피치 아 파스토 리스 형질전환 체 를 30 ℃ 에서 100 mg / l 의 제 오신 을 갖 는 YPD 플레이트 상 에서 48 시간 동안 배양 하 였 다 . 세포 를 와트 만 ( Whatman ) 541 경화 무회 ( ashless ) 70 mmØ 필터 상 에 올리 고 공기 - 건조 시켰 다 . 에스터 라 제 활성 을 색 반응 에 의해 가시 화 하 기 위해 , 6 mg 의 α - 나프 틸 아세테이트 ( 시그마 , 500 μ l 의 아세톤 에 용해 ) , 2 . 5 mg 의 테트라 아조 화 o - 다 이 아니시딘 ( 패스트 블루 솔트 ( Fast Blue Salt ) BN , 시그마 , 125 μ l 의 물 에 용해 ) 및 5 ml 의 0 . 1 M 인산 칼륨 완충액 ( pH 7 ) 의 용액 을 사용 하 여 필터 를 배양 하 였 다 . 4 개 플라스미드 pGAPZ A PLE - ER , pGAPZ A PLE + ER , pGAPZ A APLE - ER 및 pGAPZ A APLE + ER 중 통합 된 하나 를 갖 는 모든 형질전환 체 에서 활성 을 검출 하 였 다 . 이것 은 에스터 라 제 활성 을 갖 는 기능 성 단백질 의 발현 을 입증 한다 . 대 조군 으로 , 통합 된 빈 벡터 를 갖 는 클론 도 또한 동일 한 방법 으로 시험 하 였 다 . 이 경우 , 필적 하 는 반응 시간 내 에 의미 있 는 에스터 라 제 활성 이 나타나 지 않 았 다 .