SK - Br - 3 세포 를 통상 적 으로 10 % 태아 소 혈청 이 보충 된 변형 된 맥코이 5 A 배지 에서 배양 하 고 , BT - 474 세포 를 10 % FBS 가 보충 된 DMEM 에서 배양 하 였 다 . 준 - 전면 성장 세포 를 트립신 화 하 고 , PBS 로 세척 하 고 , 성장 배지 를 사용 하 여 5 x 104 개 세포 / mL 로 희석 하 고 , 96 - 웰 투명 바닥 흑색 플레이트 ( 코스타 ( Costar ) 3904 ) 에 5000 개 세포 / 웰 의 밀도 로 플 레이팅 하 였 다 . 세포 를 37 ℃ 에서 밤새 인 큐 베이 션 한 후 에 적절 한 농도 의 HER 3 항체 ( 전형 적 인 최종 농도 는 10 또는 1 μ g / mL 임 ) 를 첨가 하 였 다 . 플레이트 를 6 일 동안 다시 인큐베이터 에 넣 은 후 에 셀타 이터 - 글 로 ( CellTiter - Glo ) ( 프로 메가 ( Promega ) ) 를 이용 하 여 세포 생존 율 을 평가 하 였 다 . 100 μ L 의 셀타 이터 - 글 로 용액 을 각각 의 웰 에 첨가 하 고 , 10 분 동안 부드럽 게 진탕 시키 면서 실온 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 발광 의 양 을 스펙 트라 맥스 플레이트 판독기 ( 몰레 큘라 디바 이시즈 ) 를 이용 하 여 결정 하 였 다 . 각각 의 항체 에서 수득 한 성장 억제 의 정도 는 각각 의 HER 3 항체 에서 수득 한 발광 값 을 표준 이소 형 대조 항체 ( MOR 06391 ) 와 비교 하 여 계산 하 였 다 .