ADJUVANT EFFECT OF THE TLR1/2 AGONIST DIPROVOCIM SYNERGIZES WITH CHECKPOINT-INHIBITING ANTIBODIES TO ELIMINATE DISEASEA potent human and mouse Toll-like receptor (TLR)1/TLR2 agonist was identified and optimized, Diprovocim, which exhibited an EC50 of 110 pM in human THP-1 cells and 1.3 nM in primary mouse peritoneal macrophages. In mice, Diprovocim-adjuvanted ovalbumin immunization promoted antigen-specific humoral and CTL responses, and synergized with anti- PD-L1 treatment to inhibit tumor growth, generating long-term anti-tumor memory, curing or prolonging survival of mice engrafted with the murine melanoma B16-OVA. Diprovocim induced greater frequencies of tumor infiltrating leukocytes than alum, of which CD8 T cells were necessary for the antitumor effect of immunization plus anti-PD-L1 treatment.A method of inhibiting the growth of diseased cells in a mammal, which diseased cells exhibit a marker molecule that is absent on cells of the same type that are free of said disease or is present on the disease-free cells in significantly reduced numbers compared to said diseased cells, that comprises the steps of:a) administering to said mammal (i) an adjuvant-sufficient amount of a Diprovocim compound, (ii) a T cell-stimulating amount of an immune checkpoint inhibitor, and (iii) an immunizing amount of said marker molecule or portion thereof;b) maintaining said immunized mammal for a time period sufficient for said mammal to mount an immune response to said immunization; andwherein said Diprovocim compound corresponds in structure to structural Formula V, wherein-A is -H (hydrido) or -C(0)NH-R4;R1, R2, R3 and R4 are the same or difterent and are a 2- (4-fluorophenyl) ethyl, a trans-2- phenylcyclopropyl , a trans-2- ( 4-fluorophenyl) - cyclopropyl or a C2-C]_g hydrocarbyl group with the provisos that:1) at least two of r , R^, R-3 (r -^) or at least two of R-'-, R^, and R^ (Ri-3) are a trans- 2-phenylcyclopropyl, a trans-2- (4-fluorophenyl) - cyclopropyl group or a mixture thereof, or each of ys a 2- ( 4-fluorophenyl) ethyl group,2) at least one depictedpyrrolidinyldicarboxamido group has the (S,S) configuration, and each depicted R substituent other than a Cg-Cpg hydrocarbyl group is a trans-2- phenylcyclopropyl , a trans-2- (4-fluorophenyl) - cyclopropyl group or a mixture thereof 'when each of P.l- 13 other than 2- ( 4-fluorophenyl ) ethyl,3) no more than two of Ri_ are C2_C]_3 hydrocarbyl groups when -A is -C(0)NH-R^, and4) when A is hydrido, one of R^-^ can j-,e a Cf-Cig hydrocarbyl group and the depicted R^- containing pyrrolidinylcarboxamido group can have either the R or S configurations, or a mixture of both configurations;-Z is one or more of halogen -H, -NH2 , -OH, -OCH3, -N02, -0CH2C02H, -0 (CH2CH20) nCH2CH2C02H, -0CH2C0NH (CH2CH20) nCH2CH2C02H, -NHC0CH20- (CH2CH20) nCH2C02H, -OCHgCONHCHgCONHCH (CHOH) C02H, -0CH2C0NHCH2C0NHCHC02H {CH2C02H) ,-OCH2CONHCH2CONHCH (CHOH) (CH2CH20) h0H20H2002H,-OCH2CONHCH2CONHCH (CHOH) (CH2CH20) h0H20H2002H,-OCHgCONHCHgCONHCH [ (CH2) 4NH23 C02H,-OCH2CONHCH2CONHCH (CH20H) CO {NHCH [ (CH2) 4NH2 ] CO } NHCH-[ (CH2) 4NH2]C02H (SEQ ID NOs : 3-8), -OCH2CONHCH2CO{NHCH[ (CH2) 4NH2 ] CO } pNHCH [ (CH2) 4NH]C02H (SEQ ID NOs: 9-13)and -OCH2CONHCH2CO{NHCH (CH2OH) CO} qNHCH {CH2OH) C02H(SEQ ID NOs : 14-18) ;W is nitrogen (N) or CH;'n' is a number whose average value is one to about eight;'m' is a number whose value is 1 to about 6; 'r' is a number whose value is 1 to about6 ; and'q' is a number whose value is 1 to about
질환을 제거하기 위한 체크포인트-억제 항체와 상승작용하는 TLR1/2 작용제 디프로보심의 애쥬번트 효과잠재적 사람 및 마우스 Toll-유사 수용체 (TLR)1/TLR2 작용제는 확인되고 최적화하된 디프로보심이고, 이는 사람 THP-1 세포에서 110 pM 및 일차 마우스 복막 마크로파지에서 1.3 nM의 EC50을 나타내었다. 마우스에서, 디프로보심-보강된 오브알부민 면역접종은 항원-특이적 체액 및 CTL 반응을 촉진하고, 항-PD-L1 치료제와 상승작용하여 종양 성장을 억제하고, 장기간 항-종양 기억을 생성하고, 뮤린 흑색종 B16-OVA와 생착된 마우스의 생존을 치유 또는 연장시켰다. 디프로보심은 명반보다 더 높은 빈도의 종양 침윤성 백혈구를 유발하고, 이의 CD8 T 세포는 면역접종 플러스 항-PD-L1 치료제의 항종양 효과에 필수적이다.포유동물에서 질환에 걸린 세포의 성장을 억제하는 방법으로서, 상기 질환에 걸린 세포는, 상기 질환이 없는 동일한 유형의 세포에는 부재하거나, 상기 질환에 걸린 세포와 비교하여, 무-질환(disease-free) 세포에서 상당히 감소된 수로 존재하는 마커 분자를 나타내고, 상기 방법은: a) 상기 포유동물에게 (i) 애쥬번트(adjuvant)-충분량의 디프로보심(Diprovocim) 화합물, (ii) T 세포-자극량의 면역 체크포인트(checkpoint) 억제제, 및 (iii) 면역량 (immunizing amount)의 상기 마커 분자 또는 이의 부분을 투여하는 단계; b) 상기 면역접종된(immunized) 포유동물을 상기 포유동물이 상기 면역접종에 대한 면역 반응을 일으키기 위해 충분한 시간 동안 유지시키는 단계를 포함하고; 여기서, 상기 디프로보심 화합물은 구조식 V의 구조에 상응하는, 방법:화학식 V상기 화학식 V에서, -A는 -H (하이드라이도(hydrido)) 또는 -C(O)NH-R4이고;R1, R2, R3 및 R4는 동일하거나 상이하고, 2-(4-플루오로페닐)에틸, 트랜스-2-페닐사이클로프로필, 트랜스-2-(4-플루오로페닐)-사이클로프로필 또는 C2-C18 하이드로카빌 그룹이고, 단: 1) R1, R2, R3 및 R4 (R1-4) 중 적어도 2개 또는 R1, R2, 및 R3 (R1-3) 중 적어도 2개는 트랜스-2-페닐사이클로프로필, 트랜스-2-(4-플루오로페닐)-사이클로프로필 그룹 또는 이의 혼합물이거나, R1-4 각각은 2-(4-플루오로페닐)에틸 그룹이고, 2) R1-4 각각이 2-(4-플루오로페닐)에틸이 아닌 경우, 적어도 하나의 도시된 피롤리디닐디카복스아미도 그룹은 (S,S) 배치를 갖고, C2-C18 하이드로카빌 그룹 이외의 도시된 R 치환체 각각은 트랜스-2-페닐사이클로프로필, 트랜스-2-(4-플루오로페닐)-사이클로프로필 그룹 또는 이의 혼합물이고, 3) -A가 -C(O)NH-R4인 경우, R1-4 중 2개 이하는 C2-C18 하이드로카빌 그룹이고, 4) A가 하이드라이도인 경우, R1-3 중 하나는 C2-C18 하이드로카빌 그룹일 수 있고, 도시된 R3-함유 피롤리디닐카복스아미도 그룹은 R 또는 S 배치 중 어느 하나, 또는 둘 다의 배치의 혼합을 가질 수 있고;-Z는 할로겐, -H, -NH2, -OH, -OCH3, -NO2, -OCH2CO2H, -O(CH2CH20)nCH2CH2CO2H, -OCH2CONH(CH2CH2O)nCH2CH2CO2H, -NHCOCH2O-(CH2CH2O)nCH2CO2H, -OCH2CONHCH2CONHCH(CHOH)CO2H, -OCH2CONHCH2CONHCHCO2H(CH2CO2H), -OCH2CONHCH2CONHCH(CHOH)(CH2CH2O)nCH2CH2CO2H, -OCH2CONHCH2CONHCH(CHOH)(CH2CH2O)nCH2CH2CO2H, -OCH2CONHCH2CONHCH[(CH2)4NH2]CO2H, -OCH2CONHCH2CONHCH(CH2OH)CO{NHCH[(CH2)4NH2]CO}mNHCH-[(CH2)4NH2]CO2H (서열번호: 3-8), -OCH2CONHCH2CO{NHCH[(CH2)4NH2]CO}pNHCH[(CH2)4NH]CO2H (서열번호: 9-13) 및 -OCH2CONHCH2CO{NHCH(CH2OH)CO}qNHCH(CH2OH)CO2H (서열번호: 14-18) 중 하나 이상이고;W는 질소 (N) 또는 CH이고; "n"은 평균 값이 1 내지 약 8인 수이고; "m"은 이의 값이 1 내지 약 6인 수이고; "p"는 이의 값이 1 내지 약 6인 수이고;"q"는 이의 값이 1 내지 약 6인 수이다.