Recombinant antibody of anti-human cardiac troponin IThe invention relates to a novel isolated binding protein containing a cTnI antigen binding domain, and researches of the preparation, the applications and the like of the binding protein. The bindingprotein is high in activity, has high affinity with human cTnI protein, and can be widely applied to the field of cTnI protein detection.An isolated binding protein comprising an antigen binding domain, wherein the antigen binding domain comprises at least one complementarity determining region selected from the group consisting of amino acid sequences recited in seq id nos: or; has at least 80% sequence identity with the complementarity determining regions of the amino acid sequence described below and has k with cardiac troponin id≤3.33×10-8affinity of mol/l;cdr-vh1 is g-f-t-x1-s-n-y-a-m-s, wherein,x1 is y or f;cdr-vh2 is i-s-x1-g-g-s-y-s-x2-y-p-d-s-v-k, wherein,x1 is t or s, x2 is y or f;cdr-vh3 is a-r-x1-d-n-y-x2-g-s-x3-f-m-d-y, wherein,x1 is k or r, x2 is y, p or f, x3 is t or s;the complementarity determining region cdr-vl1 is r-a-s-q-x1-i-t-x2-y-l-n, wherein,x1 is d or e, x2 is q or n;the cdr-vl2 is i-y-y-x1-s-r-x2-h-s-g-v-s, wherein,x1 is s or t, x2 is i or l;the complementarity determining region cdr-vl3 is q-q-g-x1-t-x2-p-l-t, wherein,x1 is n or h, x2 is i or l;preferably:in the complementarity determining region cdr-vh2, x1 is s;in the complementarity determining region cdr-vh3, x1 is r;in the complementarity determining region cdr-vl1, x2 is n;in the complementarity determining region cdr-vl2, x1 is t;preferably, in the complementarity determining region cdr-vh1, x1 is y;preferably, in the complementarity determining region cdr-vh1, x1 is f;preferably, in the complementarity determining region cdr-vh2, x2 is y;preferably, in the complementarity determining region cdr-vh2, x2 is f;preferably, in the complementarity determining region cdr-vh3, x2 is y, x3 is t;preferably, in the complementarity determining region cdr-vh3, x2 is p, x3 is t;preferably, in the complementarity determining region cdr-vh3, x2 is f, x3 is t;preferably, in the complementarity determining region cdr-vh3, x2 is y, x3 is s;preferably, in the complementarity determining region cdr-vh3, x2 is p, x3 is s;preferably, in the complementarity determining region cdr-vh3, x2 is f, x3 is s;preferably, in the complementarity determining region cdr-vl1, x1 is d;preferably, in the complementarity determining region cdr-vl1, x1 is e;preferably, in the complementarity determining region cdr-vl2, x2 is i;preferably, in the complementarity determining region cdr-vl2, x2 is l;preferably, in the complementarity determining region cdr-vl3, x1 is n, x2 is i;preferably, in the complementarity determining region cdr-vl3, x1 is h, x2 is i;preferably, in the complementarity determining region cdr-vl3, x1 is n, x2 is l;preferably, in the complementarity determining region cdr-vl3, x1 is h, x2 is l;preferably, the mutation site of each complementarity determining region is selected from any one of the following combinations of mutations:
항-인간 심근 트로포닌 I 재조합 항체본 발명은 cTnI 항원 결합 도메인을 포함하는 신규 분리된 결합 단백질에 관한 것이고, 상기 결합 단백질의 제조, 응용 등 측면에서 연구한 것이다. 상기 항원 결합 도메인은 본문에서 한정된 아미노산 서열의 적어도 하나의 상보성 결정 영역으로부터 선택된 것을 포함하거나; 또는, 하기 아미노산 서열의 상보성 결정 영역과 적어도 80 %의 서열 동일성을 가지며 심근 트로포닌 I과 KD≤3.33×10-8 mol/L의 친화력을 가진다. 상기 결합 단백질의 활성은 강하고, 인간 cTnI 단백질과 아주 높은 친화력을 가지므로, cTnI 단백질의 검출 분야에 광범위하게 응용될 수 있다.항원 결합 도메인을 포함하는 분리된 결합 단백질로서,상기 항원 결합 도메인은 하기 아미노산 서열의 적어도 하나의 상보성 결정 영역으로부터 선택된 것을 포함하거나; 또는, 하기 아미노산 서열의 상보성 결정 영역과 적어도 80 %의 서열 동일성을 가지며 심근 트로포닌 I과 KD≤3.33×10-8 mol/L의 친화력을 가지되;상보성 결정 영역 CDR-VH1은 G-F-T-X1-S-N-Y-A-M-S이고, 여기서,X1은 Y 또는 F이며;상보성 결정 영역 CDR-VH2는 I-S-X1-G-G-S-Y-S-X2-Y-P-D-S-V-K이고, 여기서,X1은 S 또는 T이며, X2는 Y 또는 F이고;상보성 결정 영역 CDR-VH3은 A-R-X1-D-N-Y-X2-G-S-X3-F-M-D-Y이며, 여기서,X1은 R 또는 K이고, X2는 Y, P 또는 F이며, X3은 T 또는 S이고;상보성 결정 영역 CDR-VL1은 R-A-S-Q-X1-I-T-X2-Y-L-N이며, 여기서,X1은 D 또는 E이고, X2는 N 또는 Q이며;상보성 결정 영역 CDR-VL2는 I-Y-Y-X1-S-R-X2-H-S-G-V-S이고, 여기서,X1은 T 또는 S이며, X2는 I 또는 L이고;상보성 결정 영역 CDR-VL3은 Q-Q-G-X1-T-X2-P-L-T이며, 여기서,X1은 N 또는 H이고, X2는 I 또는 L이며;바람직하게,상기 상보성 결정 영역 CDR-VH2에서, X1은 S이고;상기 상보성 결정 영역 CDR-VH3에서, X1은 R이며;상기 상보성 결정 영역 CDR-VL1에서, X2는 N이고;상기 상보성 결정 영역 CDR-VL2에서, X1은 T이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VH1에서, X1은 Y이고;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VH1에서, X1은 F이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VH2에서, X2는 Y이고;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VH2에서, X2는 F이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VH3에서, X2는 Y이고, X3은 T이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VH3에서, X2는 P이고, X3은 T이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VH3에서, X2는 F이고, X3은 T이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VH3에서, X2는 Y이고, X3은 S이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VH3에서, X2는 P이고, X3은 S이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VH3에서, X2는 F이고, X3은 S이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VL1에서, X1은 D이고;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VL1에서, X1은 E이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VL2에서, X2는 I이고;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VL2에서, X2는 L이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VL3에서, X1은 N이고, X2는 I이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VL3에서, X1은 H이고, X2는 I이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VL3에서, X1은 N이고, X2는 L이며;바람직하게, 상기 상보성 결정 영역 CDR-VL3에서, X1은 H이고, X2는 L이며;바람직하게, 각 상보성 결정 영역의 돌연변이 부위는 하기 돌연변이 조합 중 어느 하나로부터 선택인 것을 특징으로 하는 항원 결합 도메인을 포함하는 분리된 결합 단백질.[이미지][이미지]