단계 4 에서 , 보호기 Pg 1 ( 단계 3 에서 아미노산 s 에 도입 됨 ) 이 제거 되 고 , 아미드 컬 플 링 이 ( 탈 보호 된 ) 화합물 t 와 꼬리 기 "" 카 복실 레이트 시약 u 를 반응 시킴 으로써 수행 된다 . Pg 1 이 Fmoc 기인 양태 에서 ", 탈 보호 는 극성 비양 성 자성 용매 , 예컨대 THF 또는 메틸 - THF 중 테트라 부틸 아모 늄 클로라이드 ( TBAF ) 를 사용 하 여 수행 될 수 있 다 . 단계 4 의 아미드 커플링 은 1 - 하이드 록 시 - 7 - 아자 벤조 트라이아졸 ( HOAt ) 의 존재 하 에 에틸 -( N ', N '- 다이메틸 아미노 ) 프로필 카 보디 이미드 하이드로 클로라이드 ( EDC ) 를 사용 함 으로써 수행 될 수 있 다 . 꼬리 기 시약 u 는 하 기 추가 로 상세히 설명 된다 .