엔 테 로 코 쿠스 패 슘 에 대한 사멸 능 을 가진 박테리오파지 의 존재 가 확인 된 여 과액 을 이용 하 여 순수 박테리오파지 의 분리 를 실시 하 였 다 . 순수 박테리오파지 의 분리 에 는 통상 의 용균 반 분석 ( Plaque assay ) 을 이용 하 였 다 . 이 를 자세히 설명 하 면 , 용균 반 분석 에서 형성 된 용균 반 하나 를 멸균 된 팁 을 이용 하 여 회수 한 다음 에 이 를 엔 테 로 코 쿠스 패 슘 배양액 에 첨가 해 주 어 4 - 5 시간 동안 37 ℃ 에서 함께 배양 하 였 다 . 배양 후 8 , 000 rpm 에서 20 분 간 원심 분리 하 여 상등 액 을 얻 었 다 . 얻 어 진 상등 액 에 50 분 의 1 의 부피 로 엔 테 로 코 쿠스 패 슘 배양액 을 첨가 해 준 다음 에 다시 37 ℃ 에서 4 - 5 시간 배양 해 주 었 다 . 박테리오파지 의 수 를 증가 시키 기 위하 여 이러 한 과정 을 최소 5 회 이상 실시 한 다음 에 최종 적 으로 8 , 000 rpm 에서 20 분 간 원심 분리 하 여 상등 액 을 얻 었 다 . 얻 어 진 상등 액 을 사용 하 여 다시 용균 반 분석 을 실시 하 였 다 . 통상 순수 박테리오파지 의 분리 가 상기 과정 의 1 회 만 으로 는 달성 되 지 않 기 때문 에 이때 형성 된 용균 반 을 이용 하 여 앞 단계 를 전체 적 으로 다시 반복 하 였 다 . 이 와 같 은 과정 을 최소 5 회 이상 반복 실시 하 여 순수 한 박테리오파지 를 포함 한 용액 을 확보 하 였 다 . 통상 적 으로 순수 박테리오파지 의 분리 는 형성 된 용균 반 의 크기 및 모양 이 모두 유사 하 게 될 때 까지 반복 수행 하 였 다 . 그리고 최종 적 으로 는 전자 현미경 분석 을 통하 여 박테리오파지 의 순수 분리 여부 를 확인 하 였 다 . 전자 현미경 분석 에서 순수 분리 가 확인 될 때 까지 앞 에 설명 한 과정 을 반복 하 였 다 . 전자 현미경 분석 은 통상 의 방법 에 따라 실시 하 였 다 . 이 를 간단히 설명 하 면 다음 과 같 다 . 순수 한 박테리오파지 를 포함 한 용액 을 구리 격자 ( Copper grid ) 에 묻히 고 2 % 유라 닐 아세테이트 ( Uranyl acetate ) 로 역 염색법 ( Negative staining ) 과 건조 를 수행 한 후 투과 전자 현미경 을 통하 여 그 형태 를 관찰 하 였 다 . 순수 분리 한 박테리오파지 의 전자 현미경 사진 이 도 1 에 제시 되 어 있 다 . 형태 적 특징 으로 판단 할 때 신규 확보 된 박테리오파지 는 시포 비리 대 ( Siphoviridae ) 박테리오파지 에 속함 을 확인 할 수 있 었 다 .