문헌 [ 참조 : Schenk D . et al . , ( 1999 ) Nature 400 , 173 - 177 ] 에 의해 앞서 기재 된 바 와 같이 , ELISA 에 의해 혈청 역가 ( 순차 희석 으로 측정 ) 및 응집 AA 에 대한 모노클 로 날 항체 결합 을 수행 하 였 다 . 가용성 AA 란 디 메틸 설 폭 사이드 에서 초음파 처리 된 AA 원섬유 를 의미 한다 . 항체 의 순차 희석 액 을 실온 에서 밤새 50 , 000 cpm 의 125 I - AA 와 함께 항온 처리 하 였 다 . 단백질 A 세파 로스 ( Amersham Biosciences , 스웨덴 웁살라 소재 ) 75 mg / ml / 토끼 항마 우스 IgG ( H + L ) ( Jackson ImmunoResearch , 미국 펜실베이니아주 웨스트 그로브 소재 ) 200 μ g 을 함유 하 는 슬러리 50 μ l 를 희석 항체 와 실온 에서 1 시간 동안 항온 처리 하 고 , 2 회 세척 하 고 , Wallac 감마 계수기 ( PerkinElmer Life Science , 미국 일리노이주 그로브 소재 ) 로 계수 하 였 다 . 모든 단계 를 10 mM Tris , 0 . 5 M NaCl , 1 mg / ml 젤라틴 및 0 . 5 % Nonidet P - 40 으로 이루어진 방사선 면역 측정 완충액 ( pH 8 . 0 ) 중 에서 수행 하 였 다 .