부위 특이 적 인 페길레이션 ( PEGylation ) 의 경우 , 아미노산 위치 87 에서 유리 시스테인 잔기 를 갖 는 hNGAL 뮤 테인 ( SEQ ID NO : 13 , SEQ ID NO : 14 ) 이 분지 된 40 k PEG - 말레 이미드 로 페길레이션하기 위해 사용 되 었 다 . 이러 한 목적 을 위해 , 87 위치 에서 세린 은 부위 특이 적 인 돌연변이 유도 ( Quick - change mutagenesis Kit , Stratagene ) 에 의해 hNGAL 야생 형 에서 원래 발생 하 는 시스테인 으로 복귀 돌연변이 되 었 다 . 페길레이션 반응 전 에 , 유리 시스테인 잔기 는 실온 에서 3 시간 동안 안티 칼린 대 TCEP 의 1 : 1 몰 비율 로 감소 하 였 다 . 이후 , 페길레이션은 실온 에서 1 . 5 시간 동안 2 몰 이상 의 과량 의 PEG 40 - 말레 이미드 시약 과 단백질 을 혼합 하 여 수행 되 었 다 .