간략 하 게 는 384 웰 포맷 에서 0 . 04 μ g / ml 의 최종 농도 의 재조합 BACE 1 단백질 을 화합물 또는 DMSO 의 존재 하 에 인 큐 베이 션 완충제 ( 50 mM 시트 레이트 완충제 ( pH 5 . 0 ) , 0 . 05 % PEG ) 중 20 μ M 기질 과 함께 실온 에서 450 분 동안 인 큐 베이 션 한다 . 그 다음 에 , 단백질 분해 의 양 을 상이 한 인 큐 베이 션 시간 ( 0 분 , 30 분 , 60 분 , 90 분 , 120 분 및 450 분 ) 에 형광 측정 ( 320 nm 에서 의 여기 및 405 nm 에서 의 방출 ) 에 의해 직접 측정 한다 . 모든 실험 에 있 어서 , 시간 곡선 ( 0 분과 120 분 사이 30 분 마다 ) 을 이용 하 여 고 대 조군 의 최저 기저 신호 가 발견 되 는 시간 을 결정 한다 . 이 시점 ( Tx ) 에서 의 신호 를 이용 하 여 450 분 에서 의 신호 에서 감산 한다 . 결과 를 T 450 과 Tx 사이 의 차이 로서 , RFU 로 표현 한다 .