마지막 으로 , 박테리아 세포 용해 물 에 의해 고리 형 보론 산 에스터 유도체 의 세프 타지 딤 과 비아 페넴 분해 를 억제 하 는 능력 을 결정 하 였 다 . 완충 용액 A 100 μ l ( 50 mM 인산염 나트륨 pH = 7 ; 0 . 5 % 글루코스 , 1 mM MgCl 2 ) 을 96 - 웰 UV - 투과 플레이트 의 각 웰 에 분주 하 였 다 . 완충 용액 A 내 에 있 는 고리 형 보론 산 에스터 유도체 용액 50 μ l 를 수직 으로 적정 하 여 6 번 96 - 웰 플레이트 열 에 분주 하 여 3 - 배 희석 액 을 만들 었 다 . 완충 용액 A ( 최적 의 희석 액 은 상기 실험 에 의해 결정 된다 ) 에 있 는 희석 된 세포 용해 물 50 μ l 을 분주 하 였 고 , 플레이트 를 37 ℃ 에서 플레이트 리더 에 두 었 고 15 분 간 배양 하 였 다 . 완충 용액 A ( 37 ℃ 에서 15 분 간 전 - 배양 시킴 ) 에 있 는 세프 타지 딤 또는 비아 페넴 용액 50 μ g / mL 중 50 μ l 씩 각 웰 에 분주 하 였 다 . 세프 타지 딤 과 비아 페넴의 가수 분해 를 250 nm 와 296 nm 에서 각각 측정 하 였 다 . 억제 EC 50 은 고리 형 보론 산 에스터 유도체 농도 에 대한 세프 타지 딤 또는 비아 페넴 분해 율 을 측정 하 여 결정 되 었 다 .