간세포 현탁액 ( 50 μ L / 웰 ) 을 48 - 웰 플레이트 에 첨가 하 였 다 . 화합물 1 a ( 20 μ mol / L ) 함유 작업 스톡 용액 50 마이크 로 리터 를 첨가 하 여 반응 을 시작 하 였 다 . 플레이트 를 조직 배양 인큐베이터 ( 5 % CO 2 / 95 % 공기 가습 분위기 및 37 ℃) 에 배치 하 고 반응 을 2010 ng / mL 푸 로세 미드 및 0 . 2 μ mol / L ( R ) - 프로프라놀롤 함유 100 % 메탄올 / 아 세토 니트릴 ( 1 / 1 , v / v ) 로 이루어진 200 μ L 의 정지 용액 으로 5 , 30 , 60 , 120 , 180 및 240 분 에 정지 시켰 다 . 혼합물 을 원심 분리 하 고 여과 하 고 상청 액 은 분석 을 위해 수집 하 였 다 . 동결 보존 된 간세포 의 최종 농도 는 1 x 106 개 세포 / mL 이 었 다 . 화합물 1 a 의 최종 인 큐 베이 션 농도 는 10 μ mol / L 였 다 .