AQUEOUS BIOMOLECULE COUPLING ON CO2-PLASMA-ACTIVATED SURFACESThis disclosure provides, e.g., methods for coupling an entity to a solid substrate. The method can comprise treating the substrate with a plasma, e.g., a CO2 plasma, to increase its reactivity. The entity can be, e.g., a biological polymer that binds a microbe. Substrates produced by these methods can be used in a variety of applications, including hemodialysis and diagnostic assays.A method of making a substrate having an entity (e.g., a polypeptide, e.g., a glycopolypeptide, e.g., a glycoprotein, a nucleic acid, a carbohydrate, e.g., a polysaccharide, a biological polymer, a small molecule, a peptidomimetic, a drug, or a moiety that can interact with, e.g., specifically bind, a pathogenic or disease molecule, e.g., bind a glycopolypeptide, e.g., a glycoprotein) attached thereto, the method comprising:I:i) contacting the substrate with a plasma to form a modified substrate comprising a plasma-generated-moiety (PGM); andii) contacting the entity (e.g., a biological polymer, e.g., a polypeptide) with the modified substrate under conditions sufficient for attachment of the entity to the modified substrate;II:i) obtaining a modified substrate comprising a PGM; andii) contacting the entity (e.g., a biological polymer, e.g., a polypeptide) with the modified substrate under conditions sufficient for attachment of the entity to the modified substrate; orIII:i) contacting the substrate with a plasma to form a modified substrate comprising a PGM; andii.a) classifying the modified substrate comprising a PGM as suitable for contacting the entity (e.g., a biological polymer, e.g., a polypeptide) with the modified substrate under conditions sufficient for attachment of the entity to the modified substrate; orii.b) transporting, selling, shipping, transferring control of, or transferring possession of, the modified substrate comprising a PGM to a party for contacting the entity (e.g., a biological polymer, e.g., a polypeptide) with the modified substrate under conditions sufficient for attachment of the entity to the modified substrate;thereby making a substrate having the entity attached thereto,provided that one or more (e.g., 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, or all) of the following:a) the substrate is fluid-permeable, ion-permeable, porous, flexible, autoclavable (e.g., retains structure at above lOOC), or other than polystyrene;b) the substrate comprises less than 90, 80, 70, 60 or 50% polystyrene; c) the substrate comprises polysulfone (PS), polyarylethersulfone (PAES) or polyethersulfone (PES);d) the substrate comprises a structure having a compartment, e.g., a lumen, e.g., the structure comprises a hollow fiber;e) the entity comprises a first member of a specific binding pair; f) the entity comprises an antibody domain, e.g., an Fc domain;g) the entity comprises a fusion protein;h) the entity comprises an opsonin;i) the entity comprises a lectin;j) the entity comprises a subunit of a multimeric protein; ork) an attached entity is cross linked to a second entity (e.g., wherein the second entity is attached to the substrate or wherein the second entity is not attached to the substrate); andprovided that one or more (e.g., 2 or all) of the following:1) the plasma is other than an oxygen plasma (e.g., the plasma is a C02 plasma); m) the modified substrate is not contacted with or derivatized with a crosslinking moiety (e.g., a silane, e.g., (3-Aminopropyl) trimethoxysilane (APTMS)), prior to attachment of the entity; orn) the modified substrate is not contacted with an organic solvent (e.g., an organic alcohol, e.g., ethanol) prior to attachment of the entity.
