Genomic DNA 는 Genomic DNA extraction Kit ( iNtRON Biotechnology Inc . , Korea ) 를 사용 하 여 추출 하 였으며 Nano drop 을 이용 하 여 50 ng 으로 정량 화 하 였 다 . 이후 PCR 은 genomic DNA 50 ng , 프라이머 각 쌍 0 . 1 μ mol / l , MgCl 2 와 dNTP 2 . 0 mmol / l , Taq 중합효소 ( Ex Taq polymerase , TaKaRa Korea Biomedical Inc . , Korea ) 1 unit 을 기본 조성 으로 총 반응 액 은 25 μ l 로 수행 하 였 다 . PCR 반응 은 94 ℃ 에서 5 분 간 변성 반응 을 거친 후 , 증폭 단계 에서 94 ℃ 에서 30 초 , 어닐링 ( anealing ) 온도 는 각 프라이머 조건 에 맞 는 온도 에 30 초 를 진행 하 였 고 , 72 ℃ 20 초 를 35 회 반복 하 여 진행 하 였으며 , 최종 신장 반응 은 72 ℃ 에서 2 분 간 수 행하 였 다 . PCR 산물 은 EtBr ( 0 . 1 μ g / ml ) 이 포함 된 2 . 0 % 아가로스 겔 에서 160 V 로 50 분 간 동안 전기영동 한 후 UV Gel - doctor 를 이용 하 여 확인 하 였 다 .