정량 적 형광 공명 에너지 전이 ( fluorescence resonance energy transfer ; FRET ) - 기본 방법 을 사용 하 여 HCV NS 3 / 4 A 프로테아제 억제제 를 확인 하 였 다 . 분석 은 HCV NS 5 A / 5 B 절단 분위 로부터 유도 된 합성 FRET 펩타이드 및 HCV 프로테아제 를 사용 하 여 복합체 의 분해 활성 을 모니터링 함 으로써 프로테아제 에 대한 화합물 의 활성 을 평가 하 였 다 . NS 5 A - 5 B 접합 점 ( NH 2 - EDVVCCSMSYK - COOH ) 을 포함 하 는 합성 펩타이드 를 각각 N - 및 C - 말단 에서 다 브 실 ( Dabcyl ) 및 에 단스 ( Edans ) 로 표지 하 였 다 ( 제조원 ; Invitrogen , Carlsbad , CA ) . 형광 측정 을 사용 하 여 시험 화합물 의 IC 50 값 을 추정 하 였 다 . 두 개 의 형광체 는 켄 칭 쌍 ( quenching pair ) 을 형성 하 며 , 천연 펩타이드 내 에서 FRET 를 나타낸다 . HCV NS 3 / 4 A 프로테 이나 제 복합체 ( 100 ng / mL ) 에 의한 FRET 펩타이드 의 분해 시 , 형광 을 회수 하 고 여기 / 방출 = 340 / 490 nm 에서 계속 모니터링 할 수 있 다 .