C ) 대사물질 의 검출 : 600 mm 패트리 접시 에 BV 2 세포 를 접종 하 고 24 시간 정치 한 후 , 정상 산소 또는 저 산소 로 6 시간 동한 배양 한다 . 미리 냉각 한 PBS 로 세포 를 3 회 세척 한 후 , 1 . 5 ml 의 냉동 된 80 % 의 메탄올 을 첨가 하 고 , - 80 ℃ 의 냉장고 에서 30 분 동안 부화 시킨다 . 세포 를 수집 하 여 , 4 ℃ 에서 14 , 000 g 를 15 분 동안 원심 분리 시킨다 . 상층 메탄올 / 수상 을 새로운 원심 분리 관 으로 옮겨 - 80 ℃ 의 냉장고 에서 다시 30 분 동안 부화 시킨다 . 원심 분리 하 여 상청 액 을 새로운 원심 분리 관 에 수집 하 고 , 질소 분위기 에서 샘플 을 바람 에 건조 시킨다 . 샘플 은 액체 크로 마토 그래피 - 질량 분석 을 진행 하 기 전 에 - 80 ℃ 에서 보존 한다 .