96 웰 판 ELISA PLATE 에 , 0 . 5 μ g / ml 의 인간 PD - L 1 을 피복 하 여 , 섭씨 37 도 에서 60 분 동안 항온 배양 한다 . 그 다음 웰 안 의 용액 을 제거 하 고 , 세 척 완충액 으로 3 회 세척 하 여 , 2 % BSA 을 함유 하 는 PBS 용액 으로 60 분 동안 밀폐 한다 . 세 척 완충액 으로 3 회 세척 한 후 구배 희석 된 항체 를 넣 어 , 섭씨 37 도 에서 60 분 동안 배양 한 뒤 세척 완충액 으로 3 회 세척 한 후 , 1 : 10000 배 희석 된 바이오틴 - 항 IgG 4 항체 를 넣 어 , 섭씨 37 도 에서 1 시간 동안 배양 하 고 , 세 척 완충액 으로 3 회 세척 한 후 , 세 척 완충액 으로 1 : 10000 배 로 희석 된 HPR - 스 트 렙 트 아 비딘 을 넣 어 , 실온 에서 1 시간 동안 배양 하 고 , 세 척 완충액 으로 3 회 세척 한 후 , 100 μ l TMB 기저 용액 을 넣 어 현색 하 여 , 실온 에서 30 분 동안 반응 한 후 , 100 μ l 2 M 의 염산 용액 으로 반응 을 종료 하 여 450 nm 에서 흡광도 를 읽 어 낸다 .