실험에 사용된 황칠나무 종자는 완도수목원에서 분양받았으며, 멸균 후 식물생장조절물질이 첨가되지 않은 MS 배지에 치상하여 무균발아시켰다. 잎, 줄기, 뿌리 절편은 IBA가 첨가된 MS 배지에 치상하여 4주 후 부정근의 개수와 길이, 생중량을 조사하였으며, 유도된 부정근 절편의 근단을 절단하여 sucrose가 포함된 MS 배지에 2,4-D, IAA, IBA, NAA를 첨가하고 4주 후 부정근의 개수와 생중량을 조사하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>식물재료 및 배양조건</h2> <p>실험에 사용된 황칠나무(Dendropanax morbifera Lev.)의 종자는 전라남도 산림환경연구소 완도수목원에서 분양받았다. 종자는 3개월간 저온처리한 후 포화수분 상태에서 24시간 침지한 후 종피를 완전히 제거 하였다. 종자의 소독은 \( 70 \% \) 에탄올에 1 분, \( 1 \% \) 차아염소산 나트륨용액에 15 분간 침지한 후 멸균수로 5 회 세척하였다. 멸균된 종자는 식물생장조절물질이 첨가되지 않은 \( 1 / 3 \) MS(Murashige and Skoog 1962) 배지에 치상하여 무균발아를 하였다. 실험에 사용한 모든 배지와 기구는 \( 121 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 1.2 기압으로 20 분간 고온고압 멸균하여 petri dish에 각각 \( 30 \mathrm { ~mL } \) 씩 분주하여 실험에 사용하였다.</p> <h2>잎, 줄기, 뿌리 절편에 따른 부정근(adventitious root)유도</h2> <p>잎은 \( 1 \times 0.5 \mathrm { ~cm } \) 정도로 3 등분 횡절단하였다. 줄기는 엽병까지 제거한 후 \( 1 \mathrm { ~cm } \) 로 절단하였고 뿌리는 근단을 포함하여 \( 1 \mathrm { ~cm } \) 로 절단하여 실험에 사용하였다. MS배지에 \( 3.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 의 IBA가 첨가된 배지위에 치상하여 4 주 후 부정근의 개수, 길이 그리고 생중량을 조사하였다. 절편은 petri dish당 10 개씩, 총 30 개씩 각각 치상하였고 \( 22 \pm 1 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 암 배양 하였다.</p> <h2>Auxin 종류에 따른 2차 부정근유도</h2> <p>부정근 절편의 근단을 \( 1 \mathrm { ~cm } \) 로 절단하여 sucrose가 \( 30 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \) 포함된 MS 배지에 2,4-D, IAA, IBA, NAA가 \( 1 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 첨가하여 10 개씩 각각 30 개의 절편을 치상하였다. 배양 4 주후에 부정근의 유도 개수와 길이 그리고 생중량을 각각 조사하였다. 절편은 식물생장조절제의 처리에 따라 petri dish당 10 개씩, 총 30 개씩 각각 치상하였고 \( 22 \pm \) \( 1 { } ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 암배양 하였다.</p>