C 2 C 12 세포 를 6 well plate 에 6 × 105 cells / well 씩 분주 하 여 24 시간 동안 배양 하 였 다 . 24 시간 후 에 세포 분화 를 시키 기 위해 분화 배지 로 교체 하 였 고 , 6 일 동안 이틀 에 한 번 씩 배지 교환 해 줬 다 . 6 일 후 50 ㎍/㎖ + TNF - α 를 처리 하 여 다시 48 시간 동안 반응 하 였 다 . 48 시간 반응 후 에 디지털카메라 가 장착 된 광학 현미경 으로 세포 근관 넓이 를 확인 하 였 다 .