상기 절차 는 상기 단계 2 를 생략 하 고 , 단계 1 에서 Cas 9 분자 및 sgRNA 분자 를 용액 내 에서 고농도 로 제공 하 고 , 구성 성분 을 평형 화 시킴 으로써 sgRNA 분자 와 함께 사용 되 기 위해 변형 될 수 있 다 . 실시 형태 에서 , Cas 9 분자 및 각각 의 gRNA 구성 성분 은 용액 내 에서 1 : 2 비 ( ratio ) ( Cas 9 : gRNA ) , 예 를 들 어 1 : 2 몰 비 의 Cas 9 : gRNA 분자 로 제공 된다 . dsRNA 분자 가 사용 되 는 경우 , 상기 비 , 예 를 들 어 몰 비 는 1 : 2 : 2 ( Cas 9 : tracr : crRNA ) 이 다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 20 uM 이상 의 농도 , 예 를 들 어 약 20 uM 내지 약 50 uM 의 농도 로 형성 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 10 uM 이상 의 농도 , 예 를 들 어 약 10 uM 내지 약 30 uM 의 농도 로 형성 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 ) 표적 세포 를 전달 하 기 위해 상기 표적 세포 를 포함 하 는 용액 내 에서 10 uM 이하 의 최종 농도 ( 예 를 들 어 약 0 . 01 uM 내지 약 10 uM 의 농도 ) 까지 희석 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 ) 표적 세포 를 전달 하 기 위해 상기 표적 세포 를 포함 하 는 용액 내 에서 3 uM 이하 의 최종 농도 ( 예 를 들 어 약 0 . 01 uM 내지 약 3 uM 의 농도 ) 까지 희석 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 ) 표적 세포 를 전달 하 기 위해 상기 표적 세포 를 포함 하 는 용액 내 에서 1 uM 이하 의 최종 농도 ( 예 를 들 어 약 0 . 01 uM 내지 약 1 uM 의 농도 ) 까지 희석 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 ) 표적 세포 를 전달 하 기 위해 상기 표적 세포 를 포함 하 는 용액 내 에서 0 . 3 uM 이하 의 최종 농도 ( 예 를 들 어 약 0 . 01 uM 내지 약 0 . 3 uM 의 농도 ) 까지 희석 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 ) 표적 세포 를 전달 하 기 위해 상기 표적 세포 를 포함 하 는 용액 내 에서 약 3 uM 의 최종 농도 로 제공 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 ) 표적 세포 를 전달 하 기 위해 상기 표적 세포 를 포함 하 는 용액 내 에서 약 2 uM 의 최종 농도 로 제공 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 ) 표적 세포 를 전달 하 기 위해 상기 표적 세포 를 포함 하 는 용액 내 에서 약 1 uM 의 최종 농도 로 제공 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 ) 표적 세포 를 전달 하 기 위해 상기 표적 세포 를 포함 하 는 용액 내 에서 약 0 . 3 uM 의 최종 농도 로 제공 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 ) 표적 세포 를 전달 하 기 위해 상기 표적 세포 를 포함 하 는 용액 내 에서 약 0 . 1 uM 의 최종 농도 로 제공 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 ) 표적 세포 를 전달 하 기 위해 상기 표적 세포 를 포함 하 는 용액 내 에서 약 0 . 05 uM 의 최종 농도 로 제공 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 ) 표적 세포 를 전달 하 기 위해 상기 표적 세포 를 포함 하 는 용액 내 에서 약 0 . 03 uM 의 최종 농도 로 제공 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 ( 예 를 들 어 본원 에 기재 된 ) 표적 세포 를 전달 하 기 위해 상기 표적 세포 를 포함 하 는 용액 내 에서 약 0 . 01 uM 의 최종 농도 로 제공 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 전기 천공 에 적합 한 배지 내 에서 제제화 된다 . 실시 형태 에서 , RNP 는 예 를 들 어 본원 에 기재 된 전기 천 공 조건 을 사용 하 여 전기 천공 에 의해 예 를 들 어 본원 에 기재 된 바 와 같 은 세포 , 예 를 들 어 HSPC 세포 에 전달 된다 .