이 들 2 가지 융합 단백질 ( hPAM 4 - DDD 및 h 679 - AD 2 ) 을 안정 적 으로 형질 감염 된 골수종 세포 에서 독립 적 으로 발현 시켰 다 . 조직 배양 상층 액 을 모으 고 , 2 배 몰 과잉 의 hPAM 4 - α 를 산출 하 였 다 . 반응 혼합물 을 1 mM 환원 된 글루타티온 을 이용 한 온화 한 환원 조건 하 에 실온 에서 24 시간 동안 항온 처리 하 였 다 . 환원 이후 에 , 2 mM 산화 된 글루타티온 을 이용 한 온화 한 산화 로 DNL 반응 을 완결 시켰 다 . h 679 Fab 에 높 은 특이 성 으로 결합 하 는 IMP 291 - affigel 수지 를 이용 한 친화성 크로마토그래피 로 TF 10 을 분리 하 였 다 . hPAM 4 IgG 및 임상 시험 에 들어가 는 항 - CEA x 항 - HSG bsMAb 에 대하 여 전체 조직 구조 ( full tissue histology ) 및 혈액 세포 결합 패널 ( blood cell binding panel ) 이 이미 조사 되 었 다 . hPAM 4 결합 은 1 / 3 견본 에서 방광 과 위 에 매우 약한 결합 ( 생체 내 에서 결합 은 관찰 되 지 않 음 ) 으로 한정 되 고 , 항 - CEA x 항 - HSG bsMAb 에 기인 된 정상 조직 에 결합 은 관찰 되 지 않 았 다 . 더 나아가 , H 1 및 H 2 히스타민 수용체 를 보유 하 는 세포주 ( cell line ) 에 대한 시험관 내 연구 는 IMP - 288 di - HSG 펩티드 로 길항 ( antagonistic ) 또는 항진 ( agonistic ) 활성 이 없 음 을 증명 하 고 , 2 가지 상이 한 종 에서 동물 연구 는 이미지 화 에 이용 되 는 것 보다 20 , 000 배 높 은 용량 에서 히스타민 성분 에 관련 된 상기 펩티드 의 약리학 적 활성 이 없 음 을 증명 하 였 다 . 따라서 상기 HSG - 히스타민 유도체 는 약리학 적 활성 을 갖 지 않 는다 .