레바 우디 오시드 A 60 % 에 대한 조작 된 라운드 18 변이체 의 활성 을 특성 화 하 기 위해 진탕 플라스크 분말 로딩 용량 반응 실험 을 수행 하 였 다 . 0 . 0013 - 0 . 04 g / L 수준 의 진탕 플라스크 분말 ( SFP ) 을 50 mM 인산칼륨 완충제 , pH 6 , 20 g / L RebA 60 , 0 . 05 g / L ADP , 40 g / L 수크로스 , 0 . 05 g / L SUS SFP 서열 번호 7506 및 0 . 15 g / L β - 1 , 3 - 글 리코 실트 랜스 퍼라 제 ( β 1 , 3 GT ) SFP 서열 번호 7388 을 함유 하 는 100 μ L 의 총 반응 부피 에서 검정 하 였 다 . 반응 은 16 - 18 시간 동안 300 RPM 에서 써 모 트론 ® 적정 플레이트 진탕기 에서 60 ℃ 에서 수행 하 였 다 . 반응물 을 상기 한 바 와 같이 희석 하 고 , 켄 칭 하 고 , 분석 하 였 다 . 0 . 005 g / L SFP 로딩 시 에 라운드 18 변이체 에 의한 원 포트 반응 에서 레바 우디 오시드 M 의 생 성 에 대한 결과 가 표 58 . 3 에 제시 된다 . 서열 번호 7784 의 변이체 가 가장 개선 된 변이체 이 었 다 . 따라서 , 이 변이체 를 레바 우디 오시드 D 를 형성 하 기 위해 ADP - 글루코스 로부터 레바 우디 오시드 A 로 글 리코 실 을 전달 하 는 촉매 작용 을 위한 최상 의 효소 로서 선택 되 었 다 .