사람 유래 각질 형성 세포 ( HaCaT , Human keratinocyte ) 는 ATCC ( American Type Culture Collection ) 에서 구입 하 여 사용 하 였 다 . HaCaT 세포 를 6 웰 플레이트 에 1 x 105 cells / well 의 농도 로 세포 를 접종 하 여 안정 화 시킨 후 , TRPV 1 의 발현 을 위하 여 캡사이신 처리 와 동시 에 실험 시료 를 처리 하 였 다 . 이후 , 24 시간 배양 후 , 용균 버퍼 ( lysis buffer ) 를 이용 하 여 단백질 을 용균 ( lysis ) 하 였 다 . 이후 단백질 BCA 방법 으로 단백질 을 정량 하 여 20 ㎍ 의 단백질 을 취하 여 SDS - PAGE 를 진행 하 였 다 . 그 후 , PVDF membrane 으로 트랜스퍼 ( transfer ) 후 anti - TRPV 1 을 1 : 1000 으로 냉장 에서 4 ℃ 에서 24 시간 처리 한 다음 검출 하 였 다 . 각 밴드 는 베타 - 액틴 ( β - actin ) 으로 정량 하 고 imageJ 1 . 47 소프트웨어 를 이용 하 여 수치 화 하 여 그래프 로 나타내 었 다 . 그 결과 를 표 6 및 도 5 에 에 나타냈 다 .