HPV阳性宫颈癌细胞特异性穿膜肽PTP的穿膜特性研究
HPV阳性宫颈癌细胞特异性穿膜肽PTP的穿膜特性研究
目的：证实宫颈癌细胞特异性细胞膜穿透肽特异性穿膜并优化穿膜条件。方法：将编码人乳头瘤病毒阳性宫颈癌细胞特异性穿膜肽的cDNA片断与编码绿色荧光蛋白的基因片断融合，克隆至原核表达质粒pET15b克隆位点，构建pET15 b-GFP-PTP重组原核表达载体。转化大肠杆菌BL21并表达GFP-PTP融合蛋白，纯化后的GFP-PTP融合蛋白作用于体外培养的HPV阳性官颈癌细胞株HeLa，Siha，肺癌细胞株A549及正常脐静脉内皮细胞ECV304。利用合成的标记短肽探讨优化穿膜条件。结果：荧光显微镜观察发现，与融合蛋白GFP-PTP共孵育后……