또한 , 줄기세포 로서 의 분화 능 을 확인 하 기 위해 , PEDF 기능 강화 태반 - 유래 중 간엽 줄기세포 를 골세포 및 지방 세포 로 분화 를 유도 하 였 다 . PEDF 기능 강화 태반 - 유래 중 간엽 줄기세포 ( 5 x 103 cells / cm 2 ) 를 배양 후 , 골세포 및 지방 세포 분화 유도 배지 ( Gibco . USA ) 로 2 일 마다 1 회 씩 배지 를 교환 하 였 다 . 21 일 후 , 분화 유도 된 세포 를 4 % paraformaldehyde 을 이용 하 여 고정 시킨 후 , 1 시간 동안 본 코사 ( Von Kossa , Sigma - Aldrich ) 및 오 일 레드 오 ( Oil Red O , Sigma - Aldrich ) 염색법 을 통해 칼슘 및 지질 소포 의 축적량 을 시각 화 하 였 다 . 골세포 및 지방 세포 로 분화 된 PEDF 기능 강화 태반 - 유래 중 간엽 줄기세포 로부터 qRT - PCR 기법 을 통해 골세포 및 지방 세포 특이 적 유전자 발현 을 확인 하 였 다 . 증폭 된 유전자 의 프라이머 서열 , PCR 반응 조건 은 각각 상기 표 1 내지 표 3 과 같 았 다 .