지방 흡입 수술 로 얻 어 진 지방 조직 이나 , 외과 적 수술 후 에 얻 어 진 지방 조직 을 10 ％ 페니실린 - 스트렙토마이신 을 포함 한 PBS 로 10 회 이상 세척 하 여 혈액 과 이 물질 을 제거 한 후 , 조직 을 0 . 2 - 0 . 3 g 이 되 도록 잘 게 절단 하 였 다 . 0 . 2 ％ 콜라 게나 아제 ( Roche , Sandhofer Strasse , Mannheim , Germany ) 용액 에 넣 어서 37 ℃ 의 수욕 , 100 rpm 에서 1 시간 동안 반응 시켰 다 . 100 ㎛ 메 쉬 를 이용 하 여 콜라 게나 아제 에 의해서 분해 된 용액 층 과 분해 되 지 않 은 조각 을 분리 한 후 , 분리 된 콜라 게나 아 제 용액 에 동량 의 PBS 를 첨가 하 였 다 . 이 어 , 4 ℃, 1200 rpm 에서 5 분 간 원심 분리 하 여 상층 액 인 지질 과 지방 층 을 제거 하 고 , 콜라 게나 아 제 상층 액 을 제거 하 였 다 . 가라앉 은 MSC 로부터 남 은 콜라 게나 아 제 용액 을 제거 하 기 위해서 MSCGM [ mesenchymal stem cell growth media : MSC 기본 배지 ( Cambrex , Walkersville , MD , 미국 ) , 간엽 세포 성장 보조 물 ( Cambrex , Walkersville , MD , 미국 ) , 4 mM L - 글루타민 및 페니실린 ( 0 . 025 unit / 500 ㎖)/ 스트렙토마이신 ( 0 . 025 mg / 500 ㎖)] 를 넣 어 다시 4 ℃, 1200 rpm 에서 5 분 간 원심 분리 하 였 다 . MSCGM 은 우태 아 혈청 을 포함 하 는 DMEM ( Dulbecco ' s modified Eagle ' s medium ) 에 기초 한 배지 이 다 . 이 어 , 상층 액 을 제거 하 고 , 얻 어 진 MSC 는 배양 접시 에 접종 하 여 MSCGM 로 37 ℃, 5 ％ CO 2 항온기 에서 배양 하 였 다 . 이틀 에 한 번 씩 배양액 을 교체 하 면서 배양 하 였 다 .