혈액 은 건강 한 동의 공 여자 로부터 정맥 천자 ( venipuncture ) 에 의해 수득 하 였 다 . 6 가지 부피 의 혈액 을 1 가지 부피 의 구연산 덱 스트로스 ( ACD ; 85 mM 구연산나트륨 , 110 mM 덱 스트로스 , 및 62 . 3 mM 구연산 , pH 4 . 9 ) , 최종 pH 6 . 5 로 수집 하 고 , 20 분 동안 실온 ( RT ) 에서 220 g 로 원심 분리 하 였 다 . 혈소판 - 풍부 혈장 ( PRP ) 을 수집 하 고 , Medonic CA 620 혈액학 분석기 ( Boule Diagnostics AB , 스웨덴 스판 가 ) 로 혈소판 농도 를 결정 하 였 다 . 혈장 부분 을 함유 하 는 적혈구 세포 를 RT 에서 600 g 로 10 분 동안 추가 로 원심 분리 하 였 다 . 혈소판 - 부족 플 라즈 마 ( PPP ) 를 수집 하 여 PRP 를 300 , 000 혈소판 / μ l 까지 희석 하 는 데 사용 하 였 다 . FVIII - 중화 항 인간 FVIII 항체 ( 양 항인 간 인자 VIII - 5 mg , Haematologic Technologies , 미국 버몬트주 ) 를 0 . 1 mg / ml 의 최종 농도 까지 첨가 하 여 HA 상태 를 유도 하 고 , RT 에서 30 분 동안 2 rpm 으로 부드럽 게 회전 시켰 다 .