[ 웨스턴 블 럿 ] 세포 배양 은 동일 하 며 , ASO 처리 후 48 시간 이 되 었 을 때 배양 된 세포 를 수확 하 여 PBS 로 2 회 수세 하 고 , RIPA buffer ( Cell Signaling , Cat . No . 9806 ) 로 용해 하 였 다 . BCA 용액 ( Thermo , Cat . No . 23225 ) 를 이용 하 여 단백질 정량 을 하 였 고 , 동량 의 단백질 을 10 % SDS - PAGE gel 을 이용 하 여 분리 하 였 다 . 분리 된 단백질 을 PVDF 멤 브레인 으로 ( Millipore , Cat . No . IPVH 00010 ) 전달 한 후 5 % 탈지유 완충 용액 에서 1 시간 블로킹 을 하 였 다 . 항 - MLPH 와 ( Proteintech , Cat . No . 10338 - 1 AP ) 항 - β - 액틴 을 ( Sigma , Cat . No . A 3854 ) 1 차 항체 로 사용 하 고 , 각각 의 항체 에 따라 goat anti - Rabbit 을 ( CST , Cat . No . 7074 ) 2 차 항체 로 사용 하 였으며 , HRP 기질 을 ( Millipore , Cat . No . WBKLS 0500 ) 이용 하 여 발광 시키 고 겔 독 을 ( Geldoc , ATTO ) 통해 발광 정도 를 측정 하 였 다 . 웨스턴 블 럿의 결과 를 토대 로 각 밴드 의 발현 정도 를 Image - J 프로그램 으로 정량 하 여 MLPH 의 상대 적 인 발 현양 을 그래프 로 변환 하 였 다 .