이 실시 예 는 고 - 부피 생산 성 을 갖 는 생체 촉매 를 사용 한 일괄 발효 를 나타낸다 . 변형 된 생체 촉매 GEVO 1530 이 두 개 의 플라스미드 pSA 69 및 pSA 55 로 형질 전환 되 고 , 플라스미드 는 피루브산 을 아 이소 부탄올 로 변환 시키 는 효소 경로 를 암호 화 한다 . 생체 촉매 GEVO 1530 ( pSA 69 , pSA 55 ) 가 약 30 ℃ 에서 생체 촉매 성장 에 적절 한 배지 에서 포도당 과 접촉 될 때 , 생체 촉매 는 포도당 으로부터 아 이소 부탄올 을 생산 했 다 . 각각 72 g / L 의 포도당 과 10 g / L 의 효소 추출물 을 포함 하 는 200 ml 의 EZ Rich 배지 ( Neidhardt , F . C . , P . L . Bloch , 및 D . F . Smith . 1974 . Culture medium for enterobacteria . J bacteriol . 119 : 736 - 47 ) 를 포함 하 는 두 개 의 400 mL DasGip 발효 용기 에 GEVO 1530 ( pSA 69 , pSA 55 ) 세포 가 주입 되 었 다 . 발효 용기 는 베이스 의 첨가 , 약 30 ℃ 의 온도 , 용해 된 산소 및 교반 ( agitation ) 을 통하 여 pH 를 6 . 5 에서 감시 하 고 제어 하 기 위하 여 컴퓨터 제어 시스템 에 연결 되 었 다 . 이 용기 는 300 rpm 의 최소 교반 으로 교반 되 고 , 교반 은 OD 600 이 약 1 . 0 이 될 때 까지 12 sL / h 의 공기 분무 ( air sparge ) 를 사용 하 여 약 50 % 의 용해 된 산소 함량 을 유지 하 도록 변경 된다 . 이 용기 는 다음 으로 0 . 1 mM IPTG 가 도입 되 었 다 . 이 용기 는 이러 한 조건 하 에서 약 11 시간 동안 동작 하 였 다 . 약 11 시간 후 , 발효 용기 의 내용물 이 500 ml 의 무균 눈금 플라스틱 병 으로 따라 지 고 , 약 4500 rpm 에서 20 분 동안 원심 분리 되 었 다 . 세포 들 은 약 50 ml 전체 양 의 변형 된 M 9 배지 내 에 재 부유 된다 . 72 g / L 의 포도당 과 10 g / L 의 효소 추출물 을 포함 하 는 150 ml 의 EZ Rich 배지 를 포함 하 는 400 ml DasGip 용기 에 배지 를 포함 하 는 50 ml 의 세포 가 주입 되 고 다음 으로 0 , 1 mM IPTG 가 도입 되 었 다 . 세포 농도 는 약 6 g / L 였 다 . 5 % 의 일정 한 용해 산소 함량 이 300 부터 1200 rpm 까지 자동 으로 제어 되 는 가변 교반 을 구비 한 2 . 5 sL / h 공기 분무 를 사용 하 여 유지 되 었 다 . 옥탄 올 버블 트랩 내 의 트랩 핑 에 의해 발효 용기 방출 가스 의 측정 및 GC 에 의 핸 측정 이 아이 소 부탄올 과 에탄올 에 대하 여 수행 되 었 다 . 이산화 탄소 및 산소 의 방출 가스 농도 의 연속 적 인 측정 또한 실험 동안 DasGip 방출 가스 분석기 에 의해 측정 되 었 다 . 샘플 들 은 실험 동안 발효 용기 로부터 무균 적 으로 제거 되 었 으며 , 발효 액 내 에 OD 600 , HPLC 에 의한 포도당 농도 및 GC 에 의한 아이 소 부탄올 농도 를 측정 하 기 위하 여 사용 되 었 다 . 아 이소부탄 올 생산 은 약 15 g / L 의 일괄 농도 및 약 86 % 의 최대 이론 수율 로 약 4 시간 에 최대 에 도달 하 였 다 . 발효 시작 시간 인 0 시 부터 약 4 시간 경과 된 발효 시간 까지 계산 된 발효 부피 생산 성 은 약 3 . 5 g / L / h 였 다 .