10 % FCS , 580 　㎍/ ml L - 글루타민 , 50 　 Units / ml 페니실린 및 50 ㎍/ ml 스트렙토마이신 이 보충 된 DMEM 배지 에서 배 앙 한 , 기하급수 적 으로 증식 중 인 COS 세포 를 트립신 처리 및 원심 분리 에 의해 수확 하 고 , PBS 로 헹구 었 다 . 세포 를 최종 농도 1 x 107 cells / ml 로 PBS 에 재현 탁하 였 다 . COS 세포 현탁액 700 ㎕ 를 Gene Pulser 큐벳 에 옮기 고 , 중쇄 및 카파 경쇄 발현 벡터 DNA ( 각각 10 ㎍ 또는 슈퍼 벡터 13 ㎍) 와 혼합 하 였 다 . 세포 에 Bio - Rad Gene Pulser 를 이용 하 여 1900 V 및 25 μ F 로 전기 충격 을 가하 였 다 . 형질 전환 된 세포 를 , 10 % 감마 - 글 루 불린 무 첨가 FBS , 580 ㎍/ ml L - 글루타민 , 50 Units / ml 페니실린 및 50 ㎍/ ml 스트렙토마이신 이 첨가 된 DMEM 에서 72 시간 배양 한 후 , 항체 가 함유 된 세포 배양 상층 액 을 회수 하 였 다 .