Phage display
ফেজ ডিসপ্লে হল প্রোটিন-প্রোটিন, প্রোটিন-পেপটাইড এবং প্রোটিন-ডিএনএ মিথস্ক্রিয়া অধ্যয়নের জন্য একটি পরীক্ষাগার কৌশল যা ব্যাকটেরিওফেজ (ভাইরাস যা ব্যাকটেরিয়াকে সংক্রামিত করে) ব্যবহার করে প্রোটিনগুলিকে জেনেটিক তথ্যের সাথে সংযুক্ত করে যা তাদের এনকোড করে। এই কৌশলে, আগ্রহের একটি প্রোটিনকে এনকোডিং করা একটি জিন একটি ফেজ কোট প্রোটিন জিনে ঢোকানো হয়, যার ফলে ফেজ তার বাইরের দিকে প্রোটিনকে "প্রদর্শন" করে এবং প্রোটিনের জন্য জিনটি তার অভ্যন্তরে ধারণ করে, যার ফলে জিনোটাইপ এবং ফেনোটাইপের মধ্যে একটি সংযোগ তৈরি হয়। প্রদর্শিত প্রোটিন এবং অন্যান্য অণুর মধ্যে মিথস্ক্রিয়া সনাক্ত করার জন্য ফেজগুলি যে প্রোটিনগুলি প্রদর্শন করছে সেগুলি অন্যান্য প্রোটিন, পেপটাইড বা ডিএনএ সিকোয়েন্সের বিরুদ্ধে পরীক্ষা করা যেতে পারে। এইভাবে, প্রোটিনের বড় গ্রন্থাগারগুলি ইন ভিট্রো সিলেকশন নামে একটি প্রক্রিয়ায় স্ক্রিনিং এবং পরিবর্ধিত করা যেতে পারে, যা প্রাকৃতিক নির্বাচনের অনুরূপ। ফেজ ডিসপ্লেতে ব্যবহৃত সবচেয়ে সাধারণ ব্যাকটেরিওফেজগুলি হল এম13 এবং এফডি ফিলামেন্টাস ফেজ, যদিও টি4, টি7 এবং λ ফেজও ব্যবহার করা হয়েছে। জর্জ পি স্মিথ 1985 সালে প্রথম ফেজ ডিসপ্লে বর্ণনা করেন, যখন তিনি পেপটাইড সিকোয়েন্সের সংগ্রহ থেকে একটি পেপটাইডে ভাইরাসের ক্যাপসিড প্রোটিনকে ফিউজ করে ফিলামেন্টাস ফেজ (দীর্ঘ, পাতলা ভাইরাস যা ব্যাকটেরিয়াকে সংক্রামিত করে)-এর উপর পেপটাইডের প্রদর্শন প্রদর্শন করেন। এটি ভাইরাল ক্লোন সংগ্রহের বাইরের পৃষ্ঠে বিভিন্ন পেপটাইড প্রদর্শন করে, যেখানে প্রক্রিয়াটির স্ক্রিনিং ধাপটি পেপটাইডগুলিকে সর্বোচ্চ বাঁধাই সম্পর্কিততার সাথে পৃথক করে। 1988 সালে, স্টিফেন পারমলি এবং জর্জ স্মিথ অ্যাফিনিটি নির্বাচনের জন্য বায়োপ্যানিং বর্ণনা করেছিলেন এবং দেখিয়েছিলেন যে নির্বাচনের পুনরাবৃত্তিমূলক রাউন্ডগুলি এক বিলিয়ন বা তার কম 1-এ উপস্থিত ক্লোনগুলির জন্য সমৃদ্ধ করতে পারে। 1990 সালে, জেমি স্কট এবং জর্জ স্মিথ ফিলামেন্টাস ফেজ-এ প্রদর্শিত বড় র্যান্ডম পেপটাইড গ্রন্থাগার তৈরির বর্ণনা দেন। গ্রেগ উইন্টার এবং জন ম্যাকক্যাফার্টির সাথে আণবিক জীববিজ্ঞানের গবেষণাগার, রিচার্ড লার্নার এবং কার্লোস বারবাসের সাথে দ্য স্ক্রিপস রিসার্চ ইনস্টিটিউট এবং ফ্রাঙ্ক ব্রেটলিং এবং স্টিফান ডুবেলের সাথে জার্মান ক্যান্সার রিসার্চ সেন্টারের গোষ্ঠীগুলি থেরাপিউটিক প্রোটিন ইঞ্জিনিয়ারিংয়ের জন্য অ্যান্টিবডিগুলির মতো প্রোটিন প্রদর্শনের জন্য ফেজ ডিসপ্লে প্রযুক্তি আরও উন্নত ও উন্নত করেছিল। স্মিথ এবং উইন্টারকে ফেজ ডিসপ্লে বিকাশে অবদানের জন্য 2018 সালের রসায়নে নোবেল পুরস্কারের অর্ধেক অংশ দেওয়া হয়েছিল। 