Ficoll - Hypaque 밀도 구배 ( density 1 . 077 , Biochrom , VWR ) 또는 Lymphoprep 밀도 구배 ( Stem Cell Technologies , cat . : 07861 ) 원심 분리 에 의해 건강 한 성인 공 여자 ( Blutbank Mannheim , " Germany ) 의 연막 ( buffy coat ) 으로부터 PBMC 를 단리 했 다 . "" Human NK cell Isolation Kit "" ( Miltenyi Biotec ) 또는 LS 분리 컬럼 ( Miltenyi Biotec ) 을 이용 한 "" MojoSortTM Human NK cell Isolation Kit "" ( Biolegend ) 를 이용 한 네 가티 브 선택 에 의해 PBMC 로부터 NK 세포 를 정제 했 다 . PBMC 로부터 NK 세포 를 고갈 시키 기 위해 ( PBMC △ NK ) "," 포지티브 선택 을 위해 CD 56 MicroBeads 를 사용 했 다 ( Miltenyi Biotec ) . 새로 단리 된 NK 세포 ( 이하 에서 "" 미접 촉 ( naive ) "" 으로 지칭 됨 ) 를 10 % 인간 혈청 ( Invitrogen ) 을 포함 하 는 SCGM 배지 ( CellGenix ) 중 에 ; PBMC 및 PBMC △ NK 를 완전 한 RPMI 배지 중 에 밤새 유지 시켰 다 . "