NS 0 안정 한 형질 감염 C 8 을 롤러 병 ( roller bottle ) 에서 500 ml 의 인 비트 로 젠 하이브리도마 SFM ( Invitrogen ' s hybridoma SFM ) 배양액 에서 완전히 소모 할 때 까지 배양 하 였 다 . 배양액 을 코닝 ( Corning ' s ) 250 ml 원심 분리 튜브 ( 카탈로그 번호 430776 ) 에 넣 고 베크만 콜터 알레그라 ( Beckman Coulter ' s Allegra ) X - 12 R 원심분리기 ( 2000 RPM 에서 15 분 ) 에서 원심 분리 한다 . 배양 상층 액 을 파 마시아 ( Pharmacia ) P 1 펌프 를 이용 하 여 1 ml GE 헬스 케어 ( Healthcare ) 하이트 랩 맵 셀렉 트 슈어 칼럼 ( HiTrap MabSelect SuRe column ) ( 카탈로그 번호 11 - 034 - 95 ) 에 로딩 한다 . 칼럼 을 트리스 로 완충 한 식염수 ( 피어스 ( Pierce ) , 카탈로그 번호 28379 ) 로 세척 하 고 피어스 의 순한 Ag / Ab 추출 완충액 ( Pierce ' s Gentl Ag / Ab Elution Buffer ) ( 카탈로그 번호 21027 ) 로 추출 한다 . 분획 ( Fractions ) ( 약 1 ml ) 을 수집 하 여 OD 를 280 nm 에서 측정 한다 .