공지 된 PLE 서열 에 상동 성 인 염기 를 굵 은 활자 로 나타내 었 다 . 제한 엔 도 뉴클레아제 에 대한 인지 서열 을 강조 하 기 위해 이탤릭체 로 나타내 었 다 . ' 퓨 션 고 충실 도 DNA 폴리머 라 제 ( Phusion High - Fidelity DNA Polymerase ) ' 매뉴얼 ( 핀자 임 ( Finnzymes ) ) 에 따른 1 x 퓨 션 HF 완충액 중 1 U 의 퓨 션 ( Phusion ) DNA 폴리머 라 제 ( 핀 자임 , 핀란드 에스 푸 ) , 주형 으로서 500 ng 의 cDNA , 각각 20 마이크 로 몰의 프라이머 1 및 2 , 5 μ l 의 dNTP 혼합물 ( 각각 2 mM ) 을 갖 는 50 μ l 의 혼합물 중 에서 , 98 ℃ 에서 30 초 의 변성 단계 로 출발 하 여 , 증폭 을 위한 30 주기 ( 98 ℃ 10 초 , 68 ℃ 20 초 , 72 ℃ 1 분 ) 후 70 ℃ 에서 8 분 간 최종 배양 에 의해 증폭 을 수행 하 여 완전 한 생성물 을 제조 하 였 다 . 상기 PCR 은 1 . 8 kb ( 아가로스 겔 전기영동 으로 측정 ) 의 크기 를 갖 는 DNA 단편 을 제공 하 였 다 .