인간 세포주 ( Daudi , Raji , Ramos ) 는 ECACC 로부터 획득 하 였으며 , 10 % 우태 아 혈청 ( FCS ) ( Lonza , UK ) 이 보충 된 RPMI ( Invitrogen , UK ) 및 글루타민 및 피 루 베이트 ( 둘 다 모두 Invitrogen ) 에서 유지 하 였으며 , 37 ℃, 5 % CO 2 에서 배양 하 였 다 . BCR 발현 이 결핍 된 Rx 3 Ramos 세포 를 이전 에 생성 하 였 다 ( 36 ) . Ramos Fc γ RIIb 트랜스 펙 턴 트 및 빈 벡터 ( Fc γ RIIb 음성 ) 로 트랜스펙션 된 대 조구 세포 는 이전 에 기술 한 바 와 같 으며 ( 36 ) , 상기 한 바 와 같이 보충 된 RPMI 에서 유지 하 고 , Geneticin ( Invitrogen , UK ) 을 첨가 하 였 다 . Fc γ RIIb 및 빈 벡터 로 트랜스펙션 된 Rx 3 세포 들 을 생성 하 고 , 동일 한 방식 으로 유지 하 였 다 . Fc γ RIIb 표면 발현 은 PE - 표지 AT 10 ( 하 기 에 기술 함 ) 을 이용 하 여 플로우 사이토 메트리 에 의해 측정 되 었 다 . 저 , 중 또는 고 수준 의 Fc γ RIIb 를 발현 하 는 Ramos Fc γ RIIb 트랜스 펙 턴 트 의 집단 을 FACS Aria 플로우 사이토 미터 ( BD Biosciences , USA ) 를 이용 하 여 분류 하 였 다 .