일부 양태 에서 , Cas 9 분자 는 적어도 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 이상 의 NLS 와 같 은 하나 이상 의 핵 국재 화 서열 ( NLS ) 을 포함 할 수 있 다 . 일부 실시 형태 에서 , Cas 9 분자 는 아미노 말단 에 또는 그 부근 에 적어도 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 이상 의 NLS , 카르복시 말단 에 또는 그 부근 에 적어도 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 이상 의 NLS , 또는 이 들 의 조합 ( 예 를 들 어 아미노 말단 에 하나 이상 의 NLS 및 카르복시 말단 에 하나 이상 의 NLS ) 를 포함 한다 . 하나 를 초과 하 는 NLS 가 존재 할 때 , 각각 은 다른 것 들 과 독립 적 으로 선택 될 수 있 어 , 단일 NLS 는 하나 를 초과 하 는 카피 로 및 / 또는 하나 이상 의 카피 로 존재 하 는 하나 이상 의 다른 NLS 와 조합 하 여 존재 할 수 있 다 . 일부 실시 형태 에서 , NLS 는 NLS 의 가장 가까운 아미노산 이 N 말단 또는 C 말단 으로부터 폴리펩타이드 사슬 을 따라 약 1 , 2 , 3 , 4 , 5 , 10 , 15 , 20 , 25 , 30 , 40 , 50 이상 의 아미노산 이내일 때 , N - 또는 C - 말단 부근 이 라고 여겨진다 . 전형 적 으로 , NLS 는 단백질 표면 상 에 노출 된 하나 이상 의 양전하 리신 또는 아르기닌 의 짧 은 서열 로 구성 되 지만 , 다른 유형 의 NLS 가 알려져 있 다 . NLS 의 비 제한 적 인 예 로 는 아미노산 서열 PKKKRKV ( SEQ ID NO : 206 ) 를 갖 는 SV 40 바이러스 대형 T - 항원 의 NLS ; 서열 KRPAATKKAGQAKKKK ( SEQ ID NO : 207 ) 의 뉴 클레오 플라스민 으로부터 의 NLS ( 예 를 들 어 뉴 클레오 플라스민 2 부분 으로 된 NLS ; 아미노산 서열 PAAKRVKLD ( SEQ ID NO : 208 ) 또는 RQRRNELKRSP ( SEQ ID NO : 209 ) 를 갖 는 c - myc NLS ; 서열 N Q S S N F G P M K G G N FGGRSSGPYGGGGQYFAKPRNQGGY ( SEQ ID NO : 210 ) 를 갖 는 hRNPA 1 M 9 NLS , 임포 틴 - 알파 로부터 의 IBB 도메인 의 서열 R M R I Z F K N K G K D T A E L R RRRVEVSVELRKAKKDEQILKRRNV ( SEQ ID NO : 211 ) ; 근종 T 단백질 의 서열 VSRKRPRP ( SEQ ID NO : 212 ) 및 PPKKARED ( SEQ ID NO : 213 ) ; 인간 p 53 의 서열 PQPKKKPL ( SEQ ID NO : 214 ) ; 마우스 c - ab 1 IV 의 서열 SALIKKKKKMAP ( SEQ ID NO : 215 ) ; 인플루엔자 바이러스 NS 1 의 서열 DRLRR ( SEQ ID NO : 216 ) 및 PKQKKRK ( SEQ ID NO : 217 ) ; 간염 바이러스 델타 항원 의 서열 RKLKKKIKKL ( SEQ ID NO : 218 ) ; 마우스 Mx 1 단백질 의 서열 REKKKFLKRR ( SEQ ID NO : 219 ) ; 인간 폴리 ( ADP - 리보스 ) 중합효소 의 서열 KRKGDEVDGVDEVAKKKSKK ( SEQ ID NO : 220 ) ; 및 스테로이드 호르몬 수용체 ( 인간 ) 글루코코르티코이드 의 서열 RKCLQAGMNLEARKTKK ( SEQ ID NO : 221 ) 를 포함 하 거나 이 로부터 유래 된 NLS 서열 이 포함 된다 . 다른 적합 한 NLS 서열 은 당 분야 에 공지 되 어 있 다 ( 예 를 들 어 문헌 [ Sorokin , Biochemistry ( Moscow ) ( 2007 ) 72 : 13 , 1439 - 1457 ; Lange J Biol Chem . ( 2007 ) 282 : 8 , 5101 - 5 ] ) .