도 3 에 나타난 바 와 같이 유비퀴틴 과 결합 한 KIAA 0317 단백질 은 높 은 분자량 으로 인하 여 , 결합 하 지 않 은 것 과 전기영 동시 이 동거리 의 차이 로 분리 할 수 있 다 . 본 발명 의 KIAA 0317 단백질 은 E 1 및 E 2 의 존재 하 에서 , 유비퀴틴 과 복합체 를 형성 하 였으며 , 이러 한 복합체 의 형성 은 유비퀴틴 과 의 티오 에스테르 결합 을 방해 하 는 환원제 ( DTT ) 및 시스테인 잔기 의 알리 닌 으로 의 돌연변이 ( KIAA 0317 - Hc / a ) 에 의해 손실 되 었 다 . 세포 내 에서 의 표적 단백질 의 유비퀴틴 화 에 관여 하 는 E 3 - 유비퀴틴 라 이게 이즈 는 통상 적 으로 E 1 및 E 2 의 존재 하 에서 유비퀴틴 과 티오 에스테르 결합 을 형성 하 는 것 으로 알려져 있 다 . 따라서 , 상기 결과 는 본 발명 의 KIAA 0317 단백질 , 특히 HECT 영역 이 E 3 - 유비퀴틴 라 이게 이 즈 로서 기능 한다는 것 을 증명 하 는 것 이 다 .