다음 과 같 은 HTP 효소 결합 검정 을 사용 하 여 라이브러리 를 스크리닝 하 였 다 : 펠 렛 화 된 이 . 콜라 이 배 양물 을 1 mM 황산마그네슘 및 0 . 5 mg / mL 리소자임 및 폴리 믹 신 B 술 페이트 ( PMBS ) 와 함께 250 μ L 의 트리스 - HCl , pH 7 . 5 로 용해 시키 고 , 원심 분리 에 의해 맑 게 하 였 다 . 용해 물 을 트리스 - HCl , pH 7 . 5 로 20 배 희석 하 였 다 . 이어서 , 10 μ L 의 희석 된 SuS 용해 물 및 2 g / L GT 서열 번호 696 ( Rd 8 BB ) 을 ~ 1 mM 레바 우디 오시드 D 의 기질 로딩 및 1 mM ADP ( Sigma , > 95 %) 및 10 mM 수크로스 ( Sigma ) 의 보조 기질 로딩 과 함께 100 μ L 반응 부피 에서 조합 하 였 다 . 하 기 반응 조건 을 사용 하 였 다 : 2 시간 동안 300 RPM 진탕 하 에 써 모 트론 ® 적정 플레이트 진탕기 에서 50 mM 인산칼륨 완충제 , pH 7 , 3 mM MgCl 2 , 50 ℃. 상기 설명 한 반응물 은 10 μ L 검정 물 을 0 . 2 % 포름산 을 갖 는 90 μ L 아세 토니 트릴 에 첨가 함 으로써 켄 칭 하 고 , 원심 분리 에 의해 침전 시켰 다 . 상청 액 을 물 에 10 배 희석 한 후 , 스 테 비올 글리코시드 생성물 을 표 31 . 1 에 기재 된 기기 및 파라미터 를 사용 하 여 RapidFire SPE - MS / MS 에 의해 검출 하 였 다 .