한편 , 제한 효소 는 5 '... GAGTC . .. 3 ' 부위 를 절단 하 는 Hinf I 을 사용 하 였 고 , 도 3 에 나타낸 바 와 같이 , 남일 벼 는 제한 효소 에 의해 절단 되 지 않 는 반면 , Namil ( SA ) - flo 2 는 SNP 에 의해 GAGTC 의 서열 을 가지 므로 상기 제한 효소 에 의해 절단 되 도록 설계 하 였 다 . 제한 효소 의 처리 는 1 X enzyme buffer [ 50 mM Potassium Acetate , 20 mM Tris - acetate , 10 mM Magnesium Acetate , 100 μ g / ml BSA ] , 10 ng 의 PCR product , 5 U Hinf I ( NEB , UK ) 을 이용 하 여 , 총 부피 15 ㎕ 로 실시 하 였 다 . PTC - 100 ⓡ thermocycler ( Waltham , USA ) 를 사용 하 여 , 37 ℃ 에서 120 분 간 반응 시켰 다 . 결과물 은 FA ( Flagment analyzer ) 를 이용 하 여 전기영동 한 후 , 이 에 따라 유전자형 을 판정 하 였 다 .