생성 된 독소 추출 은 각 플라스크 로부터 얻 어 진 배양액 을 250 ml 분별 깔때기 로 옮겨 담 은 후 , 100 ml 의 클로로포름 ( chloroform ) 을 넣 어 진탕 ( 20 분 , 300 spm ) 하 였 다 , 진탕 후 클로로포름 은 flat bottom flask 로 모두 옮겨 담 았 으며 , 이 과정 을 총 2 회 반복 하 였 다 . 회전식 감압 증발기 로 chloroform 을 모두 증발 시키 고 ( 55 ℃), 70 % methanol ( v / v ) 을 첨가 하 여 재용 해 시킨 후 , 시린지 필터 ( Hyundai micro , 0 . 2 μ m , hydrophobic ) 로 여과 하 여 high performance liquid chromatography ( HPLC ; Younglin , YL 9100 HPLC System , Korea ) 로 Symmetry C 18 column ( 150 x 4 . 6 mm ) ( Waters Co . , USA ) 을 이용 하 여 분석 하 였 다 . 분석 에 이용한 이동상 은 물 / 아 세토 나이트릴 / 초산 ( 99 : 99 : 2 , v / v ) 이 며 , column oven 의 온도 는 30 ℃, 시료 주 입량 은 20 μ l , 유속 은 1 ml / min 으로 하 여 형광 ( fluorescence ) 검출기 ( FLD ; Aglilent Technologies , 1260 Infinity , 333 nm excitation , 460 nm emission ) 을 이용 하 여 15 분 간 분석 하 였 다 . 검량 선 은 OTA 표준물질 ( Cayman Chemical Co . , USA ) 로 작성 하 여 OTA 를 정량 하 였 다 . 독소 농도 변화 는 하 기 식 을 이용 하 여 계산 하 였 다 . 상기 실험 은 El - Gendy 와 Marth , ( 1981 ) 및 Sun 등 ( 2016 ) 의 방법 과 Xiong 등 ( 2016 ) 과 Kupski 등 ( 2018 ) 의 독소 분석 방법 을 참고 하 여 수행 하 였 다 .