. 박테리아에 파지나 플리스미드가 들어오게 되면 외부 DNA 조각 ( protospace ) 을 박테리아 유전체 속 반복 서열 사이에 넣게된다. 이 반복된 서열을 CRISPR이라고 한다. CRISPR array에는 두개의 RNA가 암호화 되어 있는데, 하나는 crRNA ( CRISPR RNA ) 이고, 다른 하나는 tracrRNA ( trans activating CRPSPR RNA ) 이다. crRNA는 protospace 부분에서 전사되며, tracrRNA와 결합하여 3차 구조를 형성한다. 두 종류의 RNA는 핵산분해효소가 외부 DNA를 인지하고 자를 수 있도록 도와준다. [ 21 ] CRISPR 시스템에서 crRNA와 tracrRNA를 합쳐서 하나의 RNA만을 사용하도록 gRNA를 새롭게 프로세싱 하였다. gRNA는 20bp 정도의 서열 인식범위를 가지고 있다. gRNA를 사용하면 하나의 RNA를 이용하므로 좀 더 간단하게 유전체 편집을 할 수 있다. 그러나 한가닥의 gRNA를 사용하는 것보다 crRNA와 tracrRNA 두가지를 사용한 CRISPR 기술이 더 효율이 좋다고 알려져 있다. CRISPR
일어나면 DNA의 이중가닥 절단 말단 부분에 붙는 Ku70 / 80 이형이형다량체가 DNA 가닥에 붙게 되고, 이 복합체는 DNA - PKcs를 불러들인다. DNA - PKcs는 자기인산화를 통해 Artemis가 DNA 끝을 가공하는데 유리하게 해준다. 마지막으로 XRCC4 / DNA ligase IV 복합체를 이용하여 DNA 양 끝을 라이게이션을 통해 수선이 일어난다. [ 5 ] 상동재조합 ( HR, Homologous recombination ) [ 편집 ] 반면, 상동재조합의 경우 상동성 있는 서열을 포함한 DNA 공여체가 수선의 주형으로 이용되므로, 관심 있는 유전적 부분에 원하는 변이를 만들어낼 수 있다는 장점을 가진다. 상동재조합의 경우 DNA 이중가닥 절단이 일어나면, PARP1 이 DNA 이중가닥 절단 부위에 붙게되며, MRN 복합체 ( MRE11, Rad50, Nbs1 ) 를 불러들인다. MRN 복합체는 DNA 이중가닥 말단에 붙게 되고, 이후 인산화 된 CtIP를 불러들인다. 인산화 된 CtIP는 MRE11의 앤도뉴클레아제 부분을 활성화 시킨다. 뿐만아니라 CtIP는 BRCA1, BARD
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. 이렇게 만든 단백질을 핵산 분해 효소의 도메인과 융합시켜 원하는 염기서열의 DNA의 절단을 유도하고, 이런 단백질들을 게놈 연구의 도구로 사용하는 것이 가능하다. [ 13 ] 보통의 징크핑거 핵산분해 효소는 두 개의 DNA 결합 단백질 ( 3 ~ 6 개의 zinc finger를 포함 ) 과 핵산 분해 효소인 Fok1의 제한 도메인을 결합시킨다. 두 단백질은 몇 개의 뉴클레오타이드가 떨어져 있는 두 개의 DNA 서열을 인식한다. 두개의 징크핑거 단백질을 각각의 서열에 연결하면 두 개의 Fok1 도메인이 가까워진다. Fok1은 핵산 분해 효소 활성을 갖기 위해 이량체가 필요하며 각 핵산 분해 효소 파트너가 독특한 DNA 염기 서열을 인식함에 따라 특이도가 증가한다. 이러한 효과를 높이기 위해서 Fok1은 이질이량체만 기능 할 수 있도록 조작되었다. [ 14 ] [ 15 ] 특정 서열에 대한 징크핑거 뉴클레아제를 설계하기 위해 여러 접근법이 사용된다. 가장 널리 알려진 것은 징크핑거 유닛을 알려진 특이성과 결합하는 것이다. 최적의 특이성과 세포 내성을 가진 조합을 확인하기 위해 박테리아나 효모 또는 동물 세포를 이용한 기술이 개발되었다. 징크핑거
Valérie ; Thomas, Séverine ; Valton, Julien ; Beurdeley, Marine ; Silva, George H. ; Daboussi, Fayza ( 2014년 1월 23일 ). " BurrH : a new modular DNA binding protein for genome engineering ". 《 Scientific Reports 》 ( 영어 ) 4 ( 1 ). ISSN 2045 - 2322. doi : 10. 1038 / srep03831. ↑ Mojica, Francisco J. M. ; -, Chc ) sar ; -, ; Soria, Elena ( 2005년 2월 1일 ). " Intervening Sequences of Regularly Spaced Prokaryotic Repeats Derive from Foreign Genetic Elements ". 《 Journal of Molecular Evolution 》 ( 영어 ) 60 ( 2 ) : 174 - 182. ISSN 0022 - 2844. doi : 10. 1007 / s00239 - 004 - 0046 - 3. ↑ Grissa, Ibtissem ; Vergnaud, Gilles ; Pourcel, Christine. " The CRISPR
