상기 주지 된 바 와 같이 CD 137 MAB - 3 의 인간 화 는 결합 친화도 에서 대략 2 배 의 손실 을 초래 하 였 다 ( 예컨대 , 상기 표 9 참조 ) . 최적화 를 모 쥐과 항체 와 유사 한 또는 그것 보다 더 나 은 결합 친화도 를 가지 는 인간 화 된 CD 137 MAB - 3 클론 을 확인 하 기 위하 여 사용 하 였 다 . 간단히 설명 하 면 , 무작위 돌연변이 생성 을 사용 하 여 치환 을 hCD 137 MAB - 3 ( 1 . 3 ) 의 중쇄 CDRH 3 ( Kabat 위치 99 내지 102 ) 도메인 내 에 도입 하 였 다 . 증가 하 는 엄격 성 을 사용 하 는 선택 스크리닝 을 3 회기 사용 하 여 CD 137 에 대해 증강 된 결합 을 가진 클론 을 확인 하 였 다 . 48 개 의 클론 을 회기 2 및 3 으로부터 선택 하 였 고 , 친화도 에 대해 디아 바디 ( 도 5 B 에서 나타낸 구조 를 가짐 ) 로서 평가 하 였 다 . 표 12 는 hCD 137 에 대한 증강 된 결합 에 대해 선택 된 4 개 의 클론 으로부터 CDRH 3 Kabat 잔기 99 내지 102 의 아미노산 서열 의 정렬 을 제공 한다 .