일군 의 실험 에서 30 ℃ 에서 LB 아가 플레이트 에서 자란 Rhodococcus 균주 의 콜로니 는 지시 된 성장 배지 및 가스 혼합물 을 포함 하 는 가스 밀착 혈청병 으로 이동 되 었 다 . ( 원래 의 LB 배양 접종물 은 - 80 ° C 에 보관 된 글리세롤 원액 으로부터 미리 회수 되 었 다 ) . 가스 상 에서 혈청병 성장 은 160 mL 의 마개 가 있 고 밀봉 된 휘튼 유리 혈청병 ( VWR 제품 번호 16171 - 385 ) 에서 수행 되 었 다 . 액체 배지 의 부피 는 10 내지 20 mL 이 었 다 . 병 은 휘튼 수동 크림 퍼 ( VWR # 80078 - 996 ) 를 사용 하 여 고무 마개 ( VWR # 100483 - 774 ) 및 알루미늄 밀봉 ( VWR # 89047 - 008 ) 으로 막 았 다 . 무균 성장 배지 를 무균 조건 하 에서 병 으로 옮겼 다 . 접종물 은 무균 조건 하 에 병 에 도입 되 었 고 , 병 을 고무 마개 로 막 고 밀봉 하 였 다 . 가스 혼합물 은 병 에 첨가 되 었 다 . 가스 믹스 를 첨가 한 이후 , 밀봉 을 알루미늄 으로 크림 핑 하 여 혈청병 을 밀봉 하 였 다 . 다음 으로 , 병 을 진탕 플라스크 배양기 에 두 었 다 . 병 은 30 ° C , 250 RPM 에서 배양 되 었 다 . 모든 시료 는 주사기 와 바늘 을 사용 하 여 무균 조건 하 에서 채취 되 었 다 . 성장 은 650 nm 에서 분광 광도계 로 광학 밀도 ( OD ) 를 측정 하 여 평가 하 였 다 .