이전 에 기술 한 바 와 같이 돼지 태아 섬유 모세포 세포 를 단일 층 으로부터 트립신 분해 하 여 제조 하 였 다 ( Kragh , et al . , 2005 ) . 융합 을 2 단계 로 수행 하 였으며 , 제 2 단계 는 또한 활성 화 개시 를 포함 하 였 다 . 제 1 단계 동안 , 50 % 의 이용 가능 한 세포질체 를 3 초 동안 T 0 에서 용해 된 1 mg / ㎖ 의 포토 헤마 글루 티 닌 ( PHA ; ICN Pharmaceuticals , Australia ) 에 이동 시킨 후 , 재빨리 단일 섬유 모세포 에 떨어뜨렸 다 . 부착 후 , 세포질체 - 섬유 모세포 쌍 을 10 초 동안 융합 배지 ( 0 . 3 M 만니톨 및 0 . 01 % PVA ) 에서 평형 화 한 후 , 융합 챔버 에 이동 시켰 다 . 0 . 6 KV / cm 및 700 KHz 의 교류 ( AC ) 를 이용 하 여 , 전선 으로부터 최대한 멀리 떨어진 체세포 가 있 는 융합 챔버 의 전선 에 세포 쌍 을 정렬 시켰 고 ( 도 7 d ) , 그 후 9 μ s 동안 2 . 0 KV / cm 직류 로 융합 시켰 다 . 전기 펄스 후 , 세포 쌍 을 전선 으로부터 조심 스럽 게 제거 하 고 , T 10 방울 에 이식 시킨 후 , 융합 이 일어나 는지 여부 를 관찰 하 기 위하 여 인 큐 베이 션 하 였 다 .