원형질체 현탁액 의 200 ㎕ 분취 액 을 1 . 9 ㎍ pUWL 201 PW 또는 2 . 9 ㎍ pUWL 201 _ iso 로 형질 전환 시켰 다 . 비 - 선별 성 R 5 - 한 천 플레이트 상 에서 28 ℃ 에서 하룻밤 동안 인 큐 베이 션 한 후 , 티 오스트 렙톤 ( 250 ㎍/㎖) 을 함유 하 는 R 3 - 오버레이 한천 에서 4 일 동안 추가 인 큐 베이 션 하 여 양성 형질전환 체 를 선별 하 였 다 . 티 오스트 렙톤 내성 형질전환 체 를 Plasmid Mini 키트 ( Qiagen ) 를 사용 하 는 플라스미드 제제 에 의해 pUWL - 플라스미드 의 존재 하 에서 시험 하 였 다 . 준비 된 플라스미드 DNA 를 대장균 DH 5 α 내 로 재 도입 하 여 , 제한 분석 으로 분석 하 기 에 충분 한 양 의 플라스미드 DNA 를 생성 시켰 다 . 양성 형질전환 체 를 암피실린 - 함유 L - 한 천 플레이트 상 에서 선별 하 고 NdeI 및 BamHI 엔 도 뉴클레아제 로 플라스미드 DNA 를 소화 시켜 삽 입물 분석 을 수행 하 였 다 . 이소프렌 신 타아 제 를 양성 pUWL 201 iso 클론 에서 1 . 7 kb 절편 으로서 확인 하 였으나 , 대 조군 균주 ( pUWL 201 PW ) 에서 는 이러 한 절편 이 관찰 되 지 않 았 다 .