이어서 , 혈청 - 억제제 - 바이러스 혼합물 을 기존 에 Vero 세포 - 시 딩 된 평저 96 - 웰 판 에 놓아두 고 , 33 ℃ 하 에 2 시간 동안 항온 배양 한 후 , 160 ㎕ 의 배지 를 부가 하 였 다 . 판 을 NI 역가 탐지 를 위한 면역 형광 검정 때 까지 5 % CO 2 및 33 ℃ 하 에 5 내지 6 일 동안 추가 로 항온 배양 하 였 다 . 인산염 완충 식염수 ( PBS ) 중 의 1 % 파라포름알데히드 를 이용 하 여 1 시간 동안 고정 시킨 후 , 판 을 2 % 밀크 / PBS 및 차단 완충액 으로 차단 시켰 다 . 염소 항 - RSV 항체 ( 공급 처 : Biodesign Internation ; 1 : 400 ) 를 세정 없이 각 웰 에 가하 고 , 실온 하 에 2 시간 동안 항온 배양 하 였 다 . 샘플 을 PBS 로 2 회 세척 하 고 , 차단 완충액 중 의 항 - 염소 IgG - FITC ( 공급 처 : Sigma ; 1 : 400 ) 를 웰 에 가하 였 다 . 판 을 실온 하 에 2 시간 동안 다시 항온 배양 하 고 , 판독 에 앞서 상기 와 같이 2 회 세척 하 였 다 . ≥ 1 형광 성 합포체 가 탐지 되 는 경우 에 , 웰 은 양성 으로 간주 되 었 다 . 스 페아 르 만 - 카르 버 ( Spearman - Karber ) ( SK ) 방법 을 이용 하 여 50 % 조직 배양 감염 용량 ( TCID 50 ) 을 계산 하 였 고 , NI 비율 은 다음 과 같이 계산 하 였 다 : [ ( 0 ㎍ 의 Neut 역가 / ml 억제제 - 25 ㎍ 의 Neut 역가 / ml 억제제 ) / 0 ㎍ 의 Neut 역가 / ml 억제제 ] X 100 . 도 3 에 제시 된 예시 결과 는 PreF 가 시험 된 21 명 공 여자 중 의 16 명 에게서 NI 에 있 어 FG 에 비해 탁월 하 다는 것 을 나타낸다 .