국제 PCT 공개 제 WO 2003 / 083125 호 는 바실 러스 세포 를 변형 시키 기 위한 방법 , 예컨대 , 대장균 ( E . coli ) 을 우회 하 기 위해 PCR 융합 을 사용 하 여 바실 러스 결실 균주 및 DNA 작 제물 을 생성 하 는 방법 을 개시 하 고 있 다 . PCT 공개 제 WO 2002 / 14490 는 바실 러스 세포 를 변형 하 기 위한 방법 을 개시 하 고 있 으며 , 이 에 는 ( 1 ) 통합 플라스미드 ( pComK ) 의 작 제 및 형질전환 , ( 2 ) 코딩 서열 , 신호 서열 및 전 - 펩티드 서열 의 무작위 돌연변이 유발 , ( 3 ) 상동성 재조합 , ( 4 ) 형질전환 DNA 에 대한 비 - 상동성 측면 서열 의 추가 에 의해 형질전환 효율 증가 , ( 5 ) 이중 교차 통합 ( double cross - over integration ) 최적화 , ( 6 ) 부위 지향 적 돌연변이 유발 및 ( 7 ) 마커 를 남기 지 않 는 결실 ( marker - less deletion ) 을 포함 한다 .