인슐린 분말 ( Biocon , India ) 을 10 mM HCl 에 용해 시킨 후 , 2 K butyr - ALD ( 2 ) PEG ( 양 말단 에 각각 부틸 알데하이드기 를 하나 씩 지니 고 있 는 PEG , LAYSAN BIO 사 , 미국 ) 를 인슐린 베타 체인 과 면역 글 로 불린 Fc 의 N - 말단 에 페길화시키기 위하 여 , 위 실시 예 1 과 같 은 페길화 반응 조건 및 정제 조건 과 면역 글 로 불린 Fc 단편 과 의 반응 조건 및 정제 조건 을 따라 인슐린 - 2 kDa PEG - 면역 글 로 불린 Fc 결합체 를 제조 및 정제 하 였 다 . 단 , 반응 이 종결 된 후 반응 액 은 Tris - HCl ( pH 7 . 5 ) 버퍼 와 NaCl 농도 구배 를 이용 하 여 Source 15 Q ( GE , 미국 ) 컬럼 을 적용 하 고 , 황산암모늄 과 Tris - HCl ( pH 7 . 5 ) 의 농도 구배 를 이용 하 여 , Source 15 ISO ( GE , 미국 ) 에 적용 하 여 , 인슐린 - 2 kDa PEG - 면역 글 로 불린 Fc 결합체 를 정제 하 였 다 .