참치 심장 70 \( \% \) 에탄올 추출물을 용매별로 분획한 결과, dichloromethane 분획물이 다른 분획물에 비해 에탄올 추출물보다 전염증성 cytokine의 분비량 억제 효과가 높게 나타나 dichloromethane 분획물에 대해 in vivo와 in vitro 상에서 항염증 효과를 확인하였으며 참치 심장 dichloromethane 분 획물이 대식세포의 증식능에 미치는 영향을 측정하기 위해 RAW 264.7 세포에 dichloromethane 분획물을 처리하여 세포 독성을 MTT assay를 이용하여 측정하였다.
<h2>귀 부종 측정 및 조직 관찰</h2> <p>귀 부종을 측정 위해 ICR 마우스에 참치 심장 dichloromethane 분획물을 10,50 및 \( 250 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \) body weight 농도로 \( 200 \mu \) 씩 경구 투여하고 한 시간 후, 오른쪽 귀에 2.5 \( \% \) croton oil을 \( 20 \mu \mathrm { l } / \mathrm { ear } \)농도로 도포하였다. 귀 두께는 croton oil을 처리하고 5시간 후에 측정하였으며 croton oil 처리한 후 두께의 증가를 부종의 형성으로 간주하였다. 귀 조직 관찰을 ICR 마우스의 오른쪽 귀에 참치 심장 dichloromethane 분획물을 \( 100 \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \) 농도로 20 \( \mu 1 \)씩 도포 하였고, 6시간 뒤, diethylether로 마취시키고, 귀조직을 절 제하여 10 \( \% \) formaldehyde에 72시간 고정하였다. 고정 후 파라핀 블록을 만들어 박편을 제조하여 hematoxylin-eosin과 toluidine-blue 염색을 하여 조직을 관찰하였다.</p> <p>Edema formation ( \% of control) \( = \)Ear thickness of Sample / Ear thickness of Control \( \times 100 \)</p> <h2>통계처리</h2> <p>모든 실험 결과에 대한 유의차 검정은 SAS software (SAS Institute, Inc., USA)에서 평균값을 분산분석한 후, Duncan's multiple range test법에 따라 p<0.05 수준에서 검정하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>RAW 264.7에서 참치 심장 dichloromethane 분획물의 세포독성</h2> <p>참치 심장 70 \( \% \) 에탄올 추출물을 용매별(dichloromethane, ethyl acetate, butanol, water)로 분획한 결과, dichloromethane 분획물이 다른 분획물에 비해 에탄올 추출물보다 전염증성 cytokine의 분비량 억제 효과가 높게 나타나 dichloromethane 분획물에 대해 in vivo와 in vitro 상에서 항염증 효과를 확인하였다(data not shown). 참치 심장 dichloromethane 분 획물이 대식세포의 증식능에 미치는 영향을 측정하기 위해 RAW 264.7 세포에 dichloromethane 분획물을 처리하여 세포 독성을 MTT assay를 이용하여 측정하였다. 그 결과 세포의 생존율은 대조군(PBS 처리군)과 비교 시 모든 농도에 서 유의적인 차이가 나타나지 않음을 관찰하였다. 따라서, 참치 심장 dichloromethane 분획물은 \( 0.1-100 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)농도에서 세포 생존율에 영향을 미치지 않아 독성이 없는 것으로 나타났다.</p>