pTrcKudzu - yIDI ( kan ) 을 PstI 으로 소화 시키 고 , SAP 으로 처리 하 고 , 열 사 멸 시키 고 겔 정제 하 였 다 . 이 를 합성 RBS 를 갖 는 대장균 dxs 를 인코딩 하 는 PCR 생성물 에 라 이게 이 션 ( 프라이머 MCM 13 5 '- G A T C A T G C A T T C G C C C T T A G G A G G T A A A A A A A C A T GAGTTTTGATATTGCCAAATACCCG ( SEQ ID NO : 18 ) 및 MCM 14 5 '- C A T G C T GCAGTTATGCCAGCCAGGCCTTGAT ( SEQ ID NO : 19 ) ; 주형 TOP 10 세포 ) ( NsiI 및 PstI 으로 소화 됨 ) 하 고 겔 정제 하 였 다 . 최종 플라스미드 를 pTrcKudzu - yIDI - dxs ( kan ) 로 지칭 하 였 다 ( 도 21 및 22 ) .