Vcap 세포 ( 안드로겐 수용체 양성 전립선암 세포 ) ( ATCC , 제품 목록 번호 CRL - 2876 ) 에서 B 001 , 상기 안드로겐 수용체 경로 조절 제 , 상기 다른 치료제 를 단독 으로 사용 하 거나 서로 병용 하 여 사용 할 시 전립선암 세포 증식 에 대한 억제 작용 을 테스트 하 였 다 . 구체 적 인 실험 방법 은 하 기 와 같 다 웰 당 5 x 103 개 의 Vcap 세포 를 특정 배지 가 들 어 있 는 바닥 이 투명 하 고 벽 이 하얀 96 - 웰 배양 플레이트 ( Corning , 제품 목록 번호 CLS 3903 ) 에 접종 하 여 37 ℃, 5 % CO 2 인 인큐베이터 에서 24 시간 동안 배양 하 였 다 . 테스트 화합물 은 DMSO ( Sigma , 제품 목록 번호 276855 ) 로 150 mM 의 저장 용액 을 배합 하 고 , 배지 로 원 하 는 농도 ( DMSO 최종 농도 는 0 . 2 %) 까지 희석 한 후 2 웰 / 농도 로 각 웰 에 추가 하 며 , 37 ℃, 5 % CO 2 인 인큐베이터 에서 5 일 간 배양 하 였 다 . 테스트 화합물 은 세포 를 단독 으로 또는 병용 하 여 처리 하 였 다 . 다른 치료제 는 아비라 테론 아세테이트 ( Selleck , 제품 목록 번호 S 2246 ) , 갈레 테론 ( Selleck , 제품 목록 번호 S 2803 ) , ODM - 201 ( Kangpu Biomedical Technology ( Shanghai ) Co . , Ltd . ) 과 프레드 니 손 ( Selleck , 제품 목록 번호 S 1622 ) 으로부터 얻 는다 . 각 테스트 화합물 의 농도 설정 은 다음 실험 결과 표 를 참조 한다 . 그 후 , 웰 당 100 μ l 의 CellTiter - Glo ® 세포 활성 검사 시약 ( Promega , 제품 목록 번호 G 7570 ) 을 넣 고 , 셰이커 에서 10 분 동안 혼합 하 여 세포 용해 를 유도 한다 . 96 웰 플레이트 에 10 분 동안 방치 하 여 발광 신호 를 안정 화 시킨다 . EnSpire 테스트 플레이트 를 사용 하 여 흰색 바탕 필름 을 배지 의 저부 에 부착 하 였 다 . Graphpad / Prism 과 Calcusyn 소프트 웨 를 통해 데이터 를 처리 하 고 , 각 화합물 의 평균 세포 증식 억제 율 또는 생존 율 을 계산 하 며 , 구체 적 인 실험 결과 는 표 1 ( 표 1 Part I . 과 표 1 Part II . 두 부분 포함 ) 과 표 2 ( 표 2 Part I . 과 표 2 Part II . 두 부분 포함 ) 를 참조 하 였 다 .