pHg 3 A - 3 플라스미드 가 내재 되 어 있 는 TG 1 세포 를 2 % glucose 가 포함 된 ( 2 x YT / TG ) 배지 에서 OD 600 nm = 0 . 5 까지 배양 하 였 다 . Electro - competent cell 의 제조 를 위해 배양 된 세포 를 10 % 글리세롤 ( glycerol ) 이 함유 되 어 있 는 dH 2 O 로 3 번 세척 하 였 다 . 결과 적 으로 , pHg 3 A - 3 플라스미드 가 내재 되 어 있 는 electro - competent TG 1 세포 에 100 ng 의 pLflT - 3 파지 미드 를 형질전환 시키 고 , 2 x YT / AY ( 2 x YT with 50 μ g / ml ampicillin , 10 μ g / ml tetracycline ) 아가 플레이트 ( agar plate ) 에 도말 하 여 27 ℃ 에서 밤새 도록 배양 하 였 다 . 이후 , 재조합 파지 의 증폭 을 위해 배양 된 2 ml 의 세포 를 OD 600 = 0 . 5 로 조절 하 고 , Ex 12 helper phage ( 20 M . O . I ) 를 첨가 하 여 37 ℃ 에서 1 시간 동안 배양 하 였 다 . 배양 된 세포 를 원심 분리 하 여 상등 액 을 제거 하 고 , 20 ml 의 2 x YT / ACTKA ( 2 x YT medium with 50 μ g / ml ampicillin , 10 μ g / ml carbenicillin , 10 μ g / ml tetracycline , 50 μ g / ml kanamycin , 0 . 02 % arabinose ) 로 재현 탁하 여 , 27 ℃ 에서 밤새 도록 ( overnight ) 배양 하 였 다 .