도 9 는 폐 염 즘 및 NF - κ B 활성 화 에 대한 안티 센스 Rac 올리 고 뉴클레오티드 처리 의 효과 를 나타낸다 . ( A ) OVA 자극 으로 유발 되 는 기관지 내 호산구 침윤 의 과정 에서 Rac 의 관련 성 을 확인 하 기 위해 , 안티 센스 올리 고 뉴클레오티드 ( 체중 당 1 . 25 mg / kg ) 를 자극 24 시간 및 4 시간 전 에 마우스 의 꼬리 정맥 으로 주사 하 였 다 . OVA 자극 48 시간 후 , 마우스 를 희생 시켜 BAL dor 및 폐 조직 을 얻 었 다 . BAL 액 의 세포 를 슬라이드 글라스 에 바르 고 제조사 의 권고 에 따라 헤마 컬러 ( Hemacolour ) 로 염색 하 였 다 . 폐 조직 은 정상 , 버퍼 , 대 조군 Rac 올리 고 뉴클레오티드 ( 대 조군 Rac ) 또는 안티 센스 Rac 올리 고 뉴클레오티드 ( asRac ) 처리 된 마우스 로부터 얻 었 다 . 폐 조직 을 10 % 포르말린 으로 고정 시키 고 , 탈수 하 여 파라핀 에 포 매시 켰 다 . 상기 조직 을 6 μ m 절편 으로 자르 고 헤마톡실린 & 에오신 으로 염색 하 였 다 . ( B ) OVA 자극 이 NF - κ B 활성 을 유도 하 고 유도 된 NF - κ B 가 Rac 에 의해 매개 되 는지 를 확인 하 기 위하 여 , 안티 센스 Rac 올리 고 뉴클레오티드 처리 된 마우스 를 이용 하 여 EMSA ( electropholetic mobility shift assay ) 를 수행 하 였 다 . 핵 추출물 을 상기 폐 조직 으로부터 깨끗이 분리 하 고 실온 에서 NF - κ B 결합 공통 또는 돌연변이 서열 을 포함 하 는 32 P - 표지 된 이중 가닥 올리 고 뉴클레오티드 로 인 큐 베이 션 하 였 다 . DNA - 단백질 복합체 를 비변 성 조건 ( nondenaturing condition ) 하 에서 6 % 아크릴아마이드 겔 에서 전기영동 함 으로서 분리 하 고 , 방사능 사진 촬영 을 수행 하 였 다 . ( C ) 유조직 ( parenchyma ) 내 혈관 ( blood vessel ) 으로부터 호산구 내피세포 이동 ( eosinophil transendothelial migration ) 의 과정 에 결정 적 인 역할 을 하 는 것 으로 알려져 있 는 , VCAM - 1 의 발현 수준 을 확인 하 기 위해 , 전 세포 용해 물 ( whole cell lysate ) 을 폐 조직 으로부터 얻 어 웨스턴 블롯 분석 을 수행 하 였 다 .