Single-chain variable fragment
سنگل چین متغیر ٹکڑا (ایس سی ایف وی) دراصل اینٹی باڈی کا ایک ٹکڑا نہیں ہے، بلکہ اس کے بجائے امیونوگلوبلن کے بھاری (وی ایچ) اور ہلکی زنجیروں (وی ایل) کے متغیر علاقوں کا فیوژن پروٹین ہے، جو دس سے تقریبا 25 امینو ایسڈ کے مختصر لنکر پیپٹائڈ سے جڑا ہوا ہے۔ لنکر عام طور پر لچک کے لیے گلائسین سے بھرپور ہوتا ہے، ساتھ ہی گھلنشیلتا کے لیے سیرائن یا تھریونین سے بھرپور ہوتا ہے، اور یا تو وی ایچ کے این-ٹرمینس کو وی ایل کے سی-ٹرمینس سے جوڑ سکتا ہے، یا اس کے برعکس۔ مستقل علاقوں کو ہٹانے اور لنکر کے تعارف کے باوجود یہ پروٹین اصل امیونوگلوبلین کی خاصیت کو برقرار رکھتا ہے۔ دائیں طرف کی تصویر سے پتہ چلتا ہے کہ یہ ترمیم عام طور پر مخصوصیت کو کس طرح بغیر کسی تبدیلی کے چھوڑ دیتی ہے۔ یہ مالیکیول فیج ڈسپلے کو آسان بنانے کے لیے بنائے گئے تھے، جہاں اینٹیجن بائنڈنگ ڈومین کو ایک واحد پیپٹائڈ کے طور پر ظاہر کرنا انتہائی آسان ہے۔ ایک متبادل کے طور پر، ایس سی ایف وی کو ہائبرڈوما سے حاصل کردہ ذیلی کلون شدہ بھاری اور ہلکی زنجیروں سے براہ راست بنایا جا سکتا ہے۔ ایس سی ایف وی کے بہت سے استعمال ہیں، مثال کے طور پر، فلو سائٹومیٹری، امیونو ہسٹو کیمسٹری، اور مصنوعی ٹی سیل ریسیپٹرز (چیمیرک اینٹیجن ریسیپٹر) کے اینٹیجن بائنڈنگ ڈومینز کے طور پر۔ مونوکلونل اینٹی باڈیز کے برعکس، جو اکثر ممالیہ سیل کلچرز میں تیار ہوتے ہیں، ایس سی ایف وی زیادہ تر بیکٹیریا سیل کلچرز جیسے ای کولی میں تیار ہوتے ہیں۔ صفائی سنگل چین متغیر ٹکڑوں میں مستقل ایف سی ریجن کی کمی ہوتی ہے جو مکمل اینٹی باڈی مالیکیولز میں پایا جاتا ہے، اور اس طرح، عام بائنڈنگ سائٹس (جیسے، پروٹین جی) کو اینٹی باڈیز کو صاف کرنے کے لیے استعمال نہیں کیا جا سکتا۔ ان ٹکڑوں کو اکثر پروٹین ایل کا استعمال کرتے ہوئے صاف یا متحرک کیا جا سکتا ہے، کیونکہ پروٹین ایل کاپا لائٹ چینز کے متغیر علاقے کے ساتھ تعامل کرتا ہے۔ زیادہ عام طور پر، سائنس دان ایس سی ایف وی مالیکیول کے سی-ٹرمینس پر چھ ہسٹائڈائن ٹیگ شامل کرتے ہیں اور انہیں امبوبلائزڈ میٹل افینیٹی کرومیٹوگرافی (آئی ایم اے سی) کا استعمال کرتے ہوئے صاف کرتے ہیں۔ کچھ ایس سی ایف وی کو پروٹین اے کے ذریعے بھی پکڑا جا سکتا ہے اگر ان میں انسانی وی ایچ 3 ڈومین ہو۔ دو ایس سی ایف وی کو جوڑ کر بائیولینٹ اور ٹرائولینٹ ایس سی ایف وی ایس ڈائیولینٹ (یا بائیولینٹ) سنگل چین متغیر ٹکڑوں (ڈی-ایس سی ایف وی ایس، بی-ایس سی ایف وی ایس) کو تیار کیا جا سکتا ہے۔ یہ دو وی ایچ اور دو وی ایل خطوں کے ساتھ ایک واحد پیپٹائڈ سلسلہ تیار کرکے کیا جا سکتا ہے، جس سے ٹینڈم ایس سی ایف وی حاصل ہوتے ہیں۔ ایک اور امکان لنکر پیپٹائڈز کے ساتھ ایس سی ایف وی کی تخلیق ہے جو دو متغیر علاقوں (تقریبا پانچ امینو ایسڈ) کے لیے ایک ساتھ جوڑنے کے لیے بہت مختصر ہیں، جس سے ایس سی ایف وی کو ڈائمرائز کرنے پر مجبور کیا جاتا ہے۔ اس قسم کو ڈائی باڈیز کہا جاتا ہے۔ ذیابیطس کو متعلقہ ایس سی ایف وی کے مقابلے میں 40 گنا کم تک علیحدگی کے مستقل طور پر دکھایا گیا ہے، جس کا مطلب ہے کہ ان کا اپنے ہدف سے بہت زیادہ تعلق ہے۔ نتیجتا، ذیابیطس کی دوائیوں کو دیگر علاج معالجے کے اینٹی باڈیز کے مقابلے میں بہت کم خوراک دی جا سکتی ہے اور وہ ویو میں ٹیومر کو انتہائی مخصوص ہدف بنانے کی صلاحیت رکھتی ہیں۔ پھر بھی چھوٹے لنکرز (ایک یا دو امینو ایسڈ) ٹرائمرز، نام نہاد ٹرائی باڈیز یا ٹرائی باڈیز کی تشکیل کا باعث بنتے ہیں۔ ٹیٹرا باڈیز بھی تیار کی گئی ہیں۔ وہ اپنے اہداف کے ساتھ ڈائی باڈیز سے بھی زیادہ لگاؤ کا مظاہرہ کرتے ہیں۔ ان تمام شکلوں کو دو مختلف اینٹی جینز کی خاصیت کے ساتھ متغیر ٹکڑوں سے بنایا جا سکتا ہے، ایسی صورت میں وہ دو مخصوص اینٹی باڈیز کی اقسام ہیں۔ ان میں سے سب سے زیادہ ترقی یافتہ دو مخصوص ٹینڈم ڈائی-ایس سی ایف وی ہیں، جنہیں دو مخصوص ٹی سیل اینگیجرز (بی آئی ٹی ای اینٹی باڈی کنسٹرکٹس) کے نام سے جانا جاتا ہے۔ مثال کے طور پر پیکسیلزوماب، ایک ایس سی ایف وی جو تکمیلی نظام کے جزو 5 سے جڑا ہوا ہے اور کارڈیک سرجری سی 6.5 کے مضر اثرات کو کم کرنے کے لیے ڈیزائن کیا گیا ہے، کچھ چھاتی کے کینسر برولوسیزماب میں پایا جانے والا ایچ ای آر 2/نیو کو نشانہ بنانے والا ایک ڈائی باڈی، وی ای جی ایف-اے سے جڑا ہوا ایس سی ایف وی اور گیلے عمر سے متعلق میکولر انحطاط جی 6 اے کے علاج کے لیے استعمال ہوتا ہے، جو انسان Hsp70.1 کے لیے جڑا ہوا ایس سی ایف وی ہے اور اس پروٹین کو وسیع کینسر میں ممکنہ مارکر کے طور پر نشانہ بنانے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ حوالہ جات۔