humana antivacina.Poderão ser preparadas outras imunoglobulinas humanas específicas. Se existir uma norma internacional, elas deverão ser controladas em função dessa norma e a sua actividade deverá ser expressa em unidades internacionais.A imunoglobulina humana antivacina deve conter pelo menos 500 UI por ml de anticorpos antivacina, determinados por teste de neutralização sobre membrana cório-alantoide ou em cultura de tecidos.A imunoglobulina humana antitetânica deve conter pelo menos 50 UI por ml de antitoxina tetânica determinada por teste de neutralização em animal.As imunoglobulinas humanas específicas devem, além disso, satisfazer os requisitos descritos no nº 4, Imunoglobulina humana normal.Segundo a taxa da anticorpos, a concentração de imunoglobulina na solução final oscila entre 100 e 170 gramas por litro.EtiquetagemA etiqueta do recipiente deve fornecer todas as informações constantes da etiqueta modelo (Anexo 5). Além disso, a etiqueta deverá indicar a actividade expressa em unidades internacionais, nos mesmos termos do padrão internacional ou da preparação internacional de referência.6. FIBRINÓGENO HUMANO DESSECADOO fibrinógeno humano dessecado é uma preparação seca que contém o constituinte solúvel do plasma humano líquido que, após adição de trombina, se transforma em fibrina. O método de preparação utilizado deve ser tal que o produto final satisfaça as condições prescritas mais adiante e de modo a reduzir o risco de transmissão da hepatite de inoculação.As misturas de plasma utilizadas na preparação do fibrinógeno devem provir do menor número possível de amostras.Durante a preparação, não deve ser acrescentada qualquer substância anti-séptica ou bacteriostática.O produto final deve ser liofilizado.SolubilidadeO produto seco deve ser completamente solúvel após adição da quantidade de água prescrita. Nos 60 minutos que seguem a reconstituição, não deve produzir-se qualquer precipitação.Identificaçãoi) Os testes de precipitação com anti-soros específicos devem indicar que o produto contém apenas proteínas plasmáticas humanas;ii) O produto que acaba de ser reconstituído tem a propriedade de coagular com adição de trombina.Após adição de trombina a uma solução de fibrinógeno humano, cuja concentração foi igualada à do plasma normal fresco, a coagulação deve produzir-se num prazo que não exceda o dobro do tempo de coagulação do plasma normal fresco, após adição de trombina;iii) Proteína coagulável. Não deve ser coagulável pela trombina menos de 50 % da quantidade de proteínas totais.Perda da massa por dessecaçãoA dessecação, em presença de anidrido fosfórico sob uma pressão não superior a 0,02 mm de mercúrio durante 24 horas, não deve provocar perda de peso superior a 0,5 %.EsterilizaçãoO produto final, após reconstituição, deve ser estéril, quando examinado por um
de colheita e de injecção, utilizando o extracto A, e para cada novo lote de matérias de formulação aprovada, utilizando o extracto B, segundo o processo prescrito na farmacopeia nacional ou qualquer outro método aprovado pela autoridade nacional encarregada do controlo (a composição dos extractos A e B é indicada na nota abaixo apresentada).2. O controlo da apirogenia será efectuado aquando da análise inicial das formulações das matérias plásticas destinadas ao fabrico dos frascos e dos dispositivos de colheita e de administração, utilizando o extracto A e, para cada novo lote de matérias da fórmula aprovada, utilizando o extracto C ; aquando do controlo normal de rotina dos frascos e dos dispositivos de colheita e de injecção, utilizando o extracto C, de acordo com o procedimento prescrito na farmacopeia nacional ou qualquer outro método aprovado pela autoridade nacional encarregada do controlo.A incidência dos controlos de apirogenia, utilizando o extracto C, será determinada pela autoridade nacional encarregada do controlo.(A composição dos extractos A e C é indicada na nota abaixo.)3. A análise dos efeitos hemolíticos num sistema tamponado será efectuada aquando da análise inicial das formulações das matérias plásticas destinadas ao fabrico dos recipientes e do equipamento para a colheita e administração do sangue e incidirá sobre cada novo lote de matéria que corresponda às formulações aprovadas, utilizando o extracto descrito atrás em I.A. (Para o método e os limites aceitáveis, ver o apêndice ao presente anexo.)4. Um ensaio de sobrevivência in vivo dos glóbulos vermelhos será efectuado aquando da análise inicial das formulações das matérias plásticas destinadas ao fabrico dos recipientes para sangue. Se for feita qualquer alteração à formulação acordada, o ensaio será repetido. (Ver os métodos