역 분화 줄기세포 ( Induced Pluripotent Stem Cell ; iPS ) 를 제조 하 기 위하 여 , 기관 IRB 의 승인 을 받 아 질병 을 가지 고 있 지 않 은 정상 인 기부자 두 명 의 말초 혈액 으로부터 각각 단핵 세포 를 분리 하 였 다 . 단핵 세포 를 분리 하 기 위하 여 , 혈액 을 Ficoll Paque - PLUS ( GE Healthcare ) 를 이용 하 여 2 , 000 rpm 에서 30 분 간 원심 분리 하 여 단핵 세포 를 분리 하 고 , 분리 된 단핵 세포 는 StemSpan cc 110 이 첨가 된 StemSpan - ACF ( Stem Cell Technologies ) 에서 4 일 동안 배양 하 였 다 . 그리고 vitronectin 이 코팅 된 24 - 웰 플레이트 에 단핵구 세포 를 다시 재 접종 하 고 , CytoTune ® 2 . 0 Reprogramming kit ( Invitrogen ) 을 이용 하 여 역 분화 줄기세포 를 제조 하 였 다 . 형질도입 후 12 일 이 경과 하 고 역 분화 줄기세포 콜로니 가 형성 된 후 에 , 수동 피 킹 방식 으로 콜로니 를 개별 적 으로 vitronectin 이 코팅 된 플레이트 에 역 분화 줄기세포 를 접종 하 고 , mTeSR 1 배지 ( Stem Cell Technologies ) 를 이용 하 여 배양 하 며 특성 화 를 위해 확대 시켰 다 . 이 를 통하 여 , 정상 인 기부자 두 명 으로부터 각각 KW 군 ( KW , c 1 , p - 27 ) 과 BM 군 ( BM , No - 2 , c 1 , P - 14 ) 두 종류 의 역 분화 줄기세포 를 획득 하 였 다 .