IgE - 수용체 의 교차 연결 을 통한 활성 화 / 자극 을 위해 , 배양 한 비 만 세포 를 우선 15 % 하이브리도마 상층 액 을 이용 한 단일 클론 마우스 항 - TNP IgE - 항체 ( IgEl - b 4 , ATCC , Rockville , MD , USA ) 로 37 ℃ ( 5 % CO 2 ) 에서 90 분 간 감작 시킨다 . N - 아세틸 - β - D - 헥소스 아미니 다제 ( 또는 히스타민 ) 또는 사이토카인 / 케모 카인 방출 분석 ( 하 기 참조 ) 에서 사용 할 세포 는 , PBS 로 2 번 헹구 고 , 0 . 2 % 소 혈청 알부민 ( BSA ) ( Sigma ) 이 보충 된 RPMI - 1640 배지 로 재현 탁한 다음 , 100 ng / mL TNP - BSA ( Biosearch Technologies , San Francisco , CA ) 를 커플링 비율 9 / 1 로 첨가 하 여 세포 ( 0 . 5 - 10 x 106 / mL ) 를 활성 화 시킨다 . TNP - BSA 와 의 인 큐 베이 션 ( 37 ℃/ 5 % CO 2 ) 은 β - 헥소스 아미니 다제 ( 또는 히스타민 ) 방출 분석 의 경우 에 는 30 분 이 고 , 사이토카인 과 케모 카인 의 방출 의 경우 에 는 6 - 24 시간 이 다 . 세포 는 TNP - BSA 를 첨가 하 기 전 1 분 내지 24 시간 동안 , 테스트 약물 ( 들 ) ( 서 플라 타스 트 와 스타 틴 ( 피타 바스타 틴 , 플 루 바스타 틴 , 로바스타틴 , 프라 바스타 틴 또는 바람직 하 게 는 심바 스타 틴 , 로수 바스타 틴 또는 아 토르바 스타 틴 ) 의 조합 , 서 플라 타스 트 단독 및 스타 틴 단독 ) 과 함께 ( 37 ℃/ 5 % CO 2 ) 인 큐 베이 션 한다 ( 약물 의 스톡 용액 과 농도 에 대해서 는 상기 실시 예 1 참조 ; 테스트 약물 ( 들 ) 은 또한 TNP - BSA 자극 과 동시 에 첨가 될 수 있 음 ) . 비교 를 위해 , 일부 실험 은 약물 첨가 없이 수행 한다 . 인 큐 베이 션 / 자극 후 , 샘플 을 원심 분리 하 고 , 후술 되 는 바 와 같이 β - 헥소스 아미니 다제 ( 또는 히스타민 ) 및 / 또는 사이토카인 / 케모 카인 의 양 에 대해 상층 액 을 분석 한다 . 세포 펠 렛 은 마이크 로 어레이 실험 을 위해 추가 적 으로 가공 할 때 까지 RLT 완충액 ( QIAGEN , Valencia , CA ) 중 에 동결 ( - 80 ℃) 저장 한다 ( 하 기 실시 예 12 참조 ) .