융합 : 가장 높 은 항 - 362 . 78 - CHO 중화 역가 를 나타내 는 2 마리 의 마우스 를 마지막 으로 보조제 없이 PBS 중 의 대략 50 g 의 362 . 78 - CHO ( Ab 1 ) 으로 피하 주사 를 통해 면역 시켰 다 . 4 일 후 에 이 들 마우스 의 비장 과 림프절 을 수득 하 였 다 . 림프구 를 마우스 골수종 P 3 - X 63 - Ag 8 . 653 세포 ( American Type Culture Collection , CRL 1580 ) 와 1 : 1 림프구 - 골수종 비율 로 융합 하 기 위해 , 당해 기술 분야 에 공지 되 어 있 는 표준 방법 을 사용 하 고 , Cyto - pulse CEEF - 50 장치 ( Cyto Pulse Sciences Inc . , Glen Burnie , MD ) 를 사용 하 여 전기 융합 을 수행 하 였 다 . 융합 혼합물 을 96 - 웰 평평 한 바닥 플레이트 에 분배 하 였 다 . 융합 플레이트 의 웰 에 70 % 대체 된 하이브리도마 성장 배지 ( 1 x L - 글루타민 ( 10 Ox ) , 1 x 페니실린 - 스트렙토마이신 ( 10 Ox ) ( 모두 Gibco Invitrogen , Carlsbad , CA 제품 ) , 10 % Fetalclonel 혈청 , 비 - 열 비활성 화 된 ( HyClone , Logan , UT ) , 10 % 하이브리도마 클로닝 인자 ( BM Condimed Hl Roche Diagnostic , Indianapolis , IN ) , 1 x HAT 보충 물 ( 5 Ox , Gibco Invitrogen ) 이 첨가 된 IMDM ) 로 3 회 공급 하 였 다 . 웰 을 융합물 을 플 레이팅 하 고 10 일 후 에 분석 하 였 다 .