北海道医療大学学術リポジトリ
唾液腺炎発症マウスにおける顎下腺のタイト結合構成タンパクの発現・局在
著者坂巻 秀敏,  賀来 亨
雑誌名北海道医療大学歯学雑誌
ページ175- 182
発行年2010- 12
URLht t p: //i d. ni i . ac. j p/1145/00006464/
唾液腺炎発症マウスにおける顎下腺のタイト結合構成タンパクの発現・局在
坂巻秀敏，賀来亨
北海道医療大学生体機能・病態学系臨床口腔病理学分野
Expression and localization of tight junction proteins of submandibular glandsin mouse sialoadenitis
Hidetoshi SAKAMAKI, Tohru KAKU
Division of Clinical Oral Pathology, Department of Human Biology and Pathophysiology,School of Dentistry, Health Sciencies University of Hokkaido
Abstract
[Background] Tight junctions (TJs) play an essential role in the functions of barrier membranes and fluid−secreting
epithelial cells. Expression profiles of TJ proteins including the claudin family and occludin in healthy salivary
glands differ among species. The expression pattern of TJ proteins in mice salivary glands as well as how the pat-
tern of expression of TJ proteins alters in salivary epithelial cells during the progression of sialoadenitis are both un-
clear. [Purpose] The present study investigated expression profiles of the claudin family and occludin in healthy sali-
vary glands and spontaneously induced sialoadenitis in MRL/lpr mice. [Materials and Methods] The submandibular
glands of 4 to 16−week−old MRL/lpr mice were dissected. Immunohistochemical staining was performed using anti-
bodies against claudin−1, −2, −3, −4 and−5, as well as against occludin. Real−time RT−PCR and RT−PCR assays
were carried out to observe the expression level of these TJ proteins. [Results and Discussion] No inflammatory cell
infiltration was observed in the submandibular glands of 4−week−old mice. An early form of sialadenitis was pre-
sent in the glands of mice aged 8−weeks and the inflammatory cell infiltration increased with age up to 16−weeks.
In 4−week−old mice, immunohistochemical staining for claudin−1 was observed at the intercellular membrane of ac-
inar cells. Claudin−3 was present at the intercellular membrane and in a part of the cytoplasm of acinar cells and in
the luminal surface of ductal cells. Occludin was present at the intercellular membrane and in a part of the cyto-
plasm of the intercalated and striated ducts. No immunohistochemical staining for claudin−2, −4 or −5 was observed
in the glands. During the progress of sialoadenitis, the immunohistochemical staining for claudin−1 was maintained
in acinar cells being destroyed by the inflammatory cell infiltration even after the age of 10 weeks. Expression of
claudin −3 and occludin, however, disappeared in acinar and ductal cells as the inflammatory infiltration increased
with age. Real−time RT−PCR assays showed no statiscally significant difference in the claudin−1 mRNA of the 4−
week−old mice in the control group and the experimental mice groups. The expression level of claudin−3 mRNA
was significantly lower in 14−week−old mice than in the control. The expression level of occludin mRNAs was sig-
nificantly lower in more than 8−week−old mice than in the control. These findings indicate that claudin and oc-
cludin may play a role in the maintenance of tight junctions in mouse salivary glands. The expression profiles in
mouse salivary glands may be different from those in humans and rats. Sialoadenitis may alter the expression of
these tight junction proteins in mice.
