BL 21 / pTrcHis 2 A - mvaE / mvaS 또는 FM 5 / p pTrcHis 2 A - mvaE / mvaS 를 LB 및 카르 베니 실린 ( 100 ㎍/㎖) 에 접종 하 고 , 200 rpm 에서 진탕 하 면서 37 ℃ 에서 하룻밤 동안 성장 시켰 다 . 이 들 배 양물 을 250 ㎖ 배 플 드 플라스크 내 의 50 ㎖ 배지 로 0 . 1 의 OD 600 이 되 도록 희석 하 였 다 . 배지 는 TM 3 , 1 또는 2 % 글루코오스 , 카르 베니 실린 ( 100 ug / ㎖) 또는 TM 3 , 1 % 글루코오스 , 가수 분해 된 콩기름 , 및 카르 베니 실린 ( 100 ug / ㎖) 또는 TM 3 및 바이오매스 ( 제조 된 바가스 , 옥수수 대 또는 지팽이 풀 ) 였 다 . 배 앙물 을 OD 600 이 0 . 4 에 도달 할 때 까지 약 2 ~ 3 시간 동안 200 rpm 에서 진탕 하 면서 30 ℃ 에서 성장 시켰 다 . 이 시점 에서 , IPTG ( 400 μ M ) 을 첨가 하 여 mvaE mvaS 구성 물 로부터 의 발현 을 유도 하 였 다 . 2 시간 주기 내지 유도 후 6 시간 , 이후 필요시 24 , 36 및 48 시간 후 에 취한 샘플 로 추가 20 또는 40 시간 동안 배 양물 을 인 큐 베이 션 하 였 다 . 1 ㎖ 의 배 양물 을 제거 하 고 , OD 60 O 을 측정 하 고 , 마이크 로 퓨즈 ( microfuge ) 에서 세포 를 펠릿 화고 상청 액 을 제거 하 고 , 메 발론 산 에 대해 이 를 분석 하 여 샘플링 을 수행 하 였 다 .