Diketopiperazine forming dipeptidyl linkerThe invention relates to a method for homogeneous solution phase peptide synthesis (HSPPS) of a N-terminal peptide fragment PEP-N and a C-terminal peptide fragment C-PEP, with C- PEP carrying a specific diketopiperazine (DKP) comprising C-terminal protecting group, which contains a handle group HG, with HG being connected to the C-terminus of the peptide fragment; thereby this specific DKP comprising C-terminal protecting group can be selectively cleaved from the peptide as a conventionally used C-terminal protecting group. By the use of this DKP and HG comprising C-terminal protecting group, certain process steps in convergent peptide synthesis based on a combination of HSPPS and solid phase peptide synthesis (SPPS) can be avoided. The invention relates further to a method for the preparation of such specifically protected fragment C-PEP by SPPS by using a linker comprising a specific dipeptide and HG for connecting the growing peptide chain to the resin, which linker forms said DKP group, when the peptide fragment C-PEP is cleaved from the supporting resin; and further to the intermediates of the preparation method.Method (c-pep) for preparing peptide c-pep,c-pep comprises peptidyl pep-c, and the c end of pep-c is by protecting group dkp-pg protection, and dkp-pg comprises handle shape group hg, comprises spacer sg according to circumstances, and diketopiperazine residue dkp;sg is the spacer of known use in the chemistry of peptides;dkp is the diketopiperazine residue derived from dipeptide residue dpr;dpr comprises alpha amino acid residue xaa1 and xaa2;xaa1 is the c terminal amino acid residue of dpr;xaa2 is the n terminal amino acid residue of dpr, and xaa2 has side chain, and this side chain replaces through functional group fg;pep-c is via xaac (1)be connected to hg; xaac is the amino-acid residue of pep-c;xaac (1)in the c end position of index (1) expression pep-c; xaac (1)c terminal amino acid residue for pep-c; hg knownly among the synthetic spps of solid-phase peptide is connected to the handle shape group of solid phase be used to the c end that makes peptide, its allow this c end under the condition that does not make the amido linkage cracking that connects two amino-acid residues in the peptide from the hg cracking;hg is connected directly to fg, or if there is a sg, and then hg is connected to sg and sg is connected to fg;method (c-pep) comprises step (iii);step (iii) comprises reaction (inrifo);reaction (inrifo) is for comprising following reaction: the intramolecularly annulation in peptide pep-c-dkp-l-resin a and scission reaction simultaneously;the pep-c-dkp-l-resin a is the presoma of c-pep and comprises pep-c and resin dkp-l-resin a that wherein pep-c system is connected to the dkp-l-resin a;the dkp-l-resin a comprises resin a and forms the connexon dkp-l of dkp-pg, and wherein resin a system is connected to dkp-l,resin a is known resin as solid phase in spps,dkp-l comprises hg, comprises sg according to circumstances, and dpr, and wherein the c of dpr end carboxylic acid group is the carboxylic acid group of xaa1 and is connected to resin a;the c end carboxylic acid group reaction of the n end amido of intramolecularly cheng huanwei dpr in the reaction (inrifo) and dpr, thus dkp formed, thus make xaa1 simultaneously from the resin a cracking and form dkp-pg, wherein the n of this dpr end amido is the α amido of xaa2;hg selects in some way, so that hg and xaac (1)between key not the reaction (inrifo) during cracking.