Key words：唾液腺炎，タイト結合構成タンパク，Claudin，Occludin，MRL/lprマウス
受付：平成２２年９月３０日
北海道医療大学歯学雑誌 ２９�（１７５－１８２）平成２２年２７
唾液が口腔内に分泌される際には，腺房で原唾液が産
生され，導管で電解質の分泌・再吸収が行われる．唾液
腺を構成する細胞の接着には，タイト結合，接着結合，
デスモゾーム結合ギャップ結合があるが，特にタイト結
合は，細胞同士の緊密結合をつくり，腺，管の管腔側と
組織との交通を防ぐ強固なバリアとしての働きをするの
みならず，シグナル伝達の役割を担うことが明らかとな
っている（Baker, 2010）．タイト結合は，形態的にジッ
パーのように隣り合った細胞の細胞膜を連続的につなぎ
あわせる構造からなっており，このジッパーに相当する
部分には様々なタイト結合タンパクが存在している．タ
イト結合は，claudinやoccludin，junctional adhesion mole-
culeなどのタンパクから構成されており，タンパク質及
び膜脂質の移動を制限することにより，頂端領域と基底
領域の領域を区分し，細胞の極性を維持すると考えられ
ている（Melvin et al., 2005）．Claudinは２４種類の遺伝子
ファミリーからなっており，１個の細胞には通常，複数種
のclaudinの発現がみられ，細胞や臓器の特異性に関与し
ていると考えられている（Morita et al., 1999 ; Rahner et
al., 2001）．Occludinはタイト結合に最も普遍的に存在す
るタンパク質であると言われている（Furuse et al.,
1993 ; Tsukita et al., 2001）．最近，ヒトとラットで正常
唾液組織におけるClaudin－１～５までの局在様式につ
いて報告され（Kriegs et al., 2007 ; Luorenço et al., 2007 ;
Maria et al., 2008），動物種により局在部に違いのある事
が示されたが，マウスでのその詳細は不明である．ま
た，炎症の程度に伴いタイト結合の破壊がみられる唾液
腺炎でのこれらの分子の発現，局在様式の変化は明らか
になっていない．本研究では，唾液腺炎が加齢とともに
自然発症するMRL/lprマウス（Hasegawa, 2008）を用
い，正常状態でのClaudin１～５およびOccludinの局在を
観察し，炎症の進行過程でのこれらの発現変化について
比較検討した．
材料および方法
動物には，唾液腺炎が加齢とともに自然発症する
MRL/lpr雌マウス（三協ラボサービス）の４週齢で購入
し，本学動物実験センターにて１６週齢まで飼育した．
MRL/lprマウスはリンパ球のアポトーシスに関連したFas
遺伝子に変異がみられ，リンパ球のアポトーシスが抑制
されることから，唾液腺をはじめとして全身諸臓器にリ
ンパ球浸潤がみられるマウスである（Shlomchik et al,
2003）．動物の処置および管理はすべて本学動物実験セ
ンター取り扱い規約に基づき，人道的に行われた．
２．組織標本の作製・染色および免疫組織化学的染色
１）組織標本作製
摘出物は直ちに中性緩衝２０％ホルマリン溶液にて固定
を行い，通法に従い，パラフィンに包埋し，５μmパラ
フィン切片を作製した．一部は，脱パラフィンの後，ヘ
マトキシリン・エオジン重染色を施し，他は免疫組織染
色用とした．
２）組織学的検索
ヘマトキシリン・エオジン重染色を施し，組織学的検
索を行った．すなわち，唾液腺では，生後８週齢以降リ
ンパ球浸潤がみられることから，４週齢を正常，すなわ
ちコントロールとして，８週齢以降，８，１０，１４，１６週
時にそれぞれ１２匹ずつ屠殺し顎下腺組織の摘出を行っ
３）免疫組織化学的検索
免疫組織染色のために，一次抗体として抗claudin－
１，－２，－３，－４抗体（Invitrogen, Calsbad, CA），
claudin－５抗体（Novus Biologicals, Litttleton, CO）およ
び抗occludin抗体（Invitrogen）を用いた．二次抗体以
降 ， ペ ル オ キ シ ダ ー ゼ 標 識 Avidin − biotin − complex
（Zymed, San Francisco, CA）を用いて反応を行い，ジア
ミノベンチジン４HClによる発色の後，透過型光学顕微
鏡（Nikon ECLIPSE８０i，ニコン，東京）で観察，撮影
３．PCRおよび定量的RT−PCR
Claudin－１～５とoccludinのmRNAの発現変化を観察
するために，顎下腺を摘出後直ちにホモジナイズし，
RNA抽出薬剤（TRIzol Reagent, GIBVO / BRL, London,
