IGF - 1 R HC ** 및 LC ** 를 코딩 하 는 핵산 서열 을 , 각각 화학 적 합성 으로 합성 한 후 Geneart ( Regensburg , Germany ) 의 pGA 4 클로닝 벡터 에 기초 한 pPCRScript ( Stratagene ) 내 로 클로닝 하 였 다 . IGF - 1 R HC ** 를 코딩 하 는 발현 카세트 를 PvuII 및 BmgBI 제한 부위 를 통해 각각 의 E . 콜라 이 ( E . coli ) 플라스미드 내 로 라 이게 이 션 하 여 최종 벡터 pUC - HC **- IGF - 1 R 을 산출 하 였 고 ; 각각 의 IGF - 1 R LC ** 를 코딩 하 는 발현 카세트 를 PvuII 및 SalI 제한 부위 를 통해 각각 의 E . 콜라 이 ( E . coli ) 플라스미드 내 로 라 이게 이 션 하 여 최종 벡터 pUC - LC **- IGF - 1 R 을 산출 하 였 다 . 서브 클로닝 된 핵산 서열 을 DNA 서열 분석 으로 확인 하 였 다 . 일시 적 및 안정 적 트랜스펙션 을 위해서 , 형질 전환 된 E . 콜라 이 ( E . coli ) 배 양물 로부터 의 플라스미드 제조 ( Nucleobond AX , Macherey - Nagel ) 에 의해 다량 의 플라스미드 를 제조 하 였 다 .