준비 된 필름 을 24 - 웰 ( well ) 플레이트 의 각 웰 에 가하 였 다 . 필름 을 인산염 완충 염수 ( phosphate - buffered saline : PBS ) 에 침지 하 고 , 약 37 ℃ 의 온도 에서 약 2 시간 동안 유지 하 였 다 . PBS 를 제거 하 고 , 각 웰 에 1 ㎎/㎖ 의 소 혈청 알부민 ( bovine serum albumin : BSA ) ( Sigma - Aldrich ) 또는 0 . 1 ㎎/㎖ 의 피브리노겐 ( Fibrinogen , Sigma - Aldrich ) 을 1 ㎖ 씩 가하 였 다 . 플레이트 를 약 30 rpm 의 속도 로 교반 하 면서 약 1 시간 동안 유지 하 였 다 . 그 후 , BSA 또는 피브리노겐 용액 을 제거 하 고 필름 을 PBS 으로 4 내지 5 회 반복 하 여 세척 하 였 다 . 각 웰 에 1 ㎖ 의 2 w % 소듐 도데 실 술 페이트 ( sodium dodecyl sulfate : SDS ) 용액 을 가하 고 , 실온 에서 약 30 rpm 의 속도 로 약 1 시간 동안 교반 하 였 다 . 그 후 , 마이크 로 BCA 용액 과 SDS 반응물 을 1 : 1 비율 로 혼합 하 고 , 96 - 웰 플레이트 에서 약 37 ℃ 의 온도 에서 약 30 rpm 의 속도 로 교반 하 면서 약 2 시간 동안 유지 하 였 다 . UV 검출기 를 사용 하 여 562 nm 의 파장 에서 반응물 의 흡광도 를 측정 하 였 고 , 측정 된 흡광도 로부터 단백질 을 정량 하 였 다 . 필름 에 흠 착 된 단백질 의 양 을 도 7 a 및 도 7 b 에 나타내 었 다 ( 도 7 a : BSA , 도 7 b : 피브리노겐 ) .