사람 의 T 림프구 세포 주인 Jurkat 을 1 × 107 / mL 이 되 도록 PBS 로 희석 한 후 살 아 있 는 세포 에 만 선택 적 으로 염색 되 는 형광 염료 인 calcein - AM ( Fluka 17783 ) 을 최종 농도 5 mM 이 되 도록 첨가 한 후 30 분 간 배양 하 였 다 . 세포 에 염색 되 고 남 은 과잉 의 염료 를 PBS 로 씻 어 내 는 과정 을 3 회 반복 하 고 3 × 106 / mL 이 되 도록 RPMI - 1640 ( BioWhittaker 社 ) 배양액 으로 준비 하 였 다 . HaCaT 세포주 표면 에 의 ICAM - 1 분자 의 유도 발현 과정 이 완료 된 후 , 배양액 을 제거 하 고 깨끗이 세척 한 후 calcein - AM 으로 형광 염색 된 Jurkat 세포주 를 각 웰 마다 3 × 105 씩 넣 고 1 시간 동안 추가 로 배양 하 였 다 . HaCaT 세포주 와 유착 하 지 않 은 과잉 의 Jurkat 세포 들 을 PBS 로 깨끗이 제거 하 는 과정 을 4 회 반복 하 였 고 형광 판독기 ( Fluorescent microplate reader ) 를 사용 하 여 480 / 530 nm 파장 에서 형광 정도 를 측정 하 였 다 . HaCaT 세포주 와 Jurkat 세포주 간 의 유착 의 정도 는 ICAM - 1 분자 의 발현 정도 를 의미 하 며 그 값 은 측정 된 형광 의 세기 에 비례 하 며 , 발현 억제 율 은 하 기 수학식 1 로 계산 하 여 그 결과 를 하 기 표 1 에 나타내 었 다 .