단백질 샘플 들 은 10 % 또는 8 % SDS - PAGE 겔 ( gel ) 에서 전기영동 하 여 PVDF membrane 으로 전이 시켰 다 ( transfer ) . 5 % 의 무 지방 건조 밀크 ( skim milk ) 가 포함 된 Tris 완충 용액 에서 전이 된 단백질 의 비 특이 적 인 결합 을 차단 하 고 , 특이 적 분석 을 위해 CUEDC 2 , Runx 2 , Osx , Actin 항체 ( antibody ) 와 각각 의 이 차 항체 ( secondary antibody ) 로 반응 시켰 다 .