Microtome
مائکروٹوم (یونانی مائکروس سے، جس کا مطلب ہے "چھوٹا"، اور ٹیمین، جس کا مطلب ہے "کاٹنا") ایک کاٹنے کا آلہ ہے جو مواد کے انتہائی پتلی سلائسز تیار کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے جسے سیکشنز کہا جاتا ہے، اس عمل کو مائکروسیکشننگ کہا جاتا ہے۔ سائنس میں اہم، مائیکروٹومس کا استعمال خوردبین میں منتقل شدہ روشنی یا الیکٹران تابکاری کے تحت مشاہدے کے لیے نمونوں کی تیاری کے لیے کیا جاتا ہے۔ مائکروٹومز اسٹیل، شیشے یا ہیرے کے بلیڈ کا استعمال کرتے ہیں جو اس بات پر منحصر ہے کہ نمونہ کاٹا جا رہا ہے اور حصوں کی مطلوبہ موٹائی کاٹا جا رہا ہے۔ اسٹیل بلیڈ کا استعمال ہلکے خوردبین کے لیے جانوروں یا پودوں کے بافتوں کے ہسٹولوجیکل حصوں کو تیار کرنے کے لیے کیا جاتا ہے۔ شیشے کے چاقو ہلکے خوردبین کے لیے حصوں کو کاٹنے اور الیکٹران خوردبین کے لیے بہت پتلی حصوں کو کاٹنے کے لیے استعمال ہوتے ہیں۔ صنعتی درجے کے ہیرے کے چاقو ہلکے خوردبین اور الیکٹران خوردبین دونوں کے لیے سخت مواد جیسے ہڈی، دانت اور سخت پودوں کے مادے کو کاٹنے کے لیے استعمال ہوتے ہیں۔ جواہر کے معیار کے ہیرے کے چاقو الیکٹران مائکروسکوپی کے لیے پتلی حصوں کو کاٹنے کے لیے بھی استعمال کیے جاتے ہیں۔ مائکروٹومی ہڈیوں، معدنیات اور دانتوں جیسے مواد کے لیے پتلی حصوں کی تیاری کا ایک طریقہ ہے، اور الیکٹروپولشنگ اور آئن ملنگ کا متبادل ہے۔ مائیکروٹوم کے حصوں کو اتنا پتلا بنایا جا سکتا ہے کہ انسانی بالوں کو اس کی چوڑائی کے پار تقسیم کیا جا سکے، جس کے حصے کی موٹائی 50 این ایم اور 100 مائیکرو میٹر کے درمیان ہو۔ تاریخ ہلکے خوردبین کی نشوونما کے آغاز میں، پودوں اور جانوروں کے حصوں کو استرا بلیڈ کا استعمال کرتے ہوئے دستی طور پر تیار کیا جاتا تھا۔ یہ پایا گیا کہ زیر مشاہدہ نمونے کی ساخت کا مشاہدہ کرنے کے لیے 100 مائیکرو میٹر کی ترتیب پر صاف تولیدی کٹوتی کرنا ضروری تھا، جس کے ذریعے روشنی منتقل کی جا سکتی ہے۔ اس نے ٹرانسمیشن موڈ میں ہلکے خوردبین کا استعمال کرتے ہوئے نمونوں کے مشاہدے کی اجازت دی۔ اس طرح کے کٹوتیوں کی تیاری کے لیے پہلے آلات میں سے ایک 1770 میں جارج ایڈمز، جونیئر (1750-1795) نے ایجاد کیا تھا اور مزید الیگزینڈر کمنگز نے تیار کیا تھا۔ آلہ ہاتھ سے چلایا گیا تھا، اور نمونے کو سلنڈر میں رکھا گیا تھا اور نمونے کے اوپری حصے سے ہینڈ کرینک کا استعمال کرتے ہوئے بنایا گیا تھا۔ 