THP - 1 세포 를 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션 ( American Type Culture Collection ) 으로부터 구매 하 고 , 공급 업체 로부터 의 지침서 에 따라 계대 배양 하 였 다 . 실험 전 에 , 세포 를 10 % 열 불활성화 FBS , 페니실린 ( 100 유닛 / ml ) 및 스트렙토마이신 ( 100 μ g / ml ) 함유 RPMI 1640 중 에서 배양 하 고 , 실험 설정 전 에 대 수기 로 유지 하 였 다 . 실험 전 에 , THP - 1 을 PMA ( 포르 볼 ( Phorbol ) 12 - 미리 스테이트 13 - 아세테이트 ) ( 10 μ g / ml ) 로 24 시간 동안 처리 하 였 다 . 실험 일 에 , 배지 를 제거 하 고 , 부착 세포 를 트립신 으로 2 분 동안 처리 하 고 , 이어서 세포 를 수집 하 고 , PBS ( 포스 페이트 완충제 염수 ) 로 세척 하 고 , 회전 침강 시키 고 , 2 % 열 불활성화 FBS 함유 RPMI 중 에 1 x 106 개 세포 / ml 의 농도 로 재현 탁 시키 고 , 100 μ l 을 96 웰 플레이트 에 플 레이팅 하 였 다 . 화합물 을 디 메틸 술 폭 시드 ( DMSO ) 중 에 용해 시키 고 , 원 하 는 농도 ( 예 를 들 어 , 100 , 30 , 10 , 3 , 1 , 0 . 3 또는 0 . 1 μ M ) 가 달성 되 도록 배양 배지 에 첨가 하 였 다 . 세포 를 화합물 과 함께 4 시간 동안 인 큐 베이 션 하 였 다 . 무 세포 상청 액 을 수집 하 고 , IL - 1 β 의 생산 을 ELISA 에 의해 평가 하 였 다 . 비 히 클 단독 대 조군 을 각각 의 실험 과 공동 으로 시험 하 였 다 . 최종 DMSO 농도 는 1 % 였 다 . 화합물 은 PMA - 분화 THP - 1 세포 에서 IL - 1 β 생산 의 용량 - 관련 증가 를 나타내 었 다 .