하이브리도마 는 문헌 [ Kohler , B . and Milstein , C . ( 1975 ) Nature 256 : 495 - 497 ] 의 일반 적 체세포 혼성 화 기술 을 사용 하 거나 또는 문헌 [ Buck , D . W . , et al . , In Vitro , 18 : 377 - 381 ( 1982 ) ] 에 의해 변형 된 바 와 같이 , 림프구 및 불멸 화 골수종 세포 로부터 제조 할 수 있 다 . X 63 - Ag 8 . 653 및 솔 크 인스 티 튜 트 , 셀 디스 트리 뷰 션 센터 ( Salk Institute , Cell Distribution Center ; 미국 캘리포니아주 샌디에이고 ) 로부터 의 것 을 포함 하나 , 이 에 제한 되 지 는 않 는 입수 가능 한 골수종 세포주 를 상기 혼성 화 에 사용 할 수 있 다 . 일반 적 으로 , 이러 한 기술 은 폴리에틸렌 글리콜 과 같 은 융합 유도 제 를 이용 하 거나 , 또는 관련 기술 분야 의 통상 의 기술자 에게 널리 공지 된 전기 적 수단 에 의해 골수종 세포 와 림프계 세포 를 융합 시키 는 것 을 포함 한다 . 이러 한 융합 후 , 상기 세포 를 융합 배지 로부터 분리 시키 고 , 선택 적 성장 배지 , 예컨대 히포 크산틴 - 아 미노프 테린 - 티미 딘 ( HAT ) 배지 에서 성장 시켜 혼성 화 되 지 않 은 모 세포 를 제거 한다 . 혈청 으로 보충 시켰 거나 보충 시키 지 않 은 , 본원 에 기재 된 배지 중 임의 의 것 이 , 모노클 로 날 항체 를 분비 하 는 하이브리도마 를 배양 하 기 위해 사용 될 수 있 다 . 세포 융합 기술 에 대한 또 다른 대안 으로서 , EBV 불멸 화 B 세포 를 사용 하 여 본원 에 기재 된 TCR - 유사 모노클 로 날 항체 를 생산 할 수 있 다 . 하이브리도마 를 원하 는 경우 , 확장 하 고 서브 클로닝 하 며 , 상등 액 을 대상 으로 통상 적 인 면역 검정 절차 ( 예 를 들 어 , 방사성 면역 검정 , 효소 면역 검정 , 또는 형광 면역 검정 ) 에 의해 항 - 면역원 활성 에 관하 여 검정 한다 .