p - ERK 1 / 2 크 립 테이트 항체 및 p - ERK 1 / 2 d 2 항체 ( pERK 측정 키트 에 부속 ) 를 각각 검출 버퍼 ( detection buffer ) ( pERK 측정 키트 에 부속 ) 로 20 배 희석 하 여 , 이 들 2 종 의 항체 의 혼합 용액 을 제작 했 다 . 항체 의 혼합 용액 을 384 웰 플레이트 에 4 μ L / 웰 의 액량 으로 첨가 했 다 . 또한 , 0 . 5 μ g / μ L 로 희석 한 종양 용해 물 을 16 μ L / 웰 의 액량 으로 첨가 했 다 . 약 17 시간 , 웨트 박스 내 에서 실온 에서 정치 한 후 , EnVision 2103 멀티 라벨 리더 ( PerkinElmer 사 ) 를 이용 하 여 , 여기 파장 337 nm 의 조건 으로 620 nm 및 665 nm 에 있 어서 의 형광 강도 를 측정 했 다 . 참조 파장 620 nm 에 의한 형광 강도 로 값 을 표준 화 한 후 , 비 히 클 투 여군 의 카운트 를 0 % 저해 , 용해 물 첨가 없 음 의 카운트 를 100 % 저해 로 하 여 , 피 험 화합물 투여 샘플 의 저해 치를 % 저해 율 로 산출 했 다 . 몇 개 의 식 ( I ) 의 피 험 화합물 의 결과 를 표 4 에 나타낸다 .