propostos e os limites aceitáveis que constam do apêndice ao presente anexo.)NotaExtracto A:adicionar ao extracto acima descrito em I.A cloreto de sódio apirógeno até à obtenção final de uma concentração de 9 gramas de cloreto de sódio por litro.Extracto B:Dispositivo de transfusão : encher o dispositivo de transfusão tão completamente quanto possível de uma solução estéril e apirógena de 9 gramas de cloreto de sódio por litro, fixar as extremidades e imergir completamente o dispositivo assim cheio, durante uma hora, em água mantida a 85 C. Recolher o conteúdo do dispositivo.Recipiente em matéria plástica : se o recipiente estiver cheio de uma solução anticoagulante, convém esvaziá-lo e enxaguá-lo duas vezes com 250 ml de água destilada estéril e apirógena a uma temperatura de 20 C. Encher o recipiente com 100 ml de solução estéril e apirógena de 9,0 gramas de cloreto de sódio por litro, fechá-lo cuidadosamente e imergi-lo durante uma hora em posição horizontal em água mantida a 85 os dois produtos contêm somente proteínas plasmáticas humanas;ii) A electroforese, praticada em migração livre, em condições aceitáveis e adequadas, mostra que a fracção de proteínas com a mobilidade do componente albumínico do plasma humano normal constitui, pelo menos, 95 % da massa para as preparações de albumina humana ou, pelo menos, 85 % para as soluções estáveis de proteínas plasmáticas humanas.Teor e concentração de sódioO teor de sódio da albumina humana pobre em sal não deve exceder 0,61 milimole de sódio/grama de albumina. Nos outros preparados de albumina humana e nas soluções estáveis de proteínas plasmáticas humanas, a concentração em sódio não deve ser superior a 0,15 mole por litro de solução ou de produto seco reconstituído.Concentração de potássioA concentração de potássio não deve exceder, na albumina humana e nas soluções estáveis de proteínas plasmáticas humanas, 2 milimoles por litro de solução ou de produto dessecado reconstituído.AcidezMedida a uma temperatura de 15 C a 25 C numa solução diluída num concentrado de 10 gramas de proteínas e 0,15 mole de cloreto de sódio por litro, o pH dos dois preparados deve ser de 6,8 ± 0,2.Perda de massa por dessecaçãoQuando se trata de um preparado dessecado, a dessecação em presença de anidrido fosfórico sob uma pressão que não exceda 0,02 mm de mercúrio, durante 24 horas, não deve causar perda de peso superior a 0,5 %.EsterilidadeO produto final, quando examinado através de uma técnica bacteriológica adequada, deve ser estéril.ConservaçãoA albumina humana dessecada deve ser colocada em atmosfera de azoto ou no vácuo, em recipiente estéril, selado, de modo a excluir micro-organismos e humidade. Deve estar protegida da luz e conservada a uma temperatura inferior a 20 C.As soluções de albumina humana e as soluções estáveis de proteínas plasmáticas humanas devem ser conservadas em recipientes estéreis, selados, de modo a excluir micro-organismos. Devem ser protegidas da luz e conservadas à temperatura de 4 C a 6 C.EtiquetagemA etiqueta do recipiente deve fornecer todas as informações constantes da etiqueta modelo (Anexo 4). Para as soluções, a data de preparação é a data de aquecimento no recipiente final.4. IMUNOGLOBULINA HUMANA NORMALA imunoglobulina humana normal é uma preparação de proteínas plasmáticas extraída do sangue humano total e que contém os anticorpos de um adulto normal. É obtida a partir da mistura do plasma líquido de, pelo menos, 1 000 dadores.O processo de preparação deve ser de modo a que o produto satisfaça as condições prescritas mais adiante e a que o produto final não transmita a hepatite de inoculação. Além disso, o método de preparação deve ser de modo a que os anticorpos contidos no produto inicial estejam concentrados em quantidades adequada no produto final. O processo utilizado deve dador. Sempre que exista uma técnica nacional, normalizada e recomendada, para determinação do grupo sanguíneo, deve a mesma ser utilizada.O termo Rh negativo deve ser apenas utilizado quando provas específicas tenham revelado a ausência dos antígenos C, D, Du e E. Todos os outros sangues devem ser classificados como Rh positivo.O sangue objecto de intercâmbio nos termos do presente Acordo só será utilizado para transfusões em indivíduos pertencentes ao grupo AB0 correspondente.ConservaçãoO sangue humano total é mantido num recipiente esterilizado, devidamente selado, de forma a estar ao abrigo dos micro-organismos, e conservado a uma temperatura entre 4 C e 6 C até à sua administração, excepto durante os períodos necessários ao seu exame e ao seu transporte a uma temperatura mais elevada, não devendo, no entanto, tais períodos exceder 