인간 활성 트립 타제 ( 사량 체 ) 의 농도 는 ELISA 검정 으로 결정 되 었 다 . 인간 트립 타제 를 인식 하 는 그리고 트립 타제 사량 체 를 해리 시킬 수 있 는 마우스 단 클론 성 항체 클론 B 12 는 포착 항체 로서 사용 되 었 다 ( Fukuoka 등 상동 ) . 인간 트립 타제 를 결합 시키 는 다른 항체 는 또한 사용 될 수 있 다 . 재조합 인간 활성 트립 타제 베타 1 은 정제 되 었 고 검정 표준 의 제조 용 원료 물질 로서 사용 되 었 다 . 검정 표준 , 대 조군 , 및 희석 된 샘플 은 10 분 동안 500 μ g / ml SBTI 로 인 큐 베이 션 되 었 고 그 다음 1 시간 동안 ABP ( G 0353816 ) 으로 라벨 링 되 었 다 . 소분 자 트립 타제 억제제 ( G 02849855 ) 는 20 분 동안 첨가 되 어 ABP 라벨 링 을 중단 시켰 다 . 이 혼합물 은 1 시간 동안 포착 항체 를 가진 ELISA 플레이트 에 첨가 되 었 고 , 1 x PBST 로 세정 되 었 고 , 2 시간 동안 SA - HRP 시약 으로 인 큐 베이 션 되 었 다 . 비색계 신호 는 TMB 적용 으로 생성 되 었 고 , 반응 은 인산 첨가 로 중단 되 었 다 . 플레이트 는 기준 흡광도 로 650 nm 및 검출 흡광도 로 450 nm 를 사용 하 는 SpectraMax ® M 5 플레이트 판독기 에서 판독 되 었 다 .