##도 일어난다. 바이러스 또는 바이러스의 일부를 이루는 RNA 매개체는 유전암호를 편집할 수 있는 능력이 있는 것으로 알려져 있다. [ 25 ] 하지만, 원하는 변이를 얻을 수 있는 확률은 매우 낮다는 것을 염두에 두어야 한다. 예를 들어, 누군가 세포가 NHEJ에 의한 변이를 만들고자 계획 하였을지라도, 세포는 이중가닥절단을 수선하기 위해 HR을 채택할 수 있는 것이다. 참고 문헌 [ 편집 ] ↑ Esvelt, KM. ; Wang, HH. ( 2013 ). " Genome - scale engineering for systems and synthetic biology. ". 《 Mol Syst Biol 》 9 ( 1 ) : 641. PMC 3564264. PMID 23340847. doi : 10. 1038 / msb. 2012. 66. ↑ Tan, WS. ; Carlson, DF. ; Walton, MW. ; Fahrenkrug, SC. ; Hackett, PB. ( 2012 ). " Precision editing of large animal genomes. ". 《 Adv Genet 》 80 : 37 - 97. PMC 3683964. PMID 23084873. do
Rahdar, M., & Porteus, M., Gene editing : not just for translation anymore. Nat Meth 9 ( 1 ), 28 - 31 ( 2012 ). ↑ Witzany, G ( 2011 ). " The agents of natural genome editing ". 《 J Mol Cell Biol 》 3 ( 3 ) : 181 - 189. PMID 21459884. doi : 10. 1093 / jmcb / mjr005. 원본 주소 " " 분류 : 유전체 편집숨은 분류 : CS1 - 영어 인용 ( en ) PMID 매직 링크를 사용하는 문서영어 표기를 포함한 문서 둘러보기 메뉴 개인 도구 로그인하지 않음토론기여계정 만들기로그인 이름공간 문서토론 변수 보기 읽기편집역사 보기 더 보기 검색 둘러보기 대문사용자 모임요즘 화제최근 문서 보기임의 문서로도움말기부 도구 여기를 가리키는 문서가리키는 글의 최근 올리기특수 문서 목록고유 링크문서 정보위키데이터 항목이 문서 인용하기 인쇄 / 내보내기 책 만들기PDF로 다운로드인쇄용 판 다른 언어 Indonesia 日 本 語 中 文 링크 편집 이 문서는 2019년 5월 12일
, Ibtissem ; Vergnaud, Gilles ; Pourcel, Christine. " The CRISPRdb database and tools to display CRISPRs and to generate dictionaries of spacers and repeats ". 《 BMC Bioinformatics 》 8 ( 1 ). doi : 10. 1186 / 1471 - 2105 - 8 - 172. ↑ Jinek, Martin ; Chylinski, Krzysztof ; Fonfara, Ines ; Hauer, Michael ; Doudna, Jennifer A. ; Charpentier, Emmanuelle ( 2012년 8월 17일 ). " A Programmable Dual - RNA - Guided DNA Endonuclease in Adaptive Bacterial Immunity ". 《 Science 》 ( 영어 ) 337 ( 6096 ) : 816 - 821. ISSN 0036 - 8075. PMID 22745249. doi : 10. 1126 / science. 1225829. ↑ 가 나 McMahon, M. A., Rahdar, M., & Porteus, M., Gene editing : not just for transl
