FP 테스트 를 위하 여 , 분석 테스트 키트 를 Invitrogen 사 에서 구입 하 여 인간 AR - LBD 와 100 % 서열 동일 성 을 갖 는 분리 된 래트 AR - LBD 에 대한 화합물 결합 을 측정 하 는 데 사용 하 였 다 . Invitrogen PolarScreenTM 안드로겐 수용체 경쟁자 분석 레드 ( 제품 코드 번호 PV 4293 ) 는 , 테스트 화합물 이 형광 표지 된 트레이서 화합물 을 대체 할 수 있 는 경우 , 측정 되 는 경쟁 분석 을 기준 으로 하 는 형광 편광 ( FP ) 이 다 . 테스트 화합물 이 AR - LBD 에 결합 하 는 경우 , 이것 은 수용체 / 트레이서 착체 의 형성 을 방지 하 여 편광 값 이 낮 아 진다 . 테스트 화합물 이 수용체 에 결합 하 지 않 는 경우 , 이것 은 수용체 / 트레이서 착체 의 형성 에 영향 을 주 지 않 아 , 트레이서 의 측정 된 편광 값 은 여전히 높 다 . 실질 적 으로 Invitrogen 방법 에 개시 된 바 와 같이 분석 을 실시 하 였으나 예외 적 으로 최종 분석 부피 는 12 ㎕ 였으며 , 이것 은 적절히 낮 은 부피 의 블랙 384 웰 미세 적정 플레이트 를 필요 로 하 였 다 . 화합물 은 연속 적 으로 희석 된 화합물 ( 각각 10 mM , 0 . 1 mM , 1 μ M 및 10 nM 의 최종 화합물 을 함유 하 는 4 웰 ) 을 함유 하 는 화합물 공급원 마이크 로 플레이트 로부터 직접 Labcyte Echo 550 을 사용 하 여 분석 마이크 로 플레이트 로 투약 된다 . Echo 550 은 DMSO 화합물 용액 의 마이크 로 플레이트 간 직접 전달 을 실시 하 기 위하 여 음향 기술 을 사용 하 는 액체 핸들러 이 며 상기 시스템 은 복수 의 증가 에서 마이크 로 플레이트 간 에 2 . 5 nL 의 작 은 부피 를 옮기 도록 프로그래밍 될 수 있 으며 이 로써 희석 화합물 을 생성 하 고 이것 을 역 충전 하 여 희석 범위 에 걸쳐 DMSO 농도 를 정상 화 한다 . 각 화합물 로 수득 되 는 FP 용량 반응 데이터 를 적당 한 소프트웨어 패키지 ( 예컨대 , Origin ) 로 전달 하 여 곡선 피팅 분석 을 실시 하 였 다 . 경쟁 적 AR 결합 은 IC 50 값 으로서 표현 되 었 다 . 이것 은 AR - LBD 에 대한 트레이서 화합물 결합 이 50 % 감소 되 는 데 필요 한 화합물 의 농도 를 계산 함 으로써 측정 하 였 다 .