Nucleic acids encoding improved transaminase proteinsThe present invention relates to proteins having improved ω -transaminase (ω -TA) activity, nucleic acid molecules encoding the respective proteins having improved ω -TA activity, and methods of stereoselective synthesis of chiral amines and amino acids or increasing chiral amine isomers in enantiomeric mixtures.A protein having ω -transaminase (ω -ta) activity, wherein the protein is selected from the following:a) a protein comprising the amino acid sequence from position 1 to 477 as set forth in seq id no 3, in addition to which the amino acid at position 25 is not f, the amino acid at position 64 is not l, the amino acid at position 88 is not t, the amino acid at position 157 is not t, the amino acid at position 165 is not r, the amino acid at position 169 is not v, the amino acid at position 174 is not e, the amino acid at position 187 is not s, the amino acid at position 197 is not m, the amino acid at position 239 is not s, the amino acid at position 327 is not s, the amino acid at position 328 is not v, the amino acid at position 384 is not y, the amino acid at position 389 is not i, the amino acid at position 391 is not d, the amino acid at position 396 is not k, the amino acid at position 410 is not h, and the amino acid at position 414 is not p;b) a protein comprising the amino acid sequence from position 1 to 479 as shown in seq id no 6, except that the amino acid at position 25 is not f, the amino acid at position 64 is not l, the amino acid at position 88 is not t, the amino acid at position 157 is not t, the amino acid at position 165 is not r, the amino acid at position 169 is not v, the amino acid at position 174 is not e, the amino acid at position 187 is not s, the amino acid at position 197 is not t, the amino acid at position 239 is not s, the amino acid at position 327 is not s, the amino acid at position 328 is not v, the amino acid at position 384 is not y, the amino acid at position 389 is not i, the amino acid at position 391 is not d, the amino acid at position 396 is not k, the amino acid at position 410 is not h, and the amino acid at position 414 is not p;c) a protein comprising the amino acid sequence from position 1 to 476 as set forth in seq id no 9, except that the amino acid at position 25 is not f, the amino acid at position 64 is not l, the amino acid at position 88 is not t, the amino acid at position 157 is not t, the amino acid at position 165 is not r, the amino acid at position 169 is not v, the amino acid at position 174 is not e, the amino acid at position 187 is not s, the amino acid at position 197 is not m, the amino acid at position 239 is not s, the amino acid at position 327 is not s, the amino acid at position 328 is not v, the amino acid at position 384 is not y, the amino acid at position 389 is not i, the amino acid at position 391 is not d, the