단백질 의 정량 은 BCA assay kit ( bio - rad CA ) 의 bradford 법 을 사용 하 였 고 , 동일 량 의 단백질 을 10 % SDS - PAGE 에 전기영동 한 후 , 0 . 45 polyvinylidene fluoride ( PVDF : Millipore ) 를 사용 하 여 겔 에서 옮겼 으며 , 항체 의 사용 은 1 차 항체 로 COX - 2 를 1 / 1000 으로 , 베타 - actin 을 1 / 5000 으로 희석 하 여 O / N ( over - night ) 하 고 2 차 항체 로 Horseradish peroxidase ( HRP ) 를 가지 고 있 는 항체 를 실온 에서 1 시간 반응 시킨 후 , supersignal ( Pierce , CA ) 로 반응 시킨 후 , LAS - 3000 ( Fuji Co , Japan ) 를 사용 하 여 결과 를 확인 하 였 다 .