1985 সাল থেকে অগ্রাধিকার দাবি করে জর্জ পাইজেনিকের একটি পেটেন্টও পেপটাইড গ্রন্থাগারের প্রজন্মের বর্ণনা দেয়। নীতি দ্বি-সংকর ব্যবস্থার মতো, ফেজ ডিসপ্লে প্রোটিন মিথস্ক্রিয়ার উচ্চ-থ্রুপুট স্ক্রিনিংয়ের জন্য ব্যবহৃত হয়। এম13 ফিলামেন্টাস ফেজ ডিসপ্লের ক্ষেত্রে, ডিএনএ এনকোডিং প্রোটিন বা আগ্রহের পেপটাইডকে পি. আই. আই বা পি. ভি. আই. আই জিনের সাথে সংযুক্ত করা হয়, যা যথাক্রমে মাইনর বা মেজর কোট প্রোটিনকে এনকোডিং করে। একাধিক ক্লোনিং সাইট কখনও কখনও তিনটি সম্ভাব্য পঠন ফ্রেমে টুকরোগুলি ঢোকানো হয় তা নিশ্চিত করার জন্য ব্যবহার করা হয় যাতে সিডিএনএ টুকরোটি সঠিক ফ্রেমে অনুবাদ করা হয়। ফেজ জিন এবং ইনসার্ট ডিএনএ হাইব্রিড তারপর ই. কোলাই ব্যাকটেরিয়া কোষ যেমন টিজি1, এসএস320, ইআর2738, বা এক্সএল1-ব্লু ই. কোলাইতে ঢোকানো হয় (একটি প্রক্রিয়া যা "ট্রান্সডাকশন" নামে পরিচিত)। যদি একটি "ফেজেমিড" ভেক্টর ব্যবহার করা হয় (একটি সরলীকৃত প্রদর্শন নির্মাণ ভেক্টর) ফেজের কণাগুলি ই. কোলাই কোষ থেকে মুক্তি পাবে না যতক্ষণ না তারা সহায়ক ফেজ দ্বারা সংক্রামিত হয়, যা ফেজ ডিএনএ-র প্যাকেজিং এবং প্রাসঙ্গিক প্রোটিন খণ্ডের সাথে পরিপক্ক ভিরিওনের সমাবেশকে সক্ষম করে তাদের বাইরের কোটের অংশ হিসাবে মাইনর (পিআইআই) বা মেজর (পিভিআইআই) কোট প্রোটিনের উপর। একটি মাইক্রোটাইটার প্লেটের কূপের পৃষ্ঠে একটি প্রাসঙ্গিক ডিএনএ বা প্রোটিন লক্ষ্য (গুলি) স্থির করে, একটি ফেজ যা একটি প্রোটিন প্রদর্শন করে যা তার পৃষ্ঠের সেই লক্ষ্যগুলির মধ্যে একটির সাথে আবদ্ধ থাকে এবং অন্যগুলি ধোয়ার মাধ্যমে সরানো হয়। যেগুলি অবশিষ্ট থাকে সেগুলি বাদ দেওয়া যেতে পারে, আরও ফেজ তৈরি করতে (হেল্পার ফেজ দিয়ে ব্যাকটেরিয়া সংক্রমণ দ্বারা) এবং প্রাসঙ্গিক (অর্থাৎ। বাঁধাই) ফেজ। অবাঞ্ছিত উপকরণ অপসারণের মাধ্যমে সোনার নমুনা সমৃদ্ধকরণের প্রসঙ্গে এই পদক্ষেপগুলির পুনরাবৃত্ত সাইকেল চালাকে 'প্যানিং' হিসাবে উল্লেখ করা হয়। চূড়ান্ত পর্যায়ে নির্গত ফেজ একটি উপযুক্ত ব্যাকটেরিয়া পোষককে সংক্রামিত করতে ব্যবহার করা যেতে পারে, যা থেকে ফেজেমিডগুলি সংগ্রহ করা যেতে পারে এবং প্রাসঙ্গিক, মিথস্ক্রিয়াশীল প্রোটিন বা প্রোটিনের টুকরোগুলি সনাক্ত করার জন্য প্রাসঙ্গিক ডিএনএ সিকোয়েন্স এক্সাইজ এবং সিকোয়েন্স করা যেতে পারে। 