클로람페니콜 용액 ( 100 % 알코올 100 ㎖ + 클로람페니콜 340 mg ) 400 ㎕ 가 함유 된 1 X LB ( DIFCO , Cat . No 244620 ) 85 ㎖ 에 각 BAC 클론 원액 2 ㎕ 를 접종 하 였 다 . 37 ℃ 에서 15 시간 동안 250 rpm 으로 회전 배양 한 후 , 6 , 000 rpm , 4 ℃, 5 분 원심 분리 하 여 펠 렛 을 수득 한 후 , QUIAGEN - tip 100 ( QIAGEN plasmid midi kit ) 을 사용 하 여 DNA 를 추출 하 였 다 .