단계 ( c ) 의 혼성 화 에 적합 한 조건 은 , Joseph Sambrook , et al . , Molecular Cloning , A Laboratory Manual , Cold Spring Harbor Laboratory Press , Cold Spring Harbor , N . Y . ( 2001 ) 및 Haymes , B . D . , et al . , Nucleic Acid Hybridization , A Practical Approach , IRL Press , Washington , D . C . ( 1985 ) 에 개시 된 사항 을 참조 하 여 결정 할 수 있 다 . 혼 성 화 에 이용 되 는 엄격 조건 ( stringent condition ) 은 온도 , 이온 세기 ( 완충액 농도 ) 및 유기 용매 와 같 은 화합물 의 존재 등 을 조절 하 여 결정 될 수 있 다 . 이러 한 엄격 한 조건 은 혼성 화 되 는 서열 에 따라 다르 게 결정 될 수 있 다 .