Granzyme B
கிரான்சைம் பி (ஜி. ஆர். பி) என்பது இயற்கையான கொலையாளி செல்கள் (என். கே. செல்கள்) மற்றும் சைட்டோடாக்ஸிக் டி செல்களின் துகள்களில் பொதுவாகக் காணப்படும் செரின் புரோட்டீஸ் கிரான்சைம்களில் ஒன்றாகும். இலக்கு உயிரணுக்களில் அப்போப்டொசிஸை மத்தியஸ்தம் செய்ய துளைகளை உருவாக்கும் புரதமான பெர்ஃபோர்னுடன் இந்த உயிரணுக்களால் இது சுரக்கப்படுகிறது. பாசோஃபில்கள் மற்றும் மாஸ்ட் செல்கள் முதல் மென்மையான தசை செல்கள் வரை பரந்த அளவிலான சைட்டோடாக்ஸிக் அல்லாத செல்களால் கிரான்சைம் பி உற்பத்தி செய்யப்படுவதாகவும் கண்டறியப்பட்டுள்ளது. கிரான்சைம் B இன் இரண்டாம் நிலை செயல்பாடுகளும் எண்ணற்றவை. கிரான்சைம் பி சைட்டோகைன் வெளியீட்டைத் தூண்டுவதன் மூலம் வீக்கத்தைத் தூண்டுவதில் ஈடுபட்டிருப்பதைக் காட்டுகிறது, மேலும் இது செல்களுக்கு வெளியே உள்ள மேட்ரிக்ஸ் மறுவடிவமைப்பிலும் ஈடுபட்டுள்ளது. கிரான்சைம் B இன் உயர்ந்த அளவுகள் பல தன்னுடல் தாக்க நோய்கள், பல தோல் நோய்கள் மற்றும் வகை 1 நீரிழிவு நோய்களில் சிக்கியுள்ளன. மனிதர்களில், கிரான்சைம் B குரோமோசோம் 14q.11.2 இல் GZMB ஆல் குறியிடப்படுகிறது, இது 3.2kb நீளமானது மற்றும் 5 எக்ஸான்களைக் கொண்டுள்ளது. இது மிகவும் ஏராளமான கிரான்சைம்களில் ஒன்றாகும், இதில் மனிதர்களில் 5 மற்றும் எலிகளில் 10 உள்ளன. கிரான்சைம் பி ஒரு கிரான்சைம் எச் தொடர்பான முன்னோடியிலிருந்து உருவானதாக கருதப்படுகிறது, மேலும் இது மற்ற கிரான்சைம்களை விட குறைந்த செறிவுகளில் மிகவும் பயனுள்ளதாக இருக்கும். நொதி ஆரம்பத்தில் ஒரு செயலற்ற முன்னோடி ஜைமோஜென் வடிவத்தில் உள்ளது, கூடுதல் அமினோ முனைய பெப்டைட் வரிசையுடன். இந்த வரிசையை கதீப்சின் சி மூலம் பிளவுபடுத்தி, 2 அமினோ அமிலங்களை அகற்றலாம். கேத்தப்சின் எச் கிரான்சைம் பி ஐ செயல்படுத்துவதாகவும் தெரிவிக்கப்பட்டுள்ளது. கிரான்சைம் பி இன் அமைப்பு 3 டிரான்ஸ் டொமைன் பிரிவுகளுடன் இரண்டு 6 சிக்கலான β தாள்களைக் கொண்டுள்ளது. சைட்டோடாக்ஸிக் லிம்போசைட்டுகளின் துகள்களில் நொதி இரண்டு கிளைகோசைலேட்டட் வடிவங்களில் இருக்கலாம். உயர் மேனோஸ் வடிவம் 32kDa மற்றும் சிக்கலான வடிவம், 35kDa எடையைக் கொண்டுள்ளது. கிரான்சைம் பி அதன் செயலில் உள்ள