유도 만능 줄기세포 ( induced pluripotent stem cells , iPSCs ) 는 전 신경화증 환자 의 혈액 에서 말초 혈액 세포 ( Peripheral Blood Cell , PBMC ) 를 분리 하 여 Yamanaka 펙 터 를 포함 하 는 센다이 ( Sendai ) 바이러스 를 처리 하 여 iPSC 를 획득 하 였 다 . 일반 적 으로 유도 만능 줄기세포 리프 로 그래 밍 은 체세포 에 리프 로 그래 밍 에 필요 한 인자 를 인위 적 으로 과 발현 시켜 만능 줄기세포 를 유도 해 내 는 기술 을 의미 한다 . 상기 유전자 를 과 발현 시키 는 방법 으로 는 바이러스 , 플라스미드 벡터 , mRNA , 단백질 등 이 있 다 . 3 x 105 개 의 PBMC 를 24 - 웰 플레이트 ( Well Plate ) 에 도말 하 였 다 . CytoTune - iPSC 센다 이 리프 로 그래 밍 키트 를 사용 하 여 리프 로 그래 밍 을 유도 했 다 . 바이러스 형질도입 은 3 x 105 개 의 세포 당 7 . 5 의 다중성 감염 으로 수행 되 었 다 . 바이러스 를 처리 한 뒤 1 , 160 xg , 37 ℃ 에서 30 분 간 원심 분리 한 후 5 % CO 2 , 37 ℃ 에서 배양 하 였 다 . 다음 날 세포 를 비트 로 넥 틴 ( Vitronectin ; Life Technologies ) 으로 코팅 된 24 - 웰 플레이트 로 옮기 고 1 , 160 xg , 37 ℃ 에서 10 분 간 원심 분리 한 후 5 % CO 2 , 37 ℃ 에서 배양 하 였 다 . Essential 8 ( Life Technologies ) 을 1 : 1 의 비율 로 배양액 을 첨가 하 였 다 . 리프 로 그래 밍 된 세포 는 일 일 배양액 교환 으로 Essential 8 배양액 에서 유지 및 확장 되 었 다 .