유세포 측정 분석 - MICA 차단 . 리간드 결합 의 차단 을 분석 하 기 위해서 , 50000 NKG 2 D / DAP 10 - 발현 BaF / 3 세포 를 총 100 μ l ( 2 % FBS 를 갖 는 PBS pH 7 . 4 ) 에서 하이브리도마 상청 액 또는 정제 된 항체 의 양 을 변화 시키 면서 1 h 동안 16 ℃ 에서 인 큐 베이 션 한 다음 , mFc - MICA ( 사람 항체 를 위해서 ) 또는 hFc - MICA ( ON 72 를 위해서 ) ( 1 μ g ) 와 함께 30 분 동안 4 ℃ 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 그 후 세포 를 세정 하 고 , 2 차 산양 - 항 - 마우스 IgG - HRP Fc γ 절편 특이 적 , Jackson ( 109 - 036 - 151 ) 을 MICA - mFc 결합 의 검출 을 위해 첨가 하 였 다 . 그 다음 세포 를 B & D FACSArray 유세포 측정기 에서 분석 하 였 다 . 프리 인 큐 베이 션 에 의한 MICA 결합 의 감소 정도 를 프리 인 큐 베이 션 으로 의 결합 의 MFI ( 평균 형광 강도 ) 로서 프리 인 큐 베이 션 없이 MICA 결합 의 % 로 분석 하 였 다 .