토끼 항 - 트립 타제 단 클론 성 항체 E 104 의 경쇄 는 , 가변 도메인 ( VL ) 의 FR 3 내 Cys 80 과 불변 도메인 ( CL ) 내 Cys 170 사이 디 설파이드 브릿지 를 함유 하 는 , 토끼 카파 경쇄 이 다 . VL 에서 Cys 80 의 중요 성 을 평가 하 기 위해 , 알라닌 으로 돌연변이 된 위치 80 에서 시스테인 ( Cys 80 Ala ) 를 가진 키메라 E 104 변이체 는 생성 되 었 다 . 표 2 에서 나타낸 바 와 같이 , 크기 배제 크로마토그래피 에 의해 결정 된 양쪽 Cys 80 및 Cys 80 Ala 키메라 변이체 에서 높 은 % 단량체 로 입증 된 바 와 같이 , 수율 또는 응집 의 관점 에서 2 개 의 변이체 사이 차이 없 음 . 따라서 , Cys 80 잔기 가 임계 적 이 지 않 고 인간 화 된 버전 에서 , Cys 80 이 VH 4 그 라프트 에서 처럼 프롤린 잔기 로 변화 되 지 않 음 이 결정 되 었 다 . 또한 , 인간 IgG 1 또는 IgG 4 불변 도메인 에 어느 한쪽 융합 된 , 가변 도메인 FR 3 에서 Cys 80 Ala 돌연변이 를 가진 키메라 E 104 항체 는 위치 80 에서 시스테인 을 가진 토끼 단 클론 성 항체 로서 유사 한 억제 성 활성 을 보여 주 었 다 ( 데이터 도시 되 지 않 음 ) .