CRISPR / Cas 9 - 매개 유전자 녹아웃 을 통한 SMARCA 2 의 녹아웃 에 대한 민감 성 을 CRISPR / Cas 9 풀 링 된 스크리닝 에 의해 결정 하 였 다 . 큰 세포 개체군 을 관심 대상 의 유전자 에 대해 바코드 된 sgRNA 가이드 의 풀 링 된 라이브러리 로 감염 시켰 다 . 증식 - 기반 스크린 을 위해 , 게놈 DNA 의 서열 분석 에 의해 , 실험 의 시작 및 종료 시점 에서 바코드 / CRISPR 표현 을 측정 하 였으며 , CRISPR sgRNA 에서 의 상대 적 인 풍부 화 / 감소 로 녹아웃 이 그 증식 속도 를 변경 시킨 유전자 들 을 확인 하 였 다 . 600 개 의 후성 적 유전자 에 대해 표적 화 하 는 6500 개 의 소형 가이드 RNA 를 이용 한 주문 제작 CRISPR 렌 티 바이러스 라이브러리 를 생성 하 였으며 , 40 일 이하 의 기간 에 걸쳐 195 개 의 세포주 에 대해 스크리닝 하 였 다 . CRISPR / Cas 9 라이브러리 내 에 양성 대 조군 으로서 KRas 를 포함 하 였으며 , KRas 녹아웃 에 대한 민감 성 은 KRas 돌연변이 와 고도 로 상관 되 어 있 음 을 관찰 하 였 다 . A 549 및 NCIH 1299 폐암 세포주 를 포함 하 여 , SMARCA 4 널 ( null ) 또는 돌연변이 세포 는 SMARCA 2 녹아웃 에 대해 민감 한 것 으로 발견 되 었 다 ( 도 1 ) . SMARCA 2 와 SMARCA 4 사이 의 합성 치사 관계 는 문헌 [ Hoffman et al . PNAS , 2013 , 111 ( 8 ) , 3128 - 3133 ] ; [ Wilson et al , Mol . Cell Biol . , 2014 , 34 ( 6 ) , 1136 - 44 ] ; [ Vangamundi et al . Cancer Res . 2015 , 75 ( 18 ) : 3865 - 78 ] ; 및 [ Oike et al . , Cancer Res . 2013 Sep 1 ; 73 ( 17 ) , 5508 - 18 ] ( 이 들 각각 의 내용 은 그 전체 가 참고 로 본 명세서 에 포함 됨 ) 에서 추가 로 입증 되 었 다 .