5 '- 프라이머 KL - NC 454 및 3 '- 프라이머 KL - NC 433 은 각각 조작 된 Xho I 및 Bgl II 절단 부위 를 포함 하 였 다 . 프라이머 KL - NC 451 및 프라이머 KL - NC 431 과 는 상반 되게 , KL - NC 454 및 KL - NC 433 은 , 효모 K . 락 티스 에 따른 hNC 4 유전자 를 바람직 한 코돈 으로 변화 시키 지만 , hNC 4 단백질 서열 은 변화 하 지 않 도록 보존 하 는 , 다수 의 유전자 돌연변이 를 제공 하 였 다 .