다음 13000 rpm , 4 ℃ 에서 15 분 간 원심 분리 한 후 에 얻 어 진 상층 액 을 각 세포주 의 세 포추 출액 으로 모았 다 . 용해 버퍼 ( lysis buffer ) 는 10 mM HEPES - NaOH ( pH 7 . 9 ) , 10 mM KCL , 0 . 1 mM EGTA , 0 . 1 mM EDTA , 0 . 5 mM 페닐 메틸 설포닐 플 루오 라이드 ( phenylmethylsulfonyl fluoride , PMSF ) , 2 ㎍/㎕ 아프 로티 닌 ( aprotinin ) , 2 ㎍/㎕ 류 펩 틴 ( leupeptin ) , 0 . 3 % 노니 데 트 ( Nonidet ) P - 40 로 조성 되 었 다 .