올레산 ( oleic acid ) 과 디 이소프로필 카 보디 이미드 를 디 메틸 포름 아미드 용매 하 에서 1 시간 동안 반응 시켰 다 . 반응 30 분 전 에 폴리스티렌 비드 가 붙 어 있 는 Lys - Thr - Thr - Lys - Ser 의 염기 서열 을 가진 펩타이드 에 디 메틸 포름 아미드 용매 를 넣 어 충분히 불려 준 후 , 상기 올레산 과 디 이소프로필 카 보디 이미드 반응물 에 넣 어 17 시간 동안 반응 시켰 다 . 반응 이 완료 된 후 원심분리기 에 의해 3 분 간 2000 rpm 의 속도 로 회전 시켜 상층 의 디 메틸 포름 아미드 를 제거 하 고 , 메탄올 을 투입 하 여 반응 중 에 생긴 이 물질 과 잔존 디 메틸 포름 아미드 를 제거 하 였 다 . 이 어 , 원심분리기 및 질소 가스 에 의해 상기 펩타이드 로부터 메탄올 을 제거 하 였 고 , 메탄올 이 제거 된 펩타이드 를 TFA 클리 비지 용액 ( 88 중량 % 의 TFA , 5 중량 % 의 폴리스티렌 , 5 중량 % 의 물 , 2 중량 % 의 트리 이소프로필 실란 ) 과 2 시간 동안 반응 시켰 다 . 이 어 , 상기 반응물 을 글라스 울 필터 로 여과 한 후 필터 를 통과 한 용액 을 디에틸에테르 20 ml 에 떨어뜨려 총액 이 50 ml 가 되게 한 후 냉장고 에 보관 하 여 하룻밤 을 보내 어 침전물 을 얻 었 다 . 이 어 , 침전 이 형성 된 펩타이드 를 원심분리기 에 넣 고 5 분 간 3000 rpm 의 속도 로 회전 시켜 , 디에틸에테르 와 TFA 클리 비지 용액 을 제거 하 였 다 . 이 어 , 디에틸에테르 를 투여 한 후 원심분리기 에 의해 상층 액 을 제거 하 고 ( 5 회 반복 ) , 질소 가스 에 의해 상기 펩타이드 로부터 디에틸에테르 를 제거 하 였 다 . -> 수득 율 65 % 이상