amino acid at position 396 is not k, the amino acid at position 410 is not h, and the amino acid at position 414 is not p;d) a protein comprising the amino acid sequence from position 1 to 476 as set forth in seq id no 12, except that the amino acid at position 25 is not f, the amino acid at position 64 is not l, the amino acid at position 88 is not t, the amino acid at position 157 is not t, the amino acid at position 165 is not r, the amino acid at position 169 is not v, the amino acid at position 174 and the amino acid at position 187 is not s, is not e, the amino acid at position 197 is not t, the amino acid at position 239 is not s, the amino acid at position 327 is not s, the amino acid at position 328 is not v, the amino acid at position 384 is not y, the amino acid at position 389 is not i, the amino acid at position 391 is not d, the amino acid at position 396 is not k, the amino acid at position 410 is not h, and the amino acid at position 414 is not p;e) a protein comprising the amino acid sequence from position 1 to 476 as set forth in seq id no 15, except that the amino acid at position 25 is not f, the amino acid at position 64 is not l, the amino acid at position 88 is not t, the amino acid at position 157 is not t, the amino acid at position 165 is not r, the amino acid at position 169 is not v, the amino acid at position 174 and the amino acid at position 187 is not s, is not e, the amino acid at position 197 is not m, the amino acid at position 239 is not s, the amino acid at position 327 is not s, the amino acid at position 328 is not v, the amino acid at position 384 is not y, the amino acid at position 389 is not i, the amino acid at position 391 is not d, the amino acid at position 396 is not k, the amino acid at position 410 is not h, and the amino acid at position 414 is not p;f) a protein having an amino acid sequence which is at least 60%, preferably 70%, more preferably 80%, yet more preferably 90%, even more preferably 95%, even yet more preferably 96%, particularly preferably 97%, most preferably 98% or particularly preferably 99% identical to any of the amino acid sequences shown in a), b), c), d), e) or f), although in each case the amino acid corresponding to position 25 is not f, the amino acid corresponding to position 64 is not l, the amino acid corresponding to position 88 is not t, the amino acid corresponding to position 157 is not t, the amino acid corresponding to position 165 is...
