이 들 클론 의 아미노산 서열 을 5 개 사슬 디아 바디 DART - G 에 통합 시켜서 최적 화 된 DART - G 분자 ( DART - G 1 , DART - G 2 ; DART - G 3 , 및 DART - G 4 로서 표시 됨 ) 를 생성 하 였 다 . DART - G 2 , DART - G 3 , 및 DART - G 4 의 결합 친화도 를 BIAcore 를 통해 평가 하 였 다 ( 표 11 ) . 이러 한 평가 를 위하 여 , His - 태그 된 가용성 인간 CD 137 ( huCD 137 ) 또는 시노 몰구 스 원숭이 CD 137 ( cynoCD 137 ) ( 히스티딘 - 함유 펩타이드 에 융합 된 인간 또는 시노 몰구 스 원숭이 CD 137 의 세 포외 부분 을 함유 함 ) 을 고정 된 항체 로 코팅 된 표면 위 로 통과 시켰 다 . 간단히 설명 하 면 , 각각 의 테스트 분자 를 F ( ab ) 2 염소 - 항 - 인간 Fc - 코팅 된 표면 위 로 포획 한 후 상이 한 농도 ( 6 . 25 내지 100 nM ) 의 huCD 137 또는 cynoCD 137 의 존재 하 에 인 큐 베이 션 하 였 다 . 결합 의 동역학 을 BIACORE ® 분석 결합 ( 표준 화 된 1 : 1 랑 뮈에르 결합 모델 ) 을 통해 측정 하 였 다 . 이 들 결과 로부터 계산 된 ka , kd 및 KD 를 표 13 에 제공 한다 .