실험 세포 는 CCL 39 에서 유래 된 PS 120 세포 에 사람 NHE - 1 를 발현 시켜 사용 하 였으며 , 10 % 소 태아 혈청 과 1 % 페니실린 / 스트렙토마이신 ( 100 X solution ) , 1 % L - 글루타민 ( 200 mM 수용액 ) 이 보충 된 DMEM ( Dulbecco ' s modified Eagle ' s medium ) 배지 에서 세포 를 배양 하 였 다 . 직경 100 mm 디쉬 에서 약 80 ~ 90 % 키운 PS 120 / NHE - 1 세포 를 트립신 으로 처리 한 후 , 인산 완충 용액 ( PBS , phosphate buffer saline ) 으로 1 회 , 나트륨 없 는 완충액 ( Na - free buffer , pH 7 . 4 ; 138 . 2 mM 의 염화 콜린 , 4 . 9 mM 의 KCl , 1 . 5 mM 의 CaCl 2 · H 2 O , 1 . 2 mM 의 MgSO 4 · H 2 O , 1 . 2 mM 의 KH 2 PO 4 , 15 mM 의 D - 글루코스 , 20 mM HEPES ) 으로 1 회 세척 하 였 다 . 이것 을 원심 분리 하 여 침전물 을 20 mM NH 4 Cl 및 10 μ M BCECF - AM ( 2 ', 7 '- bis ( 2 - carboxyethyl ) - 5 , 6 - carboxy - fluorescein acetoxymethyl ester ) 을 함유 하 는 나트륨 없 는 완충액 에 부유 시킨 후 , 37 ℃ 의 CO 2 배양기 에서 30 분 간 배양 하 였 다 . NH 4 Cl 를 제거 하 고 동시 에 세포 밖 에 남 아 있 는 BCECF - AM 을 세척 해 주 기 위하 여 , PS 120 / NHE - 1 세포 를 원심 분리 한 후 나트륨 없 는 완충액 으로 1 회 세척 하 고 , 세 포수 가 2 . 5 × 104 세포 / 10 μ l 가 되 도록 부 유액 을 만들 어 4 ℃ 의 암실 에 보관 하 였 다 .