ms - sgRNA 의 패널 은 CD 33 엑손 2 에 근접 한 SpCas 9 PAM ( 5 '- NGG - 3 ') 에 대한 수동 검사 에 의해 설계 되 었 고 , 온라인 검색 알고리즘 으로 인간 게놈 에서 잠재 적 인 오프 타 겟 부위 를 최소 화 함 으로써 예측 된 특이 성 에 따라 우선 순위 가 결정 되 었 다 ( Benchling , Doench et al . ( 2016 ) ; Hsu et al . ( 2013 ) ) ( 표 6 ) . 이어서 , 인트론 1 또는 2 를 표적 으로 하 는 ms - sgRNA 의 서브 세트 를 , 시험관 내 유전자 편집 효율 에 근거 하 여 선택 하 였 다 . 각각 의 sgRNA 는 인간 CD 33 을 표적 으로 하 고 Cas 9 유형 SpCas 9 를 사용 한다 .