또한 , 본 발명 은 부위 - 특이 적 유전자 삽입 을 위한 Flp 재조합 표적 부위 를 함유 하 는 SB - 표지 된 게놈 을 포함 하 는 돼지 세포 의 제조 방법 에 관한 것 이 다 . 상기 방법 은 a ) 포유 류 세포 를 제공 하 는 단계 , b ) a ) 의 세포 를 유전자 전위 효소 를 발현 하 는 플라스미드 및 DNA 트랜스포존 구조 체 및 ( i ) FRT 재조합 부위 및 ii ) IRES - 유래 된 선택 유전자 를 포함 하 는 바 이시스 트로닉 유전자 카세트 를 포함 하 는 재조합 표적 벡터 로 트랜스펙션 하 는 단계 , c ) SB - 표지 된 세포 를 선택 하 는 단계 를 포함 한다 . 본원 에 설명 된 대로 , 포유 류 세포 는 어떤 세포 일 수 있 다 . 돼지 세포 를 계속 해서 사용 하 여 본원 에 설명 된 수작업 프로토콜 에 따라서 핵 이식 에 의해 유전 적 으로 변형 된 돼지 를 제조 하 는 한 구체 예 에서 , 바람직 한 구체 예 에서 , 돼지 세포 는 섬 유아 세포 이 고 , 돼지 일 차 섬유 아 세포 가 가장 바람직 하 다 . 원 하 는 트랜스 젠 이 세포 의 게놈 에 존재 하 는 통합 을 위해 적어도 한 부위 에 직접 통합 될 수 있 다는 것 이 인정 된다 . 그러나 , 다른 구체 예 에서 , 게놈 이 통합 을 위한 적어도 하나 의 부위 를 지닌 세포 는 , 예 를 들 어 공여 세포 또는 그것 의 핵 을 난 모세포 로 미량 주사 하 는 것 에 의해 , 또는 예 를 들 어 체 핵 이식 에 의해 유전 적 으로 변형 된 돼지 를 제조 하 기 위한 공여 세포 로서 사용 된다 . 바람직 한 구체 예 에서 , 공여 세포 또는 그것 의 핵 은 본원 에 설명 된 과정 을 사용 하 여 체 핵 이식 에 의해 유전 적 으로 변형 된 돼지 를 제조 하 는 데 사용 된다 .