HLA DR 이 결실 된 섬 유아 세포 ( fibroblast ) 를 제조 하 기 위하 여 , 일차 적 으로 인간 진피 섬유 아 세포 를 10 % 우태 아 혈청 ( fetal bovine serum ; FBS ) , 0 . 1 mM 의 MEM , 100 U / mL 의 페니실린 , 및 100 μ g / mL 의 스트렙토마이신 이 첨가 된 DMEM 에서 배양 하 였 다 . 그리고 배양 된 섬 유아 세포 에 실시 예 1 . 2 와 동일 한 방법 으로 준비 된 좌측 탈 렌 벡터 , 우측 탈 렌 벡터 및 리포터 벡터 를 4 μ g : 4 μ g : 1 μ g 의 양 으로 섬 유아 세포 에 형질 주입 시켰 다 . 형질 주입 한 후 에 48 시간 동안 추가 배양 한 후 에 MACS LS column ( Miltenyi Biotec ) 를 이용 하 여 제조사 에서 제공 되 는 프로토콜 에 따라 eGFP 를 발현 하 는 세포 를 분리 하 고 , 단세포 ( single cell ) 로 96 - 웰 플레이트 에 접종 한 후 2 주 동안 배양 한 후 에 , 각각 의 클론 을 6 - 웰 플레이트 로 이동 시켜 이후 실험 을 위하 여 배양 하 였 다 . 탈 렌 을 이용 하 여 HLA DR 이 결실 된 섬 유아 세포 를 제조 하 는 방법 에 대한 개략 도 는 도 2 에 나타내 었 다 .