HCV 레 플리 콘 세포주 는 로만 ( Lohman ) 등 ( Lohmann , V . , F . Korner , J . - O . Koch , U . Herian , L . Theilmann , and R . Bartenschlager 1999 , Science 285 : 110 - 113 ) 에 의해 기재 된 바 의 콜로니 로부터 단리 하 였 고 , 모든 실험 에 사용 하 였 다 . 간략히 말 하 면 , 레 플리 콘 클론 을 ScaI 로 선형 화 한 다음 , RNA 전 사물 을 제조 업자 의 지시 에 따라 T 7 메가 스크립트 ( MegaScript ) 전사 키트 ( 앰 비온 ( Ambion ) , 미국 텍사스 주 오스틴 ) 를 사용 하 여 시험관 내 합성 하 였 다 . 10 내지 20 ㎍ 의 시험관 내 - 전사 레 플리 콘 RNA 를 제조 업자 의 프로토콜 에 따라 DMRIE - C 시약 ( 인비 트로겐 코 포레이 션 ( Invitrogen Corporation ) , 미국 캘리포니아주 칼스 배드 ) 을 사용 한 형질 감염 에 의해 4 - 5 x 106 개 Huh - 7 세포 내 로 도입 시켰 다 . 24 h 후 에 , 0 . 5 mg / mL 게 네 티 신 ( G 418 , 기브 코 - BRL ( Gibco - BRL ) , 미국 메릴랜드 주 록빌 ) 을 함유 하 는 선택 배지 를 첨가 하 고 , 배지 를 3 내지 5 일 마다 교체 하 였 다 . 대략 4 주 후 , 세포 를 추가 분석 을 위해 증대 시켰 다 . 세포 를 10 % 열 - 불활성화 송아지 혈청 ( 시그마 ( Sigma ) ) , 페니실린 / 스트렙토마이신 , 및 0 . 5 mg / ml G 418 을 함유 하 는 DMEM ( 기브 코 - BRL , 미국 메릴랜드 주 록빌 ) 중 에서 37 ℃ 에서 유지 시켰 다 .