UK）に浸漬をしてtotal RNAの抽出を行った．Oligo
（dT）１２～１８プライマー（Superscript reverse transcriptase, In-
vitrogen）によるReverse transcriptionの後，claudin－１～
５，occludinに特異的なプライマー（表）を用いたRT−
PCR法を行った（Applied Biosystems, Foster City, CA）．
また，これらの発現量を定量的に評価するために，
TaqMan probeを用いたReal−time RT−PCR法（AmpliTag-
GoldTM Kit, Applied Biosystems）を行った．結果は，One
−way ANOVAにより統計的に評価した．
MRL / lprマウスの顎下腺を摘出し，組織標本を作製
し観察したところ，４週齢の顎下腺組織には明らかな炎
坂巻秀敏等／唾液腺炎発症マウスにおける顎下腺のタイト結合構成タンパクの発現・局在２８
������
��Claudin 1
��Claudin 3
症性変化はみられなかったものの，８週齢以降，リンパ
球の集簇による明らかな炎症巣を形成しながら，経時的
に炎症範囲の拡大していくのが観察された（図１）．こ
れらの標本を用いてタイト結合構成タンパクである
claudinとoccludinの局在を，抗claudin－１，－２，－
３，－４－５抗体および抗occludin抗体を用いて免疫組
織化学的に観察した．マウス正常顎下腺での局在を観察
するために，炎症性変化のみられない４週齢マウスから
摘出された顎下腺組織を用いた．その結果，claudin－
１，－３とoccludinの局在が確認された（図２，３，
４）．すなわち，claudin－１は腺房細胞の細胞間および
細胞質の一部に局在がみられ，導管上皮には陽性反応が
認めず（図２），claudin－３は，腺房細胞の細胞間およ
び導管上皮の内腔側に陽性反応がみられた（図３）．ま
た，occludinは腺房から導管に移行する付近の上皮，す
なわち線条部～介在部導管付近で細胞間および細胞質の
Gene NameAssay IDRef SeqGenBank mRNAAmplicon Length
Claudin 1Mm00516701−m1NM_016674.311 GenBank
Claudin 2Mm00516703−s1NM_016675.34 GenBank
Claudin 3Mm00515499−s1NM_009902.37 GenBank
Claudin 4Mm00515514−s1NM_009903.23 GenBank
Claudin 5Mm00727012−s1NM_013805.36 GenBank
OccludinMm00500912−m1NM_008756.28 GenBank
The Dental Journal of Health Sciences University of Hokkaido 29� 2010
表Claudin，Occludinのreal−time PCR primer（Applied Biosystems）
図２．４週齢マウス（コントロール）のclaudin－１の免疫組織化学染色像A：４０倍，B：１００倍Claudin－１の局在は，腺房細胞の細胞間（長い矢印）および細胞質（短い矢印）の一部に認められた．
図１．MRL / lprマウスの顎下腺のヘマトキシリン・エオジン染色像A：４週齢，B：８週齢，C：１２週齢，D：１６週齢４週齢の顎下腺組織には明らかな炎症性変化はみられなかったものの，８週齢以降，リンパ球の集簇による明らかな炎症巣を形成しながら，経時的に炎症範囲が拡大していくのが観察された（矢印）（４０倍）．図３．４週齢マウスのclaudin－３の免疫組織化学染色像A：４０倍，B：１００倍Claudin－３の局在は，腺房細胞の細胞間（長い矢印）および導管上皮の内腔側（短い矢印）に認められた．
��occludin
���Claudin 1�6�Claudin 3
������Claudin 3Claudin 3
������
一部に陽性反応が認められた（図４）．Claudin－２，
－４，－５の局在は今回の免疫染色では確認されなかっ
炎症性細胞浸潤がみられた８週齢以降のマウス顎下腺
で，同様にタイト結合構成タンパクの発現，局在の観察
を行った．Claudin－１は，炎症性細胞浸潤により唾液
腺組織が破壊されたところでも局在が比較的よく保持さ
れていた．すなわち，著明なリンパ球浸潤により炎症巣
を形成し，唾液組織が完全に破壊された部分が存在する
１２週齢以降でも陽性反応のみられるところがあった（図
５）．Claudin－３は，リンパ球の浸潤部分での局在は消
失傾向にあり，著明なリンパ球浸潤により炎症巣を形成
したところでは，完全に消失していた（図６）．Claudin
