녹차 추출물 의 췌장 세포 에 대한 보호 효과 를 확인 하 기 위하 여 , 한국 세포주 은행 에서 분양 받 은 췌장 세포 인 RINm 5 F 세포 및 MIN 6 세포 와 위 5 종 추출물 을 처리 하 여 세포 보호 효과 정도 를 시판 되 는 분석 키트 를 이용 하 여 확인 하 였 다 . 녹차 잎 추출물 을 10 ㎍/ mL ~ 100 mg / mL 의 농도 로 배양 배지 에 첨가 하 여 시료 를 제조 하 였 다 . 그리고 , RINm 5 F 세포 를 10 % FBS , 1 % 페니실린 - 스트렙토마이신 을 첨가 한 RPMI 배지 를 포함 하 는 96 - 웰 플레이트 내 에 5 × 104 으로 분주 하 여 37 ℃, 5 % CO 2 가 유지 되 도록 배양 하 였 다 . MIN 6 세포 는 10 % FBS , 1 % 페니실린 - 스트렙토마이신 , 1 % 55 mM 2 - 메르 캅 토 에탄올 ( 2 - Mercaptoethanol ) 을 첨가 한 DMEM 배지 를 포함 하 는 96 - 웰 플레이트 내 에서 37 ℃, 5 % CO 2 가 유지 되 도록 배양 하 였 다 . 약 1 일 동안 RINm 5 F 세포 , MIN 6 세포 를 안정 화 시킨 뒤 , 상기 제조 한 추출물 시료 를 96 웰 플레이트 의 한 웰 볼륨 200 ㎕ 의 100 분 의 1 의 농도 인 2 ㎕ 씩 첨가 하 였 다 . 4 시간 후 RINm 5 F 세포 에 STZ ( Streptozotocin ) 100 mM 의 농도 로 96 웰 플레이트 의 한 웰 볼륨 200 ㎕ 의 100 분 의 1 의 농도 인 2 ㎕ 씩 첨가 하 였 다 . 그리고 MIN 6 세포 에 STZ ( Streptozotocin ) 300 mM 의 농도 로 96 웰 플레이트 의 한 웰 볼륨 200 ㎕ 의 100 분 의 1 의 농도 인 2 ㎕ 씩 첨가 하 였 다 . 24 시간 후 RINm 5 F 세포 , MIN 6 세포 에 CCK 96 - 웰 플레이트 의 한 웰 볼륨 200 ㎕ 의 20 분 의 1 의 농도 인 10 ㎕ 씩 각 웰 에 첨가 하 였 다 . 4 시간 정도 37 ℃, 5 % CO 2 가 유지 된 인큐베이터 에서 반응 시켜 준 뒤 플레이트 리더 를 이용 하 여 540 nm 에서 흡광도 를 측정 하 였 다 .