25 ℃ 에서 다중 분석 사이클 을 사용 하 여 결합 을 평가 하 였 다 . 각각 의 사이클 은 50 ㎕/ 분 의 유량 으로 수행 되 었 고 , 하 기 의 단계 들 로 이루 어 졌 다 : 250 ㎕ 의 N 3 pGlu 항체 용액 을 주입 하 는 단계 ( 500 nM 로 시작 하 고 , 각각 의 사이클 에 대해 2 배 단계 희석 을 사용 함 ) , 그 후 20 분 동안 해리 시키 는 단계 , 및 약 30 ㎕ 의 10 mM 글리신 히 드 로 클로라이드 ( pH 1 . 5 ) 를 사용 하 여 재생 시키 는 단계 . 각각 의 사이클 에 대한 회합 및 해리 속도 를 비 아이 밸류 에 이 션 분석 소프트웨어 내 의 이종성 리간드 모델 을 사용 하 여 평가 하 였 다 . 1 : 1 결합 모델 이 데이터 에 맞 지 않 았 기 때문 에 , 이종성 피트 ( fit ) 모델 로 2 개 의 결합 친화도 ( 낮 은 친화 도 및 높 은 친화도 ) 가 산출 되 었 다 . R 17 L 및 B 12 L 항체 및 모 뮤 린 ( murine ) 항체 mE 8 c 는 응집 된 N 3 pGlu A β 에 높 은 친화도 KD , 1 < 100 pM 및 더 낮 은 친화도 KD , 2 < 10 nM 로 결합 하 였 다 . 최대 결합 신호 ( Rmax ) 가 낮 은 친화 도 및 높 은 친화 도 결합 으로부터 의 Rmax 의 합 으로서 계산 되 었 다 . 밀도 가 더 높 은 표면 에서 더 많 은 결합 부위 가 이용 가능 할 때 예상 되 는 바 와 같이 , 표면 상 의 펩티드 의 밀도 가 증가 함 에 따라 Rmax 가 증가 하 는 것 으로 보였 다 . 이러 한 결합 연구 는 본 발명 의 항체 가 응집 된 N 3 pGlu A β 에 결합 한다는 것 을 입증 한다 .