－３と同様にoccludinでもリンパ球浸潤に伴い発現の消
失が認められた（図７）．尚，炎症性変化のみられない
部分での唾液腺の染色性は，いずれの週例においても変
化は認められなかった．
発 現 の 認 め ら れ た claudin － １， － ３ と occludin の
mRNAの炎症性変化に伴う発現変化を，RT−PCRと定量
的RT−PCR法により観察した（図８A，B）．それぞれの
mRNAの発現レベルを炎症性変化の存在しない４週齢を
コントロールとして他の週齢と比較検討した．Claudin
－１はどの週齢のmRNAのレベルもコントロールと有意
差がみられなかったのに対し，claudin－３では，コント
ロールに比べて，１４，１６週齢で有意な発現低下が観察さ
れた．また，occludinでは，１０，１２，１４，１６週齢でコン
トロールに比べて有意な発現低下が認められた．
本研究では，マウス顎下腺におけるタイト結合タンパ
クclaudin－１，－２，－３，－４－５とoccludinの発現
様式を明らかにし，唾液腺炎進行中におけるそれらの発
現変化について観察した．本研究で用いたMRL/lprマウ
スは，Fas抗原遺伝子の欠損から，リンパ球のアポトー
シスが起こらず，唾液腺や腎臓などの実質臓器でのリン
パ球浸潤が経時的に増加するものであり，自己免疫疾患
Hidetoshi SAKAMAKI et al.／Expression and localization of tight junction proteins of submandibular glands in mouse sialoadenitis
図４．４週齢マウスのoccludinの免疫組織化学染色像A：４０倍，B：１００倍Occludinは腺房から導管に移行する付近の上皮，すなわち線条部（長い矢印）～介在部導管（短い矢印）付近で細胞間および細胞質の一部に局在が認められた．
図６．１２週齢と１６週齢のマウスのclaudin－３の免疫組織化学染色像A：１２週齢，B：１６週齢リンパ球の浸潤部分での局在は消失傾向にあり，著明なリンパ球浸潤により炎症巣を形成したところでは，完全に消失していた（矢印）（４０倍）．
図５．１２週齢と１６週齢のマウスのclaudin－１の免疫組織化学染色像A：１２週齢，B：１６週齢著明なリンパ球浸潤により炎症巣を形成し，唾液腺組織が完全に破壊された部分が存在する１２週齢，１６週齢でも陽性反応のみられるところがあった（矢印）（４０倍）．
図７．１２週例と１６週齢のマウスのoccludinの免疫組織化学染色像A：１２週齢，B：１６週齢リンパ球の浸潤部分での局在は消失傾向にあり，著明なリンパ球浸潤により炎症巣を形成したところでは，完全に消失していた（矢印）（４０倍）．
Claudin 1
Claudin 3
Occludin
4w10w 12w 14w 16w8w
Claudin 1
4w8w10w12w14w16w
4w8w10w12w14w16w
Occludin
4w8w10w12w14w16w
Claudin 3
のモデルマウスとして広く用いられてきている（Chan
et al., 1997 ; Nose et al., 2000 ; Hasegawa et al., 2008）．
Fas抗原遺伝子の欠損がない同種のマウスであるC３H/
HeJとC５７BL／６Jと比較した研究では，C３H/HeJとC５７
BL／６Jは２０週例以降でも唾液腺炎にリンパ球浸潤がみ
られないことが報告されており，MRL/lprマウスは自己
免疫性唾液腺炎のモデル動物となると結論づけられてい
る（Nose et al., 2000）．本研究でも，４週例ではリンパ
球浸潤はみられなかったものの，８週例以降で明らかな
リンパ球浸潤がみられその後，経時的な増加が認められ
た．タイト結合タンパクの経時的な発現変化は，加齢に
よる発現変化も完全には否定できないが，リンパ球浸潤
のみられない部分での唾液腺の染色性は，いずれの週例
においても変化は認められなかった．このことより，タ
イト結合タンパクの経時的な発現変化はリンパ球浸潤に
よるものと考えられた．
Claudin－１～５やoccludinの唾液腺での局在について
は，ヒトやラットでの観察が多く（Kriegs et al., 2007 ;
Lourenço et al., 2007 ; Maria et al., 2008 ; Baker, 2010），
マウスでの局在を観察したものは僅かである．それぞれ
により発現や局在が異なっており，これらは種特異的で
あると考えられている．すなわち，ヒトの大唾液腺組織
でclaudin－１，－２，－３，－４とoccludinが腺房と導
管上皮に観察されるものの，claudin－５は認められなく
（Kriegs et al., 2007 ; Maria et al., 2008），ラットでは，腺
