혼합 용매 A ( SMA ) 및 B ( SMB ) 를 사용 하 는 0 . 25 ml / min 유속 의 구배 용출 을 채용 하 였 다 . SMA 는 95 % 메탄올 수용액 중 의 0 . 1 % 포름산 이 고 SMB 는 5 % 메탄올 수용액 중 의 0 . 1 % 포름산 이 다 . 구배 조건 은 하 기 와 같 다 : 주입 후 최초 1 . 5 분 간 , 100 % A ; 1 . 5 - 2 . 5 분 , 70 % A ; 2 . 5 - 3 . 5 분 , 50 % A ; 3 . 5 - 4 . 5 분 , 0 % A ; 및 4 . 5 분 에 초기 조건 ( 100 % SMA ) 으로 회귀 . 혈장 시료 를 2 부피 배 의 아 세토 니트릴 로 처리 하 고 진탕 및 원심 분리 하 여 단백질 을 침강 시킨다 . 상등 액 은 LC - MS / MS 시스템 에 주입 할 수 있 다 . 양 이온 모드 에서 다중 반응 감시 ( MRM : multiple reaction monitoring ) 을 사용 하 여 분석 을 실시 한다 . 감시 할 전이 ( transition ) 는 m / z 345 로부터 277 이 다 . IK 1 차단제 의 혈장 농도 는 비 투여 마우스 의 혈장 에서 작성 한 5 - 점 표준 곡선 을 이용 하 여 계산 한다 .