알리자린 의 ExoS 로 유도 된 염증 억제 효과 를 알아보 기 위하 여 , H 292 세포 를 소태 아 혈청 ( Fetal Bovine Serum , FBS ) 을 10 % 첨가 한 RPMI ( Welgene , 한국 ) 배지 에서 배양 하 였으며 , ExoS 로 유도 된 IL - 1 β , IL - 6 , 그리고 IL - 18 생성 에 대한 알리자린 의 억제 율 을 측정 하 였 다 . H 292 세포 를 4 x 105 개 / ml 농도 로 현 탁 하 여 12 - 웰 플레이트 에 1000 μ l 씩 접종 한 후 , 알리자린 을 2 . 5 , 5 , 10 , 20 μ M 의 농도 로 처리 하 였 다 . 1 시간 동안 배양 한 후 , MOI 100 의 ExoS 를 처리 하 여 6 시간 동안 더 배양 하 였 다 . 그 후 , Trizol ( Invitrogen ; Thermo Fisher Scientific , Inc . , MA , USA ) 을 사용 하 여 세포 를 회수 하 여 - 70 ℃ 에 보관 하 였 다 . 이 는 Trizol 법 을 활용 하 여 RNA 를 추출 하 였으며 , cDNA 를 만들 기 위해 RNA 를 정량 후 DNA 합성 kit ( Cat . No . FSQ - 301 , TOYOBO , Japan ) 를 사용 하 여 제조사 의 프로토콜 에 따라 cDNA 를 만들 었 다 .