선별 균주 의 동정 을 위해 균체 는 한 천 고체 배지 로부터 회수 하 였으며 , 이 들 의 DNA 는 Qiuagen QIAamp DNA mini kit 를 사용 하 여 추출 하 였 다 . 16 S rRNA 유전자 는 두 개 의 알려진 유니버설 프라이머 를 사용 하 여 증폭 하 였 다 . 두 유니버설 프라이머 의 염기 서열 은 다음 과 같 다 . 먼저 , 정 방향 프라이머 는 27 F 프라이머 5 '- AGAGTTTGATCMTGGCTCAG - 3 '( 서열 번호 2 ) , 역방향 프라이머 는 1492 R 프라이머 5 '- TACGGYTACCTTGTTACGACTT - 3 '( 서열 번호 3 ) 이 다 . PCR 반응 의 조건 은 다음 과 같 다 . 95 ℃ 에서 10 분 간 1 회 초기 변성 후 DNA 증폭 을 위하 여 90 ℃ 에서 30 초간 변성 , 60 ℃ 에서 30 초간 결합 , 72 ℃ 에서 30 초간 증폭 과정 을 35 회 실시 하 고 72 ℃ 에서 10 분 간 마지막 증폭 을 1 회 실시 하 였 다 . 반응 이 끝난 PCR 산물 은 1 . 5 % 아가로스 겔 에서 전기영동 한 후 UV 트랜스 일루 미네 이터 ( Gel documentation , Bio - Rad ) 를 이용 하 여 밴드 를 확인 한 후 증폭 이 확인 된 PCR 산물 은 마크 로 젠 ( 주 ) 에 의뢰 하 여 16 S rRNA 유전자 의 서열 분석 을 실시 하 였 다 .