원정 액 ( fresh semen ) 은 일 주일 에 1 회 듀 록 ( Duroc ) 종모돈 으로부터 채취 하 였 다 . 사출 된 농후 정액 ( sperm rich fraction ) 은 85 % 이상 의 운동 성 과 정상 첨체 율 ( normal acrosome ) 을 나타내 는 것 만 을 이용 하 였 다 . 채취 후 2 시간 에 걸쳐 원정 액 의 온도 를 서서히 실온 으로 내렸 다 . 원정 액 을 15 ml 시험관 ( BD Falcon , USA ) 에 옮기 고 실온 에서 800 ×g , 10 분 간 원심 분리 하 였 다 . 상층 액 은 깨끗이 버리 고 남 은 정자 ( sperm ) 에 실온 의 10 ml LEN ( 100 ml distilled water 에 11 . 0 g lactose hydrate , 20 ml egg yolk , 0 . 05 g N - acetyl - D - glucosamine 이 포함 된 것 ) 희석 액 을 넣 어 잘 섞 고 최종 정자 농도 가 1 . 0 × 109 sperm / ml 가 되 도록 하 였 다 . 액상 정액 은 4 oC 냉장고 에 넣 어 5 일 간 보존 하 며 사용 하 였 다 .