POLYPEPTIDE CARRIER FOR PRESENTING TARGET POLYPEPTIDE AND USES THEREOFThe invention relates to a polypeptide carrier for presenting a target polypeptide, and use thereof. In particular, the invention relates to a nucleic acid molecule, comprising a nucleotide sequence encoding a polypeptide carrier, and being used for insertion of a nucleotide sequence encoding a target polypeptide. In addition, the invention further relates to a recombinant protein comprising the polypeptide carrier and a target polypeptide. Furthermore, the invention further relates to use of the nucleic acid molecule and the recombinant protein. In addition, the invention further relates to a vaccine or a pharmaceutical composition useful for preventing, alleviating or treating HBV infection or a disease associated with HBV infection (e.g., hepatitis B), comprising a recombinant protein comprising the polypeptide carrier of the invention and an epitope from HBV.A nucleic acid molecule, comprising a nucleotide sequence encoding a polypeptide carrier, or a variant thereof, wherein the variant has an identity of at least 90% (e.g., at least 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%) to the nucleotide sequence, or is capable of hybridizing to the nucleotide sequence under a stringent condition or a high stringent condition, wherein, the polypeptide carrier is selected from: (1) RBHBcAg carrier, which differs from a core antigen protein from roundleaf bat HBV (RBHBcAg; e.g., its amino acid sequence is set forth in SEQ ID NO: 1) in that: (a) one or more amino acid residues (e.g., 1, 2, 3, 4, 5 or 6 amino acid residues; e.g., amino acid residues from positions 78-83, amino acid residues from positions 78-82, amino acid residues from positions 78-81, or amino acid residues from positions 78-80) of the amino acid residues from positions 78-83 at N-terminus of RBHBcAg protein are deleted or substituted with a linker (e.g., a flexible linker; e.g., a linker set forth in SEQ ID NO: 43); and (b) optionally, 1-40 amino acid residues (e.g., 1-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, 30-35, or 35-40 amino acid residues) at C-terminus of RBHBcAg protein are deleted; (2) TBHBcAg carrier, which differs from a core antigen protein from tent-making bat HBV (TBHBcAg; e.g., its amino acid sequence is set forth in SEQ ID NO: 2) in that: (a) one or more amino acid residues (e.g., 1, 2, 3, 4 or 5 amino acid residues; e.g., amino acid residues from positions 80-84, amino acid residues from positions 80-83, or amino acid residues from positions 80-82) of the amino acid residues from positions 80-84 at N-terminus of TBHBcAg protein are deleted or substituted with a linker (e.g., a flexible linker; e.g., a linker set forth in SEQ ID NO: 43); and (b) optionally, 1-35 amino acid residues (e.g., 1-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, or 30-35 amino acid residues) at C-terminus of TBHBcAg are deleted; or (3) HBHBcAg carrier, which differs from a core antigen protein from horseshoe bat HBV (HBHBcAg; e.g., its amino acid sequence is set forth in SEQ ID NO: 3) in that: (a) one or more amino acid residues (e.g., 1, 2, 3, 4, 5 or 6 amino acid residues; e.g., amino