이러 한 결합 을 더 특성 화 하 기 위해 , 데이터 를 수집 하 여 , 11 D 4 가 상호 작용 하 는 OX 40 R 의 세 포외 도메인 상 의 영역 을 평가 하 고 , 또한 수용체 가 결합 후 내재 화 되 는지 여부 를 결정 하 였 다 . OX 40 R IgG 1 융합 단백질 에 대한 경쟁 결합 데이터 는 11 D 4 가 OX 40 리간드 를 발현 하 는 세포 와 의 결합 에 대해 경쟁 한다는 것 을 가리켜 , 11 D 4 가 수용체 의 리간드 결합 영역 에서 상호 작용 한다는 증거 를 제공 하 였 다 . 또한 , 11 D 4 는 FACS 분석 에 의해 평가 시 T 세포 에 의 결합 에 대해 시판 되 는 2 개 의 OX 40 R 항체 인 BerAct 35 및 L 106 과 교차 - 경쟁 하 지 않 는다 . 비 - 경쟁 검출 항체 를 사용 하 는 FACS 분석 은 활성 화 된 1 차 T 세포 를 11 D 4 와 함께 30 분 동안 예비 - 인 큐 베이 션 한 후 OX 40 R 이 내재 화 되 지 않 았 음 을 가리켰 다 . OX 40 R 세포 외 도메인 융합 단백질 을 고정 된 리간드 로 사용 하 는 Biacore 분석 에 의해 결정 된 이 의 결합 친화력 은 결합 에 대한 11 D 4 의 평형 해리 상수 ( KD ) 가 0 . 48 nM 임 을 가리켰 다 . 이러 한 분석 에서 11 D 4 의 오프 속도 상수 ( kd ) 가 5 . 72 E - 05 l / s 인 것 으로 또한 평가 되 었 다 . 따라서 , 11 D 4 는 OX 40 R 의 리간드 결합 영역 에 높 은 친화력 으로 결합 하 고 , 오프 - 속도 상수 가 느리 며 , 결합 후 수용체 를 내재 화 하 지 않 는다 .