猪精子获能期间蛋白质磷酸化时间依赖性的上调
猪精子获能期间蛋白质磷酸化时间依赖性的上调
通过获能猪精子酪氨酸磷酸化蛋白分离和表达，来确定精子获能的最佳状态。将猪精子悬浮于改良的Tris缓冲液获能培养基中，在体积分数为5% C02孵箱37℃培养，以考马斯亮蓝染液染色的方法来评价精子获能状态，经过SDS - PAGE分离后，进行Western免疫印迹分析，检测获能猪精子间酪氨酸磷酸化蛋白的分布。有27，47 ku的2种蛋白发生酪氨酸磷酸化，其中27 ku的蛋白酪氨酸磷酸化水平自精子体外培养后呈递增趋势，而47 ku的蛋白酪氨酸磷酸化水平在精子培养1.5h时最高，后呈递减趋势，1.5h时获能状态最佳。