상기 실시 예 < 5 - 1 > 의 MDCK 세포 를 PBS 로 신속 하 게 2 회 세척 하 고 3 . 7 % 파라 포 름알데히드가 함유 된 PBS 에서 30 분 간 고정 하 였 다 . PBS 로 2 회 세척 하 고 , 0 . 3 % 트리톤 으로 15 분 간 처리 하 였 다 . 상기 세포 를 α - SMA 항체 ( Sigma , 미국 ) , 바이 멘 틴 항체 ( Santa cruz Biotechnology , 미국 ) , ZO - 1 항체 ( Santa cruz Biotechnology , 미국 ) 및 E - 카드 헤 린 ( R & D systems , 미국 ) 항체 와 함께 4 ℃ 에서 하룻밤 동안 반응 시켰 다 . 이 를 PBS 로 세척 하 고 0 . 3 % 트린 톤 으로 15 분 간 3 회 세척 한 후 형광 항체 ( 염소 항 토끼 IgG , Alexa Fluor 488 및 염소 항 마우스 IgG , Alexa Fluor 594 , Molecular Probes Inc , Eugene , OR ) 및 결합 된 2 차 항체 와 21 ℃ 에서 3 시간 동안 반응 시켰 다 . 그 다음 PBS 로 15 분 간 2 회 세척 하 고 항 페이드 ( antifade ) 봉입 시약 으로 봉입 하 였 다 . 봉입 된 세포 는 형광 현미경 ( Zeiss Axiophot fluorescence microscope ) 으로 관찰 하 였 다 . α - SMA 와 E - 카드 헤 린 은 녹색 을 나타내 며 ZO - 1 과 바이 멘 틴 은 붉 은 색 을 나타낸다 . 또한 세포 의 핵 은 파란색 으로 나타난다 .