'ব্যাকটেরিয়াল প্যাকেজিং সেল লাইন' প্রযুক্তি ব্যবহার করে সহায়ক ফেজ ব্যবহার বন্ধ করা যেতে পারে। সোনিফিকেশনের সাথে নিম্ন-পিএইচ ইল্যুশন বাফারের সংমিশ্রণে ইল্যুশন করা যেতে পারে, যা পেপটাইড-টার্গেট মিথস্ক্রিয়া শিথিল করার পাশাপাশি, স্থিরকরণ পৃষ্ঠ থেকে লক্ষ্য অণুটিকে পৃথক করতেও কাজ করে। এই আল্ট্রাসাউন্ড-ভিত্তিক পদ্ধতিটি উচ্চ-আকর্ষণযুক্ত পেপটাইডের একক-ধাপ নির্বাচনকে সক্ষম করে। ফেজ প্রদর্শন প্রযুক্তির প্রয়োগগুলির মধ্যে একটি প্রোটিনের মিথস্ক্রিয়া অংশীদারদের নির্ধারণ অন্তর্ভুক্ত (যা একটি কোষ, টিস্যু বা জীবের সমস্ত কোডিং সিকোয়েন্স সমন্বিত একটি ডিএনএ লাইব্রেরির সাথে স্থির ফেজ "বেট" হিসাবে ব্যবহৃত হবে) যাতে সেই প্রোটিনের কার্যকারিতা বা প্রক্রিয়া নির্ধারণ করা যায়। ফেজ ডিসপ্লে ইন ভিট্রো প্রোটিন বিবর্তনের জন্যও ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত একটি পদ্ধতি (যাকে প্রোটিন ইঞ্জিনিয়ারিংও বলা হয়)। এইভাবে, ফেজ ডিসপ্লে ওষুধ আবিষ্কারের একটি দরকারী হাতিয়ার। এটি প্রোটিনকে লক্ষ্য করার জন্য নতুন লিগ্যান্ড (এনজাইম ইনহিবিটার, রিসেপ্টর অ্যাগোনিস্ট এবং অ্যান্টাগনিস্ট) খুঁজে বের করার জন্য ব্যবহৃত হয়। এই কৌশলটি টিউমার অ্যান্টিজেন নির্ধারণ করতে (রোগ নির্ণয় এবং থেরাপিউটিক টার্গেটিং-এ ব্যবহারের জন্য) এবং এলোমেলো অংশগুলির সাথে বিশেষভাবে নির্মিত ডিএনএ লাইব্রেরি ব্যবহার করে প্রোটিন-ডিএনএ মিথস্ক্রিয়া অনুসন্ধান করতেও ব্যবহৃত হয়। সম্প্রতি, ক্যান্সার চিকিৎসার প্রেক্ষাপটে ফেজ ডিসপ্লে ব্যবহার করা হয়েছে-যেমন দত্তক কোষ স্থানান্তর পদ্ধতি। এই ক্ষেত্রে, টিউমার পৃষ্ঠের প্রোটিনগুলিকে লক্ষ্য করে সিন্থেটিক অ্যান্টিবডি তৈরি এবং নির্বাচন করতে ফেজ ডিসপ্লে ব্যবহার করা হয়। এগুলি রোগীর কাছ থেকে সংগৃহীত টি-কোষের জন্য সিন্থেটিক রিসেপ্টর তৈরি করা হয় যা রোগের বিরুদ্ধে লড়াই করতে ব্যবহৃত হয়। ইন ভিট্রো প্রোটিন বিবর্তনের প্রতিযোগিতামূলক পদ্ধতির মধ্যে রয়েছে ইস্ট ডিসপ্লে, ব্যাকটেরিয়াল ডিসপ্লে, রাইবোজোম ডিসপ্লে এবং এমআরএনএ ডিসপ্লে। অ্যান্টিবডি পরিপক্কতা ইন ভিট্রো অ্যান্টিবডি ফেজ ডিসপ্লের আবিষ্কার অ্যান্টিবডি ওষুধের আবিষ্কারকে বৈপ্লবিক করে তুলেছে। এমআরসি ল্যাবরেটরি অফ মলিকুলার বায়োলজি (গ্রেগ উইন্টার এবং জন ম্যাকক্যাফার্টি), স্ক্রিপস রিসার্চ ইনস্টিটিউট (রিচার্ড লার্নার এবং কার্লোস এফ বারবাস) এবং জার্মান ক্যান্সার রিসার্চ সেন্টার (ফ্রাঙ্ক ব্রেইটলিং এবং স্টিফান ডুবেল)-এর পরীক্ষাগারগুলি প্রাথমিক কাজ করেছিল। 