Colo 205 세포 의 1 . 5 x 105 을 96 - 웰 플레이트 의 웰 에 씨 딩 하 였 다 . 8 내지 32 ug / ml 의 범위 에 있 는 농도 에서 정제 한 m 5 F 1 , c 5 F 1 , c 5 F 1 - v 17 , c 5 F 1 - v 24 , c 5 F 1 - v 25 및 대 조군 항체 의 알리 쿼트 를 배 양물 배지 에서 새로 제조 하 였 고 각 웰 에 첨가 하 였 다 . 처리 한 세포 를 세포 자멸 을 위한 FACS 분석 전 에 6 시간 동안 37 ℃ 인큐베이터 에서 유지 하 였 다 . 세포 의 세포 자멸 분석 에 대해 , Annexin V 염색 을 제조 업자 의 설명서 에 따라서 Annexin - V - FITC Apoptosis 검출 키트 ( Strong Biotech , Cat . No . AVK 250 ) 를 사용 하 여 측정 하 였 다 . 간단히 말 하 면 , 처리 한 세포 를 수확 하 였 고 실온 에서 Annexin V - FITC 를 함유 하 는 Annexin V 결합 완충제 에서 재현 탁하 였 다 . 어둠 속 에서 15 분 배양 한 후 , 세포 를 200 ul 의 Annexin V 결합 완충제 로 2 회 세척 하 였 다 . FACS 분석 전 , 0 . 25 ug / ml 의 프로 피디 움 아이 오다 이드 ( PI ) 를 첨가 하 였 다 . 모든 유세포 분석 분석 물 을 Cell Quest 소프트웨어 를 사용 하 여 BD - LSR 유세포 분석기 ( Becton Dickinson ) 에서 수행 하 였 다 . Annexin VI 양성 및 / 또는 PI 양성 세포 는 세포 자멸 세포 로 고려 된다 . 5 F 1 항체 의 모든 시험 버전 을 나타낸 표 11 의 데이터 는 Colo 205 세포 에서 세포 자멸 을 유도 할 수 있 었 다 .