PCR products 는 1 . 5 % agarose gels 에 ethidium bromide 염색 된 것 을 확인 하 였 고 , 이후 SYBR Premix Ex Taq ( Takara Bio Inc . , Otsu , Shiga , Japan ) 및 ABI Prism 7500 Sequence Detection System ( Applied biosystems , Foster City , CA , USA ) 을 이용 하 여 RT - qPCR ( Real - time quantitative PCR ) 을 실시 하 였 다 . 실험 조건 은 다음 과 같 다 : Denaturation : 1 분 , 94 ° C ; Amplification : 각 40 번 의 사이클 , 94 ° C 에서 15 초 , 60 ° C 에서 15 초 , 72 ° C 에서 33 초 ) . IL - 8 copy numbers 를 정규 화 시키 기 위해 , Glyceraldehyde - 3 - phosphate dehydrogenase ( GAPDH ) 를 코딩 하 는 유전자 를 IL - 8 cDNA 와 함께 증폭 시켰 다 . Real - time RT - qPCR 은 각 RNA 샘플 마다 3 회 반복 실시 되 었 고 결과 는 도 2 d 에 나타내 었 다 .