세포 펠릿 을 크 렙 스 ( Krebs ) - 트리스 완충액 ( 4 . 8 mM KCl , 1 . 2 mM CaCl 2 , 1 . 2 mM MgCl 2 , 120 mM NaCl , 15 mM 트리스 ; pH 7 . 5 ; 결합 분석 용 완충액 ) 에 현 탁 시키 고 , 얼음 위 에서 폴리 트론 ( polytron ) 으로 약 20 초간 균질 화 시킨 후 , 4 ℃ 에서 60 분 간 원심 분리 시켰 다 ( 50000 g ; 소발 ( Sorvall ) , 로터 : SM 24 = 20000 rpm ) . 세포 펠릿 을 크 렙 스 - 트리스 완충액 에 재현 탁 시키 고 얼음 위 에서 폴리 트론 으로 약 15 초간 균질 화 시켰 다 . 단백질 을 측정 하 고 ( 브래드포드 ( Bradford ) 방법 , 바이오 - 래드 ( Bio - Rad ) ) , 1 ㎖ 의 분취 량 을 준비 하 고 - 80 ℃ 에서 저장 하 였 다 .