조제 한 효모 세포 를 , 버퍼 A ( 1 M 소르비톨 , 0 . 1 M EDTA , pH 7 . 4 ) 에 현 탁 하 고 , 2 - 메르 캅 토 에탄올 ( 최종 농도 14 mM ) 및 100 U zymolase ( 10 mg / ml ) 를 첨가 하 여 , 용액 이 투명 해질 때 까지 30 ℃ 로 1 시간 , 교반 하 면서 인 큐 베이트 하 였 다 . 550 g 으로 10 분 간 원심 하 여 프로토플래스트 를 회수 후 , 버퍼 B ( 50 mM Tris - HCl , pH 7 . 4 , 20 mM EDTA ) 에 현 탁한 다음 , 도데 실 황산나트륨 을 1 %( w / v ) 가 되도록 더 한 후 , 65 ℃ 로 30 분 간 인 큐 베이트 하 였 다 . 이어서 , 체적 비 2 / 5 량 의 5 M CH 3 COOK 를 첨가 하 여 혼합 한 다 음 30 분 간 빙 랭 후 , 15 , 000 g 으로 30 분 간 원심 하 여 상청 액 을 회수 하 였 다 . 회수 한 상청 액 에 체적 비 1 / 10 량 의 3 M CH 3 COONa 와 등량 의 이소프로판올 을 더 해 잘 섞 고 , 15 , 000 g 4 ℃ 로 30 분 간 원심 하 여 얻 어 진 침전 을 70 % 에탄올 로 린스 하 여 회수 하 였 다 . 침전 을 건조 시킨 후 , 1 ml 의 TE 버퍼 ( 10 mM Tris - HCl , pH 8 . 0 , 1 mM EDTA ) 에 용해 하 고 , 40 μ g / ml 가 되 도록 RNa se A ( Sigma 사제 ) 를 더 해 37 ℃ 로 1 시간 인 큐 베이트 하고 , 이어서 , 혼합액 에 proteinase K ( Sigma 사제 ) 를 500 μ g / ml 및 도데 실 황산나트륨 을 1 %( w / v ) 가 되도록 더 한 후 , 이것 을 55 ℃ 로 약 16 시간 진탕 하 였 다 . 진탕 이 끝난 후 , 당해 혼합물 을 페놀 [ 1 M Tris - HCl ( pH 8 . 0 ) 로 포화 ] · 클로로포름 추출 처리 하 였 다 . 수층 을 회수 하 고 , 이것 에 NaCl 을 0 . 5 N 이 되도록 더 한 후 , 이것 을 에탄올 침전 처리 하 여 생긴 침전 을 회수 하 였 다 . 회수 된 침전 을 70 % 에탄올 로 린스 함 으로써 , 게놈 DNA 를 얻 었 다 .