장치 : PEEK 상부 판 ; 0 . 2 μ m 필터 로 가스 전달 용 배관 에 연결 된 하나 의 다공성 유리 프릿 을 갖 는 스파 지 튜브 ; 수정 전달 을 위한 격막 포트 ; 무균 시료 화 어셈블리 로 바닥 까지 딥 튜브 ; 가스 배출구 상 에 0 . 2 μ m 필터 를 갖 는 오버플로 용기 로 의 배관 을 통해 연결 된 콘덴서 ; 멸균 주사기 에 맞춘 루어 를 갖 는 베이스 전달 용 포트 및 베이스 전달 용 배관 ; 접지 탐침 ; 거품 방지 제 전달 용 포트 ; pH / 온도 탐침 ; 산화 / 환원 탐침 ( ORP ) 을 갖 는 맞춤 제작 된 500 mL 유리 발효기 를 사용 하 여 회분 식 으로 배양 되 었 다 . 시판 되 는 제어기 ( Electrolab , Fermac 360 , 영국 ) 을 사용 하 여 온도 는 37 oC 로 및 pH 는 6 . 5 로 조절 되 었 다 . 목표 온도 는 반응기 바닥 상 의 가열 패드 및 냉각수 용 일체 형 유리 자켓 에 의해 유지 되 었 다 . pH 를 6 N NH 4 OH 를 사용 하 여 6 . 5 로 유지 하 였 다 . 반응기 를 교반 플레이트 ( VWR 12365 - 344 ) 상 에 놓 고 자기 교반 막대 ( 십자형 , VWR ' spinplus '# 58947 - 828 ) 를 혼합 에 사용 하 였 다 . 상기 교반 플레이트 는 300 내지 400 RPM 으로 설정 되 었 다 . 생물 반응기 로 의 가스 유속 은 1 VVM 이 었 다 . 가스 공급 은 압축 된 H 2 , 압축 된 CO 2 및 수용 공기 로부터 이루어지 며 , 각각 20 psi 로 조절 되 었 다 . H 2 및 CO 2 는 가스 의 상대 분 율 을 설정 하 는 유동 분배 기 ( Matheson G 2 - 4 D 151 - E 401 / E 401 , 20 psi ) 로 전달 되 었 다 . 공기 는 가변 면적 유량계 ( Key Instruments 1 G 03 _ R 5 ) 로 전달 되 었 다 . 유량 조절기 로부터 의 H 2 / CO 2 가스 믹스 를 공기 중 에 티 잉 한 다음 가변 면적 유량계 를 통해 발효기 로 전달 하 였 다 . 압력 게이지 는 발효기 로 의 가스 전달 압력 을 모니터링 하 는 데 사용 되 었 다 . 유입 가스 는 0 . 2 μ m 필터 ( Pall , p / n 4251 ) 를 통과 한 다음 하나 의 다공성 파이렉스 프릿 ( 40 내지 60 μ m , 시그마 - 알드리치 CLS 3953312 - C ) 을 통해 발효 배양액 내 로 분산 되 었 고 , 콘덴서 ( 재킷 화 및 냉각 됨 ) 를 통해 반응기 로부터 2 L 거품 - 오버플로 병 으로 배출 된 다음 또 다른 0 . 2 μ m 필터 ( Pall , p / n 4251 ) 를 통하 고 , 최종 적 으로 배기 시스템 으로 배출 되 었 다 . CO 2 유동 은 최소 값 c . l . = 5 ( c . l . = 유동 중심선 ) 으로 설정 되 었 고 , 다른 가스 들 은 목표 로 한 가스 조성 을 달성 하 도록 설정 되 고 , 유량계 표 에 따라 계산 하 고 , GC 에 의해 조성 을 측정 하 고 , 조정 및 재 측정 하 였 다 . 사용 된 c . l . H 2 = 25 , c . l . 공기 = 45 는 CO 2 / O 2 / H 2 의 비율 각각 11 / 6 . 3 / 59 를 갖 는 가스 믹스 를 제공 한다 . 유입 및 유출 라인 에서 O 2 의 계속 적 인 모니터링 은 폭시 탐침 을 사용 하 여 시행 되 었 다 . 때로 가스 시료 를 GC 분석 ( 1 L 호일 백 에서 , skcinc . com p / n 262 - 01 ) 을 위해 수집 하 였 다 .