房ではclaudin－３のみであり，導管にはclaudin－１，－
３，－４がみられるとの報告がある（Lourenço et al.,
2007）．マウスでは，僅かに腺房にclaudin－３，－４の
局在を示した報告があるにすぎない．すなわち，claudin
－３，－４いずれも腺房部にのみ局在がみられるとして
いる（Hashizume et al., 2004）．本研究では，claudin
－１，－３とoccludinのマウスでの局在様式を明らかに
した．すなわち，caludin－１は腺房細胞のみに局在して
おり，claudin－３は腺房と導管の両方に，occludinは線
条部～介在部導管付近に局在が認められたが，claudin
－４の局在は確認されなかった．Claudin－３，－４の
局在は先行研究の結果（Hashizume et al., 2004）と一致
していなかったが，これは用いた抗体の違いや免疫組織
化学的染色の手法の違いによるものと思われた．免疫染
色では，陽性は陽性として評価できるが，陰性は陰性と
して評価できないことから，本研究でのclaudin－３は腺
房と導管に局在しているとの結果は先行研究の腺房のみ
とする結果より信頼性が高いものと考えられた．一方，
本研究でのclaudin－４を陰性とする結果は，さらなる検
討が必要であると思われる．
北海道医療大学歯学雑誌 ２９�平成２２年
図８．claudin－１，－３とoccludinのmRNAのRT−PCRと定量的RT−PCRA：mRNAのRT−PCR, B：定量的RT−PCR（縦軸：Target mRNA/GAPDHratio，横軸：週齢）それぞれのmRNAの発現レベルを炎症性変化の存在しない４週齢をコントロールとして他の週齢と比較検討した．Claudin－１はどの週齢のmRNAのレベルもコントロールと有意差がみられなかったのに対し，claudin－３では，コントロールに比べて，１４，１６週齢で有意な発現低下が観察された．また，occludinでは，１０，１２，１４，１６週齢でコントロールに比べて有意な発現低下が認められた．
Claudin－１の詳細な生理学的役割は未だ明らかにな
っていない．Claudin－１をノックダウンした新生児マ
ウスでは著明な脱水症状を引き起こし，生後１日以内に
死ぬことから，マウスにおけるClaudin－１にはタイト
結合の根本的な働きのあることが示唆されている（Fu-
ruse et al., 2002）．本研究で示したclaudin－１が顎下腺
に局在しているとの結果はこの報告と矛盾しないものと
思われた．腎上皮由来細胞であるMDCK細胞を用いた実
験で，claudin－１を過剰発現させると，細胞間結合が強
固になり物質の透過性が抑制されることから，claudin－
１はタイト結合形成に重要な役割を担っていることが示
唆されている（Inai et al., 2005）．このことを支持するよ
うに，ラットの耳下腺由来の細胞をTNF－αやIFNγなど
の炎症性サイトカインで処理すると，claudin－１の発現
の減少とともにタイト結合の破壊もみられるとの報告が
ある（Baker et al., 2008）．本研究では，炎症の進行に伴
う腺房の破壊によってもclaudin－１の免疫染色性は他の
ものと比較してよく保持されており，mRNAの発現レベ
ルも有意な低下がみられず，この報告と矛盾しているも
のであった．この点に関して，claudin－１の発現がみら
れるヒトの唾液腺で，唾液腺炎のみられるシェーグレン
症候群と正常唾液腺では，シェーグレン症候群での
claudin－１の発現が上昇しているとの報告がある（Ew-
ert et al., 2010）．Claudin－１の発現上昇した理由につい
て，この発現上昇に一致して他のタイト結合構成タンパ
クであるZO－１やoccludinの発現が減少したことから，
タイト結合を維持させ細胞を生存のための生体の防衛反
応としてそのような現象がみられたものと推測してい
る．本研究での結果は，この考えを支持するもの思われ
Claudin－３は，ヒトとラットの腺房と導管の両者へ
の局在が確認されていたが，マウスでは腺房での局在が
示されているのみであった．本研究では，マウスでも腺
房と導管の両者へ局在していることが明らかとなった．
今回初めて導管への局在も確認された理由として，過去
の報告と用いた抗体の違いや免疫組織化学的手法の違い
などが考えられる．Claudin－３は種を超えて唾液腺の
腺房，導管両方に広く存在しているものと思われる．
Claudin－３をclaudin－１と同様にMDCK細胞に遺伝子
導入した実験では，claudin－１では細胞間結合が密にな
り透過性が抑制されたのにも関わらず，claudin－３では
