면역 글 로 불린 중쇄 ( IgH ) cDNA 를 , IgH 프라이머 MHV 7 ( 5 '- ATGG - GCATC - AAGATGG - AGTCA - CAGA - CCC - AGG - 3 ') [ 서열 번호 3 ] 및 IgG 1 불변 영역 프라이머 MHCG 1 ( 5 '- CAG - TGGATA - GACAGAT - GGG - GG - 3 ') [ 서열 번호 4 ] 를 이용 하 여 PCR 로 증폭 하 였 다 . 마찬가지 로 , 면역 글 로 불린 경쇄 ( IgL ) 를 , 3 가지 다른 Ig κ 프라이 머들 MKV 2 ( 5 '- ATG - GAGACA - GACA - CACTC - CTGC - TATGGG - TG - 3 ') [ 서열 번호 5 ] , MKV 4 ( 5 '- ATG - AGGGCCC - CTGCTCA - GTTTTTT - GGCT - TCTTG - 3 ') [ 서열 번호 6 ] 및 MKV 9 ( 5 '- ATGG - TATCCAC - ACCTCA - GTTC - CTTG - 3 ') [ 서열 번호 7 ] 를 각각 프라이머 MKC ( 5 '- ACTG - GATGGTGGGA - AGATGG - 3 ') [ 서열 번호 8 ] 과 조합 사용 하 여 , 증폭 하 였 다 . 모든 증폭 산물 들 을 TOPO - TA 클로닝 키트 ( Invitrogen , Carlsbad , CA ) 를 제조사 의 지침 에 따라 사용 하 여 , pCR 2 . 1 - TOPO 벡터 에 직접 연결 하 였 다 .