100 units / mL penicillin - streptomycin 과 10 % FBS 를 첨가 한 DMEM 배지 를 사용 하 여 A 549 인체 폐암 세포 를 37 ℃, 5 % CO 2 배양기 에서 배양 하 였 다 . 세포 를 100 - mm 2 dish 에 1 × 106 세포 / mL 로 분주 하 여 37 ℃, 5 % CO 2 배양기 에서 하루 동안 배양 후 에 , 배지 를 2 % FBS DMEM 으로 바꿔 주 고 1 시간 뒤 세포 에 IL - 1 β ( 1 ng / mL ) 을 처리 하 였 다 . 48 시간 배양 후 에 , PBS 로 세포 를 세척 한 후 Trypsin / EDTA 2 mL 로 5 분 간 반응 시킨 후 3 mL 의 DMEM 을 추가 하 여 세포 를 분리 하 여 1 , 000 rpm , 5 분 간 원심 분리 로 세포 를 모은 후 PBS 로 두 번 다시 세포 를 세 척하 였 다 . 준비 된 세포 는 homogenization buffer ( 0 . 1 M potassium phosphoate buffer , pH 7 . 4 , 2 . 5 mM glutathione , 0 . 25 M sucrose ) 1 mL 로 재용 해 하 고 얼음 에서 10 분 간 배양 한 뒤 에 , 초음파 분해 ( 3 × 20 초 ) 하 여 1 , 000 ×g , 10 분 간 그리고 174 , 000 ×g , 1 시간 , 4 ℃ 에서 원심 분리 로 미세 소체 를 분획 하 였 다 . 이 미세 소체 분획 을 homogenization buffer 50 μ L 로 재용 해 한 뒤 에 Bradford assay 로 단백질 정량 을 진행 하 였 다 .