write a sub-section heading for the following results:"A KMD with a transmission ratio near 100% could be misunderstood as an essential gene (Fig 1A). To seek for potential KMDs lurking in the genome of S. pombe, we investigated the disagreement between homozygous and heterozygous deletion analysis from previous datasets (data S1). mug135 (meiotically upregulated gene) was previously annotated ‘essential’ since mug135Δ haploid offspring from mug135(+)/mug135Δ are inviable(16). However, no meiotic defect was reported for mug135Δ/mug135Δ(17,18), raising mug135 a potential selfish KMD. We independently deleted mug135 in the haploid lab strain and observed no overt defect. Diploids lacking both mug135 copies also exhibited normal spore viability (Fig. 1B). However, mug135(+)/mug135Δ heterozygotes mainly give rise to a 2:2 pattern and the viable colonies are almost always mug135(+) (Fig. 1B). These results confirm that mug135 is actually a KMD, dispensable when homozygous, while skewing transmission ratio in heterozygotes. According to this characteristic, we renamed mug135 as tdk1 (transmission-distorting killer). 

tdk1 locates on the left arm of chromosome III and contains a single 1074-nt-long open reading frame (ORF) (Fig. 1C and fig. S1). Through inspecting the Illunima sequencing data of 161 natural isolates, we found that tdk1 has fixed in all these natural strains(19). Since the repeat region in the middle is challenging to assemble and seems versatile, we constructed a haplotype tree of tdk1 from 56 typical haploid strain according to single-nucleotide polymorphisms (SNPs) in the non-repeat region. There are eight haplotypes in total, forming three main types—one including tdk1from lab strain, one containing six nonsynonymous mutations (S65A, R102K, E230D, I235M, R255K and D288E) and the other with three nonsynonymous mutations (K50R, D241Y and G319E) (hereafter referred to as tdk1(6SNP) and tdk1(3SNP)) (fig. S2A). We picked two strains of tdk1(6SNP) type and two of tdk1(3SNP), manipulated them into heterothallic, and found that neither tdk1(6SNP) in JB939 or JB953 is able to distort transmission ratio (fig. S2B). Nevertheless, both tdk1(3SNP) from JB1180 and JB1206 are still active killers (fig. S2C). We then introduced these six mutations into lab strain and found that tdk1(6SNP) is not an active killer in reference strain, but shows resistance to killing by tdk1 (Fig. 2A). In other words, the six nonsynonymous mutations of tdk1(6SNP) from natural populations has rendered tdk1 a resistant type.

To study the molecular mechanism of tdk1, we ectopically integrated plasmids containing tdk1 gene under its endogenous promoter into tdk1Δ strain. tdk1 inserted at ade6 locus on the right arm of chromosome III or leu1 locus on chromosome II both distort transmission ratio efficiently (Fig. 1, C and D). The observation that no specific target locus is required for killing action of tdk1 and the locus-independent manner point to the poison-antidote model. When the start-codon was mutated, tdk1 became incapable of killing siblings with no tdk1 insertion and fails to resist the toxicity from tdk1 (Fig. 1D). Additively, codon-scrambled tdk1 driven by the promoter of another meiotically upregulated gene and terminated by the terminator of a constitutive gene (mug24p-tdk1(SCR)-ADH1t) also distort transmission ratio efficiently (fig. S3A), and no in-frame isoform was detected by western blotting against Tdk1 (fig. S3, B and C), ruling out the participation of transcripts other than Tdk1 polypeptide. Taken together, these results demonstrate that tdk1 is a single-gene selfish killer, and the same Tdk1 polypeptide performs both as a poison and antidote. 

