( A ) FVB 마우스 들 에 헤파린 ( heparin ) ( 20 units ) 과 PBS , VEGF ( 100 ng ) , VEGF + LY 255283 ( 10 μ g ) , VEGF + U 75302 ( 1 μ g ) 또는 VEGF + DMSO 가 함유 된 400 μ l 의 성장 인자 - 유도성 매트리 겔 을 피하 에 주사 하 였 다 . 7 일 후 , 마우스 들 을 죽이 고 , 고체 화 된 매트 리겔 을 제거 하 고 , 10 % 포르 마 잔 으로 고정 시키 고 , 파라핀 으로 포 매 ( embed ) 시키 고 , 5 μ m 로 절단 하 고 , 제 조사 의 지시 에 따라 혈관 염색 키트 ( Blood Vessel Staining Kit ) ( Chemicon ) 를 이용 하 여 안티 - vWF ( anti - von Willebrand factor ) 항체 와 염색 시켰 다 . 각각 의 염색 된 매트 리겔 을 DP 71 디지털 카메라 가 장착 된 BX 51 현미경 ( Olympus ) 를 이용 하 여 이미지 를 얻 었 으며 , 혈관 의 vWF - 양성 부분 을 이미지 J 소프트웨어 ( Image J software ) 를 이용 하 여 측정 하 였 다 . 얻 어 진 이미지 는 각각 의 처리 로 얻 어 진 결과 를 나타낸 것 이 다 . ( B ) HUVEC 를 5 % FBS 를 포함 하 는 M 199 배지 에서 4 시간 동안 배양 하 고 , LY 255283 과 U 75302 를 1 % FBS 를 포함 하 는 M 199 배지 에 분산 시킨 세포 에 30 분 동안 첨가 하 였 다 . 세포 를 성장 인자 - 유도성 매트리 겔 이 코팅 된 24 - well 배 양판 에 평판 배양 시키 고 , VEGF 로 자극 하 였 다 . 12 시간 후 , 무작위 로 선택 한 5 개 의 지역 을 영상 화 하 고 , 튜브 길이 를 이미지 J 소프트웨어 ( Image J sofrware ) 를 이용 하 여 측정 하 였 다 . 바 ( bar ) 는 100 μ m 를 나타낸다 . ( C ) HUVEC 를 5 % FBS 를 포함 하 는 M 199 배지 에서 4 시간 동안 배양 시키 고 , LY 255283 과 U 75302 를 1 % FBS 를 포함 하 는 M 199 배지 에 분산 시킨 세포 에 30 분 동안 첨가 하 였 다 . 위 의 웰 ( upper well ) 에 세포 를 채워 넣 고 , 아래 웰 ( lower well ) 에 VEGF 를 처리 하 였 다 . 3 시간 후 , 세포 를 아랫 부분 으로 이동 시키 고 , 염색 시킨 후 카운트 하 였 다 .