상기 1 . 에서 준비 된 최종 시료 를 역상 수지 크로마토그래피 에 걸 어 혈장 펩티드 절편 을 분리 하 였 고 , 삼중 사 극자 질량분석기 ( 기기 : 5500 Qtrap , AB Sciex , USA ) 를 사용 해 각 펩티드 의 MRM 스펙트럼 을 얻 었 다 . 이때 , 역상 수지 크로마토그래피 는 HALOTM C 18 컬럼 ( Eksigent , USA ) 컬럼 으로 45 분 간 5 %~ 40 % 의 아 세토 니트릴 농도 구배 를 이용 하 여 실시 하 였 다 . MultiQuantTM 컴퓨터 정량 분석 프로그램 ( AB Sciex , USA ) 으로 타깃 펩티드 의 MRM 크로마토그램 의 피크 면적 을 계산 하 여 정량 정보 를 확인 하 였 다 . 이때 각 타깃 펩티드 의 정량 값 은 내부 표준물질 로 넣 어 준 대장균 베타 갈락토시다아제 의 MRM 크로마토그램 의 피크 면적 에 대한 비율 로 표시 하 였 다 . 각 펩티드 의 MRM 크로마토그램 면적 비 를 구함 으로써 유방암 환자 와 비 환자 대 조군 사이 에 탄산 탈수 효소 4 의 단백질 발 현량 의 차이 를 확인 하 여 그 결과 를 도 1 에 나타내 었 다 .