효소 역가 측정 을 위해서 PDF - FDH 커플 된 어 세이 를 구축 하 였 다 . 유전자 재조합 기술 에 의해 제조 된 S . aureus PDF 을 사용 하 였 다 . 역가 측정 은 50 mM HEPES 완충 용액 ( pH 7 . 5 ) 중 에서 수행 하 며 기질 로 는 f - MAS ( N - formylmethionine - alanine - serine ) 4 mM , NAD 2 mM , BSA 1 mg / ml 을 사용 하 고 PDF 를 30 - 50 nM 사용 하 고 , FDH ( formate dehydrogenase ) 는 0 . 05 Unit 를 사용 한다 . 효소 를 첨가 하 고 상온 에서 60 분 반응 시킨 후 UV - spectrometer 를 이용 하 여 340 nm 에서 NADH 의 흡광 도 증가 를 측정 한다 . 저해 능 을 평가 한 화합물 은 디 메 칠 설 폭 사이드 ( DMSO ) 용매 에 용해 시켜 전체 반응 액 의 5 % 이내 로 첨가 하 여 효소 저해 능 을 평가 한다 . 효소 저해 능 은 시험 화합물 이 없 는 상태 에서 의 NADH 증가 정도 에 대한 , 시험 화합물 의 NADH 증가 정도 를 백분 율 로 표시 하 며 50 % 의 효소 활성 을 저해 하 는 각 시험 화합물 의 농도 를 IC 50 으로 결정 한다 .