비장 세포 를 수득 하 여 2 마리 의 고 역가 의 BALB / c 마우스 또는 유전자 도입 마우스 로부터 모아서 P 3 - X 63 - Ag 8 . 653 마우스 골수종 세포 에 단일 융합 과정 으로 PEG 1450 을 사용 하 여 융합 시켰 다 ( 2 : 1 융합 비륭 , 비장 세포 대 골수종 세포 , " "" Antibodies : A Laboratory Manual """, E . Harlow and D . Lane , Cold Spring Harbor Press ) . 융합 후 9 일 동안 성장 시킨 후 , 특이 한 항체 - 생성 하이브리도마 풀 을 , 태그 가 붙 지 않 은 것 과 사람 IgG Fc 태그 가 붙 은 재조합 IL - 21 단백질 을 특이 한 항체 표적 으로서 사용 하 여 다이렉트 & 캡 춰 ELISA 에 의해 확인 하 였 다 . 포지티브 하이브리도마 풀 을 추가 로 수용체 결합 에 대한 리간드 를 차단 하 는 하이브리도마 의 능력 에 대해 분석 하 였 는데 , " 그것 을 IL - 21 수용체 서열 을 발현 하 는 BaF 3 세포 상 의 정제 된 재조합 IL - 21 단백질 의 리간드 - 수용체 상호 작용 후 의 STAT 3 - 인산화 수준 ( "" 인 - STAT 3 중화 분석 "") 으로서 측정 한다 . 조직 배양 배지 로부터 정제 된 단 클론 성 항체 를 그것 이 수용체 서열 을 발현 하 는 Baf 3 세포 상 의 정제 된 재조합 IL - 21 의 리간드 - 수용체 상호 작용 을 차단 하 는 능력 에 대해 특성 확인 하 였 다 ( "" 인 - STAT 3 중화 분석 ""). "" 중화 "" 단 클론 성 항체 를 이 방식 으로 확인 하 였 다 . "