메 발 로 놀 아세톤 ( 1 . 0 g , 7 . 7 mmol ) ( CAS # 503 - 48 - 0 ) 을 메 발론 산 의 칼륨염 을 생성 시키 기 위해 물 ( 7 . 7 ㎖) 에 용해 하 고 수산화 칼륨 ( 7 . 7 mmol ) 으로 처리 한 시럽 으로서 Sigma - Aldrich ( WI , USA ) 에서 공급 받 았 다 . 메 발론 산 으로 의 변환 을 1 H NMR 분석 으로 확증 하 였 다 . 14 , 000 rpm 에서 5 분 동안 원심 분리 하 여 세포 를 제거 한 후 상청 액 의 300 ㎕ 분취 액 을 900 ㎕ 의 H 2 O 에 첨가 하 여 HPLC 분석 을 위한 샘플 을 제조 하 였 다 . 이후 과염소산 ( 70 % 용액 의 36 ㎕) 을 첨가 한 후 , 얼음 상 에서 5 분 동안 혼합 및 냉각 하 였 다 . 이후 샘플 을 다시 원심 분리 하 고 ( 14 , 000 rpm 에서 5 분 ) , 상청 액 을 HPLC 에 옮겼 다 . 메 발론 산 표준물 ( 20 , 10 , 5 , 1 및 0 . 5 g / L ) 을 동일 한 방식 으로 제조 하 였 다 . 5 mM 황산 으로 0 . 6 ㎖/ 분 에서 용리 된 BioRad Aminex 87 - H + 컬럼 ( 300 mm , 7 . 0 mm ) 을 사용 하 여 굴절 률 ( RI ) 검출 을 갖 는 HPLC 에 의해 메 발론 산 의 분석 ( 20 uL 주입 부피 ) 을 수행 하 였 다 . 이 들 조건 하 에 18 . 5 분 에서 락톤 형태 로서 메 발론 산 을 용리 하 였 다 .