항균성 시험 은 배양 된 그램 음성 ( gram negative ) E . coli 를 사용 하 여 수행 되 고 ; DH 5 alpha - Invitrogen Catalog No . I 8258012 , Lot No . 7672225 는 PucI 9 ( Invitogen ) 플 라즈 미드 로 변환 을 통해 케나 마이신 ( Kanamycin ) 항생제 ( resistant ) 가 제공 된다 . 박테리아 배양 은 LB Kan Broth ( Teknova # L 8145 ) 또는 Typtic Soy Broth ( Teknova # T 1550 ) 을 사용 하 여 개시 된다 . 대략 2 ㎕ 의 액체 박테리아 현탁액 또는 피펫 팁 풀 의 박테리아 는 아가 플레이트 로부터 접종 하 여 배양액 ( broth ) 의 2 - 3 ml 를 함유 하 는 뚜껑 있 는 튜브 에 분산 되 며 , 진동 배양기 ( shaking incubator ) 에서 37 ℃ 로 밤새 배양 한다 . 다음 날 상기 박테리아 배양 은 배양기 로부터 제거 되 고 PBS 로 두 번 세척 된다 . 광학 밀도 ( OD ) 는 측정 되 고 , 상기 세포 배양 은 대략 1 　 x 　 106 CFU / ml 의 최종 박테리아 농도 로 희석 된다 . 상기 세포 는 37 ℃ 에서 6 시간 동안 항균성 또는 항균성 이 아닌 ( 대 조구 ) , 선택 된 유리 표면 상 에 배치 된다 . 각 웰 로부터 버퍼 는 수집 되 고 상기 플레이트 는 아이스 - 냉각 ( ice - cold ) PBS 로 두 번 세척 된다 . 각각 웰 에서 버퍼 및 세 척 은 조합 되 고 , 상기 표면 스프 레드 - 플레이트 방법 ( spread - plate method ) 은 콜로니 를 카 운 팅 하 기 위해 사용 된다 .