빙상 의 400 μ l 의 시 냅 토 좀 현탁액 ( 5 mg 본래 조직 ) 에 , 물 중 100 μ l 시험 화합물 을 첨가 하 였 다 . 37 ℃ 에서 5 분 동안 예비 인 큐 베이 션 후 , 100 μ l 의 3 H - 5 - HT ( 최종 농도 10 nM ) 를 첨가 하 고 , 샘플 을 10 분 동안 37 ℃ 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 10 μ M 의 미 표지 5 - HT 를 함유 하 는 5 ml 완충액 의 세정 으로 Whatman GF / F 필터 를 통해 진 공하 에 샘플 을 여과 하 여 인 큐 베이 션 을 종료 하 였 다 . 필터 를 카 운 팅 바이알 에 두 고 , 4 ml 의 적합 한 섬광 유체 ( 예 를 들 어 , Picofluor ™ 15 , Packard ) 를 첨가 하 였 다 . 1 시간 동안 교반 및 어둠 속 에서 2 시간 동안 저장 후 , 방사능 활성 의 함량 을 액체 섬광 계수 ( cpm ) 에 의해 측정 하 였 다 . 10 μ M 시험 화합물 의 존재 하 에 측정 된 비 - 특이 적 결합 및 수동 적 수송 을 빼 , 섭취 를 수득 하 였 다 . 측정 된 cpm 을 시험 화합물 농도 에 대해 플롯 팅 하 고 , 최적 피팅 된 s - 형 곡선 을 작성 하 였 다 . 섭취 억제 강 화력 을 IC 5 O 값 ( nM ) ( 로그 평균 ) 으로 표현 하 였 다 . 2 개 의 전체 농도 - 반응 곡선 을 5 개 농도 의 시험 화합물 을 3 중 으로 사용 하 여 측정 할 수 있 다 . IC 5 O 값 은 섭취 가 , 대 조군 샘플 중 의 총 섭취 － 10 μ M 시험 화합물 의 존재 하 의 비 - 특이 적 결합 및 섭취 의 50 % 인 농도 로 측정 된다 .