단백질 : Fab 복합체 를 제조 하 고 , 적어도 2 시간 동안 4 ℃ 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 샘플 , 희석제 , 켄 칭 및 환원 용액 을 함유 하 는 4 개 의 96 - 웰 플레이트 를 액체 - 취 급기 에 로딩 한 후 에 각각 의 실험 을 시작 하 였 다 . 온 - 교환 실험 시작 을 위해 50 μ L 의 HER 3 또는 HER 3 : Fab 복합체 를 150 μ L D 2 O 완충제 로 희석 하 였 다 . 혼합물 을 200 μ L 환원 완충제 를 1 분 동안 첨가 하 여 환원 시킨 후 에 600 μ L 의 켄 칭 완충제 로 켄 칭 하 였 다 . 모든 액체 취급 단계 이후 의 전체 부피 는 약 1 mL 였 다 . 혼합 되 면 , 켄 칭 된 용액 을 크로마토그래피 시스템 에 주사 하 여 , 여기 서 이 를 자동 소화 시키 고 , 분리 하 고 , LCMS 에 의해 분석 하 였 다 . 샘플 과 대 조군 사이 의 중수소화 의 평균 변화 를 샘플 과 대 조군 의 중수소 흡수 수준 사이 의 차이 로 계산 하 였 다 .