일 실시 형태 에서 , 세포 는 적합 한 세포 배 양물 ( 예 를 들 어 , HEK 293 ) 세포 에서 제조 된다 . 본 명세서 에 기재 된 유전자 요법 을 제조 하 는 방법 은 유전자 요법 벡터 의 생 성 을 위해 사용 되 는 플라스미드 DNA 의 생 성 , 벡터 의 생 성 및 벡터 의 정제 와 같이 당업 계 에 잘 공지 된 방법 을 포함 한다 . 일부 실시 형태 에서 , 유전자 요법 벡터 는 AAV 벡터 이 고 , 생성 된 플라스미드 는 AAV 게놈 및 관심 유전자 를 암호 화 하 는 AAV 시스 - 플라스미드 , AAV rep 및 cap 유전자 를 함유 하 는 AAV 트랜스 - 플라스미드 , 및 아데노바이러스 헬퍼 플라스미드 이 다 . 벡터 생성 공정 은 방법 단계 , 예컨대 , 세포 배양 의 개시 , 세포 의 계대 , 세포 의 시 딩 , 세포 에 의 플라스미드 DNA 의 형질 주입 , 혈청 무 함유 배지 로 의 형질 주입 후 배지 교환 , 및 벡터 - 함유 세포 및 배양 배지 의 수거 를 포함 할 수 있 다 . 수거 된 벡터 - 함유 세포 및 배양 배지 를 본 명세서 에서 조 세포 수 거물 이 라 지칭 한다 . 또 다른 시스템 에서 , 유전자 요법 벡터 는 곤충 세포 내부 로 바 큘로바이러스 - 기반 벡터 로 의 감염 에 의해 도입 된다 . 이러 한 생산 시스템 에 대한 리뷰 에 대해서 는 , 일반 적 으로 예 를 들 어 , 문헌 [ Zhang et al . , 2009 , " "" Adenovirus - adeno - associated virus hybrid for large - scale recombinant adeno - associated virus production "," Human Gene Therapy 20 : 922 - 929 ] ( 그 내용 은 전문 이 본 명세서 에 참고 로 포함 됨 ) 를 참고 하 기 바란다 . 이러 한 및 다른 AAV 생산 시스템 의 제조 및 사용 방법 은 하 기 미국 특허 에 기술 되 어 있 으며 , 이 들 각각 의 내용 은 전문 이 본 명세서 에 참고 로 포함 된다 : 5 , 139 , 941 ; 5 , 741 , 683 ; 6 , 057 , 152 ; 6 , 204 , 059 ; 6 , 268 , 213 ; 6 , 491 , 907 ; 6 , 660 , 514 ; 6 , 951 , 753 ; 7 , 094 , 604 ; 7 , 172 , 893 ; 7 , 201 , 898 ; 7 , 229 , 823 ; 및 7 , 439 , 065 .