30 minutos, após os quais o sangue deve ser imediatamente arrefecido até uma temperatura de 4 C a 6 C.EtiquetagemA etiqueta do recipiente deve fornecer todas as informações constantes da etiqueta modelo (Anexo 2). Para o grupo Rh deve-se especificar se é «Positivo» ou «Negativo», ou em abreviatura, «POS» ou «NEG».1. b) CONCENTRADOS DE GLÓBULOS VERMELHOS HUMANOSO concentrado de glóbulos vermelhos humanos é uma unidade de sangue humano total a que foi subtraída grande parte do plasma.Tal concentrado contém todos os glóbulos vermelhos da unidade a partir da qual foi preparado, podendo os outros elementos celulares estar presentes ou ter sido parcialmente retirados.O conteúdo líquido do concentrado é constituído quer por plasma residual, quer por uma solução artificial isotónica adequada, adicionada após a subtração do plasma. O volume ocupado pelos glóbulos vermelhos deve situar-se entre 65 % e 75 % do volume total do produto, mas, em caso de concentração mais elevada dos glóbulos vermelhos, a percentagem aproximada de eritrócitos em volume (hematócrito) deve constar da etiqueta.As manipulações necessárias à preparação devem ser efectuadas assepticamente. As decantações devem ser efectuadas em circuito esterilizado, e sempre por compressão, não devendo ser adicionada qualquer substância antisséptica ou bacteriostática.Grupo sanguíneo e conservaçãoO mesmo que para o sangue humano total.EtiquetagemA etiqueta do recipiente deve conter todas as informações constantes da etiqueta modelo (Anexo 2 A). Para o grupo Rh deve-se especificar se é «Positivo» ou «Negativo», ou em abreviatura «POS» ou «NEG». Se tiver sido adicionada qualquer solução artificial, a etiqueta deve também indicar o seu volume e a sua composição.2. PLASMA HUMANO DESSECADOO plasma humano dessecado é preparado por dessecação do líquido obtido através da centrifugação ou sedimentação do sangue humano total.No decurso da preparação não deve ser adicionada nenhuma (L) dos tubos em cm, é calculado como se segue:D1 = diâmetro interior em cm,D2 = diâmetro exterior em cm.Os tubos devem ser cortados no sentido do comprimento, em secções de cerca de 10 cm. Para a extracção utilizam-se 10 ml de água por 50 cm2.b) Os pedaços de película ou de tubo de matéria plástica devem ser introduzidos num recipiente de vidro de borosilicato com 250 ml de água destilada, apirógena, proveniente de um alambique eficaz com superfícies de condensação e tubos de captação em vidro (1) A abertura do recipiente é recoberta com um copo de boca larga em posição invertida e o recipiente é, então, aquecido a vapor saturado a 110 C, durante 30 minutos (em autoclave) e rapidamente arrefecido à temperatura ambiente, sendo o volume elevado a 250 ml por adição de água destilada, apirógena. Uma possível aderência ligeira entre as amostras de matéria plástica não deve ser considerada importante.(1) Se as matérias plásticas tiverem estado em contacto com uma solução anticoagulante, os pedaços devem, primeiro, ser introduzidos num recipiente semelhante contendo água destilada fria (100 ml), o qual deve ser agitado várias vezes. Esta operação deve ser repetida mais uma vez.Em vez de serem aquecidas em autoclave, as matérias plásticas sensíveis ao calor podem ser aquecidas a 70 , durante 72 horas.É preparada uma solução-testemunho correspondente sem as matérias plásticas.B. Ensaios sobre o extracto1. Matérias oxidáveisA 20 ml de extracto, contidos num frasco Erlenmeyer de vidro de borosilicato, adicionar 20 ml de solução de 2 milimoles de permanganato de potássio por litro e 1,0 ml de ácido sulfúrico de 1 mole por litro e deixar ferver a mistura durante 3 minutos. Arrefecer a solução rapidamente e adicionar 100 mg de iodeto de potássio e 5 gotas de solução de amido. Titular com uma solução contendo 10 milimoles de tiossulfato de sódio por litro efectuando uma titulação paralela com a solução-testemunho. A diferença entre a quantidade de tiossulfato utilizada nas duas titulações não ultrapassa 2,00 ml de uma solução de 10 milimoles de tiossulfato de sódio por litro.2. CloretoO extracto é submetido a um ensaio-limite próprio para os cloretos correspondendo a um máximo de 11,2 ¶moles de cloreto por litro.3. AmoníacoO extracto é submetido a um ensaio-limite próprio para o amoníaco correspondendo a um máximo de 120 ¶mole de NH3 por litro.4. Ácido fosfórico-fosfatoO extracto é submetido ao ensaio-limite dos fosfatos.Ensaio-limite dos fosfatosFazer evaporar 25 ml do extracto quase a seco num balão Kjeldahl, arrefecer o resíduo, adicionar 2 gotas de ácido sulfúrico e 1 ml de ácido nítrico, aquecer a mistura até à libertação de vapores brancos e arrefer. Adicionar uma gota de