서열 번호 4875 변이체 를 발현 하 는 맑 아 진 이 . 콜라 이 배양 용 해물 의 96 웰 플레이트 에서 검정 을 수행 하 였 다 . 펠 렛 을 실시 예 60 에 기재 된 바 와 같이 용해 시키 고 , 용해 물 을 맑 게 만든 후 , 인산칼륨 완충제 , pH 6 . 5 내 에서 10 배 희석 하 였 다 . 조합 라이브러리 의 검정 은 4 mM 스테비오 시드 ( > 95 % 순도 ) 또는 레바 우디 오시드 D 기질 , 0 . 2 mM ADP ( Sigma , > 93 % 순도 ) 보조 기질 , 0 . 2 g / L SUS SFP 서열 번호 1456 , 및 24 mM 수크로스 ( 자당 ) 와 함께 100 μ L 반응물 내 의 10 μ L 용해 물 을 사용 하 여 수행 하 였 다 . 하 기 반응 조건 을 사용 하 였 다 : 1 시간 동안 300 RPM 진탕 하 에 써 모 트론 ® 적정 플레이트 진탕기 에서 50 mM 인산칼륨 완충제 , pH 6 . 5 , 50 ℃. 반응물 은 실시 예 60 에 기재 된 바 와 같이 가용화 하 고 , 켄 칭 하 고 , 희석 하 였 다 . 샘플 을 실시 예 1 , 표 1 . 1 에 기재 된 바 와 같이 RapidFire - MS / MS 에 의해 분석 하 였 다 . 포화 돌연변이 유발 라이브러리 에 대해 , 동일 한 검정 을 수행 하 되 , 5 x 희석 된 용해 물 , pH 6 인산칼륨 완충제 , 및 50 ℃ 에서 1 - 2 인 큐 베이 팅 . 선택 된 변이체 를 또한 상기 조건 하 에서 삼중 으로 재 시험 하 였 다 . 인 시 츄 합성 된 ADP - 글루코스 를 사용 하 여 스테비오 시드 / 레바 우디 오시드 D 로부터 레바 우디 오시드 A / 레바 우디 오시드 M 을 서열 번호 4876 보다 더 많 은 양 으로 생성 한 글 리코 실트 랜스 퍼라 제 변이체 폴리펩티드 가 확인 되 었 다 . 조작 된 폴리펩티드 는 표 63 . 1 에 열거 되 어 있 다 . 서열 번호 4876 과 비교 하 여 표 63 . 2 에 제시 된 변이체 의 분석 을 위해 실시 예 1 에서 설명 된 바 와 같이 진탕 플라스크 규모 배 양물 을 성장 시키 고 , 용해 시키 고 , 맑 게 하 고 , 분말 로 동결 건조 시켰 다 .