따라서 , 본 발명 은 상기 언급 된 바 와 같 은 방법 , 특히 ( ii ) 에서 , 반응 을 환원제 , 바람직 하 게 NaCNBH 3 의 존재 하 에 바람직 하 게 수성 시스템 중 에서 , 0 내지 37 ℃, 바람직 하 게 0 내지 25 ℃ 범위 의 온도 하 에 및 3 내지 9 , 보다 바람직 하 게 3 내지 7 , 보다 바람직 하 게 3 내지 7 미만 범위 의 pH 에서 수행 하 고 , ( ii ) 에서 , HAS 유도체 대 생물학 적 활성제 BA 의 몰 비 가 단계 ( ii ) 에서 이용 된 HAS 유도체 의 수 평균 분자량 ( Mn ) 을 기준 으로 하 여 0 . 1 : 1 내지 200 : 1 당량 , 바람직 하 게 1 : 1 내지 10 : 1 당량 인 ( 각 경우 에 있 어서 , 단 X 는 아미드 기 가 아니 다 ) , 상기 언급 된 바 와 같 은 방법 에 의해 수득 되 거나 수득 가능 한 HAS 유도체 에 관한 것 이 다 . 특히 바람직 한 HAS 유도체 대 생물학 적 활성제 BA 의 몰 비 는 10 미 만 , 예 를 들 어 1 : 1 내지 9 : 1 , 보다 바람직 하 게 1 : 1 내지 8 : 1 , 보다 바람직 하 게 1 : 1 내지 7 : 1 , 보다 바람직 하 게 1 : 1 내지 6 : 1 , 보다 더 바람직 하 게 1 : 1 내지 5 : 1 , 예 를 들 어 약 1 : 1 , 약 2 : 1 , 약 3 : 1 , 약 4 : 1 또는 약 5 : 1 이 다 . 이러 한 낮 은 몰 비 , 예 를 들 어 50 : 1 이하 의 몰 비 , 보다 바람직 하 게 10 : 1 이하 의 몰 비 가 몇 가지 생물학 적 활성제 에 대해 생각 할 수 있 는 것 이 긴 하 지만 , 이 는 , 예 를 들 어 IFN 알파 가 특히 바람직 한 단백질 에 대해 바람직 하 다 . 예 를 들 어 , G - CSF 및 EPO 가 관련 되 는 한 은 , 50 : 1 이하 , 예 를 들 어 1 : 1 내지 50 : 1 의 몰 비 가 바람직 하 다 . 일반 적 으로 , 예 를 들 어 1 : 1 내지 50 : 1 또는 2 : 1 내지 40 : 1 또는 3 : 1 내지 30 : 1 또는 4 : 1 내지 20 : 1 또는 5 : 1 내지 15 : 1 의 몰 비 를 언급 할 수 있 다 .