இடத்தில் வினையூக்கி முக்கோண ஹிஸ்டிடின்-அஸ்பார்டிக் அமிலம்-செரின் கொண்டுள்ளது மற்றும் பி 1 நிலையில் அமைந்துள்ள அஸ்பார்டிக் அமில எச்சத்திற்குப் பிறகு முன்னுரிமை ரீதியாக பிளவுபடுகிறது. பிளவுபடுத்தப்பட வேண்டிய அஸ்பார்டிக் அமில எச்சம் நொதியின் பிணைப்பு பாக்கெட்டில் உள்ள அர்ஜினைன் எச்சத்துடன் தொடர்புடையது. கிரான்சைம் பி ஒரு நடுநிலை pH இல் செயலில் உள்ளது, எனவே அமில சி. டி. எல் துகள்களில் செயலற்ற நிலையில் உள்ளது. சைட்டோடாக்ஸிக் டி செல்களுக்குள் அப்போப்டொசிஸ் தூண்டப்படுவதைத் தவிர்ப்பதற்காக துகள்களில் உள்ள செர்லைசினால் பிணைக்கப்படும்போது நொதி செயலற்றதாகிவிடும். டெலிவரி கிரான்சைம் பி பெர்ஃபோர்னுடன் வெளியிடப்படுகிறது, இது ஒரு இலக்கு உயிரணுவின் பிளாஸ்மா சவ்வில் ஒரு துளையை உருவாக்குகிறது. பெர்ஃபோர்னின் ஆரம் 5,5 என்எம் மற்றும் கிரான்சைம் பி ஸ்டோக்ஸ் ஆரம் 2.5 என்எம் ஆகும், எனவே பெர்ஃபோர்ன் துளை வழியாக அழிக்கப்பட வேண்டிய இலக்கை கடக்க முடியும். மாற்றாக, வெளியிடப்பட்டவுடன், கிரான்சைம் பி ஒரு இலக்கு செல்லில் உள்ள ஏற்பிகளைக் கொண்ட எதிர்மறையாக சார்ஜ் செய்யப்பட்ட ஹெபரான் சல்பேட்டுடன் பிணைக்கப்பட்டு எண்டோசைட்டோஸ் ஆக மாறும். நொதியை உள்ளே கொண்டு செல்லும் வெசிகிள்கள் பின்னர் வெடித்து, கிரான்சைம் பி-ஐ சைட்டோபிளாஸம் மற்றும் அதன் அடி மூலக்கூறுகளுக்கு வெளிப்படுத்துகின்றன. எச்எஸ்பி-70 கிரான்சைம் பி நுழைவுக்கு உதவுவதோடு இணைக்கப்பட்டுள்ளது. கிரான்சைம் பி ஒரு இலக்கின் பிளாஸ்மா சவ்வில் எதிர்மறை பாஸ்போலிப்பிடுகளுக்கு அதன் பிணைக்கப்பட்ட செர்லைசினை முதலில் பரிமாறிக்கொள்வதன் மூலம் ஒரு இலக்குக்குள் நுழைய முன்மொழியப்பட்டுள்ளது. உறிஞ்சும் பைனோசைட்டோசிஸின் குறைவான தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட செயல்முறையால் நுழைவு ஏற்படுகிறது. இலக்கு செல்லுக்குள் நுழைந்தவுடன், கிரான்சைம் பி 8 மற்றும் 10 துவக்க கேஸ்பேஸ்களை பிளவுபடுத்தி செயல்படுத்தலாம், மேலும் மரணதண்டனை நிறைவேற்றுபவர் 3 மற்றும் 7 கேஸ்பேஸ்களை அப்போப்டொசிஸைத் தூண்டும். காஸ்பேஸ் 7 கிரான்சைம் B க்கு மிகவும் உணர்திறன் கொண்டது மற்றும் காஸ்பேஸ்கள் 3,8 மற்றும் 10 ஆகியவை இடைநிலை துண்டுகளாக