인간 NK 세포 가 종양 세포 를 용해 시키 는 능력 을 프로 메가 로부터 의 시토 톡스 96 비 - 방사선 활성 세포독성 검정 ( G 1780 ) 을 이용 하 여 TriNKET 을 첨가 하 거나 첨가 하 지 않 고 측정 하 였 다 . 관심 암 표적 을 발현 하 는 인간 암 세포주 를 배 양물 로부터 수확 하 였 고 , 세포 를 PBS 로 세척 하 고 , 표적 세포 로서 사용 하 기 위해 성장 배지 중 에서 1 - 2 x 105 / mL 로 재현 탁 시켰 다 . 50 μ l 의 표적 세포 현탁액 을 각각 의 웰 에 첨가 하 였 다 . 관심 암 항원 을 표적 으로 하 는 모노클 로 날 항체 또는 TriNKET 를 배양 배지 에서 희석 하 고 , 50 μ l 의 희석 된 mAb 또는 TriNKET 를 각각 의 웰 에 첨가 하 였 다 . 휴지 된 및 / 또는 활성 화 된 NK 세포 를 배 양물 로부터 수확 하 였 고 , 세포 를 세 척하 고 , 배양 배지 중 에서 원 하 는 E : T 비 에 따라 105 - 2 . 0 x 106 / mL 로 재현 탁 시켰 다 . 50 μ l 의 NK 세포 를 플레이트 의 각각 의 웰 에 첨가 하 여 , 총 150 μ l 의 배 양물 부피 를 만들 었 다 . 플레이트 를 37 ℃ 에서 5 % CO 2 하 에 3 시간 15 분 동안 인 큐 베이 션 하 였 다 . 인 큐 베이 션 후 에 , 10 x 용해 완충제 를 최대 용해 및 부피 대 조군 으로서 표적 세포 단독 의 웰 에 및 배지 단독 을 함유 하 는 웰 에 첨가 하 였 다 . 이어서 , 플레이트 를 추가 45 분 동안 인큐베이터 에 다시 두 어서 , 발달 시키 기 전 에 총 4 시간 의 인 큐 베이 션 을 달성 하 였 다 .