DMSO ( 48 ㎖) 에 녹인 화합물 1 ( 0 . 743 g , 0 . 799 mmol , 1 . 0 eq ) , 화합물 2 ( 1 . 976 g , 1 . 374 mmol , 1 . 72 eq ) 와 DIEA ( 0 . 24 ㎖, 1 . 374 mmol , 1 . 72 eq ) 의 용액 은 실온 에서 3 일 동안 교반 한다 . HPLC 는 출발 물질 1 이 소모 되 었 음 을 지시 하 였 다 . 반응 혼합물 은 교반 CH 2 Cl 2 / 에테르 ( 1 : 2 , 450 ㎖) 에 첨가 한다 . 생성 된 침전물 은 수집 하 고 , CH 2 Cl 2 ( 20 ㎖ x 3 ) 와 에테르 ( 20 ㎖ x 3 ) 로 세척 하 고 , 자연 건조 시킨다 . 정제 되 지 않 은 산물 은 0 . 01 N HCl ( 200 ㎖) 로 희석 하 고 , 7 볼륨 ( volume ) 의 메탄올 과 에탄올 로 순차 적 으로 사전 - 세척 된 C 18 역상 43 g 칼럼 에 적용 한다 . 상기 칼럼 은 먼저 , 물 ( 50 ㎖) 로 세척 하 고 완충액 A 에서 5 - 40 % B ( 각각 200 ㎖, 5 % 씩 증가 ) 로 용출 한다 . 분획 물 은 HPLC 로 순도 를 검사 한다 . 원 하 는 분획 물 은 모으 고 , 1 볼륨 의 물 로 희석 하 고 , Waters C 18 Sep - Pak 카트리지 ( 1 O g , P / N WAT 043350 , 3 볼륨 의 메탄올 과 물 로 순차 적 으로 사전 - 세척 됨 ) 에 흡착 시킨다 . 산물 은 물 ( 20 ㎖ x 3 ) , 0 . 01 M HCl ( 20 ㎖ x 3 ) , 물 ( 20 ㎖ x 3 ) 로 세척 하 고 , 9 : 1 아세 토니 트릴 / 물 ( 50 ㎖) 로 카르 지로 부터 용출 한다 . 상기 유기 용매 는 회전 증발기 ( rotary evaporator ) 로 제거 한다 . 잔류물 은 0 . 01 N 염산염 용액 ( 40 ㎖, 몇 방울 의 0 . 1 N 염산염 용액 의 조력 ) 에 용해 시키 고 , 0 . 45 ㎛ 나일론 막 필터 로 여과 하 고 , 동결 건조 시킨다 . 780 ㎎( 41 . 9 %) 의 적색 분말 이 수득 된다 . ES ( +)- MS : 1148 . 9 [ ( M + H ) 2 +], 1329 . 9 ( CbI +), 665 . 7 [ ( Cbl + H ) 2 +], 971 . 6 [ ( Cbl - 359 ) +], 359 . 1 ( C - OP ( O ) 결합 의 파괴 로부터 단편 ) . HPLC 는 상기 산물 이 대략 98 . 6 % 순 도임 을 지시 한다 .