RLE가 MDI(분화 초기 지방세포 유도 복합체) 처리에 의한 세포 증식 유도 과정에서, G1기에서 세포 주기를 정지시켜 세포 증식 억제를 확인함으로써 금앵자 추출물은 지방세포 분화의 중요단계인 clonal expansion에서 세포의 주기를 G1기에서 정지시키기 때문에 지방전구세포에서 지방세포로의 분화를 더 효과적으로 억제시키고, 이를 통해 항비만 활성과 연관된 기초연구를 위한 소재 활용 뿐만 아니라 기능성 식품 등 여러 소재로 활용이 가능할 것으로 사료된다.
<h2>G1 arrest 관련 단백질의 발현변화</h2> <p>RLE가 분화 초기 지방세포 유도 복합체인 MDI 처리에 의한 세포의 증식 유도 단계에서, G1기에서 세포 주기를 정지시킴으로써 세포의 증식을 억제함을 확인하였다. RLE에 의한 G1기로의 세포주기 정지에 대한 분자기전을 확인하기 위해 세포주기 조절에 관여하는 단백질들의 발현 변화를 western blot analysis를 통해 확인하였다. 세포주기는 Cyclin에 의한 cyclin-dependent kinase(Cdk)의 활성화 및 Cdk inhibitor의 발현에 의해 조절된다. 그 중 G1기에서 S기로 진입하는 단계에서는 Cyclin E가 발현되어 Cdk2를 활성화시켜 세포주기가 진행된다. 그러나 어떠한 요인에 의해 Cyclin과 Cdk 발현이 정상적으로 유도되지 않으면, 필요한 단백질의 합성이 충분히 진행될 때까지 세포주기가 정지된다고 알려져 있다. 또한 Cyclin E와 Cdk2가 활성화 되면 \( \mathrm{Rb} \)를 인산화시키게 되는데, \( \mathrm{Rb} \)가 인산화되면 DNA 복제를 진행시키는 전사인자가 발현되어 S기가 시작된다.Cdk는 다양한 증식 억제 신호들에 의해 발현되는 Cdk inhibitor인 p21에 의해 그 활성이 억제된다고 알려져 있다. 3T3-L1 지방전구세포에 MDI와 다양한 농도의 RLE를 동시에 처리하여 배양한 후, 회수하여 G1기에서 S기로의 전이에 관여하는 단백질들인 Cdk2, Cyclin E, Rb, phosphor-Rb 및 p21의 발현변화를 검토하였다. 그 결과 RLE의 농도 의존적으로 Cdk inhibitor인 p21의 발현이 증가하였고, Cyclin E와 Cdk2, phosphor-Rb의 발현은 감소됨을 확인하였다(Fig. 7). 이는 RLE에 의해 증가된 Cdk inhibitor인 p21이 CyclinE/Cdk2 complex에 결합하여 CyclinE/Cdk2 complex의 활성이 저해되고 따라서, 이후 단계의 \( \mathrm{Rb} \)의 인산화가 억제되어 S기로의 진행이 저해되고 G1기에서 세포주기 정지가 유도되었을 것으로 사료된다.</p> <p>본 연구에 사용된 금앵자는 장미과의 금앵자 나무 열매를 건조한 것으로, 유기산, 탄닌, 정유, 비타민 C, 수지, 사포닌 등의 성분이 함유되어 있는 것으로 알려져 있다. 금앵자가 속해있는 장미과 식물 중 비파엽, 용아초, 복분자, 산사 등에 의한 지방세포 분화억제 효능에 대한 보고가 있다. 그 중 비파엽은 3T3-L1 cell에서 \( \mathrm{PPAR} \gamma \)와 \( \mathrm{C} / \mathrm{EBP} \alpha \)의 발현 억제를 통해 지방세포의 분화를 억제시키는 것으로, 금앵자 추출물의 효능 및 작용 메커니즘이 유사한 것으로 사료된다. 또한 용아초 \( \mathrm{EtOH} \) 추출물은 지방축적이 유도된 HepG2 세포내에서 \( \mathrm{PPAR} \gamma \)의 발현 억제를 통해 지방 축적을 억제시키고, 그 외 복분자 열매 추출물이나 산사 약침은 지방세포의 분화 억제 효능은 확인되었으나 메커니즘에 대한 연구는 아직 진행되지 않은 상태이다. 또한 비타민 C, 탄닌, 사포닌 등 금앵자에 포함된 성분에 대한 항비만 효능도 다수 보고되어 있다. 그러나 본 연구에 사용된 금앵자는 항염증, 항산화 등에 대한 보고 외에 항비만 효능에 대한 보고는 본 연구팀이 최초이며, 금앵자 추출물이 지방세포의 분화에 관련된 핵심 전사인자들의 발현을 저해하는 것은 비파엽 추출물의 메커니즘과 유사하다고 할 수 있다. 그러나 금앵자 추출물은 지방세포의 분화에 중요한 단계인 clonal expansion에서 세포의 주기를 G1기에서 정지시킴으로써, 지방전구세포에서 지방세포로의 분화를 보다 효과적으로 억제시킬 것으로 사료된다. 따라서 금앵자는 지방세포의 분화 억제활성을 나타내는 성분의 규명 및 실험 동물 내에서의 지방 억제 효능에 대한 연구 등 항비만 활성과 관련된 기초연구를 위한 소재로 활용이 가능할 뿐만 아니라 기능성 식품 등의 소재로도 활용이 가능할 것으로 사료된다.</p>