도 6 A 내지 도 6 G 는 톨 - 유사 수용체 패밀리 구성원 ( Toll - like receptor ( TLR ) family member ) 에 대한 TIC 10 - 7 의 억제 효과 를 나타낸 것 으로 , RAW 264 . 7 세포 를 대 조군 ( -), DMSO ( 0 . 25 %) 및 TIC 10 - 7 ( 10 또는 20 μ M ) 으로 1 시간 동안 전처리 하 고 , 4 시간 동안 각각 TLR 1 / 2 ( Pam 3 CSK ) , TLR 2 / 6 ( FSL - 1 ) , TLR 4 ( LPS ) , TLR 7 ( Imiquimod ) , TLR 9 ( ODN 2395 ) 에 선택 적 인 작용 제 로 자극 하 였으며 TLR 3 ( poly I : C ) 선택 적 작용 제 만 예외 적 으로 24 시간 동안 자극 했 다 . TNF - α 의 분비 수준 은 ELISA 로 측정 하 였 다 . TLR 8 에 국한 되 어 , 인간 단구 세포주 ( THP - 1 ) 가 이용 되 었 다 . THP - 1 세포 를 phorbol 12 - myristate 13 - acetate ( PMA ) 와 48 시간 동안 분화 시킨 후 TIC 10 - 7 을 1 시간 동안 처리 한 다음 TLR 8 작용 제 인 TL 8 - 506 을 4 시간 동안 처리 하 였 다 . 인간 TNF - α 분비 는 ELISA 로 측정 하 였 다 . 도 6 H 는 1 시간 동안 TIC 10 - 7 로 처리 후 , NF - κ B ( nuclear factor k - light - chain - enhancer of activated B cells ) 의 p 65 서브 유닛 인산화 ( p - p 65 ) 및 MAPKs ( mitogen - activated protein kinases : extracellular - signal - regulated kinase ( p - ERK ) , p 38 - MAPK ( p - p 38 ) 및 c - Jun N - terminal kinase ( p - JNK ) ) 인산화 의 감소 를 나타내 는 웨스턴 블랏 결과 를 나타낸 것 으로 , RAW 264 . 7 세포 를 TIC 10 - 7 ( 20 μ M ) 의 존재 또는 부재 조건 에서 15 또는 30 분 동안 TLR 9 작용 제 인 ODN 2395 로 자극 시켰으며 , 전체 단백질 추출 및 면역 블랏팅 은 각각 의 단백질 에 대한 1 차 및 2 차 항체 를 사용 하 여 수행 하 였 다 .