인간 CB 1 및 CB 2 수용체 를 pcDNA 3 CB - 1 ( 인간 ) 또는 pcDNA 3 CB - 2 ( 인간 ) 로 트랜스펙션 된 SK - N - MC 세포 에서 안정 적 으로 발현 시켰 다 . 세포 를 5 % CO 2 분위기 중 에서 37 ℃ 에서 표준 세포 배양 조건 하 에 T - 180 세포 배양 플라스크 에서 성장 시켰 다 . 세포 를 트립신 화 하 여 수집 하 고 , 균질 화 버퍼 ( 10 mM 트리스 , 0 . 2 mM MgCl 2 , 5 mM KCl , 프로테아제 저해제 아프 로티 닌 , 류 펩 틴 , 펩 스타 틴 A 및 바시트라신 함유 ) 에서 균질 화 시켜 , 원심 분리 ( 2000 g ) 하 였 다 . 그 후 , 상청 액 을 2 M 수크로스 ( 31 , 300 g ) 에서 원심 분리 하 여 , 준 정제 막 ( semi - purified membrane ) 펠릿 을 생성 하 였 다 . 펠릿 을 균질 화 하 여 재현 탁 시키 고 , - 80 ℃ 로 보관 하 였 다 .