먼저 , 배양 된 RAW 264 . 7 세포 를 24 - 웰 플레이트 ( 24 - well plate ) 에 웰 당 1 . 8 X 105 cells / mL 로 분주 한 후 , 24 시간 배양 하 였 다 . 배양 후 , 각각 추출물 과 LPS ( lipopolysaccharide , 1 μ g / mL ) 를 동시 에 처리 하 여 24 시간 배양 하 였 다 . 생성 된 산화질소 의 양 은 Griess 시약 [ 1 % ( w / v ) Sulfanilamide , 0 . 1 % ( w / v ) Naphylethylenediamine in 2 . 5 % ( v / v ) Phosphoric acid ] 을 이용 하 여 세포 배양액 중 에 존재 하 는 NO 2 - 의 형태 로 측정 하 였 다 . 세포 배양 상등 액 100 μ L 와 Griess 시약 100 μ L 를 혼합 하 여 96 - 웰 플레이트 에서 10 분 동안 반응 시킨 후 540 nm 에서 흡광도 를 측정 하 였 다 . 생성 된 산화질소 의 양 은 Sodium nitrite ( NaNO 2 ) 를 standard 로 비교 하 였 다 . 시료 를 처리 하 지 않 은 세포 배양액 의 흡광도 를 대 조군 100 % 로 하 였으며 , 실험 은 각각 3 회 씩 수행 하 여 평균값 ± 표준편차 로 나타내 었 다 .