250 ㎖ 둥근바닥 플라스크 에 5 , 6 - 다이 클로 로 이사틴 ( 5 , 6 - dichloroisatin ) ( 500 ㎎, 2 . 32 m ㏖) 을 넣 고 메탄올 ( MeOH ) ( 92 . 80 ㎖) 에 녹인 뒤 , 인 독실 아세테이트 ( indoxyl acetate ) ( 405 . 48 ㎎, 2 . 315 mmol ) 과 탄산 나트륨 ( Na 2 CO 3 ) ( 637 . 83 ㎎, 6 . 02 mmol ) 을 첨가 하 여 65 ℃ 에서 12 시간 동안 교반 한다 . TLC ( Rf = 0 . 4 , 에틸 아세테이트 / 헥산 = 1 / 2 ( v / v ) ) 를 이용 하 여 반응 의 종결 을 확인 하 고 , 생성물 을 얼음 에서 결정 덩어리 가 생길 때 까지 식혀준다 . 결정체 가 생기 면 여과 시켜 용매 를 제거 한 후 , 여 과액 은 버리 고 생성물 을 용매 ( 에탄올 / 물 = 1 / 1 ( v / v ) ) 로 여러 번 씻 어 준다 . 생성물 을 여과 하 여 진공 펌프 에서 건조 시킨 다음 추가 정제 없이 다음 단계 에서 사용 하 였 다 .