acid residues from positions 78-83, amino acid residues from positions 78-82, amino acid residues from positions 78-81, or amino acid residues from positions 78-80) of the amino acid residues from positions 78-83 at N-terminus of HBHBcAg protein are deleted or substituted with a linker (e.g., a flexible linker; e.g., a linker set forth in SEQ ID NO: 43); and (b) optionally, 1-40 amino acid residues (e.g., 1-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, 30-35, or 35-40 amino acid residues) at C-terminus of HBHBcAg protein are deleted;preferably, a restriction enzyme cleavage site is introduced at a position of nucleotides encoding the one or more amino acid residues that are deleted; preferably, a restriction enzyme cleavage site is introduced in the nucleotide sequence encoding the linker, and/or at either or both of the termini thereof; preferably, the polypeptide carrier has an amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 4-9; preferably, the nucleic acid molecule comprises a nucleotide sequence selected from SEQ ID NO: 12-17; preferably, the nucleic acid molecule is used to insert a nucleotide sequence encoding a target polypeptide, for example, the nucleotide sequence encoding the target polypeptide is inserted at a position of nucleotides encoding the one or more amino acid residues that are deleted, or inserted in the nucleotide sequence encoding the linker or at either or both of the termini thereof (e.g., by a restriction enzyme cleavage site); preferably, the nucleic acid molecule further comprises a nucleotide sequence encoding a target polypeptide, wherein the target polypeptide is heterologous relative to the polypeptide carrier, and the nucleotide sequence encoding the target polypeptide is inserted at a position of nucleotides encoding the one or more amino acid residues that are deleted, or is inserted in the nucleotide sequence encoding the linker or at either or both of the termini thereof (e.g., by a restriction enzyme cleavage site); preferably, the target polypeptide is an epitope peptide, for example, an epitope peptide comprising an antigenic epitope from HIV, PDL1 or HBV (particularly human HBV); preferably, the epitope peptide comprises: an epitope (e.g., a linear epitope, such as amino acids from positions 113-135 of HBsAg protein) of HBsAg from human HBV (e.g., HBV genotype A, B, C or D), an epitope of HIV GP120 protein (e.g., a linear epitope, such as amino acids from positions 361-375 of GP120 protein), or an epitope of human PD-L1 (e.g., a linear epitope, such as amino acids from positions 147-160 of human PD-L1 protein); preferably, the target polypeptide has an amino acid sequence selected from SEQ ID NO: 20-22 and 60-62; preferably, the nucleic acid molecule comprises or consists of a nucleotide sequence encoding an am...
