PCR 조건 은 5 ㎕ 10 X 반응 버퍼 중 에 2 ㎕ ( 50 ng / ㎕) DNA 및 1 ㎕ 의 각각 의 프라이머 ( 50 pM ) , 5 ㎕ 10 mM dNTP ( 각각 2 . 5 mM ) 혼합물 및 1 ㎕ 5 U Ex TaqTM DNA 중합효소 ( TaKaRa , Shiga , Japan ) 를 최종 부피 50 ㎕ 가 되 도록 하 여 , thermal cycler ( PTC - 100 TM , MJ Research , Waltham , MA , USA ) 에서 수행 하 였 다 . PCR 조건 은 95 ℃/ 5 분 후 , 30 사이클 ( 95 ℃/ 30 초 , 55 ℃/ 30 초 , 및 72 ℃/ 30 초 ) PCR 수행 후 , 72 ℃ 에서 7 분 동안 최종 연장 하 였 다 . 증폭 된 PCR 산물 을 1 . 0 % ( w / v ) 아가로스 겔 전기영동 하 여 0 . 7 kb 크기 의 산물 을 확인 하 였 다 ( 도 1 ) . 도 1 에서 알 수 있 는 바 와 같이 , ORF 2 코딩 유전자 염기 서열 은 BamHI 과 HindIII 제한 효소 로 절단 되 어 3 kb ( pRSET 벡터 ) 및 0 . 7 kb ( PCV 2 ORF 2 ) 의 2 개 의 밴드 로 관찰 되 었 다 .