PCR 은 10 ng 의 DNA 와 5 pmol 의 forward 및 reverse 프라이머 , 0 . 2 mM dNTP mix , 1 X PCR buffer [ 50 mM KCl , 10 mM Tris - HCl ( pH 9 . 0 ) , 0 . 1 % Triton X - 100 , 1 . 5 mM MgCl 2 ] 및 1 unit 의 Taq polymerase ( Nurotics , Korea ) 를 이용 하 여 총 부피 20 ul 로 실시 하 였 다 . PTC - 100 ⓡ thermocycler ( Waltham , USA ) 를 사용 하 여 , 95 ℃ 에서 5 분 간 초기 변성 후 95 ℃ 에서 20 초 , 61 ℃ 에서 30 초 , 72 ℃ 에서 60 초 로 총 35 회 반복 하 고 , 72 ℃ 에서 10 분 간 반응 시켰 다 .