mAb 1 ~ 9016 의 1 가 단일 아암 ( OA ) 버전 의 응고 촉진 활성 은 , Hemker 등 에 의한 원리 ( Pathophysiol Haemost Thromb , 32 : 249 - 253 ( 2002 ) 참조 ) 에 따라 응고 촉진 인지질 막 이 존재 하 는 가운데 트롬빈 생성 을 촉진 하 는 이 의 능력 에 기초 하 여 결정 하 였 다 . 　 224 F 3 항체 ( mAb 1 ~ 1582 ) 의 단일 아암 버전 은 비교 를 위해 포함 시켰 다 . 각각 의 항체 ( 시험 화합물 ) 는 , 96 - 웰 플레이트 형광 측정기 ( Fluoroscan Ascent 플로리다주 , Thermolabsystems , 핀란드 헬싱 키 ) 를 사용 하 여 표준 검교 정 된 자동 화 혈전 영상 촬영 에 의해 A 형 혈우병 ( HA ) 환자 의 풀 링 된 혈소판 - 부족 혈장 ( HA - PPP ) ( George King Bio - Medical Inc , 미국 캔자스주 ) 에서 의 트롬빈 생성 시험 ( TGT ) 에서 시험 하 였 다 . 반응 혼합물 은 , 70 μ l HA - PRP , 10 μ l 시험 화합물 ( 20 mM HEPES , 140 mM NaCl , pH 7 . 4 , 2 % BSA 에서 희석 됨 ) , 활성 화 된 인간 혈장 - 유래 인자 XI ( hFXIa , 8 . 3 mU / mL 최종 ) ( Enzyme Research Laboratories , 미국 인디애나주 ) 또는 트롬빈 캘 리브레 이터 ( Thrombinoscope BV ) 를 함유 하 는 20 μ l PRP 시약 ( 합성 인지질 , Thrombinoscope BV , 네덜란드 마스트리히트 ) , 형광 표지 된 트롬빈 기질 z - Gly - Gly - Arg - AMC ( 3 mM ) 및 CaCl 2 ( 90 mM ) 를 함유 하 는 20 μ l 의 혼합물 ( Thrombinoscope BV ) 을 함유 하 였 다 . TGT 는 시험 화합물 의 5 가지 농도 ( 30 , 100 , 300 , 600 및 900 nM , 최종 혈장 농도 ) 에서 수행 하 거나 첨가 된 완충액 ( 20 mM HEPES , 140 mM NaCl , pH 7 . 4 , 2 % BSA ) ( HA 대 조군 을 나타냄 ) 에서 만 수행 하 였 다 . 동일 한 스톡 유래 의 HA - PP 에서 의 2 번 의 독립 적 인 실험 에서 농도 범위 를 시험 하 였 다 . TGT 를 총 90 분 동안 진행 시켰으며 , TGT 파라미터 피크 트롬빈 높이 ( nM ) 는 Thrombinoscope 소프트웨어 ( Thrombinoscope BV ) 에 의해 분석 하 였 다 . 도 4 / 표 17 은 시험 된 농도 에서 각각 의 1 가 단일 아암 항체 에 대해 측정 된 피크 트롬빈 생성 속도 를 보여 주 고 / 나열 한 것 이 다 . 데이터 는 mAb 1 ~ 9016 의 OA 항체 버전 이 항체 가 없 는 가운데 관찰 된 수준 보다 많이 피크 트롬빈 형성 을 증가 시킨다는 것 , 즉 응고 촉진 활성 을 나타낸다는 것 을 보여준다 . 또한 , mAb 1 ~ 9016 의 OA 항체 버전 에 의해 유도 된 트롬빈 생 성 은 224 F 3 항체 ( mAb 1 ~ 1582 ) 의 1 가 OA 버전 에 대해 관찰 된 것 보다 더 높 다 .