HbA1c MEASUREMENT METHOD USING AMADORIASE ACTING ON GLYCATED PEPTIDESThis invention provides an amadoriase that can react with a wide variety of glycated peptides generated upon hydrolysis of the β chain of hemoglobin A1c (HbA1c) to generate hydrogen peroxide, a method for measurement of HbAlc using such amadoriase, and a reagent kit for measurement of HbAlc using such amadoriase. Provided is an amadoriase obtained by substitution of one or more amino acids at positions corresponding to amino acids selected from the group consisting of amino acids 62, 63, 102, 106, 110, 113, and 355 in the amino acid sequence of the amadoriase derived from the genus Coniochaeta or the like which amadoriase is capable of oxidizing a wide variety of glycated peptides to generate hydrogen peroxide. Further provided is a method for measurement of HbAlc comprising using such amadorise as well as a reagent kit for measurement of HbAlc comprising such amadoriase. This invention can provide a method for measurement of HbAlc that enables quantification of HbAlc to be performed rapidly, simply, and accurately with the use of a small amount of a protease and a kit used for such measurement. This invention can also provide a method for measurement of HbAlc that enables quantification of HbAlc to be performed rapidly, simply, and accurately, with high sensitivity with the use of a small amount of a protease and a kit used for such measurement.A method for measurement of α-fructosyl oligopeptide in a sample, said method comprising allowing an amadoriase capable of reacting with one or more α-fructosyl oligopeptides selected from among αF3P to αF16P below to react with a sample comprising one or more α-fructosyl oligopeptides selected from among αF3P to αF16P and measuring the amount of hydrogen peroxide generated or enzyme consumed in such reaction: α-fructosyl-valyl-histidyl-leucine (αF3P); α-fructosyl-valyl-histidyl-leucyl-threonine (αF4P); α-fructosyl-valyl-histidyl-leucyl-threonyl-proline (αF5P); α-fructosyl-valyl-histidyl-leucyl-threonyl-proryl-glutamic acid (αF6P); α-fructosyl-valyl-histidyl-leucyl-threonyl-proryl-glutamyl-glutamic acid (αF7P); α-fructosyl-valyl-histidyl-leucyl-threonyl-proryl-glutamyl-glutamyl-lysine (αF8P); α-fructosyl-valyl-histidyl-leucyl-threonyl-proryl-glutamyl-glutamyl-lysyl-serine (αF9P); α-fructosyl-valyl-histidyl-leucyl-threonyl-proryl-glutamyl-glutamyl-lysyl-seryl-alanine (αF10P); α-fructosyl-valyl-histidyl-leucyl-threonyl-proryl-glutamyl-glutamyl-lysyl-seryl-alanyl-valine (αF11P); α-fructosyl-valyl-histidyl-leucyl-threonyl-proryl-glutamyl-glutamyl-lysyl-seryl-alanyl-valyl-threonine (αF12P); α-fructosyl-valyl-histidyl-leucyl-threonyl-proryl-glutamyl-glutamyl-lysyl-seryl-alanyl-valyl-threonyl-alanine (αF13P); α-fructosyl-valyl-histidyl-leucyl-threonyl-proryl-glutamyl-glutamyl-lysyl-seryl-alanyl-valyl-threonyl-alanyl-leucine (αF14P); α-fructosyl-valyl-histidyl-leucyl-threonyl-proryl-glutamyl-glutamyl-lysyl-seryl-alanyl-valyl-threonyl-alanyl-leucyl-tryptophane (αF15P); and α-fructosyl-valyl-histidyl-leucyl-threonyl-proryl-glutamyl-glutamyl-lysyl-seryl-alanyl-valyl-threonyl-alanyl-leucyl-tryptophyl-glycine (αF16P).
당화 펩티드에 작용하는 아마도리아제를 이용한 HbA1c 측정법헤모글로빈 A1c(HbA1c)의 β쇄를 가수분해하여 발생하는 다종다양한 당화 펩티드에 작용하여 과산화수소를 생성하는 것을 특징으로 하는 아마도리아제를 제공하고, 이를 이용한 HbA1c의 측정 방법 및 측정 시약 키트를 제공한다. 코니오카에타(Coniochaeta) 속 등 유래의 아마도리아제의 62위, 63위, 102위, 106위, 110위, 113위, 355위로 이루어지는 군에서 선택되는 아미노산에 대응하는 위치에서 하나 또는 그 이상의 아미노산 잔기를 치환함으로써 얻어지는 아마도리아제로서, 다종다양한 당화 펩티드를 산화하여 과산화수소를 생성하는 것을 특징으로 하는 아마도리아제를 이용한 HbA1c의 측정 방법 및 이 아마도리아제를 포함하는 측정 시약 키트. 적은 프로테아제의 처방량으로 HbA1c를 신속, 간편하고 정밀도 높게 정량할 수 있는 측정 방법, 측정 키트, 또는 HbA1c를 신속, 간편, 고정밀도이고 고감도로 정량할 수 있는 측정 방법, 측정 키트를 제공할 수 있다.이하의 αF3P~αF16P 중 어느 하나 이상을 포함하는 시료에 αF3P~αF16P 중 어느 하나 이상의 α-프럭토실 올리고펩티드에 작용하는 아마도리아제를 작용시키고, 그 작용에 의해 생성되는 과산화수소 또는 소비되는 산소를 측정하는 것을 특징으로 하는 시료 중의 α-프럭토실 올리고펩티드의 측정 방법: α-프럭토실 발릴 히스티딜 류신(αF3P), α-프럭토실 발릴 히스티딜 류실 트레오닌(αF4P), α-프럭토실 발릴 히스티딜 류실 트레오닐 프롤린(αF5P), α-프럭토실 발릴 히스티딜 류실 트레오닐 프롤릴 글루타민산(αF6P), α-프럭토실 발릴 히스티딜 류실 트레오닐 프롤릴 글루타밀 글루타민산(αF7P), α-프럭토실 발릴 히스티딜 류실 트레오닐 프롤릴 글루타밀 글루타밀 리신(αF8P), α-프럭토실 발릴 히스티딜 류실 트레오닐 프롤릴 글루타밀 글루타밀 리실 세린(αF9P), α-프럭토실 발릴 히스티딜 류실 트레오닐 프롤릴 글루타밀 글루타밀 리실 세릴 알라닌(αF10P),α-프럭토실 발릴 히스티딜 류실 트레오닐 프롤릴 글루타밀 글루타밀 리실 세릴 알라닐 발린(αF11P), α-프럭토실 발릴 히스티딜 류실 트레오닐 프롤릴 글루타밀 글루타밀 리실 세릴 알라닐 발릴 트레오닌(αF12P), α-프럭토실 발릴 히스티딜 류실 트레오닐 프롤릴 글루타밀 글루타밀 리실 세릴 알라닐 발릴 트레오닐 알라닌(αF13P), α-프럭토실 발릴 히스티딜 류실 트레오닐 프롤릴 글루타밀 글루타밀 리실 세릴 알라닐 발릴 트레오닐 알라닐 류신(αF14P), α-프럭토실 발릴 히스티딜 류실 트레오닐 프롤릴 글루타밀 글루타밀 리실 세릴 알라닐 발릴 트레오닐 알라닐 류실 트립토판(αF15P), α-프럭토실 발릴 히스티딜 류실 트레오닐 프롤릴 글루타밀 글루타밀 리실 세릴 알라닐 발릴 트레오닐 알라닐 류실 트립토필 글리신(αF16P).