단백질 분석 은 Western blotting 방법 에 의해 수행 하 였 다 . 1 × 106 APPswe 세포 를 60 ㎜ dish 에서 배양 하 고 24 시간 후 DMSO 또는 실시 예 1 의 AM 을 DMSO 에 용해 시켜 10 , 50 ㎍/㎖ 의 농도 로 처리 하 였 다 . 상기 DMSO 에 용해 된 실시 예 1 의 AM 은 DMSO 에 50 ㎎/㎖ 의 농도 로 용해 시킨 것 을 희석 하 여 사용 하 였 다 . 37 ℃ 의 인큐베이터 에서 overnight 배양 한 다음 PMSF ( p h e n ylmethanesulfonylfluoride ) 존재 하 에 배양액 과 세포 를 회수 하 였 다 . 세포 의 경우 PBS ( Phosphate buffered saline ) 로 세척 한 다음 protease inhibitor ( Sigma , St . Louis , MO ) 를 첨가 한 cell lysis buffer ( 150 mM NaCl , 50 mM Tris - HCl , pH 7 . 4 , 0 . 5 % NP - 40 , 0 . 5 % sodium deoxycholate , 5 mM EDTA ) 를 넣 고 분쇄 하 여 시료 로 사용 하 였 다 . 배양액 과 세포 분쇄 물 의 단백질 50 ㎍ 을 7 %, 14 % Tris - glycine SDS - PAGE 및 16 . 5 % Tris - tricine SDS - PAGE 로 분리 한 후 , sAPP α 특이 적 항체 및 APP 특이 적 항체 를 이용 하 여 immunoblotting 에 의해 sAPP α 및 APP 의 단백질 양상 을 검출 하 였 다 . 단백질 밴드 를 Image J 분석 프로그램 ( NIH 제공 ) 에 의해 정량 하 였으며 actin 밴드 를 기준 으로 보정 하 였 다 .