각 BAC DNA 의 전체 서열 내용 을 실질 적 으로 나타내 는 상당 량의 PCR 앰 플리 콘 을 , 2 번 의 중합효소 연쇄 반응 ( PCR ) 증폭 으로 제조 하 였 다 . 1 차 PCR ( 20 ) 은 , DOP 프라이머 믹스 ( 21 ) , DOP PCR 중합효소 ( 22 ) 및 DOP PCR 완충액 ( 23 ) 과 상기 에서 제조 한 주형 으로서 의 BAC DNA ( 18 ) 를 이용한 , 비 특이 적 인 축퇴성 올리 고 뉴클레오티드 프라이머 ( DOP ) PCR 이 다 . 2 차 PCR 증폭 ( 25 ) 에 는 , DOP 프라이머 의 공지 된 서열 모티프 에 대한 단일 프라이머 를 사용 하 였 다 . 2 번 의 PCR 을 실시 하 여 , 이후 인코딩 비드 ( 30 ) 에 앰 플리 콘 ( 29 ) 을 커플링 ( 32 ) 하 기 위한 , 최종 앰 플리 콘 산물 ( 29 ) 약 20 ㎍ 을 수득 하 였 다 .