구체 적 으로 , 1 - 1 에서 Flag - Oct 4 를 과 발현 하 는 세포 를 Cell lysis buffer ( 150 mM NaCl , 25 mM Tris - HCl [ pH 8 . 0 ] , 1 mM EDTA , 0 . 1 % ( v / v ) NP 40 ) 를 이용 하 여 용해 하 고 , Flag - M 2 bead ( Sigma , A 2220 ) 로 Flag - Oct 4 를 면역 침전 한 후 , 3 X FLAG Peptide ( Sigma , F 4799 ) 로 Flag - Oct 4 를 수득 ( elution ) 하 였 다 . 정제 된 Flag - Oct 4 는 Glu - C ( Roche ) 를 37 ℃ 에서 밤새 ( overnight ) 처리 하 여 펩타이드 상태 로 자르 고 , QTRAP 5500 ( AB Sciex ) 을 이용 하 여 Nano - LC - ESI - MS / MS 분석 하 였 다 . 분석 결과 얻 은 펩타이드 들 의 스펙트럼 들 중 에서 BioWorks BrowserTM ( version Rev . 3 . 3 . 1 SP 1 , Thermo ) 을 이용 하 여 Oct 4 단백질 펩타이드 서열 만 을 선별 하 였 다 .