분주 한 FreeStyle F 17 배지 에 Polyethyleneimine max ( PEImax , Polyscience 사 ) 8000 μ g 을 용해 시켜 , PEImax 용액 으로 하 였 다 . 또한 분주 한 다른 F 17 배지 에 벡터 pCL _＃ 13552 , pCL _＃ 12287 , pCL _＃ 13540 , 및 pCL _＃ 12290 을 15 : 15 : 53 : 17 의 비율 로 혼합 한 벡터 혼합물 , 또는 벡터 pCL _＃ 13541 , pCL _＃ 12321 , pCL _＃ 13543 , 및 pCL _＃ 12313 을 22 : 8 : 17 : 53 의 비율 로 혼합 한 벡터 혼합물 을 1000 μ g 첨가 하 여 , 벡터 혼합물 로 하 였 다 . 추가 로 분주 한 다른 F 17 배지 에 , pAKT 및 pGFP ( 모두 National Research Council ) 와 단편 화 완료 된 연어 정자 DNA ( Sigma - Aldrich 사 ) 를 혼합 한 DNA 혼합물 을 1000 μ g 첨가 하 여 , DNA 용액 으로 하 였 다 . PEImax 용액 , 벡터 혼합물 , 및 DNA 용액 을 합쳐서 온화 하 게 교반 하 고 , 5 분 간 방치 한 후 에 2 L 의 CHO - 3 E 7 세포 배양액 에 첨가 하 였 다 . 37 ℃, 5 % CO 2 인큐베이터 내 에서 1 일 진탕 배양 한 후 , 0 . 5 mM valproic acid ( Sigma - Aldrich 사 ) 및 0 . 1 % ( w / v ) Tryptone N 1 ( organotechnie 사 ) 을 첨가 하 고 , 32 ℃ 에서 6 일 간 더 진탕 배양 하 였 다 . 배양 개시 후 7 일 째 에 배양 상청 을 회수 하 고 , 0 . 2 μ m filter ( Sartorius 사 ) 로 여과 하 여 평가 용 의 샘플 로 하 였 다 .