HEK 293 세포 가 렌 티 바이러스 형질도입 에 의해 높 은 수준 의 인간 , 생쥐 또는 시노 몰구 스 원숭이 TIGIT 를 안정 되게 발현 하 도록 가공 되 었 다 . 대략 100 , 000 개 의 부모 HEK 293 ( TIGIT - 음성 ) 세포 , 또는 인간 , 생쥐 또는 시노 몰구 스 원숭이 를 과다 발현 하 는 HEK 293 세포 가 실온 에서 5 분 동안 100 nM 의 각 항 - TIGIT 항체 로 염색 되 었 다 . 세포 는 이후 , 세 척 완충액 으로 2 회 세척 되 고 , 그리고 얼음 위 에서 15 분 동안 , PE 에 접합 된 항 인간 IgG 와 함께 배양 되 었 다 . 세포 는 이후 , 세 척 완충액 으로 2 회 세척 되 고 , 그리고 FACS Canto II 기기 ( BD Biosciences ) 에서 유세포 분석법 에 의해 분석 되 었 다 . 배경 대비 배수 ( FOB ) 가 표적 - 음성 세포 에 결합 된 항 - TIGIT 클론 의 MFI 에 의해 나눗셈 된 , 표적 - 양성 세포 에 결합 된 항 - TIGIT 클론 의 중앙 형광 강도 ( MFI ) 로서 계산 되 었 다 .