Umu Chromotest
மருந்தியல் மற்றும் மரபியலுக்கு, உமு குரோமோட்டஸ்ட், முதன்முதலில் ஓடா மற்றும் பலர் உருவாக்கி வெளியிட்டது, இரசாயன சேர்மங்களின் மரபணு நச்சு திறனை மதிப்பிடுவதற்கான ஒரு உயிரியல் மதிப்பீடு (பயோஅஸ்ஸே) ஆகும். இது உமு ஓபரானின் வெளிப்பாட்டைத் தூண்டும் டிஎன்ஏ-சேதப்படுத்தும் முகவர்களின் திறனை அடிப்படையாகக் கொண்டது. சேதம் தூண்டக்கூடிய (டின்) மரபணுக்கள் ரீகா, லெக்ஸ்ஏ மற்றும் யுமுடி தொடர்பாக, யுமுசி மரபணு அடிப்படையில் எஸ்ஓஎஸ் பதிலின் மூலம் பாக்டீரியா பிறழ்வில் ஈடுபட்டுள்ளது. இந்த சோதனை ஒரு ஓபரான் இணைவைப் பயன்படுத்துகிறது, இது லாக் ஓபரானை (லாக்டோஸை சிதைக்கும் புரதமான β-கேலக்டோசிடேஸை உற்பத்தி செய்வதற்கு பொறுப்பானது) உமு தொடர்பான புரதங்களின் கட்டுப்பாட்டின் கீழ் வைக்கிறது. ஒரு எளிய வண்ண அளவீட்டு சோதனை லாக்டோஸ் அனலாக்கைச் சேர்ப்பதன் மூலம் சாத்தியமாகும், இது β-கேலக்டோசிடேஸால் சீரழிக்கப்படுகிறது, இது ஒரு வண்ண கலவையை உருவாக்குகிறது, இது ஸ்பெக்ட்ரோஃபோட்டோமெட்ரி மூலம் அளவிடப்படலாம். வண்ண வளர்ச்சியின் அளவு என்பது உற்பத்தி செய்யப்படும் β-கேலக்டோசிடேஸின் மறைமுக அளவீடு ஆகும், இது டிஎன்ஏ சேதத்தின் அளவுடன் நேரடியாக தொடர்புடையது. ஐ. எஸ். ஓ 13829 இன் கீழ் அதன் செயல்முறையை குறியிடுவதன் மூலம் உமு குரோமோடெஸ்ட் கூடுதல் நன்மையைக் கொண்டுள்ளது "நீரின் தரம்-உமு-சோதனையைப் பயன்படுத்தி நீர் மற்றும் கழிவுநீரின் மரபணு நச்சுத்தன்மையை தீர்மானித்தல்". மரபணு நச்சுத்தன்மையை மனிதர்களில் புற்றுநோயின் வளர்ச்சியுடன் நேரடியாக இணைக்க முடியாது என்றாலும், பாக்டீரியாவில் உள்ள மரபணு நச்சு விளைவுகளுக்கும் பாலூட்டிகளில் அவற்றின் பிறழ்வு மற்றும் கட்டியைத் தொடங்கும் பண்புகளுக்கும் இடையே ஒரு வலுவான தொடர்பு இருப்பதாகக் காட்டப்பட்டுள்ளது. கோட்பாடு சால்மோனெல்லா டைஃபிமூரியம் டிஏ 1535 [பி. எஸ். கே 1002] பாக்டீரியாக்கள் 96-வெல் மைக்ரோபிளேட்டில் உள்ள மரபணு நச்சு சோதனை சேர்மங்களுக்கு வெளிப்படுகின்றன. பாக்டீரியா மரபணுவில் மரபணு நச்சு புண்கள் உற்பத்தி செய்யப்பட்டால், பொதுவான எஸ்ஓஎஸ் பதிலின் ஒரு பகுதியாக யூமுசி மரபணு தூண்டப்படுகிறது. பிளாஸ்மிட் pSK1002 இல் லாக்இசட் ரிப்போர்ட்டர் மரபணுவுடன் இணைக்கப்பட்ட உமுசி மரபணு உள்ளது, இது SOS குரோமோட்டஸ்டில் உள்ள இணைப்பைப் போன்றது. எனவே யூமுசி-ஜீனின் தூண்டல் மாதிரியின் மரபணு நச்சு ஆற்றலுக்கான ஒரு அளவீடு ஆகும். யூமுசி-ஜீன் β-கேலக்டோசிடேஸிற்கான லாக்இசட்-ஜீனுடன் இணைக்கப்பட்டிருப்பதால், β-கேலக்டோசிடேஸ் செயல்பாட்டை தீர்மானிப்பதன் மூலம் யூமுசி-ஜீனின் தூண்டலை எளிதில் மதிப்பிட முடியும், இது நிறமற்ற ஓஎன்பிஜி அடி மூலக்கூறை (ஓ-நைட்ரோபீனைல்-பீடா-டி-கேலக்டோபைரானோசைடு) லாக்இசட்-குறியிடப்பட்ட பி-கேலக்டோசிடேஸ் மூலம் மஞ்சள் தயாரிப்பு ஓ-நைட்ரோபீனைலாக