진탕 플라스크 분말 ( SFP ) 을 20 g / L 의 농도 로 재 구성 하 고 , 50 mM 인산칼륨 완충제 , pH 6 , 15 mM 스테비오 시드 ( > 95 % 순도 ) 또는 레바 우디 오시드 D , 0 . 2 mM ADP ( Amresco , 초 순수 등급 ) 보조 기질 , 0 . 05 g / L SUS SFP 서열 번호 2510 , 및 37 . 5 mM 수크로스 ( 자당 ) 의 100 μ L 의 총 반응 부피 에 0 . 003 - 0 . 1 g / L SFP 로 희석 하 였 다 . 반응물 은 60 ℃ 에서 4 시간 동안 300 RPM 진탕 하 에 써 모 트론 ® 적정 플레이트 진탕기 에서 인 큐 베 이 팅 하 였 다 . 반응물 을 물 에 20 배 희석 하 여 가용화 하 고 , 0 . 2 % 포름산 을 갖 는 아세 토니 트릴로 5 배 희석 함 으로써 켄 칭 하 고 , 원심 분리 에 의해 맑 게 하 고 , 분석 을 위해 물 로 15 배 희석 하 였 다 . 글 리코 실화 된 생성물 은 실시 예 31 , 표 31 . 1 에 기재 된 바 와 같이 SPE - QQQ 에 의해 검출 되 었 다 . 동결 건조 전 에 맑 아 진 진탕 플라스크 용해 물 을 사용 하 여 추가 의 열 안정 성 특성 분석 을 다음 과 같이 수행 하 였 다 : 용해 물 을 50 mM 인산칼륨 완충제 , pH 6 에 400 배 희석 하 고 , 60 - 75 ℃ 의 구배 로 16 시간 동안 열 순환기 에서 인 큐 베 이 팅 하 였 다 . 남 아 있 는 활성 의 비율 을 결정 하 기 위해 , 예비 인 큐 베이 팅 된 용해 물 을 스테비오 시드 또는 레바 우디 오시드 D 및 60 ℃ 에서 의 4 시간 인 큐 베이 션 을 사용 하 여 상기 기재 된 바 와 같이 검정 하 였 다 . 남 아 있 는 % 활성 은 고온 에서 의 생 성 을 예비 인 큐 베이 팅 된 최저 온도 에서 의 생 성 으로 나눈 값 으로 나타냈 다 .