gRNA 가 제 1 플래그 폴 연장 을 포함 하 는 경우 , tracr 는 제 1 tracr 연장 을 포함 할 수 있 다 . 제 1 tracr 연장 은 제 1 플래그 폴 연장 의 뉴클레오타이드 와 상보 적 인 , 예 를 들 어 80 %, 85 %, 90 %, 95 % 또는 99 %, 예 를 들 어 완전히 상보 적 인 뉴클레오타이드 를 포함 할 수 있 다 . 일부 양태 에서 , 제 1 플래그 폴 연장 의 상보 적 인 뉴클레오타이드 와 혼성 화 되 는 제 1 tracr 연장 뉴클레오타이드 는 연속 적 이 다 . 일부 양태 에서 , 제 1 플래그 폴 연장 의 상보 적 인 뉴클레오타이드 와 혼성 화 되 는 제 1 tracr 연장 뉴클레오타이드 는 불연속 적 이 고 , 예 를 들 어 제 1 플래그 폴 연장 의 뉴클레오타이드 와 염기쌍 형성 하 지 않 는 뉴클레오타이드 에 의해 분리 된 2 개 이상 의 혼성 화 영역 을 포함 한다 . 일부 양태 에서 , 제 1 tracr 연장 은 적어도 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14 , 15 , 16 , 17 , 18 , 19 , 20 개 이상 의 뉴클레오타이드 를 포함 한다 . 일부 양태 에서 , 제 1 tracr 연장 은 SEQ ID NO : 189 를 포함 한다 . 일부 양태 에서 , 제 1 tracr 연장 은 SEQ ID NO : 189 와 적어도 80 %, 85 %, 90 %, 95 % 또는 99 % 상동인 핵산 을 포함 한다 .