무게 10 kg 인 랜드레이스 , 요크셔 및 듀 록의 3 원 교잡종 수컷 돼지 ( Medi - pig Korea , 천안 ) 를 수술 전날 저녁 부터 금식 ( 물 은 제외 ) 시킨 후 , 수술 당일 에 케타민 ( 20 mg / kg , 유한양행 ) 및 자일 라진 ( xylazine ) ( 2 mg / kg , 바이엘 코리아 ( 주 ) ) 을 투 여 하 여 마취 시켰 다 . 기관 삽 관 을 통해 엔 플 루 레인 ( enflurane , 중외 제약 ) 으로 호흡 마취 시킨 후 , 근이완제 인 노 큐 론 ( 0 . 1 mg / kg , 한 화제 약 ( 주 ) ) 을 주사 하 고 개복 하 였 다 . 총 문맥 ( portal vein ) 에 튜브 를 연결 하 여 1 단계 관류 용액 ( NaCl 8 g / ℓ, KCl 0 . 4 g / ℓ, NaH 2 PO 4 2 H 2 O 0 . 078 g / ℓ, Na 2 HPO 4 ㆍ 12 H 2 O 0 . 151 g / ℓ, HEPES ( 4 -( 2 - hydroxyethyl ) - 1 - piperazineethane - sulfonic acid , Sigma Chem Co . ) 2 . 38 g / ℓ, EDTA ( e thylenediaminetetraacetic acid , Gibco BRL Co . ) 0 . 19 g / ℓ, 중탄산나트륨 0 . 35 g / ℓ, 글루 코즈 0 . 9 g / ℓ, 페니실린 100 Unit / ㎖, 스트렙토마이신 ( streptomycin ) 10 mg / ㎖, 및 암포 테 리신 B ( amphotericin B ) 25 ㎍/㎖) 을 관류 시킨 후 간 을 적출 하 였으며 , 무균 작업대 에서 2 단계 콜라 게네 이즈 ( collagenase ) 용액 ( 콜라 네 이즈 ( Gibco BRL ) 0 . 5 g / ℓ, 트립신 저해제 ( Gibco BRL ) 0 . 05 g / ℓ, NaCl 8 g / ℓ, KCl 0 . 4 g / ℓ, CaCl 2 0 . 56 g / ℓ, NaH 2 PO 4 ㆍ 2 H 2 O 0 . 078 g / ℓ, Na 2 HPO 4 ㆍ 12 H 2 O 0 . 151 g / ℓ, HEPES 2 . 381 g / ℓ, 중탄산나트륨 0 . 35 g / ℓ, 페니실린 100 Unit / ㎖, 스트렙토마이신 10 mg / ㎖, 및 암포 테 리신 B 25 ㎍/㎖) 을 관류 시켰 다 . 이때 , 인공 심폐 기 ( CapioxSX - 10 , Terumo , Japan ) 를 사용 하 여 간 에 산소 가 충분히 공급 되 도록 하 였 고 , 관류 용액 의 온도 는 모두 37 ℃ 로 유지 시켰으며 , 관류 속도 는 분당 700 ㎖ 이상 이 되 도록 하 였 다 .