기질 로서 이 . 콜라 이 에서 생성 된 재조합 GST - MEK 1 을 사용 하 여 200 μ M ATP 의 존재 하 에 30 분 동안 분석 을 수행 하 였 다 . 기질 의 인산화 를 검출 하 고 , HTRF 를 사용 하 여 정량 화 하 였으며 , 시약 은 시스 바이오 에서 공급 하 였 다 . 이 들 은 알 로 피코시아닌 ( XL 665 ) 에 접합 된 항 - GST 항체 및 유로퓸 - 크 립 테이트 에 접합 된 항 - 포스 포 ( Ser 217 / Ser 221 ) MEK 항체 로 이루어진다 . 항 - 포스 포 항체 는 Ser 217 및 Ser 221 상 에서 이중 인산화 된 MEK 또는 Ser 217 상 에서 단일 인산화 된 MEK 를 인식 한다 . 항체 가 둘 모두 MEK 에 결합 된 경우 ( 즉 , 기질 이 인산화 된 경우 ) , 340 nm 에서 의 여기 에 따라 크 립 테이트 로부터 알 로 피코시아닌 으로 의 에너지 전달 이 일어나 생성 된 인산화 된 기질 의 양 에 비례 하 여 방출 되 는 형광 이 발생 한다 . 형광 은 다중 - 웰 형광 계 를 이용 하 여 검출 하 였 다 .