코호트 1 의 101 명 의 직장암 환자 조직 및 35 개 의 상응 하 는 비종 양성 대장 점막 성 동결 조직 시료 를 저온 유지 장치 를 이용 하 여 현미 해부 하 고 분별 하 여 종양 함량 을 향상 시켰 다 . RNA 분리 를 위한 절개 이전 에 , 슬라이드 를 헤마톡실린 - 에오신 으로 염색 하 여 > 70 % 의 종양 세포 를 가지 는 시료 단면 을 선택 하 고 , 종양 세포 함량 이 70 % 미만 인 시료 는 추가 적 으로 절개 하 여 종양 세포 수 를 증가 시켰 다 . 이러 한 과정 을 통해 본 발명 에서 분석 된 모든 시료 는 > 70 % 의 종양 세포 를 포함 함 을 확인 할 수 있 었 다 . TRIzol 시약 ( Invitrogen Life Technologies , Carlsbad , CA , USA ) 을 이용 하 여 제조자 의 프로토콜 에 따라 총 RNA 를 추출 하 였 다 . DNase 분해 및 다른 제거 과정 후 에 , RNA 시료 를 정량 한 뒤 사용 시 까지 - 80 ℃ 에서 보관 하 였 다 . 품질 관리 를 위해 , RNA 순도 및 완전 성 은 변성 젤 전기영동 과 A 260 / 280 비율 측정 을 통해 평가 하 였 다 . 모든 시료 는 2100 Bioanalyzer ( Agilent Technologies , Santa Clara , CA , USA ) 를 이용 하 여 분석 하 였 다 . 모든 시료 에서 , RIN ( RNA integrity number ) 점수 는 > 9 . 5 였 다 .