이어서 , 시토신 및 아데닌 표적 화 된 디 아미 나 아제 모두 의 조합 을 식물 세포 에서 시험 하 였 다 . 구 조체 KG 10098 및 KG 10436 을 혼합 하 고 , LIN 5 sgRNA 1 sgRNA 발현 플라스미드 와 함께 토마토 원형질체 에 트랜스펙션 시켰 다 . rAPOBEC 1 - Cas 9 D 10 A - UGI - NLS ( KG 10098 ) 및 TadA - Cas 9 D 10 A - NLS ( KG 10436 ) 시토신 및 아데닌 디 아미나 아 제 는 각각 LIN 5 sgRNA 1 표적 부위 에서 모두 활성 화 되 어 표적 화 를 위해 동일 한 sgRNA 를 이용 한다 . 함께 트랜스펙션 되 는 경우 에 , 디 아미나 아 제 는 단일 세포 내 의 표적 서열 에서 C 에서 T 로 의 그리고 A 에서 G 로 의 변환 을 생성 할 수 있 다 . 이것 은 시퀀싱 의 존재 에 의해 검출 될 수 있 고 , 디 아미 나 아제 가 뉴클레오티드 변화 의 신규 한 조합 을 도입 하 기 위해 함께 사용 될 수 있 음 을 입증 할 수 있 다 . 이 실험 의 결과 는 도 3 에 도시 된다 . 이 샘플 에서 , 판독 의 0 . 35 % 는 위치 6 에서 시토신 디 아미나 아제 ( KG 10098 ) 에 의해 생성 된 C 에서 T 로 의 변화 를 포함 하 고 , 판독 의 0 . 15 % 는 아데닌 디 아미나 아제 ( KG 10436 ) 에 의해 생성 된 위치 5 에서 의 A 에서 G 로 의 변화 를 포함 하 였 다 . 흥미 롭 게 도 , 6 번 위치 에서 C 에서 T 로 의 변화 와 8 번 위치 에서 A 에서 G 로 의 변화 둘 모두 에서 판독 이 발견 되 었 으며 , 이 는 동일 한 위치 에서 두 디 아미 나 아제 의 활성 을 통해서 만 생성 될 수 있 었 다 . 따라서 , 이 접근 법 은 시토신 및 아데닌 디 아미 나 아제 가 동일 한 식물 세포 ( 들 ) 에서 발현 될 수 있 고 , 상이 한 뉴클레오티드 변화 를 생성 할 수 있 는 동일 한 위치 를 표적 으로 한다는 것 을 보여준다 . 따라서 , 이 는 달성 될 수 있 는 아미노산 변화 의 범위 를 증가 시킨다 .