생성물 PCRwv 308 및 PCRwv 309 를 다음 클로닝 단계 에서 pUC 19 폴리 링커 에 있 는 PstI 부위 를 이용 하 기 위해 동일 한 배향 으로 pUC 19 로 클로닝 하 였 다 . pWV 309 로부터 의 1443 bp AvrII / PstI 단편 을 pWV 308 의 4073 bp AvrII / PstI 단편 에 클로닝 하 여 pWV 310 을 제조 하 였 다 . 따라서 , pWV 310 은 AvrII 부위 에 융합 된 mbcM 의 플 랭킹 영역 에 상동 성 인 DNA 를 암호 화 하 는 SpeI / XbaI 단편 을 포함 하 였 다 . 이러 한 2816 bp SpeI / XbaI 단편 을 SpeI 으로 선형 화 된 pKC 1132 ( Bierman et al . , 1992 ) 으로 클로닝 하 여 pWV 320 을 제조 하 였 다 .