RAW 264 . 7 또는 분화 된 THP - 1 세포주 를 96 - well culture plate 에 2 x 104 cells / well 의 밀도 로 분주 하 였 다 . 세포 를 테스트 화합물 로 1 시간 동안 처리 한 다음 , TLR 작용 제 로 4 시간 동안 자극 하 였 다 . 상등 액 을 미리 코팅 된 분석 플레이트 에 옮기 고 각각 의 ELISA 키트 ( Invitrogen , Carlsbad , CA , USA ) 를 사용 하 여 마우스 및 인간 TNF - α 의 분비 수준 을 측정 하 였 다 . 모든 실험 은 제조사 의 지시 에 따라 수행 되 었 다 . 마이크 로 플레이트 리더 분광 광도계 ( microplate reader spectrophotometer , Molecular Devices , Inc . , San Jose , CA , USA ) 로 흡광도 를 측정 하 고 , SoftMax Pro 5 . 3 software ( Molecular Devices , Inc . ) 를 사용 하 여 표준 곡선 으로부터 데이터 를 보 간 ( interpolated ) 하 였 다 .