피 로 글루 타밀 잔기 대신 에 N - 말단 글루 타미 닐 을 포함 하 는 인간 재조합 MCP - 1 ( Peprotech ) 를 10 ㎍/ ml 의 농도 로 25 mM Tris / HCl ( pH 7 . 6 ) 에 용해 시켰 다 . 인간 류머티스 윤활 섬유 아 세포 로부터 의 MMP - 1 효소 전구체 ( Calbiochem ) 를 0 . 1 N NaOH 에 용해 된 25 mM p - 아미노 페닐 머 큐 릭 아세테이트 ( APMA ) 를 사용 하 여 APMA : 효소 - 혼합물 10 : 1 의 비율 로 37 ℃ 에서 3 시간 동안 활성 화 하 였 다 . MCP - 1 은 30 ℃ 에서 3 시간 동안 재조합 인간 QC ( 0 . 0006 mg / ml ) 와 함께 예비 배양 한 다음 30 ℃ 에서 MMP - 1 과 배양 하 거나 사전 의 QC 적용 없이 MMP - 1 과 배양 하 였 다 . Maldi - TOF 질량 분석법 을 사용 하 여 0 분 , 15 분 , 30 분 , 1 시간 , 2 시간 , 4 시간 및 24 시간 후 에 생성 된 MMP - 1 분 해 산물 을 분석 하 였 다 .