실시간 PCR 을 위한 반응물 로서 정 방향 프라이머 ( 10 uM ) 1 ㎕, 역방향 프라이머 ( 10 uM ) 1 ㎕, 프로브 ( 5 uM ) 1 ㎕, SensiFAST probe Hi - ROX mix ( Biotine , London , Uk ) 10 ㎕ 및 상기 실시 예 3 - 1 에서 200 ㎕( 대 조군 ) 또는 7 ㎕( 실험 군 ) 의 추출 버퍼 를 사용 하 여 추출 한 DNA 용액 중 7 ㎕ 를 취하 여 혼합 하 고 총 부피 20 ㎕ 가 되 도록 하 였 다 . 실시간 PCR 은 StepOne Plus 실시간 PCR 시스템 을 사용 하 여 95 ℃ 에서 10 초 , 60 ℃ 에서 50 초 의 조건 으로 총 40 사이클 을 수행 하 였 다 . Ct ( threshold cycle ) 값 은 Applied Biosystems 의 StepOne ™ 소프트웨어 를 사용 하 여 분석 하 였 다 .