மட்டுமே பிரிக்கப்படுகின்றன, மேலும் முழு செயல்பாட்டிற்கு மேலும் பிளவு தேவைப்படுகிறது. கிரான்சைம் பி மைட்டோகாண்ட்ரியாவிலிருந்து பிஏஎக்ஸ்/பிஏகே ஒலிகோமெரைசேஷன் மற்றும் சைட்டோக்ரோம் சி வெளியீட்டிற்கு வழிவகுக்கும் பிஐடி பிளவுபடுத்தலாம். கிரான்சைம் பி ஐசிஏடி பிளவுபடுத்தலாம், இது டிஎன்ஏ துண்டு துண்டுகள் மற்றும் அப்போப்டொசிஸுடன் தொடர்புடைய ஏணி வடிவத்திற்கு வழிவகுக்கும். கிரான்சைம் பி 300 க்கும் மேற்பட்ட அடி மூலக்கூறுகளின் திறனைக் கொண்டுள்ளது மற்றும் வெளிப்புற மைட்டோகாண்ட்ரியல் சவ்வில் எம். சி. எல்-1 ஐ பிளவுபடுத்த முடியும். பிம் பிஏஎக்ஸ்/பிஏகே ஒலிகோமெரைசேஷன், மைட்டோகாண்ட்ரியல் சவ்வு ஊடுருவல் மற்றும் அப்போப்டொசிஸ் ஆகியவற்றைத் தூண்டுகிறது. மைட்டோகாண்ட்ரியா துருவமுனைப்பை எளிதாக்க கிரான்சைம் பி எச்ஏஎக்ஸ் 1 (எச்எஸ்-1 தொடர்புடைய புரதம் எக்ஸ்-1) ஐ பிளவுபடுத்தலாம். கிரான்சைம் பி உயிரணு இறப்புக்கு மத்தியஸ்தம் செய்ய மைட்டோகாண்ட்ரியல் எதிர்வினை ஆக்ஸிஜன் இனங்களின் (ஆர்ஓஎஸ்) சைட்டோடாக்ஸிக் அளவை உருவாக்க முடியும். செல் மரணத்தின் காஸ்பேஸ் சுயாதீன பாதைகள் காஸ்பேஸ்களைத் தடுக்கும் மற்றும் அப்போப்டொசிஸைத் தடுக்கக்கூடிய வைரஸ்களைக் கடக்க தோன்றியதாக கருதப்படுகிறது. நியூக்ளியஸ் கிரான்சைம் பி அணுக்கருவில் அமைந்துள்ள பல அடி மூலக்கூறுகளைக் கொண்டுள்ளது. டிஎன்ஏ பழுதுபார்ப்பு மற்றும் ரெட்ரோவைரல் டிஎன்ஏ ஒருங்கிணைப்பை சீர்குலைக்க கிரான்சைம் பி PARP (பாலி ADP ரைபோஸ் பாலிமரேஸ்) மற்றும் டிஎன்ஏ பிகே (டிஎன்ஏ புரத கைனேஸ்) ஆகியவற்றை பிளவுபடுத்த முடியும். கிரான்சைம் பி வைரஸ் பிரதிபலிப்பைத் தடுக்க நியூக்ளியோஃபோஸ்மின், டோபோஐசோமரேஸ் 1 மற்றும் நியூக்ளியோலின் ஆகியவற்றைப் பிளவுபடுத்தலாம். கிரான்சைம் பி ஐ. சி. பி 4 ஐ எச். எஸ். வி 1 வைரஸிலிருந்து பிளவுபடுத்த முடியும், இது மரபணு மாற்றத்திற்கு பயன்படுத்தப்படும் ஒரு அத்தியாவசிய புரதமாகும் மற்றும் நுமா (நியூக்ளியர் மைட்டோடிக் கருவி புரதம்) மைட்டோசிஸைத் தடுக்க பிளவுபடுத்தப்படலாம். கிரான்சைம் பி டிபிபியை (டிஎன்ஏ பைண்டிங் புரோட்டீன்) 50 கேடிஏ துண்டாக பிளவுபடுத்தி, பின்னர் அது செயல்படுத்தும் காஸ்பேஸ்கள் மூலம் மறைமுகமாக கூடுதலாக 