Bielschowsky 실버 염색법 은 이전 에 공개 된 방법 을 이용 하 여 고정 된 단면 에서 행하 였 다 ( Schwab C , Steele JC , McGeer PL . Dystrophic neurites are associated with the majority of early stage extracellular neurofibrillary tangles in parkinsonism dementia complex of Guam . Acta Neuropathol 1997 ; 94 : 486 - 492 . , 및 Schwab C , Hosokawa M , Mcgeer PL . Transgenic mice overexpressing amyloid beta protein are an incomplete model of alzheimer disease . Exp Neurol 2004 ; 188 : 52 - 64 . 참조 ) . 면역 조직 화학 기법 의 경우 , 마우스 의 뇌 단면 을 퍼 옥시다아제 표지 에 대한 제조사 의 지시 에 따라 DAB 키트 를 이용 하 여 염색 하 였 다 . 이미지 는 형광 현미경 으로부터 획득 하 였 다 . 면역 조직 화학 기법 에 사용 된 1 차 항체 는 마우스 항 - HIF - 1 α ( 1 : 800 ; Abcam , 미국 매사 츄 세츠 ) 이 었 다 . 노인 성 플라크 및 HIF - 1 α 양성 세포 의 표면적 을 측정 하 고 , Image J 소프트웨어 를 사용 하 여 치상 회의 백분율 로서 비교 하 였 다 .