2 - 배럴 시린지 구동 펌프 ( 하버드 33 트윈 시린지 ( Harvard 33 Twin Syringe ) ) 를 이용 하 여 멸균 지질 / 에탄올 용액 및 멸균 siNA / 담체 또는 siNA / 담체 칵테일 / 시트 레이트 완충제 ( 20 mM 시트 레이트 완충제 ( pH 5 . 0 ) ) 용액 을 동일 한 , 또는 거의 동일 한 유량 으로 0 . 5 mm ID T - 혼합기 에서 혼합 하 였 다 ( 혼합 단계 I ) . 생성 된 아울렛 LNP 현탁액 은 40 - 50 vol % 에탄올 을 함유 하 였 다 . 45 vol % 에탄올 아울렛 현탁액 을 수득 하 기 위해 , 멸균 지질 / 에탄올 및 멸균 siNA / 담체 또는 siNA / 담체 칵테일 / 시트 레이트 완충제 용액 를 각각 54 mL / min 및 66 mL / min 의 유량 으로 혼합 하 여 , 혼합 아울렛 의 전체 유량 이 120 mL / min 가 되 었 다 .