VP 4 유전자 를 증폭 하 기 위하 여 , 정 방향 프라이머 Con 3 ( 5 - TGGCTTCGCCATTTTATAGACA - 3 ': 서열 번호 7 ) 와 역방향 프라이머 Con 2 ( 5 ' ATTTCGGACCATTTATAACC - 3 ': 서열 번호 8 ) 를 사용 하 였으며 , RT - PCR 반응 은 50 ℃ 에서 30 분 동안 초기 역전사 단계 를 수행 한 후 95 ℃ 에서 15 분 동안 처리 하 고 , 94 ℃ 에서 45 초 , 50 ℃ 에서 50 초 , 72 ℃ 에서 45 초간 의 반응 을 35 회 반복 하 고 , 마지막 으로 72 ℃ 에서 10 분 간 반응 시켜 876 bp 단편 의 VP 4 유전자 를 증폭 하 였으며 , 이 를 1 . 5 % 아가 로즈 겔 에서 전기영동 하 여 확인 하 였 다 .