상기 실시 예 2 에서 증폭 된 단편 을 pMAL - c 5 X 발현 벡터 ( 입 수처 : New England Biolabs ) 에 클로닝 을 한 뒤 , 재조합 pMAL - c 5 X 를 E . coli BL 21 ( DE 3 ) 세포 에 도입 하 여 형질 전환 된 균주 를 제작 하 였 다 . 진세 노시 다제 ( Ginsenosidase ) 를 대량 생산 하 기 위하 여 , 상기 형질 전환 된 균주 를 앰 피 실린 ( Ampicillin ) 이 첨가 된 LB 배지 가 들 어 있 는 삼각 플라스크 에 접종 하 여 600 nm 에서 의 흡광도 가 0 . 6 이 될 때 까지 27 ℃ 의 진탕 배양기 에서 100 rpm 으로 종균 배양 을 실시 하 였 다 . 50 mM IPTG ( Isopropyl - beta - D - thiogalactoside ) 를 처리 하 여 진세 노시 다제 ( Ginsenosidase ) 의 대량 발현 을 유도 하 였 다 . 균주 가 정체기 ( Stationary phase ) 에 들 었 을 때 , 균주 의 배양액 을 5000 rpm 에서 30 분 동안 원심 분리 하 고 , 20 mM 인산나트륨 버퍼 ( Sodium phosphate buffer , pH 7 . 0 ) 를 첨가 하 여 현 탁한 후 , 상기 세포 용액 을 파쇄기 ( Sonicator ) 로 파쇄 하 였 다 . 상기 세포 파쇄 물 을 다시 9000 rpm 으로 30 분 동안 원심 분리 하 여 , 최종 적 으로 진세 노시 다제 를 생산 에 사용 할 수 있 는 상등 액 으로부터 획득 하 였 다 . 글루타티온 수지 ( Glutathione Resin ) 를 이용 하 여 분리 정제 하 고 프로테아제 에 의해 절단 하 여 얻 은 진세 노시 다제 ( Ginsenosidase ) 를 락 토 바실 러스 카제 이 GFC 1 DNA 및 재조합 미생물 파쇄 물 과 함께 SDS - PAGE 로 분석 하 였 다 . 그 결과 , 진세 노시 다제 ( Ginsenosidase ) 단백질 은 약 71 . 1 kDa 의 분자량 을 나타내 었 다 ( 도 1 ) .