실질 적 으로 상기 에 기재 된 것 과 같이 , 만능 세포 를 6 웰 플레이트 내 의 E 8 배지 중 에서 배양 하 였 다 . 각각 의 웰 로부터 배양 배지 를 흡인 하 고 , 세포 를 1 . 0 mL 의 EDTA / PBS ( PBS 중 0 . 5 mM EDTA , 삼투압 농도 340 ) 로 2 회 세척 하 였 다 . 그 후 세포 를 37 ℃ 에서 EDTA / PBS 중 에서 5 분 동안 인 큐 베이 션 하 였 다 . PBS / EDTA 를 제거 하 고 , 세포 를 1 ml 의 E 8 배지 로 신속히 헹구 었 다 . 그 후 , 세포 를 동일 부피 의 20 % 디 메틸 설 폭 시드 ( DMSO ) 및 E 8 배지 ( 최종 농도 : E 8 배지 중 10 % DMSO ) 중 에 재현 탁 시키 고 , 크라이 오제 닉 바이알 에 분액 하 여 넣 고 CRYOBOXTM 를 이용 하 여 - 80 ℃ 에서 동결 시켰 다 . 그 후 , 세포 를 액체 질소 탱크 로 옮겼 다 .