1991 সালে, দ্য স্ক্রিপস গ্রুপ ফেজ-এ মানব অ্যান্টিবডিগুলির প্রথম প্রদর্শন এবং নির্বাচনের কথা জানায়। এই প্রাথমিক গবেষণায় মানব অ্যান্টিবডি ফ্যাবের দ্রুত বিচ্ছিন্নতার বর্ণনা দেওয়া হয়েছে যা টিটেনাস টক্সিনকে আবদ্ধ করে এবং পদ্ধতিটি তারপর ভ্যাকসিনের নকশা এবং থেরাপির জন্য মানব অ্যান্টি-এইচআইভি-1 অ্যান্টিবডিগুলিকে দ্রুত ক্লোন করার জন্য প্রসারিত করা হয়েছিল। অ্যান্টিবডি লাইব্রেরির ফেজ প্রদর্শন ইমিউন প্রতিক্রিয়া অধ্যয়নের পাশাপাশি থেরাপির জন্য মানুষের অ্যান্টিবডিগুলি দ্রুত নির্বাচন এবং বিকশিত করার একটি পদ্ধতি উভয়ের জন্যই একটি শক্তিশালী পদ্ধতিতে পরিণত হয়েছে। অ্যান্টিবডি ফেজ ডিসপ্লে পরে দ্য স্ক্রিপস রিসার্চ ইনস্টিটিউটে কার্লোস এফ বারবাস সিন্থেটিক হিউম্যান অ্যান্টিবডি লাইব্রেরি তৈরি করতে ব্যবহার করেছিলেন, যা 1990 সালে ব্রেটলিং এবং সহকর্মীদের (পেটেন্ট সিএ 2035384) দ্বারা প্রথম পেটেন্ট করা হয়েছিল, যার ফলে সিন্থেটিক বৈচিত্র্য উপাদান থেকে মানব অ্যান্টিবডিগুলি ভিট্রোতে তৈরি করা যায়। ফেজ-এ লক্ষ লক্ষ বিভিন্ন অ্যান্টিবডি প্রদর্শনকারী অ্যান্টিবডি লাইব্রেরিগুলি প্রায়শই ফার্মাসিউটিক্যাল শিল্পে অত্যন্ত নির্দিষ্ট থেরাপিউটিক অ্যান্টিবডি সীসা পৃথক করতে ব্যবহৃত হয়, প্রাথমিকভাবে অ্যান্টি-ক্যান্সার বা অ্যান্টি-ইনফ্ল্যামেটরি থেরাপিউটিক্স হিসাবে অ্যান্টিবডি ওষুধ হিসাবে বিকাশের জন্য। সবচেয়ে সফলগুলির মধ্যে একটি ছিল অ্যাডালিমুম্যাব, যা কেমব্রিজ অ্যান্টিবডি টেকনোলজি দ্বারা ডি2ই7 হিসাবে আবিষ্কৃত হয়েছিল এবং অ্যাবট ল্যাবরেটরিজ দ্বারা উন্নত ও বিপণন করা হয়েছিল। টিএনএফ আলফার একটি অ্যান্টিবডি আদালিমুম্যাব ছিল বিশ্বের প্রথম সম্পূর্ণ মানব অ্যান্টিবডি যা বার্ষিক 1 বিলিয়ন ডলারের বেশি বিক্রয় অর্জন করেছিল। সাধারণ প্রটোকল নীচে ফেজ ডিসপ্লে স্ক্রিনিংয়ে অনুসরণ করা ঘটনাগুলির ক্রম যা পলিপেপটাইডগুলি সনাক্ত করতে অনুসরণ করা হয় যা পছন্দসই লক্ষ্য প্রোটিন বা ডিএনএ অনুক্রমের সাথে উচ্চ সাদৃশ্যের সাথে আবদ্ধ হয়ঃ লক্ষ্য প্রোটিন বা ডিএনএ ক্রমগুলি একটি মাইক্রোটাইটার প্লেটের কূপগুলিতে স্থির থাকে। অনেক জেনেটিক সিকোয়েন্স একটি ব্যাকটেরিওফেজ লাইব্রেরিতে ব্যাকটেরিওফেজ কোট প্রোটিনের সাথে ফিউশন আকারে প্রকাশ করা হয়, যাতে সেগুলি ভাইরাল কণার পৃষ্ঠে প্রদর্শিত