A 14 - ME 및 B 15 - ME 트랜스포존 을 각각 3 ' 바이오틴 을 함유 하 는 ME ' 에 어니 링 하 였 다 . 3 ' 바이오틴 을 ME ' 에 커플링 시켜 3 '-( I ( a ) ) 및 3 '-( I ( c ) ) 링커 를 형성 하 였 다 . 어닐링 반응 은 NaCl 완충액 을 사용 하 여 25 ㎕ 부피 로 진행 하 였 다 . 생성 된 이중 가닥 트랜스포존 각각 을 밤새 반응 으로 37 ℃ 에서 트랜스 포사 제 와 복합체 화 시켰 다 . 트랜스 포 좀 복합체 를 형성 한 후 , A 14 및 B 15 트랜스 포 좀 복합체 를 함께 동일 부피 로 혼합 하 고 , 300 nM 의 농도 로 스 트 렙 타비 딘 비드 상 에 적재 하 여 300 nM 의 밀도 로 결합 된 복합체 를 생성 하 였 다 . 비드 에 부착 한 후 , ( I ( a ) ) 및 ( I ( c ) ) 300 nM 밀도 혼합물 을 120 nM 의 농도 로 추가 로 희석 시켰 다 . 따라서 , 비드 는 여전히 300 nM 밀도 를 갖 지만 , 복합체 는 희석 된 용액 중 에 120 nM 의 농도 로 존재 한다 . 희석 단계 는 비드 상 의 복합체 의 밀도 를 변경 하 지 않 기 때문 에 , 삽 입물 크기 가 아닌 라이브러리 수율 에 영향 을 미친다 .