pGL 3 - tata - HRE - FL 벡터 를 안정 적 으로 포함 하 고 있 는 형질전환 세포주 HeLa / pGL 3 - tata - HRE - FL ( 기탁 번호 : KCTC 10862 BP ) 를 이용 하 여 저산소증 을 조절 할 수 있 는 화합물 을 선별 하 기 위해 , 상기 실시 예 2 에서 제조 한 세포주 HeLa / pGL 3 - tata - HRE - FL 및 표준 세포주 HeLa / pRL - CMV 를 3 : 1 의 비율 로 혼합 한 후 , 24 -, 96 - 또는 384 - 웰 플레이트 에 약 30 % 의 밀도 로 이식 하 여 37 ℃, 5 % CO 2 배양기 에서 약 20 시간 동안 배양 하 였 다 . 배양 이 끝나 면 신선 한 DMEM / 10 % FBS 배지 로 바꿔 주 고 37 ℃, 5 % CO 2 배양기 에서 약 1 시간 동안 배양 한 다음 , 선별 하 고자 하 는 화합물 ( 한국 화학 연구원 내 한국 화합물 은행 의 화합물 라이브러리 KRICT - RP ) 을 10 μ M 의 농도 로 1 시간 동안 처리 하 였 다 . 여기 에 저산소증 을 유발 하 기 위해 CoCl 2 를 최종 농도 100 μ M 로 처리 한 다음 추가 로 20 시간 더 배양 하 였 다 . 배양 이 끝나 면 실시 예 1 의 < 1 - 4 - 2 > 에 기재 된 방법 과 동일 한 방법 으로 HIF - 1 의 전사 활성 에 의한 재조합 벡터 pGL 3 - tata - HRE - FL 내 반딧불 이 루시퍼 라 아제 의 발광 도 및 pRL - CMV 벡터 의 전사 활성 에 의한 레 닐 라 루시퍼 라 아제 의 발 광도 를 차례 로 측정 하 였으며 이 들 을 비교 한 결과 를 도 7 에 나타내 었 다 .