60 கேடிஏ ஆக மாற்றலாம். எக்ஸட்ராசெல்லுலர் மேட்ரிக்ஸ் கிரான்சைம் பி ஃபைப்ரோநெக்டின், விட்ரோநெக்டின் மற்றும் அக்ரெகான் உள்ளிட்ட எக்ஸட்ராசெல்லுலர் மேட்ரிக்ஸில் (ஈ. சி. எம்) உள்ள பல புரதங்களை சிதைக்க முடியும். பிளவு அனோய்கிஸ் மூலம் செல் மரணத்தை ஏற்படுத்தலாம் மற்றும் ஈ. சி. எம் தூண்டுதல் வீக்கத்திலிருந்து அலாரமின்களை வெளியிடலாம். ஃபைப்ரொனெக்டினின் துண்டுகள் நியூட்ரோஃபில்களை ஈர்க்கும் மற்றும் காண்ட்ரோசைட்டுகளிலிருந்து எம். எம். பி வெளிப்பாட்டைத் தூண்டும். எண்டோதெலியல் செல்-செல் தொடர்புகளை சீரழிக்க பாசோஃபில்கள் கிரான்சைம் பி ஐ சுரக்கின்றன, இது வீக்கத்தின் தளங்களுக்கு கூடுதல் பரவலை அனுமதிக்கிறது. கிரான்சைம் பி சைட்டோகைன்கள் ஐஎல்-1α மற்றும் ஐஎல் 18 ஐ செயலாக்குவதன் மூலம் வீக்கத்தைத் தூண்டும். இது PAR1 (புரோட்டீஸ் ஆக்டிவேட்டட் ஏற்பி 1) ஐ செயல்படுத்துவதன் மூலம் ஐஎல்6 மற்றும் ஐஎல்8 இன் வெளியீட்டைத் தூண்டும். உயிரணு வளர்ச்சி சமிக்ஞை பாதைகளுக்கு இடையூறு விளைவிக்கும் ஆர். ஜி. டி ஒருங்கிணைப்பு பிணைப்பு தளத்தில் விட்ரோநெக்டின் பிளவு ஏற்படுகிறது. லேமினின் மற்றும் ஃபைப்ரொனெக்டின் பிளவு தோல்-எபிடெர்மல் சந்தி இணைப்பு மற்றும் குறுக்கு பேச்சை சீர்குலைக்கிறது, அதே நேரத்தில் கிரான்சைம் பி மூலம் டெக்கரின் அழிவு கொலாஜன் ஒழுங்கின்மை, தோல் மெலிதாக்கம் மற்றும் வயதானதை ஏற்படுத்துகிறது. சருமத்தின் ஃபோட்டோகேஜிங்குடன் இணைக்கப்பட்டுள்ள யுவிஏ மற்றும் யுவிபியின் வெளிப்பாட்டிற்குப் பிறகு கெராடினோசைட்டுகள் கிரான்சைம் பி ஐ வெளிப்படுத்தலாம். கிரான்சைம் பி காயம் குணப்படுத்துவதையும் பாதிக்கலாம். வான் வில்லெபிராண்ட் காரணி பிளவுபடுவது பிளேட்லெட் திரட்டலைத் தடுக்கிறது மற்றும் பிளாஸ்மினோஜெனின் ஆஞ்சியோஜெனெசிஸைத் தடுக்கும் ஆஞ்சியோஸ்டாடின் துண்டுகளை உருவாக்குகிறது. ஃபைப்ரோநெக்டின்கள் மற்றும் விட்ரோநெக்டின்களின் வெட்டு ஒரு தற்காலிக மேட்ரிக்ஸ் உருவாக்கத்தை தாமதப்படுத்துகிறது, இது காயம் குணமடைவதை மேலும் பாதிக்கிறது. டி செல் ஒழுங்குமுறை கிரான்சைம் பி என்பது சிடி 4 + டி செல்களைக் கொல்ல ஒழுங்குமுறை டி செல்களால் (ட்ரெக்ஸ்) சுரக்கப்படுகிறது, அவை புற திசுக்களுக்கு