본 연구에서는 synbiotic 제제를 첨가한 후 7일 동안 bag을 노출시키고, bag의 중심부에서 약 \( 200 \mathrm { ~g } \)의 시료를 채취하여 사료의 영양소 함량 및 발효 특성을 분석했다. 또한, 각 노출 시기에 따라 건물손실률을 측정하기 위해 시료를 \( 70 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 12시간 동안 건조시켰다. 마지막으로, 7일 동안 혐기 발효된 사료의 온도 변화를 측정하기 위해 전자 온도계를 사용하여 bag의 중앙부에서 온도를 측정했다.
<p>시료채취는 synbiotic 제제 첨가 7일 후에 bag의 가로 상단부를 개봉하여 1, 3, 5, 7, 14 및 21 일 동안 실내에서 노출시켰다. 사료 내 영양소 함량 및 발효 특성을 위한 시료채취는 bag의 개봉 표면 \( 5 \mathrm { ~cm } \) 까지 부분을 제외한 중심부위에서 약 \( 200 \mathrm { ~g } \) 씩 3 반복으로 채취하여 대표시료로 하였다.</p> <h2>조사 항목 및 조사 방법</h2> <p>사료의 일반성분 함량은 AOAC 법으로 측정하였으며, 세포벽구성 성분은 Van Soest 등의 방법으로 분석하였다. Hemicellulose 함량은 NDF (neutral detergent fiber)와 ADF (acid detergent fiber)의 차이로 구하였으며, 세포질 구성성분은 100에서 NDF 함량을 제하여 계산하였다. 건물손실률은 노출시기별로 \( 70 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 가 유지되는 drying oven에서 12 시간 동안 건조한 다음, 중량을 측량하였다. 7 일간 혐기 발효시킨 후, 개봉 1,3,5,7,14 및 21 일째 되는 혐기발효-TMR 사료의 온도 변화는 vinyl bag (가로 \( 43 \mathrm { ~cm } \) \( \times \) 세로 \( 58 \mathrm { ~cm } \) )에 저장된 시험사료의 중앙부위에 \( -50 ^ {\circ } \mathrm { C } \sim 150 ^ {\circ } \mathrm { C } \)까지 측정이 가능한 전자 온도계(THERMOLAB)를 넣어 일정한 시각(12:00)에 각각 측정하였다. \( \mathrm { pH } \)는 개봉 후, 노출기간별로 수거현 혐기발효-TMR 시료 \( 50 \mathrm { ~g } \) 에 \( 450 \mathrm { ml } \) 의 증류수 \( ( \mathrm { pH } 7.0) \) 를 침가하여 homogenizer를 이용하여 1 분간 혼합시키고, \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 냉장고에서 24 시간 방치시킨 후, 4 겹의 cheese cloth로 여과한 용액을 pH meter (Mettler toledo, MP-230)를 이용하여 측정하였다. 완충능력은 Playne와 McDonald의 방법에 의해 상기 \( \mathrm { pH } \)측정을 위한 침출액에 \( 0.1 \mathrm { ~N } \mathrm { HC } \) 로 적정하여 \( \mathrm { pH } \)를 4.0까지 내리는데 소요된 부피와 \( 0.1 \mathrm { ~N } \mathrm { NaOH } \) 로 적징하여 \( \mathrm { pH } \)를 7.0까지 올리는데 소요된 부피로씨 고유 완충능력을 측정하였다. 암모니아태 질소 \( \left ( \mathrm { NH } _ { 3 } - \mathrm { N } \right ) \) 는 Chaney와 Marbach의 방법으로 전처리한 후, spectrophotometer (BIO-RAD Model 680)를 이용하여 OD(optical density)값을 측정하여 표준용액과 비교분석하였다. VFA (volatile fatty acid)는 Erwins 등의 방법으로 다음과 같이 분석하였다. 상기 \( \mathrm { pH } \) 측정을 위한 침출액 \( 5 \mathrm { ml } \) 을 채취하여 \( 12 \mathrm { ml } \) tube에 넣고, \( \mathrm { HgCl } _ { 2 } 0.05 \mathrm { ml } , \mathrm { H } _ { 3 } \mathrm { PO } _ { 4 } 1 \mathrm { ml } \), pivalic acid \( 0.2 \mathrm { ml } \) 을 첨가한 후, \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30분간 정치시킨 다음, 3,000 rpm에서 20 분간 원심 분리 후, 상층액 \( 2 \mathrm { ml } \) 을 취하여 냉장 보관하였다가 GC (VARIAN CP-3800, USA)를 이용하여 분석하였다.</p>