먼저 , 81 passage 의 HaCaT 세포 를 3 × 105 / well 의 세포 농도 로 6 - well plate 에 seeding 후 24 시간 동안 serum free media 로 배양 한 다음 , 본 발명 의 펩타이드 를 각각 10 , 50 , 100 μ M 의 농도 로 15 분 동안 처리 하 였 다 . positive control 은 상기 펩타이드 대신 에 성장 인 자 인 bFGF 100 nM 및 IGF 100 nM 를 처리 한 것 으로 하 였 다 . 세포 를 상기 혼합물 과 15 분 동안 반응 시킨 후 세포 로부터 용해 물 을 얻 어 항 - p - Akt 항체 ( cell signaling , USA ) 와 항 - p - ERK 항체 ( cell signaling , USA ) 를 사용 하 여 p - Akt 및 p - ERK 에 대한 웨스턴 블랏팅 을 진행 하 였 다 . β - 액틴 은 실험 에 사용 한 단백질 총량 을 비교 하 기 위하 여 항 - β - 액틴 항체 ( Santacruz biotechnology , USA ) 를 이용 하 여 확인 하 였 다 .