선별 균주 의 세 포외 효소 들 중 발효 와 관련 된 단백질 , 섬유소 및 전분 분해 효소 의 활성 을 분석 하 기 위하 여 각 효소 와 특이 적 으로 반응 하 는 기질 을 첨가 한 고체 배지 를 제조 하 였 다 . 단백질 분해 효소 ( protease ) 의 활성 은 Vermelho 등 의 방법 에 따라 2 % 스킴 밀크 에 1 . 5 % 아가 를 첨가 하 여 스킴 밀크 아가 배지 를 제조 하 였으며 , 섬유소 분해 효소 ( cellulase ) 의 활성 은 Teather 와 Wood 의 방법 에 따라 1 % CMC ( carboxylmethyl cellulose ) 에 1 . 5 % 아가 및 0 . 01 % 트리 판 블루 를 첨가 하 여 CMC 아가 배지 를 제조 하 였 다 . 또한 , 전분 분해 효소 ( amylase ) 의 활성 을 확인 하 기 위하 여 1 % 가용성 전분 과 1 . 5 % 아가 를 첨가 한 전분 아가 배지 를 제조 하 였 고 , 웰 확산 ( well diffusion ) 방법 을 이용 하 여 효소 활성 을 측정 하 기 위하 여 각각 의 배지 에 8 mm 의 구멍 을 뚫 었 다 . 선별 된 바실 러스 균 은 LB 액체 배지 에서 37 ℃, 24 시간 진탕 배양 하 였 다 . 선별 균주 배양액 은 13 , 000 rpm 로 10 분 간 원심 분리 하 여 상등 액 을 취하 고 , 0 . 45 ㎛ 멤 브레인 필터 로 제 균 한 뒤 100 ㎕ 씩 각각 의 세 포외 효소 활성 측정 배지 의 구멍 에 분주 하 여 25 ℃ 에서 24 시간 동안 반응 시킨 후 웰 주위 로 생기 는 환 의 크기 를 측정 하 였 다 . 아밀라아제 활성 의 경우 반응 후 루골 용액 ( Lugol ' s solution ) 으로 염색 한 뒤 생기 는 환 의 크기 를 측정 하 였 다 .