실시 예 2 ( 1 ) 에서 제작 한 할로 하 이 드린 에폭시 데이즈 유전자 변이체 라이브러리 를 사용 하 여 , 개량 형 할로 하 이 드린 에폭시 데이즈 의 스크리닝 ( 일차 평가 ) 을 다음 과 같이 행했 다 . 96 웰 플레이트 ( 딥 웰 ) 에 , IPTG 를 최종 농도 로서 1 mM 포함 하 는 LB Amp 배지 를 웰 당 500 ㎕ 씩 분주 하 고 , 각 웰 에 할로 하 이 드린 에폭시 데이즈 유전자 변이체 라이브러리 의 콜로니 를 식균 했 다 . 한편 , 96 웰 중 1 내지 2 개 의 웰 에 대해서 는 , 평가 의 대조 로서 사용 하 는 JM 109 / pSTT 002 콜로니 를 식균 했 다 . 37 ℃, 800 rpm 으로 약 16 시간 배양 한 후 , 얻 어 진 배양액 중 20 ㎕ 를 평형 96 웰 플레이트 에 분주 했 다 . 원심분리기 ( 사쿠마 제작소 50 A - IVD ) 및 로터 ( 사쿠마 제작소 HM - 2 HLS ) 를 사용 하 여 , 평형 96 웰 플레이트 를 원심 분리 ( 3000 rpm , 5 분 간 , 4 ℃) 하 였 다 . 배양액 상청 을 제거 한 후 , 평가 용 반응 액 1 ( 400 mM DCP , 800 mM ( R ) - CHBN , 0 . 025 % 브로모 크레졸 퍼 플 ( BCP ) , 50 mM Tris - 황산 ( pH 8 ) ) 40 ㎕ 를 각 웰 에 첨가 했 다 . 현 탁 후 , 실온 에서 정치 하 여 , 반응 액 의 정색 ( 呈色 ) 변화 를 경시 적 으로 관찰 하 여 ( 할로 하 이 드린 에폭시 데이즈 활성 에 의한 염화물 이온 의 생 성 에 수반 하 는 pH 저하 에 의해 , BCP 의 색 이 자색 으로부터 황색 으로 변화 됨 ) , 대조 인 JM 109 / pSTT 002 보다 도 상당히 빨리 변색 이 보인 주 를 선발 했 다 . 약 20 , 000 주 의 콜로니 에 대하 여 상기 일 차 평가 를 행하 여 , 77 주 를 선발 했 다 .