0 . 05 % TweenTM 20 를 포함 하 는 TBS 로 3 분 간 3 회 세정 한 후 , 2 차 항체 를 반응 시켰 다 . 인간 화 항 인간 NR 10 항체 검출 계 에 는 알칼리 포스파타아제 표지 염소 항 인간 IgG γ ( BIOSOURCE , Cat . # AHI 0305 ) 를 , 마우스 항 인간 NR 10 항체 검출 계 에 는 알칼리 포스파타아제 표지 염소 항마 우스 IgG ( SantaCruz , Cat . # sc - 2008 ) 를 , Myc 태그 검출 계 에 는 알칼리 포스파타아제 표지 염소 항 토끼 IgG ( SantaCruz , Cat . # sc - 2057 ) 를 사용 하 여 , 실온 에서 1 시간 반응 시켰 다 . 0 . 05 % TweenTM 20 를 포함 하 는 TBS 로 3 분 간 4 회 세정 한 후 , BCIP / NBT Phosphatase substrate , 1 - Component System ( KPL ) 에 의해 발색 시켰 다 . 여기 서 사용 한 TBS ( Tris - Buffered Saline ) 는 , TBS ( Tris - Buffered - Saline ) powder ( TaKaRa ) 1 포 를 증류수 1 L 에 용해 하 여 조제 하 였 다 . 결과 를 도 27 에 나타낸다 .