어유 에서 는 시료 2 . 5 g 을 원심분리기 용 튜브 에 정밀히 달 아 헥산 5 mL , 메탄올 5 mL , 1 % 질산 0 . 5 mL 을 넣 고 30 분 간 진탕기 에서 진탕 하 고 10 분 간 원심 분리 ( 3 , 000 G ) 하 여 층 분리 된 아래층 ( 1 차 추출 액 ) 을 완전히 취해 원심분리기 용 튜브 에 옮길 수 있 으며 , 남 은 여액 에 클로로포름 5 mL , 메탄올 3 . 75 mL , 1 % 질산 1 . 25 mL 을 넣 고 30 분 간 진탕기 에서 다시 진탕 하 고 10 분 간 원심 분리 하 여 층 분리 된 상층 액 ( 2 차 추출 액 ) 을 완전히 취해 앞 에서 취한 1 차 추출 액과 합할 수 있 다 . 여기 에 0 . 2 % 질산 을 넣 어 50 mL 이 되 기 하 여 잘 섞 은 후 10 분 간 원심 분리 ( 3 , 000 G ) 할 수 있 으며 , 이후 상층 액 4 mL 을 취하 여 0 . 2 % 질산 으로 10 mL 로 맞추 고 멤 브레인 필터 ( nylon , 0 . 45 ㎛) 로 일부 를 여과 하 여 시험 용액 을 추출 할 수 있 다 .