MMP 2 / 9 에 의해 인지 되 는 서열 을 커넥터 내 에 도입 함 으로써 , 제 2 결합 독립 체가 예 를 들 어 종양 또는 염증 조직 에서 이러 한 프로테아제 를 만나 기 전 까지 불활성 인 , 이중 특이 적 dsFv - 함유 독립 체 를 생산 할 수 있 다 . 기질 메탈 로 프로테 이나 제 ( MMP ) 는 일부 질환 조직 에서 , 예 를 들 어 종양 또는 염증 조직 의 환경 에서 높 은 수준 으로 존재 한다 ( 참고 로 표 1 참조 ) . 서열 GPLGMLSQ , GPLGLWAQ 및 GPLGIAGQ 는 MMP 2 및 MMP 9 에 대한 기질 이 다 ( Netzel - Arnett , JBC , 1991 ; Netzel - Arnett , Biochemistry , 1993 ) . 이 들 서열 을 커넥터 서열 에 통합 하 여 MMP 2 / 9 에 의해 해방 될 수 있 는 dsFv - 융합 을 생성 했 다 ( 도 3 b 및 도 3 의 설명 ) . 우리 가 재조합 발현 에 사용 한 HEK 293 세포 에 는 유의 한 수준 의 MMP 가 존재 하 지 않 는다 . 그 때문 에 , 그러 한 커넥터 가 있 는 독립 체의 발현 및 정제 로 2 개 의 확장 된 H - 사슬 을 갖 는 제한 분자 가 수득 된다 . 단백질 A 및 SEC 정제 후 수율 10 - 20 ㎎/ L ( 표 2 참조 ) 및 정제 된 분자 의 조성 은 프리시 젼 자리 를 함유 한 이중 특이 적 변이체 와 거의 동일 했 다 ( 상기 참조 ) . SDS - PAGE 는 ( Her 3 - 독립 체의 L - 사슬 에 더 하 여 ) 높이 65 kD 에 단백질 ( 이중 -) 밴드 가 존재 함 을 보여준다 . 이 밴드 는 C - 말단 에 부가 적 커넥터 펩티드 ( 2 kd ) 및 VH 또는 VL 도메인 ( 13 kD ) 을 보유 하 는 H - 사슬 ( 50 kd ) 을 나타낸다 .