뉴클레아제 도메인 이 CRISPR - 뉴클레아제 이 거나 이 로부터 유도 된 것 이 고 , 여기 서 융합 단백질 또는 가이드 RNA 중 하나 를 코딩 하 는 상이 한 구조 체 를 사용 하 여 트랜스펙션 이 수행 되 는 구현 에서 , 가이드 RNA 발현 플라스미드 에 대한 융합 단백질 발현 플라스미드 의 중량 비 는 10 : 1 내지 1 : 200 , 예컨대 2 : 1 내지 1 : 10 , 또는 1 : 1 내지 1 : 5 , 보다 바람직 하 게 는 1 : 1 내지 1 : 3 의 범위 , 예컨대 약 1 : 2 의 범위 내이 다 . 바람직 하 게 , 트랜스펙션 용액 ( 수용액 및 PEG 내 의 세포 둘 모두 를 포함 함 ) 당 예 를 들 어 , 적어도 0 . 5 ㎍, 적어도 1 ㎍, 적어도 5 ㎍, 또는 적어도 10 ㎍, 또는 약 10 ㎍ 과 같이 적어도 0 . 1 ㎍ 의 융합 단백질 발현 플라스미드 가 사용 된다 . 일 구현 으로 , 적어도 0 . 5 μ g , 적어도 1 μ g , 적어도 5 μ g 또는 적어도 10 μ g 또는 약 10 μ g 와 같 은 상기 적어도 0 . 1 μ g 의 융합 단백질 발현 플라스미드 가 본원 에 교시 된 바 와 같 은 적절 한 중량 범위 로 가이드 RNA 발현 플라스미드 와 조합 되 고 , 그리고 융합 단백질 플라스미드 와 가이드 RNA 발현 플라스미드 의 상기 조합 은 10 , 000 - 10 , 000 , 000 , 바람직 하 게 약 50 , 000 - 5 , 000 , 000 , 보다 바람직 하 게 는 약 100 , 000 - 1 , 000 , 000 , 예 를 들 어 약 500 , 000 식물 세포 또는 식물 원형질체 와 조합 된다 .