튜브 를 진탕 형 배양 조 ( 37 ℃, 900 rpm ) 에서 5 분 간 에비 배양 하 고 , 독점 적 장 업 용액 ( 5 ㎕) 의 등분 을 첨가 함 으로써 반응 을 개시 했 다 . 이하 의 샘플 포집 을 조정 하 기 위해 상기 첨가 의 시간 을 주의깊 게 조절 했 다 . 소량 의 등분 ( 50 ㎕) 을 0 , 5 , 15 , 30 , 60 및 90 분 에 꺼내 어 , 메탄올 또는 아 세토 니트릴 에 용해 시킨 덱 스트로 판 ( 0 . 5 ㎍/ ml 용액 100 ㎕) 을 수용 하 는 각각 의 튜브 에 이송 했 다 . 샘플 을 4 ℃ 에서 15 분 간 14 , 000 g 으로 원심 분리 했 다 . 상청 액 을 투명 라벨 링 된 HPLC 주입 바이 얼 에 옮기 고 , 분석 할 때 까지 - 80 ℃ 에서 보관 했 다 . 상청 액 의 등분 ( 25 ㎕) 을 물 ( 75 ㎕) 에 첨가 하 고 , 혼합 한 다음 LC - MS / MS 시스템 에 주입 하 고 분석 했 다 . 본 발명 의 화합물 몇 가지 에 대한 결과 는 하 기 실시 예 20 의 표 에서 알 수 있 다 .