희석 된 100 μ L 용량 의 분액 ( aliquot ) 을 R 2 A Agar ( Difco . Co . USA ) 배지 에 스프 레딩 하 고 , 25 ℃ 에서 일 주일 동안 정치 배양 하 여 콜로니 를 형성 시키 는 과정 을 2 회 반복 수행 하 였 다 . 이렇게 형성 된 3 개 콜로니 에서 균주 를 분리 하 여 20 %( w / v ) 글리세롤 에 보관 하 여 - 80 ℃ 에서 동결 보존 하 여 사용 하 였 다 .