마우스 하이브리도마 는 생성 되 었 고 스크리닝 되 었 으며 양성 클론 은 유사 한 방식 으로 분석 되 었 다 . 3 마리 A / J 마우스 ( Harlan , Indianapolis , Ind . ) 는 하 기 로서 정제 된 트립 타제 단백질 로 면역 화 되 었 다 : 항원 ( EPC , Inc . # TR 913 ) . 완전 한 프로인트 아쥬 반트 ( 제 1 면역 화 ) 또는 불 완전 한 프로인트 아쥬 반트 ( 제 2 , 제 3 , 및 제 4 면역 화 ) 와 혼합 및 1 : 1 유화 후 피하 로 및 복강 내 로 면역 화 에 따라 20 μ g / 마우스 로 투여 된 경우 효소 적 으로 활성 트립 타제 . 부스트 ( 제 5 면역 화 ) 는 아쥬 반트 를 갖 지 않 았 다 . 제 4 면역 화 후 , 면역 화 된 마우스 로부터 혈청 은 ELISA 로 시험 되 었 고 1 : 1 . 28 x 104 의 희석 액 에서 OD 450 > 2 . 16 보다 더 높 은 혈청 역가 를 가진 마우스 는 하이브리도마 융합 을 위하 여 선택 되 었 다 . 107 x 106 단리 된 비장 세포 는 하 기 의 존재 하 에서 융합 을 위하 여 100 x 106 Sp 2 / 0 골수종 세포 ( ATCC ) 와 혼합 되 었 다 : 폴리에틸렌 글리콜 ( Sigma - Aldrich , " Cat . No . P 7777 - 5 G ) . 24 클론 은 트립 타제 에 결합 을 위하 여 스크리닝 되 었 고 트립 타제 효소 적 활성 의 억제 를 위하 여 검정 되 었 다 . 클론 T 31 a ( 또한 본 명세서 에서 일명 "" 31 A "" 및 "" mu . 31 A "") 는 인간 화 를 위하 여 선택 되 었 다 . "