gRNA 에 대한 B . 리 체니 포르 미스 발현 카세트 는 , gRNA 를 암호 화 하 는 DNA ( 서열 번호 111 ) 를 B . 리 체니 포르 미스 에서 활성 인 프로모터 ( 예 : 표 6 ) 및 B . 리 체니 포르 미스 에서 활성 인 종결자 ( 예 : 서열 번호 103 ) 에 작동 가능 하 게 연결 함 으로써 생성 되 며 , 이 는 gRNA 발현 카세트 ( spac - gRNA - t 0 , 서열 번호 112 ) 를 생성 한다 . Cas 9 발현 카세트 ( 서열 번호 104 ) 및 gRNA 발현 카세트 ( 서열 번호 112 ) 에 의해 만들 어 진 DNA 절단 을 정확 하 게 복구 하 기 위해서 는 세포 의 DNA 복구 기 작 에 의해 사용 될 편집 템플 릿 이 제공 되 어야 한다 . 예 를 들 어 , 18 - bp 중복 의 상류 ( 5 ’) 에 있 는 500 bp ( 서열 번호 113 ) 가 18 - bp 중복 의 하류 ( 3 ’) 에 있 는 500 bp ( 서열 번호 114 ) 에 융합 되 어 , RGEN 에 의해 생긴 DNA 절단 을 복구 하 기 위해 B . 리 체니 포르 미스 숙주 기 작 에 의해 사용 될 수 있 는 편집 템플 릿 ( 서열 번호 115 ) 이 생성 된다 .