மட்டுப்படுத்தப்பட்ட மற்றும் தைமஸை அடைய முடியாத ஹோஸ்ட் செல்களுக்கு ஆளாகவில்லை. இந்த ஆக்டிவேஷன்-தூண்டப்பட்ட செல் மரணம் (ஏ. ஐ. சி. டி) பாஸ் மரண பாதை இல்லாமல் அடைய முடியும் மற்றும் சுய ஆன்டிஜென்களுக்கு தன்னுடல் தாக்க எதிர்வினை தடுக்கிறது. கிரான்சைம் பி இன் மிகவும் பொதுவான தடுப்பான்கள் எஸ். இ. ஆர். பி. ஐ. என். பி 9 ஆகும், இது புரோட்டீனேஸ் இன்ஹிபிட்டர் ஒன்பது (பி. ஐ-9) என்றும் அழைக்கப்படுகிறது, இது 376 அமினோ அமிலங்கள் நீளமானது மற்றும் நியூக்ளியஸ் மற்றும் சைட்டோபிளாஸத்தில் காணப்படுகிறது. தற்செயலான கிரான்சைம் பி மத்தியஸ்த செல் மரணத்திலிருந்து தங்களைப் பாதுகாத்துக் கொள்ள இது பல வகையான உயிரணுக்களால் உற்பத்தி செய்யப்படுகிறது. பிஐ-9 மெட்டாஸ்டபிள் மற்றும் கிரான்சைம் பி உடன் பிணைக்கப்படும்போது ஆற்றல் ரீதியாக சாதகமான இணக்கத்தை உருவாக்குகிறது. பிஐ-9 மூலக்கூறின் எதிர்வினை வளைய மையம் (ஆர்சிஎல்) ஒரு போலி சப்ஸ்ட்ரேட்டாக செயல்படுகிறது மற்றும் ஆரம்பத்தில் ஒரு தலைகீழ் மைக்கேலிஸ் வளாகத்தை உருவாக்குகிறது. ஆர். சி. எல் இன் பெப்டைட் பிணைப்பு பி 1 மற்றும் பி 1 'நிலைகளுக்கு இடையில் பிளவுபட்டவுடன், கிரான்சைம் பி நிரந்தரமாக தடுக்கப்படுகிறது. இருப்பினும், ஆர். சி. எல் திறம்பட பிளவுபட்டால், பிஐ-9 ஒரு 1:1 தற்கொலை அடி மூலக்கூறாக செயல்படாது மற்றும் கிரான்சைம் பி தடையின்றி விடப்படுகிறது. கிரான்சைம் எம் அணுக்கரு மற்றும் சைட்டோபிளாஸத்தில் பிஐ-9 ஐ பிளவுபடுத்தி கிரான்சைம் பி இன் தடுப்பை நீக்க முடியும். அடினோ வைரஸ்களிலிருந்து வரும் புரதம் எல் 4-100 கே எக்ஸோசைட்டுகள் மற்றும் குறிப்பிட்ட பிணைப்பு பாக்கெட்டுகளில் பிணைப்பதன் மூலம் கிரான்சைம் பி ஐத் தடுக்கலாம். எல் 4-100 கே என்பது ஹெக்ஸான் கேப்சோமெர்களை அடினோவைரஸின் கருக்களுக்குள் கொண்டு செல்லக்கூடிய ஒரு அசெம்பிளி புரதமாகும். அடினோவைரஸ் 5 பாதிக்கப்பட்ட உயிரணுக்களில் முக்கியமான இந்த தடுப்பிலிருந்து விடுபட கிரான்சைம் எச் மூலம் 100k ஐ 90kDa துண்டுகளாக பிளவுபடுத்தலாம். கிரான்சைம் பி நோயில் பங்கு இரத்த பிளாஸ்மாவில் 20-40 pg/ml இன் சாதாரண செறிவு உள்ளது, அதே நேரத்தில் 70 சதவீதம் செயல்பாட்டைத் தக்க வைத்துக் கொள்கிறது