" 도 29 A - C . 종양 용 해성 바이러스 에 의해 유도 된 - 종양 침윤 된 T 세포 ( "" OV - 유도 된 T 세포 "") 는 생체 외 배양 될 수 있 고 이 들 의 종양 특이 성 을 유지 할 수 있 다 . ( A ) 실험 적 셋 업 : B 6 마우스 는 5 x 105 MC 38 암 세포 로 s . c . 접종 되 었 다 . 종양 면적 이 5 x 5 mm 2 를 도달 한 경우 vvDD ", vvDD - IL - 2 ( 1 x 10 s pfu / 종양 ) 또는 PBS 는 종양 내 주사 되 었 다 ( n = 4 / 그룹 , 데이터 는 2 개 의 독립 적 인 실험 의 요약 으로서 제시 된다 ) . 10 일 후 종양 은 수집 되 었 고 단일 세포 현탁액 으로 향하 고 이어서 자기 분리 되 었 다 ( CD 90 . 2 비드 ) . 각각 의 개별 마우스 로부터 T 세포 는 IL - 2 ( 30 IU / ml ) 및 IL - 7 ( 5 ng / ml ) 의 존재 하 에서 RPMI 완전 배지 내 24 - 웰 플레이트 ( 1 x 1 O 6 / 웰 ) 에서 배양 되 었 다 . ( B ) 배양 조건 하 에 T 세포 의 종양 특이 성 을 결정 하 기 위해 , 각각 의 개별 마우스 로부터 T 세포 는 ELISPOT 에 의한 IFN - γ 생산 에 대하 여 4 일 후 시험 되 었 다 . T 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 은 어느 한쪽 으로 자극 되 지 않 은 채 남 아 있 었 거나 ( 배지 ) 또는 24 시간 동안 2 중 으로 비 - 종양 - 보유 B 6 마우스 로부터 γ - 조사 된 B 16 종양 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 또는 비 접촉 비장 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 로서 무관 한 표적 세포 또는 γ - 조사 된 MC 38 종양 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 로 도전 되 었 다 . 결과 는 2 중 으로 평가 된 각각 의 마우스 로부터 T 세포 의 막대 ( 평균 ± 표준편차 ) 그리고 개별 데이터 포인트 ( 각각 의 웰 에서 스팟 의 수 ) 로서 보여진다 . 스튜던트 의 t - 시험 은 통계 적 유의 도 ( * p < 0 . 05 ; ** p < 0 . 01 ; *** p < 0 . 001 ; **** p < 0 . 0001 ) 를 분석 하 는 데 사용 되 었 다 . ( C ) IFN - γ ELISPOT 이외 에 T 세포 는 유세포 측정 에 의한 4 - 1 BB 상향 조절 에 대하 여 시험 되 었 다 . T 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 은 어느 한쪽 으로 자극 되 지 않 은 채 남 아 있 었 거나 ( 배지 대 조군 ) 또는 2 중 으로 비 - 종양 - 보유 B 6 마우스 로부터 γ - 조사 된 B 16 종양 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 또는 비 접촉 비장 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 로서 무관 한 표적 세포 또는 γ - 조사 된 MC 38 종양 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 로 도전 되 었 다 . 24 시간 후 세포 는 CD 3 , CD 4 , CD 8 , 4 - 1 BB 에 대한 유세포 측정 분석 을 위하 여 염색 되 었 다 . 결과 는 2 중 으로 평가 된 각각 의 마우스 로부터 T 세포 의 막대 ( 평균 ± 표준편차 ) 그리고 개별 데이터 포인트 ( CD 8 + 4 - 1 BB + T 세포 및 CD 4 + 4 - 1 BB + T 세포 의 백분율 ) 로서 보여진다 . 스튜던트 의 t - 시험 은 통계 적 유의 도 ( * p < 0 . 05 ; ** p < 0 . 01 ; *** p < 0 . 001 ; **** p < 0 . 0001 ) 를 분석 하 는 데 사용 되 었 다 .