도 22 는 BCL 11 A 유전자 의 적혈구 계 - 특이 적 인 핸 서 영역 으로부터 의 gRNA ( sg - G 1128 ; sg 1128 로 도 지칭 됨 ) 와 비교 하 여 감마 글 로 빈 프로모터 영역 으로부터 의 sgRNA ( sg - G 0008 , sg - G 0051 , sg - G 0010 , sg - G 0048 , sg - G 0067 ) 를 이용 하 여 편집 된 HSC 의 줄기세포 기능 을 평가 히기 위한 이식 연구 의 개략 도 를 보여준다 . 5 x 105 개 인간 CD 34 + 세포 를 0 일 차 에 해동 시키 고 , 3 일 차 에 모크 RNP 복합체 ( Cas 9 단독 및 gRNA 없 음 ) , " 또는 Cas 9 ( NLS - Cas 9 - NLS - His 6 ( SEQ ID NO : 247 로서 개시 된 "" His 6 "")) 및 다양 한 gRNA 를 이용 하 여 형성 된 RNP 복합체 를 이용 하 여 전기 천공 시켰 다 . 6 일 차 에 ", 각각 의 조건 으로부터 의 모든 세포 를 수확 하 고 , 2 그레이 아치 사 방사선 조사 된 NOD . Cg - Prkdc scid Il 2 rg tm 1 Wjl / SzJ ( NSG ) 마우스 에게 이식 하 였 다 ( 도 22 ) . 이식 - 후 4 , 8 , 12 , 16 및 20 주 째 에 마우스 를 양육 시켰 다 . 이식 - 후 8 및 20 주 째 에 , 동물 로부터 의 골수 세포 를 또한 수확 하 여 , 골수 에서 의 인간 세포 생 착 을 검사 하 였 다 .