의 온도 에서 수행 한다 . 표준 아민 결합 화학 물질 을 사용 하 여 25 μ g / ml 의 항 His 항체 ( R & D Systems , 카탈로그 번호 MAB 050 ) 를 CM 5 센서 칩 에 고정 하 였 다 . 25 nM 의 항 FIX 변이체 를 1 분 동안 분당 10 μ l 의 유속 으로 주입 하 고 , 고정 된 항 His 항체 에 의해 His - 태그 를 통해 이 를 포획 하 였 다 . 이어서 , 200 nM ( 4 배 연속 희석 물 ) , 1600 nM ( 3 배 연속 희석 물 ) , 및 2000 nM ( 3 배 연속 희석 물 ) 의 mAb 4 ~ 0004 , mAb 3 ~ 3279 및 mAb 4 ~ 0673 각각 을 5 분 동안 분당 50 μ l 의 유속 으로 주입 하 여 포획 된 FIX 변이체 에 결합 될 수 있 게 한 다음 , 10 분 동안 완충액 을 주입 하 여 1 가 항 FIX 항체 가 해리 될 수 있 게 하 였 다 . 사용 된 런닝 완충액 은 20 mM 트리스 , 150 mM NaCl , 5 mM NaCl 2 , 0 . 05 % Tween - 20 , 1 mg / ml BSA , pH 7 . 4 였 다 . 이 는 항 FIX 항체 와 FIX 샘플 의 희석 에 도 사용 하 였 다 . 10 mM 글리신 pH 2 . 0 을 사용 하 여 칩 을 재생 을 달성 하 였 다 . 결합 데이터 는 제조사 ( Biacore AB , 스웨덴 웁살라 ) 가 공급 한 BiaEvaluation 4 . 1 을 사용 하 여 1 : 1 모델 에 따라 분석 하 였 다 . 유사 한 실험 장비 를 Biacore 4000 기기 에 사용 하 였 다 .