조혈 줄기 및 전 구체 하위 집단 에서 편집 효율 의 분석 을 위한 유세포 분석 세포 소팅 . 전기 천공 - 후 3 일 째 에 편집 된 세포 배 양물 을 수합 하 고 , 2 % FBS ( Omega Scientific , Cat . # FB - 11 ) 및 2 mM EDTA ( Corning Cat . # 46 - 034 - CL ) 가 보충 된 HBSS ( GE Life Sciences , Cat . # SH 30588 . 01 ) 로 구성 된 FACS 염색 완충제 중 항 - CD 34 ( BD Biosciences , Cat # 348057 ) , 항 - CD 38 ( BD Biosciences , Cat # 560677 ) , 항 - CD 90 ( BD Biosciences , Cat # 559869 ) , 항 - CD 45 RA ( BD Biosciences , Cat # 563963 ) , 항 - CD 49 f ( BD Biosciences , Cat # 562598 ) 와 함께 인 큐 베이 션 하 였 다 . 세포 를 FACS 염색 완충제 로 세척 하 고 , DAPI ( 4 ', 6 - 디아 미 디노 - 2 - 페닐 인돌 ) 의 첨가 에 의해 세포 생존 력 을 결정 하 였 다 . 다색 FACS 분석 을 FACS Aria 세포 소터 ( BD Biosciences ) 상 에서 수행 하 였 다 . 음성 과 양성 세포 집단 사이 의 구별 을 , 각각 의 항체 를 개별 적 으로 이 소형 및 형광 크롬 - 공액 매칭 된 비 - 특이 적 대 조군 항체 ( BD Biosciences Cat # 550854 , 554680 , 563437 , 557872 및 562602 ) 로 대체 한 대 조군 염색 된 세포 배 양물 을 사용 하 여 설정 된 게이트 에 의해 결정 하 였 다 . 소팅 된 세포 의 순도 를 소트 - 후 순도 체크 에 의해 확인 하 였 다 .