추가 의 이중 특이 적 항체 의 기능 성 ( 전장 항체 에 대한 디 술 피드 - 안정 화 된 Fv 단편 의 오직 하나 의 도메인 을 통해 연결 됨 ) 을 표면 플라 즈 몬 공명 을 통해 결합 검정 으로 조사 하 였 다 . 퓨 린 을 통한 가공 이 발현 공정 동안 발생 하 기 때문 에 , 정제 후 수득 되 는 제제 는 완전 하 게 활성 인 연결 없 는 dsFvs 를 갖 는 이중 특이 적 독립 제 로 이루어져야 만 한다 . 완전 한 결합 적격성 을 SPR 분석 으로 확인 하 였 고 , 이 는 이중 특이 적 항체 의 모든 결합 독립 체 및 디 곡 시 게 닌 에 결합 하 는 dsFv 가 제한 되 지 않 은 결합 능 을 갖 는 것 으로 나타났 다 . 표적 항원 1 및 표적 항원 2 디 곡 시 게 닌 에 대한 이 들 의 친화도 는 , 변형 되 지 않 은 항체 또는 Fab 와 필적 할 만 하 다 . 예 를 들 어 , 모 항체 와 비교 한 , 본 발명 에 따른 이중 특이 적 항체 유도체 의 디 곡 시 게 닌 화 된 탑재 에 대한 개별 적 인 결합 은 Kd 22 nM ( 대 조군 분자 에 대해 ) 및 19 nM ( 퓨 린 - 가공 된 분자 에 대해 ) 이 었 다 ( 도 14 ) . 또한 , 이 들 SPR 실험 ( 도 14 b 및 도 15 b ) 는 , 이중 특이 적 항체 유도체 가 2 개 의 상이 한 항원 에 동시 에 결합 함 을 명백히 입증 하 였 다 . 이 는 표적 1 항원 LeY 및 CD 22 에 대해 나타났 다 ( 도 14 및 도 15 ) .