RIN 5 F ( 쥐 인슐린종 ( Rat Insulinoma ) ) 세포 를 37 ℃, 가습 인큐베이터 ( 5 % CO 2 ) 에서 , 소듐 피 루 베이트 ( 1 mM ) HEPES 및 글루 코즈 ( 4 . 5 g / L ) 으로 보충 된 RPMI 1640 배지 에서 배양 시켰 다 . 트립신 처리 후 , RIN 5 F 세포 를 웰 당 0 . 2 X 106 개 세포 의 농도 로 12 웰 플레이트 에 심 었 다 . 세포 를 80 % 콘 플 루 엔스 ( confluence ) 까지 밤새 배양 하 고 다음 과 같이 인슐린 분비 실험 을 수행 하 였 다 ( Montrose - Rafizadeh C , et al . , Mol . Cell . Endo . 1997 , 130 , 109 . ; Wang , X . , et al . , Endocrinology 2001 , 5 , 1820 ) .