이 들 연구 에 사용 된 Huh - 7 세포주 는 랄프 바르 텐 쉴 라허 ( Ralf Bartenschlager ) 박사 ( 하이델베르크 대학 ( University of Heidelberg ) , 독일 하이델베르크 ) 로부터 입수 하 였으며 , 10 % FBS , 10 U / mL 페니실린 및 10 ㎍/ mL 스트렙토마이신 을 함유 하 는 DMEM 에서 증식 시켰 다 . 이 들 연구 에 사용 되 는 HCV 레 플리 콘 은 WO 2004014852 에 기재 된 절차 를 이용 하 여 브리스톨 - 마이어스 스퀴브 에서 생성 하 였 다 . 공개 된 유전자형 1 b HCV 레 플리 콘 의 코딩 서열 ( Lohmann , V . , F . Korner , J . - O . Koch , U . Herian , L . Theilmann , and R . Bartenschlager 1999 , Science 285 : 110 - 113 ) 은 EMBL 등록 번호 AJ 242652 , 뉴클레오티드 1801 - 7758 에 기재 된 서열 을 이용 하 여 오페론 테크놀로지 스 , 인 코포 레이티 드 ( Operon Tehnologies , Inc . , 미국 캘리포니아주 알라 메다 ) 에서 합성 하 였 다 . 이어서 , 기능 적 레 플리 콘 을 표준 분자 생물학 기술 을 이용 하 여 플라스미드 pGem 9 zf ( +)( 프로 메가 ( Promega ) , 미국 위스콘신주 매디슨 ) 에서 조립 하 였 다 . 루시퍼 라 제 리포터 를 코딩 하 는 레 플리 콘 을 생성 하 기 위하 여 , 인간 화 레 닐 라 ( Renilla ) 루시퍼 라 제 단백질 을 코딩 하 는 유전자 를 네오마이신 포스 포 트랜스퍼 라 제 유전자 의 상류 에 도입 시켰 다 . 생성 되 는 레 플리 콘 은 ( i ) 캡시드 단백질 의 처음 12 개 의 아미노산 에 융합 된 HCV 5 ' UTR , ( ii ) 레 닐 라 루시퍼 라 제 유전자 , ( iii ) 네오마이신 포스 포 트랜스퍼 라 제 유전자 ( neo ) , ( iv ) 뇌심근염 바이러스 ( EMCV ) 로부터 의 IRES , 및 ( v ) HCV NS 3 내지 NS 5 B 유전자 와 HCV 3 ' UTR 로 이루어져 있 다 .