Meth 9 ( 1 ), 27 - 27 ( 2011 ). ↑ 가 나 다 Smith, J. et al., A combinatorial approach to create artificial homing endonucleases cleaving chosen sequences " Nucleic Acids Research 34 ( 22 ), e149 ( 2006 ). ↑ Chevalier, B. S. et al., Design, Activity, and Structure of a Highly Specific Artificial Endonuclease " Molecular Cell 10 ( 4 ), 895 - 905 ( 2002 ). ↑ " Baker M ( January 2012 ). " Gene - editing nucleases ". Nature Methods. 9 ( 1 ) : 23 - 6. PMID 22312637. ". ↑ " Kim YG, Cha J, Chandrasegaran S ( February 1996 ). " Hybrid restriction enzymes : zinc finger fusions to Fok I cleavage domain ". Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93 ( 3 ) : 1156 - 60
##42. PMID 20717154. ". ↑ " de Souza N ( January 2012 ). " Primer : genome editing with engineered nucleases ". Nature Methods. 9 ( 1 ) : 27. doi : 10. 1038 / nmeth. 1848. PMID 22312638. ". ↑ Stella, Stefano ; Montoya, Guillermo ( 2016년 7월 1일 ). " The genome editing revolution : A CRISPR - Cas TALE off - target story ". 《 BioEssays 》 ( 영어 ) 38 : S4 - S13. ISSN 1521 - 1878. doi : 10. 1002 / bies. 201670903. ↑ Bogdanove, Adam J. ; Voytas, Daniel F. ( 2011년 9월 30일 ). " TAL Effectors : Customizable Proteins for DNA Targeting ". 《 Science 》 ( 영어 ) 333 ( 6051 ) : 1843 - 1846. ISSN 0036 - 8075. PMID 21960622. doi : 10. 1126 / science.
유전체 편집(영어: genome editing, gene editing) 또는 조작된 핵산분해효소를 이용한 유전체 편집(genome editing with engineered nuclease, genome engineering)은 인공적으로 조작된 핵산분해효소 혹은 유전자 가위를 이용해 유전체로부터 DNA가 삽입, 대체 혹은 결실되는 유전 공학의 일종이다. 핵산분해효소는 유전체 상의 원하는 위치에 특정한 이중가닥절단(Double-stranded break, DSB)을 일으키게 되고, 그 절단은 세포의 자체적인 기작에 의해 상동재조합(Homologous Recombination, HR) 또는 비상동말단연결(Non-homologous end joining, NHEJ)의 방식으로 수선된다. 최근 주로 이용되고 있는 조작된 핵산분해효소는 크게 4가지가 있다 : ZFNs (Zinc Finger Nucleases), TALENs (Transcription Activator-Like Effector Nucleases), the CRISPR/Cas system, 그리고 메가핵산분해효소 (meganucleases). 일부 생물체에서만 작용하는 한계가 있다. 엄격한 선별 과정을 필요로 하므로, DNA상에 선별을 위한 특이적인 서열을 추가적으로 넣어주어야 한다. 다소 불충분한 부분이 있다. 생쥐 배아줄기세포는 원하는 서열을 담은 DNA 공여체를 넣어주었을 때, 100만개 당 하나의 비율로 원하는 자리에 변이가 생기게 된다. 초파리에서 P인자 (P element)를 이용하는 경우, 임의적 변이가 일어나고 다른 유전자 변이 패턴에 영향을 줄 수 있다는 한계를 가진다.그러므로, 조작된 핵산분해효소를 이용한 유전체 편집은 앞서 설명한 것들의 단점을 극복하고 상대적으로 간단하게 이용 가능한 접근법이라고 할 수 있다.