Raw 264 . 7 ( 마우스 대식 세포주 ) 는 한국 세포주 은행 ( KCLB ) 에서 분양 받 아 사용 하 였으며 , 10 % FBS ( Fetal Bovine Serum ) , 페니실린 ( 100 unit / ㎖), 스트렙토마이신 설 페이트 ( 100 ㎍/㎖) 가 포함 된 DMEM 배지 ( Dulbecco ' s modified Eagle ' s medium ) 에서 37 ℃, 5 % 이산화 탄소 의 습기 있 는 환경 에서 배양 하 였 다 . 세포 들 은 원심 분리 및 스 크 래퍼 로 수집 하 여 , 10 % FBS 를 포함 하 는 RPMI 1640 배지 100 ㎕ 를 포함 하 는 96 웰 플레이트 에 1 × 105 / 웰 을 넣 었 다 . 3 베타 , 4 베타 - 에폭시 - 8 a - 이소부 티 릴 옥시 구아 이 아 - 1 ( 10 ) , 11 , ( 13 ) - 디엔 - 12 . 6 a - 올 라이드 는 디 메틸 설 폭 사이드 ( DMSO ) 용매 에 용해 시켰으며 , 모든 시험 에서 DMSO 의 농도 는 0 . 1 % 를 초과 하 지 않 았 다 . 하룻밤 경과 후 , 시료 및 LPS ( 1 ㎍/ mL ) 를 첨가 하 고 플레이트 는 24 시간 동안 배양 하 였 다 . 세포 들 은 한 차례 세척 한 후 , 5 ㎎/㎖ 의 MTT 를 함유 하 는 FBS 없 는 배지 50 ㎕ 를 첨가 하 였으며 , 37 ℃ 에서 4 시간 배양 한 후 , 배지 는 제거 되 었 고 , 세포 내 에서 형성 된 포마잔 블루 ( formazan blue ) 를 100 ㎕ 의 DMSO 에 녹인 후 , 540 nm 에서 흡광도 를 측정 하 여 세포 독성 효과 를 IC 50 값 으로 구하 였 다 . IC 50 은 화합물 을 처리 하 지 않 았 을 때 에 비하 여 세포 의 숫자 가 50 % 감소 효과 를 나타내 는 농도 를 의미 한다 .