본 발명 은 Cas 9 의 REC 1 - II 도메인 의 무작위 돌연변이 유발 을 통해 얻 어 진 증가 된 특이 성 을 갖 는 단리 된 Cas 9 분자 , 및 각각 의 생성 된 변이체 의 온 - 및 오프 - 타 겟 활성 을 동시 에 평가 하 는 효모 기반 검정 을 사용 한 스크리닝 을 기재 한다 . 선택 된 히트 는 포유 동물 시스템 에서 의 스크리닝 에 의해 추가 로 개량 되 었 다 .