상기 처리 에 의해 생성 된 모든 돼지 배아 를 최대 습도 로 5 % O 2 , 5 % CO 2 및 90 % N 2 중 의 38 . 5 ℃ 에서 4 mg / ㎖ BSA 를 함유 하 는 변형 된 NCSU 37 배지 에서 배양 하 였 다 ( Kikuchi , et al . , 2002 ) . 제 0 일 ( 수정 및 활성 화 를 위한 날 ) 내지 제 2 일 에 배양 배지 에 0 . 17 mm 피루브산 나트륨 및 2 . 73 mm 락트산 나트륨 을 공급 하 였 고 , 그 후 제 2 일 내지 제 7 일 에 락트산 나트륨 및 피루브산 나트륨 을 5 . 5 mm 글루코오스 로 대신 하 였 다 . 모든 ZF 배아 를 상기 사용 한 바 와 같 은 동일 한 배양 배지 및 기체 혼합물 에서 WOW ( Vajta , et al . , 2000 ) 에서 배양 하 고 , WOWs 로부터 배아 를 제거 하 는 것 없이 제 2 일 에 조심 스럽 게 배지 를 변경 시켰 다 . 제 7 일 에 배 반포 비율 을 기록 하 였 다 . 전체 세포 수 를 결정 하 기 위해 , 배반 포 를 고정 시키 고 20 ㎍/㎕ Hoechst 33342 형광 색소 를 함유 하 는 글리세롤 내 유리 현미경 슬라이드 에 올려 두 었 다 . 염색 24 시간 후 , 배아 를 형광 부착 및 UV - 2 A 필터 를 가지 는 Diaphot 200 역상 현미경 ( Nikon , Tokyo , Japan ) 하 에서 관찰 하 였 다 .