레바 우디 오시드 A 에 대한 조작 된 라운드 16 변이체 의 활성 을 특성 화 하 기 위해 진탕 플라스크 분말 로딩 용량 반응 실험 을 수행 하 였 다 . 0 . 003 - 0 . 1 g / L 수준 의 진탕 플라스크 분말 ( SFP ) 을 79 ℃ 에서 0 . 5 시간 동안 예비 인 큐 베이 팅 한 후 , 50 mM 인산칼륨 완충제 , pH 6 , 20 mM 레바 우디 오시드 A , 0 . 2 mM ADP , 50 mM 수크로스 , 및 0 . 05 g / L SUS SFP 서열 번호 2432 를 함유 하 는 100 μ L 의 총 반응 부피 에 첨가 하 였 다 . 반응 은 4 시간 동안 300 RPM 에서 써 모 트론 ® 적정 플레이트 진탕기 에서 60 ℃ 에서 수행 하 였 다 . 반응물 을 상기 한 바 와 같이 희석 하 고 , 켄 칭 하 고 , 분석 하 였 다 . 0 . 0125 g / L SFP 로딩 시 에 라운드 16 변이체 에 의한 레바 우디 오시드 D 의 생성 수준 은 표 56 . 3 에 제시 된다 . 서열 번호 4550 이 가장 개선 되 었 고 , 레바 우디 오시드 D 를 형성 하 기 위해 ADP - 글루코스 로부터 레바 우디 오시드 A 로 글 리코 실 을 전달 하 는 촉매 작용 을 위한 최상 의 효소 로서 선택 되 었 다 .