약물 링커 화합물 중간체 6 을 , 그러 한 개시 에 대해 참조 로 본원 에 포함 된 , 국제 공개 번호 . WO 2007 / 011968 에 기술 된 방법 에 따라 제조 하 였 다 . 글루쿠론산 잔기 내 에서 C - 4 아세테이트 의 β - 제거 로부터 소 정량 의 불순물 을 감소 시키 는 , 화합물 7 을 제공 하 기 위하 여 본 발명 의 방법 에 의한 화합물 6 의 단계 식 탈 보호 를 다음 방식 으로 달성 한다 . 화합물 6 을 둥근 바닥 플라스크 에 넣 은 후 동등 한 부피 의 THF 및 MeOH 를 첨가 한다 . 고체 를 완전히 용해 시킨 후 , 용액 을 얼음 조 에서 냉각 시킨다 . 메틸 마그네슘 아이 오다 이드 용액 ( Et 2 O 중 의 3 M ) ( 5 당량 ) ( Sigma - Aldrich , cat # 254363 ) 을 적상 방식 으로 첨가 하 고 , 온도 를 5 ℃ 아래 로 ( 내부 ) 유지 되 도록 조절 한다 . 반응 혼합물 을 실온 에 도달 하 도록 허용 하 고 밤새 교반 하 여 에스터 교환 반응 을 완료 하 였 는데 , 그것 은 아세테이트 작용기 를 탈 보호 하 지만 카르복시산 작용기 의 에틸 에스터 보호 를 유지 한다 . 그런 후 반응 혼합물 을 얼음 조 에서 다시 냉각 시키 고 수중 의 수산화 리튬 ( 12 당량 ) 을 서서히 첨가 하 여 FMOC 및 메틸 에스터 보호기 를 제거 한다 . 온도 를 실온 으로 점차 증가 되 도록 허용 한다 . 반응 혼합물 을 셀라이트 를 통해 여과 하 여 FMOC 관련 부산물 을 제거 한다 . 화합물 7 생성물 의 순도 는 분석 용 HPLC 에 의해 평가 하 여 β - 제거 불순물 의 양 을 측정 할 수 있 고 , 또는 측정 은 다음 과 같이 약물 링커 화합물 ( 9 ) 이 전체 적 으로 탈 보호 된 화합물 7 을 DMF 중 의 2 , 5 - 다 이옥 소피 롤리 딘 - 1 - 일 6 -( 2 , 5 - 다 이 옥소 - 2 , 5 - 다 이 하이드로 - 1 H - 피롤 - 1 - 일 ) 헥사 노 에이트 ( mc - OSu , 8 ) 로 다이 - 아이소프로필 다이에틸 아민 ( DIPEA ) 의 존재 하 에 축합 함 으로써 얻 어 질 때 까지 지연 될 수 있 다 :