시험 과정 은 하 기 와 같이 요약 된다 : MDA - MB - 436 세포 를 FBS 를 함유 한 DMEM F 12 ( 둘 다 Gibco 로부터 구입 ) 를 완전 배지 로 사용 하 는 96 - 웰 배양 플레이트 에 적절 한 세포 농도 로 ( 예 , 3000 세포 / ml 배지 ) 심 었 다 . 37 ℃ 및 5 % 이산화 탄소 의 조건 하 에서 , 상기 세포 를 균일 한 온도 배양기 에 배양 하 고 밤새 키웠 다 . 시험 된 화합물 을 디 메틸 설 폭사 이드 에 용해 한 후 FBS 없 는 배양액 에 시험 에 필요 한 농도 로 희석 하 였 다 . 세포 가 벽 에 부착 하 면 , 세포 배양액 을 시험 화합물 이 일련 의 농도 로 ( 일반 적 으로 7 내지 9 개 농도 물 들 ) 포함 되 어 있 는 신선 한 배양액 으로 교체 하 였 다 . 다음 세포 플레이트 를 37 ℃ 및 5 % 이산화 탄소 조건 하 에서 72 시간 배양 하 였 다 . 72 시간 후 , 세포 증식 을 저해 하 는 시험 화합물 의 활성 을 CCK 8 ( Cell Counting kit - 8 , No : CK 04 , Dojindo 로부터 구입 ) 방법 을 사용 하 여 결정 하 였 다 .