본 연구 는 공 여자 모낭 진피 유두 유래 의 인간 세포 에서 수행 되 었 다 . 진피 유두 는 전립선 조직 에서 와 같이 5 α R 2 이 형체 를 가지 고 있 으므로 이러 한 모델 은 유익 하 다 . 세포 를 24 - 웰 플레이트 에 접종 하 고 L - 글루타민 ( 2 mM ) , 페니실린 ( 50 U / ml ) , 스트렙토마이신 ( 50 μ g / ml ) 및 소태 야 혈청 ( 10 %) 이 보충 되 는 DMEM 배지 의 표준 배양 조건 ( 37 ° C 및 5 % CO 2 ) 에서 24 시간 배양 하 였 다 . 이어 배지 를 L - 글루타민 ( 2 mM ) , 페니실린 ( 50 U / ml ) , 스트렙토마이신 ( 50 μ g / ml ) 및 소태 야 혈청 ( 1 %) 이 보충 되 는 DMEM 분석 배지 로 교체 하 였 다 . 이러 한 분석 배지 는 24 h 전 - 배양 과정 에서 피 험 생성물 및 기준 화합물 , 피 나스 테 리드 ( 10 μ M ) 를 함유 하 거나 하 지 않 을 수 있 다 ( 대조 조건 ) . 이어 세포 를 [ C 14 ] - 테스토스테론 함유 및 시험 또는 기준 생성물 함유 또는 미 - 함유 ( 대조 조건 ) 분석 배지 로 처리 하 고 , 세포 를 24 h 동안 배양 하 였 다 . 배양 후 , 테스토스테론 대사 분석 을 위하 여 상청 액 을 모았 다 . 모든 실험 은 3 회 수행 되 었 다 . 클로로포름 / 메탄올 혼합물 로 상청 액 으로부터 스테로이드 분자 들 을 추출 하 였 다 . 유기상 을 모으 고 , 디 클로로메탄 , 에틸 아세테이트 및 메탄올 을 함유 하 는 용매 계 를 이용 하 여 박 층 크로마토그래피 로 상이 한 분자 종 들 ( 테스토스테론 대사산물 ) 을 분리 하 였 다 . 크로마토그래피 에서 방사능 사진 촬영 하 고 농도 분석 으로 변환 된 테스토스테론 을 추정 하 였 다 .