온전 한 경골 을 수작업 으로 근육 및 다른 접착성 연 조직 으로부터 제거 하 였 다 . 전체 경골 을 효소 적 으로 1 시간 동안 37 ℃ 에서 0 . 2 % SigmaBlend 콜라 게나 제 F 형 ( Sigma - Aldrich ) 으로 분해 하 였 다 . 골막 분리 물 을 이어서 20 초 동안 30 A 에서 Kontes Micro Ultrasonic Cell Disrupter Model # KT 50 ( Vineland , NJ ) 을 사용 하 여 초음파 처리 하 였 다 . 파쇄 물 의 전체 알칼리 성 포스 파타 제 활성 은 ACE 임상 적 화학 분석기 ( Alfa Wassermann , Fairfield , NJ ) 상 에서 제조 업자 의 프로토콜 에 따라 정량 하 였 다 .