폐 배지 ( spent medium ) 를 사용 해 세포 를 1 / 4 부피 의 원 배 양물 에 재현 탁하 였 다 . 야생형 고초균 aprE 5 ′- UTR ( WT - 5 ′- UTR ) 에 작동 가능 하 게 연결 된 동일 한 5 ′ catH 상동 아암 , catH 유전자 및 spoVGrrnIp 혼 성 프로모터 를 ( 5 ’ 에서 3 ’ 방향 으로 ) 포함 하 는 대략 1 μ g 의 발현 카세트 와 100 μ l 의 농축 세포 를 혼합 하 고 ( WT - 5 ′- UTR 은 lat 신호 서열 을 암호 화 하 는 DNA 에 작동 가능 하 게 연결 됨 ) , 이어서 변이체 G . 스테아 로써 모필 루스 α - 아밀라아제 를 암호 화 하 는 DNA ( ORF ) 와 혼합 하 였 다 . 변이체 G . 스테아 로써 모필 루스 α - 아밀라아제 를 암호 화 하 는 DNA ( ORF ) 의 3 ’ 말단 을 , 3 ′ catH 상동 아암 에 작동 가능 하 게 연결 된 lat 종결자 에 작동 가능 하 게 연결 하 였 다 . 형질전환 반응물 을 약 90 분 동안 37 ℃ 에서 1000 RPM 으로 배양 하 였 다 .