개선된 트랜스아미나제 단백질을 코딩하는 핵산본 발명은 개선된 오메가-트랜스아미나제 (ω-TA) 활성을 갖는 단백질, 개선된 ω-TA 활성을 갖는 각각의 단백질을 코딩하는 핵산 분자, 및 키랄 아민 및 아미노산의 입체 선택적 합성을 위한 또는 거울상이성질체 혼합물에서 키랄 아민 이성질체를 증가시키기 위한 방법에 관한 것이다.ω-트랜스아미나제 (ω-TA)의 활성을 갖는 단백질로서, 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 단백질:a) 위치 25의 아미노산이 F와 상이하고, 위치 64의 아미노산이 L과 상이하고, 위치 88의 아미노산이 T와 상이하고, 위치 157의 아미노산이 T와 상이하고, 위치 165의 아미노산이 R과 상이하고, 위치 169의 아미노산이 V와 상이하고, 위치 174의 아미노산이 E와 상이하고, 위치 187의 아미노산이 S와 상이하고, 위치 197의 아미노산이 M과 상이하고, 위치 239의 아미노산이 S와 상이하고, 위치 327의 아미노산이 S와 상이하고, 위치 328의 아미노산이 V와 상이하고, 위치 384의 아미노산이 Y와 상이하고, 위치 389의 아미노산이 I와 상이하고, 위치 391의 아미노산이 D와 상이하고, 위치 396의 아미노산이 K와 상이하고, 위치 410의 아미노산이 H와 상이하고, 위치 414의 아미노산이 P와 상이한 것을 제외하고는, 서열식별번호: 3에 제시된 위치 1 내지 477의 아미노산 서열을 포함하는 단백질;b) 위치 25의 아미노산이 F와 상이하고, 위치 64의 아미노산이 L과 상이하고, 위치 88의 아미노산이 T와 상이하고, 위치 157의 아미노산이 T와 상이하고, 위치 165의 아미노산이 R과 상이하고, 위치 169의 아미노산이 V와 상이하고, 위치 174의 아미노산이 E와 상이하고, 위치 187의 아미노산이 S와 상이하고, 위치 197의 아미노산이 T와 상이하고, 위치 239의 아미노산이 S와 상이하고, 위치 327의 아미노산이 S와 상이하고, 위치 328의 아미노산이 V와 상이하고, 위치 384의 아미노산이 Y와 상이하고, 위치 389의 아미노산이 I와 상이하고, 위치 391의 아미노산이 D와 상이하고, 위치 396의 아미노산이 K와 상이하고, 위치 410의 아미노산이 H와 상이하고, 위치 414의 아미노산이 P와 상이한 것을 제외하고는, 서열식별번호: 6에 제시된 위치 1 내지 479의 아미노산 서열을 포함하는 단백질;c) 위치 25의 아미노산이 F와 상이하고, 위치 64의 아미노산이 L과 상이하고, 위치 88의 아미노산이 T와 상이하고, 위치 157의 아미노산이 T와 상이하고, 위치 165의 아미노산이 R과 상이하고, 위치 169의 아미노산이 V와 상이하고, 위치 174의 아미노산이 E와 상이하고, 위치 187의 아미노산이 S와 상이하고, 위치 197의 아미노산이 M과 상이하고, 위치 239의 아미노산이 S와 상이하고, 위치 327의 아미노산이 S와 상이하고, 위치 328의 아미노산이 V와 상이하고, 위치 384의 아미노산이 Y와 상이하고, 위치 389의 아미노산이 I와 상이하고, 위치 391의 아미노산이 D와 상이하고, 위치 396의 아미노산이 K와 상이하고, 위치 410의 아미노산이 H와 상이하고, 위치 414의 아미노산이 P와 상이한 것을 제외하고는, 서열식별번호: 9에 제시된 위치 1 내지 476의 아미노산 서열을 포함하는 단백질;d) 위치 25의 아미노산이 F와 상이하고, 위치 64의 아미노산이 L과 상이하고, 위치 88의 아미노산이 T와 상이하고, 위치 157의 아미노산이 T와 상이하고, 위치 165의 아미노산이 R과 상이하고, 위치 169의 아미노산이 V와 상이하고, 위치 174의 아미노산 및 위치 187의 아미노산이 S와 상이하고 E와 상이하고, 위치 197의 아미노산이 T와 상이하고, 위치 239의 아미노산이 S와 상이하고, 위치 327의 아미노산이 S와 상이하고, 위치 328의 아미노산이 V와 상이하고, 위치 384의 아미노산이 Y와 상이하고, 위치 389의 아미노산이 I와 상이하고, 위치 391의 아미노산이 D와 상이하고, 위치 396의 아미노산이 K와 상이하고, 위치 410의 아미노산이 H와 상이하고, 위치 414의 아미노산이 P와 상이한 것을 제외하고는, 서열식별번호: 12에 제시된 위치 1 내지 476의 아미노산 서열을 포함하는 단백질;e) 위치 25의 아미노산이 F와 상이하고, 위치 64의 아미노산이 L과 상이하고, 위치 88의 아미노산이 T와 상이하고, 위치 157의 아미노산이 T와 상이하고, 위치 165의 아미노산이 R과 상이하고, 위치 169의 아미노산이 V와 상이하고, 위치 174의 아미노산 및 위치 187의 아미노산이 S와 상이하고 E와 상이하고, 위치 197의 아미노산이 M과 상이하고, 위치 239의 아미노산이 S와 상이하고, 위치 327의 아미노산이 S와 상이하고, 위치 328의 아미노산이 V와 상이하고, 위치 384의 아미노산이 Y와 상이하고, 위치 389의 아미노산이 I와 상이하고, 위치 391의 아미노산이 D와 상이하고, 위치 396의 아미노산이 K와 상이하고, 위치 410의 아미노산이 H와 상이하고, 위치 414의 아미노산이 P와 상이한 것을 제외하고는, 서열식별번호: 15에 제시된 위치 1 내지 476의 아미노산 서열을 포함하는 단백질;f) 각각의 경우에 위치 25에 상응하는 아미노산이 F와 상이하고, 위치 64에 상응하는 아미노산이 L과 상이하고, 88에 상응하는 아미노산이 T와 상이하고, 위치 157에 상응하는 아미노산이 T와 상이하고, 위치 165에 상응하는 아미노산이 R과 상이하고, 위치 169에 상응하는 아미노산이 V와 상이하고, 위치 174에 상응하는 아미노산이 E와 상이하고, 위치 187에 상응하는 아미노산이 S와 상이하고, 위치 197에 상응하는 아미노산이 T 또는 M과 상이하고, 위치 239에 상응하는 아미노산이 S와 상이하고, 위치 327에 상응하는 아미노산이 S와 상이하고, 위치 328에 상응하는 아미노산이 V와 상이하고, 위치 384에 상응하는 아미노산이 Y와 상이하고, 위치 389에 상응하는 아미노산이 I와 상이하고, 위치 391에 상응하는 아미노산이 D와 상이하고, 위치 396에 상응하는 아미노산이 K와 상이하고, 위치 410에 상응하는 아미노산이 H와 상이하고, 위치 414에 상응하는 아미노산이 P와 상이한 것인, a), b), c), d), e) 또는 f)에 제시된 임의의 아미노산 서열과 적어도 60%, 바람직하게는 70%, 더욱 바람직하게는 80%, 추가로 더 바람직하게는 90%, 훨씬 더 바람직하게는 95%, 추가로 훨씬 더 바람직하게는 96%, 특히 바람직하게는 97%, 가장 바람직하게는 98% 또는 특히 바람직하게는 99% 동일성을 갖는 아미노산 서열을 갖는 단백질.