PEPTIDE CARRIER FOR DISPLAYING TARGET POLYPEPTIDE AND USE THEREOFThe invention relates to a polypeptide carrier for presenting a target polypeptide, and use thereof. In particular, the invention relates to a nucleic acid molecule, comprising a nucleotide sequence encoding a polypeptide carrier, and being used for insertion of a nucleotide sequence encoding a target polypeptide. In addition, the invention further relates to a recombinant protein comprising the polypeptide carrier and a target polypeptide. Furthermore, the invention further relates to use of the nucleic acid molecule and the recombinant protein. In addition, the invention further relates to a vaccine or a pharmaceutical composition useful for preventing, alleviating or treating HBV infection or a disease associated with HBV infection (e.g., hepatitis B), comprising a recombinant protein comprising the polypeptide carrier of the invention and an epitope from HBV.A nucleic acid molecule, comprising a nucleotide sequence encoding a polypeptide carrier, or a variant thereof, wherein the variant has an identity of at least 90% (e.g., at least 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, or 99%) to the nucleotide sequence, or is capable of hybridizing to the nucleotide sequence under a stringent condition or a high stringent condition, wherein, the polypeptide carrier is selected from the following polypeptide carriers carrying a T cell epitope (such as a human T cell epitope): (1) RBHBcAg carrier, which differs from a core antigen protein from roundleaf bat HBV (RBHBcAg protein; e.g., its amino acid sequence is set forth in SEQ ID NO: 1) by difference comprising the following: (a) one or more amino acid residues (e.g., 1, 2, 3, 4, 5 or 6 amino acid residues; e.g., amino acid residues from positions 78-83, amino acid residues from positions 78-82, amino acid residues from positions 78-81, or amino acid residues from positions 78-80) of the amino acid residues from positions 78-83 at N-terminus of RBHBcAg protein are deleted or substituted with a linker (e.g., a flexible linker; e.g., a linker set forth in SEQ ID NO: 43); and (b) optionally, 1-40 amino acid residues (e.g., 1-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, 30-35, or 35-40 amino acid residues) at C-terminus of RBHBcAg protein are deleted; (2) TBHBcAg carrier, which differs from a core antigen protein from tent-making bat HBV (TBHBcAg protein; e.g., its amino acid sequence is set forth in SEQ ID NO: 2) by difference comprising the following: (a) one or more amino acid residues (e.g., 1, 2, 3, 4 or 5 amino acid residues; e.g., amino acid residues from positions 80-84, amino acid residues from positions 80-83, or amino acid residues from positions 80-82) of the amino acid residues from positions 80-84 at N-terminus of TBHBcAg protein are deleted or substituted with a linker (e.g., a flexible linker; e.g., a linker set forth in SEQ ID NO: 43); and (b) optionally, 1-35 amino acid residues (e.g., 1-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, or 30-35 amino acid residues) at C-terminus of TBHBcAg are deleted; (3) HBHBcAg carrier, which differs from a core antigen protein from horseshoe bat HBV (HBHBcAg protein; e.g., its amino acid sequence is set forth in SEQ ID NO: 3) by difference comprising the following: (a) one or more amino acid residues (e.g., 1, 2, 3, 4, 5 or 6 amino acid residues; e.g., amino acid residues from positions 78-83, amino acid residues from positions 78-82, amino acid residues from positions 78-81, or amino acid residues from positions 78-80) of the amino acid residues from positions 78-83 at N-terminus of HBHBcAg protein are deleted or substituted with a linker (e.g., a flexible linker; e.g., a linker set forth in SEQ ID NO: 43); and (b) optionally, 1-40 amino acid residues (e.g., 1-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, 30-35, or 35-40 amino acid residues) at C-terminus of HBHBcAg protein are deleted; preferably, the T cell epitope is selected from the group consisting of an MHC I restricted human T cell epitope and an MHC II restricted human T cell epitope, such as the MHC I restricted human T cell epitope as set forth in SEQ ID NO: 87, and the MHC II restricted human T cell epitope as set forth in SEQ ID NO: 88 or 89.
