배양 된 파울러 자유 아메바 에 솔잎 열수 추출물 ( 500 μ g / ml ) 을 처리 한 후 37 ℃ 배양기 에서 24 시간 과 48 시간 동안 배양 하 였 다 . 이때 솔잎 열수 추출물 을 첨가 하 지 않 고 동일 한 조건 에서 배양 한 파울러 자유 아바 를 대 조군 으로 사용 하 였 다 . 파울러 자유 아메바 의 형태학 적 인 변화 를 광학 현미경 으로 관찰 한 후 파울러 자유 아메바 를 원심 분리 하 여 수집 한 후 멸균 phosphate buffered saline ( PBS , pH 7 . 4 ) 으로 3 회 세척 한 후 파울러 자유 아메바 를 고정액 ( 2 . 5 % glutaraldehyde , pH 7 . 4 ) 으로 일차 고정 하 였 다 . 고정 후 OsO 4 용액 으로 후 고정 한 후 에탄올 로 탈수 한 다음 Exoxy 소지 에 포 매 하 고 초 박절기 ( Ultracut E Ultramicrotome ) 를 이용 하 여 70 nm 두께 의 초 박 절편 을 제작 하 였 다 . 절편 은 전자 염색 후 FEI ( Tecnai 12 ) 전자 현미경 으로 관찰 하 였 다 .