도 31 A - C . 입양 T 세포 이송 에 앞서 vvDD - IL - 2 유도 된 T 세포 대 비접 촉 T 세포 의 시험관 내 분석 . ACT 에 앞서 배양 된 T 세포 는 IFN - γ ELISA 및 4 - 1 BB 발현 의 유세포 측정 염색 용 공 - 배양 검정 및 IFN - γ ELISPOT 을 사용 하 여 시험관 내 종양 반응 성 에 대하 여 시험 되 었 다 . ELISPOT 및 공 - 배양 검정 을 위하 여 T 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 은 어느 한쪽 으로 자극 되 지 않 은 채 남 아 있 었 거나 ( 배지 ) 또는 24 시간 동안 2 중 으로 비 - 종양 - 보유 B 6 마우스 로부터 γ - 조사 된 B 16 종양 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 또는 비 접촉 비장 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 로서 무관 한 표적 세포 또는 γ - 조사 된 MC 38 종양 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 로 도전 되 었 다 . ( A ) ELISPOT 결과 는 2 중 으로 평가 된 각각 의 마우스 로부터 T 세포 의 막대 ( 평균 ± 표준편차 ) 그리고 개별 데이터 포인트 ( 각각 의 웰 에서 스팟 의 수 ) 로서 보여진다 . ( B 및 C ) IFN - γ ELISPOT 이외 에 T 세포 는 유세포 측정 에 의한 4 - 1 BB 발현 에 대하 여 시험 되 었 다 . 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 은 어느 한쪽 으로 자극 되 지 않 은 채 남 아 있 었 거나 ( 배지 대 조군 ) 또는 2 중 으로 비 - 종양 - 보유 B 6 마우스 로부터 γ - 조사 된 B 16 종양 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 또는 비 접촉 비장 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 로서 무관 한 표적 세포 또는 γ - 조사 된 MC 38 종양 세포 ( 2 x 104 / 웰 ) 로 도전 되 었 다 . 24 시간 후 세포 는 CD 3 , CD 4 , CD 8 , 4 - 1 BB 에 대한 FLOW 분석 을 위하 여 염색 되 었 다 . 결과 는 2 중 으로 평가 된 각각 의 마우스 로부터 T 세포 의 막대 ( 평균 ± 표준편차 ) 그리고 개별 데이터 포인트 ( CD 8 + 4 - 1 BB + T 세포 및 CD 4 + 4 - 1 BB + T 세포 의 백분율 ) 로서 보여진다 . 스튜던트 의 t - 시험 은 통계 적 유의 도 ( * p < 0 . 05 ; ** p < 0 . 01 ; *** p < 0 . 001 ; **** p < 0 . 0001 ) 를 분석 하 는 데 사용 되 었 다 .