হয়। প্রদর্শিত প্রোটিন ফেজ-এর মধ্যে জেনেটিক সিকোয়েন্সের সাথে মিলে যায়। এই ফেজ-ডিসপ্লে লাইব্রেরিটি থালাটিতে যোগ করা হয় এবং ফেজকে বেঁধে রাখার সময় দেওয়ার পরে থালাটি ধুয়ে ফেলা হয়। ফেজ-প্রদর্শনকারী প্রোটিনগুলি যা লক্ষ্য অণুগুলির সাথে মিথস্ক্রিয়া করে তা থালাটির সাথে সংযুক্ত থাকে, অন্য সমস্তগুলি ধুয়ে ফেলা হয়। সংযুক্ত ফেজ বাদ দেওয়া যেতে পারে এবং উপযুক্ত ব্যাকটেরিয়া পোষকের সংক্রমণ দ্বারা আরও ফেজ তৈরি করতে ব্যবহৃত হতে পারে। নতুন ফেজ একটি সমৃদ্ধ মিশ্রণ গঠন করে, যার মধ্যে উল্লেখযোগ্যভাবে কম অপ্রাসঙ্গিক ফেজ থাকে (অর্থাৎ। অ-বাঁধাই) প্রাথমিক মিশ্রণে উপস্থিত ছিল। 3 থেকে 5 ধাপ ঐচ্ছিকভাবে এক বা একাধিক বার পুনরাবৃত্তি করা হয়, যা প্রোটিন বাঁধতে ফেজ গ্রন্থাগারকে আরও সমৃদ্ধ করে। আরও ব্যাকটেরিয়া-ভিত্তিক পরিবর্ধন অনুসরণ করে, মিথস্ক্রিয়াশীল ফেজের মধ্যে ডি. এন. এ ক্রমানুসারে মিথস্ক্রিয়াশীল প্রোটিন বা প্রোটিন খণ্ডগুলি সনাক্ত করা হয়। কোট প্রোটিন ফিলামেন্টাস ফেজ পি. আই. আই. পি. আই. আই-এর নির্বাচন হল সেই প্রোটিন যা ভিরিওনের সংক্রামকতা নির্ধারণ করে। পি. আই. আই. গ্লাইসিন সমৃদ্ধ সংযোগকারী দ্বারা সংযুক্ত তিনটি ডোমেন (এন1, এন2 এবং সিটি) নিয়ে গঠিত। এন2 ক্ষেত্রটি ভাইরাস সংক্রমণের সময় এফ পাইলাসের সাথে আবদ্ধ হয়ে এন1 ক্ষেত্রটিকে মুক্ত করে যা তারপর ব্যাকটেরিয়ার পৃষ্ঠে একটি টোলএ প্রোটিনের সাথে মিথস্ক্রিয়া করে। এই প্রোটিনের মধ্যে সন্নিবেশগুলি সাধারণত অবস্থান 249 (সিটি এবং এন2-এর মধ্যে একটি সংযোগকারী অঞ্চলের মধ্যে), অবস্থান 198 (এন2 ডোমেনের মধ্যে) এবং এন-টার্মিনাস (এন-টার্মিনাল স্রাব ক্রম এবং পিIII-এর এন-টার্মিনাসের মধ্যে সন্নিবেশিত) যোগ করা হয়। যাইহোক, 198তম অবস্থানে অবস্থিত বামহি সাইটটি ব্যবহার করার সময় একজনকে অবশ্যই অসম্পূর্ণ সিস্টাইন অবশিষ্টাংশ (সি201) সম্পর্কে সতর্ক থাকতে হবে যা ফেজ প্রদর্শনের সময় সমস্যা সৃষ্টি করতে পারে যদি কেউ পি. আই. আই-এর নন-ট্রাঙ্কেটেড সংস্করণ ব্যবহার করে। পি. ভি. আই. আই-এর পরিবর্তে পি. আই. আই ব্যবহার করার একটি সুবিধা হল যে পি. আই. আই একটি সহায়ক ফেজের সাথে মিলিত হয়ে ফেজেমিড (এফ. এফ ফেজেস থেকে প্রাপ্ত প্লাজমিড) ব্যবহার করার সময় মনোভালেন্ট প্রদর্শনের অনুমতি দেয়। উপরন্তু, পি. আই. আই. আই বৃহত্তর প্রোটিন সিকোয়েন্স (> 100 অ্যামিনো অ্যাসিড) সন্নিবেশের অনুমতি দেয় এবং পি. ভি. আই. আই-এর তুলনায় এর প্রতি বেশি