NMDA 수용체 활성도 를 멤 브레인 전류 의 표준 편차 ( SD ) 로서 측정 했 다 . 약물 의 급 성 효과 를 검토 하 기 위해 , 멤 브레인 전류 의 SD 를 매개체 컨트롤 용액 중 에서 약물 의 여러 가지 농도 ( 1 ∼ 100 μ M ) 의 존재 하 에 측정 했 다 . 스크리닝 을 위해 , 대부분 의 화합물 에 대해 1 μ M 과 10 μ M 을 사용 했 다 . 선두 화합물 과 전형 적 인 컴 퍼 레이터 ( comparator ) ( 예컨대 , 클 로자 핀 ) 에 대해서 , 완벽 한 농도 - 감응 곡선 을 만들 었 다 . 약물 은 10 분 이상 의 시간 으로 적용 했 다 . 매개체 컨트롤 은 동일 한 시간 에 걸쳐 모니터 했 다 . 약물 의 만성 적 노출 시 NMDA 수용체 기능 에서 의 기능 적 변화 를 측정 하 기 위해 , NMDA 의 농도 ( 1 mM ) 를 포화 시킴 으로써 발생 되 는 전류 를 약물 처리 배 약액 과 컨트롤 배양액 에 기록 했 다 . 뉴런 을 5 ∼ 7 일 간 평판 배양 한 후 , 배양액 접시 의 절반 을 고정 농도 의 약물 로 처리 하 고 , 나머지 절반 은 매개체 만 으로 처리 했 다 . 약물 적용 하 고 7 ∼ 14 일 후 기록 을 행했 다 . 매개체 컨크 롤 및 처리 된 배양액 에서 의 NMDA - 유도 전류 의 크기 를 비교 했 다 . 멤 브레인 전류 및 NMDA - 유도 전류 의 SD 를 TTX - 함유 ( 0 . 3 ∼ 1 μ M ) 세포 외 용액 에서 기록 했 다 . NMDA 수용체 - 조정 된 mEPSC 기록 의 경우 에 , Mg 2 + 는 세 포외 용액 으로부터 생략 되 었 다 . 글루 타 메이트 수용체 - 조정 된 전류 의 NMDA 성분 을 분리 하 기 위해 , 비 - NMDA ( AMPA / 카이 네이트 ) 수용체 길항제 NBQX ( 10 ∼ 20 μ M ) 를 세포 외 용액 에 첨가 했 다 ( Vh =- 60 mV ) . NMDA - 유도 전류 는 Mg 2 + 의 생리학 적 농도 ( 1 mM ) 의 존재 하 에 - 30 mV 에서 기록 되 었 다 . 글리신 및 GABA 수용체 를 각각 블록 킹 하 기 위해 모든 경우 에 세 포외 용액 에 스트리크닌 ( strychnine ) ( 1 μ M ) 및 피크 로 톡 신 ( picrotoxin ) ( 100 μ M ) 을 첨가 했 다 . 염기 성 세 포외 용액 은 다음 을 함유 했 다 ( 단위 : mM ) : NaCl ( 140 ) , KCl ( 4 ) , CaCl 2 ( 2 ) , MgCl 2 ( 1 ) , 4 -( 2 - 하이드 록 시에 틸 ) - 1 - 피페 라 진 에탄 술폰산 ( HEPES ) ( 10 ) , 및 글루코오스 ( 11 ) . 세 포외 용액 의 pH 는 NaOH 를 사용 하 여 7 . 4 로 조절 했 다 . 패치 전극 을 채우 기 위한 주 된 용액 은 다음 을 함유 했 다 ( 단위 : mM ) : Cs 글루 코 네이트 ( 135 ) , NaCl ( 5 ) , KCl ( 10 ) , MgCl 2 ( 1 ) , CaCl 2 ( 1 ) , EGTA ( 11 ) , HEPES ( 10 ) , Na 2 ATP ( 2 ) , Na 2 GTP ( 0 . 2 ) . 세포내 용액 의 pH 는 CsOH 를 사용 하 여 7 . 4 로 조절 했 다 . 전술 한 프로토콜 에 따라 , 다양 한 농도 의 클 로자 핀 및 ATI - 화합물 을 세포 외 용액 에 첨가 했 다 .