IL - 6 은 중요 한 골 재흡수 인자 이 다 . IL - 6 의 과 발현 은 생체 내 에서 심각 한 골 손실 을 유발 할 수 있 다 . 골 세포 에 의한 IL - 16 생산 의 감소 는 골 재흡수 를 감소 시킴 에 의해 치료 학적 으로 이로울 것 이 다 . 화합물 102 ; 및 안드로겐 수용체 조절 제 LG 0893410 및 LG 0893411 을 시험 하 여 , 공동 형질 감염 분석 을 사용 하 여 Saos - 2 사람 골 아 세포 에서 TNF α - IL - 1 β - 유도 된 IL - 6 프로모터 활성 을 억제 하 는 이 들 의 능력 을 측정 하 였 다 . 사람 골 아 세포주 ( Saos - 2 ) 는 사람 AR 발현 플라스미드 ; 및 루시퍼 라 제 cDNA 의 IL - 6 프로모터 상류 를 함유 하 는 루시퍼 라 제 리포터 플라스미드 로 일시 적 으로 형질 감염 시켰 다 . Saos - 2 세포 를 96 웰 플레이트 에서 웰 당 6000 개 세포 로 씨 딩 하 였 다 . 동일 한 날 에 , 비 리포 좀 성 제형 인 FuGENE 6 시약 ( Roche , Indianapolis , IN ) 을 세포 의 형질 감염 을 위해 사용 하 였 다 . 각각 의 웰 에 3 . 6 μ g 의 IL - 6 - LUC 리포터 플라스미드 및 0 . 7 μ g 의 pCMV - hAR 을 첨가 하 였 다 . 형질 감염 24 시간 후 , DMEM ( 둘 베 코 최소 필수 배지 ) 중 에서 상이 한 농도 의 용매 화 된 화합물 ( 10 - 11 내지 10 - 6 M ) 을 세포 에 3 회 첨가 하 고 당해 세포 를 24 시간 동안 배양 하 였 다 . 루시퍼 라 제 의 발현 은 사이토 킨 종양 괴사 인자 α ( TNF α ; 10 ng / mL ) 및 인터 루킨 - 1 베타 ( IL - 1 β , 1 ng / mL ) 로 자극 하 였 다 . 당해 배지 를 흡인 제거 하 고 당해 세포 를 세제 함유 완충액 으로 용해 시켰 다 . 각각 의 웰 에 루시퍼 라 제 분석 완충액 을 첨가 한 후 , 당해 세포 를 발광 측정기 를 사용 하 여 루시퍼 라 제 활성 에 대해 분석 하 여 전사 활성 화 수준 을 측정 하 였 다 . 최대 반응 의 50 % 를 나타내 는 유효 농도 ( EC 50 ) 를 농도 반응 곡선 의 중간 점 을 가로지르 는 2 개 농도 사이 에 외 삽 함 에 의해 화합물 에 대한 농도 - 반응 곡선 으로부터 측정 하 였 다 . 시험 화합물 에 대한 효능 제 효능 은 표준 효능 제 DHT 에 의한 최대 루시퍼 라 제 반응 과 비교 하 여 루시퍼 라 제 반응 의 % 로서 계산 하 였 다 .