카나마이신 선택 배지 에서 생존 한 콜로니 는 kanR 이 삽입 되 었 음 을 알려 주 는 리포터 역할 을 하 는 것 이 사실 이 지만 , 다시 한 번 분자 생물학 적 방법 으로 검증 을 하 기 위해서 PCR 검증 을 실시 하 였 다 . 즉 , aroA 유전자좌 에 kanR 이 치환 되 었 는지 확인 하 기 위해 다음 과 같이 PCR 을 실시 하 였 다 ( 도 6 참조 ) . 즉 , 4 종류 의 프라이머 세트 를 이용 하 여 PCR 을 수행 함 에 있 어 PCR 검증 1 번 ( V 1 ) 은 P 5 프라이머 ( 서열 번호 7 ) 과 P 6 프라이머 ( 서열 번호 8 ) , 검증 2 번 ( V 2 ) 은 P 1 프라이머 ( 서열 번호 3 ) 과 P 4 프라이머 ( 서열 번호 6 ) , 검증 3 번 은 P 4 프라이머 ( 서열 번호 6 ) 과 P 5 프라이머 ( 서열 번호 7 ) , 그리고 검증 4 번 은 P 7 프라이머 ( 서열 번호 9 ) 과 P 8 프라이머 ( 서열 번호 10 ) 을 이용 하 여 각각 0 . 7 kb , 1 . 8 kb , 1 . 5 kb , 및 0 . 7 kb 의 PCR 산물 의 증폭 을 기대 하 며 수행 하 였 다 . 그 결과 , 각각 의 PCR 검증 에 기대 되 는 크기 의 PCR 산물 들 이 생성 됨 을 확인 하 여 성공 적 으로 aroA 유전자 가 제거 되 었 음 을 알 수 있 었 다 ( 도 7 의 A , B , C , D ) .