도 9 와 10 에서 는 다수 의 조작 된 변이체 가 WT IgG 1 과 비교 하 여 , pH 6 . 0 에서 인간 FcRn 결합 에 대하 여 더욱 높 은 친화 성 으로 결합 한다는 것 을 증명 한다 . 향상 은 소정 의 위치 에서 치환 의 실체 에 상당히 의존 하 였 다 . 가령 , 향상 된 결합 에 대한 기준 으로서 2 - 배 를 이용 하 는 경우 에 , IgG 2 내 에 434 위치 에서 다수 의 돌연변이 가 친화성 을 증가 시키 고 ( A , S , Y , F 및 W ) , 일부 는 중립 적 이 고 ( WT IgG 2 의 2 - 배 이내 ) ( G , H , M 및 T ) , 그리고 다수 의 치환 이 친화성 을 감소 시켰 다 ( < 0 . 5 배 ) ( D , E , K , P , R 및 V ) . IgG 1 의 배경 에서 더욱 큰 결합 이 반드시 , IgG 2 에서 더욱 큰 결합 으로 연결 되 는 것 은 아니 었 다 ( 가령 , 434 T 는 IgG 1 에서 결합 을 향상 시키 지만 IgG 2 에서 는 그러 지 못하 였 다 ) . 게다가 , 단일 변이체 에 의해 제공 되 는 향상 이 조합 이후 에 항상 부가 적 ( additive ) 인 것 은 아니 었 다 . 도 11 a 에서 는 선택 된 이중 치환 변이체 에 의한 실험 적 인 배수 적 FcRn 결합 대 ( 對 ) 이 들 을 구성 하 는 개별 단일 변이체 에 의한 배수 적 FcRn 결합 의 결과 를 플롯 팅 ( plotting ) 함 으로써 , 이 를 도표 로서 증명 한다 . 직선 은 완전 한 부가 ( perfect additivity ) , 다시 말 하 면 , 단일 치환 의 결과 로부터 기대 되 거나 예측 되 는 수치 를 나타낸다 . 다수 의 이중 변이체 가 이 선 아래 로 떨어지 거나 , 또는 이 선 에 근접 한다 ( 259 I / 319 I , 259 I / 428 L , 319 I / 428 L , 그리고 308 F / 428 L ) . 여러 변이체 는 부가 적 이 지 못하 였 다 ( 319 I / 308 F , 252 Y / 428 L , 그리고 428 L / 434 M ) . 이 들 변이체 , 특히 뒤쪽 2 개 변이체 ( 252 Y / 428 L 및 428 L / 434 M ) 의 경우 에 , 이 들 단일 치환 의 친화성 향상 은 통합 될 때 , 서로 에 비 양립 성 ( incompatable ) 인 것 으로 보인다 . 놀랍 게 도 , 변이체 259 I / 308 F 및 428 L / 434 S 의 FcRn 친화성 향상 은 그 들 의 개별 단일 치환 의 친화성 으로부터 예측 되 는 것 보다 컸 다 . 이 들 특정 한 단일 치환 은 통합 될 때 , 예기 치 않 게 상승 된 향상 을 나타냈 다 . 실험 적 친화 성 및 이 들 단일 변이체 의 친화 성 으로 예측 된 친화성 간 의 차이 는 도 11 b 에 플롯 팅 되 는데 , 여기 에서 변이체 는 그 들 의 복합 단일 변이체 ( 좌측 에 259 I , 308 F 및 319 I , 그리고 우측 에 482 L 과 의 조합 ) 에 따라 분류 된다 . 상승효과 는 예측 된 수치 와 비교 하 여 실험 적 수치 의 배수 를 계산 하 고 , 그 이후 에 1 로 표준 화 ( normalization ) 시키 고 백분율 ( percentage ) ( 상승효과 % = 100 x [ ( 실험 적 배수 / 예측 된 배수 ) - 1 ) ] 로 전환 시킴 으로써 정량 될 수 있 다 . 이러 한 분석 결과 는 도 11 b 에 플롯 팅 되 는데 , 여기 에서 변이체 는 그 들 의 복합 단일 변이체 에 따라 분류 된다 . 상기 그래프 는 이 들 변이체 중 에서 일부 , 특히 259 I / 308 F 및 428 L / 434 S 의 상승효과 를 명백 하 게 보여준다 . 도 11 b 및 11 c 에서 는 또한 , 이러 한 스크린 ( screen ) 으로부터 다수 의 최적 단일 치환 을 통합 하 는 작업 의 비 예측 성 ( nonpredictive nature ) 을 강조 한다 . 가령 , 428 L 의 434 S 및 259 I 와 의 조합 은 상승적 결합 향상 을 제공 하 는 반면 , 252 Y 또는 434 M 은 428 L 과 통합 될 때 부정 적 인 영향 을 주 었 다 . 428 L 과 434 S 의 통합 대 ( 對 ) 434 M 간 의 이러 한 극 적 인 차이 는 소정 위치 에서 의 치환 의 특정 한 아미노산 실체 의 중요 성 을 더욱 뒷받침 한다 .