마찬가지 로 , L 1 부위 를 포함 하 는 전장 쥐 카파 체인 을 절단 한 다음 , 중간체 이중 발현 벡터 pDCOrigIB 15 MoigG 2 a hukappa 의 BamHI / XhoI 부위 중 으로 클로닝 하 여 인간 카파 체인 을 치환 하 여 공 ( empty ) L 1 부위 를 갖 는 중간체 쥐 이중 발현 벡터 pDCOrigIB 15 molgG 2 a 를 생성 하 였 다 . 야생형 경쇄 가변 영역 을 갖 는 작 제물 을 생성 하 기 위하 여 , 상보성 5 ' 인산화 프라이머 wtkappavarL 1 for 및 rev ( 표 2 ) 를 어닐링 한 다음 , 전술 한 바 와 같이 EcoRV 로 선형 화 한 후 L 1 부위 중 으로 삽입 하 였 다 . 최종 적 으로 , GP 100 DR 7 / H 1 TRP 2 / H 2 및 GP 100 DR 4 / H 3 를 포함 하 는 DCIB 54 으로부터 의 중쇄 가변 영역 을 HindIII / AfeI 를 사용 하 여 전달 하 여 pDCOrig GP 100 DR 7 / H 1 TRP 2 / H 2 GP 100 DR 4 / H 3 moigG 2 a 야생 형 카파 ( DCIB 68 , 도 17 C 및 60 ) 를 생성 하 였 다 .