하 기 절차 에 따라 업 스테이트 엘 티 디 ( Upstate Ltd ; 영국 던디 ( Dundee , United Kingdom ) 소재 ) 에 의해 , 화합물 을 생화학 적 활성 에 대해 분석 하 였 다 . 25 μ l 의 최종 반응 부피 에서 , KDR ( h ) ( 5 - 10 mU ) 을 8 mM MOPS pH 7 . 0 , 0 . 2 mM EDTA , 0 . 33 mg / ml 미 엘린 염기성 단백질 , 10 mM 마그네슘 아세테이트 및 [ γ - 33 P - ATP ] ( 대략 500 cpm / pmol 의 비활성 , 필요 에 따라 농축 ) 와 함께 인 큐 베이 션 한다 . MgATP 믹스 의 첨가 에 의해 반응 을 개시 한다 . 실온 에서 40 분 동안 인 큐 베이 션 한 이후 , 3 ％ 인산 용액 5 μ l 의 첨가 에 의해 반응 을 중지 시킨다 . 이후 , 반응물 10 μ l 을 P 30 필터 맷 ( filtermat ) 에 스팟 팅 하 고 , 75 mM 인산 으로 5 분 동안 3 회 및 메탄올 로 1 회 세척 하 고 , 이후 건조 시키 고 , 섬광 계수 한다 .