축퇴 코돈 을 지니 지 않 는 올리 고 디 옥시 뉴클레오티드 는 Metabion ( Munich , Germany ) 에서 HPLC 등급 으로 구입 하 였 다 . NNK 를 포함 하 는 올리 고 디 옥시 뉴클레오티드 는 판매 된 상품 과 동일 한 탈염 된 것 으로 구입 하 였 고 추가 로 urea PAGE 로 정제 하 였 다 . 최종 DNA 라이브러리 는 BstXI ( Promega , Mannheim , Germany ) 로 절단 하 였 고 , 파지 미드 벡터 phNGAL 102 ( SEQ ID NO : 26 ) 에 클로닝 하 였 다 . 상기 파지 미드 벡터 는 유전자 발현 벡터 pASK 111 ( Vogt and Skerra ( 2001 ) J . Mol . Recognit . 14 ( 1 ) , 79 - 86 ) 에 기초 하 고 , OmpA 신호 펩타이드 , 변형 된 성숙 Lcn 2 , 이어서 앰버 코돈 및 실사 형 박테리오파지 M 13 의 유전자 III 코트 단백질 의 C - 말단 단편 으로 구성 된 , 즉 앞서 빌린 - 결합 단백질 을 위한 기재 된 것 ( Beste et al . , 상기 에서 기재 됨 ; Skerra , 상기 에서 기재 됨 ) 과 유사 한 융합 단백질 을 코딩 한다 . 8 . 4 ㎍ 의 절단 된 PCR 산물 및 94 ㎍ 의 절단 된 플라스미드 DNA 의 라 이게 이 션 혼합물 로 E . coli XL 1 - Blue ( Bullock et al . ( 1987 ) Biotechniques 5 , 376 - 378 ) 을 전기 천공 한 후 , 1 × 1010 개 의 형질전환 체 를 얻 었 다 .