AP 염색 ( Alkaline Phosphatase staining ) 을 위해 상기 실시 예 1 - 2 를 통해 생 성 및 유지 된 iPSC 를 5 x 103 개 의 세포 를 비트 로 넥 틴 이 코팅 된 6 - 웰 플레이트 에 도말 하 고 5 일 동안 확장 하 였 다 . 미분화 iPSC 콜로니 의 염색 은 알 칼라 인 포스파타아제 검출 키트 ( Alkaline phosphatase detection kit ; Millipore , Billerica , MA , USA ) 를 사용 하 여 수행 하 였 다 . 배양액 을 제거 하 고 , 4 % 포름알데하이드 ( Paraformaldehyde ) 로 1 - 2 분 간 고정 하 였 다 . 남 아 있 는 고정액 을 0 . 05 % Tween - 20 을 포함 하 는 PBS 로 세척 하 였 다 . Fast Red Violet , 나프톨 AS - BI 인산염 용액 및 물 을 2 : 1 : 1 의 비율 로 혼합 하 여 15 분 간 염색 하 였 다 . 0 . 05 % Tween - 20 을 포함 하 는 PBS 로 세척 한 뒤 PBS 를 넣 어 건조 를 방지 하 였 다 . 염색 된 콜로니 를 Leica DMi 8 현미경 을 사용 하 여 측정 하 였 다 . 상기 실험 으로 iPSC 의 전분 화 능 을 확인 하 였 다 ( 도 1 C ) .