Interestingly, tdk1(+) and tdk1Δ spores from tdk1(+)/tdk1Δ are indistinguishable and germinate properly, differing from ‘spore killers’ which disable spores (Fig. 1, F and G, movies S1 and S2). A selective germination system was designed to examine the respective phenotype of tdk1(+) and tdk1Δ cells during spore germination (fig. S4A). Live-cell imaging revealed that although tdk1Δ spores germinate normally, 80.6% of them displayed severe defect during the first mitosis after germination. Chromosome segregation of tdk1Δ cells is largely hindered, leading to high level of nuclear displacement (61.2%) or "cut" phenotype (19.4%) (Fig. 1, F and G, movies S1 and S2). These results suggest that tdk1kills non-carrier siblings by preventing chromosome segregation during developmental growth rather than by disabling spores."
다음 결과에 대한 하위 섹션 제목을 작성합니다: "100%에 가까운 전달률을 가진 KMD는 필수 유전자로 오해될 수 있습니다(그림 1A). S. 폼베의 게놈에 숨어 있는 잠재적 KMD를 찾기 위해 이전 데이터 세트(데이터 S1)에서 동형접합체와 이형접합체 결실 분석 간의 불일치를 조사했습니다. mug135(메오틱 업레귤레이션 유전자)는 이전에 mug135(+)/mug135Δ의 일배체 자손이 불가능하므로 '필수'라는 주석이 달렸었습니다(16). 그러나 mug135Δ/mug135Δ에 대한 감수성 결함은 보고되지 않았으며(17,18), mug135는 잠재적인 이기적 KMD로 제기되었습니다. 우리는 일배체 실험실 균주에서 mug135를 독립적으로 제거했지만 명백한 결함은 관찰되지 않았습니다. mug135 사본이 모두 결여된 이배체도 포자 생존력이 정상적으로 나타났습니다(그림 1B). 그러나 mug135(+)/mug135Δ 이형 접합체는 주로 2:2 패턴을 생성하며 생존 가능한 콜로니는 거의 항상 mug135(+)입니다(그림 1B). 이러한 결과는 mug135가 실제로 동형접합 시에는 존재하지 않는 KMD이며, 이형접합 시에는 전달 비율을 왜곡한다는 것을 확인시켜 줍니다. 이러한 특성에 따라 mug135의 이름을 tdk1(전송 왜곡 킬러)로 변경했습니다. tdk1은 염색체 III의 왼쪽 팔에 위치하며 1074-nt 길이의 단일 오픈 리딩 프레임(ORF)을 포함합니다(그림 1C 및 그림 S1). 161개 자연 분리주의 일루니마 시퀀싱 데이터를 검사한 결과, 모든 자연 균주에서 tdk1이 고정되어 있는 것을 발견했습니다(19). 중간에 있는 반복 영역은 조립이 어렵고 다양한 것으로 보이기 때문에 비반복 영역의 단일염기다형성(SNP)에 따라 56개의 전형적인 일배체 균주에서 tdk1의 일배체형 트리를 구성했습니다. 총 8개의 일배체형은 실험실 균주에서 추출한 tdk1을 포함하여 6개의 비동일 돌연변이(S65A, R102K, E230D, I235M, R255K, D288E)가 있는 유형과 3개의 비동일 돌연변이(K50R, D241Y, G319E)(이하 tdk1(6SNP) 및 tdk1(3SNP))를 포함하는 3가지 주요 유형을 형성합니다(그림 S2A). 우리는 tdk1(6SNP) 유형의 균주 두 개와 tdk1(3SNP) 유형의 균주 두 개를 골라 이형접합체로 조작한 결과, JB939 또는 JB953의 tdk1(6SNP) 모두 전송률을 왜곡할 수 없다는 것을 확인했습니다(그림 S2B). 그럼에도 불구하고 JB1180과 JB1206의 tdk1(3SNP)는 모두 여전히 활성 킬러입니다(그림 S2C). 그런 다음 이 6개의 돌연변이를 실험실 균주에 도입한 결과, tdk1(6SNP)은 참조 균주에서는 활성 킬러가 아니지만 tdk1에 의한 사멸에 저항성을 보인다는 것을 발견했습니다(그림 2A). 즉, 자연 개체군에서 발견한 6개의 비동일성 돌연변이(6SNP)가 tdk1을 내성 유형으로 만든 것입니다.tdk1의 분자적 기전을 연구하기 위해 내인성 프로모터 아래에 tdk1 유전자가 포함된 플라스미드를 tdk1Δ 균주에 이소성적으로 삽입한 결과, 염색체 III의 오른쪽 팔에 있는 ade6 유전자좌 또는 염색체 II의 leu1 유전자좌에 삽입된 tdk1은 모두 효율적으로 전달율을 왜곡하는 것을 확인했습니다(그림 1, C 및 D). tdk1의 살상 작용에 특정 표적 유전자좌가 필요하지 않다는 관찰과 유전자좌에 독립적인 방식은 독-해독제 모델을 가리킵니다. 시작 코돈이 돌연변이를 일으켰을 때, tdk1이 삽입되지 않은 형제 자매를 죽일 수 없게 되었고, tdk1의 독성에 저항하지 못했습니다(그림 1D). 또한, 다른 메오이오틱 상향 조절 유전자의 프로모터에 의해 구동되고 구성 유전자의 터미네이터에 의해 종결되는 코돈 스크램블 된 tdk1 (mug24p-tdk1 (SCR)-ADH1t)도 전송 비율을 효율적으로 왜곡하며 (그림 S3A), Tdk1에 대한 웨스턴 블롯팅에서 프레임 내 이소형이 검출되지 않았습니다 (그림 S3, B 및 C), Tdk1 폴리펩티드 이외의 전사의 참여를 배제합니다. 이러한 결과를 종합하면, tdk1은 단일 유전자 이기적 킬러이며 동일한 Tdk1 폴리펩타이드가 독과 해독제 역할을 모두 수행한다는 것을 보여줍니다. 흥미롭게도, 포자를 무력화시키는 '포자 킬러'와는 달리 tdk1(+)/tdk1Δ의 포자는 구별이 불가능하고 제대로 발아합니다(그림 1, F 및 G, 동영상 S1 및 S2). 포자가 발아하는 동안 tdk1(+) 세포와 tdk1Δ 세포의 각각의 표현형을 조사하기 위해 선택적 발아 시스템을 설계했습니다(그림 S4A). 살아있는 세포 이미징 결과, tdk1Δ 포자는 정상적으로 발아하지만 80.6%가 발아 후 첫 유사 분열 중에 심각한 결함을 보였습니다. tdk1Δ 세포의 염색체 분리가 크게 방해되어 높은 수준의 핵 변위(61.2%) 또는 "절단" 표현형(19.4%)으로 이어집니다(그림 1, F 및 G, 동영상 S1 및 S2). 이러한 결과는 tdk1이 포자를 비활성화하기보다는 발달 성장 중에 염색체 분리를 방지하여 비보균자 형제를 죽인다는 것을 시사합니다."