সহনশীল। যাইহোক, পি. আই. আই. কে ফিউশন অংশীদার হিসাবে ব্যবহার করলে ফেজ সংক্রামকতা হ্রাস পেতে পারে যার ফলে ফেজ বৃদ্ধির হারের পার্থক্যের কারণে নির্বাচন পক্ষপাতের মতো সমস্যা হতে পারে বা আরও খারাপ, ফেজ তার হোস্টকে সংক্রামিত করতে অক্ষম। ফেজ সংক্রামকতা হ্রাস একটি ফেজেমিড প্লাজমিড এবং একটি সহায়ক ফেজ ব্যবহার করে এড়ানো যেতে পারে যাতে ফলস্বরূপ ফেজ বন্য প্রকার এবং ফিউশন পিআইআই উভয়ই ধারণ করে। দুটি পরিপূরক লিউসিন জিপার সিস্টেম, ডাইরেক্ট ইন্টারেকশন রেসকিউ বা সি-টার্মিনাসের সিডিএনএ এবং পিআইআই-এর মধ্যে একটি 8-10 অ্যামিনো অ্যাসিড লিঙ্কার যুক্ত করে পিআইআই ব্যবহার করে সিডিএনএ বিশ্লেষণ করা হয়েছে। পি. ভি. আই. আই. পি. ভি. আই. আই হল এফ. এফ ফেজ-এর প্রধান আবরণ প্রোটিন। পেপটাইডগুলি সাধারণত পি. ভি. আই. আই-এর এন-টার্মিনাসের সাথে সংযুক্ত থাকে। সাধারণত যে পেপটাইডগুলি পি. ভি. আই. আই-তে সংযুক্ত করা যেতে পারে সেগুলি 6-8 অ্যামিনো অ্যাসিড দীর্ঘ হয়। আকারের সীমাবদ্ধতা যুক্ত অংশের কারণে সৃষ্ট কাঠামোগত প্রতিবন্ধকতার সাথে কম এবং কোট প্রোটিন রফতানির সময় পিআইভি দ্বারা সৃষ্ট আকার বর্জনের সাথে আরও বেশি সম্পর্কযুক্ত বলে মনে হয়। যেহেতু একটি সাধারণ ফেজ-এ প্রোটিনের প্রায় 2700 কপি থাকে, তাই ফেজেমিড ব্যবহার করা হলেও আগ্রহের প্রোটিন বহুগুণীভাবে প্রকাশিত হওয়ার সম্ভাবনা বেশি। এটি এই প্রোটিনের ব্যবহারকে উচ্চ আকর্ষণ বন্ধনকারী অংশীদারদের আবিষ্কারের জন্য প্রতিকূল করে তোলে। পি. ভি. আই. আই-এর আকারের সমস্যা কাটিয়ে ওঠার জন্য কৃত্রিম কোট প্রোটিন তৈরি করা হয়েছে। একটি উদাহরণ হল ওয়েইস এবং সিধুর উল্টানো কৃত্রিম কোট প্রোটিন (এসিপি) যা সি-টার্মিনাস-এ বড় প্রোটিন প্রদর্শনের অনুমতি দেয়। এসিপি 20কেডিএ-র একটি প্রোটিন প্রদর্শন করতে পারে, তবে, শুধুমাত্র নিম্ন স্তরে (বেশিরভাগ ক্ষেত্রে শুধুমাত্র মনোভ্যালেন্টভাবে)। সিডিএনএ গ্রন্থাগার প্রদর্শনের জন্য পিভিআই পিভিআই ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়েছে। ফেজ ডিসপ্লের মাধ্যমে সিডিএনএ গ্রন্থাগারগুলির প্রদর্শন তার উচ্চ থ্রুপুট ক্ষমতার কারণে মিথস্ক্রিয়াশীল প্রোটিন এবং পেপটাইড আবিষ্কারের জন্য ইস্ট-2-হাইব্রিড পদ্ধতির একটি আকর্ষণীয় বিকল্প। সি. ডি. এন. এ গ্রন্থাগারের অভিব্যক্তির জন্য পি. ভি. আই.