조직 은 수 송체 로 크실렌 을 사용 하 여 Paraplast Plus ( Sigma ) 로 내장 시키 고 핸드 마이크로톰 으로 절단 하 고 poly - L - lysine - coated 현미경 슬라이드 로 옮겼 다 . 면역 조직 화학 적 염색 을 위해 , 이 부분 을 0 . 02 % 소듐 아지드 및 0 . 05 % 트윈 - 20 이 포함 된 PBS 에 2 % BSA 가 포함 된 차단 완충액 에서 1 시간 동안 상온 에서 배양 시켰 다 . 이 부분 을 정제 된 0 . 1 % 트윈 - 20 및 차단 완충액 ( 1 : 1 , v / v ) 이 포함 된 희석 된 완충액 에서 일차 항체 와 2 시간 동안 배양 시켰 다 . 조직 표본 은 각각 10 분 동안 PBS - T 로 3 회 헹군 다음 1 시간 동안 알칼리 인산화 효소 와 공유 결합 된 anti - rabbit IgG 항체 ( 1 : 300 ) 와 반응 시킨 후 PBS - T 로 10 분 동안 헹군 다음 시료 를 가시 화 하 기 위해 NBT / BCIP 용액 에서 20 분 동안 배양 시켰 다 .