쿠 주 ( 푸 에 라리아 몬타나 ) 이소프렌 신 타아 제 유전자 ( IspS ) 에 대한 단백질 서열 을 GenBank ( AAQ 84170 ) 에서 수득 하 였 다 . 대장균 코돈 사용 을 위해 최적 화 된 쿠 주 이소프렌 신 타아 제 유전자 를 DNA 2 . 0 에서 구매 하 였 다 ( SEQ ID NO : 1 ) . BspLU 11 I / PstI 으로 제한 엔 도 뉴클레아제 소화 시켜 이소프렌 신 타아 제 유전자 를 공급 플라스미드 로부터 제거 하 고 , 겔 - 정제 하 고 , NcoI / PstI 으로 소화 된 pTrcHis 2 B ( Invitrogen ) 에 라 이게 이 션 하 였 다 . 이소프렌 신 타아 제 유전자 내 의 정지 코돈 이 PstI 위치 에 대해 5 ' 가 되 도록 구성 물 을 설계 하 였 다 . 결과 로서 , 구성 물 이 발현 되 는 경우 His - 표지 가 이소프렌 신 타아 제 단백질 에 결합 하 지 않 는다 . 생성 된 플라스미드 , pTrcKudzu 를 서열 분석 으로 확인 하 였 다 ( 도 2 및 3 ) .