실험 용 쥐 를 흡입 마취제 ( isoflurane ) 로 마취 시킨 후 비장 을 적출 하 여 40 μ m 세포 여과기 ( Corning , NY , USA ) 에 통과 시켰 다 . 적혈구 가 용해 된 후 에 비장 세포 를 인산 완충 생리식염수 ( PBS ) 로 씻 어 내 고 RPMI - 1640 ( WelGENE INC . , 대구 , 한국 ) 에서 재 부유 시켰 다 . 배양액 에 는 10 % FBS , 50 IU / ml 페니실린 , 50 μ g / ml 스트렙토마이신 ( Hyclone , Logan , UT , USA ) 이 첨가 되 었 다 . 비장 세포 에 는 plate - bound CD 3 ( 5 μ g / ml ) 와 soluble CD 28 ( 2 μ g / ml ) 단일 클론 항체 ( BD Biosciences , San Jose , CA , USA ) 와 함께 0 . 4 μ g / ml 의 bvPLA 2 ( Sigma - Aldrich , ST . Louis , MO , USA ) 를 처리 하 였 다 . 100 nM 라파 마이신 ( rapamycin ) 만 단독 으로 처리 한 세포 군 이 실험 대 조군 으로 준비 되 었 다 . 비장 세포 들 을 37 ℃ 에서 72 시간 동안 배양 시켰 다 .