서열 번호 7387 변이체 를 발현 하 는 맑 아 진 이 . 콜라 이 배양 용 해물 의 96 웰 플레이트 에서 검정 을 수행 하 였 다 . 펠 렛 을 실시 예 60 에 기재 된 바 와 같이 용해 시키 고 , 용해 물 을 맑 게 만든 후 , 50 mM 인산칼륨 완충제 , pH 6 내 에서 20 배 희석 하 였 다 . 용해 물 을 열 에 의해 처리 하 기 위해 , 1 시간 동안 300 RPM 진탕 하 에 써 모 트론 ® 적정 플레이트 진탕기 에서 75 ℃ 에서 예비 인 큐 베이 팅 하 였 다 . 검정 은 20 g / L 레바 우디 오시드 A 60 % 기질 , 0 . 05 g / L ADP ( Amresco , 초 순수 등급 ) 보조 기질 , 0 . 05 g / L SUS SFP 서열 번호 2510 , 0 . 08 g / L β - 1 , 2 - 글 리코 실트 랜스 퍼라 제 ( β 12 GT ) 서열 번호 7324 , 및 40 g / L 수크로스 ( 자당 ) 와 함께 100 μ L 반응물 내 의 10 μ L 예비 인 큐 베이 팅 된 용해 물 을 사용 하 여 수행 하 였 다 . 하 기 반응 조건 을 사용 하 였 다 : 16 시간 동안 300 RPM 진탕 하 에 써 모 트론 ® 적정 플레이트 진탕기 에서 50 mM 인산칼륨 완충제 , pH 6 , 60 ℃. 반응물 은 물 에 20 배 희석 하 여 가용화 하 고 , 0 . 2 % 포름산 을 갖 는 아세 토니 트릴로 5 배 희석 함 으로써 켄 칭 하 고 , 분석 을 위해 물 로 20 배 희석 하 였 다 . 샘플 을 실시 예 31 , 표 31 . 1 에 기재 된 바 와 같이 RapidFire - MS / MS 에 의해 분석 하 였 다 . 인 시 츄 합성 된 ADP - 글루코스 를 사용 하 여 레바 우디 오시드 A 60 으로부터 레바 우디 오시드 M 을 서열 번호 7388 보다 더 많 은 양 으로 생성 한 글 리코 실트 랜스 퍼라 제 변이체 폴리펩티드 가 확인 되 었 다 . 조작 된 폴리펩티드 는 표 74 . 1 및 표 74 . 2 에 열거 되 어 있 다 . 서열 번호 7388 과 비교 하 여 표 74 . 3 에 제시 된 변이체 의 분석 을 위해 실시 예 31 에서 설명 된 바 와 같이 진탕 플라스크 규모 배 양물 을 성장 시키 고 , 용해 시키 고 , 맑 게 하 고 , 분말 로 동결 건조 시켰 다 .