# 171 ( 농도 = 0 . 15 ㎍/ ml ) 로 형질 감염 된 세포 로부터 의 상등 액 을 0 . 075 ㎍/ ml 에서 출발 하 여 RPMI + 10 % FBS ( 무 항생제 ) 배지 중 3 배 연속 희석 물 로 8 개 의 지점 에 대해 적정 하 였 다 . 희석 당 5 회 의 반복 시험 을 행하 였 다 . SKOV 3 - Her 2 - Luc 세포 를 고체 백색 플레이트 내 에서 1 x 10 e 4 개 / 100 ㎕ RPMI + 10 % FBS ( 무 항생제 ) / 웰 로 접종 하 였 다 . 세포 를 약 2 시간 동안 침강 되게 하 고 , 이어서 회전 시키 고 , 상등 액 을 회수 하 였 다 . 다음 으로 , 3 배 연속 희석 된 # 171 함유 상등 액 50 ㎕ 를 SKOV 3 세포 에 첨가 하 였 다 . 이어서 , 50 ㎕ 의 CAR - T 세포 # 150 ( 서열 번호 314 ) ( 5 x 10 e 4 개 ) 을 첨가 하 고 ( 5 CAR - T : 1 SKOV 3 비 ) , 플레이트 를 37 ℃ 에서 48 시간 동안 인 큐 베이 션 하 였 다 . 상등 액 을 수집 하 고 , 세포 를 PBS 로 2 회 세척 하 였 다 . 루시페라아제 검정 시스템 키트 ( Promega , Fisher CAT # PR - E 1500 ) 로부터 의 20 ㎕ 의 1 x 용해 완충액 을 플레이트 내 로 첨가 하 였 다 . 플레이트 를 주입기 를 구비 한 발광 광도계 ( Promega 로부터 의 Glomax Multi Detection System ) 내 로 넣 었 다 . 주입기 는 웰 당 100 ㎕ 의 루시페라아제 검정 시약 을 첨가 하 고 , 이어서 웰 을 즉시 판독 한다 . 주입 후 판독 과정 의 반복 을 위하 여 플레이트 를 다음 웰 로 전진 시킨다 . 단지 식 ( 1 - RLU 샘플 ) / ( RLU 표적 세포 ) x 100 % 를 사용 하 여 , 각각 의 농도 를 표적 세포 의 RLU ( 상대 루시페라아제 단위 ) 로 나누 어서 각각 의 농도 에 대해 사멸 % 를 결정 하 였 다 .