세 번 째 단계 는 고정 화 효소 의 제조 단계 이 다 . 질량 분 율 이 1 % 인 키 토산 ( 수용성 ) 용액 에 적당 한 양 의 초산 을 첨가 한 후 자력 으로 30 분 이상 믹 싱하 여 키토산 초산 용액 을 제조 하 며 고압 주사 펌프 를 사용 하 여 상기 용액 100 mL 를 질량 분 율 이 3 % 인 삼 인산나트륨 용액 에 주입 하 여 1 ~ 2 시간 정도 고정 시켜 입도 가 균일 하 고 형태 가 규칙 적 인 백색 의 키 토산 구체 를 얻 은 뒤 여과 시키 고 이온 수 로 수차례 세척 한다 . 제조 된 키 토산 구체 를 질량 분 율 이 0 . 125 % 인 글루타르 알데히드 수용액 이 담긴 비커 에 넣 고 37 ℃, 170 g 의 테이블 환경 에서 2 ~ 4 시간 활성 화 시켜 활성 화 된 키 토산 미소 구체 를 얻 어 낸다 .