동역학 적 측정 을 위해 , 인간 , 마우스 또는 사이 노 몰 거스 FAP 세포 외 도메인 을 10 ㎕/ 분 의 유속 으로 10 nM 에서 20 초 동안 ( Fab 단편 의 경우 ) 또는 20 nM 에서 25 초 동안 ( IgG 의 경우 ) 주입 하 였 고 고정 된 펜 타 His 항체 로 그 의 His 태그 를 통해 포획 하 였 다 . HBS - EP +( 지이 헬 쓰 케 어 , 10 mM HEPES , 150 mM NaCl , 3 mM EDTA , 0 . 05 % 계면 활성제 P 20 , pH 7 . 4 ) 중 의 항체 의 연속 희석 물 ( Fab 단편 의 경우 6 . 25 nM 내지 200 nM 의 2 배 희석 물 , 또는 IgG 의 경우 3 . 2 pM 내지 10 nM 의 5 배 희석 물 ) 을 25 ℃ 에서 90 ㎕/ 분 의 유속 으로 주입 하 였 다 . 하 기 파라미터 들 이 적용 되 었 다 : 결합 시간 180 초 , 해리 시간 300 초 ( Fab 의 경우 ) 또는 900 초 ( IgG 의 경우 ) , 각각 의 주기 사이 에 60 초 동안 10 mM 글리신 ( pH 2 ) 을 사용 한 재생 . 결합 및 해리 센서 그램 을 동시 에 피팅 함 으로써 단순 1 - 대 - 1 랭뮤어 결합 모델 ( 비아 코어 ( 등록 상표 ) T 100 평가 소프트웨어 ) 을 이용 하 여 결합 속도 ( kon ) 및 해리 속도 ( koff ) 를 계산 하 였 다 ( 모델 파라미터 는 국소 R 최대 및 RI = 0 이 었 음 ) . 평형 해리 상수 ( KD ) 를 비 koff / kon 으로서 계산 하 였 다 .