디케토피페라진 형성 디펩티딜 링커본 발명은 N-말단 펩티드 단편 PEP-N 및 C-말단 펩티드 단편 C-PEP 의 균일 용액상 펩티드 합성 (HSPPS) 방법에 관한 것이며, 이때 C-PEP 는 핸들기 HG 를 포함하는 C-말단 보호기를 포함하는 특정 디케토피페라진 (DKP) 을 운반하고, 상기 HG 는 펩티드 단편의 C-말단에 연결되며; 그로 인해 C-말단 보호기를 포함하는 상기 특정 DKP 는 통상 사용된 C-말단 보호기로서 펩티드로부터 선택적으로 절단될 수 있다. C-말단 보호기를 포함하는 이러한 DKP 및 HG 를 사용하여, HSPPS 및 고체상 펩티드 합성 (SPPS) 의 조합을 기반으로 하는 수렴적 펩티드 합성에서의 특정 공정 단계가 회피될 수 있다. 본 발명은 또한, 증가하는 펩티드 사슬을 수지에 연결시키기 위해 특정 디펩티드 및 HG 를 포함하는 링커를 사용함으로써 SPPS 에 의해 이러한 특이적으로 보호된 단편 C-PEP 를 제조하는 방법에 관한 것이며 (펩티드 단편 C-PEP 가 지지성 수지로부터 절단되는 경우 링커는 상기 DKP 기를 형성함); 또한 상기 제조 방법의 중간체에 관한 것이다.펩티드 C-PEP 의 제조를 위한 방법(C-PEP) 로서,C-PEP 가 펩티딜 라디칼 PEP-C 를 포함하고, PEP-C 의 C-말단이 보호기 DKP-PG 에 의해 보호되고, DKP-PG 는 핸들기 HG, 임의로는 스페이서기 SG, 및 디케토피페라진 잔기 DKP 를 포함하고; SG 가 펩티드 화학에서 통상 사용되는 스페이서기이고;DKP 가 디펩티드 잔기 DPR 에서 유래한 디케토피페라진 잔기이고;DPR 이 알파 아미노산 잔기 Xaa1 및 Xaa2 를 포함하고; Xaa1 이 DPR 의 C-말단 아미노산 잔기이고; Xaa2 가 DPR 의 N-말단 아미노산 잔기이고, Xaa2 가 측쇄를 갖고, 상기 측쇄가 관능기 FG 에 의해 치환되고; PEP-C 가 XaaC(1) 을 통해 HG 에 연결되고; XaaC 가 PEP-C 의 아미노산 잔기이고; XaaC(1) 에서의 지수 (1) 이 PEP-C 의 C-말단 위치를 나타내고; XaaC(1) 이 PEP-C 의 C-말단 아미노산 잔기이고;HG 가 펩티드에서 2 개의 아미노산 잔기를 연결하는 아미드 결합을 절단하지 않는 조건 하에 HG 로부터 C-말단이 절단될 수 있게 하는, 펩티드의 C-말단을 고체상에 연결시키기 위한 고체상 펩티드 합성 SPPS 에서 통상 사용하는 핸들기이고;HG 가 FG 에 직접 연결되거나, SG 가 존재하는 경우, HG 가 SG 에 연결되고 SG 가 FG 에 연결되고;방법(C-PEP) 가 단계 (iii) 을 포함하고; 단계 (iii) 이 반응(INRIFO) 를 포함하고; 반응(INRIFO) 가 분자내 고리 형성 및 펩티드 PEP-C-DKP-L-ResinA 에서의 동시 절단 반응을 포함하는 반응이고; PEP-C-DKP-L-ResinA 가 C-PEP 의 전구체이며 PEP-C 및 수지 DKP-L-ResinA 를 포함하고, 이때 PEP-C 가 DKP-L-ResinA 에 연결되고; DKP-L-ResinA 가 ResinA 및 DKP-PG 형성 링커 DKP-L 을 포함하고, 이때 ResinA 가 DKP-L 에 연결되고, ResinA 가 SPPS 에서 고체상으로서 통상 사용되는 수지이고, DKP-L 이 HG, 임의로는 SG, 및 DPR 을 포함하고, 이때 Xaa1 의 카르복실산기인 DPR 의 C-말단 카르복실산기가 ResinA 에 연결되고; 반응(INRIFO) 에서의 분자내 고리 형성이 Xaa2 의 알파 아미노기인 DPR 의 N-말단 아미노기의, DPR 의 C-말단 카르복실산기와의 반응이며, 이에 따라 DKP 를 형성하고, 이에 따라 Xaa1 이 동시에 ResinA 로부터 절단되고 DKP-PG 가 형성되고; HG 가, HG 와 XaaC(1) 사이의 결합이 반응(INRIFO) 동안 절단되지 않는 방식으로 선택되는 방법.