다양 한 사이토카인 ( IL - 2 단독 , IL - 15 단독 , IL - 2 및 IL - 15 조합 , GM - CSF 단독 , 및 GM - CSF 및 IL - 2 조합 ) 으로 활성 화 되 거나 활성 화 되 지 않 은 rMSCs ( 3 × 105 ) 를 72 h 동안 배양 하 였 다 . 다음 , 배양 상층 액 을 얻 어서 , 표적 세포 ( GFP 안정 한 쥐 뇌 교종 9 L 세포주 ) 의 배 양접시 첨가 하 였 다 . 5 일 후 , 상기 와 같이 각 배양 상층 액 의 세포독성 에 대한 시각 생존 세포 측정 을 실시 하 였 다 . 또한 , ELISA 측정 키트 ( R & D Systems ) 를 이용 하 여 세포 로부터 분비 된 IL - 4 및 γ - INF 단백질 농도 를 정량 하 였 다 . 96 - well 플레이트 를 항 인간 IL - 4 및 γ - INF 단 클론 항체 로 코팅 하 였 다 . 제 조사 의 프로토콜 에 따랐 으며 , 각 well 의 흡광도 를 마이크 로 플레이트 리더 ( MR 5000 ; Dynatech Laboratories , Chantilly , VA ) 로 450 nm 파장 에서 결정 하 였 다 . 케모 카인 단백질 의 농도 를 표준 곡선 에 기초 하 여 계산 하 였 다 .