BIOT - 3806 의 증식 스톡 ( vegetative stock ) 을 50 mg / L 아프 라 마이신 을 포함 하 는 배지 1 에서 성장 시킨 후 제조 하 고 , 증류수 중 의 20 % w / v 글리세롤 : 10 % w / v 락 토 즈 에 보관 하 며 , - 80 ℃ 에서 저장 하 였 다 . 증식 스톡 을 50 mg / L 아프 라 마이신 으로 보충 된 ISP 2 배지 ( 배지 3 ) 의 플레이트 에 다시 입히 고 , 48 시간 동안 28 ℃ 에서 인 큐 베이 션 하 였 다 . ISP 2 플레이트 로부터 직경 5 mm 의 2 개 의 한 천 플러그 를 떼 어 내 고 50 mg / L 아프 라 마이신 을 포함 하 는 250 mL 진탕 플라스크 에서 30 mL 배지 1 에 이 들 을 접종 시킴 으로써 증식 배 양물 을 제조 하 였 다 . 플라스크 를 48 시간 동안 28 ℃, 200 rpm ( 5 cm 쓰 로우 ) 으로 인 큐 베이 션 하 였 다 .