BIAcore 2000 기기 ( Biacore AB , Uppsala , Sweden ) 를 이용 하 여 ( 1 ) 라이브러리 로부터 파 아지 를 선별 하 고 , ( 2 ) 높 은 결합 친화력 을 스크리닝 하 고 , ( 3 ) scFvs 의 동적 특성 을 분석 하 였 다 . 10 mM 소듐 아세테이트 ( pH 5 . 0 ) 에 용해 된 50 ㎍/ mL 의 uPA 을 주입 함 으로써 uPA 를 1 - 에틸 - 3 -[ 3 - 디메틸아미노 프로필 ] 카르 보디 이미드 하이드로 클로라이드 / N - 하이드 록 시숙 신 이미드 - 활성 화 CM 5 센서 칩 에 고정 시켜 파 아지 선별 및 스크리닝 용 5500 공 명 유 니트 ( RU ) 를 준비 하 였 고 , 또한 동적 분석 용 1000 RU 를 준비 하 였 다 . 파 아지 선별 을 위하 여 , 100 ㎕ 의 파 아지 라이브러리 ( 1 × 1012 콜로니 - 형성 단위 [ cfu ] / mL ) 를 1 ㎕/ min 의 속도 로 주입 한 후 , 센서 칩 을 HBS - EP 완충액 ( 0 . 01 M HEPES [ pH 7 . 4 ] , 0 . 15 M NaCl , 3 mM EDTA , 0 . 005 % 계면 활성제 P 20 ; Biacore AB ) 을 6 시간 동안 연속 적 으로 흘러 주 면서 세정 하 였 고 , uPA 에 결합 된 파 아지 항체 를 재생 완충액 으로 용출 시키 고 , ER 2537 에서 증폭 시켰 다 . 2 차 BIAcore panning 후 , 회수 된 파 아지 항체 를 96 딥 웰 박테리아 배양 플레이트 를 이용 하 여 각 클론 을 분리 하 여 증폭 시켰 다 . 증폭 된 파 아지 항체 를 uPA 고정 된 CM 5 칩 과 반응 시켜 스크리닝 하 였 다 . 대 조군 과 비교 하 여 도 1 과 같이 3 개 의 클론 A 2 , E 4 및 A 8 을 선별 하 였 다 .