< ANGPT 2 > HC 및 LC 를 코딩 하 는 핵산 서열 을 , 각각 화학 적 합성 으로 합성 한 후 Geneart ( Regensburg , Germany ) 의 pGA 4 클로닝 벡터 에 기초 한 pPCRScript ( Stratagene ) 내 로 클로닝 하 였 다 . < ANGPT 2 > HC 를 코딩 하 는 발현 카세트 를 각각 의 E . 콜라 이 ( E . coli ) 플라스미드 내 로 클로닝 하 여 최종 벡터 SB 04 - pUC - HC - ANGPT 2 를 산출 하 였 고 ; 각각 의 < ANGPT 2 > LC 를 코딩 하 는 발현 카세트 를 각각 의 E . 콜라 이 ( E . coli ) 플라스미드 내 로 클로닝 하 여 최종 벡터 SB 06 - pUC - LC - ANGPT 2 를 산출 하 였 다 . 서브 클로닝 된 핵산 서열 을 DNA 서열 분석 으로 확인 하 였 다 . 일시 적 및 안정 적 트랜스펙션 을 위해서 , 형질 전환 된 E . 콜라 이 ( E . coli ) 배 양물 로부터 의 플라스미드 제조 ( Nucleobond AX , Macherey - Nagel ) 에 의해 다량 의 플라스미드 를 제조 하 였 다 .