리버스 ELISA 접근 법 에서 미정 제 세포 용해 물 에서 가용성 으로 발현 되 는 뮤 테인 은 그 들 의 T 7 - 태그 에 의해 ELISA 플레이트 에서 포획 된 후 그 들 의 친화도 에 의해 뮤 테 인 들 을 구별 하 기 위해 표적 - 제한 조건 에 이르 는 다양 한 함량 의 C - 말단 에 바이오틴 이 결합 된 hHepcidin 과 인 큐 베이 션 되 었 다 . 표적 의 결합 은 엑스트라 비딘 - HRP 컨 쥬 게이트 ( Sigma ) 에 의해 검출 되 었 다 . 100 nM 의 바이오틴 이 결합 되 지 않 은 사람 헵시딘 - 25 를 추가 하 여 뮤 테 인 결합 을 경쟁 할 수 도 있 다 . 이 는 또한 상기 뮤 테인 이 변형 되 지 않 은 hHepcidin - 25 와 결합 함 을 시사 한다 .