본 개시 의 기판 상 에서 올리 고 뉴클레오티드 합성 을 위한 적절 한 방법 은 , 포스 포르 아미 다 이트 빌딩 블록 과 기판 에 결합 된 뉴클레오시드 사이 에 포스 파이트 트리 에스테르 결합 을 형성 하 는 커플링 단계 에서 성장 하 는 올리 고 뉴클레오티드 에 대한 포스 포르 아미 다 이트 빌딩 블록 , 즉 뉴클레오시드 포스 포르 아미 다 이 트 의 조절 된 첨가 를 포함 하 는 포스 포르 아미 다 이트 방법 이 다 . 일부 경우 에 , 뉴클레오시드 포스 포르 아미 다 이 트 는 활성 화 된 기판 에 제공 된다 . 일부 경우 에 , 뉴클레오시드 포스 포르 아미 다 이 트 는 활성화제 를 갖 는 기판 에 제공 된다 . 일부 경우 에 , 뉴클레오시드 포스 포르 아미 다 이 트 는 기판 - 결합 된 뉴클레오시드 에 비해 1 . 5 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15 , 16 , 17 , 18 , 19 , 20 , 25 , 30 , 35 , 40 , 50 , 60 , 70 , 80 , 90 , 100 배 과량 또는 이 를 초과 하 게 기판 에 제공 된다 . 일부 경우 에 , 뉴클레오시드 포스 포르 아미 다 이 트 의 첨가 는 무수 환경 , 예컨대 무수 아 세토 니트릴 중 에서 수행 된다 . 커플링 단계 에서 뉴클레오시드 포스 포르 아미 다 이 트 의 첨가 및 결합 후 , 기판 은 임의 적 으로 세척 된다 . 일부 경우 에 , 커플링 단계 는 1 회 이상 추가 로 반복 되 며 , 임의 적 으로 기판 에 뉴클레오시드 포스 포르 아미 다 이 트 를 첨가 하 는 사이 에 세 척 단계 를 수행 한다 . 일부 경우 에 , 본원 에서 사용 되 는 올리 고 뉴클레오티드 합성 방법 은 1 , 2 , 3 회 또는 이 를 초과 하 는 순차 적 인 커플링 단계 를 포함 한다 . 많 은 경우 에 , 커플링 이전 에 기판 에 결합 된 뉴클레오시드 는 보호기 의 제거 에 의해 탈 보호 되 며 , 여기 서 보호기 는 중합 을 방지 하 는 작용 을 한다 . 통상 적 인 보호기 는 4 , 4 '- 디 메 톡 시 트리 틸 ( DMT ) 이 다 .