또한 , 상기 와 같이 과 발현 되 어 생산 된 라이 보스 5 - 인산 이성화 효소 는 상기 형질 전환 된 균주 의 배양액 을 6 , 000 ×g 로 4 ℃ 에서 30 분 동안 원심 분리 하 고 0 . 85 % 염화나트륨 ( NaCl ) 으로 두 번 세 척 한 다음 50 mM 트리스 - 염산 완충 용액 ( 50 mM Tris - HCl , pH 7 . 5 ) 을 첨가 하 여 상기 세포 용액 을 초음파 파쇄기 ( sonicator ) 로 파쇄 하 였 다 . 상기 세포 파쇄 물 은 다시 13 , 000 ×g 로 4 ℃ 에서 20 분 동안 원심 분리 하 고 세포 펠 렛 은 제거 한 다음 세포 상등 액 만 을 얻 어 알로스 의 생산 에 사용 되 는 효소 액 으로서 분리 하 였 다 .