( 4 ) 또한 , 상기 ( 1 ) 내지 ( 3 ) 과 같 은 방법 으로 전기영동 한 후 , 겔 속 의 단백질 을 세미 드라이 블 로터 로 폴리 비닐리덴 플 루오 라이드 ( PVDF ) 막 에 전사 했 다 . 이어서 , 1 % 의 소 혈청 알부민 을 포함 한 PBS 완충액 으로 90 분 간 블로킹 한 후 , 1 차 항체 ( 항 Cryj 1 토끼 IgG ) 를 포함 한 PBS 완충액 속 에서 90 분 간 반응 시키 고 , 마지막 으로 알칼리 포스파타아제 의 기질 용액 을 더 해 10 분 간 반응 시킨 후 , 정제 삼 나무 꽃가루 항원 Cryj 1 을 특이 적 으로 검출 했 다 .