역위 및 대형 결실 의 검출 을 위한 비 - 정량 적 PCR . 하 기 프라이머 세트 를 사용 하 여 HBG 1 및 HBG 2 의 영역 에서 gDNA 를 증폭 시켰 다 . P 1 : 포워드 프라이머 5 '- TGCTGAGATGAAACAGGCGT - 3 '( SEQ ID NO : 257 ) , 리버스 프라이머 5 '- TTAGGCATCCACAAGGGCTG - 3 '( SEQ ID NO : 258 ) , HBG 1 과 HBG 2 표적 / 표적 - 외 부위 사이 의 결실 에 대해 예상 된 약 2 . 8 kb 생성물 , HBG 1 과 HBG 2 표적 / 표적 - 외 부위 사이 의 역위 에 대해 예상 된 약 7 . 7 kb 생성물 , 대형 결실 또는 역위 가 없 는 경우 에 대해 예상 된 약 7 . 7 kb 생성물 ( 개별 적 으로 HBG 1 및 / 또는 HBG 2 표적 / 표적 - 외 부위 에서 비 편집 된 또는 더 작 은 삽입 결실 ) . P 2 : 포워드 프라이머 5 '- GCTCTACAAATGGAACCCAACC - 3 '( SEQ ID NO : 259 ) , 리버스 프라이머 5 '- CTGCTCTGATCTCTAACACCTCA - 3 '( SEQ ID NO : 260 ) , HBG 1 과 HBG 2 표적 / 표적 - 외 부위 사이 의 역위 에 대해 어떠 한 생성물 도 예상 되 지 않 음 , HBG 1 과 HBG 2 표적 / 표적 - 외 부위 사이 , 대형 결실 또는 역위 에 대해 예상 된 약 3 . 8 kb 생성물 ( 개별 적 으로 HBG 1 및 / 또는 HBG 2 표적 / 표적 - 외 부위 에서 비 편집 된 또는 더 작 은 삽입 결실 ) . P 3 : 포워드 프라이머 5 '- GAAGATACAGCTTGCCTCCGA - 3 '( SEQ ID NO : 261 ) , 리버스 프라이머 5 '- TTGCTGAGATGAAACAGGCGT - 3 '( SEQ ID NO : 262 ) , HBG 1 과 HBG 2 표적 / 표적 - 외 부위 사이 의 역위 에 대해 어떠 한 생성물 도 예상 되 지 않 음 , HBG 1 과 HBG 2 표적 / 표적 - 외 부위 사이 의 역위 에 대해 예상 된 약 1 . 75 kb 생성물 , 대형 결실 또는 역위 에 대해 어떠 한 생성물 도 예상 되 지 않 음 ( 개별 적 으로 HBG 1 및 / 또는 HBG 2 표적 / 표적 - 외 부위 에서 비 편집 된 또는 더 작 은 삽입 결실 ) . PCR 생성물 을 0 . 5 , 1 , 1 . 5 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 8 and 10 kb 밴드 를 함유 하 는 참조 사다리 와 함께 아가로스 겔 상 에서 시각 화 하 였 다 ( L ; New England Biolabs 카탈로그 # N 3232 L ) . 선택 생성물 을 지시 된 바 와 같이 단리 하 고 , 실시 예 2 . 1 에 기재 된 바 와 같이 NGS 를 받 게 하 였 다 .