폐렴 구균 혈청형 3 옵소닌 식세포 사멸 검정 ( OPA ) 을 이전 에 기재 된 바 와 같 되 약간 의 변형 을 가하 여 수행 하 였 다 ( Caro - Aguilar et al . , 2017 Vaccine 35 ( 6 ) : 865 - 72 ; 및 Burton et al . , 2006 , Clin Vaccine Immunol 13 ( 9 ) : 1004 - 9 ) . 혈청 , 박테리아 , 보체 및 HL - 60 세포 의 인 큐 베이 션 후 에 , 10 μ l 의 옵소닌 식세포 반응물 을 200 μ l / 웰 의 멸 균수 를 함유 하 는 밀리 포어 96 - 웰 필터 플레이트 상 의 개별 웰 로 옮겼 다 . 플레이트 를 진공 여과 하 고 , 100 μ l 의 토드 휴에트 효모 추출물 ( THYE , 테크 노바 ( Teknova ) ) 브로 쓰 를 첨가 하 였 다 . 배지 를 여과 하 고 , 습윤 플레이트 를 밀봉 된 플라스틱 백 내 에 27 ℃ 에서 밤새 놓 아 두 었 다 . 이어서 플레이트 필터 를 100 μ l / 웰 의 0 . 1 % 쿠마시 블루 용액 ( 바이오 - 라드 ( Bio - Rad ) , 캘리포니아주 허큘레스 ) 으로 염색 하 였 다 . 염색 제 를 플레이트 를 통해 여과 하 고 , 콜로니 를 쿠마시 탈 염색 용액 ( 바이오 - 라드 ) 으로 탈 염색 하 고 , 건조 될 때 까지 다시 진공 여과 하 였 다 . 염색 된 박테리아 콜로니 를 CTL 이 뮤 노 스폿 판독기 ( 셰이커 하이츠 ( Shaker Heights ) , 오하이오주 ) 상 에서 계수 하 였 다 . OPK 역가 는 보체 대 조군 ( 무 혈청 대 조군 ) 웰 에서 의 평균 성장 과 비교 하 여 적어도 50 % 사멸 을 갖 는 혈청 희석률 의 역수 로 규정 하 였으며 , 신호 가 50 % 사멸 을 아우르 는 연속 희석률 사이 에 선형 으로 내 삽 함 으로써 계산 하 였 다 .