4 ℃ 에서 성장 인자 가 감소 된 Matrigel ( Corning ) 을 밤새 해동 하 였 다 . 미리 냉각 된 24 - 웰 플레이트 의 각 웰 을 100 ㎕ Matrigel 로 코팅 하 고 40 분 동안 37 ℃ 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . HUVEC ( 3 x 104 세포 ) 을 100 ㎕ 의 EGM - 2 배지 에 현 탁 시키 고 400 ㎕ 의 대식세포 조건 화 배지 에 분주 하 고 , 37 ℃ 5 % CO 2 조건 으로 12 시간 동안 배양 하 였 다 . 대식세포 조건 화 배지 는 24 시간 동안 20 mM 의 락트산 을 대식세포 ( 또는 , α - CHC 로 1 시간 동안 전처리 한 대식세포 ) 에 처리 하 여 자극 하 고 , 배지 를 갈 아 준 후 상등 액 을 수집 한 것 을 의미 한다 .