CO2-플라즈마-활성화된 표면 상에 수성 생분자 커플링본원의 개시내용은 예를 들어, 엔티티를 고체 기판에 커플링시키기 위한 방법을 제공한다. 상기 방법은 기판을 이의 반응성을 증가시키기 위해 플라즈마, 예를 들어, CO2 플라즈마로 처리함을 포함할 수 있다. 상기 엔티티는 예를 들어, 미생물에 결합하는 생물학적 중합체일 수 있다. 이들 방법에 의해 생산된 기판은 혈액투석 및 진단 검정을 포함하는 다양한 응용에 사용될 수 있다.엔티티(entity)(예를 들어, 폴리펩타이드, 예를 들어, 글리코폴리펩타이드, 예를들어, 당단백질, 핵산, 탄수화물, 예를 들어, 폴리사카라이드, 생물학적 중합체, 소분자, 펩티도모사체, 약물, 또는 병원성 또는 질환 분자와 상호작용할 수 있는, 예를 들어, 특이적으로 결합하는, 예를 들어, 글리코폴리펩타이드, 예를 들어, 당단백질과 결합할 수 있는 모이어티)가 부착된 기판을 제조하는 방법으로서, 상기 방법은 하기 단계를 포함하는 방법:I:i) 상기 기판을 플라즈마와 접촉시켜 플라즈마-생성된-모이어티(PGM)를 포함하는 변형된 기판을 형성하는 단계; 및 ii) 상기 엔티티를 상기 변형된 기판에 부착시키기에 충분한 조건하에서 상기 엔티티(예를 들어, 생물학적 중합체, 예를 들어, 폴리펩타이드)를 상기 변형된 기판과 접촉시키는 단계;II:i) PGM을 포함하는 변형된 기판을 수득하는 단계; 및 ii) 상기 엔티티를 상기 변형된 기판에 부착시키기에 충분한 조건하에서 상기 엔티티(예를 들어, 생물학적 중합체, 예를 들어, 폴리펩타이드)를 상기 변형된 기판과 접촉시키는 단계; 또는III:i) 상기 기판을 플라즈마와 접촉시켜 PGM을 포함하는 변형된 기판을 형성하는 단계; 및ii) a) 상기 엔티티를 상기 변형된 기판에 부착시키기에 충분한 조건하에서 상기 엔티티(예를 들어, 생물학적 분자, 예를 들어, 폴리펩타이드)를 상기 변형된 기판과 접촉시키기 위해 적합한 PGM을 포함하는 변형된 기판을 분류하거나;ii) b) 상기 엔티티를 상기 변형된 기판에 부착시키기에 충분한 조건하에서 상기 엔티티(예를 들어, 생물학적 중합체, 예를 들어, 폴리펩타이드)를 상기 변형된 기판과 접촉시키기 위한 파티에 대한 PGM을 포함하는 변형된 기판을 수송, 판매, 선적, 제어 이전 또는 소유 이전시킴으로써;부착된 엔티티를 갖는 기판을 제조하는 단계를 포함하고; 단, 하기 중 하나 이상(예를 들어, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 또는 전부) 이어야 한다:a) 상기 기판은 유체-투과성, 이온-투과성, 다공성, 유연성, 고압증기멸균성 (예를 들어, 100℃ 이상에서 구조를 유지한다), 또는 폴리스티렌 이외의 것이거나;b) 상기 기판은 90, 80, 70, 60 또는 50% 미만의 폴리스티렌을 포함하거나;c) 상기 기판은 폴리설폰(PS), 폴리아릴에테르설폰(PAES) 또는 폴리에테르설폰(PES)을 포함하거나;d) 상기 기판은 격실, 예를 들어, 루멘(lumen)을 갖는 구조를 포함하고, 예를 들어, 상기 구조는 중공 섬유를 포함하거나;e) 상기 엔티티는 특이적 결합 쌍의 제1 구성원을 포함하거나;f) 상기 엔티티는 항체 도메인, 예를 들어, Fc 도메인을 포함하거나;g) 상기 엔티티는 융합 단백질을 포함하거나;h) 상기 엔티티는 옵소닌을 포함하거나;i) 상기 엔티티는 렉틴을 포함하거나;j) 상기 엔티티는 다량체 단백질의 서브유니트를 포함하거나;k) 부착된 엔티티는 제2 엔티티에 가교결합되고(예를 들어, 여기서, 상기 제2 엔티티는 상기 기판에 부착되거나 상기 제2 엔티티는 상기 기판에 부착되어 있지 않다);단, 하기 중 하나 이상(예를 들어, 2 또는 전부) 이어야 한다:l) 상기 플라즈마는 산소 플라즈마 이외의 것이거나(예를 들어, 상기 플라즈마는 CO2 플라스마이다);m) 상기 변형된 기판은 엔티티의 부착 전에 가교결합 모이어티(예를 들어, 실란, 예를 들어, (3-아미노프로필)트리메톡시실란(APTMS))와 접촉되지 않거나 유도체화되지 않거나;n) 상기 변형된 기판은 엔티티의 부착 전에 유기 용매(예를 들어, 유기 알코올, 예를 들어, 에탄올)와 접촉되지 않는다.