과정 : 디 메틸 포름 아미드 중 의 로다민 - NHS 에스테르 ( 1 . 0 당량 ) 를 실온 에서 2 시간 동안 Boc - NH - PEG 3 - NH 2 ( 1 . 2 당량 ) 및 디 이소프로필 에틸아민 ( 3 . 0 당량 ) 과 반응 시켰 다 . 생성물 을 UV 검출기 를 사용 하 여 분취 용 역상 HPLC 에 의해 정제 하 였 다 . 정제 된 로다민 - PEG 3 - NH - Boc 접합체 ( 1 . 0 당량 ) 를 1 : 10 TFA - 디 클로로메탄 시스템 에서 2 시간 동안 교반 함 으로써 Boc 탈 보호 를 실시 하 였 다 . 이어서 , 미 정제 유리 아민 생성물 을 디 메틸 포름 아미드 에 용해 시키 고 , 디 이소프로필 에틸아민 ( 3 . 0 당량 ) 의 존재 하 에 EDC ( 2 . 0 당량 ) , HOBT ( 2 . 0 당량 ) 로 활성 화 시켰 다 . 15 분 후 , FK 506 - CO 2 H ( 1 . 2 당량 , 참고 문헌 : Bioorg . Med . Chem . , 17 ( 2009 ) 5763 - 5768 의 과정 을 사용 하 여 합성 됨 ) 를 첨가 하 고 , 반응 혼합물 을 밤새 교반 하 였 다 . 최종 FK 506 - 로다민 접합체 를 UV 검출기 ( 파장 280 nm 에서 모니터링 함 ) 를 사용 하 여 분취 용 역상 HPLC 상 에서 정제 한 후 단리 하 였 다 . 미 정제 생성물 을 Xterra RP 18 분 취용 HPLC 컬럼 ( Waters ) 에 로딩 하 고 , 95 % 5 mM 인산 나트륨 ( 이동상 A , pH 7 . 4 ) 및 5 % 아 세토 니트릴 ( 이동상 B ) 로 시작 하 여 12 mL / 분 의 유속 으로 35 분 에 0 % A 및 50 % B 에 도달 하 는 구배 조건 으로 용리 시켰 다 . 7 분 분석 용 HPLC - MS 분석 에서 구배 ( 0 ~ 50 % B ) 동안 생성물 피크 의 체류 시간 = 2 . 5 분 . ESI m / z = 1539 . 6 . 약어 : PEG = 폴리에틸렌 글리콜 ; EDC = 1 - 에틸 - 3 -( 3 - 디메틸아미노 프로필 ) 카르 보디 이미드 ; HOBT = 하이드 록 시 벤조 트리아졸 ; HPLC = 고 성능 액체 크로마토그래피 .