10 mL 배양 배지 [ high glucose DMEM ( Gibco , Cat no . 11995 - 065 ) , 10 % Fetal bovine Serum ( HyClone ) , 1 % MEM Non - Essential Amino Acids Solution ( 100 X ) ( Gibco , Cat no . 11140 - 050 ) ] 가 포함 된 100 mm 세포 배양 디쉬 ( dish ) 에 중간 엽 줄기세포 및 유도 만능 줄기세포 유래 기능 강화 중 간엽 전구 세포 ( BxC ) 를 각각 디쉬 당 1000 세포 씩 접종 하 고 21 일 동안 배양 하 였 다 . 배양 된 세포 가 부착 된 디쉬 를 PBS 로 2 회 세척 하 고 상온 에서 약 2 분 간 95 % 메탄올 로 고정 하 였 다 . 고정 된 세포 를 PBS 로 3 회 세척 한 후 , 0 . 5 % 크리스탈 바이올렛 용액 [ crystal violet ( sigma , C - 3886 , USA ) 5 g , 메탄올 100 ml ] 을 첨가 한 후 5 분 동안 염색 하 고 물 로 세척 후 실온 에서 건조 하 였 다 . 각 디쉬 에서 50 개 이상 의 세포 로 구성 된 콜로니 의 수 를 계수 하 여 비교 하 였 다 .