프로브 는 천식 을 검출 하 기 위해 엄격 한 ( stringent ) 조건 하 에서 cDNA 분자 와 혼성 화 된다 . 적절 한 혼성 화 조건 은 최적 화 과정 에 의해 관례 적 으로 결정 될 수 있 다 . 온도 , 구성 성분 의 농도 , 혼성 화 및 세 척 시간 , 버퍼 구성 성분 , 및 그 들 의 pH 및 이온 세기 ( ionic strength ) 와 같 은 조건 은 프로브 의 길이 와 GC 함량 및 타 겟 뉴클레오티드 서열 을 포함 하 여 , 다양 한 요소 에 따라 변경 될 수 있 다 . 혼 성 화 를 위한 상세 한 조건 은 Joseph Sambrook , et al . , Molecular Cloning , A Laboratory Manual , Cold Spring HarborLaboratory Press , Cold Spring Harbor , N . Y . ( 2001 ) ; 및 M . L . M . Anderson , Nucleic Acid Hybridization , Springer - Verlag New York Inc . N . Y . ( 1999 ) 에서 찾 을 수 있 다 . 예 를 들 어 , 매우 엄격 한 조건 은 65 ℃ 에서 0 . 5 M NaHPO 4 , 7 % SDS ( sodium dodecyl sulfate ) 및 1 mM EDTA 에서 의 혼성 화 및 68 ℃ 에서 0 . 1 x SSC ( standard saline citrate ) / 0 . 1 % SDS 에서 의 세 척 을 포함 한다 . 또한 , 매우 엄격 한 조건 은 48 ℃ 에서 6 x SSC / 0 . 05 % 피로 인산나트륨 ( sodium pyrophosphate ) 에서 의 세 척 을 포함 한다 . 약간 엄격 한 조건 은 예컨대 , 42 ℃ 에서 0 . 2 x SSC / 0 . 1 % SDS 에서 의 세 척 을 포함 한다 .