사람 안드로겐 수용체 ( hAR ) 를 암호 화 하 는 cDNA 를 포함 하 는 배 큘로바이러스 발현 플라스미드 는 표준 기술 을 사용 하 여 제조 하 였 다 . 당해 발현 플라스미드 를 사용 하 여 스 포 도프 터 프루 기 페르 다 ( Spodopter frugiperda ) - 21 ( Sf - 21 ) 세포 를 형질 감염 시켰 다 . 비 감염 된 Sf - 21 세포 의 현 탁 배 양물 을 1 . 2 x 106 세포 / mL 의 밀도 로 성장 시킴 에 이어서 감염 다중 도 2 에서 hAR cDNA 를 포함 하 는 재조합 바이러스 로 감염 시켰 다 . 당해 감염 된 Sf - 21 세포 를 48 시간 동안 배양 함 에 이어서 40 ℃ 에서 10 분 동안 1000 x g 에서 원심 분리 하 여 수거 하 였 다 . 수득 한 세포 펠릿 을 용해 완충액 ( 50 mM 인산칼륨 완충액 , pH 7 . 0 , 10 mM 모노 티오 글리세롤 , 5 mM DTT , 20 mM 나트륨 몰 리브 데이트 , 1 mM PMSF , 1 μ g / mL 아프 로티 닌 및 10 μ g / mL 류 펩 틴 ) 중 에 재현 탁 시키 고 빙상 에서 15 분 동안 배양 하 였 다 . 재현 탁 된 세포 펠릿 을 다운스 ( Dounce ) 파쇄기 및 B 페슬 ( pestle ) 을 사용 하 여 파쇄 시켰 다 . 2 M KCl 의 용적 을 파쇄 된 세포 펠릿 에 첨가 하 여 최종 농도 가 0 . 4 M 이 되게 한다 . 수득 한 수용체 용해 물 을 40 ℃ 에서 60 분 동안 100 , 000 x g 에서 원심 분리 하 고 결합 분석 에 사용 하 기 위해 저장 하 였 다 .