본 발명 에서 사용 하 기 위한 항 - NGF 길항제 항체 는 당 분야 에 공지 된 방법 을 이용 하 여 확인 되 거나 특징 화 될 수 있 고 , 이 에 의해 NGF 의 생물학 적 활성 의 감소 , 개선 또는 중화 가 검출 및 / 또는 측정 될 수 있 다 . 제 PCT WO 04 / 065560 호 에 개시 된 방법 을 이용 할 수 있 다 . 다른 방법 , 예 를 들 면 미국 특허 제 5 , 766 , 863 호 및 제 5 , 891 , " 650 호 에 개시 된 키나제 수용체 활성 화 ( KIRA ) 분석법 을 이용 하 여 항 - NGF 제 를 확인 할 수 있 다 . 이러 한 ELISA - 유형 분석법 은 수용체 단백질 타이로신 키나제 ( 이후 로 는 "" rPTK "")", 예 를 들 면 TrkA 수용체 의 키나제 도메인 의 자 가 인산화 를 측정 함 으로써 키나제 활성 화 를 정성 적 또는 정량 적 으로 측정 하 고 , 또한 선택 된 rPTK , 예 를 들 면 TrkA 의 잠재 적 길항제 의 확인 및 특성 규명 에 적합 하 다 . 분석법 의 제 1 단계 는 키나제 수용체 , 예 를 들 면 TrkA 수용체 의 키나제 도메인 의 인산화 를 포함 하 고 , 여기 서 , 수용체 는 진 핵 세포 의 세포 막 에 존재 한다 . 수용체 는 내인성 수용체 일 수 있 거나 , 수용체 또는 수용체 구축물 을 인코딩 하 는 핵산 이 세포 로 형질 전환 될 수 있 다 . 전형 적 으로 제 1 고 형 상 ( 예 를 들 면 제 1 분석 플레이트 의 웰 ) 을 세포 가 고형 상 에 고착 되 도록 이런 세포 ( 일반 적 으로 포유 동물 세포주 ) 의 실질 적 으로 동종 의 모집단 으로 코팅 시킨다 . 종종 , 세포 가 부착 되 고 , " 이 에 의해 제 1 고 형 상 에 자연 적 으로 부착 된다 . "" 수용체 구축물 "" 이 사용 되 는 경우 ", 이 는 일반 적 으로 키나제 수용체 와 플랙 폴리펩타이드 의 융합체 를 포함 한다 . 플랙 폴리펩타이드 는 분석법 의 ELISA 부분 에서 포착 제 , 종종 포착 항체 에 의해 인식 된다 . 그런 다음 , 키 로 신 키나제 수용체 ( 예 를 들 면 TrkA 수용체 ) 가 NGF 와 분석 물 에 노출 ( 또는 접촉 ) 하 도록 분석 물 , 예 를 들 면 후보자 NGF 길항제 ( 항 - NGF 길항제 항체 를 포함 ) 를 NGF 와 함께 부착 세포 를 갖 는 웰 에 첨가 한다 . 이 분석법 은 이 의 리간드 인 NGF 에 의한 TrkA 의 활성 화 를 억제 하 는 길항제 ( 항체 포함 ) 를 확인 할 수 있 다 . NGF 와 분석 물 에 노출 시킨 후 , 용균 완충액 ( 이 는 내부 에 용해 성 세제 를 갖 는다 ) 을 이용 하 여 접착 세포 를 용해 시키 고 , 부드럽 게 진탕 하 여 , 세포 용균 물 을 방출 시켜 세포 용균 물 을 농축 하 거나 청정 화 할 필요 없이 분석법 의 ELISA 부분 에 직접 가할 수 있 다 .