모의 T 세포 또는 ACTR T 세포 ( 이펙터 ; E ) 및 표적 세포 ( 표적 ; T ) 를 1 : 1 , 이펙터 - 대 - 표적 비 ( 30 , 000 개 표적 세포 ) 로 , 증가 하 는 농도 의 인간 화 비 - 푸코 실화 항 - BCMA 항체 ( hSG 16 . 17 SEA ) 와 함께 , 10 % 태아 소 혈청 이 보충 된 RPMI 1640 배지 중 에서 200 - μ L 반응 부피 로 인 큐 베이 션 하 였 다 . 반응물 을 7 일 동안 37 ℃ 에서 CO 2 ( 5 %) 인큐베이터 내 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 살 아 있 는 CD 3 + T 세포 의 카운트 를 제 7 일 에 결정 하 였 다 . 간략 하 게 , 제 7 일 에 , 세포 를 염색 완충제 중 에서 2 회 세척 한 후 , 라이브 / 데드 이 플루오르 - 780 염료 로 4 ℃ 에서 30 분 동안 염색 하 였 다 . 살 아 있 는 세포 / 사멸 세포 염색 중 에서 인 큐 베이 션 후 , 세포 를 2 회 세척 하 고 , 후속 해서 AF 488 - 접합 된 항 - 인간 CD 3 항체 및 AF 647 - 접합 된 항 - 인간 CD 16 항체 로 이루어진 항체 칵테일 100 μ L 와 함께 인 큐 베이 션 하 였 다 . 염색 후 에 , 세포 를 염색 완충제 로 다시 2 회 세척 하 고 , 후속 해서 염색 을 유동 세포 측정 법 을 통해 검출 하 였 다 . CD 3 + T 림프구 에 대한 유동 세포 측정 법 게이팅 을 이중선 배제 및 사멸 세포 배제 후 에 수행 하 였 다 .