상기 < 1 - 4 - 2 > 의 결과 에 따라 , 가장 높 은 발현 배수 를 보인 클론 32 번 의 DNA 에 제한 효소 Mlu I 과 Xma I 을 처리 하 여 HRE 염기 서열 이 포함 된 DNA 절편 을 분리 정제 한 다음 , 절편 의 Xma I 제한 효소 부위 가 꼬리 - 꼬리 결합 ( tail - to - tail ) , 즉 MluI -- XmaIXmaI -- MluI 의 형태 로 형성 된 이량체 를 다시 원래 의 클론 32 번 DNA 의 Mlu I 절단 부위 에 클로닝 하 여 최종 적 으로 효소 Mlu I 과 Xma I DNA 절편 이 2 개 더 ( 총 3 개 ) 삽입 되 도록 하 였 다 . 상기 재조합 벡터 의 저산소증 의존 성 루시퍼 라 아제 발현 을 저산소증 유발 화합물 인 CoCl 2 및 DFO 의 처리 와 HIF - 1 α 발현 벡터 인 하 기 실시 예 3 의 pCMV - EGFP - HIF - 1 α 와 의 코 트랜스펙션 ( co - transfection ) 으로 확인 하 였으며 ( [ Wilson and Poellinger , Biochem Bioph . Res . Co . 293 , 446 - 450 , ( 2002 ) ] ; 및 [ Bertges et al . , J . Surg . Res . 106 , 157 - 165 , ( 2002 ) ] 참조 ) , 제작 된 벡터 를 pGL 3 - tata - HRE - FL 이 라고 명명 하 였 다 ( 도 4 ) .