개별 적 인 마우스 의 척수 조직 으로부터 TRI - 시약 을 사용 하 여 RNA 를 분리 할 수 있 다 . RNA 6000 나노 랩 칩 키트 ( RNA 6000 Nano LapChip kit ) 로 RNA 완전 도 ( RNA integrity ) 및 농도 를 결정 할 수 있 다 . RT - PCR 키트 를 사용 하 여 역전사 를 수행 함 으로써 RNA 의 cDNA 복제물 을 제조 할 수 있 다 . 하 기 와 같이 RT - PCR 키트 로서 수퍼 스크립트 ( SuperScript ) ( 등록 상표 ) 제 1 열 합성 시스템 을 사용 하 여 역전사 를 실행 할 수 있 다 . 총 RNA 를 0 . 5 ㎍ 의 올리 고 ( dT ) 및 50 ng 의 무작위 육량 체 ( hexamer ) 와 함께 70 ℃ 에서 10 분 간 총 부피 12 ㎕ 로 어닐링 하 고 얼음 위 에 냉각 시킨다 . 이어서 2 . 5 ×RT 완충액 , 6 . 25 mM MgCl 2 , 1 . 25 mM dNTP , 25 mM DTT 및 200 U 수퍼 스크립트 II 역전사 효소 를 함유 하 는 8 ㎕ 의 칵테일 을 가한다 . 혼합물 을 25 ℃ 에서 10 분 , 42 ℃ 에서 50 분 , 및 70 ℃ 에서 15 분 간 배양 하 고 얼음 위 에 냉각 시킨다 . 시료 를 2 U 의 RNase H 로 37 ℃ 에서 20 분 간 처리 할 수 있 다 .