리 툭 시 맵 은 사우샘프턴 종합 병원 의 종양학 조제실 에서 제공 받 았 다 . Rit m 2 a ( 마우스 IgG 2 a Fc 리전 을 함유 하 는 리 툭 시 맵 ) 및 WR 17 ( 항 - CD 37 ) , 모든 마우스 IgG 2 a 를 이전 에 기술 된 바 와 같이 생성 하 였 다 ( 18 ) . 항 - Fc γ RIIb mAb ( AT 10 ) 은 사내 에서 제조 되 었 으며 , 이전 에 기술 된 바 와 같이 제조 되 었 다 ( 47 ) . 토시 투모 맵 은 Prof Tim Illidge ( 맨체스터 , 영국 ) 으로부터 제공 받 았 다 . 오 파투 무 맵 및 GA 101 gly ( 비변 형 Fc 리전 으로 글 리코 실화 된 GA 101 ) 를 특허 공개 서열 로부터 사내 에서 제조 하 였 다 . NB : 이 들 mAb 는 CHO 또는 293 F 세포 에서 생성 되 었 으며 , 따라서 임상 용 으로 생성 된 mAb 와 다를 수 있 다 ( 예 를 들 어 , 이 들 의 당질 구조 의 차이 ) . Alexa - 488 및 항 - Alexa 488 시약 을 Invitrogen 에서 구입 하 였 다 . F ( ab ') 2 프레 그 먼 트 의 생 성 은 이전 에 기술 한 바 와 같 다 ( 48 ) . Fab ' 프레 그먼 트 는 20 mM 2 - 머 캅 토 에탄올 과 함께 25 ℃ 에서 30 분 간 배양 한 다음 , 과잉 의 요오드 아세트아미드 를 첨가 하 여 생성 하 였 다 . 사용 된 웨스턴 블롯 팅 항체 는 항 - 액틴 ( AC 74 , Sigma , UK ) 및 항 - 포스 포 - Fc γ RIIb ( Cell Signaling Technology , UK ) 이 었 다 .