실시 예 2 ( 2 ) 에서 선발 된 일차 평가 선발 주 77 주 에 대하 여 , 다음 과 같이 2 차 평가 를 행했 다 . 일 차 평가 선발 주 77 주 에 대하 여 , 실시 예 2 ( 2 ) 와 같이 , 96 웰 플레이트 ( 딥 웰 ) 에 의한 배양 을 한 후 , 얻 어 진 각 배양액 에 대하 여 ( 20 ㎕, 15 ㎕, 10 ㎕, 5 ㎕) × 2 샘플 씩 을 평형 96 웰 플레이트 에 분주 했 다 . 원심분리기 ( 사쿠마 제작소 50 A - IVD ) 및 로터 ( 사쿠마 제작소 HM - 2 HLS ) 를 사용 하 여 , 평형 96 웰 플레이트 를 원심 분리 ( 3000 rpm , 5 분 간 , 4 ℃) 하 였 다 . 배양액 상청 을 제거 한 후 , 각 배양액 침전 ( 균체 ) 에 대하 여 , 실시 예 2 ( 2 ) 에 기재 된 평가 용 반응 액 1 및 평가 용 반응 액 2 ( 400 mM DCP , 0 . 025 % 브로모 크레졸 퍼플 ( BCP ) , 50 mM Tris - 황산 ( pH 8 ) ) 40 ㎕ 를 각 웰 에 첨가 했 다 . 현 탁 후 , 실온 에서 정치 하 여 , 반응 액 의 정색 변화 를 경시 적 으로 관찰 하 여 , 평가 용 반응 액 1 을 첨가 한 계 에서 대조 인 JM 109 / pSTT 002 보다 도 상당히 빨리 변색 이 보인 주 , 및 각 주 에 대하 여 평가 용 반응 액 1 첨 가계 에서 의 정색 속도 와 평가 용 반응 액 2 첨 가계 에서 의 정색 속도 의 차이 가 적 은 주 를 선발 했 다 . 일 차 평가 선발 주 77 주 에 대하 여 상기 2 차 평가 를 하 여 , 20 주 를 선발 했 다 .