항 - NGF Fab 및 모노클 론 항체 의 친화성 이 BIAcore 3000 TM 표면 플라스몬 공명 ( SPR ) 시스템 ( 뉴저지주 피 스카 웨이 소재 의 바이아 코어 인 코포 레이티 드 ( BIACore INC ) ) 에 의해 측정 될 수 있 다 . CM 5 칩 은 공급자 의 지시 에 따라 N - 에틸 - N '-( 3 - 다이메틸 아미노 프로필 ) - 카 보다 이나 이드 하이드로 클로라이드 ( EDC ) 및 N - 하이드 록 시석 신 이미드 ( NHS ) 를 이용 하 여 활성 화 되 었 다 . 인간 NGF 를 10 mM 나트륨 아세테이트 pH 4 . 0 으로 희석 하 고 , 0 . 005 mg / mL 의 농도 에서 활성 화 된 칩 상 으로 주입 하 였 다 . 개별 적 인 칩 채널 을 가로지르 는 가변 유동 시간 을 이용 하 여 하 기 2 개 범위 의 항체 밀도 를 달성 할 수 있 다 : 상세 한 동역학 연구 를 위한 100 내지 200 반응 단위 ( RU ) , 및 스크리닝 분석 을 위한 500 내지 600 RU . 칩 을 에탄올아민 으로 블록 킹 할 수 있 다 . 재생 연구 는 피어스 용출 완충액 ( 일리노이주 록 포드 소재 의 피어스 바이오테크놀로지 ( Pierce Biotechnology ) , 제품 번호 21004 ) 및 4 M NaCl ( 2 : 1 ) 의 혼합물 이 200 회 주입 동안 칩 상의 hNGF 의 활성 을 유지 시키 면서 도 결합 된 Fab 를 효과 적 으로 제거 한다는 것 을 보여 주 었 다 . HBS - EP 완충액 ( 0 . 01 M HEPES , pH 7 . 4 , 0 . 15 NaCl , 3 mM EDTA , 0 . 005 % 계면 활성제 P 29 ) 을 모든 바이아 코어 분석 을 위한 작업 완충액 으로 이용 하 였 다 .