18 시간 배양 후 ( day 3 ) , 차가운 DPBS 로 2 회 세척 하 고 세포 를 회수 하 였 다 . 원심 분리 ( 1 , 200 rpm , 3 분 ) 하 여 얻 은 펠 렛 을 세포 용해 버퍼 ( Cell Signaling Technology , Inc . , Danvers , MA , USA ) 로 용해 하 고 , 브래드포드 어세 이 법 으로 단백질 을 정량 하 였 다 ( Bio - Rad Laboratories ) .