프로 파르 길 알코올 - 개시 된 폴리 ( 프로필렌 푸마 레이트 ) 디스크 ( ø = 6 mm ) 를 각각 1 시간 동안 클로로포름 , 아세톤 , 및 에탄올 로 세정 하 였 고 , 이후 12 시간 동안 1 × PBS 에 침지 시켰 다 . 나중 에 , 필름 은 1 시간 동안 70 % EtOH 에 침지 시킴 으로써 멸균 되 었 고 , UV 광 에 의 15 분 노출 이 후속 되 었 다 . 세포 씨 딩 이전 에 필름 은 세포 씨 딩 이전 에 2 시간 동안 Alpha - MEM 에 침지 되 었 다 . 마우스 두 개 관 줄기 세포 ( MC 3 T 3 - E 1 ) 을 10 % 우태 혈청 ( FBS ) , 100 유닛 / mL 페니실린 , 및 100 μ g . mL - 1 스트렙토마이신 이 보충 된 Alpha - MEM 배지 에서 배양 하 였 고 , 매 3 일 마다 계대 배양 시켰 다 . 계대 수 8 로 의 MC 3 T 3 를 250 세포 . mm - 2 로 씨 딩 하 였 고 , 모든 후속 실험 을 세포 씨 딩 이후 48 시간 동안 수행 하 였 다 .