피질 뇌 샘플 을 배너 헬스 리서치 인 스티 튜 트 ( Banner Health Research Institute ) ( 애리조나주 선 시티 ) 로부터 입수 하 였 다 . 환자 12 - 18 , 01 - 03 및 04 - 51 로부터 의 MSA 뇌 조직 을 면역 고갈 실험 에 사용 하 였 다 . 뇌 샘플 을 여과 된 PBS ( 1 ml PBS / 100 mg 조직 습윤 중량 ) 중 에서 콘 테스 마이크로 ( KONTES Micro ) 초음파 세포 교란 기 ( 출력 40 , 튠 50 ) 를 사용 하 여 2 x 10 초 동안 초음파 처리 하 였 다 . 샘플 을 2 ml 에 펜 도르 프 튜브 에 넣 고 , 튜브 를 초음파 처리 동안 습식 얼음 상 에 유지 시켰 다 . 뇌 용해 물 을 3 , 000 g , 4 ℃ 에서 5 분 동안 원심 분리 하 였 다 . 상청 액 분취 물 을 액체 질소 중 에서 동결 시키 고 , - 80 ℃ 에서 저장 하 였 다 . α Syn ELISA ( 총 & pS 129 ) 를 포함 한 QC 검정 을 수행 하 였 다 . 펠릿 을 고속 - 회전 단리 하 기 위해 , PBS 중 100 mg / ml 로 이전 에 제조 된 뇌 균질 물 을 빙 냉 PBS 중 에서 33 . 3 mg / ml 로 3 - 배 희석 한 후 , 4 ℃ 에서 30 분 동안 100 , 000 x g 에서 원심 분리 하 였 다 . 상청 액 을 제거 하 고 폐기 하 였 다 . 펠릿 을 출발 샘플 과 동일 한 부피 로 빙 냉 PBS 중 에 재현 탁 시켰 다 .