 약학적 제제는 인슐린 유사체 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염을 포함하고, 상기 인슐린 유사체 또는 이의 생리학적으로 허용가능한 염은 짝을 이룬 히스티딘 치환을 A4 및 A8에서 함유하고 A21에서 치환을 선택적으로 함유하는 인슐린 A-사슬 서열을 포함한다. 상기 제제는 6개의 인슐린 유사체 분자당 적어도 4개의 아연 이온을 함유하는 약학적으로 허용가능한 완충액을 추가로 함유한다. 상기 제제는 피하 주사시 지속성 아연-의존적 피하 침착물을 형성한다. 아연이 없는 제제에서, 상기 인슐린 유사체 모노머는 HisA4 및 HisA8 치환을 함유하지 않는 다른 일치하는 인슐린 또는 인슐린 유사체와 비교하여, 인슐린 유사 성장 인자 수용체에 대하여 감소된 활성을 나타내고 동일 종의 인슐린 수용체에 대한 친화성의 적어도 20%를 나타낸다.
A pharmaceutical formulation comprises an insulin analogue or a physiologically acceptable salt thereof, wherein the insulin analogue or a physiologically acceptable salt thereof contains an insulin A-chain sequence that contains paired Histidine substitutions at A4 and A8, and optionally a substitution at A21. The formulation further contains a pharmaceutically acceptable buffer containing at least about 4 zinc ions per 6 insulin analogue molecules. The formulation forms a long-acting zinc-dependent subcutaneous depot upon subcutaneous injection. In a zinc-free formulation, the insulin analogue monomer exhibits decreased affinity for the Insulin-like Growth Factor receptor and at least 20% of the affinity for the insulin receptor of the same species, in comparison to an otherwise identical insulin or insulin analogue that does not contain the HisA4 and HisA8 substitutions.