PCR 튜브 에 , 상기 에서 조제 한 올리 고 뉴클레오티드 용액 10 μ L 와 , 상기 의 5 ’ 말단 비오틴 표식 올리 고 뉴클레오티드 용액 5 μ L 와 , 완충액 ( 330 mM Tris - Acetate pH 7 . 9 , 660 mM KOAc , 100 mM MgOAc 2 , 5 mM Dithiothreitol ) 10 μ L 와 , MgCl 2 수용액 ( 0 ∼ 1000 mM ) 60 μ L 를 첨가 하 고 , 또한 당해 혼합물 에 멸균 초 순수 를 더 해 액량 을 100 μ L 로 하 여 , 혼합 하 였 다 .