재조합 TfR 엑 토 도메인 ( ECD ) 에 대한 클론 변이체 의 친 화력 을 결정 하 기 위해 , Biacore ™ Series S CM 5 센서 칩 은 스 트 렙 타 비딘 과 함께 고정 되 었 다 . 바 이오티 닐 화 된 인간 또는 cyno TfR ECD 는 각 유동 쎌 ( flow cell ) 상 에서 1 분 동안 포집 되 었 고 , 클론 변이체 의 일련 의 3 - 배 희석 물 은 실온 에서 30 μ L / 분 의 유속 으로 주사 되 었 다 . 각 샘플 은 45 - 초 연합 및 3 - 분 해리 의 프로토콜 로 분석 되 었 다 . 결합 반응 은 유사 한 밀도 에서 TfR ECD 가 없 는 유동 쎌 에서 RU 를 차감 함 으로써 수정 되 었 다 . Biacore ™ T 200 평가 소프트웨어 v 3 . 1 을 사용 하 여 , 농도 에 대한 평형 에서 반응 을 피팅 함 으로써 정상 - 상태 ( Steady - state ) 친화력 을 수득 하 였 다 .