용액 상 패닝 의 각 라운드 를 뉴 레 귤 린 1 - β 1 ( R & D 시스템즈 ( R & D Systems ) ) 의 존재 또는 부재 하 에 다양 한 비오티 닐 화 재조합 HER 3 단백질 을 이용 하 여 수행 하 였 다 . 단백질 은 제조 업체 의 지시 에 따라 EZ - 연결 술포 - NHS - LC 비오티 닐 화 키트 ( 피어스 ) 를 이용 하 여 비오티 닐 화 시켰 다 . 800 μ l 의 스 트 렙 타비 딘 연결 된 자기 비드 ( 다이나 비드 ( Dynabead ) , 다 이날 ( Dynal ) ) 를 PBS 로 1 회 세척 하 고 , 케미 블로커 ( Chemiblocker ) ( 케미 콘 ( Chemicon ) ) 로 밤새 차단 시켰 다 . HuCAL GOLD ® 파지 - 항체 및 적절 한 비오티 닐 화 HER 3 을 반응 튜브 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 스 트 렙 타비 딘 자기 비드 를 20 분 동안 첨가 하 고 , 자기 입자 분리기 ( 다 이날 ) 로 수집 하 였 다 . 각각 의 튜브 에 DTT 함유 완충제 를 첨가 하 여 다이나 비드로 부터 결합 된 파지 를 용리 하 고 , 이 . 콜라 이 TG - 1 에 첨가 하 였 다 . 파지 감염 을 고체 상 패닝 에서 기재 된 바 와 동일 한 방식 으로 수행 하 였 다 . 각각 의 HER 3 패닝 전략 은 패닝 의 개별 라운드 로 구성 되 고 , 특징 적 인 항원 , 항원 농도 및 세 척 엄 격도 를 함유 하 였 다 .