교반 막대 가 장착 된 40 mL 들 이 신틸레이션 바이알 에 A 24 ( 1 당량 ) 및 THF ( 22 mL ) 를 첨가 하 였 다 . 용해 후 , 반응 생성물 을 0 ℃ 로 냉각 하 였 다 . 상기 용액 에 1 M LiOH 수용액 을 적가 하 여 내부 온도 를 1 . 5 ℃ 미만 으로 제어 하 였 다 . 반응 생성물 을 HPLC 로 모니터링 하 였 다 . 약 1 시간 동안 99 % 초과 의 전환 후 , 반응 생성물 을 EtOAc ( 20 mL ) 및 5 % 염수 로 급 냉각 하 였 다 . 층 분리 후 , 유기 층 을 1 M 수성 HCl ( 6 . 4 mL ) 로 pH 3 내지 4 까지 산성화 시켰 다 . 층 분리 후 , 수성 층 을 EtOAc ( 2 x 25 mL ) 로 처리 하 였 다 . 유기 층 을 합치 고 감압 하 에 농축 하 였 다 . 생성 된 미 정제 카 복실 레이트 ( 반 응석 2 E 에 는 나타내 지 않 음 ) 를 100 mL 들 이 이 지 맥스 ( EasyMax ) 반응기 에 투입 한 후 , 건성 MeTHF ( 40 mL ( 8 vol ) ) 를 투입 하 고 , 상기 혼합물 을 25 ℃ 에서 투명 한 용액 이 수득 될 때 까지 교반 하 였 다 . 이어서 , HATU ( 1 . 1 당량 ) 을 상기 혼합물 에 첨가 하 고 , 슬러리 를 25 ℃ 에서 60 분 동안 교반 하 였 다 . 별도 로 아 미노아 세토 니트릴 의 용액 을 , 아 미노아 세토 니트릴 HCl ( 1 . 1 당량 ) 을 DMF ( 5 . 0 mL , 1 vol ) 중 에 용해 시킨 후 , DIPEA ( 2 . 2 당량 ) 을 첨가 하 고 30 분 동안 25 ℃ 에서 교반 함 으로써 제조 하 였 다 . 이어서 , 아 미노아 세토 니트릴 DMF 용액 을 상기 이 지 맥스 반응기 에 25 ℃ 에서 첨가 하 고 , 생성 된 혼합물 을 60 분 동안 완료시 까지 교반 하 였 다 . 완료 된 반응 생성물 을 H 2 O ( 5 vol ) 에 2 . 5 % NaHCO 3 용액 을 첨가 한 후 , MeTHF ( 5 vol ) 를 첨가 하 였 다 . 생성 된 혼합물 을 분리 하 고 , 유기 층 을 H 2 O ( 5 vol ) 로 2 회 세척 하 였 다 . 생성 된 유기 용액 을 셀라이트 패드 ( celite pad ) 를 통해 여과 하 고 농축 건조 시켰 다 . 미 정제 생성물 을 DMF ( 50 mL , 10 vol ) 중 에 용해 시키 고 70 ℃ 로 가열 하 였 다 . H 2 O ( 30 mL , 6 vol ) 를 첨가 하 고 , 혼합물 을 15 분 동안 교반 하 고 20 ℃ 로 14 시간 동안 냉각 하 였 다 . 생성 된 슬러리 를 여과 하 고 H 2 O ( 2 vol ) 로 세척 한 후 , 헵탄 ( 2 vol ) 으로 세척 한 후 , 진 공하 에 40 ℃ 에서 16 시간 동안 건조 시켜 글리신 니트릴 탄두 화합물 을 백색 고체 로서 수득 하 고 , 이 를 THF 중 에 용해 시키 고 완전 용 해시 까지 25 ℃ 에서 교반 하 였 다 . 상기 혼합물 에 메탄 설폰산 ( 6 . 2 μ L , 2 당량 ) 을 첨가 하 고 , 생성 된 혼합물 을 60 ℃ 로 가열 하 고 20 시간 동안 교반 하 였 다 . 백색 고체 를 침전 시키 고 여과 에 의해 채집 하 여 A 25 를 수득 하 였 다 .