피부 섬유 아 세포 ( HDFn ) 를 48 well 플레이트 에 5 × 104 cells / well 의 농도 로 배양 배지 0 . 3 mL 로 접종 하 여 37 ℃, 5 % CO 2 에서 배양 하 였 다 . 24 시간 지난 이후 추출물 을 농도 별 로 포함 한 새로운 배지 로 24 시간 동안 배양 하 였 다 . 24 시간 배양 이후 배양액 을 모아서 enzymes - linked immunoassay kit ( Takara 사 ) 를 이용 하 여 콜라겐 전구체 의 C - 말단 의 양 을 측정 하 였 다 . 또한 , 콜라겐 용액 640 ng / mL 을 이용 하 여 콜라겐 농도 0 ng - 640 ng 사이 의 standard curve 를 얻 어 배지 에 있 는 콜라겐 양 을 계산 하 였 다 .