RIKEN 세포 은행 ( Tsukuba , Japan ) 으로부터 입수 한 뮤 린 전구 세포 ( 세포주 C 3 H 10 T 1 / 2 또는 ATDC 5 ) 또는 인간 면역 선택 적 Stro - 1 + 전구 세포 ( Mesoblast Ltd , Melbourne , Australia ) 를 3 x 105 세포 밀도 로 2 mL 스 크류 캡 ( screw - capped ) 원심 분리 관 에 접종 하 고 , DMEM - 고 ( + 10 % FBS ) 로 최종 부피 가 1 ml 가 되 도록 하 였 다 . 세포 를 , 스윙 아웃 원심분리기 에서 , 실온 에서 10 분 간 500 g 으로 원심 분리 한 후 , 5 % CO 2 / 95 % 습윤 공기 분위기 하 , 37 ℃ 에서 , 24 시간 동안 인 큐 베이 션 하 였 다 . 시간 이 지남 에 따라 펠 렛 이 형성 되 었 는지 관찰 하 였 다 . 처음 2 일 간 은 매일 , 그 이후 로 는 2 - 3 일 마다 한 번 씩 매질 을 교체 하 였 다 . 3 일 째 매질 을 제거 하 고 , DMEM 640 ㎕ ( + 10 % FBS ) 중 50 mCi / ml 3 H - 티미 딘 80 ㎕ 및 rhNC 4 80 ㎕ ( 0 , 1 , 2 . 5 , 5 , 10 , 25 μ g g / ml ) 을 각 관 에 첨가 하 였 다 ( 도 23 ) .