세포 접종 일 에 아포 화 B 16 F 10 세포 를 PBS 로 헹군 후 , 세포 가 탈락 될 때 까지 트립신 - EDTA 용액 ( Invitrogen Gibco , ref 25300 - 096 ) 과 함께 배양 하 였 다 . 새 배지 를 가하 고 , 세포 를 1200 rpm 으로 5 분 간 원심 분리 하 여 25 ml 의 새 배지 에 재현 탁하 였 다 . 생존 성 정량 을 위하 여 0 . 04 % 트리 판 블루 에서 세포 를 계수 하 였 다 . 세포 를 원심 분리 하 고 , 100 ㎕ 내 에 106 B 16 F 10 세포 가 있 도록 적당 한 부피 의 0 . 9 % NaCl ( Versol , Laboratoire Aguettant , Lyon , France ) 에 재현 탁하 였 다 .