내분비계의 정상적인 기능을 방해하고, 독성이 매우 강하다고 알려진 내분비교란물질은 심혈관계, 생식계, 신경계뿐만 아니라 인체의 여러 기관에 심각한 타격을 주기 때문에, 본 연구에서는 benzophenone과 같은 내분비교란물질이 계배의 발생과정에 미치는 영향과 기형 유도 가능성을 살펴보고자, Benzophenone \( 1 \mu \mathrm { g } / \mathrm { egg } \) 에서 \( 500 \mu \mathrm { g } / \mathrm { egg } \) 까지를 투여한 후 부화기에서 발생을 유도하고 각각 6. 9. 12. 15. 18. 21일째마다 확인하였다. 그 결과, benzophenone은 발생단계에서 심각한 영향을 미치고 계배의 기형을 유도하였다.
<h1>결 과</h1> <h2>Benzophenone 투여시기</h2> <p>시료의 투여시기를 알아보기 위하여 무처치 대조군을 날짜 별로 관찰한 결과, 발생 4일째에 혈관형성이 왕성하게 형성되었으므로, 발생 4일에 EtOH과 benzophenone을 투여하였다(Fig. 1)</p> <h2>육안적인 외형 검사</h2> <p>무처치 대조군과 비고해 용매 대조군과 실험군인 benzo-phenone \( 1,20 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)에서는 발생초기에는 별 다른 차이가 보이지 않았으나, 발생 후반부에서 체장의 감소가 보였다. 이에 반해 benzophenone \( 40,50,60 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)에서는 전 실험기간동안 현저한 감소를 보였다(Table 1, Fig. 2).</p> <h2>사망률</h2> <p>전체 실험군의 사망률을 보았을 때 무처치대조군과 \( 15 \% \) EtOH 투여군, \( 1 \sim 20 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 투여군의 경우에는 각각 \( 3.4 \% \), \( 11.7 \%, 5 \% \)의 사망률을 보였다. 그러나 중용량 투여군과 고용량 투여군에서는 각각 \( 40.6 \%, 90.8 \% \)의 사망률을 보였는데, 중용량 투여군의 경우에는 12일이 지나면서부터 사망률이 높아졌으나, 고용량 투여군의 경우에는 거의 대부분 발생이 정지되어 버리는 것을 확인할 수 있었다(Table 2).</p> <h2>기형발생정도</h2> <p>유정란 1개당 \( 100,200,300,400,500 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 의 benzophe-none 고용량 투여군에서는 간헐적으로 발생 중인 개체가 나오기는 하였지만 그 발생 진행과정이 무처치 대조군과 비교하였</p> <p>을때 현저하게 늦는 것을 확인할 수 있었다(Fig. 3). 그러나 이 역시 대부분의 경우에는 투여 시점을 기준으로 보았을때 거의 발생이 정지되었음을 볼 수 있었다(Fig. 4). 또한 발생과정 중에 기형이 발생하였는데 안구, 부리, 다리 기형과 복부 부위에 부종이 나타났으며, 특히 안구와 부리 기형은 동시에 나타나는 것을 볼 수 있었다(Fig. 5). 예상과는 달리 심혈관계에 대한 직접적인 영향은 관찰되지 않았다.</p> <h1>고 찰</h1> <p>환경호르몬이라고도 불리우는 내분비교란물질은 생체 내에서 호르몬과 유사하게 작용함으로써 호르몬의 생리기능을 변화시키는 화학물질을 말하는데, 호르몬의 작용을 교란 또는 간섭함으로써 생태계 뿐만 아니라 세대를 거치면서 인간에게 생식 이상이나 성장 억제와 같은 영향을 미치는 것으로 알려져 있다. 이에 본 연구에서는 내분비 교란물질 중에서도 benzophenone이 발생과정에 어떠한 영향이 있는가를 알아보기 위하여 닭의 배아를 이용하여 관찰하였다. 