다음 라이브러리 는 주요 결합 파 라토프 에서 허용 가능 한 전체 다양 성 을 탐색 하 도록 설계 되 었 다 . 취한 접근 법 은 NNK 워크 라이브러리 와 유사 하 였 다 . 각 원래 리지 스터 위치 ( 157 , 159 , 160 , 161 , 162 , 163 , 186 , 189 , 및 194 ) 에 추가 로 2 개 의 핫 스팟 ( 153 및 188 ) 을 NNK 코돈 으로 개별 적 으로 무작위 화 하 여 , 이스트 에서 일련 의 단일 위치 포화 돌연변이 유발 라이브러리 를 생성 하 였 다 . 추가 적 으로 , 각각 의 위치 를 개별 적 으로 야생 형 잔기 로 되돌리 고 , 이 들 개별 클론 을 이스트 에 표시 하 였 다 . 도 23 은 야생 형 복귀 및 단일 - 위치 NNK 라이브러리 와 비교 하 였을 때 , 부모 클론 CH 3 C . 35 . 21 의 결합 을 보여준다 . 위치 153 , 162 , 163 , 및 188 은 야생 형 잔기 로 의 복귀 시 TfR 에 실질 적 으로 결합 을 유지 한 유일 한 위치 였 다 ( 186 의 야생 형 으로 의 복귀 되 는 경우 결합 은 일부 잔류 하 지만 그러나 상당히 감소 됨 이 관찰 됨 ) .