a ) 보르데 텔라 브론 키 셉 티 카 aroA 유전자 결손 비 병원 성 변이 주 생산 을 위하 여 , aroA 유전자 부위 중 에서 N - 말단 약 300 mer 와 C - 말단 약 300 mer 를 각각 PCR 로 증폭 하 고 이 를 클로닝 벡터 인 pGEM - T Easy 벡터 에 클로닝 한다 . 또한 , 선택 마커 유전자 로 KanR 유전자 가 삽입 되 어 있 는 헬퍼 벡터 pKD 13 으로부터 KanR 을 증폭 하 여 pGEM - T Easy 벡터 에 클로닝 한다 . 그리고 이종 항원 단백질 로 발현 될 PCV 2 의 캡시드 단백질 유전자 도 PCR 로 증폭 하 여 pGEM - T Easy 벡터 에 클로닝 한다 ( 도 1 참조 ) .