3 ) 48 시간 형질전환 한 후 ， 배지 를 폐기 하 여 ， 무균 PBS 으로 세포판 기저 세포 를 두 번 세척 하 고 ， 300 μ L 의 Trizol 용액 을 첨가 하 여 ， RNAiso Plus ( TaKaRa ) 설명서 에 따라 세포 RNA 을 추출 하 고 ， DNA 효소 처리 후 , SuperScriptT ( Invitrogen 회사 , 캐나다 ) 키트 를 사용 하 여 DNAEngine 을 거쳐 cDNA 으로 역전사 하 였 다 . cDNA 을 주형 으로 하 고 , SYBRGreen 법 으로 각 시점 의 형광 PCR 산물 을 실시간 검측 분석 ( Light Cycler Roche 회사 , 독일 ) 하 여 ， hGPRC 6 A 의 발 현량 을 검출 하 도록 한다 . 필요 할 경우 ， 푸 로 마이신 을 사용 하 여 안정 되게 발현 된 세포주 를 선별 한 후 ， qPCR 을 사용 하 여 이 의 유전자 발현 을 검출 하 되 , 실험 결과 는 도 6 A 에 도시 된 바 와 같이 ， 인간 GPRC 6 A 은 Hela 에서 안정 되게 다량 으로 발현 된다 .