재조합 TfR 정점 도메인 에 대한 클론 변이체 의 친화력 은 Biacore ™ T 200 기구 를 이용 한 표면 플라스몬 공명 에 의해 결정 되 었 다 . Biacore ™ Series S CM 5 센서 칩 은 항 - 인간 Fab 항체 ( 인간 Fab 포획 키트 , GE Healthcare ) 와 함께 고정 되 었 다 . 5 μ g / mL 의 폴리펩티드 - Fab 융합 은 각 유동 쎌 ( flow cell ) 상 에서 1 분 동안 포집 되 었 고 , 인간 또는 cyno 정점 도메인 의 일련 의 3 - 배 희석 물 은 실온 에서 30 μ L / 분 의 유속 으로 주사 되 었 다 . 각 샘플 은 45 - 초 연합 및 3 - 분 해리 의 프로토콜 로 분석 되 었 다 . 각 주입 후 , 상기 칩 은 10 mM 글리신 - HCl ( pH 2 . 1 ) 를 사용 하 여 재생 되 었 다 . 결합 반응 은 유사 한 밀도 에서 무관 한 IgG 를 포획 하 는 유동 쎌 로부터 RU 를 차감 함 으로써 , 교정 되 었 다 . Biacore ™ T 200 평가 소프트웨어 v 3 . 1 을 사용 하 여 , 농도 에 대한 평형 에서 반응 을 피팅 함 으로써 정상 - 상태 ( Steady - state ) 친화력 을 수득 하 였 다 .