10 μ l 의 2 x SDS 샘플 완충액 ( 125 mM 트리스 - HCl , pH 6 . 8 ; 4 % SDS , 20 % 글리세롤 , 5 % β - 머 캅 토 에탄올 , 0 . 05 % 브로모 페놀 블루 ) 을 10 μ l 의 상업 적 으로 시판 하 는 돼지 간 에스터 라 제 또는 10 μ l 의 60 - 배 농축 된 ( 사토 리우스 ( Sartorius ) 의 센트리 콘 한외 여과 - 스핀 컬럼 ( Centricon Ultrafiltrations - Spin Columns ) ) , 플라스미드 pGAPZ A APLE - ER 또는 빈 pGAPZ A 플라스미드 ( 대조 균주 ) 를 함유 하 는 피치 아 파스토 리스 배 양물 의 상등 액 ( 배 플 이 있 는 2 l 엘렌 메이어 ( Erlenmeyer ) 플라스크 에서 250 ml 의 YPD 배지 중 100 rpm 및 28 ℃ 에서 72 시간 ) 에 가하 였 다 . 샘플 을 95 ℃ 에서 5 분 간 가열 한 후 , 단백질 을 12 . 5 % 폴리 아크릴아마이드 겔 ( 4 % 축적 겔 ) 상 에서 분리 하 고 검출 을 위해 쿠마시 브릴리언트 블루 ( Coomassie Brilliant Blue ) R 250 으로 염색 하 였 다 . SDS - PAGE 는 pGAPZ A APLE 플라스미드 를 갖 는 효모 균주 에서 rAPLE ( 약 60 kDa ) 에 대해 예상 된 크기 를 갖 는 단백질 띠 를 나타내 었 지만 , 대조 용 균주 에서 는 나타내 지 않 았 다 ( 도 2 ) . 비교 를 위해 또한 분석 한 상업 적 으로 시판 하 는 돼지 간 에스터 라 제 는 동일 크기 범위 의 2 개 의 단백질 띠 를 나타내 었 다 ( 도 2 에서 화살표 ) .