확보 된 5 , 000 개 의 콜로니 를 각각 가압 살균 한 종 배지 200 ㎕ 에 접종 하 여 96 deep well plate 에서 마이크 로 플레이트 진탕기 ( Microplate shaker ( TAITEC ) ) 를 이용 하 여 30 ℃ 온도 , 1200 rpm 에서 24 시간 진탕 배양 하 여 종 배양액 으로 사용 하 였 다 . 가압 살균 한 발효 배지 290 ㎕ 를 96 deep well plate 에 분주 한 후 종 배양액 20 ㎕ 씩 접종 하 고 , 상기 조건 과 동일 하 게 72 시간 진탕 배양 하 여 원심 분리 하 여 세포 를 얻 었 다 . 다음 으로 회수 된 세포 를 1 X 포스 페이트 버퍼 ( 10 X phosphate - buffered saline : 염화나트륨 80 g , 염화칼륨 2 g , 인산나트륨 14 . 4 g , 인산칼륨 2 . 4 g , 멸 균수 0 . 8 L ) 에 세 척 후 , 같 은 버퍼 에 재현 탁 시킨 후 , 형광 강도 를 측정 하 였 다 . 형광 강도 는 마이크 로 플레이트 리더 ( Microplate reader ) 를 이용 하 여 488 nm 에서 여기 광 을 조사 하 고 , 511 nm 발 출광 을 이용 하 여 측정 함 으로써 , GFP 유전자 의 발현 정도 를 측정 하 였 다 . 측정 후 , 야생형 의 PpurA - gfp 에 비해 형광 강도 가 약화 된 2 개 의 변이 콜로니 PpurA ( mt 3 ) 및 PpurA ( mt 378 ) 를 선별 하 였 다 .