ANTIBODIES BINDING TO ILT4The present application relates to antibodies specifically binding to immunoglobulin-like transcript 4 (ILT4), which is also known as LILRB2, LIR2, MIR10, and CD85d, and corresponding nucleic acids, host cells, compositions, and uses. In some embodiments, the antibodies bind specifically to human ILT4, but do not significantly bind to ILT2, ILT3, or ILT5, or to other members of the LILRA or LILRB families.An isolated antibody that binds specifically to human ILT4 (hILT4 or ILT4), the antibody comprising a heavy chain and a light chain, and further comprising one or more of the following characteristics:specific binding to hILT4 (e.g. comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO:108, 109, 111, 112, or 119), e.g., with a KD of 10 8 M or less, or of 10 9 M or less; lack of specific binding to hILT2, hILT3, and/or hILT5;lack of specific binding to one or more members of the LILRA and/or LILRB families;stimulates T cell activation, e.g., in a mixed lymphocyte reaction (MLR) assay, as measured by increased T cell proliferation or IFN-gamma secretion, e.g., as shown in an assay described in the Examples;stimulates differentiation or activation of monocytes into macrophages, e.g., stimulates differentiation of monocytes into pro-inflammatory macrophages, e.g., as shown in an assay described in the Examples;- promotes expression of CD83 and CD86 on human monocyte derived immature dendritic cells (Mo-iDC), e.g., as shown in an assay described in the Examples; enhances IFN-g secretion upon antigen stimulation in a cytomegalovirus (CMV) lysate assay, e.g., as shown in an assay described in the Examples;enhances IFN-g and TNF-a secretion by CD4+ and CD8+ T cells in an allo-mixed lymphocyte reaction (MLR) assay upon CD3 stimulation, e.g., as shown in an assay described in the Examples;inhibits binding of HLA-A and/or HLA-B to ILT4;- binds to 70ITRIRPELVKNGQFHIPSITWEHTGRYGCQY100 (SEQ ID NO: 122) as determined by hydrogen deuterium exchange (HDX), e.g., as shown in an HDX assay described in the Examples;competes for binding to hILT4 with an antibody described herein;- binds specifically to a cyno ILT4 comprising SEQ ID NO: 118, e.g., as shown in a binding assay described in the Examples; inhibits binding of human ILT4 (hILT4) to an ILT4 binding partner, such as an MHC class I molecule, such as HLA-A and HLA-B (for example, inhibits binding of hILT4 to both HLA-A and HLA-B);has an HLA-A and HLA-B binding profile shown in Fig. 28;- has a binding profile as shown in Fig 27;- binds to the following regions of hILT4: (i) 70ITRIRPEL77 (SEQ ID NO: 120) and/or 78VKNGQFHIPSITWEHTGRYGCQY100 (SEQ ID NO: 121); (ii)70ITRIRPELVKNGQFHIPSITWEHTGRYGCQY100 (SEQ ID NO: 122); or (iii) 154ILCKEGEEEHPQCLNSQPHARGSSRAIF181 (SEQ ID NO: 123) and/or425SSPPPTGPIS434 (SEQ ID NO: 124), and, if binding to (i) or (ii), then optionally, not binding significantly to other regions of the extracellular domain of ILT4, such as regions or residues located N-terminal to amino acid 170, wherein the amino acid numbering of hILT4 is that of immature hILT4 (i.e., ILT4 comprising its native signal sequence); andinteracts with one or more (or all of) amino acid residues Lys43, Ile49, Thr50 and Arg5l of mature hILT4 or interacts with one or more (or all of) amino acid residues Gly 117, V all 19, Try 120, Leul34, Lysl36, Glnl49, Prol50, Ilel59, Serl61, Vall62 ,Glyl63, Pro 164, Prol67, Hisl73, Tryl78, Prol83 and Tyrl84 of mature hILT4 or interacts with one or more (or all of) amino acid residues Glu42, Lys43, Gly 76,Cys77, Leu88, Pro9l, Prol83 and Tyrl84 of mature hILT4, as determined by carbene foot-printing, e.g., as described in the Examples.