-কে পি. ভি. আই. আই এবং পি. আই. আই-এর চেয়ে বেশি ব্যবহার করা হয়েছে কারণ ফেজ সমাবেশে পি. ভি. আই-এর ভূমিকাকে ব্যাপকভাবে প্রভাবিত না করে পি. ভি. আই-এর সি-টার্মিনাস-এ আগ্রহের প্রোটিন যোগ করা যেতে পারে। এর মানে হল যে সিডিএনএ-তে স্টপ কোডন আর কোনও সমস্যা নয়। যাইহোক, সি. ডি. এন. এ-র ফেজ প্রদর্শন সর্বদা ইউক্যারিওটিক কোষে উপস্থিত অনুবাদ-পরবর্তী পরিবর্তনগুলি তৈরি করতে বেশিরভাগ প্রোক্যারিওটের অক্ষমতার দ্বারা বা মাল্টি-ডোমেন প্রোটিনের ভুল ভাঁজ দ্বারা সীমাবদ্ধ থাকে। যদিও পি. ভি. আই. সি. ডি. এন. এ গ্রন্থাগারগুলির বিশ্লেষণের জন্য দরকারী, পি. আই. আই. এবং পি. ভি. আই. আই ফেজ প্রদর্শনের জন্য সর্বাধিক ব্যবহৃত কোট প্রোটিন হিসাবে রয়ে গেছে। পি. ভি. আই. আই এবং পি. আই. এক্স 1995 সালে একটি পরীক্ষায়, পি. ভি. আই এবং পি. আই. এক্স উভয় ক্ষেত্রেই গ্লুটাথিয়ন এস-ট্রান্সফারেজের প্রদর্শন করার চেষ্টা করা হয়েছিল এবং ব্যর্থ হয়েছিল। যাইহোক, এন-টার্মিনাসের উপর একটি পেরিপ্লাজমিক সিগন্যাল সিকোয়েন্স (পেলবি বা ওম্পা) যোগ করার পরে এই প্রোটিনের ফেজ প্রদর্শন সফলভাবে সম্পন্ন হয়েছিল। সাম্প্রতিক এক গবেষণায় দেখা গেছে যে, সিগন্যাল সিকোয়েন্সের প্রয়োজন ছাড়াই পি. ভি. আই. আই-তে অ্যাভিট্যাগ, ফ্ল্যাগ এবং হিজ প্রদর্শিত হতে পারে। তারপর একক শৃঙ্খল এফভি (এস. সি. এফ. ভি) এবং একক শৃঙ্খল টি কোষ রিসেপ্টর (এস. সি. টি. সি. আর)-এর অভিব্যক্তি সংকেত ক্রম সহ এবং ছাড়াই প্রকাশ করা হয়েছিল। পি. এল. বি (একটি অ্যামিনো অ্যাসিড সংকেত ক্রম যা প্রোটিনকে পেরিপ্লাজমে লক্ষ্য করে যেখানে একটি সংকেত পেপটিডেজ তারপর পি. এল. বি থেকে বিচ্ছিন্ন হয়ে যায়) সংকেত ক্রম ছাড়া পি. ভি. আই. আই এবং পি. আই. এক্স ফিউশনের তুলনায় ফেজ ডিসপ্লে স্তরের উন্নতি করে। যাইহোক, এর ফলে ফেজেমিড জিনোমের পরিবর্তে আরও সহায়ক ফেজ জিনোমের অন্তর্ভুক্তি ঘটে। সব ক্ষেত্রেই ফেজ ডিসপ্লের মাত্রা পি. আই. আই ফিউশন ব্যবহারের তুলনায় কম ছিল। যাইহোক, নিম্ন ডিসপ্লে প্রকৃত মনোভালেন্ট ডিসপ্লের কাছাকাছি হওয়ার কারণে বাইন্ডার নির্বাচনের জন্য আরও অনুকূল হতে পারে। ছয়টির মধ্যে পাঁচটিতে, পেলবি ছাড়া পি. ভি. আই. আই এবং পি. আই. এক্স ফিউশন অ্যাফিনিটি সিলেকশন অ্যাসেসের পি. আই. আই ফিউশনের চেয়ে বেশি কার্যকর ছিল। গবেষণাপত্রে এমনকি বলা হয়েছে যে পিভিআইআই এবং পিআইএক্স ডিসপ্লে প্ল্যাটফর্মগুলি দীর্ঘমেয়াদে পিআইআই-কে ছাড়িয়ে যেতে পারে। পি. আই. আই-এর পরিবর্তে পি. ভি. আই. আই এবং পি. আই. এক্স-এর ব্যবহারও একটি সুবিধা হতে পারে কারণ ব্যবহৃত পি. আই. আই বন্য ধরনের হলে ভিরিওন-অ্যান্টিজেন বন্ধন না