먼저 시료의 투여시기를 알아보기 위한 실험에서는 발생 4일째에 혈관형성이 왕성한 것으로 알 수 있었는데, 이는 계배의 기관형성이 가장 활발한 입란 4 일 전후에 투여되는 경우가 많다는 이전의 연구결과와 일치하는 것이었다. Chick embryo 발생실험에서는 내분비 교란물질의 농도가 증가함에 따라 발생과정이 진행되면서 낮은 농도에서는 발생과정이 느려짐과 동시에 체장이 유의적으로 감소하는 것을 볼 수 있었으며, 높은 농도에서는 아예 발생 자체가 이루어지지 않음을 알 수 있었다. 또한 전체 실험군의 사망률을 보았을 때 무처치대조군의 경우에는 \( 3.4 \% \)의 사망률을 보였는데, 이는 유정란의 발생률이 \( 90 \% \) 이상으로 보았을 때 정상적인 경우라고 판단되었다. 저용량 투여군의 경우에서는 무처치대조군이나 EtOH 처치군과 별 차이를 보이지 않았으나, 중용량 투여군이나 고용량 투여군의 경우에는 발생단계가 거듭될수록 사망하거나 발생이 정지하는 것을 볼 수 있었다. 일부이긴 하지만 여러 부위에서 기형이 발생하는 것도 확인하였다. 따라서 benzophenone이 기형발생에도 상당한 영향을 미치는 것을 알 수 있었다. 일반적으로 호르몬이 배아 발생에 영향을 주고 있다는 사실 등을 미루어 볼 때 benzophenone이 내분비 교란물질임을 시사해주고 있다. 그럼에도 불구하고 심혈관계 발생이 큰 영향을 미치지 않는 것은 흥미로운 사실이다. 이는 아마도 처리 농도가 낮았거나 기간이 더 길때 영향을 주는 것이 아닌가 추측된다. 이상과 같이 내분비 교란물질인 benzophenone이 발생과정에 유의적으로 영향을 주는 것으로 추정되지만, 이러한 발생실험의 경우에는 다른 동물실험과 비교하였을 때 여러 가지 변수가 존재하므로, 정확한 기준을 마련하기 위해서는 좀더 많은 연구가 필요할 것으로 생각된다. 시약의 투여 정도나 투여시간, 실험자의투여방법, 온도나 습도와 같은 외부의 영향, 유정란의 상태 등에 의해 영향을 받기 때문이다. 따라서 본 연구의 결과를 기초로 chick embryo 실험에서의 알맞은 실험방법과 명확한 기준을 정하는 것이 우선되어야 할 것 같다.</p> <h1>요 약</h1> <p>내분비교란물질은 일상생활에서 쉽게 발견되는 화학물질이다. Bisphenol A, DDT, benzophenone, phenylphenol 등과 같은 화학물질들은 플라스틱 식품용기나 살충제 등을 통해서 체내에 흡수된다. 내분비교란물질은 내분비계의 정상적인 기능을 방해하기 때문에 인체에 해로우며, 매우 독성이 강한 것으로 알려져 있다. 이러한 내분비교란물질은 심혈관계, 생식계, 신경계뿐만 아니라 인체의 여러 기관에 심각한 타격을 주는것으로 알려져 있다. 따라서 본 연구에서는 benzophenone과 같은 내분비교란물질이 계배의 발생과정에 영향을 미치고, 계배의 기형을 유도하는지를 알아보고자 하였다. Benzophenone \( 1 \mu \mathrm { g } / \mathrm { egg } \) 에서 \( 500 \mu \mathrm { g } / \mathrm { egg } \) 까지를 투여한 후 부화기에서 발생을 유도한 후 각각 6. 9. 12. 15. 18. 21일째마다 확인하였다. 체장의 경우에는 중용량 \( (40 \mu \mathrm { g } / \mathrm { egg } \sim 60 \mu \mathrm { g } / \mathrm { egg } ) \)에서 감소가 시작되는 것을 확인할 수 있었다. 고용량의 실험군 \( (80 \mu \mathrm { g } / \) \( \mathrm { egg } \sim 500 \mu \mathrm { g } / \mathrm { egg } ) \)에서는 높은 사망률을 보였으며, 부리 이상이나 안구 기형과 같은 기형의 징후를 발견할 수 있었다. 결론적으로 benzophenone은 계배의 기형을 유도하며, 발생단계에서 심각한 영향을 미치는 것을 확인할 수 있었다.</p>