구체 적 으로 , 제작자 지침 에 따라 자성 활성 화 세포 선별 ( magnetic activated cell sorting ; MACS ) CD 4 + T 세포 분리 키트 ( Miltenyi Biotec , Cologne , Germany ) 를 사용 하 여 야생 형 Balb / c 마우스 의 비장 으로부터 naive CD 4 + T 세포 를 분리 하 였 다 . 분리 된 naive CD 4 + T 세포 는 인산 완충 식염수 ( PBS ) , VIP ( neuropeptide vasoactive intestinal peptide ) 또는 AIP - YK 1 내지 4 를 처리 한 후 RPMI 배지 에서 3 일 동안 배양 하 였 다 . 상기 RPMI 배지 는 Th 17 세포 분화 를 자극 하 기 위하 여 1 g / ㎖ 항 - CD 3 ( eBioscience , San Diego , CA , USA ) , 1 g / ㎖ 항 - CD 28 ( eBioscience ) , 2 ng / ㎖ TGF - β ( R & D 시스템 , Minneapolis , MN , USA ) , 20 ng / ㎖ IL - 6 ( BioLegend , San Diego , CA , USA ) , 5 μ g / ㎖ 항 - IFN - γ ( BioLegend ) 및 5 g / ㎖ 항 - IL - 4 ( BioLegend ) 을 포함 한다 . 배양 후 항 - CD 3 및 항 - CD 28 항체 로 24 시간 동안 자극 하 여 Th 17 세포 로부터 분비 된 IL - 17 의 수준 을 qPCR 로 측정 하 였 다 .