS 로 두 번 세 척 한 다음 실온 에서 5 분 간 4 % 파라포름 알데하이드 로 고정 하 였 다 . HT 22 세포 는 실온 에서 40 분 간 3 % 우 혈청 알부민 과 0 . 1 % Triton X - 100 이 함유 된 PBS ( PBS - BT ) 로 40 분 간 블로킹 하 고 , PBSBT 로 세척 하 였 다 . 일 차 항체 ( His - probe , Santa Cruz Biotechnology ) 는 1 : 10000 비율 로 희석 하 고 , 이 차 항체 ( Alexa fluor 488 , Invitrogen ) 는 1 : 15000 비율 로 희석 한 후 어두운 곳 에서 실온 으로 1 시간 동안 배양 하 였 다 . 세포핵 은 DAPI ( 4 ', 6 - diamidino - 2 - phenylindole 1 ㎎/ ml ; Roche , Mannheim , Germnay ) 로 3 분 간 염색 하 였 다 . 염색 된 HT 22 세포 는 Fv - 300 공 촛 점 형광 현미경 ( Olympus , Tokyo , Japan ) 하 에서 관찰 하 였 다 .