PBS 에 희석 시킨 후 에 1 x 트리스 완충제 ( 메조 스케일 디스커버리 ( Mesoscale Discovery ) ) / 0 . 1 % 트윈 - 20 중 3 % 소 혈청 알부민 으로 차단 시킨 4 μ g / mL MAB 3481 포획 항체 ( R & D 시스템즈 ) 20 μ L 로 4 ℃ 에서 밤새 코팅 된 탄소 플레이트 ( 메조 스케일 디스커버리 ) 를 이용 하 여 HER 3 포획 플레이트 를 생성 하 였 다 . 플레이트 를 진탕 시키 면서 1 시간 동안 실온 에서 인 큐 베이 션 하 여 용해 물 로부터 HER 3 을 포획 한 후 에 한 후 에 용해 물 을 흡인 하 고 , 웰 을 1 x 트리스 완충제 ( 메조 스케일 디스커버리 ) / 0 . 1 % 트윈 - 20 으로 세척 하 였 다 . 진탕 시키 면서 1 시간 동안 실온 에서 인 큐 베이 션 하 여 1 % BSA / 1 x 트리스 / 0 . 1 % 트윈 - 20 에서 제조 된 0 . 75 μ g / mL 비오티 닐 화 항 - 포스 포티 로 신 항체 ( R & D 시스템즈 ) 를 이용 하 여 인산화 HER 3 을 검출 하 였 다 . 웰 을 1 x 트리스 / 0 . 1 % 트윈 - 20 으로 4 회 세척 하 고 , 비오티 닐 화 단백질 을 1 % BSA / 1 x 트리스 / 0 . 1 % 트윈 - 20 에서 1 시간 동안 실온 에 희석 된 S - 태그 표지 된 스 트 렙 타비 딘 ( 메조 스케일 디스커버리 ) 과 인 큐 베이 션 하 여 비오티 닐 화 단백질 을 검출 하 였 다 . 각각 의 웰 을 흡인 하 고 , 1 x 트리스 / 0 . 1 % 트윈 - 20 으로 4 회 세척 한 후 에 20 μ L 의 판독 완충제 T ( 계면 활성제 포함 ) ( 메조 스케일 디스커버리 ) 를 첨가 하 고 , 메조 스케일 섹터 이미 저 ( Mesoscale Sector Imager ) 를 이용 하 여 신호 를 정량 화 하 였 다 . 항체 MOR 06391 또는 MOR 03207 을 이 소형 대 조군 으로 신호 전달 실험 에 포함 시켰 다 .