총 RNA 는 RNAiso Plus kit ( Takarabio , 일본 ) 를 사용 하 여 제조사 의 매뉴얼 에 따라 분리 되 었 다 . Maxime RT PreMix ( Random primer ) ( iNtRON Biotechnology ) 를 사용 하 여 제조사 의 매뉴얼 에 따라 cDNA 를 합성 하 고 , 각 튜브 마다 2 ㎕ 의 cDNA , 1 ㎕ 의 센스 및 안티 센스 프라이머 ( GenoTech Corp ) 용액 ( 0 . 4 μ M ) , 12 . 5 ㎕ 의 SYBR Premix Ex Taq ( Takarabio ) , 8 . 5 ㎕ 의 dH 2 O 를 혼합 하 여 총 25 ㎕ 가 되 도록 첨가 하 여 qPCR 을 수행 하 였 다 . 사용 한 프라이머 는 표 1 에 기재 하 였 다 . 95 ℃ 에서 5 분 동안 cDNA 를 전변 성 ( pre - denaturation ) 시킨 뒤 95 ℃ 30 초 , 56 - 65 ℃ 30 초 , 72 ℃ 30 초 로 온도 및 시간 을 변화 시키 며 23 - 33 사이 의 사이클 을 반복 하 였 다 . TNF - α , IL - 1 β , IL - 6 , 및 CCL - 17 mRNA 의 발 현양 은 qPCR 을 수행 한 후 , TP 850 소프트웨어 를 사용 하 여 분석 하 였 다 . 각 유전자 의 상대 적 인 발 현양 은 GAPDH 에 의해 정규 화 되 었 다 .