각 균주 로부터 추출 한 DNA 로부터 16 S / 23 S rRNA ITS ( intergenic spacer ) 지역 을 증폭 하 기 위하 여 보 고 된 프라이머 세트 를 이용 하 였 다 ( 표 1 ) . PCR 반 응시 0 . 4 mM dNTP , 0 . 5 units Taq 폴리머 라 아제 , 4 mM Mg 2 + 이 함유 된 Takara Perfect Premix ( Takara , Japan ) 10 ㎕ 에 DNA 템 플레이트 ( 20 ㎍/ ml ) 1 ㎕, 1 . 0 μ M 정 방향 프라이머 와 1 . 0 μ M 역방향 프라이머 를 각각 1 ㎕ 씩 넣 고 나머지 는 증류수 를 첨가 하 여 총 부피 가 20 ㎕ 가 되 도록 제조 하 였 다 . PCR 증폭 은 Mastercycler gradient ( Eppendorf , Hamburg , Germany ) 으로 실시 하 였 다 . PCR 반응 은 94 ℃ 에서 5 분 ( initial denaturation ) , 94 ℃ 에서 1 분 ( denaturation ) , 55 ℃ 에서 2 분 ( annealing ) , 72 ℃ 에서 2 분 ( extension ) 을 30 사이클 을 실시 하 였 고 , 72 ℃ 에서 7 분 간 최종 extension 을 실시 하 였 다 . PCR product 는 QIAxcel advanced system ( Qiagen , Valecia , CA , USA ) 장비 를 이용 한 고해상도 모세관 ( high - resolution capillary ) 전기영동 을 수행 하 였 다 .