稳定表达水通道蛋白-4HEK293细胞株的建立及应用
稳定表达水通道蛋白-4HEK293细胞株的建立及应用
目的：建立稳定表达水通道蛋白一4的HEK293细胞株，并以其检测12例视神经脊髓炎患者血清中是否存在AQP4抗体。方法：从颞叶癫痫患者脑组织提取总RNA，RT-PCR扩增AQP4的cDNA，构建AQP4-绿色荧光蛋白融合表达重组体pEGFP-N1-AQP4，转染HEK293细胞，抗生素筛选联合流式细胞仪分选筛选稳定表达细胞株，RT-PCR和间接免疫荧光法鉴定AQP4的表达，激光共聚焦显微镜观察AQP4在细胞中的定位，并以已建立的细胞为底物……