HUMANIZED T CELL MEDIATED IMMUNE RESPONSES IN NON-HUMAN ANIMALSDisclosed herein are non-human animals (e.g., rodents, e.g., mice or rats) genetically engineered to express a humanized T cell co-receptor (e.g., humanized CD4 and/or CD8 (e.g., CD8α and/or CD8β )), a human or humanized T cell receptor (TCR) comprising a variable domain encoded by at least one human TCR variable region gene segment and/or a human or humanized major histocompatibility complex that binds the humanized T cell co-receptor (e.g., human or humanized MHC II (e.g., MHC II α and/or MHC II β chains) and/or MHC I (e.g., MHC I α ) respectively, and optionally human or humanized β2 microglobulin). Also provided are embryos, tissues, and cells expressing the same. Methods for making a genetically engineered animal that expresses at least one humanized T cell co-receptor (e.g., humanized CD4 and/or CD8), at least one humanized MHC that associates with the humanized T cell co-receptor (e.g., humanized MHC II and/or MHC I, respectively) and/or the humanized TCR are also provided. Methods for using the genetically engineered animals that mount a substantially humanized T cell immune response for developing human therapeutics are also provided.A genetically modified non-human animal, comprising(a) a chimeric CD4 co-receptor, and/or a chimeric CD8 co-receptor comprising a chimeric CD8 a polypeptide and a chimeric CD8 polypeptide,wherein the chimeric CD4 co-receptor is encoded by a first nucleotide sequence, the chimeric CD8 a polypeptide is encoded by a second nucleotide sequence, and the chimeric CD8 polypeptide is encoded by a third nucleotide sequence,wherein the chimeric CD4 co-receptor comprises the extracellular portion, or a part thereof, of human CD4 and at least transmembrane and cytoplasmic domains of a non-human CD4 co-receptor,wherein the chimeric CD8 polypeptide comprises the extracellular portion, or a part thereof, of human CD8 and at least the transmembrane and cytoplasmic domains of a non-human CD8 ,wherein the chimeric CD8 polypeptide comprises the extracellular portion, or a part thereof, of human CD8 and at least the transmembrane and cytoplasmic domains of non-human Οϋ8β;(b) a humanized TCR a chain and a humanized TCR β chain,wherein the humanized TCR a chain is derived from an unrearranged T cell receptor (TCR) a variable gene locus comprising at least one human V segment and at least one human J segment, operably linked to a non-human TCRa constant gene sequence, and the humanized TCR β chain is derived from an unrearranged TCR variable gene locus comprising at least one human νβ segment, at least one human ϋβ segment, and at least one human ϋβ segment, operably linked to a non-human TCR constant gene sequence; and optionally,(c) a chimeric MHC II complex comprising a chimeric MHC II a polypeptide and a chimeric MHC II β polypeptide, and/or a chimeric MHC I polypeptide,wherein the chimeric MHC II a polypeptide is encoded by a first nucleic acid sequence, the chimeric MHC II β polypeptide is encoded by a second nucleic acid sequence, and the chimeric MHC I polypeptide is encoded by a third nucleic acid sequence, wherein the chimeric MHC II a polypeptide comprises the extracellular portion (or part thereof) of a human HLA class II a polypeptide and at least the transmembrane and cytoplasmic domains of a non-human MHC I I a polypeptide, wherein the chimeric MHC II β polypeptide comprises the extracellular portion (or part thereof) of a human HLA class II β polypeptide and at least the transmembrane and cytoplasmic domains of a non-human MHC I I β polypeptide,wherein the chimeric MHC I polypeptide comprises the extracellular portion (or part thereof) of a human HLA class I polypeptide and the transmembrane and cytoplasmic domains of a non-human MHC I polypeptide, andwherein the chimeric MHC II complex associates with the chimeric CD4 co-receptor and/or the chimeric MHC I polypeptide associates with the chimeric CD8 co-receptor.
