4 개 의 추가 친화 성숙 라이브러리 를 항 - FAP 항체 , 즉 클론 3 F 2 , 3 D 9 , 4 G 8 , 4 B 3 및 2 C 6 ( 3 F 2 의 가변 영역 서열 에 상응 하 는 서열 번호 195 및 서열 번호 197 ; 3 D 9 의 가변 영역 서열 에 상응 하 는 서열 번호 199 및 서열 번호 201 ; 4 G 8 의 가변 영역 서열 에 상응 하 는 서열 번호 205 및 서열 번호 207 ; 4 B 3 의 가변 영역 서열 에 상응 하 는 서열 번호 209 및 서열 번호 211 ; 및 2 C 6 의 가변 영역 서열 에 상응 하 는 서열 번호 217 및 서열 번호 219 참조 ) 의 제 1 친화 성숙 과정 으로부터 미리 선별 된 교차 반응 성 항체 에 기초 하 여 구축 하 였 다 . 보다 정확 하 게 는 , 상기 4 개 의 라이브러리 는 하 기 1 ) 내지 4 ) 에 기초 한 것 이 었 다 : 1 ) 항 - FAP 클론 3 F 2 , 4 G 8 및 4 B 3 ( 가변 중쇄 의 CDR 1 및 CDR 2 에서 무작위 화 된 VH 라이브러리 , 즉 H 1 / H 2 라이브러리 ) , 2 ) 항 - FAP 클론 3 D 9 및 2 C 6 ( 가변 경쇄 의 CDR 1 및 CDR 2 에서 무작위 화 된 VL 라이브러리 , 즉 L 1 / L 2 라이브러리 ) , 3 ) 항 - FAP 클론 3 F 2 ( 경쇄 의 CDR 3 에서 약한 무작위화 를 갖 는 L 3 라이브러리 , 즉 L 3 라이브러리 ) , 및 4 ) 항 - FAP 클론 3 F 2 ( 중쇄 의 CDR 3 에서 약한 무작위화 를 갖 는 H 3 라이브러리 , 즉 H 3 라이브러리 ) . 각각 L 1 / L 2 및 H 1 / H 2 라이브러리 를 위한 상기 처음 2 개 의 라이브러리 는 항 - FAP 항체 의 제 1 친화 성숙 과정 에 대해 요약 된 방식 과 정확히 동일 한 방식 으로 구축 되 었 다 . 대조 적 으로 , 클론 3 F 2 에 기초 한 L 3 및 H 3 친화 성숙 라이브러리 들 의 경우 , 2 개 의 새로운 프라이머 를 사용 하 여 약학 무작위화 를 모 클론 의 L 3 ( AM _ 3 F 2 _ DPK 22 _ L 3 _ ba : CACTTTGGTCCCCTGGCCGAACGT C G G G G G A A G C A T A A TACCCTGCTGACAGTAATACACTGC , 이때 밑줄 표시 된 염기 는 60 % 의 주어진 염기 및 40 % 의 혼합물 N ( 4 개 의 뉴클레오타이드 A , C , G 및 T 의 혼합물 ) 임 ) 및 H 3 ( AM _ 3 F 2 _ DP 47 _ H 3 _ fo : GGCCGTATATTACTGTGCG AAA GGG TGG TT T GGT GGT TTT AAC TACTGGGGCCAAGGAAC , 이때 밑줄 표시 된 염기 는 60 % 의 주어진 염기 및 40 % 의 혼합물 N 이 고 , 이탤릭체 로 표시 된 염기 는 60 % 의 주어진 염기 및 40 % 의 G 이 고 , 밑줄 및 이탤릭체 로 표시 된 염기 는 60 % 의 주어진 염기 및 40 % 의 혼합물 K ( 2 개 의 뉴클레오타이드 G 와 T 의 혼합물 ) 임 ) 에 도입 하 였 다 . 라이브러리 크기 는 다음 과 같 았 다 : H 1 / H 2 라이브러리 ( 1 . 13 x 1010 ) , L 1 / L 2 라이브러리 ( 5 . 6 x 109 ) , L 3 라이브러리 ( 2 . 3 x 1010 ) 및 H 3 라이브러리 ( 2 . 64 x 1010 ) .