프로브 ( Probe ) 는 1 kb Expansin EST 클론 을 함유 하 고 있 는 10 ng 의 플라스미드 ( plasmid ) , dCTP 를 제외 한 100 μ M dCTP mix , 100 μ M 의 dCTP - biotin , 10 μ M 의 벡터 ( pBluescript II ) 프라이머 T 3 ( 5 ‘- AATTAACCCTCACTAAAGGG - 3 '; 서열 번호 7 ) 와 , T 7 ( 3 '- CGGGATATCACTCAGCATAATG - 5 '; 서열 번호 8 ) , 1 × PCR 버퍼 ( buffer ) 와 1 unit 의 Taq 폴리머 라 제 ( polymerase ) 를 각각 첨가 하 여 최종 부피 가 20 ㎕ 되 도록 조정 하 고 , 95 ℃ 에서 5 분 간 처리 하 여 95 ℃ 30 초 , 58 ℃ 30 초 , 72 ℃ 30 초 를 30 회 증폭 하 여 제작 하 였 다 .