이후 , 3 , 6 - 안 하이드로 - L - 갈 락 토시 데이즈 AhgA 유전자 와 섬유소 분해 효소 의 도커 린 도메인 의 유전자 를 연결 하 기 위해 회수 한 DNA 절편 을 이용 하 여 오버 렙 ( Overlap ) PCR 반응 을 수행 하 였 다 . 회수 한 두 DNA 절편 으로부터 정 방향 프라이머 ( 서열 번호 33 ) 의 5 ' 말단 영역 에 는 제한 효소 EcoR I , 역방향 프라이머 ( 서열 번호 34 ) 의 5 ' 말단 영역 에 는 제한 효소 HindIII 인식 서열 이 삽입 되 도록 프라이머 를 디자인 하 여 합성 하 였 다 . 95 ℃ 5 min 반응 후 95 ℃ 에서 1 분 , 52 ℃ 에서 1 분 , 72 ℃ 에서 2 분 씩 30 Cycle 반응 을 수행 한 후 , 마지막 으로 72 ℃ 에서 5 분 조건 의 PCR 반응 을 수행 하 여 그 결과 1383 bp 의 섬유소 분해 효소 의 도커 린 도메인 의 유전자 ( 서열 번호 35 ) 가 연결 된 조벨 리아 갈 락 토니 보란 스로 부터 유래 한 키메 릭 3 , 6 - 안 하이드로 - L - 갈 락 토시 데이즈 AhgA 유전자 ( 서열 번호 36 ) 가 포함 되 어 있 는 PCR 밴드 를 확인 하 였 다 ( 결과 는 나타내 지 않 음 ) .