세포 를 96 - 웰 플레이트 에 2 , 000 개 세포 / 웰 로 시 딩 하 고 , 24 시간 후 에 이 들 을 0 . 83 ％ DMSO 중 상이 한 농도 의 화합물 에 노출 시켰 다 . 세포 를 2 시간 또는 24 시간 동안 더 성장 시키 고 , 포름알데히드 ( 2 ％ 최종 ) 로 고정 하 고 , 메탄올 로 투과 시켰 다 . TBST - 3 ％ BSA 로 차단 한 후 에 , 고정 된 세포 를 4 ℃ 에서 밤새 1 차 항체 ( 토끼 로부터 의 항 - 포스 포 ERK ) 와 인 큐 베이 션 하 였 다 . 세포 를 프로 피 듐 요오 다 이드 ( DNA 형광 염료 ) 와 인 큐 베이 션 하 고 , 형광 알렉사 플루오르 ( Alexa Fluor ) 488 염료 ( 몰레 큘라 프로브 스 ; Molecular probes ) 에 접합 된 항 - 토끼 2 차 항체 를 사용 하 여 세포 p - ERK 의 검출 을 수행 하 였 다 . 아 쿠멘 익스플로러 ( Acumen Explorer ) ( TTP 랩 테크 ( Labtech ) ) , 레이저 - 스캐닝 마이크 로 플레이트 세포 측정기 를 이용 하 여 형광 을 분석 하 고 , 알렉사 플루오르 488 신호 를 PI 신호 ( 세포 개수 에 비례 함 ) 로 표준 화 시켰 다 .