인간 담도계 줄기/전구 세포(hBTSC)는 간경병증 환자의 세포 요법을 위해 사용되고 있다. 이러한 임상 프로그램을 위해 hBTSC의 소싱을 최적화하고 10% 디메틸 설폭사이드(DMSO), -3% 재조합 인간 알부민 및 0.1% 히알루로난으로 보충된 무혈청 쿠보타 배지(KM)를 포함하는 동결보존 방법이 확립되었다. 동결보존된 hBTSC는 새로 단리된 hBTSC와 비교해 시험관내에서 자기 복제, 엄격한(sternness) 형질 및 다분화능과 관련하여 유사하였다. 이들은 기능성 간세포, 담관세포 또는 췌장 섬세포로 분화하여 알부민 분비 또는 인슐린의 글루코오스-유발성 수준의 유사한 수준을 생성할 수 있었다. 동결보존된 hBTSC는 새로 단리된 hBTSC와 비교해 면역손상된 마우스에 동등하게 생착하여, 인간-특이적 유전자 발현 및 뮤린 혈청 중 인간 알부민 수준이 새로 단리된 hBTSC보다 동결보존된 hBTSC의 경우에 더 높은 세포를 생성할 수 있었다. hBTSC의 성공적인 동결보존은 간 질환 치료를 위한 임상 프로그램에 대한 운반상의 이점을 제공하는 hBTSC 세포 은행의 확립을 용이하게 한다.
Human biliary tree stem/progenitors (hBTSCs) are being used for cell therapies of patients with liver cirrhosis. A cryopreservation method was established to optimize sourcing of hBTSCs for these clinical programs and that comprises serum-free Kubota's Medium (KM) supplemented with 10% dimethyl sulfoxide (DMSO), -3% recombinant human albumin and 0.1% hyaluronans. Cryopreserved versus freshly isolated hBTSCs were similar in vitro with respect to self-replication, sternness traits, and multipotency. They were able to differentiate to functional hepatocytes, cholangiocytes or pancreatic islets, yielding similar levels of secretion of albumin or of glucose-inducible levels of insulin. Cryopreserved versus freshly isolated hBTSCs were equally able to engraft into immunocompromised mice yielding cells with human-specific gene expression and human albumin levels in murine serum that were higher for cryopreserved than for freshly isolated hBTSCs. The successful cryoypreservation of hBTSCs facilitates establishment of hBTSCs cell banking offering logistical advantages for clinical programs for treatment of liver disease.