사료의 혼합 및 제조는 이스라엘잉어 치어의 성장과 생식에 관한 연구(Takeuchi et al., 1985)를 참고하여 수행하였다. 고등어 수세폐액을 대량 조제하여 회수단백질을 획분하고, 일반성분, 아미노산 조성 및 산화정도를 측정하여 이스라엘잉어 치어의 성장에 필요한 적정 조단백질 함량인 35%를 맞추어 사료를 제조하였다.
<h2>고등어육 수세폐액의 조제 및 그 폐액 중의 잔존 수용성 단백질의 회수 방법</h2> <p>실험실 규모로 전보와 같이 고등어 수세폐액을 대량 조제하여 전보와 같은 폐수처리장치로써 그 폐액 중의 수용성 단백질을 회수하였다.</p> <h2>회수단백질 획분의 일반성분, 아미노산 조성 및 산화정도 측정</h2> <p>일반성분은 AOAC 법에 따라 수분은 상압가열건조법, 조지방은 Soxthlet법, 회분은 건식회화법으로 측정하였으며, 조단백질은 semimicro Kjedahl법으로 질소를 정량한 후 질소계수( \(6.25 \))를 이용하여 계산하였다. 아미노산 조성은 시료 \( 50 \mathrm { mg } \)을 정평하여 ampoule에 넣고 \( 6 \mathrm { ~N } \mathrm { HCl } \)용액 \( 2 \mathrm { ml } \)를 가하여 진공하에서 봉입한 다음 \( 110 ^ {\circ } \mathrm { C } \)의 sand bath에서 24시간 가수분해하였다. 분해액을 glass filter로 여과하고 감압건조시킨 후 \( \mathrm { pH } \(2.2 \)의 구연산 완충액으로 \( 25 \mathrm { ml } \)로 정용하여 구성아미노산 분석시료로 사용하였다. 과산화물가의 측정은 시료 \( 1 \mathrm { ~g } \)을 취하여 용매(Glacial acetic acid:Chloroform = 1:1) \( 25 \mathrm { ml } \)를 가한 후 균질화 한 다음 KI 포화용액 \( 1 \mathrm { ml } \)를 가하여 마개를 하고 1분간 심하게 진탕하여 5-10분간 어두운 곳에서 방치하였다. 증류수 \( 75 \mathrm { ml } \)를 가하여 흔든 후 \( 1 \% \) 전분 용액 \( 1 \mathrm { ml } \)를 지시약으로 혼합하여 \( 0.01 \mathrm { ~N } \) sodium thiosulfate용액으로 적정하여 과산화물가를 산출하였다. 갈변도는 Hendel 등의 방법을 수정하여 측정하였다.</p> <h2>사육 실험용 사료의 제조</h2> <p>사료 제조에 필요한 어분, 고등어가공폐액 회수단백질 및 밀가루 등은 미리 일반조성을 조사한 후(Table 1), Takeuchi 등의 결과를 근거로 이스라엘잉어 치어의 성장에 필요한 적정 조단백질 함량인 \( 35 \% \)가 되도록 사료의 혼합비를 조정하였다.</p> <p>우선 1차 사육실험에서는 고등어가공폐액 회수단백질이 어분 대체 단백질로서 적합한지를 판단하기 위해 어분만을 단백질원으로 한 사료(A 사료)와 그 어분량의 \( 33.3 \%(B 사료)와 \( 66.6 \%(C 사료)를 고등어가공폐액 회수단백질로 대체한 사료로 이스라엘잉어를 사육하였으며, 이때 사료 조성은 Table 2와 같다. 그리고 2차 사육실험에서는 1차 사육실험의 결과를 바탕으로 고등어 엑스분을 ether로 탈지한 후 사료제조에 사용하였으며, 1차 사육실험과 마찬가지로 어분만을 단백질원으로 한 사료(D 사료)와 7어분량의 \( 15 \%(E 사료)와 \( 30 \% \) (F 사료)를 고등어가공폐액 회수단백질로 대체하여 만든 사료를 각각 사용하였으며, 이때 사료 조성은 Table 3과 같다.</p>