면역 화학 염색 을 위해 3 % 과산화수소 에서 15 분 간 배양 하 여 내인성 퍼 옥시다아제 를 차단 하 였 다 . 슬라이드 를 세척 후 , 1 % 소 혈청 알부민 ( BSA ) 을 함유 하 는 PBS 로 실온 에서 1 시간 동안 세포 를 차단 한 뒤 , 일 차 항체 를 하 기 의 희석 비율 로 PBA 에 희석 하 였 다 : collagen 3 ( 1 / 200 ; Abcam ) , α - SMA ( 1 / 200 ; Abcam ) . 일 차 항체 를 실온 에서 4 ℃ 에서 하루 동안 배양 하 였 다 . 다음 날 0 . 1 % 트윈 - 20 ( TBST ) 을 함유 하 는 트리스 완충 식염수 ( TBS ) 로 세척 하 고 , 2 차 항체 를 실온 에서 10 분 간 유지 후 , 10 분 간 ABC 시약 에 배양 하 였 다 . 슬라이드 를 PBS 로 세척 하 고 , DAB 용액 을 1 분 동안 유지 하 였 다 . 핵 염색 제 로 Mayer ' s hematoxylin 을 1 분 간 적용 하 였 다 . 슬라이드 를 세 척하 고 , 에탄올 의 농도 를 증가 시키 면서 탈수 과정 을 거쳤 다 . 자일렌 으로 남 아 있 는 에탄올 을 제거 하 고 , VectaMount Permanent Mounting Medium 을 사용 하 여 봉입 하 였 다 .