이 기술 은 IL - 2 를 코딩 하 는 메신저 RNA 들 ( mRNAs ) 의 분석 에 기초 하 고 있 다 . 먼저 , 상기 세포 들 로부터 전체 RNA 를 추출 하 였 다 . 상기 RNA 를 역전사 효소 ( reverse transcriptase ) 라 불리우 는 효소 를 사용 하 여 보족 DNA ( cDNA ) 로 전환 시켰 다 . 정량 의 중합효소 연쇄 반응 ( PCR ; Polymerase Chain Reaction ) 기술 에 의한 특이 의 프라이머 들 의 수단 들 에 의해 IL - 2 에 대응 하 는 유전자 시퀀스 를 검출 하 였 다 . 시료 들 을 서로 에 대해 비교 하 기 위하 여 , 상기 분석 을 표준 화 할 필요 가 있 다 . 이 는 상존 하 거나 또는 구조 성 의 유전자 를 코딩 하 는 mRNAs 들 의 동시 적 인 분석 에 의해 실행 되 었 으며 , 그 의 발현 수준 은 배양 및 자극 조건 들 에 불구 하 고 상기 세포 들 전부 에서 동일 하 다 . 이 들 시험 들 에서 선택 된 상기 상존 하 는 유전자 는 비 - 액틴 ( b - actine ) 이 며 , 이 는 상기 세포 들 의 세포골격 ( cytoskeleton ) 의 구성 요소 들 의 하나 이 다 . 상기 세포 가 보다 더 활성 화 될수록 , IL - 2 cDNA / 비 - 액틴 cDNA 비율 은 더 높 아 질 것 이 다 . 상기 IL - 2 를 코딩 하 는 상기 mRNAs 은 일시 적 인 것 이 다 . 따라서 , 실험 적 인 조건 하 에서 의 자극 후 의 유전자 발현 이 최대 가 되 는 것 에 대하 여 시간 이 결정 되 었 다 ( 4 내지 6 시간 ) .