배지 를 제거 하 고 , 차가운 DPBS 로 2 회 세척 한 후 , DMEM + 10 % DLPS 를 첨가 하 였 고 , 이 때 , 리보 좀 분해 억제제 ( lysosomal degradation inhibitor ) 인 바 필로 마이신 A 1 ( bafilomycin A 1 ) ( BA 1 ; Sigma - Aldrich ) 을 0 또는 50 nM 처리 하 고 , 20 μ M 의 부 테 인 또는 100 μ M 의 이소 유제 놀 을 동시 에 처리 하 였 다 ( day 2 ) . 18 시간 배양 후 ( day 3 ) , 차가운 DPBS 로 2 회 세척 하 고 세포 를 회수 하 였 다 . 원심 분리 ( 1 , 200 rpm , 3 분 ) 후 , 세포 펠 렛 을 얻 었 다 .