플라스미드 조합 # 6 및 # 19 를 리프 로 그래 밍 에 사용 하 였 다 . 핵 으로 의 플라스미드 진입 을 향상 시키 기 위해 , ENBA mRNA 를 플라스미드 DNA 와 함께 전기 천공 하 였 다 . 약 100 만 개 의 세포 를 2 개 의 6 웰 플레이트 의 DF 5 SFeC 중 에 옮겨 5 일 동안 배양 하 였 다 . 그 후 , 배지 를 DF 5 SFe 로 교체 하 고 18 ∼ 25 일 동안 더 배양 하 였 다 . 일부 웰 의 세포 를 상이 한 시점 에 1 : 6 의 비 를 이용 하 여 2 차 로 계대 하 였 다 . 플라스미드 조합 # 19 는 플라스미드 조합 # 6 보다 더 많 은 콜로니 를 생성 시켰으나 , 이 들 중 대부분 은 전형 적 인 인간 ES 세포 모 폴 로지 를 닮 지 않 았 다 . 약 25 일 후 , 인간 ES 세포 유사 클 로니 가 두 플라스미드 조합 에 대한 1 차 플레이트 상 에 나타났으며 , 플라스미드 조합 # 19 를 사용 할 때 100 만 개 포피 세포 당 리프 로 그래 밍 세포 의 추정 수 가 24 개 , 플라스미드 조합 # 6 을 사용 할 때 100 만 개 포피 세포 당 리프 로 그래 밍 세포 의 추정 수 가 8 개 였 다 . 인간 ES 세포 유사 콜로니 의 수 는 2 차 계대 플레이트 후 에 현저히 증가 하 였 고 , 각각 의 플라스미드 조합 에 대해 100 만 개 포피 세포 당 추정 수 가 500 개 미만 이 었 다 . 2 차 계대 플레이트 상의 iPS 세포 콜로니 의 증가 는 아마도 1 차 플레이트 상 에서 의 iPS 세포 의 분열 에 기인 하 는 것 으로 생각 된다 . 어떤 경우 에 는 , 1 차 플레이트 는 전형 적 인 인간 ES 세포 모 폴 로지 를 닮 은 어떠 한 콜로니 도 갖 지 않 았 으나 , 다수 의 iPS 세포 는 2 차 계대 후 출현 하 였으며 , 이 는 일부 iPS 세포 는 확인 할 수 없 음 을 시사 하 는 것 이 며 , 이 는 아마도 이 들 이 체세포 와 혼합 되 었 기 때문 일 것 이 다 .