100 mm 배양 접시 를 이용 하 여 처리 한 조직 을 MSC - GM ( Cambrex ) 배양액 을 사용 하 여 , 배 양접시 밑바닥 에 부착 된 세포 가 일정 한 양 으로 증식 하 면 수확 하 여 계대 배양 을 반복 해 나간다 . 간엽 줄기세포 유지 전용 배지 를 이용 하 여 계대 배양 한다 . ( 이 를 P 1 이 라 칭한다 , 세포 밀도 는 대개 3 , 000 cells ~ 10 , 000 cells / ㎠ 를 유지 한다 . )- P 1 에서부터 계대 배양 하 면서 ( P 2 , P 3 , P 4 , ... ) 세포 수 에 알맞 도록 적절히 배양 접시 의 면적 을 늘려 가 며 , 배지 교환 은 2 ~ 3 일 간격 으로 하 고 , 필요 에 따라 바이알 당 106 개 의 세포 수 를 만들 어 간엽 줄기세포 를 저장 한다 .