24 시간 배양 후 , 배양액 을 PMSF ( p h e n ylmethanesulfonylfluoride ) 의 존재 하 에 회수 하 여 시료 로 사용 하 였 다 . A β 42 의 분석 에 는 Affinity Purified Anti - Human A β ( 38 - 42 ) Rabbit IgG 가 , A β 40 의 분석 에 는 Affinity Purified Human A β ( 35 - 40 ) ( 1 A 10 ) Mouse IgG MoAb 가 각각 코팅 된 플레이트 에 100 ㎕ 의 시료 를 넣 고 4 ℃ 에서 16 시간 동안 반응 시키 고 7 회 세척 한 후 , HRP ( enzyme horseradish peroxidase ) conjugation 된 A β ( 11 - 28 ) 특이 적 Affinity Purified Anti - Human A β ( 11 - 28 ) Mouse IgG MoAb 를 4 ℃ 에서 1 시간 동안 반응 시켰 다 . 다시 9 회 세척 한 후 tetramethyl benzidine ( TMB ) 기질 액 을 넣 고 실온 에서 30 분 간 반응 시킨 후 정지액 인 1 N H 2 SO 4 를 100 ㎕ 첨가 하 여 450 ㎚ 에서 Model 680 Microplate Reader ( Bio - Rad , CA ) 를 이용 하 여 흡광도 를 측정 하 였 다 .