서열 번호 4684 변이체 를 발현 하 는 맑 아 진 이 . 콜라 이 배양 용 해물 의 96 웰 플레이트 에서 검정 을 수행 하 였 다 . 펠 렛 을 실시 예 60 에 기재 된 바 와 같이 용해 시키 고 , 용해 물 을 맑 게 하 였 다 . 검정 은 5 mM 스테비오 시드 ( > 95 % 순도 ) , 0 . 2 mM ADP ( Sigma , > 93 % 순도 ) 보조 기질 , 0 . 1 g / L SuS SFP 서열 번호 1222 , 및 15 mM 수크로스 ( 자당 ) 와 함께 100 μ L 반응물 내 의 10 μ L 용해 물 을 사용 하 여 수행 하 였 다 . 하 기 반응 조건 을 사용 하 였 다 : 4 - 5 시간 동안 300 RPM 진탕 하 에 써 모 트론 ® 적정 플레이트 진탕기 에서 50 mM Kphos 완충제 , pH 7 , 3 mM MgCl 2 , 50 ℃. 반응물 은 실시 예 60 에 기재 된 바 와 같이 가용화 하 고 , 켄 칭 하 고 , 희석 하 였 다 . 샘플 을 실시 예 31 , 표 31 . 1 에 기재 된 바 와 같이 RapidFire - MS / MS 에 의해 분석 하 였 다 . 인 시 츄 합성 된 ADP - 글루코스 를 사용 하 여 스테비오 시드 로부터 레바 우디 오시드 A 를 서열 번호 4684 보다 더 많 은 양 으로 생성 한 글 리코 실트 랜스 퍼라 제 변이체 폴리펩티드 가 확인 되 었 다 . 조작 된 폴리펩티드 는 표 61 . 1 에 열거 되 어 있 다 . 서열 번호 4684 와 비교 하 여 표 61 . 2 에 제시 된 변이체 의 분석 을 위해 실시 예 31 에서 설명 된 바 와 같이 진탕 플라스크 규모 배 양물 을 성장 시키 고 , 용해 시키 고 , 맑 게 하 고 , 분말 로 동결 건조 시켰 다 .