도 10 의 실험 에서 , hOX 40 하이브리도마 상층 액 을 ELISAdp 의하 여 L 세포 와 비교 해서 L - hOX 40 에 대하 여 스크린 하 였 다 . 20 개 의 hOX 40 에 특이 적 인 단일 클론 항체 를 선택 하 였 다 . 2 천 만 개 의 L 세포 나 인간 유래 OX 40 을 발현 하 는 L 세포 ( L - hOX 40 ) 를 PBS 에 용해 한 0 . 01 % 마그네슘 칼슘 클로라이드 와 세포 를 섞 음 으로써 96 웰 플레이트 에 코팅 하 고 판상 후드 에서 밤새 도록 건조 하 였 다 . 플레이트 는 - 20 ℃ 에서 최소한 1 일 이상 냉각 한다 . 항체 결합 분석 을 위하 여 , 냉각 한 세포 를 PBS 로 다시 수화 하 고 PBS 에 0 . 05 % 트윈 ( Tween ) 20 을 포함 한 세척 완충액 으로 세척 하 고 세 척 완충액 에 2 % BSA 으로 블록 하 였 다 . 조절 한 세포 들 을 OX 40 항체 상등 액과 결합 하 는 데 사용 하 였 다 . 세포 에 결합 한 항체 는 2 차 항체 인 항 - 마우스 IgG FC HRP 로 탐지 하 였 다 . hOX 40 특이 적 인 하이브리도마 상층 액 은 OX 40 을 발현 하 는 L 세포 는 인식 하 지만 L 세포 는 인식 하 지 못하 였 다 .