合成大片段基因的瓶颈是什么？我们离人工制造一个生物还有多远？
关于合成DNA的原理，楼上各位已经介绍很多了。的确，目前在DNA分子的合成层面，最大的技术困难就是如何合成长链的DNA分子。另一个重要的问题是，合成的DNA分子如何进行高效的组装？ 传统的限制性内切酶效率低、限制多；新兴的gibson assembly方法依赖于PCR，但只要是PCR，在基因组水平的DNA组装上，就一定会发生突变；不依赖于PCR的golden gate方法目前是最可靠最高效的方法，新近一系列基因组水平DNA合成的文章大都采用了此方法。然而即便如此，也只是一次组装5~8个长度在1k~2k之间的片段，比起基因组水平动辄以百万碱基作为单位的长度，还是小巫见大巫。 通量低必然导致成本高，也就成了合成大片段DNA的最大门槛。