상기 준비 한 시료 50 ㎕ 를 활성 화 된 비 만 세포 에 첨가 하 였 다 . 그 후 , 37 ℃ 온도 에서 30 분 간 5 % CO 2 배양기 에서 30 분 동안 배양 하 였 다 . 이후 , 외래 항원 ( DNP ( 2 , 4 - dinitrophenol ) , 100 ng / ㎖) 을 10 ㎕ 씩 첨가 한 후 , 다시 37 ℃ 온도 에서 30 분 간 5 % CO 2 배양 시킨 다음 상층 액 을 30 ㎕ 분리 하 였 다 .