레이저 조사 후 1 , 3 , 7 , 14 , 21 일 차 에 레이저 를 조사 한 안구 를 적출 하 였 다 . 전안방 ( anterior segment ) 및 유리체 ( vitreous humor ) 를 제거 한 후 망막 과 RPE - 맥락막 을 포함 하 는 후안방 ( posterior segment ) 을 50 unit / ㎖ 의 DNase I ( Sigma - Aldrich Corp . ) 존재 하 에 1 mg / ㎖ 의 I 형 콜라 게나 제 ( Sigma - Aldrich Corp . ) 를 처리 하 여 1 시간 동안 효소 적 으로 해리 시키 고 단일 세포 로 분해 시켰 다 . 685 g 에서 5 분 동안 원심 분리 하 여 PBS 에서 단일 세포 현탁액 을 세척 한 후 , 세포 펠 렛 을 1 % BSA 및 0 . 1 % 아지드 화 나트륨 ( sodium azide ) 을 함유 하 는 FACS 버퍼 200 ㎕ 으로 현 탁 시켰 다 . 표면 염색 을 위해 , 하 기 의 항체 를 사용 하 였 다 . : Q 655 - 접합 항 마우스 CD 45 ( clone : 30 - F 11 ; eBioscience , San Diego , CA , USA ) , PE - 접합 항 마우스 F 4 / 80 ( clone : BM 8 ; eBioscience ) , APC eFluor 780 - 접합 항 마우스 CD 11 b ( clone : M 1 / 70 , eBioscience ) , V 450 - 접합 항 마우스 Gr - 1 ( clone : RB 6 - 8 C 5 ; eBioscience ) , FITC - 접합 항 랫 트 CD 206 ( clone : MR 5 D 3 , AbD Serotec , Raleigh , NC , USA )