면역 세포 활성 을 증진 시키 는 물질 의 능력 을 결정 하 였 다 . 물질 을 LPS - 자극 된 인간 단핵구 에 의한 TNF α 생산 에 대한 KA - 유도 억제 를 역전 시키 는 물질 의 능력 에 대해 시험 하 였 다 . 인간 단핵구 를 밀 테 니 비드 ( Miltenyi bead ) 를 사용 하 여 공 여자 PBMC 로부터 음성 선택 에 의해 정제 하 고 완전 성장 배지 ( RPMI 1640 , 10 % FCS ) 에 2 x 105 세포 / 웰 로 시 딩 하 였 다 . 단핵구 를 10 ng / ml LPS ( O 127 : B 8 , # L 4516 , 시그마 ) 및 200 uM KA ( # 3375 , 시그마 ) 와 함께 인 큐 베이 션 하 고 , 물질 을 1 uM , 0 . 3 uM 및 0 . 1 uM 의 농도 로 첨가 하 고 , 18 시간 동안 배양 하 였 다 . LPS 단독 은 양성 대 조군 으로서 작용 한다 . 상청 액 에서 의 TNF α 생산 을 메소 스케일 디스커버리 면역 검정 에 의해 측정 하 고 , TNF α 생산 을 구출 하 는 물질 의 능력 은 LPS 자극 및 KA - 유도 억제 의 백분 율 로 계산 하 고 , 참조 AHR 길항제 화합물 GNF - 351 에 의한 공 여자 - 특이 적 반응 에 대해 정규 화 하 였 다 ( Smith et al . , J Pharmacol Exp Ther , 2011 , 338 ( 1 ) : 318 - 27 ) . 표 4 는 GNF - 351 에 의한 가장 높 은 백분율 의 구출 대비 가장 높 은 백분율 의 TNF α 구출 ( 0 . 3 및 0 . 1 uM 에서 관찰 됨 ) 및 시험 화합물 에 의한 가장 높 은 구출 이 관찰 된 농도 를 나타낸다 .