차이 니즈 햄스터 폐 에서 유래 한 CHL / IU 세포 를 , 비 필수 아미노산 , 피 루 빈산 나트륨 및 10 ％ 소 태아 혈청 을 포함 하 는 MEM - E 배양액 에 현 탁 후 , 96 웰 플레이트 에 파종 했 다 . 배양기 ( 5 ％ 이산화 탄소 , 95 ％ 공기 , 37 ℃) 중 에서 하룻밤 배양 한 세포 는 , 그 배양액 을 피 험 물질 을 6 . 25 , 12 . 5 , 25 , 50 , 100 μ mol / L 의 농도 를 포함 하 고 , 또한 몰레 큘라 프로브 즈 ( Molecular Probes ) 사 로부터 입수 한 NBD - PE ( 형광 표지 N -( 7 - 니트 로 벤즈 - 2 - 옥사 - 1 , 3 - 디아졸 - 4 - 일 ) - 1 , 2 - 디 헥사 데카 노일 - sn - 글리세 로 - 3 - 포스 포 에탄올아민 트리 에틸 암모늄염 ) 를 포함 하 는 것 과 교환 한 후 , 추가 로 24 시간 의 배양 을 실시 했 다 . 포스 포 리피도시스 유발 능 은 , 세포 내 로 도입 된 NBD - PE 농도 를 측정 함 으로써 평가 했 다 . 구체 적 으로 는 , 세포 를 2 회 PBS 로 세정 한 후 , 세포 내 로 도입 된 NBD - PE 의 형광 ( 여기 ( 勵 起 ) 파장 : 485 nm , 형광 파장 : 535 nm ) 을 몰레큘러 디바이스 ( Molecular device ) 사 의 SpectraMax plate reader 로 측정 함 으로써 평가 했 다 . 또 , NBD - PE 의 형광 측정 후 , 다 카라바 이 오사 로부터 입수 한 Premix WST - 1 Cell Proliferation Assay System 을 이용 하 여 세포 생존 률 을 평가 했 다 . 세포 생존 률 이 50 ％ 이상 이 되 는 용량 에 있 어서 , 양성 대조 인 아미오다론 의 최대 반응 ( 아미오다론 투여 후 , 세포 내 로 도입 된 NBD - PE 농도 를 100 ％ 로 했 다 ) 의 25 ％ 이상 의 반응 ( 피 험 화합물 투여 후 에 도입 된 NBD - PE 농도 ) 이 인정 된 경우 , 포스 포 리피도시스 유발 능이 양성 이 라고 판단 했 다 .