타겟 폴리펩티드를 제시하는 펩티드 캐리어 및 이의 용도타겟 폴리펩티드를 제시하는 캐리어 및 이의 용도가 제공된다. 특히, 박쥐로부터의 B형 간염 바이러스의 세 종의 코어 항원을 변형하여, 인간 T 세포 에피토프를 제시하는 단백질 캐리어로 이용되도록 한다. 캐리어를 암호화하는 핵산분자 및 이로써 발현되는 재조합 단백질이 또한 개시된다. 핵산분자 또는 재조합 단백질은 HBV 감염의 예방, 완화, 또는 치료를 위한 백신의 제조에 이용될 수 있다.폴리펩티드 캐리어를 암호화하는 뉴클레오티드 서열, 또는 상기 뉴클레오티드 서열의 변이체를 포함하는 핵산분자로서, 상기 변이체는 상기 뉴클레오티드 서열과 적어도 90% (예, 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%)의 상동성을 갖거나, 또는 상기 뉴클레오티드 서열과 엄격한 조건(stringent condition) 또는 고도의 엄격한 조건(high stringent condition)하에서 혼성화할 수 있고, 상기 폴리펩티드 캐리어는 T 세포 에피토프(인간 T 세포 에피토프를 비롯함)를 운반하는 하기 폴리펩티드 캐리어들로부터 선택되며:(1) 다음을 포함하는 차이점에 의해, 라운드리프 박쥐(roundleaf bat) HBV로부터의 코어 항원 단백질(RBHBcAg 단백질; 예, 이의 아미노산 서열이 서열번호 1에 제시됨)과 상이한, RBHBcAg 캐리어: (a) RBHBcAg 단백질의 N-말단에서 78-83 위치의 아미노산 잔기 중 하나 이상의 아미노산 잔기 (예, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 아미노산 잔기; 예, 78-83 위치의 아미노산 잔기, 78-82 위치의 아미노산 잔기, 78-81 위치의 아미노산 잔기, 또는 78-80 위치의 아미노산 잔기)가 결실되거나 또는 링커로 치환됨 [예, 가요성 링커 (flexible linker); 예, 서열번호 43에 제시된 링커 세트]; 및 (b) RBHBcAg 단백질의 C-말단에서 1-40개의 아미노산 잔기(예, 1-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, 30-35 또는 35-40개의 아미노산 잔기)가 결실되거나 또는 결실되지 않음;(2) 다음을 포함하는 차이점에 의해, 천막 박쥐(tent-making bat) HBV로부터의 코어 항원 단백질(TBHBcAg 단백질; 예, 이의 아미노산 서열이 서열번호 2에 제시됨)과 상이한, TBHBcAg 캐리어: (a) TBHBcAg 단백질의 N-말단에서 80-84 위치의 아미노산 잔기 중 하나 이상의 아미노산 잔기 (예, 1, 2, 3, 4 또는 5개의 아미노산 잔기; 예, 80-84 위치의 아미노산 잔기, 80-83 위치의 아미노산 잔기, 또는 80-82 위치의 아미노산 잔기)가 결실되거나 또는 링커 (예, 가요성 링커; 예, 서열번호 43에 제시된 링커 세트)로 치환됨; 및 (b) TBHBcAg의 단백질의 C-말단에서 1-35개의 아미노산 잔기 (예, 1-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, 또는 30-35개의 아미노산 잔기)가 결실되거나 또는 결실되지 않음; 및(3) 다음을 포함하는 차이점에 의해, 관 박쥐(horseshoe bat) HBV로부터의 코어 항원 단백질(HBHBcAg 단백질; 예, 이의 아미노산 서열이 서열번호 3에 제시됨)과 상이한, HBHBcAg 캐리어: (a) HBHBcAg 단백질의 N-말단에서 78-83 위치의 아미노산 잔기 중 하나 이상의 아미노산 잔기 (예, 1, 2, 3, 4, 5 또는 6개의 아미노산 잔기; 예, 78-83 위치의 아미노산 잔기, 78-82 위치의 아미노산 잔기, 78-81 위치의 아미노산 잔기, 또는 78-80 위치의 아미노산 잔기)가 결실되거나 또는 링커 (예, 가요성 링커; 예, 서열번호 43에 제시된 링커 세트)로 치환됨; 및 (b) HBHBcAg 단백질의 C-말단에서 1-40개의 아미노산 잔기 (예, 1-5, 5-10, 10-15, 15-20, 20-25, 25-30, 30-35 또는 35-40개의 아미노산 잔기)가 결실되거나 결실되지 않음;바람직하게는, 상기 T 세포 에피토프는 서열번호 87에 제시된 MHC I 제한 인간 T 세포 에피토프 (MHC I restricted human T cell epitope), 및 서열번호 88 또는 89에 제시된 MHC II 제한 인간 T 세포 에피토프 (MHC II restricted human T cell epitope)를 비롯한, MHC I 제한 인간 T 세포 에피토프 및 MHC II 제한 인간 T 세포 에피토프로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 핵산분자.