각 배지 시료 로부터 의 0 . 5 ml 분취 물 2 개 를 A 및 B 로 라벨 링 하 였 다 . 1 M 아세트산 ( pH 6 . 0 ) 20 ㎕ 을 모든 분 취물 ( aliquot ) 에 가하 였 다 . 반응 완충액 ( 20 mM Na - 아세테이트 및 0 . 15 M NaCl , pH 6 . 0 ) 50 ㎕ 를 분취 물 A 에 첨가 하 고 , 반응 완충액 내 5 TRU 스 트 렙 토 마이 세스 히 알루 로니 다제 ( HYALASE ) 50 ㎕ 를 분취 물 B 에 첨가 하 였 다 . 모든 시료 를 3 시간 동안 60 ℃ 에서 인 큐 베이 션 시킨 후 , 5 분 간 가열 하 여 , 첨가 된 히 알 루 로니 다제 를 불 활성 화 시켰 다 . 겔 여과 에 앞서 시료 를 - 20 ℃ 에서 저장 하 였 다 .