상기 가이드라인 을 사용 하 여 하 기 의 참조 구성 성분 을 이용 함 으로써 변형 된 아데노바이러스 를 제조 하 였 다 . 게이트웨이 DONR 벡터 를 사용 하 였 다 . 인간 Ad 5 의 일례 에서 , PCR 에 의해 E 1 모듈 을 수득 하 고 , SLIC 를 사용 하 여 상기 E 1 모듈 을 벡터 pDONR P 1 P 4 내로 삽입 하 였 다 . attL 1 및 attL 4 재조합 부위 를 포함 하 는 pDONR P 1 P 4 벡터 골격 을 PCR 을 사용 하 여 증폭 시키 고 , SLIC 에 의해 Ad 5 E 1 모듈 과 함께 조합 하 였 다 . 대체 역선택 카세트 를 생성 하 기 위해 , 벡터 pDONR P 1 P 4 를 변형 시켰 다 . attP 1 및 attP 4 재조합 부위 를 포함 하 는 상기 벡터 골격 을 PCR 을 사용 하 여 증폭 시키 고 , PheSA 294 G 돌연변이 및 테트라사이클린 내성 카세트 ( pENTR L 3 - pLac - Tet - L 2 로부터 의 pLac - Tet 카세트 ) 와 조립 함 으로써 새로운 DONR 벡터 를 생성 하 였 다 . 이어서 , 새로운 DONR 벡터 로부터 attR 1 - PheSA 294 G - Tet ( r ) - attR 4 단편 을 PCR 에 의해 증폭 시키 고 , " Ad 셈 블리 DEST 벡터 내 로 삽입 하 였 다 . 문헌 ( [ "" MultiSite Gateway ® Pro Plus """, Cat # 12537 - 100 ] ; 및 [ Sone , T . et al . J Biotechnol . 2008 Sep 10 ; 136 ( 3 - 4 ) : 113 - 21 ] ) 을 참조 할 수 있 다 .