2 시간 인 큐 베이 션 후 에 , 세포 플레이트 를 1200 rpm 에서 5 분 동안 원심 분리 에서 회전 시켰 다 . 펠릭스 ( 사이 바이오 ) 를 사용 하 여 , 상청 액 의 8 ul 를 384 웰 , 낮 은 부피 , 백색 프록시 플레이트 ( 퍼킨 엘머 , 6008230 ) 로 옮겼 다 . 인간 IL 1 베타 hTRF 키트 를 사용 하 여 상청 액 ( 시스 바이오 , 62 MIL 1 BPEH ) 를 분석 하 였 다 . 키트 지침서 에 따라 IL 1 베타 표준 곡선 을 작성 하 였 다 ( 키트 로부터 의 항체 를 키트 에 지시 된 1 : 20 이 아닌 1 : 40 으로 희석 하 였 다 ) . 합한 후 , 항체 를 5 μ l / 웰 로 플레이트 상 에 첨가 하 였 다 . 플레이트 를 밀봉 하 고 밤새 4 ℃ 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . 이어서 , 플레이트 를 hTRF 레이저 를 사용 하 여 665 / 615 nm 에서 퍼킨 엘머 엔 비전 상 에서 판독 하 였 다 . 데이터 를 이어서 , pg / ml 의 Il 1 베타 로 변환 하 였 다 . 화합물 은 IL - 1 β 생산 의 용량 - 관련 증가 를 나타냈 다 .