정확 한 크기 의 단편 을 포함 하 는 두 개 의 분리 주 , NotI 및 EcoRI 을 대장균 BL 21 및 대장균 BL 21 ( DE 3 ) pLys 5 세포주 에 형질 감염 시켰 다 . 구체 적 으로 , 분리 된 세포 의 1 ng / ㎕ 희석 액 을 얼음 상 에서 5 분 간 인 큐 베이 션 시키 고 , 42 ℃ 에서 30 초간 및 뒤 이 어 얼음 상 에서 2 분 간 인 큐 베이 션 하 여 BL 21 및 BL 21 ( DE 3 ) pLys 5 세포주 로 의 형질 감염 을 위해 준비 하 였 다 . 그 후 , 80 ㎕ 의 SOC ( RT ) 를 첨가 하 고 반응 혼합물 을 37 ℃ 에서 60 분 간 인 큐 베이 션 시켰 다 . 그 후 , 100 ㎕ 의 반응 혼합물 을 50 ㎍/ ml 의 카르 베 니 실린 또는 암피실린 을 포함 하 는 LB 아가 플레이트 상 에 도말 하 고 37 ℃ 에서 밤새 인 큐 베이 션 시켰 다 .