이후 , 세균 을 수확 한 후 , 용해 버퍼 [ 50 mM Tris - HCl pH 8 . 0 , 200 mM NaCl , 100 μ M ZnCl 2 ] 및 초음파 파쇄기 로 세균 을 파쇄 하 였 다 . 파쇄 된 세균 용해 물 을 원심 분리 하 여 상등 액 을 취하 고 , Ni - NTA 컬럼 에 주입 하 였으며 , 용출 버퍼 [ 500 mM 이미다졸 ( imidazole ) , 50 mM Tris - Cl ( pH 8 . 0 ) , 200 mM NaCl , 100 μ M ZnCl 2 ] 를 이용 하 여 N - 말단 에 6 개 의 히스티딘 ( histidine ) 이 태그 된 Ablysin 단백질 을 정제 하 였 다 .