100 μ L 반응 에서 25 μ L 용해 물 의 용해 물 로딩 을 사용 하 고 1 mM 레바 우디 오시드 A ( > 97 % 순도 ) 의 기질 로딩 및 1 mM ADP - 글루코스 ( Sigma , > 93 % 순도 ) 의 보조 기질 로딩 을 사용 하 여 서열 번호 792 변이체 를 발현 하 는 맑 아 진 이 . 콜라 이 배양 용 해물 의 96 웰 플레이트 에서 검정 을 수행 하 였 다 . 하 기 반응 조건 을 사용 하 였 다 : 5 - 6 시간 동안 300 RPM 진탕 하 에 써 모 트론 ® 적정 플레이트 진탕기 에서 50 mM KPhos 완충제 , pH 7 , 3 mM MgCl 2 , 40 ℃. 이어서 , 10 μ L 의 반응물 을 0 . 2 % 포름산 을 갖 는 90 μ L 아세 토니 트릴 로 켄 칭 하 고 , 4 ℃ 에서 10 분 동안 원심 분리 하 고 , 상청 액 을 실시 예 9 , 표 9 . 3 에서 설명 한 바 와 같이 RapidFire - MS / MS 에 의해 분석 하 였 다 . ADP - 글루코스 를 사용 하 여 레바 우디 오시드 D 로부터 레바 우디 오시드 A 를 서열 번호 792 보다 더 많 은 양 으로 생성 한 글 리코 실트 랜스 퍼라 제 변이체 폴리펩티드 가 확인 되 었 다 . 조작 된 폴리펩티드 는 표 16 . 1 에 열거 되 어 있 다 . 서열 번호 792 와 비교 하 여 하 기 표 16 . 1 에 나타낸 변이체 의 분석 을 위해 , 실시 예 1 에서 설명 된 바 와 같 은 SFP 생성 을 위해 진탕 플라스크 규모 배 양물 을 성장 시켰 다 .