CD 독소 에 의한 염증 반응 관련 인자 IL - 8 및 PTGS 의 유전자 발현 유도 및 CD + LAB 배양액 에 의한 발현 억제 능 을 확인 하 였 다 . HT - 29 cell 을 6 well 에 1 x 106 cells / well 로 접종 후 37 ℃, 5 % CO 2 조건 으로 24 시간 배양 하 였 다 . 상층 액 제거 후 , PBS 로 3 회 세척 하 여 RPMI 1640 배지 에 CD 배양액 또는 CD + LAB 배양액 을 25 % 농도 로 처리 하 고 37 ℃, 5 % CO 2 에서 6 시간 배양 후 상등 액 을 제거 하 였 다 . HT - 29 cell 을 PBS 로 3 번 세 척 후 mRNA 분리 는 GeneAll Hybrid - RTMreagent ( GeneAll , Seoul , Korea ) 를 사용 하 였 다 . 분리 한 total RNA 200 ng 을 AccuPower ® CycleScript RT PreMix ( dT 20 ) ( Bioneer , Taejeon , Korea ) 를 사용 하 여 cDNA 를 합성 하 였 다 . 합성 한 cDNA 를 사용 하 여 IL - 8 및 PTGS 2 mRNA 양 을 β - actin 을 housekeeping gene 으로 하 여 ddCt 분석 을 통한 상대 정량 하 였 다 . PCR 시약 은 PowerSYBR Green PCR Mastermix ( Life Technologies Pty Ltd , NY , USA ) 사용 하 였 고 , StepOne realtime PCR system ( Life Technologies Pty Ltd , NY , USA ) 을 사용 하 여 하 였으며 , 프라이머 는 제노 텍 ( Genotech , 대전 ) 에서 합성 하 였 고 , 그 서열 은 아래 표 1 에 나타내 었 다 .