PCR 수행 을 위해 먼저 DNA 를 추출 하 였 다 . 새우 의 아가미 , 몸체 , 배다리 로부터 추출 액 을 수득 하 고 , 이 를 버퍼 없이 직접 균질 화 한 후 1 . 5 ml 튜브 에 넣 었 다 . 500 ㎕ 추출 버퍼 ( 400 mM NaCl , 20 mM Trizma base , 5 mM EDTA , 1 % SDS , PH 8 . 0 ) 를 사용 하 여 2 차 균질 화 하 였 다 . 다음 , 500 ㎕ 의 PCI ( phenol : chroloform : isoamylalcohol ) 를 상기 균질 화 된 추 출액 에 가하 고 잘 섞 어 주 었 다 . 15 , 800 x g ( 약 12 , 000 rpm ) 으로 5 분 간 원심 분리 한 후 , 상층 액 을 1 . 5 ㎖ 튜브 에 옮기 고 , 3 M NaOAC ( 0 . 1 vol ) 와 100 % 에탄올 ( 2 vol ) 을 첨가 하 였 다 . 다시 잘 섞 은 후 , - 80 ℃ 에서 10 분 간 보관 하 였 다 . 다음 , 18 , 506 X g 로 30 분 간 원심 분리 한 후 , 상층 액 을 제거 한 후 실온 에서 1 ~ 2 분 간 건조 하 였 다 . 수득 한 DNA 펠릿 을 20 ~ 50 ㎕ 의 용출 완충액 에 재현 탁 했 다 . WSSV - F 프라이머 ( 서열 번호 1 : 5 '- CTTTCACTTTCGGTCGTGTC - 3 ') 과 WSSV - R 프라이머 ( 서열 번호 2 : 5 '- TACTCGGTCTCAGTGCCAGA - 3 '), 및 타 겟 팅 된 WSSV vp 28 유전자 ( 604 bp ) 을 사용 하 였 다 . 상기 프라이머 각 1 pmol , DNA 추출물 1 ㎕ 및 증류수 7 ㎕ 를 사용 하 고 , 변성 ( 95 . 0 ℃), 어닐링 ( 57 . 0 ℃), 및 길 이 연장 ( elongation ) ( 72 . 0 ℃) 조건 으로 35 사이클 을 반복 하 여 PCR 을 수행 하 였 다 .