각 형질전환 체 콜로니 를 50 % 인공 해수 가 포함 된 F / 2 배지 200 μ L 에 접종 하 여 5 일 간 배양 한 후 , 원심 분리 ( 3500 rpm , 15 분 , 20 ℃) 후 상등 액 을 제거 하 였 다 . 10 μ L 용해 버퍼 ( 2 % Nonidet P - 40 ) 를 첨가 한 후 10 분 후 상기 용액 을 PCR 에 사용 하 였 다 . 이 후 , pPha - Up - NdeI - F 및 pPha - Down - MCS - R 프라이머 및 taq 중합효소 ( polymerase ) 를 사용 하 여 PCR 을 진행 하 였 다 .