본 발명 에서 는 피 브로넥 틴 계 결합 분자 , 및 공 여 CDR 을 피 브로넥 틴 계 결합 스 캐 폴드 ( scaffold ) , 특히 , Fn 3 내로 도입 하 기 위한 방법 을 제공 함 으로써 상기 한 문제 를 해결 한다 . 본 발명 의 피 브로넥 틴 계 결합 분자 는 개선 된 반감기 및 안정 성 을 위해 추가 로 공학 처리 되 거나 다른 모이 어 티 ( moiety ) , 예 를 들 어 , PEG , Fc , HSA , 항 - HSA 에 컨 쥬 게이팅 될 수 있 다 . 본 발명 은 또한 표적 항원 에 대한 결합 에 대해 상기 분자 를 스크리닝 하 는 방법 , 및 후보 바인더 ( binder ) 의 제조 및 정제 를 위한 방법 을 제공 한다 . 추가 로 , 본 발명 은 Fn 3 계 결합 분자 가 생체 내 에서 , 특히 포유 동물 세포 , 예 를 들 어 , 래트 , 마우스 , 햄스터 , 인간 세포 또는 그 로부터 유도 된 세포주 내 에서 성공 적 으로 발현 됨 을 처음 으로 입증 한다 . 또한 , 본 발명 은 공학 처리 되 거나 다른 모이 어 티 , 예 를 들 어 PEG , Fc , HSA , 항 - HSA 에 컨 쥬 게이팅 된 Fn 3 계 결합 분자 가 포유 동물 세포 내 에서 또한 성공 적 으로 발현 되 고 분자 반감기 증가 의 목적 하 는 생리학 적 효과 를 보임 을 입증 한다 .