상위 메 발론 산 ( MVA ) 경로 ( pCL Upper ) , 융합 된 하위 MVA 경로 ( gi 1 . 2 KKDyI ) , 및 M . 마제 이 로부터 의 메 발 로 네이트 키나아제 및 P . 알 바 로부터 의 이소프렌 신 타아 제 ( pTrcAlba - mMVK ) 의 고발 현물 을 포함 하 는 BL 21 ( DE 3 ) 대장균 세포 를 갖 는 15 ℓ 생물 반응기 에서 발효 를 실행 하 였 다 . 이러 한 실험 을 실행 하 여 원 하 는 발효 pH 7 . 0 및 온도 30 ℃ 에서 글루코오스 로부터 이소프렌 이 형성 되 는 것 을 모니터링 하 였 다 . 대장균 균주 의 동결 바이알 을 해동 시키 고 , 트립 톤 - 효모 추출물 배지 에 접종 하 였 다 . 접종물 이 OD 1 . 0 ( 550 nm 에서 측정 됨 ) 으로 성장 한 후 , 초기 부피 를 5 ℓ 로 하 는 15 ℓ 생물 반응기 에 접종 하 는 데 500 ㎖ 를 사용 하 였 다 .