공통 공정 흐름 을 사용 하 여 상이 한 폴리 사카 라이드 혈청형 3 , 4 , 6 A , 6 B , 7 F , 9 V , 14 , 18 C , 19 A , 19 F , 22 F , 23 F 및 33 F 를 정제 된 CRM 197 담체 단백질 에 개별 적 으로 접합 시켰 다 . 폴리 사카 라이드 를 용해 시키 고 , 표적 분자 질량 으로 크기 조정 하 고 , 화학 적 으로 활성 화 시키 고 , 한외 여과 에 의해 완충제 - 교환 하 였 다 . 활성 화 된 폴리 사카 라이드 및 정제 된 CRM 197 을 개별 적 으로 동결 건조 시키 고 디 메틸 술 폭 시드 ( DMSO ) 에 재용 해 시켰 다 . 이어서 , 재용 해 된 폴리 사카 라이드 및 CRM 197 용액 을 합하 고 하 기 기재 된 바 와 같이 접합 시켰 다 . 생성 된 접합체 를 한외 여과 에 의해 정제 한 후 최종 0 . 2 - 마이크로미터 여과 하 였 다 . 각각 의 단계 내 의 여러 공정 파라미터 , 예컨대 pH , 온도 , 농도 및 시간 을 하 기 섹션 에서 의 혈청형 - 특이 적 값 에 따라 제어 하 였 다 .