이러 한 치환 은 분자 의 기능 에 중요 한 영역 의 외부 에서 만들 어 질 수 있 고 또한 활성 폴리펩티드 를 초래 한다는 것 은 당업자 에게 명백 할 것 이 다 . 본 발명 의 분리 된 폴리뉴클레오티드 에 의해 암호 화 되 는 , 따라서 바람직 하 게 는 치환 되 지 않 는 폴리펩티드 의 활성 에 필수 적 인 아미노산 잔기 는 자리 - 지정 돌연변이 또는 알라닌 - 스캐닝 돌연변이 와 같 은 당업 계 에 공지 된 과정 에 따라서 확인 될 수 있 다 ( 예 를 들 어 , Cunningham and Wells , 1989 supra ) . 후자 의 기술 에서 , 돌연변이 는 분자 내 모든 양전하 잔기 에서 도입 되 고 결과 돌연변이 분자 는 분자 의 활성 에 중요 한 아미노산 잔기 를 확인 하 기 위한 셀룰로오스 가수 분해 향상 활성 에 대해 시험 된다 . 기질 - 효소 상호 작용 의 자리 는 예컨대 , 핵자기 공명 분석 , 결정학 또는 광 친화성 표지 에 의해 결정 되 는 3 - 차원 구조 의 분석 에 의해 결정 될 수 있 다 ( 예 를 들 어 , de Vos et al 1992 , supra , Smith et al . , 1992 supra , Wlodaver et al . , 1992 , supra 참조 )