프라이머 MCM 50 5 '- G A T C A T G C A T T C G C C C T T A G G A G G T A A A A A A A C A T GTGTGCGACCTCTTCTCAATTTACT ( SEQ ID NO : 31 ) 및 MCM 53 5 '- C G G T C G A C G G A T C CCTGCAGTTAGACATACATCAGCTG ( SEQ ID NO : 32 ) 를 사용 하 여 실시 예 1 에서 기재 된 pTrcKudzu 로부터 쿠 주 이소프렌 신 타아 제 유전자 를 PCR 로 증폭 하 였 다 . 생성 된 PCR 절편 을 pCR 2 . 1 에 클로닝 하 고 , 대장균 TOP 10 에 형질 전환 시켰 다 . 상기 절편 은 쿠 주 이소프렌 신 타아 제 에 대한 코딩 서열 및 대장균 에서 의 RBS 를 함유 하 는 상류 부위 를 포함 한다 . 형질전환 체 를 카르 베니 실린 ( 50 ㎍/㎖) 함유 LA 상 에서 선별 하 면서 37 ℃ 에서 하룻밤 동안 인 큐 베이 션 하 였 다 . 절편 의 올바른 삽 입물 을 서열 분석 으로 확인 하 고 , 상기 균주 를 MCM 93 으로 지정 하 였 다 .