인체 섬유 아 세포 ( HDF ) 를 6 - well plate 의 각 웰 ( well ) 에 18 X 105 개수 의 세포 가 되 도록 접종 한 후 , 37 ℃, 5 % CO 2 환경 에서 24 시간 동안 배양 하 였 다 . 그 후 , 인산염 완충액 ( Phosphate buffered saline , PBS ) 을 이용 하 여 세포 를 3 회 수세 한 다음 피부 노화 를 유발 하 기 위하 여 자외선 을 조사 하 였 다 . 이때 , 자외선 은 자외선 A 램프 ( Sankyo Denki FL 8 BL lamp , Sankyo Denki Co . , Japan ) 를 이용 하 여 1 초 당 27 mW / ㎠ 의 에너지 양 으로 총 50 mJ / ㎠ 를 조사 하 였 다 . 자외선 조사 직후 , 세포 를 다시 인산염 완충액 으로 수세 하 고 우태 아 혈청 이 포함 되 지 않 은 DMEM 배지 에 실시 예 5 - 7 ~ 5 - 8 의 생성물 및 지페 노 사이드 ( Gypenoside ) 함유 고 분획 물 파우더 를 최종 농도 50 ppm 이 되 도록 처리 하 여 24 시간 더 배양 하 였 다 . 배양 후 피부 노화 여부 를 확인 하 기 위하 여 피부 세포 간 기질 구성 성분 인 타입 I 프로 콜라겐 ( type I procollagen ) 의 분해 효소 인 MMP - 1 의 발현 정도 를 MMP - 1 ELISA 키트 ( MMP - 1 human , ELISA system , Biotrak Assay , Amersham Biosciences , USA ) 를 사용 하 여 제조자 의 프로토콜 에 따라 측정 하 였 다 . MMP - 1 의 농도 는 총 세포 배양액 1 ㎖ 당 단백질 ㎎ 으로 나타냈으며 , 그 결과 는 표 8 에 나타내 었 다 . 이때 사용 된 Positive control ( 양성 대 조군 ) 은 EGCG ( Epigallocatechin gallate ) 를 사용 하 였 고 , Negative control ( 음성 대 조군 ) 은 물 을 사용 하 였 다 .