Fc 변이 폴리펩티드 ( 파 아지 에서 발현 되 거나 , 세포질 추출물 안 에 또는 Fab 단편 에 대한 융합 으로 발현 됨 ) 를 96 - 웰 V - 바닥 플레이트 ( PBS + 1 % BSA ( PBSA ) 에서 웰 당 약 100 , 000 세포 ) 에 첨가 하 고 , 4 ℃ 에서 1 시간 동안 항온 처리 하 였 다 . 이어서 상기 플레이트 를 회전 시키 고 , 배지 를 제거 한 후 , 세포 를 PBSA 로 1 회 세 척 하 였 다 . 세포 를 2 차 항체 ( 일반 적 으로 염소 항 - 인간 - IgG - Alexa Fluor ® 647 ( Thermo Fisher 로부터 입수 ) ) 를 함유 하 는 PBSA 에 재현 탁 시켰 다 . 30 분 후 , 상기 플레이트 를 회전 시키 고 배지 를 제거 하 고 , 세포 를 PBSA 로 1 - 2 회 세 척 한 후 , 플레이트 를 유동 세포 분석기 ( 즉 , FACSCanto ™ II 유동 세포 분석기 ) 에서 판독 하 였 다 . FlowJo 소프트웨어 를 사용 하 여 각 조건 에 대한 중앙값 형광 값 을 계산 하 고 , 결합 곡선 을 Prism 소프트웨어 로 플롯 팅 하 였 다 .