ILT4에 결합하는 항체본 출원은 LILRB2, LIR2, MIR10, 및 CD85d로도 공지된 이뮤노글로불린-유사 전사체 4 (ILT4)에 특이적으로 결합하는 항체, 및 상응하는 핵산, 숙주 세포, 조성물 및 용도에 관한 것이다. 일부 실시양태에서, 항체는 인간 ILT4에 특이적으로 결합하지만, ILT2, ILT3, 또는 ILT5, 또는 LILRA 또는 LILRB 패밀리의 다른 구성원에는 유의하게 결합하지 않는다.중쇄 및 경쇄를 포함하고, 하기 특징 중 1개 이상을 추가로 포함하는, 인간 ILT4 (hILT4 또는 ILT4)에 특이적으로 결합하는 단리된 항체:- (예를 들어, 서열식별번호: 108, 109, 111, 112, 또는 119의 아미노산 서열을 포함하는) hILT4에, 예를 들어, 10-8 M 이하, 또는 10-9 M 이하의 KD로 특이적으로 결합함;- hILT2, hILT3, 및/또는 hILT5에 대한 특이적 결합이 결여됨;- LILRA 및/또는 LILRB 패밀리의 1개 이상의 구성원에 대한 특이적 결합이 결여됨;- 예를 들어 실시예에 기재된 검정에 제시된 바와 같이, 증가된 T 세포 증식 또는 IFN-감마 분비에 의해 측정된 바와 같이, 예를 들어 혼합 림프구 반응 (MLR) 검정에서 T 세포 활성화를 자극함;- 예를 들어 실시예에 기재된 검정에 제시된 바와 같이, 단핵구의 대식세포로의 분화 또는 활성화를 자극하고, 예를 들어 단핵구의 염증유발 대식세포로의 분화를 자극함;- 예를 들어 실시예에 기재된 검정에 제시된 바와 같이, 인간 단핵구 유래 미성숙 수지상 세포 (Mo-iDC) 상에서의 CD83 및 CD86의 발현을 촉진함;- 예를 들어 실시예에 기재된 검정에 제시된 바와 같이, 시토메갈로바이러스 (CMV) 용해물 검정에서 항원 자극 시 IFN-γ 분비를 증진시킴;- 예를 들어 실시예에 기재된 검정에 제시된 바와 같이, CD3 자극 시 동종-혼합 림프구 반응 (MLR) 검정에서 CD4+ 및 CD8+ T 세포에 의한 IFN-γ 및 TNF-α 분비를 증진시킴;- ILT4에 대한 HLA-A 및/또는 HLA-B의 결합을 억제함;- 예를 들어 실시예에 기재된 수소 중수소 교환 (HDX) 검정에 제시된 바와 같이, HDX에 의해 결정된 바와 같이 70ITRIRPELVKNGQFHIPSITWEHTGRYGCQY100 (서열식별번호: 122)에 결합함;- 본원에 기재된 항체와 hILT4에의 결합에 대해 경쟁함;- 예를 들어 실시예에 기재된 결합 검정에 제시된 바와 같이, 서열식별번호: 118을 포함하는 시노 ILT4에 특이적으로 결합함;- 인간 ILT4 (hILT4)의 ILT4 결합 파트너, 예컨대 MHC 부류 I 분자, 예컨대 HLA-A 및 HLA-B에 대한 결합을 억제함 (예를 들어, hILT4의 HLA-A 및 HLA-B 둘 다에 대한 결합을 억제함);- 도 28에 제시된 HLA-A 및 HLA-B 결합 프로파일을 가짐;- 도 27에 제시된 바와 같은 결합 프로파일을 가짐;- hILT4의 하기 영역: (i) 70ITRIRPEL77 (서열식별번호: 120) 및/또는 78VKNGQFHIPSITWEHTGRYGCQY100 (서열식별번호: 121); (ii) 70ITRIRPELVKNGQFHIPSITWEHTGRYGCQY100 (서열식별번호: 122); 또는 (iii) 154ILCKEGEEEHPQCLNSQPHARGSSRAIF181 (서열식별번호: 123) 및/또는 425SSPPPTGPIS434 (서열식별번호: 124)에 결합하며, (i) 또는 (ii)에 결합하는 경우, 임의로 ILT4의 세포외 도메인의 다른 영역, 예컨대 아미노산 I70에 대해 N-말단에 위치하는 영역 또는 잔기에는 유의하게 결합하지 않음, 여기서 hILT4의 아미노산 넘버링은 미성숙 hILT4 (즉, 그의 천연 신호 서열을 포함하는 ILT4)의 것임; 및- 예를 들어 실시예에 기재된 바와 같이, 카르벤 풋-프린팅에 의해 결정된 바와 같이, 성숙 hILT4의 1개 이상의 (또는 모든) 아미노산 잔기 Lys43, Ile49, Thr50 및 Arg51과 상호작용하거나, 또는 성숙 hILT4의 1개 이상의 (또는 모든) 아미노산 잔기 Gly117, Val119, Try120, Leu134, Lys136, Gln149, Pro150, Ile159, Ser161, Val162 ,Gly163, Pro164, Pro167, His173, Try178, Pro183 및 Tyr184와 상호작용하거나, 또는 성숙 hILT4의 1개 이상의 (또는 모든) 아미노산 잔기 Glu42, Lys43, Gly76, Cys77, Leu88, Pro91, Pro183 및 Tyr184와 상호작용함.