" LY 2875358 - CD 19 융합 단백질 ( 실시 예 1 에서 설명 된 구축물 "" 37 + 10 "") 이 A 549 암종 세포 및 FMC 63 ( 항 - CD 19 항체 ) 에 결합 하 는 능력 을 형광 활성 화 세포 분류법 ( "" FACS "" 또는 "" 유세포 분석 "" 로 도 알려짐 ) 에 의해 시험 하 였 다 . A 549 세포 는 LY 2875358 에 의해 특이 적 으로 인식 된 암세포 - 연관 단백질 c - MET 를 발현 한다 . LY 2875358 HC ( 서열 번호 7 ) 및 LY 2875358 LC ( 서열 번호 10 ) 는 293 T 세포 에서 발현 되 었 으며 ", 세포 배양 상등 액 은 A 549 세포 와 인 큐 베이 션 되 었 다 . 얼음 위 에서 30 분 인 큐 베이 션 후 , 세포 를 FACS 완충액 ( 1 % BSA 및 0 . 1 % 아지드 화 나트륨 을 갖 는 PBS ) 으로 세척 하 였 다 . 결합 된 항체 는 , 유세포 분석기 내 에서 특정 레이저 에 의해 활성 화 되 는 경우 형광 신호 를 내 는 항 - 인간 IgG - 플루오레세인 이소 티오시 아 네이트 ( FITC ) 컨 쥬 게이트 와 함께 세포 를 인 큐 베이 션 함 으로써 이후 검출 되 었 다 . 결과 의 FACS 신호 는 기기 에 의해 검출 되 는 평균 형광 강도 ( MFI ) 에서 의 증가 로서 나타낼 수 있 으며 , " 이 는 신호 를 더욱 높 게 이동 시키 도록 유발 한다 ( 도 23 a 에 묘사 된 바 와 같이 우측 이동 ) . 구축물 "" 37 + 10 "" 융합 단백질 을 함유 하 는 상등 액 을 A 549 세포 와 함께 인 큐 베이 션 한 경우 ", 유사 한 이동 이 검출 되 었 다 . 중요 하 게 는 , " A 549 세포 에 결합 된 구축물 "" 37 + 10 "" 융합 단백질 은 항 - CD 19 항체 FMC 63 을 이용 하 여 ", 파이 코 에 리트 린 ( PE ) 가 유세포 분석기 에 의해 활성 화 된 경우 PE - 컨 쥬 게이트 로서 또는 항 - 인간 IgG FITC 에 의해 이어서 결합 된 정제 된 항체 중 어느 하나 로서 검출 될 수 있 을 것 이 다 ( 도 23 b 내지 도 23 c ) . 이 들 결과 는 LY 2875358 - CD 19 융합 단백질 이 항체 결합 도메인 에 의한 c - MET 의 인식 에 의해 A 549 세포 에 결합 되 었 고 , 그 결과 FMC 63 항 - CD 19 항체 에 의해 인식 되 었 음 을 보여준다 . 이 에 따라 , 항체 결합 도메인 및 CD 19 둘 모두 는 온전 하 였 다 . 본 실시 예 는 LY 2875358 - CD 19 융합 단백질 은 c - MET 를 발현 하 는 세포 및 항 - CD 19 항체 에 결합 될 수 있 었 음 을 입증 한다 .