이후 , 1 차 항체 ( COX - 2 , iNOS ) 를 희석 하 여 4 ℃ 에서 overnight 반응 시킨 다음 다시 TBST 를 이용 하 여 10 분 간격 으로 3 회 세척 하 고 membrane 을 HRP 가 중합 된 각각 의 2 차 항체 를 희석 하 여 45 분 동안 반응 시켰 다 . Chemi - luminescence Bioimaging Instrument ( NeoScience Co . , Ltd . , Korea ) 를 사용 하 여 COX - 2 , iNOS 밴드 및 정량 을 측정 하 였 다 .