96 웰 판 ELISA PLATE 에 , PD - L 1 을 피복 하 여 , 섭씨 37 도 에서 60 분 동안 항온 배양 한다 . 그 다음 웰 안 의 용액 을 제거 하 고 , 세 척 완충액 으로 3 회 세척 하 여 , 2 % BSA 을 함유 하 는 PBS 용액 으로 60 분 동안 밀폐 한다 . 세 척 완충액 으로 3 회 세척 한 후 100 μ l 의 웰 당 바이오틴 으로 표지 된 IgG 4 항체 를 넣 어 , 섭씨 37 도 에서 30 분 동안 배양 한 뒤 세척 완충액 으로 3 회 세척 한 후 , 상이 한 희석 배수 의 인간 화 항체 를 넣 어 , 섭씨 37 도 에서 1 시간 동안 배양 하 고 , 세 척 완충액 으로 3 회 세척 한 후 , 세 척 완충액 으로 HPR 으로 표지 된 마우스 항 인간 IgG ( H + L ) 을 1 : 10000 배 로 희석 하 여 , 실온 에서 1 시간 동안 배양 하 고 , 세 척 완충액 으로 3 회 세척 한 후 , 100 μ l TMB 기저 용액 을 넣 어 현색 하 여 , 실온 에서 30 분 동안 반응 한 후 , 100 μ l 2 M 의 염산 용액 으로 반응 을 종료 하 여 450 nm 에서 흡광도 를 읽 어 낸다 .