5 종 의 상이 한 다발 성 골수종 세포주 의 표면 상 에서 의 BCMA 의 발현 을 유동 세포 측정 법 에 의해 결정 하 였 다 . 도 1 , 파트 A 에서 , 다발 성 골수종 ( MM ) 세포주 를 BSA ( 염색 완충제 ) 를 함유 하 는 포스 페이트 완충 염수 ( PBS ) 로 2 회 세척 한 후 , 10 μ g / mL 의 SG 16 . 17 과 함께 30 분 동안 4 ℃ 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 이어서 , 염색 완충제 중 에서 2 회 세척 하 고 , PE - 접합 된 염소 항 - 인간 IgG ( Fab ') 2 2 차 항체 와 4 ℃ 에서 30 분 동안 인 큐 베이 션 하 였 다 . 염색 완충제 중 에서 2 회 세척 한 후 , 유동 세포 측정 법 을 통해 PE 검출 을 수행 하 였 다 . 각 세포주 에 대한 PE 신호 의 기하 평균 형광 강도 ( gMFI ) 를 그래프 로 나타낸다 . 도 1 , 파트 B 에서 , BCMA 의 표면 발현 염색 을 유동 세포 측정 법 을 통해 MM 환자 - 유래 골수 단핵 세포 ( BMMC ) 와 함께 KMS - 20 , NCI - H 929 및 U 266 B 1 세포 에 대해 재 실행 하 였 다 . 본 실험 에서 , MM 형질 세포 집단 내 의 BCMA 의 기하 평균 형광 강도 ( gMFI ) 를 3 종 의 다발 성 골수종 세포주 및 2 종 의 환자 BMMC 샘플 사이 에서 비교 하 였 다 . 환자 유래 BMMC ( MM # 1 및 MM # 2 ) 를 해동 시키 고 , 염색 완충제 중 에서 2 회 세척 한 후 , 라이브 / 데드 이 플루오르 - 780 ( Live / Dead eFluor - 780 ) 염료 로 4 ℃ 에서 30 분 동안 염색 하 였 다 . 살 아 있 는 세포 / 사멸 세포 염색 후 , 세포 를 2 회 세척 하 고 , AF 488 - 접합 된 항 - 인간 CD 38 항체 , 항 - 인간 CD 138 V 450 , 항 - 인간 CD 45 브릴리언트 바이올렛 605 , 항 - 인간 IgG 브릴리언트 바이올렛 711 , 항 - CD 19 - PE , 항 - CD 56 PerCP - Cy 5 . 5 , 항 - CD 27 - BV 510 , 및 AF 647 접합 된 SG 16 . 17 항 - BCMA 항체 로 이루어진 항체 칵테일 100 μ L 와 함께 인 큐 베이 션 하 였 다 . 염색 후 에 , 세포 를 염색 완충제 로 다시 2 회 세척 하 고 , 염색 을 유동 세포 측정 법 을 통해 검출 하 였 다 . 다발 성 골수종 세포주 및 MM 환자 유래 BMMC 에 대한 유동 세포 측정 법 게이팅 을 이중선 배제 및 사멸 세포 배제 후 에 수행 하 였 다 .