その過剰発現がそれらに影響を及ぼさなかったとしてい
る（Amashes et al., 2002）．一方，胃がん由来細胞株で
あるMKN２８のclaudin－３をノックダウンすると，有意
に細胞透過性が上昇するとの報告がある（Hashimoto et
al., 2008）．これらのことから，claudin－３の機能は細胞
の種類によって異なっていることが示唆されている．腺
房，導管の両者に局在しているclaudin－３の唾液腺で機
能については未だ不明であるが，最近の研究で，細胞間
水トランスポータの主なものであるアクアポクリン５が
欠損しているマウスでは，claudin－３の発現が低下して
いると報告している（Kawedia et al., 2007）．このことか
ら，claudin－３は唾液腺の傍細胞水分泌に関与している
ことが示唆されている．本研究でのclaudin－３の導管で
の局在が内腔側にみられたとの結果は，この考えと矛盾
しないものと思われた．また，炎症性変化に伴いclaudin
－３の発現が低下したことについて，in vitroの実験で炎
症性サイトカインによって上皮のバリアが破壊されると
の報告（Bruewer et al., 2003）や，炎症性サイトカイン
の量が少ない時点ではclaudin－３の発現は変化しないと
の報告がある（Patrick et al., 2006）．いずれin vitroの結
果であることから，本研究での結果とは一概に照らし合
わせることはできないが，本研究のように組織切片上で
腺房の破壊がみられるような状態では，claudin－１に比
べてclaudin－３は比較的早い時期から発現が減少するも
のと考えられた．
Occludinはタイト結合のバリア機能を担う膜貫通型構
成タンパクの一つである．Occludinを欠損させた幹細胞
はタイト結合を形成しながら，上皮細胞へ分化しうるこ
とや（Saitou et al., 1998），occludinの発現を誘発した線
維芽細胞でも細胞間の接着を形成しないことから（Fu-
ruse et al., 1998），occludinはタイト結合の形成に必要な
いことが示唆されている．一方，MDCK細胞にoccludin
を過剰発現させると細胞間結合が密になり，一部の低分
子物質の透過性が抑制されることから，occludinは選択
的な透過性関門を形成することが示 唆 さ れ て い る
（Balda et al., 1996）．Occludinのマウス唾液腺での局在は
これまで確認されていないが，ヒトでは導管と腺房の両
者への局在が報告されている（Maria et al., 2008）．本研
究では，マウスの顎下腺でoccludinが線条部～介在部導
管に局在していることを明らかにした．Occludinをノッ
クダウンしたマウスでは，理由は不明であるが，線条部
導管の細胞質内の顆粒が欠損しているとの報告がある
（Saitou et al., 2000）．これらのことから，マウス唾液腺
でのoccludinは線条部導管付近の低分子物質の一部の透
過性関門の形成に関与していることが推測される．この
ことを明らかにするためには更なる研究が必要であると
思われた．また，炎症性変化に伴いoccludinの発現が低
下したことについて，in vitroの実験で炎症性サイトカイ
ン に よ っ て 上 皮 の バ リ ア が 破 壊 さ れ る と の 報 告
坂巻秀敏等／唾液腺炎発症マウスにおける顎下腺のタイト結合構成タンパクの発現・局在３２
（Bruewer et al., 2003）や，炎症性サイトカインの量が少
ない時点ではclaudin－３と同様にoccludinの発現は変化
しないとの報告がある（Patrick et al., 2006）．Occludinも
caludin－３と同様にclaudin－１に比べては比較的早い時
期から発現が減少するものと考えられた．
タイト結合構成タンパクの中には，唾液腺炎が発症し
た際に破壊されやすいものとされにくいものとがあるこ
とが示唆され，タイト結合の維持にclaudinとoccludinが
重要な役割を担っていることが示唆された．
参 考 文 献
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平成元年３月東北歯科大学（現：奥羽大学歯学部歯学科）卒業
平成６年７月坂巻歯科医院開業
平成１２年４月北海道医療大学歯学部口腔病理学講座研究生（現：生体機能・病態学系
臨床口腔病理学分野）
Hidetoshi SAKAMAKI et al.／Expression and localization of tight junction proteins of submandibular glands in mouse sialoadenitis３４