மற்றும் கிரான்சைம் பி இன் உயர்ந்த செறிவுகள் பல நோய் நிலைகளில் காணப்படுகின்றன. கிரான்சைம் பி புதிய எபிடோப்புகளை வெளிப்படுத்தும் ஆன்டிஜென்களின் ஒழுங்கற்ற பகுதிகள் மற்றும் இணைப்பு பகுதிகளில் பிளவுபடுத்துவதன் மூலம் தன்னியக்க ஆன்டிஜென்களை உருவாக்க முடியும், மேலும் இது தன்னுடல் தாக்க நோய்களின் வளர்ச்சியை ஏற்படுத்தும். சிடி8 + டி செல்களில் இருந்து பெர்ஃபோர்னுடன் கிரான்சைம் பி வெளியீடு அல்லோஜெனிக் எண்டோதெலியல் செல்களைக் கொல்வதன் மூலம் இதயம் மற்றும் சிறுநீரக மாற்று நிராகரிப்பை ஏற்படுத்தும். கணையத் தீவுகளில் இன்சுலின் உற்பத்தி செய்யும் β செல்களின் அழிவு வகை 1 நீரிழிவு நோய்க்கு பங்களிக்கும் டி செல்கள் மற்றும் கிரான்சைம் பி ஆகியவற்றால் மத்தியஸ்தம் செய்யப்படுகிறது. கிரான்சைம் பி முதுகெலும்பு காயத்திற்குப் பிறகு உயிரணுக்களின் மரணத்திற்கு மத்தியஸ்தம் செய்ய முடியும் மற்றும் முடக்கு வாதத்தில் உயர்ந்த மட்டங்களில் காணப்படுகிறது. நாள்பட்ட தடுப்பு நுரையீரல் நோய் (சிஓபிடி) என்கே மற்றும் டி செல்களில் இருந்து சுரக்கப்படும் கிரான்சைம் பி காரணமாக மூச்சுக்குழாய் எபிடெலியல் செல்களின் அப்போப்டொசிஸ் ஏற்படுகிறது. மேட்ரிக்ஸ் சீர்குலைவு மற்றும் கிரான்சைம் பி மூலம் மறுவடிவமைத்தல் ஆகியவை ஆஸ்துமா நோய்க்கிருமிகளுடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளன. கிரான்சைம் பி மெலனோசைட்டுகளைக் கொல்ல முடியும், இதனால் தோல் நிலை ஏற்படும் விட்டிலிகோ மற்றும் கிரான்சைம் பி அதிகப்படியான வெளிப்பாடு தொடர்பு தோல் அழற்சி, லைக்கன் ஸ்க்லெரோசஸ் மற்றும் லைக்கன் பிளேனஸ் வழக்குகளில் காணப்படுகிறது. முடி உதிர்தலில் சாத்தியமான பங்கை இணைக்கும் மயிர்க்கால்களுக்கு அருகில் கிரான்சைம் பி-ஐ வெளிப்படுத்தும் சைட்டோடாக்ஸிக் செல்கள் அடையாளம் காணப்பட்டுள்ளன. கிரான்சைம் பி இன் ஈசிஎம் மறுவடிவமைப்பு பண்புகள் இடது வென்ட்ரிக்குலர் மறுவடிவமைப்பில் அதன் ஈடுபாட்டைக் குறிக்கின்றன, இது மாரடைப்பு ஏற்படுவதற்கான அடுத்தடுத்த வாய்ப்புகளை அதிகரிக்கிறது. மென்மையான தசை உயிரணுக்களின் அப்போப்டொசிஸ் மூலம் பெருந்தமனி பிளேக்குகளின் நார்ச்சத்து தொப்பி பலவீனமடைவதும் கிரான்சைம் பி உடன் இணைக்கப்பட்டுள்ளது.