쥐 로부터 분리 된 비장 에서 MACS ( Magnetic - activated cell sorting ) 를 사용 하 여 제조사 가 제공 하 는 방법 에 따라 CD 4 + CD 25 + T 세포 를 분리 하 였 다 . 그런 다음 , 상기 분리 된 CD 4 + CD 25 + T 세포 를 24 웰 플레이트 의 각 웰 에 5 × 105 세 포수 로 분주 하 고 , 500 ㎕ 의 브 루프 ( Bruff ) 배지 ( Cell : Bead = 1 : 2 , hIL - 2 2000 IU / ml , mTGF - b 5 ng / ml , RA 1 ng / ml ) 를 채워 넣 고 배양 하 였 다 . 배양 3 일 째 , 500 ㎕ 의 배지 를 더 넣 어 주 고 3 일 동안 추가 적 으로 배양 하 였 다 .