다음 으로 , 상기 실시 예 1 ~ 137 의 화합물 각각 에 대하 여 최종 농도 를 50 uM , 5 uM , 500 nM , 50 nM , 5 nM , 500 pM , 50 pM , 5 pM , 및 0 . 5 pM 로 첨가 한 후 , 30 ℃ 인큐베이터 에서 2 시간 동안 반응 시켰 다 . 반응 이 종료 된 후 , 동량 의 키나아제 - 글 로 ( Kinase - Glo , Promega , Madison , WI ) 용액 을 첨가 하 여 40 분 동안 반응 시키 고 , 탐지 ( detection ) 용액 을 첨가 하 여 상온 에서 30 분 동안 더 반응 시킨 후 , 마이크 로 플레이트 효소 결합 면역 흡착 검사 판독기 ( microplate ELISA reader ; Bio - Tek ) 를 이용 하 여 루시 페라 제 ( Luciferase ) 의 양 을 측정 하 여 키나아제 의 IC 50 값 을 산출 하 였 다 .