海南木莲基因组DNA提取及ISSR反应体系的优化
海南木莲基因组DNA提取及ISSR反应体系的优化
通过对不同提取方法获得的海南木莲DNA质量进行分析，发现采用预先去杂CTAB法提取的海南木莲DNA比其它方法简便、高效，DNA杂质少，得率高；然后通过单因素实验设计对海南木莲ISSR-PCR反应体系进行优化，确立了适于海南木莲的ISSR反应体系，即20 L反应体系中含40 ng模板DNA、0.15 mmol·L^ dNTPs、0.40 mol·L^引物、2.5 mmol·L^ Mg^和1.5 UTaq DNA聚合酶；最后用16个海南木莲样品对优化体系进行检验，结果表明该体系扩增效果稳定，特异性高，可以用于海南木莲分子生物学的进一步研究。