S 6 K 1 유전자 녹아웃 세포 를 제조 하 기 위해 사용 한 세포 인 헬라 세포 는 10 % 소 태아 혈청 , 2 mmol / L 의 글루타민 , 100 units / mL 의 페니실린 , 및 100 ug / mL 의 스트렙토마이신 ( Life Technology ) 으로 보충 된 돌 베코 수정 이 글 배지 ( DMEM ) 에서 배양 하 였 다 . 이 후 서열 번호 1 로 특정 되 는 S 6 K 1 유전자 를 특이 적 으로 표적 하 는 shRNA ( small hairpin RNA ) 를 이용 하 여 24 시간 동안 헬라 세포 에 렌 티 바이러스 ( Lentivirus ) 를 감염 시켜 S 6 K 1 유전자 녹아웃 을 유도 하 였 다 ( shS 6 K 1 이 녹아웃 된 헬라 세포 는 이하 에서 ' shS 6 K 1 - 세포 ' 라 지칭 하 고 , S 6 K 1 유전자 녹아웃 을 유도 하 지 않 는 헬라 세포 는 shNA - 세포 ( short hairpin non - silencing RNA - cell ) 로 지칭 함 ) . 이 후 0 . 5 mg / ml 의 퓨 로 마이신 을 이용 하 여 녹아웃 세포 를 선택 하 였 고 , 이 를 이용 하 여 안정 한 shNS - 세포주 및 shS 6 K 1 - 세포주 를 구축 하 였 다 .