1835 میں، اینڈریو پریچرڈ نے ایک میز پر مبنی ماڈل تیار کیا جس نے آلہ کو میز پر لگا کر کمپن کو الگ کرنے کی اجازت دی، آپریٹر کو چاقو سے الگ کیا۔ کبھی کبھار، مائکروٹوم کی ایجاد کا انتساب اناٹومسٹ ولہیم ہس، سینئر (1865) کو دیا جاتا ہے۔ ولہیلم نے اپنی (مائیکروٹوم کی تفصیل کے لیے جرمن) میں لکھا: دیگر ذرائع مزید اس ترقی کو چیک فزیالوجسٹ جان ایوینجلیسٹا پرکینی سے منسوب کرتے ہیں۔ کئی ذرائع پرکین ماڈل کو عملی استعمال میں پہلا قرار دیتے ہیں۔ مائکروٹوم کی ابتداء میں غیر واضحیاں اس حقیقت کی وجہ سے ہیں کہ پہلے مائکروٹوم محض آلات کو کاٹ رہے تھے، اور ابتدائی آلات کا ترقیاتی مرحلہ وسیع پیمانے پر غیر دستاویزی ہے۔ 1800 کی دہائی کے آخر میں، مائکروٹومی کے ذریعے بہت پتلے اور مستقل طور پر پتلے نمونوں کی نشوونما، خلیوں کے اہم اجزاء یا مالیکیولز کے منتخب داغ کے ساتھ مل کر خوردبین کی تفصیلات کے تصور کی اجازت دی گئی۔ آج، مائکروٹومز کی اکثریت ایک چاقو بلاک ڈیزائن ہے جس میں ایک بدلنے والا چاقو، ایک نمونہ ہولڈر اور ایک ترقی کا طریقہ کار ہے۔ زیادہ تر آلات میں نمونے کاٹنے کا آغاز نمونے کو چاقو کے اوپر منتقل کرنے سے ہوتا ہے، جہاں ترقی کا طریقہ کار خود بخود اس طرح آگے بڑھتا ہے کہ منتخب موٹائی کے لیے اگلا کٹ بنایا جا سکے۔ حصے کی موٹائی کو ایڈجسٹمنٹ میکانزم کے ذریعے کنٹرول کیا جاتا ہے، جس سے عین مطابق کنٹرول کی اجازت ملتی ہے۔ ایپلی کیشنز مائکروٹومز کی سب سے عام ایپلی کیشنز یہ ہیں: روایتی ہسٹولوجی تکنیک: بافتوں کو فکس کیا جاتا ہے، پانی کی کمی ہوتی ہے، صاف کیا جاتا ہے، اور پگھلے ہوئے پیرافن میں سرایت کیا جاتا ہے، جو ٹھنڈا ہونے پر ایک ٹھوس بلاک بن جاتا ہے۔ اس کے بعد ٹشو کو مائکروٹوم میں 2 سے 50 مائیکرو میٹر تک مختلف موٹائیوں پر کاٹا جاتا ہے۔ وہاں سے ٹشو کو خوردبین سلائیڈ پر نصب کیا جا سکتا ہے، پیرافن کو ہٹانے کے بعد مناسب آبی رنگوں سے داغ لگایا جا سکتا ہے، اور ہلکے خوردبین کا استعمال کرتے ہوئے جانچ کی جا سکتی ہے۔ منجمد حصے کا طریقہ کار: پانی سے بھرپور بافتوں کو منجمد کرکے سخت کیا جاتا ہے اور منجمد حالت میں منجمد مائیکروٹوم یا مائیکروٹوم-کریوسٹیٹ کے ساتھ کاٹا جاتا ہے۔ حصوں کو داغدار کیا جاتا ہے اور ہلکے خوردبین سے جانچ کی جاتی ہے۔ یہ تکنیک روایتی ہسٹولوجی (5 منٹ بمقابلہ 16 گھنٹے) سے بہت تیز ہے اور فوری تشخیص حاصل کرنے کے لیے طبی طریقہ کار کے ساتھ مل کر استعمال کی جاتی ہے۔ کروسیکشنز کو امیونو ہسٹو کیمسٹری میں بھی استعمال کیا جا سکتا ہے کیونکہ منجمد ٹشو فکسٹیو کے استعمال سے زیادہ تیزی سے ٹشو کے انحطاط کو روکتا ہے اور اس کی کیمیائی ساخت کو زیادہ تبدیل یا نقاب نہیں کرتا ہے۔ الیکٹران مائکروسکوپی تکنیک: ایپوکسی رال میں بافتوں کو سرایت کرنے کے بعد، شیشے یا منی کے درجے کے ہیرے کے چاقو سے لیس ایک مائکروٹوم کا استعمال بہت پتلی حصوں (عام طور پر 60 سے 100 نینو میٹر) کو کاٹنے کے لیے کیا جاتا ہے۔ حصوں کو مناسب بھاری دھات کے نمک کے آبی محلول سے داغدار کیا جاتا ہے اور ٹرانسمیشن الیکٹران خوردبین سے جانچ کی جاتی ہے۔ اس آلے کو اکثر الٹرامائکروٹوم کہا جاتا ہے۔ الٹرامائکروٹوم کو اس کے شیشے کے چاقو یا صنعتی درجے کے ہیرے کے چاقو کے ساتھ بھی استعمال کیا جاتا ہے تاکہ پتلی سیکشننگ سے پہلے سروے کے حصوں کو کاٹا جا سکے۔ یہ سروے کے حصے عام طور پر 0.0 سے 1 مائیکرو میٹر موٹے ہوتے ہیں اور شیشے کی سلائیڈ پر نصب ہوتے ہیں اور ٹی ای ایم کے لیے پتلی سیکشننگ سے پہلے ہلکے خوردبین کے نیچے دلچسپی کے علاقوں کا پتہ لگانے کے لیے داغدار ہوتے ہیں۔ ٹی ای ایم کے لیے پتلی سیکشننگ اکثر جواہر کے معیار کے ہیرے کے چاقو سے کی جاتی ہے۔ روایتی ٹی ای ایم تکنیکوں کی تکمیل کرنے والے الٹرا مائکروٹومز تیزی سے ایس ای ایم چیمبر کے اندر نصب پائے جاتے ہیں تاکہ بلاک فیس کی سطح کو امیج کیا جا سکے اور پھر امیجنگ کے لیے اگلی سطح کو بے نقاب کرنے کے لیے مائیکرو ٹوم کے ساتھ ہٹا دیا جا سکے۔ اس تکنیک کو سیریل بلاک فیس اسکیننگ الیکٹران مائکروسکوپی (ایس بی ایف ایس ای ایم) کہا جاتا ہے۔ بوٹینیکل مائکروٹومی تکنیک: لکڑی، ہڈی اور چمڑے جیسے سخت مواد کے لیے سلیج مائکروٹوم کی ضرورت ہوتی ہے۔ ان مائیکرو ٹوموں میں بھاری بلیڈ ہوتے ہیں اور وہ عام مائیکرو ٹوم کی طرح پتلے نہیں ہو سکتے۔ سپیکٹروسکوپی (خاص طور پر ایف ٹی آئی آر یا انفراریڈ سپیکٹروسکوپی) تکنیک: پتلی پولیمر حصوں کی ضرورت ہوتی ہے تاکہ انفراریڈ ریڈ بیم جانچ کے تحت نمونے میں گھس سکے۔ نمونوں کو موٹائی میں 20 اور 100 مائیکرو میٹر کے درمیان کاٹنا معمول ہے۔ پتلے حصے میں بہت چھوٹے علاقوں کے مزید تفصیلی تجزیے کے لیے، نمونے کے معائنے کے لیے ایف ٹی آئی آر خوردبین کا استعمال کیا جا سکتا ہے۔ ایک حالیہ پیش رفت لیزر مائکروٹوم ہے، جو ہدف کے نمونے کو مکینیکل چاقو کے بجائے فیمٹوسیکنڈ لیزر سے کاٹتا ہے۔ یہ طریقہ رابطہ سے پاک ہے اور اس میں نمونہ تیار کرنے کی تکنیکوں کی ضرورت نہیں ہے۔ لیزر مائکروٹوم میں اپنی آبائی حالت میں تقریبا ہر ٹشو کو کاٹنے کی صلاحیت ہوتی ہے۔ پروسیس کیے جانے والے مواد پر منحصر ہے، 10 سے 100 مائیکرو میٹر کے ٹکڑوں کی موٹائی ممکن ہے۔ سیکشننگ وقفوں کو بنیادی طور پر یا تو درجہ بندی کیا جا سکتا ہے: سیریل سیکشننگ: پیرافن بلاک سے حصوں کا مسلسل ربن حاصل کرنا اور سلائڈز کے لیے سب کا استعمال کرنا۔ مرحلہ کے حصے: بلاک میں مخصوص گہرائیوں پر جمع کیے جاتے ہیں۔ سلیج مائکروٹوم ایک ایسا آلہ ہے جہاں نمونے کو ایک فکسڈ ہولڈر (شٹل) میں رکھا جاتا ہے، جو پھر چاقو کے پار پیچھے اور آگے کی طرف بڑھتا ہے۔ جدید سلیج مائکروٹومز میں سلیج کو لکیری بیرنگ پر رکھا جاتا ہے، ایک ایسا ڈیزائن جو مائکروٹوم کو بہت سے موٹے حصوں کو آسانی سے کاٹنے کی اجازت دیتا ہے۔ نمونے اور مائیکرو ٹوم چاقو کے درمیان کے زاویوں کو ایڈجسٹ کرکے، کٹ کے دوران نمونے پر لگنے والے دباؤ کو کم کیا جا سکتا ہے۔ مائیکروٹوم کے اس ڈیزائن کے لیے عام ایپلی کیشنز بڑے نمونوں کی تیاری کے ہیں، جیسے کہ حیاتیاتی تیاریوں کے لیے پیرافن میں سرایت شدہ۔ سلیج مائکروٹوم پر حاصل ہونے والی عام کٹ موٹائی 1 اور 60 مائیکرو میٹر کے درمیان ہوتی ہے۔ روٹری یہ آلہ ایک عام مائیکرو ٹوم ڈیزائن ہے۔ یہ آلہ اسٹیجڈ روٹری ایکشن کے ساتھ اس طرح کام کرتا ہے کہ اصل کاٹنے والی حرکت روٹری حرکت کا حصہ ہے۔ روٹری مائکروٹوم میں، چاقو کو عام طور پر عمودی پوزیشن میں لگایا جاتا ہے۔ بائیں طرف کی شکل میں کٹ کے اصول کی وضاحت کی گئی ہے۔ نمونے رکھنے والے کی حرکت کے ذریعے، نمونے کو چاقو کی پوزیشن 1 سے پوزیشن 2 تک کاٹا جاتا ہے، جس مقام پر تازہ حصہ چاقو پر رہتا ہے۔ روٹری حرکت کے سب سے اونچے مقام پر، نمونہ ہولڈر کو اسی موٹائی سے آگے بڑھایا جاتا ہے جو اس حصے کو بنایا جانا ہے، جس سے اگلا حصہ بنایا جا سکتا ہے۔ بہت سے مائکروٹومس میں فلائی وہیل کو ہاتھ سے چلایا جا سکتا ہے۔ اس کا فائدہ یہ ہے کہ ایک صاف کٹ بنایا جا سکتا ہے، کیونکہ فلائی وہیل کی نسبتا بڑی مقدار نمونے کو کاٹنے کے دوران نمونے کو روکنے سے روکتی ہے۔ نئے ماڈلز میں فلائی وہیل اکثر مائیکرو ٹوم کیسنگ کے اندر مربوط ہوتا ہے۔ روٹری مائکروٹوم کے لیے عام کٹ موٹائی 1 اور 60 مائیکرو میٹر کے درمیان ہوتی ہے۔ سخت مواد کے لیے، جیسے کہ مصنوعی رال میں سرایت شدہ نمونہ، مائیکروٹوم کا یہ ڈیزائن اچھے "نیم پتلے" حصوں کی اجازت دے سکتا ہے جن کی موٹائی 0.0 مائیکرو میٹر تک کم ہو۔ کریو مائکروٹوم منجمد نمونوں کو کاٹنے کے لیے، بہت سے روٹری مائکروٹومز کو مائع نائٹروجن چیمبر میں کاٹنے کے لیے ڈھال لیا جا سکتا ہے، نام نہاد کریو مائکروٹوم سیٹ اپ میں۔ کم درجہ حرارت نمونے کی سختی کو بڑھانے کی اجازت دیتا ہے، جیسے کہ شیشے کی منتقلی سے گزرنا، جو نیم پتلی نمونوں کی تیاری کی اجازت دیتا ہے۔ تاہم نتیجہ خیز نمونے کی موٹائی کو بہتر بنانے کے لیے نمونے کے درجہ حرارت اور چاقو کے درجہ حرارت کو کنٹرول کرنا ضروری ہے۔ الٹرا مائکروٹوم ایک الٹرا مائکروٹوم الٹرا مائکروٹومی کا ایک اہم ذریعہ ہے۔ یہ انتہائی پتلے حصوں کی تیاری کی اجازت دیتا ہے، جس میں آلہ گردش کرنے والے مائکروٹوم کی طرح کام کرتا ہے، لیکن مکینیکل تعمیر پر بہت سخت رواداری کے ساتھ۔ محتاط مکینیکل تعمیر کے نتیجے میں، ماؤنٹنگ کی لکیری تھرمل توسیع موٹائی کا بہت عمدہ کنٹرول فراہم کرنے کے لیے استعمال ہوتی ہے۔ یہ انتہائی پتلی کٹیں ٹرانسمیشن الیکٹران مائکروسکوپ (ٹی ای ایم) اور سیریل بلاک فیس اسکیننگ الیکٹران مائکروسکوپی (ایس بی ایف ایس ای ایم) کے ساتھ استعمال کے لیے اہم ہیں، اور بعض اوقات لائٹ آپٹیکل مائکروسکوپی کے لیے بھی اہم ہیں۔ ان کٹوتیوں کی عام موٹائی ٹرانسمیشن الیکٹران مائکروسکوپی کے لیے 40 اور 100 این ایم کے درمیان اور اکثر ایس بی ایف ایس ای ایم کے لیے 30 اور 50 این ایم کے درمیان ہوتی ہے۔ 500 این ایم موٹے تک کے موٹے حصوں کو خصوصی ٹی ای ایم ایپلی کیشنز کے لیے یا لائٹ مائکروسکوپی سروے کے حصوں کے لیے بھی لیا جاتا ہے تاکہ حتمی پتلی حصوں کے لیے کسی علاقے کا انتخاب کیا جا سکے۔ ہیرے کے چاقو (ترجیحا) اور شیشے کے چاقو الٹرا مائکروٹومز کے ساتھ استعمال ہوتے ہیں۔ حصوں کو جمع کرنے کے لیے، انہیں مائع کے اوپر تیرایا جاتا ہے جب انہیں کاٹا جاتا ہے اور احتیاط سے ٹی ای ایم نمونہ دیکھنے کے لیے موزوں گرڈ پر اٹھایا جاتا ہے۔ حصے کی موٹائی کا اندازہ عکاسی شدہ روشنی کے پتلی فلم مداخلت والے رنگوں سے لگایا جا سکتا ہے جو نمونے کی انتہائی کم موٹائی کے نتیجے میں دیکھے جاتے ہیں۔ کمپن مائیکروٹوم ایک کمپن بلیڈ کا استعمال کرتے ہوئے کاٹ کر کام کرتا ہے، جس کے نتیجے میں کٹ کو اسٹیشنری بلیڈ کے لیے درکار دباؤ سے کم دباؤ کے ساتھ بنایا جا سکتا ہے۔ کمپن کرنے والا مائکروٹوم عام طور پر مشکل حیاتیاتی نمونوں کے لیے استعمال ہوتا ہے۔ کٹائی کی موٹائی عام طور پر زندہ ٹشو کے لیے 30-500 μm اور فکسڈ ٹشو کے لیے 10-500 μm کے ارد گرد ہوتی ہے۔ کمپن کرنے والے مائکروٹوم پر ایک تغیر کمپریسٹوم مائکروٹوم ہے۔ کمپریسٹوم ٹشو کو پکڑنے کے لیے ایک نمونہ سرنج یا "لپ اسٹک جیسی" ٹیوب کا استعمال کرتا ہے۔ ٹشو کا نمونہ مکمل طور پر ایگروز (ایک پولیسیکرائڈ) میں جڑا ہوا ہے، اور ٹشو کو آہستہ آہستہ اور آہستہ سے ٹیوب سے باہر دبایا جاتا ہے تاکہ کمپن کرنے والے بلیڈ کو کاٹا جا سکے۔ آلہ مندرجہ ذیل طریقے سے کام کرتا ہے: نمونہ ٹیوب کا اختتام جہاں ٹشو نکلتا ہے وہ لوڈنگ اینڈ سے قدرے تنگ ہوتا ہے، جو ٹیوب سے باہر آتے ہی ٹشو کے ہلکے "کمپریشن" کی اجازت دیتا ہے۔ ہلکا سا کمپریشن کاٹنے، ناہموار کاٹنے اور کمپن کے نمونوں کو بننے سے روکتا ہے۔ نوٹ کریں کہ کمپریشن ٹیکنالوجی بکھرے ہوئے ٹشو کو نقصان نہیں پہنچاتی یا متاثر نہیں کرتی ہے۔ کمپریسٹوم مائکروٹوم کے کئی فوائد ہیں: 1) ایگروز ایمبیڈنگ تمام اطراف کے پورے نمونے کو استحکام فراہم کرتی ہے، جو ٹشو کے ناہموار ٹکڑے ٹکڑے کرنے یا کاٹنے سے روکتی ہے۔ 2) کمپریشن ٹیکنالوجی آہستہ سے ٹشو کو کاٹنے کے لیے کمپریس کرتی ہے، تاکہ بلیڈ ٹشو کے خلاف دھکا نہ دے۔ 3) زیادہ تر کمپن کرنے والے مائکروٹومز سے تیز سیکشننگ ؛ اور 4) یہ صحت مند ٹشوز فراہم کرنے کے لیے پرانے یا زیادہ بالغ جانوروں کے ٹشوز کو اچھی طرح سے کاٹتا ہے۔ سا مائیکروٹوم خاص طور پر سخت مواد جیسے دانتوں یا ہڈیوں کے لیے ہے۔ اس قسم کے مائکروٹوم میں ایک ریسیسڈ گھومنے والی آر ہوتی ہے، جو نمونے کے ذریعے کاٹتی ہے۔ کم سے کم کٹ موٹائی تقریبا 30 مائیکرو میٹر ہے اور نسبتا بڑے نمونوں کے لیے بنائی جا سکتی ہے۔ لیزر مائکروٹوم کانٹیکٹ فری سلائسنگ کا ایک آلہ ہے۔ سرایت، منجمد یا کیمیائی فکسشن کے ذریعے نمونے کی پہلے سے تیاری کی ضرورت نہیں ہے، اس طرح تیاری کے طریقوں سے نمونوں کو کم سے کم کیا جاتا ہے۔ متبادل طور پر مائکروٹوم کا یہ ڈیزائن بہت سخت مواد، جیسے ہڈیوں یا دانتوں کے ساتھ ساتھ کچھ سیرامکس کے لیے بھی استعمال کیا جا سکتا ہے۔ نمونے کے مواد کی خصوصیات پر منحصر ہے، قابل حصول موٹائی 10 اور 100 مائیکرو میٹر کے درمیان ہے۔ یہ آلہ اورکت لیزر کے کاٹنے کے عمل کا استعمال کرتے ہوئے کام کرتا ہے۔ جیسا کہ لیزر قریب اورکت میں تابکاری خارج کرتا ہے، اس طول موج کے نظام میں لیزر حیاتیاتی مواد کے ساتھ تعامل کر سکتا ہے۔ نمونے کے اندر تحقیقات کے تیز فوکسنگ کے ذریعے، TW/cm2 تک بہت زیادہ شدت کا فوکل پوائنٹ حاصل کیا جا سکتا ہے۔ فوکل ریجن میں آپٹیکل دخول کے غیر لکیری تعامل کے ذریعے ایک ایسے عمل میں مادی علیحدگی متعارف کرائی جاتی ہے جسے فوٹو ڈسپرشن کہا جاتا ہے۔ لیزر پلس کے دورانیے کو فیمٹوسیکنڈز کی حد تک محدود کرکے، ہدف کے علاقے میں خرچ ہونے والی توانائی کو قطعی طور پر کنٹرول کیا جاتا ہے، اس طرح کٹ کے تعامل زون کو مائیکرو میٹر کے نیچے تک محدود کر دیا جاتا ہے۔ اس زون کے باہر الٹرا شارٹ بیم کی درخواست کا وقت نمونے کے بقیہ حصے کو کم سے کم یا کوئی تھرمل نقصان نہیں پہنچاتا ہے۔ لیزر تابکاری کو تیز اسکیننگ آئینے پر مبنی نظری نظام کی طرف ہدایت کی جاتی ہے، جو بیم کراس اوور کی تین جہتی پوزیشننگ کی اجازت دیتا ہے، جبکہ بیم کو مطلوبہ دلچسپی کے علاقے میں منتقل کرنے کی اجازت دیتا ہے۔ اعلی رسٹر ریٹ کے ساتھ اعلی طاقت کا امتزاج اسکینر کو مختصر وقت میں نمونے کے بڑے علاقوں کو کاٹنے کی اجازت دیتا ہے۔ لیزر مائکروٹوم میں بافتوں، سیلولر ڈھانچوں، اور دیگر قسم کی چھوٹی خصوصیات میں اندرونی علاقوں کا لیزر مائکروڈسیکشن بھی ممکن ہے۔ چاقو مائیکرو ٹوم چاقو بلیڈ پروفائل کا انتخاب نمونوں کے مواد اور تیاری کے ساتھ ساتھ حتمی نمونے کی ضروریات پر منحصر ہے (مثال کے طور پر۔ موٹائی اور معیار کو کاٹ دیں)۔ ڈیزائن اور کٹ کی اقسام عام طور پر، چاقو کی خصوصیت چاقو کے بلیڈ کی پروفائل ہوتی ہے، جو پلانر کنکیو، پچر کی شکل یا چھلکے کی شکل کے ڈیزائن کے زمرے میں آتی ہے۔ پلانر کنکیو مائکروٹوم چاقو انتہائی تیز ہوتے ہیں، لیکن بہت نازک بھی ہوتے ہیں اور اس لیے صرف بہت نرم نمونوں کے ساتھ استعمال ہوتے ہیں۔ پچر پروفائل چاقو کچھ زیادہ مستحکم ہوتے ہیں اور اعتدال پسند سخت مواد میں استعمال ہوتے ہیں، جیسے کہ ایپوکسی یا کریوجینک نمونہ کاٹنے میں۔ آخر میں، چھڑی کا خاکہ اپنے دھندلے کنارے کے ساتھ، چاقو کے استحکام کو بڑھاتا ہے، جبکہ کٹ کو حاصل کرنے کے لیے نمایاں طور پر زیادہ طاقت کی ضرورت ہوتی ہے۔ الٹرا مائکروٹومز کے لیے، شیشے اور ہیرے کے چاقو درکار ہوتے ہیں، اس لیے بلیڈ کی کٹی ہوئی چوڑائی چند ملی میٹر کی ترتیب پر ہوتی ہے اور اس لیے کلاسیکی مائکروٹوم چاقووں کے مقابلے میں نمایاں طور پر چھوٹی ہوتی ہے۔ شیشے کے چاقو عام طور پر خصوصی "چاقو بنانے والے" فریکچر آلات کا استعمال کرتے ہوئے شیشے کی سلاخوں کے فریکچر سے تیار کیے جاتے ہیں۔ شیشے کے چاقو ابتدائی نمونے کی تیاری کے لیے استعمال کیے جا سکتے ہیں یہاں تک کہ جہاں حتمی حصے کے لیے ہیرے کے چاقو استعمال کیے جا سکتے ہیں۔ شیشے کے چاقووں میں عام طور پر چھوٹے گردے ہوتے ہیں، جو پلاسٹک کے ٹیپ سے بنے ہوتے ہیں، جو پانی سے بھرے ہوتے ہیں تاکہ نمونے کو بعد میں جمع کرنے کے لیے تیر سکے۔ ڈائمنڈ بلیڈ کو اس طرح کے موجودہ گرت میں بنایا جا سکتا ہے، جس سے جمع کرنے کا ایک ہی طریقہ ممکن ہو جاتا ہے۔ مائیکروٹوم کے ذریعے کاٹنے سے پہلے، حیاتیاتی مواد کو عام طور پر زیادہ سخت فکسٹیٹو میں رکھا جاتا ہے، ایک ایسے عمل میں جسے ایمبیڈنگ کہا جاتا ہے۔ یہ نمونے کے ارد گرد مائع مادے کی آمد سے حاصل ہوتا ہے، جیسے کہ پیرافن (موم) یا ایپوکسی، جسے سڑنا میں رکھا جاتا ہے اور بعد میں ایک "بلاک" پیدا کرنے کے لیے سخت کیا جاتا ہے جسے آسانی سے کاٹا جاتا ہے۔ انحطاط نمونے کے عمودی اور چاقو کے بلیڈ کے درمیان رابطے کا زاویہ ہے۔ اگر چاقو کا بلیڈ صحیح زاویہ پر ہے (زوال = 90) تو کٹ براہ راست دباؤ پر مبنی موڈ کا استعمال کرتے ہوئے بنایا جاتا ہے، اور اس لیے قوتیں متناسب طور پر بڑی ہوتی ہیں۔ اگر چاقو جھکا ہوا ہے، تاہم، چاقو کی رشتہ دار حرکت نمونے کی حرکت کے ساتھ تیزی سے متوازی ہوتی ہے، جس سے سلائسنگ ایکشن کی اجازت ملتی ہے۔ یہ طرز عمل بڑے یا سخت نمونوں کے لیے بہت اہم ہے۔ چاقو کا جھکاؤ چاقو کے چہرے اور نمونے کے درمیان کا زاویہ ہے۔ ایک بہترین نتیجہ کے لیے، اس زاویے کو مناسب طریقے سے منتخب کیا جانا چاہیے۔ زیادہ سے زیادہ زاویہ چاقو کی جیومیٹری، کٹ کی رفتار اور بہت سے دوسرے پیرامیٹرز پر منحصر ہے۔ اگر زاویے کو صفر میں ایڈجسٹ کیا جاتا ہے، تو چاقو کاٹا ہوا اکثر بے ترتیب ہو سکتا ہے، اور اسے ہموار کرنے کے لیے چاقو کا ایک نیا مقام استعمال کرنا ضروری ہے۔ اگر زاویہ بہت بڑا ہے، تو نمونہ ٹکڑے ٹکڑے ہو سکتا ہے اور چاقو کٹ میں وقتا فوقتا موٹائی میں تغیرات پیدا کر سکتا ہے۔ زاویہ کو مزید اس طرح بڑھا کر کہ یہ بہت بڑا ہو، کوئی بھی چاقو کے بلیڈ کو ہی نقصان پہنچا سکتا ہے۔ آلہ کی تجارتی دستیابی بہت سی کمپنیاں تجارتی مقاصد کے لیے مائیکرو ٹوم آلات تیار کرتی ہیں۔ روٹری مائکروٹوم روٹری مائکروٹوم حیاتیاتی نمونوں کی عین مطابق تقسیم کے لیے لیبارٹریوں اور ہسٹولوجی ایپلی کیشنز میں بڑے پیمانے پر استعمال ہوتے ہیں۔ چند مینوفیکچررز کو ان کے روٹری مائکروٹوم کی پیداوار کے لیے تسلیم کیا گیا۔ لیکا مائیکرو سسٹمز لیکا مائیکرو سسٹمز ایک کمپنی ہے جو لیبارٹری کا سامان تیار کرنے کے لیے مشہور ہے۔ وہ روٹری مائکروٹومز کی ایک رینج پیش کرتے ہیں جو حیاتیاتی نمونوں کی مستقل اور پتلی سیکشننگ کے لیے ڈیزائن کیے گئے ہیں۔ صحت سے متعلق آلات صحت سے متعلق آلات ٹشو سیکشننگ حل میں مہارت رکھتے ہیں، بشمول روٹری مائکروٹومز۔ ان کے مائکروٹومس کو ان کے جدید ڈیزائن اور ٹشو کے نمونوں کے عین مطابق، یکساں حصوں کو فراہم کرنے کی صلاحیت کے لیے پہچانا جاتا ہے۔ ہسٹولوجی مائکروسکوپ حوالہ جات بیرونی روابط ہسٹولوجی فاریسٹری ٹولز کاٹنے والی مشینیں بھی دیکھیں۔