비인간 동물에서의 인간화 T 세포 매개 면역반응인간화 T 세포 보조 수용체(예를 들어, 인간화 CD4 및/또는 CD8(예를 들어, CD8α 및/또는 CD8β)), 적어도 하나의 인간 TCR 가변 영역 유전자 단편에 의해 코딩되는 가변 도메인을 포함하는 인간 또는 인간화 T 세포 수용체(TCR) 및/또는 인간화 T 세포 보조 수용체에 결합하는 인간 또는 인간화 주요 조직적합성 복합체(예를 들어, 각각 인간 또는 인간화 MHC II(예를 들어, MHC II α 및/또는 MHC II β 쇄) 및/또는 MHC I(예를 들어, MHC Iα), 및 임의로 인간 또는 인간화 β2 마이크로글로불린)를 발현하도록 유전자 조작된 비인간 동물(예를 들어, 설치류, 예를 들어 마우스 또는 래트)가 본 명세서에 개시된다. 또한 상술한 것을 발현하는 배아, 조직 및 세포가 제공된다. 적어도 하나의 인간화 T 세포 보조 수용체(예를 들어, 인간화 CD4 및/또는 CD8), 인간화 T 세포 보조 수용체와 결합하는 적어도 하나의 인간화 MHC(예를 들어, 각각 인간화 MHC II 및/또는 MHC I) 및/또는 인간화 TCR을 발현하는 유전자 조작 동물을 생산하는 방법도 제공된다. 인간 치료제를 개발하기 위해 실질적인 인간화 T 세포 면역반응을 일으키는 유전자 조작 동물을 사용하는 방법도 제공된다.(a) 키메라 CD4 보조 수용체, 및/또는 키메라 CD8α 폴리펩타이드 및 키메라 CD8β 폴리펩타이드를 포함하는 키메라 CD8 보조 수용체- 여기서, 키메라 CD4 보조 수용체는 제1 뉴클레오타이드 서열에 의해 코딩되고, 키메라 CD8α 폴리펩타이드는 제2 뉴클레오타이드 서열에 의해 코딩되며, 키메라 CD8β 폴리펩타이드는 제3 뉴클레오타이드 서열에 의해 코딩되고, 키메라 CD4 보조 수용체는 인간 CD4의 세포외 부분 또는 이의 부분 및 비인간 CD4 보조 수용체의 적어도 막관통 및 세포질 도메인을 포함하며,키메라 CD8α 폴리펩타이드는 인간 CD8α의 세포외 부분 또는 이의 부분 및 비인간 CD8α의 적어도 막관통 및 세포질 도메인을 포함하고,키메라 CD8β 폴리펩타이드는 인간 CD8β의 세포외 부분 또는 이의 부분 및 비인간 CD8β의 적어도 막관통 및 세포질 도메인을 포함함 -;(b) 인간화 TCRα 쇄 및 인간화 TCRβ 쇄- 여기서, 인간화 TCRα 쇄는 비인간 TCRα 불변 유전자 서열에 작동가능하게 연결되는 적어도 하나의 인간 Vα 세그먼트 및 적어도 하나의 인간 Jα 세그먼트를 포함하는 재배열되지 않은 T 세포 수용체(TCR)α 가변 유전자좌로부터 유래되고, 인간화 TCRβ 쇄는 비인간 TCRβ 불변 유전자 서열에 작동가능하게 연결되는 적어도 하나의 인간 Vβ 세그먼트, 적어도 하나의 인간 Dβ 세그먼트 및 적어도 하나의 인간 Jβ 세그먼트를 포함하는 재배열되지 않은 TCRβ 가변 유전자좌로부터 유래됨 -; 및 임의로,(c) 키메라 MHC II α 폴리펩타이드 및 키메라 MHC II β 폴리펩타이드를 포함하는 키메라 MHC II 복합체, 및/또는 키메라 MHC I 폴리펩타이드- 여기서, 키메라 MHC II α 폴리펩타이드는 제1 핵산 서열에 의해 코딩되고, 키메라 MHC II β 폴리펩타이드는 제2 핵산 서열에 의해 코딩되며, 키메라 MHC I 폴리펩타이드는 제3 핵산 서열에 의해 코딩되고,키메라 MHC II α 폴리펩타이드는 인간 HLA 클래스 II α 폴리펩타이드의 세포외 부분(또는 이의 부분) 및 비인간 MHC II α 폴리펩타이드의 적어도 막관통 및 세포질 도메인을 포함하며,키메라 MHC II β 폴리펩타이드는 인간 HLA 클래스 II β 폴리펩타이드의 세포외 부분(또는 이의 부분) 및 비인간 MHC II β 폴리펩타이드의 적어도 막관통 및 세포질 도메인을 포함하고,키메라 MHC I 폴리펩타이드는 인간 HLA 클래스 I 폴리펩타이드의 세포외 부분(또는 이의 부분) 및 비인간 MHC I 폴리펩타이드의 막관통 및 세포질 도메인을 포함하며,키메라 MHC II 복합체는 키메라 CD4 보조 수용체와 결합하고/하거나, 키메라 MHC I 폴리펩타이드는 키메라 CD8 보조 수용체와 결합함 - 를 포함하는 유전자 변형 비인간 동물.