성체 도너 로부터 의 세포 를 단순 화 된 배지 중 에서 무 바이러스 에피솜 벡터 를 사용 하 여 리프 로 그래 밍 할 수 있 는지 를 확인 하 기 위해 , 환자 세포주 OAT 또는 PRPT 8 세포 200 만 개 를 EBNA mRNA 와 함께 플라스미드 조합 # 4 또는 # 6 과 전기 천공 하 여 2 개 의 10 cm 플레이트 상 에 옮겼 다 . 리프 로 그래 밍 을 최대 화 하 기 위해 , FBS 함유 배지 를 처음 6 일 동안 사용 하 였 다 . 일정 한 성체 세포 유지 조건 에 맞추 기 위해 , 세포 를 O 15 C 5 에서 유지 하 였 다 . 그 후 , 배지 를 DF 5 SFe 로 교체 하 여 14 ∼ 21 일 동안 더 배양 하 였 다 . 한 플레이트 의 세포 를 상이 한 시점 에 1 : 2 의 비 로 계대 하 였 다 . 플라스미드 조합 # 6 은 # 4 보다 더 많 은 콜로니 ( 100 만 개 세포 당 약 5 개 ) 를 생성 하 였으나 , 세포 의 대부분 이 전형 적 인 인간 ES 세포 모 폴 로지 를 닮 지 않 았 다 . 약 22 일 후 , 플라스미드 조합 # 4 에 대한 1 차 플레이트 상 에 인간 ES 세포 유사 콜로니 가 출현 하 였 다 . 플라스미드 조합 # 6 이 사용 되 었 을 때 2 차 계대 플레이트 상 에 더 많 은 인간 ES 세포 유사 콜로니 가 출현 하 였으며 , 이때 100 만 개 세포 당 콜로니 추정 수 가 약 40 개 였 다 . 플라스미드 조합 # 4 를 사용 하 였을 때 에 는 iPS 세포 가 생성 되 지 않 았 다 . 1 차 플레이트 상 에 다른 조밀 하 게 군집 화 된 세포 의 중간부 에 iPS 세포 콜로니 가 출현 하 였으며 , 이것 은 그 경계 넘 어 증식 할 수 없 었 다 . 그러나 , 2 차 플레이트 상 의 콜로니 는 콜로니 단리 에 적합 한 큰 크기 로 증식 하 였 다 . 콜로니 를 픽 킹 하 여 TeSRTM 로 바로 옮겼 으며 , 32 개 의 픽 킹 콜로니 가 생존 하 여 ES 세포 모 폴 로지 를 나타내 었 다 . 유전자 분석 은 이 들 콜로니 가 OAT 세포주 로부터 유도 되 어 정상 적 인 핵형 을 나타내 었 음 을 확인 시켜 주 었 다 .