IHC 정량화 : 유리 슬라이드 상 에 마운 팅 된 뇌 절편 을 아 페리오 ( Aperio ) AT 2 슬라이드 스캐너 를 사용 하 여 영상 화 하 였 다 . 각각 의 연구 내 의 모든 슬라이드 를 동일 한 조명 력 및 카메라 노출 을 사용 하 여 영상 화 하 였 다 . 각각 의 동물 로부터 대략 2 개 의 슬라이드 를 분석 하 였 고 , 각각 은 ~ 20 개 의 마운 팅 된 관상 뇌 절편 을 갖 는다 . 영상 획득 후 에 , 관심 영역 ( ROI ) , a ) 대 상회 영역 과 함께 1 차 피질 ( 이간 5 . 48 mm - 2 . 96 mm , 전정 1 . 69 mm - 0 . 83 mm , 6 - 10 절편 ) 및 b ) 편도체 영역 ( 이간 2 . 72 mm - 1 . 76 mm , 전정 1 . 07 mm - 2 . 03 mm , 4 - 6 절편 ) 을 함유 하 는 뇌 절편 을 , 할로 ( HALO ) 영상 분석 소프트웨어 를 사용 하 여 각각 의 동물 에 대해 확인 하 였 다 . ROI 는 동 측 측면 ( 주사 측면 ) 및 둘 다의 영역 에 대해 상응 하 는 대 측 측면 상의 pS 129 염색 에 의해 점유 된 전체 면적 에 대해 개략 화 되 었 다 . 이어서 , 각 동물 에 대한 모든 ROI 개략 화 된 절편 으로부터 의 평균 염색 을 알고리즘 ( 인디카 랩스 ( Indica Labs ) ) - 면적 정량화 를 사용 하 여 정량 화 하 였 다 . 모든 영상 을 동일 한 역치 설정 을 사용 하 여 동시 에 분석 하 여 양성 염색 된 영역 을 확인 하 였 다 . 조직 면적 ( μ m 2 ) , 총 염색 면적 ( μ m 2 ) , 염색 이 약한 면적 & 강한 면적 ( μ m 2 ) , % 염색 양성 조직 , % 염색 이 약한 및 % 염색 이 강한 양성 조직 을 분석 하 였 다 . 일원 ANOVA 에 이 은 던 넷 사후 검정 을 사용 하 여 처리 효과 를 결정 하 였 다 .