벡터 pDCOrig IB 15 의 중 / 경쇄 로부터 리더 서열 을 제거 하 기 위하 여 , 리더 를 갖 지 않 는 정 방향 프라이머 pOrig light 및 리더 를 갖 지 않 는 pOrig heavy 를 포함 하 는 주형 pDCOrig IB 15 를 각각 역방향 프라이머 huHeClonR 및 hiLiClonR 와 함께 사용 하 여 PCR 을 셋 업 하 였 다 ( 표 2 ) . 증폭 된 단편 을 벡터 pCR 2 . 1 ( Invitrogen ) 중 으로 TA TOPO 연결 시키 고 , 서열 분석 으로 클론 을 확인 하 였 다 . 리더 가 결여 된 IB 15 VH 및 VL 영역 모두 를 HindIII / AfeI 및 BamHI / BsiWI 부위 를 각각 사용 하 여 pDCOrig IB 15 중 으로 다시 클로닝 시켰 다 . VH 및 VL 영역 에 대한 DNA 서열 및 번역 을 각각 도 10 및 11 에 나타내 었 다 .