본 발명 에서 는 엽록체 및 미토콘드리아 의 특성 을 보다 더 상세 하 게 실험 하 기 위해 , RNA 겔 블롯 분석 을 이용 하 여 플라스미드 및 미토콘드리아 암호 화 유전자 의 발현 양상 을 확인 하 였 다 ( 도 6 참조 ) . 전체 RNA 는 TRV 잎 과 TRV : BTF 3 잎 의 황색 부분 으로부터 분리 하 고 , RNA 겔 블롯 분석 은 프로브 로써 다양 한 플라스미드 암호 화 유전자 를 이용 하 여 실시 하 였 다 . RNA 겔 블롯 분석 결과 도 6 에서 알 수 있 듯이 , psaB , psbB , petA , 및 rbcL ( Hajdukiewicz et al . 1997 , EMBO J 16 : 4041 - 4048 ; Baba et al . 2004 , Plant J 38 : 38 - 48 ) 유전자 를 포함 하 는 PEP - 의존 성 광합성 유전자 의 지연 상태 전 사물 수준 은 TRV : BTF 3 잎 에서 극 적 으로 감소 되 었 으며 , TRV : BTF 3 잎 은 NEP 및 PEP 프로모터 ( Silhavy et al . 1998 , Curr Genet 33 : 340 - 344 ; Magee et al . 2002 , J Exp Bot 53 : 2341 - 2349 ; 도 6 b . c 참조 ) 가 가지 고 있 는 atpB 및 rpl 33 유전자 뿐 만 아니 라 accD , ycf 2 , 및 rpoB ( Hajdukiewicz et al . 1997 , EMBO J 16 : 4041 - 4048 ; Baba et al . 2004 , Plant J 38 : 38 - 48 ) 같 은 NEP - 의존 성 유전자 의 전 사물 수준 도 현저 하 게 감소 되 는 것 을 확인 할 수 있 었 다 . 또한 NbBTF 3 결핍 은 아직 프로모터 에서 명확 하 게 정의 할 수 없 지만 rpoA 및 atpI 유전자 전 사물 의 축적 을 감소 시키 는 것 으로 측정 되 어 졌 다 . 이러 한 결과 는 NbBTF 3 유전자 결핍 이 직접 적 혹은 간접 적 으로 그 들 의 프로모터 형태 에 관계없이 다양 한 플라스미드 암호 화 유전자 발현 에 영향 을 미친다는 것 을 보여준다 . 또한 미토콘드리아 암호 화 유전자 cob 및 cox 1 의 발현 은 미토콘드리아 표적 NEP ( Baba et al . 2004 , Plant J 38 : 38 - 48 ) 에 의해 수행 하 였으며 발 현량 은 NbBTF 3 VIGS 라인 에서 감소 되 었 지만 ( 도 6 e 참조 ) , 액틴 의 전 사물 인 칼 콘 신 타제 ( CHS ) 및 유비퀴틴 ( Ub ) 은 TRV : BTF 3 세포 에서 감소 되 지 않 는 것 을 확인 할 수 있 었 다 ( 도 6 f 참조 ) . 따라서 본 발명 에서 는 NbBTF 3 유전자 결핍 이 엽록체 및 미토콘드리아 에서 NEP 및 NEP - 매개 된 전사 모두 에 영향 을 미치 는 것 으로 확인 할 수 있 었 다 .