시알 산 함량 에 따라 폴리펩티드 의 이량체 등전점 이 변하 는지 확인 하 기 위해 , 실험 예 7 에서 분리 한 SAlow , SAmedi 및 SAhigh 를 IEF 샘플 용액 과 혼합 시킨 후 , pH 3 - 7 IEF gel ( Invitrogen ) 에 로딩 ( loading ) 하 여 , 100 V 조건 에서 1 시간 , 200 V 조건 에서 1 시간 , 500 V 조건 에서 30 분 동안 순차 적 으로 전기영동 하 였 다 . 전기영동 이 끝난 후 , 겔 ( gel ) 은 12 % 트리클로로아세트산 ( Trichloroacetic acid ) 와 3 . 5 % 설포살리실산 ( Sulfosalicylic acid ) 를 포함 하 는 고정 용액 에 30 분 간 반응 시킨 후 , 증류수 로 세척 하 였 다 . 단백질 은 쿠마시 브릴리언트 블루 ( Coomassie Brilliant Blue ) 용액 으로 염색 하 였 다 .