மாற்றுவதன் மூலம் அளவிடப்படுகிறது. எஸ்ஓஎஸ் பதில் என்பது மரபணு நச்சு புண்களுக்கு ஒரு பொதுவான பிரதிபலிப்பாக இருப்பதால், பொருத்தமான நிருபர் மரபணு கட்டமைப்புடன் எஸ். டைஃபிமூரியத்தின் ஒரு திரிபு அனைத்து வகை பாக்டீரியா மரபணு நச்சுகளையும் அடையாளம் காண போதுமானது. பிற பாக்டீரியா மரபணு நச்சுத்தன்மை மற்றும் பிறழ்வுத்தன்மை மதிப்பீடுகளைப் போலவே, செயல்பாட்டிற்கு வளர்சிதை மாற்ற செயல்பாடு தேவைப்படும் சேர்மங்களையும் எஸ் 9 மைக்ரோசோமல் எலி கல்லீரல் சாற்றைச் சேர்ப்பதன் மூலம் ஆராய முடியும். செயல்முறை எஸ். வளர்ச்சியின் அதிவேக கட்டத்தில் உள்ள டைஃபிமூரியம் பாக்டீரியா நேர்மறை மற்றும் எதிர்மறை கட்டுப்பாடுகள் மற்றும் வெற்றிடங்கள் உட்பட மூன்று வடிவங்களில் சோதனை மாதிரியின் செறிவுகள் குறைந்து வருவதற்கு 2 மணி நேரம் வெளிப்படும். 2 மணி நேரத்திற்குப் பிறகு, வெளிப்பாடு கலாச்சாரங்கள் புதிய வளர்ச்சி ஊடகங்களில் நீர்த்துப்போகச் செய்யப்பட்டு மேலும் 2 மணி நேரம் வளர அனுமதிக்கப்படுகிறது. யூமுசி மரபணு மற்றும் இணைக்கப்பட்ட லாக்இசட் ரிப்போர்ட்டர் மரபணுவின் தூண்டல் மற்றும் β-கேலக்டோசிடேஸின் அடுத்தடுத்த வெளிப்பாடு பாக்டீரியாவின் லைசிஸுக்குப் பிறகு மதிப்பிடப்படுகிறது. நிறமற்ற ஓஎன்பிஜி தூண்டப்பட்ட β-கேலக்டோசிடேஸ் முன்னிலையில் மஞ்சள் தயாரிப்பு ஓ-நைட்ரோபீனைலாக மாற்றப்படுகிறது. நிறத்தின் தீவிரம் தூண்டப்பட்ட புரதத்தின் அளவுடன் தொடர்புடையது, இதனால் சோதனை மாதிரியின் மரபணு நச்சு ஆற்றல். அளவு அளவீடுகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, தட்டு உறிஞ்சுதல் வளர்ச்சி கட்டத்திற்கு முன்னும் பின்னும் OD 600 இல் படிக்கப்படுகிறது, அதே போல் ONPG அடைகாப்பிற்குப் பிறகு OD420. இது தூண்டல் விகிதத்தை (ஐஆர்) கணக்கிட அனுமதிக்கிறது, அதே போல் சைட்டோடாக்ஸிசிட்டியும் உள்ளதா என்பதை தீர்மானிக்க வளர்ச்சி காரணி மற்றும் ஐஆர் மதிப்புகளை செல்லாததாக்குகிறது. நன்மைகள் உமு குரோமோட்டஸ்ட் மற்றும் பாரம்பரிய அமேஸ் சோதனைக்கு இடையிலான உயர் தொடர்பு, ஒவ்வொரு ஆண்டும் ஒருங்கிணைக்கப்பட்ட ஆயிரக்கணக்கான புதிய மருந்து, விவசாய மற்றும் தொழில்துறை இரசாயனங்களின் ஆரம்ப கட்ட சோதனைக்கு ஒரு நியாயமான மாற்றாக இதை ஆதரிக்கிறது. பெரும்பாலான பெரிய இரசாயன உற்பத்தியாளர்கள் பாரம்பரிய அமெஸ் சோதனை மூலம் ஆண்டுக்கு 100 அல்லது அதற்கு மேற்பட்ட செயற்கை இரசாயனங்களை திரையிடும் திறனைக் கொண்டுள்ளனர், இதற்கு பல சால்மோனெல்லா விகாரங்களைப் பயன்படுத்த வேண்டும். உமு சோதனை, ஒரே ஒரு சால்மோனெல்லா திரிபைப் பயன்படுத்தி, அதே வளங்களுடன் அதிக அளவிலான புதிய இரசாயனங்களை சோதிக்க முடியும். பொருள் செலவு மற்றும் உழைப்பு குறைப்பு, அதே போல் அதன் வலிமை ஆகியவை சிக்கலான சுற்றுச்சூழல் மாதிரிகளுக்கு பொருத்தமான திரையாக நிலைநிறுத்துகின்றன. குறிப்புகள் சோதனைகள்