일부 실시 양태 에서 , 항체 와 접촉 하 거나 항체 에 의해 매립 되 는 잔기 를 함유 하 는 도메인 ( 들 ) / 영역 ( 들 ) 은 HER 3 ( 예 를 들 어 , 야생 형 항원 ) 내 의 특정 잔기 를 돌연변이 시키 고 , 항체 또는 그 의 단편 이 돌연변이 된 또는 변이체 HER 3 단백질 에 결합 할 수 있 는지 여부 를 결정 하 거나 또는 야생형 으로부터 의 친화도 의 변화 를 측정 하 여 확인 할 수 있 다 . 다수 의 개별 돌연변이 를 만들 어 결합 에서 직접 적 인 역할 을 수행 하 거나 또는 돌연변이 가 항체 와 항원 사이 의 결합 에 영향 을 미칠 수 있 도록 항체 와 충분 하 게 인접 한 잔기 를 확인 할 수 있 다 . 이 들 아미노산 에 대한 지식 으로부터 , 항체 와 접촉 하 거나 항체 에 의해 매립 되 는 잔기 를 함유 하 는 항원 ( HER 3 ) 의 도메인 ( 들 ) 또는 영역 ( 들 ) 이 설명 될 수 있 다 . 공지 된 기술 , 예컨대 알라닌 - 스캐닝 을 이용 하 는 돌연변이 유발 은 기능 상 적절 한 에 피토프 를 정의 하 는 것 을 도울 수 있 다 . 아르기닌 / 글루탐산 스캐닝 프로토콜 을 이용 하 는 돌연변이 유발 이 또한 이용 될 수 있 다 ( 예 를 들 어 , 문헌 [ Nanevicz et al . , ( 1995 ) , J . Biol . Chem . 270 ( 37 ) : 21619 - 21625 및 Zupnick et al . , ( 2006 ) , J . Biol . Chem . 281 ( 29 ) : 20464 - 20473 ] 참조 ) . 일반 적 으로 , 아르기닌 및 글루탐산 은 야생 형 폴리펩티드 내 의 아미노산 을 치환 하 고 ( 전형 적 으로 개별 적 으로 ) , 이 는 이 들 아미노산 이 하전 되 고 부피 가 커서 돌연변이 가 도입 되 는 항원 의 영역 에서 항원 결합 단백질 과 항원 사이 의 결합 을 파괴 할 가능 성 을 갖 기 때문 이 다 . 야생형 항원 내 에 존재 하 는 아르기닌 은 글루탐산 으로 교체 된다 . 다양 한 이러 한 개별 돌연변이체 를 얻 고 , 수집 한 결합 결과 를 결합 에 영향 을 미치 는 잔기 가 무엇 인지 결정 하 기 위해 분석 할 수 있 다 . 일련 의 돌연변이체 HER 3 항원 을 생성 할 수 있 고 , 여기 서 각각 의 돌연변이체 항원 은 단일 돌연변이 를 가졌 다 . 다양 한 HER 3 항체 또는 그 의 단편 을 갖 는 각각 의 돌연변이체 HER 3 항원 의 결합 을 측정 하 고 , 선택 된 항체 또는 그 의 단편 이 야생 형 HER 3 ( 서열 1 ) 에 결합 하 는 능력 을 비교 할 수 있 다 .