도 27 내지 도 34 는 고농 도 포도당 조건 하 에서 PICALM 이 클라 트린 - 매개 APP 식작용 을 촉진 함 을 나타내 는 것 이 다 . 도 27 , 도 28 , 도 30 및 도 31 은 24 시간 또는 48 시간 동안 의 고농 도 포도당 처리 ( 25 mM ) 전 에 NT siRNA 또는 PICALM siRNA 로 형질 주입 된 SK - N - Mc 에 대한 결과 이 다 . 도 27 은 세포 를 APP - 및 AP 2 A 1 - 특이 적 항체 로 면역 염색 하 고 DAPI 로 대비 염색 한 결과 이 다 . 스케일 바 , 8 μ m ( 배율 X 1 , 000 ) . n = 4 . 도 28 은 세포 를 APP - 및 CHC - 특이 적 항체 로 면역 염색 하 고 DAPI 로 대비 염색 한 결과 이 다 . 스케일 바 , 8 μ m ( 배율 X 1 , 000 ) . n = 4 . 도 29 는 24 시간 동안 고농 도 포도당 ( 25 mM ) 처리 한 세포 에 대해 , A β - 및 PICALM - 특이 적 항체 를 이용 한 면역 염색 으로 내재 화 분석 을 수행 한 결과 이 다 . 0 및 0 및 15 분 이 내재 화 시점 을 나타낸다 . 스케일 바 , 8 μ m ( 배율 X 1 , 000 ) . 도 30 은 세포 표면 을 비오틴 화 하 고 표지 된 단백질 을 스 트 렙 타비 딘 비드로 분리 한 결과 이 다 . 표면 APP , 전체 APP 및 β - 액틴 이 웨스턴 블롯 으로 검출 되 었 다 . n = 4 . 도 31 은 A β 1 - 42 특이 적 ELISA 분석 으로 세포 배양 배지 유래 A β 1 - 42 를 측정 한 결과 이 다 . n = 3 . ** p < 0 . 01 , *** p < 0 . 001 vs . NT siRNA 형질 주입 , ## p < 0 . 01 , ### p < 0 . 001 vs . NT siRNA 형질 주입 과 함께 고농 도 포도당 . 도 32 및 도 33 은 24 시간 동안 고농 도 포도당 ( 25 mM ) 처리 전 에 30 분 동안 디 나 소어 ( 25 μ m ) 를 세포 에 전처리 한 결과 이 다 . 도 32 은 세포 표면 을 비오틴 화 하 고 표지 된 단백질 을 스 트 렙 타비 딘 비드로 분리 한 결과 이 다 . 표면 APP , 전체 APP 및 β - 액틴 이 웨스턴 블롯 으로 검출 되 었 다 . n = 4 . 도 33 는 세포 를 Rab 5 - 특이 적 항체 로 면역 염색 하 고 , DAPI 로 대비 염색 한 결과 이 다 . 스케일 바 , 8 μ m ( 배율 X 1 , 000 ) . n = 5 . 도 34 는 48 시간 동안 고농 도 포도당 ( 25 mM ) 처리 전 에 30 분 동안 디 나 소어 ( 25 μ m ) 와 함께 세포 를 배양 한 결과 이 다 . A β 1 - 42 특이 적 ELISA 분석 으로 세포 배양 배지 유래 A β 1 - 42 를 측정 한 결과 이 다 . n = 3 . ** p < 0 . 01 , *** p < 0 . 001 vs . 대 조군 , # p < 0 . 05 , ## p < 0 . 01 , ### p < 0 . 001 vs . 고농 도 포도당 .