리더 는 리더 를 갖 지 않 는 정 방향 프라이머 pOrig heavy 와 , 인간 IgG 1 CH 1 도메인 에 결합 하 는 역방향 프라이머 huHeClonR ( 표 2 ) 를 사용 하 여 PCR 로 제거 하 였 고 , 중쇄 가변 ( VH ) 영역 을 효과 적 으로 재 증폭 하 였 다 . 서열 확인 후 , 리더 - 결여 VH 영역 ( VH region minus leader ) 을 HindIII / AfeI 을 사용 하 여 인간 IgG 1 불변 영역 과 인 프레임 으로 이중 발현 작 제물 DCIB 15 중 으로 다시 클로닝 하 였 다 . 박스 안 의 아미노산 은 H 1 내 GP 100210 M 에 피토프 ( TIMDQVPFSV ) 및 H 2 내 TRP 2 에 피토프 ( SVYDFFVWL ) 를 나타낸다 . 가변 중쇄 영역 의 전달 에 사용 된 HindIII / AfeI 제한 부위 는 강조 표시 하 였 다 .