CD 33 SS - TNF - 결합 Fn 3 서열 ( 서열 6 ) , CD 33 SS - TNF - 결합 Fn 3 ( R 18 L 및 I 56 T ) ( 서열 7 ) , CD 33 SS - 야생 형 Fn 3 서열 ( 서열 8 ) 및 CD 33 SS - 야생 형 Fn 3 ( RGD 로부터 RGA 로 의 ) ( 서열 9 ) 에 상응 하 는 DNA 서열 을 포유 동물 세포 에서 발현 을 위해 최적 화 하 고 , 게네 아르트 아 게 ( 독일 ) 에서 제조 하 였 다 . 생성 되 는 DNA 단편 을 BlpI / XbaI 을 사용 하 여 pRS 5 a 내 로 라이 게이팅 하 였 다 ( 적절 한 옆 에 접하 는 DNA 서열 , 예 를 들 어 Kozak 을 벡터 에 첨가 하 였 다 ) . hIgG 1 Fc 를 프라이머 18 ( 서열 33 ) 및 19 ( 서열 34 ) ( 프라이머 19 는 His 태그 를 코딩 한다 ) 를 사용 하 여 PCR 에 의해 증폭 시키 고 , RsrII / XbaI 을 사용 하 여 pRS 5 a ( CD 33 - TNF - 결합 Fn 3 서열 ( 서열 6 및 서열 7 ) 또는 CD 33 - 야생 형 Fn 3 서열 ( 서열 8 및 서열 9 ) 내 로 삽입 하 였 다 .