푸 코스 함유 올리 고 사카 라이드 구조 체 와 푸 코스 무 함유 ( 푸 코스 결여 ) 올리 고 사카 라이드 구조 체의 상대 적 비 의 측정 을 위해 , 정제 된 항체 물질 의 방출 된 글리 칸 을 MALDI TOF 질량 분광 측 정법 으로 분석 하 였 다 . 단백질 주 쇄 로부터 올리 고 사카 라이드 를 방출 시키 기 위해 항체 샘플 ( 약 50 ㎍) 을 37 ℃ 에서 2 mM 트라이스 ( pH 7 . 0 ) 중 의 5 mU N - 글리 코시 다제 F ( QAbio ; PNGaseF : E - PNG 01 ) 와 함께 밤새 항온 처리 하 였 다 . 글리 칸 의 탈 아민 화 를 위해 , 아세트산 을 150 mM 의 최종 농도 로 첨가 하 고 37 ℃ 에서 1 시간 동안 항온 처리 하 였 다 . MALDI TOF 질량 분광 측 정법 에 의한 분석 을 위해 , 2 ㎕ 의 샘플 을 MALDI 표적 상 에서 2 ㎕ 의 DHB 매트릭스 용액 ( 50 % 에탄올 / 5 mM NaCl 에 4 mg / ㎖ 의 농도 로 용해 된 2 , 5 - 다이 하이드 록 시 벤조산 [ 브루커 달 토 닉스 ( Bruker Daltonics ) # 201346 ] ) 과 혼합 하 고 MALDI TOF 질량 분광 측정기 오토 플렉스 ( Autoflex ) II 기계 [ 브루커 달 토 닉스 ] 로 분석 하 였 다 . 통상 적 으로 , 50 내지 300 쇼트 ( shot ) 가 기록 되 고 단일 실험 으로 합산 되 었 다 . 수득 된 스펙트럼 을 플렉스 분석 소프트웨어 ( 브루커 달 토 닉스 ) 로 평가 하 고 , 검출 된 피크 각각 에 대해 질량 을 측정 하 였 다 . 이어서 , 각각 의 구조 체 ( 예 를 들 면 , 푸 코스 를 갖 거나 갖 지 않 은 결합체 , 하이브리드 및 올리 고 - 또는 고 - 만 노스 각각 ) 에 대해 계산 된 질량 을 이론 적 으로 예측 된 질량 과 비교 함 으로써 피크 를 푸 코스 함유 또는 푸 코스 결여 ( 푸 코스 무 함유 ) 탄수화물 로 배정 하 였 다 .