ভেঙে ভিরিওন উদ্ধার করা যেতে পারে। পরিবর্তে, কেউ পুঁতি এবং অ্যান্টিজেনের মধ্যে একটি অংশে বিভক্ত হতে পারে। যেহেতু পি. আই. আই অক্ষত, তাই অ্যান্টিজেনটি ফেজের সাথে আবদ্ধ থাকে কিনা তা বিবেচ্য নয়। টি7 ফেজ ফেজ প্রদর্শনের জন্য এফএফ ফেজ ব্যবহার করার সমস্যাটি হল যে তাদের ফেজ-এ একত্রিত হওয়ার আগে ব্যাকটেরিয়ার অভ্যন্তরীণ ঝিল্লি জুড়ে স্থানান্তর করার জন্য আগ্রহের প্রোটিন প্রয়োজন। কিছু প্রোটিন এই প্রক্রিয়ার মধ্য দিয়ে যেতে পারে না এবং তাই এফএফ ফেজগুলির পৃষ্ঠে প্রদর্শিত হতে পারে না। এই ক্ষেত্রে, পরিবর্তে টি7 ফেজ ডিসপ্লে ব্যবহার করা হয়। টি7 ফেজ ডিসপ্লেতে, প্রদর্শিত প্রোটিনটি টি7-এর জিন 10 ক্যাপসিড প্রোটিনের সি-টার্মিনাসের সাথে সংযুক্ত থাকে। টি7 ব্যবহারের অসুবিধা হল যে, প্রোটিনের আকার যা পৃষ্ঠে প্রকাশ করা যেতে পারে তা ছোট পেপটাইডের মধ্যে সীমাবদ্ধ কারণ টি7 জিনোমে বড় পরিবর্তনগুলি এম13-এর মতো সামঞ্জস্য করা যায় না যেখানে ফেজ কেবল তার আবরণকে তার মধ্যে বৃহত্তর জিনোমের সাথে খাপ খাইয়ে নেওয়ার জন্য দীর্ঘ করে তোলে। যাইহোক, এটি এস. সি. এফ. ভি নির্বাচনের জন্য একটি বড় প্রোটিন লাইব্রেরি উৎপাদনের জন্য দরকারী হতে পারে যেখানে এস. সি. এফ. ভি একটি এম13 ফেজের উপর প্রকাশ করা হয় এবং অ্যান্টিজেনগুলি টি7 ফেজের পৃষ্ঠে প্রকাশ করা হয়। বায়োইনফরমেটিক্স সম্পদ এবং সরঞ্জাম ডাটাবেস এবং মাইমোটোপের জন্য গণনামূলক সরঞ্জামগুলি ফেজ ডিসপ্লে অধ্যয়নের একটি গুরুত্বপূর্ণ অংশ। লক্ষ্য-সম্পর্কিত নয় এমন পেপটাইডগুলি বাদ দিতে, ছোট অণু-প্রোটিন মিথস্ক্রিয়া চিহ্নিত করতে এবং প্রোটিন-প্রোটিন মিথস্ক্রিয়া মানচিত্র করতে ডেটাবেস, প্রোগ্রাম এবং ওয়েব সার্ভারগুলি ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়েছে। ব্যবহারকারীরা একটি প্রোটিনের ত্রিমাত্রিক কাঠামো এবং ফেজ ডিসপ্লে পরীক্ষা থেকে নির্বাচিত পেপটাইডগুলি ব্যবহার করে গঠনমূলক এপিটোপগুলির মানচিত্র তৈরি করতে পারেন। কিছু দ্রুত এবং দক্ষ গণনামূলক পদ্ধতি অনলাইনে পাওয়া যায়। আরও দেখুন নির্দেশিত বিবর্তন প্রোটিন-প্রোটিন মিথস্ক্রিয়া পেলবি নেতা ক্রম প্রতিযোগিতামূলক কৌশলঃ দ্বি-সংকর সিস্টেম এমআরএনএ প্রদর্শন রাইবোজোম প্রদর্শন খামির প্রদর্শন রেফারেন্স আরও পড়া রাসায়নিক প্রকৌশল নির্বাচন বনাম নকশা ইটিএইচ-2 মানব অ্যান্টিবডি ফেজ লাইব্রেরি বাহ্যিক লিঙ্ক আণবিক জীববিজ্ঞান ব্যাকটেরিওফেজ প্রোটিন-প্রোটিন মিথস্ক্রিয়া মূল্যায়ন প্রদর্শন কৌশল