변이 를 포함 하 는 핵산 서열 을 증폭 하 기 위한 본 발명 의 방법 은 소망 하 는 어떠 한 변이 도 검출 할 수 있 도록 한다 . 이러 한 핵산 분자 는 DNA 또는 RNA 이 다 . 상기 핵산 분자 는 이 중쇄 또는 단일 쇄 일 수 있 고 , 바람직 하 게 는 이 중쇄 이 다 . 출발 물질 로서 핵산 이 이 중쇄 인 경우 , 두 쇄 를 단일 쇄 로 , 또는 부분 적 인 단일 쇄 형태 로 만드 는 것 이 바람직 하 다 . 쇄 를 분리 하 는 방법 은 , 열 , 알 카리 , 포름 아미드 , 우레 아 및 글리 콕 살 처리 , 효소 적 방법 ( 예 , 헬리 카아 제 작용 ) 및 결합 단백질 을 포함 하나 , 이 에 한정 되 는 것 은 아니 다 . 예 를 들 어 , 쇄 분리 는 80 - 105 ℃ 의 온도 로 열 처리 하 여 달성 될 수 있 다 . 상술 한 처리 의 일반 적 인 방법 은 Joseph Sambrook , 등 , Molecular Cloning , A Laboratory Manual , Cold Spring Harbor Laboratory Press , Cold Spring Harbor , N . Y . ( 2001 ) 에 개시 되 어 있 다 .