RAW 264 . 7 세포 를 12 well plate 에 2 × 105 cells / well 로 분주 하 여 세포 배양기 ( 37 ℃, 5 % CO 2 ) 에서 24 시간 동안 배양 하 였 다 . 배양 후 새로운 배양액 으로 교체 하 고 홍경 천 추출물 50 ㎍/㎖ 의 농도 에 LPS 를 1 ㎍/㎖ 의 농도 로 처리 한 후 , 다시 24 시간 동안 세포 배양기 에서 배양 하 였 다 . 배양 후 1 , 200 rpm 에서 5 분 간 원심 분리 하 여 상층 액 을 획득 하 여 Milliplex map mouse cytokine / chemokine magnetic bead panel - immunology multiplex assay kit 의 구성 된 물품 을 이용 하 여 다음 과 같이 측정 하 였 다 . 96 well plate 에 상층 액 25 ㎕ 씩 분주 하 고 assay buffer 및 matrix buffer , antibody - immobilized beads 를 각 25 ㎕ 씩 가하 여 혼합 한 후 2 시간 동안 실온 에서 반응 시키 고 washing 완충 용액 을 이용 하 여 2 회 세척 하 였 다 . 세 척 후 25 ㎕ 의 detection antibody 을 가하 여 1 시간 동안 실온 에서 암소 반응 시키 고 추가 로 25 ㎕ 의 Streptavidin - Phycoerythrin 을 가하 여 30 분 동안 실온 에서 반응 시킨 후 washing 완충 용액 을 이용 하 여 2 회 세척 하 였 다 . 세 척 후 PBS 를 150 ㎕ 넣 고 5 분 간 shaking 한 후 Luminex 를 이용 하 여 측정 하 였 다 .