도 18 : MG 53 에 의해 촉매 된 시험관 내 유비퀴틴 화 . MG 53 에 대한 재조합 말토오스 - 결합 단백질 ( MBP ) 융합 단백질 이 ATP , 유비퀴틴 , E 1 및 E 2 효소 와 함께 인 큐 베이 션 되 었 고 , 항 - MBP 항체 를 이용 한 면역 블 로 팅 에 적용 되 었 다 . MBP - MG 53 이 E 2 로서 Ubc 4 또는 UbcH 5 와 인 큐 베이 션 되 는 경우 에 유비퀴틴 화 로부터 유래 된 고 분자량 의 래더 ( ladder ) 가 관찰 되 었 다 ( a ) . MG 53 의 내재 성 E 3 - 리가아제 활성 은 C 29 L 돌연변이 에서 현저 하 게 감소 되 었 다 ( b ) . ( c ) 웨스턴 블롯 은 전장 의 GFP - MG 53 및 GFP - C 29 L 단백질 이 분화 된 C 2 C 12 근관 에 존재 함 에 따라 , C 29 L 돌연변이 가 안정 적 이 고 , 상기 융합 단백질 의 분해 가 GFP - C 29 L 의 다양 한 세포 하 분포 에 기여 하 는 것 이 아님 을 입증 하 였 다 .