원 ( 야생형 ) 인자 VIIa 및 / 또는 인자 VIIa 변이체 에 바람직 한 시험관 내 단 백 분 해 분석 은 US 2007 / 0219135 ( 노보 노르 디스크 헬스 케어 엔지 ( Novo Nordisk HealthCare NG ) ) 에 기술 된 바 와 같이 미 량역 가판 ( 멕 시 소르 프 ( MaxiSorp , Nunc , Denmark ) ) 내 에서 수행 된다 . 0 . 1 M NaCl , 5 mM CaCl 2 및 1 mg / ml 소 혈청 알부민 을 함유 하 는 pH 7 . 4 , 50 mM 100 μ L 헤페스 ( Hepes ) 에서 인자 VIIa ( 10 nM ) 및 인자 X ( 0 . 8 μ M ) 를 15 분 동안 인 큐 베이 션 시켰 다 . 그 후 0 . 1 M NaCl , 20 mM EDTA 및 1 mg / ml 소 혈청 알부민 을 함유 하 는 pH 7 . 4 , 50 mM 50 μ L 헤페스 의 첨가 로 인자 X 절단 을 중단 시켰 다 . 최종 농도 0 . 5 mM 의 색원 성 기재 Z - D - Arg - Gly - Arg - p - 니트 로 아닐리드 ( S - 2765 , 크 로모 제닉스 ( Chromogenix , Sweden ) ) 의 첨가 로 생성 된 인자 Xa 의 양 을 측정 했 다 . 405 nm 에서 의 흡수도 를 스펙 트라 멕스 ( SpectraMax ) ™ 340 기판 내 에서 연속 적 으로 측정 하 였 다 . FVIIa 를 함유 하 지 않 는 블랭크 내 에서 의 흡수도 의 감산 후 10 분 동안 나타난 흡수도 는 변이체 및 야생 형 인자 VIIa 의 단 백 분 해 활성 사이 의 비 를 계산 하 는 데 사용 될 수 있 다 :