본원 에서 사용 되 는 바 와 같이 , " "" 혼성 화 엄격 성 "" 은 핵산 의 혼성 화 시 의 세 척 조건 등 과 같 은 혼성 화 조건 과 관련 된다 . 일반 적 으로 ", 혼성 화 반응 은 보다 낮 은 엄격 성 조건 하 에서 수행 된 후 , " 다양 하 지만 보다 높 은 엄격 성 의 세 척 이 실시 된다 . 용어 "" 중등 도로 엄격 한 혼성 화 "" 는 표적 DNA 에 대해 약 60 % 동일 성 ", 바람직 하 게 는 약 75 % 동일 성 , 약 85 % 동일 성 을 갖 고 , 표적 폴리뉴클레오티드 에 대해 약 90 % 초과 의 동일 성 을 갖 는 , 상보성 핵산 에 표적 DNA 가 결합 할 수 있 게 하 는 조건 을 의미 한다 . 예 시 적 인 중등 도 엄격 성 조건 은 42 ℃ 에서 50 % 포름 아미드 , 5 x 덴 하르트 용액 , 5 x SSPE , 0 . 2 % SDS 에서 의 혼성 화 , 이어서 42 ℃ 에서 02 x SSPE , " 0 . 2 % SDS 중 에서 의 세 척 이 실시 되 는 것 과 동등 한 조건 이 다 . "" 고 엄격 성 혼성 화 "" 는 일반 적 으로 정의 된 폴리뉴클레오티드 서열 에 대해 용액 조건 하 에서 결정 된 열 용융 온도 ( Tm ) 로부터 약 10 ℃ 이하 인 조건 을 의미 한다 . 일부 실시 양태 에서 ", 고 엄격 성 조건 은 65 ℃ 에 0 . 018 M NaCl 에서 안정 한 혼성체 를 형성 하 는 핵산 서열 의 혼 성 화만 을 허용 하 는 조건 을 의미 한다 ( 즉 , 혼성체 가 65 ℃ 에 0 . 018 M NaCl 에서 안정 하 지 않 으면 , 본원 에서 고려 되 는 고 엄격 성 조건 하 에서 안정 하 지 않 을 것 이 다 ) . 고 엄격 성 조건 은 예 를 들 면 42 ℃ 에 50 % 포름 아미드 , 5 x 덴 하르트 용액 , 5 x SSPE , 0 . 2 % SDS 와 동등 한 조건 에서 의 혼성 화 , 이어서 , 65 ℃ 에서 0 . 1 x SSPE , 및 0 . 1 % SDS 중 에서 의 세 척 이 실시 되 는 것 에 의해 제공 될 수 있 다 . 또 다른 고 엄격 성 조건 은 65 ℃ 에서 0 . 1 %( w : v ) SDS 를 포함 하 는 5 X SSC 에서 의 혼성 화 및 65 ℃ 에서 0 . 1 % SDS 를 포함 하 는 0 . 1 x SSC 로 세척 하 는 것 과 동등 한 조건 에서 의 혼성 화 이 다 . 중등 도 엄격 성 조건 을 비롯 한 다른 고 엄격 성 혼성 화 는 상기 인용 된 참조 문헌 에 기술 되 어 있 다 .