솔잎 열수 추출물 의 항 아메바 효과 ( 아메바 사멸 효과 ) 는 MTT assay 를 이용 하 여 분석 하 였 다 . Nelson 배지 에서 배양 한 파울러 자유 아메바 영양 형 을 96 - 웰 마이크로 플레이트 ( well microplate ) 에 접종 ( 105 cells / well ) 한 후 37 ℃ 배양기 에서 배양 하 였 다 . 배양 된 파울러 자유 아메바 에 솔잎 열수 추출물 을 다양 한 농도 ( 1 ~ 1 , 000 μ g / ml ) 로 처리 한 후 37 ℃ 배양기 에서 48 시간 동안 배양 하 였 다 . 솔잎 열수 추출물 을 첨가 하 지 않 고 동일 한 조건 에서 배양 한 파울러 자유 아바 를 대 조군 으로 사용 하 였 다 . 배 양상 층 액 을 100 μ l 제거 한 후 20 μ l 의 3 -( 4 , 5 - dimethylthiazol - 2 - yl ) - 2 , 5 - diphenyl - 2 H - tetrazolium bromide ( MTT ; 5 mg / ml ) 를 첨가 하 고 37 ℃ 에서 4 시간 반응 하 였 다 . 각 well 에서 MTT 용액 을 제거 하 고 150 μ l 의 dimethylsulfoxide ( DMSO ) 를 첨가 한 다음 37 ℃ 에서 30 분 동안 추가 반응 한 후 Multiskan FC microplate reader ( Thermo , Finland ) 를 이용 하 여 595 nm 에서 흡광도 를 측정 하 였 다 .