실시 예 1 에서 와 동일 한 방법 으로 분리 , 정제 한 총 RNA 10 ng , dT 20 프라이머 ( ( 주 ) 바이오 니아 ; 100 pmoles / 20 ㎕ 반응 액 ) , MMLV 역전사 효소 ( ( 주 ) 바이오 니아 ; 200 U / 20 ㎕ 반응 액 ) , 10 × 반응 완충 용액 2 ㎕, RNasin ( 프로 메가 ( Promega ) ; 15 U / 20 ㎕ 반응 액 ) 및 베타 인 ( 시그마 ( Sigma ) ; 500 mM / 20 ㎕ 반응 액 ) 을 혼합 하 여 역전사 반응 액 을 제조 하 였 다 . 제조 된 역전사 반응 액 을 이용 하 여 기존 의 단일 온도 조건 인 42 ℃ 및 52 ℃ 에서 , 10 분 , 20 분 , 40 분 , 60 분 반응 과 37 ℃ 2 분 , 50 ℃ 3 분 을 한 주기 로 하 여 2 회 , 4 회 , 8 회 , 12 회 순환 반응 , 37 ℃ 1 분 , 47 ℃ 3 분 , 55 ℃ 1 분 을 한 주기 로 하 여 2 회 , 4 회 , 8 회 , 12 회 순환 반응 으로 역전사 반응 을 수행 하 였 다 . 생성 된 cDNA 를 4 ㎕ 취해 PCR 반응 의 주형 으로 사용 하 였 고 이때 사용 한 ELAVL 1 프라이머 서열 은 다음 과 같 다 .