타겟 폴리펩티드를 제시하기 위한 폴리펩티드 캐리어 및 이의 용도본 발명은 타겟 폴리펩티드를 제시하기 위한 폴리펩티드 캐리어 및 이의 용도에 관한 것이다. 특히, 본 발명은 폴리펩티드 캐리어를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하고, 타겟 폴리펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드 서열의 삽입에 사용되는 핵산 분자에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 폴리펩티드 캐리어 및 타겟 폴리펩티드를 포함하는 재조합 단백질의 용도에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 폴리펩티드 캐리어를 포함하는 재조합 단백질 및 HBV로부터의 에피토프를 포함하는, HBV 감염 또는 HBV 감염에 관련된 질병(예를 들어, B형 간염)을 예방, 완화 또는 치료하기 위한 약학 조성물 또는 백신에 관한 것이다. 폴리펩티드 캐리어 또는 그의 변이체를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 포함하는 핵산분자로서, 상기 변이체는 상기 뉴클레오티드 서열과 적어도 90%의 상동성을 가지거나(예를 들어, 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%), 엄격 조건(stringent condition) 또는 고 엄격 조건 하에서 상기 뉴클레오티드 서열에 하이브리드할 수 있고, 상기 폴리펩티드 캐리어는 하기로부터 선택되는, 핵산분자:(1) 라운드리프 박쥐 HBV(RBHBcAg; 예를 들어, 그의 아미노산 서열은 서열번호 1에 기재됨)로부터의 코어 항원 단백질과 다음의 점에서 상이한 RBHBcAg 캐리어: (a) RBHBcAg 단백질의 N 말단에서 78-83 위치 아미노산의 하나 이상의 아미노산 잔기(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6 아미노산 잔기; 예를 들어 78-83 위치의 아미노산 잔기, 78-82 위치의 아미노산 잔기, 78-81 위치의 아미노산 잔기, 또는 78-80 위치의 아미노산 잔기)가 결실되거나 링커(예를 들어, 가요성 링커; 예를 들어, 서열번호 43에 기재된 링커)로 치환됨; 그리고 (b) 선택적으로, RBHBcAg 단백질의 C말단의 1-40 아미노산 잔기(예를 들어, 1-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, 30-35 또는 35-40 아미노산 잔기)가 결실됨;(2) 천막박쥐 HBV(TBHBcAg; 예를 들어, 그의 아미노산 서열은 서열번호 2에 기재됨)로부터의 코어 항원 단백질과 다음의 점에서 상이한 TBHBcAg 캐리어: (a) TBHBcAg 단백질의 N 말단에서 80-84 위치 아미노산의 하나 이상의 아미노산 잔기(예를 들어, 1, 2, 3, 4 또는 5 아미노산 잔기; 예를 들어 80-84 위치의 아미노산 잔기, 80-83 위치의 아미노산 잔기, 또는 80-82 위치의 아미노산 잔기)가 결실되거나 링커(예를 들어, 가요성 링커; 예를 들어, 서열번호 43에 기재된 링커)로 치환됨; 그리고 (b) 선택적으로, TBHBcAg 단백질의 C말단의 1-35 아미노산 잔기(예를 들어, 1-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, 또는 30-35 아미노산 잔기)가 결실됨; 또는(3) 관박쥐 HBV(HBHBcAg; 예를 들어, 그의 아미노산 서열은 서열번호 3에 기재됨)로부터의 코어 항원 단백질과 다음의 점에서 상이한 HBHBcAg 캐리어: (a) HBHBcAg 단백질의 N- 말단의 78-83 위치 아미노산의 하나 이상의 아미노산 잔기(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6 아미노산 잔기; 예를 들어 78-83 위치의 아미노산 잔기, 78-82 위치의 아미노산 잔기, 78-81 위치의 아미노산 잔기, 또는 78-80 위치의 아미노산 잔기)가 결실되거나 링커(예를 들어, 가요성 링커; 예를 들어, 서열번호 43에 기재된 링커)로 치환됨; 그리고 (b) 선택적으로, HBHBcAg 단백질의 C말단의 1-40 아미노산 잔기(예를 들어, 1-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, 30-35 또는 35-40 아미노산 잔기)가 결실됨;바람직하게는, 결실된 하나 이상의 아미노산 잔기를 코딩하는 뉴클레오티드의 위치에 제한효소 절단 부위가 도입됨;바람직하게는, 제한효소 절단 부위가 상기 링커를 코딩하는 뉴클레오티드 서열 및/또는 그의 한쪽 또는 양쪽 말단에 도입됨;바람직하게는, 상기 폴리펩티드 캐리어는 서열번호 4 내지 9로부터 선택되는 아미노산 서열을 가짐;바람직하게는, 상기 핵산 분자는 서열번호 12 내지 17로부터 선택되는 뉴클레오티드 서열을 포함함;바람직하게는, 상기 핵산 분자는 타겟 폴리펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 삽입하는데 사용되며, 예를 들어, 타겟 폴리펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은, 결실된 하나 이상의 아미노산 잔기를 코딩하는 뉴클레오티드의 위치에 삽입되거나 링커를 코딩하는 뉴클레오티드의 서열 또는 그의 한쪽 또는 양쪽 말단에 삽입됨(예를 들어, 제한효소 절단 부위에 의해); 바람직하게는, 상기 핵산 분자는 타겟 폴리펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드 서열을 추가로 포함하고, 상기 타겟 폴리펩티드는 폴리펩티드 캐리어에 대해 이종이며, 상기 타겟 폴리펩티드를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 결실된 하나 이상의 아미노산 잔기를 코딩하는 뉴클레오티드 위치에 삽입되거나 또는 링커를 코딩하는 뉴클레오티드 또는 그의 한쪽 또는 양쪽 말단에 삽입됨(예를 들어, 제한효소 절단 부위에 의해); 바람직하게는, 상기 타겟 폴리펩티드는 에피토프 펩티드, 예를 들어, HIV, PDL1 또는 HBV (특히 인간 HBV)로부터의 항원성 에피토프를 포함하는 에피토프 펩티드; 바람직하게는, 상기 에피토프 펩티드는 인간 HBV(예를 들어, HBV 유전자형 A, B, C 또는 D)로부터의 HBsAg의 에피토프(예를 들어, HBsAg 단백질의 113-135 위치로부터의 아미노산과 같은 선형 에피토프), HIV GP120 단백질의 에피토프(예를 들어, GP120 단백질의 361-375 위치로부터의 아미노산과 같은 선형 에피토프), 또는 인간 PD-L1의 에피토프(예를 들어, 인간 PD-L1의 147-160 위치로부터의 아미노산과 같은 선형 에피토프)를 포함함; 바람직하게는, 타겟 폴리펩티드는 서열번호 20 내지 22 및 60 내지 62로부터 선택되는 아미노산 서열을 가지며; 바람직하게는, 핵산 분자는 서열번호 23 내지 40 및 69 내지 74로부터 선택되는 아미노산 서열을 코딩하는 뉴클레오티드 서열로 구성되거나, 이를 포함함.