E . coli 의 유전자 결실 및 염색체 내 프로모터 교환 은 한 스탭 homologous recombination - mediated 방법 을 이용 하 여 균주 들 을 제작 하 였 다 ( Datsenko & Wanner , Proc . Natl . Acad . Sci . USA , 97 , 6640 - 6645 , 2000 ) . ppsA 과 발현 에 사용 할 trc 프로모터 는 pMtrc 9 를 주형 으로 서열 번호 22 및 서열 번호 23 을 이용 하 여 증폭 하 고 , 서열 번호 24 와 서열 번호 25 로 추가 확대 증폭 하 였 다 . 유전자 pykF 는 서열 번호 26 과 서열 번호 27 로 증폭 하 고 서열 번호 28 과 서열 번호 29 로 확대 증폭 하 였 다 . 유전자 pykA 는 서열 번호 30 과 서열 번호 31 로 증폭 하 고 서열 번호 32 과 서열 번호 33 로 확대 증폭 하 였 다 .