홍 마늘 음료 단일 시료 및 그 혼합물 추출물 의 intracellular ROS 측정 은 intracellular ROS assay kit ( Cell biolabs , USA ) 을 이용 하 여 측정 하 였 다 . 96 well black plate 에 5 × 104 cell / well 의 RAW 264 . 7 cell 을 black plate 에 분주 한 후 배양 하 여 세포 를 well 에 부착 시켜 serum free DMEM 배지 로 교환 하 였 다 . 세포 를 24 시간 배양 한 후 각 시료 를 농도 별 로 처리 하 여 24 시간 , 37 ℃, 5 % CO 2 조건 에서 배양 하 였 다 . PBS ( pH 7 . 4 ) 로 3 회 세척 한 후 1 XDCFH - DA 를 배지 에 100 μ L 첨가 하 여 1 시간 , 37 ℃, 5 % CO 2 에서 배양 한 후 또 다시 PBS 로 3 회 씻 어 냈 다 . Lysis buffer 100 μ L 를 첨가 하 여 혼합 한 후 fluorescence microplate reader ( perkinElmer , USA ) 를 이용 하 여 excitation 485 nm , emisssion 535 nm 에서 형광 을 측정 하 여 무 처리 군 과 대 조군 에 대한 ROS 생성 을 비교 하 여 상대 적 인 값 으로 나타내 었 다 .