CHO - K 1 / GluR 1 flip / stargazin 발현 세포 를 96 웰 흑색 저 투명 플레이트 ( Costar ) 에 2 × 104 세포 / 웰 로 파종 하 고 , 37 ℃, CO 2 인큐베이터 ( SANYO Electric Co . , Ltd . ) 에서 2 일 간 배양 시켰 다 . 세포 플레이트 의 배지 를 제거 하 고 , 분석 완충액 A ( D - MEM ( Invitrogen ) , 0 . 1 % BSA ( Serogical Protein ) , 20 mM HEPES ( Invitrogen ) ) 를 50 μ L / 웰 로 첨가 하 였 다 . 2 . 5 mM 프로베네시드 ( Invitrogen ) 를 첨가 한 칼슘 지시약 ( 칼슘 4 Assay Kit , Invitrogen ) 을 50 μ L / 웰 로 첨가 하 고 , 웰 을 37 ℃, CO 2 인큐베이터 에서 1 hr 동안 방치 하 였 다 . 세포 플레이트 를 CellLux ( PerkinElmer ) 에 세팅 하 고 , 분석 완충액 B ( HBSS ( Invitrogen ) , 0 . 1 % BSA , 20 mM HEPES ) 로 희석 시킨 9 mM 글루탐산 ( 최종 농도 3 mM ) 및 피 험 화합물 의 혼합물 ( 50 μ L ) ( 피 험 화합물 농도 30 μ M ) 을 첨가 하 고 , 3 min 간 의 형광 값 의 변화 량 을 측정 하 였 다 . 여기 에서 , 최종 농도 3 mM 글루탐산 과 300 μ M 시클 로티 아지드 ( TOCRIS ) 를 첨가 한 웰 의 형광 값 의 변화 량 은 100 % 이 고 , 최종 농도 3 mM 글루탐산 만 을 첨가 한 웰 의 형광 값 의 변화 량 은 0 % 로 정의 하 며 , 화합물 의 활성 은 하 기 식 에 따라서 산출 하 였 다 .