단계 ⒝ 에서 , PNA 프로브 와 표적 핵산 의 혼성 화 반응 이 잘 일어날 수 있 도록 적당 한 성분 을 포함 하 는 혼성 화 완충액 을 사용 하 는 것 이 바람직 하 다 . 이때 프라이머 말단 에 표지 되 어 있 는 바이오틴 과 결합 하 여 발색 하 는 스 트 렙 타비 딘 - 시아닌 5 ( Streptavidin - cyanine 5 ) 를 첨가 하 여 혼성 화 하 는 것 이 바람직 하 다 . 혼 성 화 반응 후 에 는 , 반응 되 지 않 은 잔여 표적 핵산 과 비 특이 적 반응물 을 효과 적 으로 제거 할 수 있 는 세척 완충액 을 사용 하 는 것 이 바람직 하 다 .