이어서 , 서열 번호 548 의 변이체 를 함유 하 는 진탕 플라스크 분말 을 제조 하 고 , 이 를 서열 번호 348 변이체 와 비교 하 여 검정 하 였 다 . 0 . 25 - 10 g / L 수준 의 진탕 플라스크 분말 ( SFP ) 을 50 mM 인산칼륨 완충제 , pH 7 . 3 , 3 mM MgCl 2 , 2 mM ADP - 글루코스 및 1 g / L 레바 우디 오시드 A 60 ( 60 % 레바 우디 오시드 A , > 35 % 스테비오 시드 ) 또는 레바 우디 오시드 D ( ChromaDex , > 93 % 순도 ) 를 함유 하 는 100 μ L 의 총 반응 부피 에 첨가 하 였 다 . 반응 은 1 시간 동안 열 순환기 에서 40 ℃ 에서 수행 하 고 , 반응 은 10 μ L 검정 물 을 0 . 2 % 포름산 을 갖 는 90 μ L 아세 토니 트릴 에 첨가 함 으로써 켄 칭 하 고 , 원심 분리 에 의해 침전 시켰 다 . 상청 액 은 물 에서 1 : 10 으로 희석 한 후 , 실시 예 1 , 표 1 . 1 에 기재 된 바 와 같이 LC - MS / MS 에 의해 스 테 비올 글리코시드 에 대해 분석 되 었 다 . 서열 번호 548 변이체 는 레바 우디 오시드 A 60 을 레바 우디 오시드 A 와 레바 우디 오시드 I 의 혼합물 로 65 % 초과 의 비율 로 전환 시키 고 , 레바 우디 오시드 D 를 레바 우디 오시드 M 으로 거의 완전 하 게 전환 하 였 다 . 0 . 25 g / L 진탕 플라스크 분말 로딩 에서 , 서열 번호 548 변이체 는 서열 번호 348 변이체 보다 1 . 4 배 더 높 은 레바 우디 오시드 D 전환 율 에 도달 하 였 고 , 레바 우디 오시드 A 60 의 전환율 은 2 . 2 배 더 높 았 다 .