망간산화기작은 세포내부 단백질에 의해 이루어진다. 미생물에따라 망간산화에 관련된 물질이 다양하게 존재한다. Pseudomonas sp. MN 55의 망간 산화능은 단백질에 의해 나타나며 중성부터 약알칼리성에서 잘 이루어진다.
<h2>Pseudomonas sp. MN \(5 \)의 망간 산화능</h2> <p>Pseudomonas sp. MN \(5 \)의 망간 산화능을 LD배지에서 균체</p> <p>생육과 함께 주기적으로 측정해본 결과, 접종 후 \(6 \)시간 후에 정지기로 접어둘었으며, 망간 산화능은 배양 \(3 \) 시간 후부터 나타나기 시작해 배양 \(21 \)시간 후에 최고치를 나타낸 후 배양 약 \(24 \)시간 후부터 점차 감소하였다(Fig. \(1 \)). 이러한 망간 산화능 변화는 Okazaki의 결과와 비슷한 결과이다.</P><p>망간산화 단배질이 세포내에 존재하는지 아니면 세포외에 존재하는지 파악하기 위해, 세포외로 분비되는 물질인 세포 배양액과 초음파를 이용해 세포를 파쇄시켜 얻은 세포내부 물질을 이용해 망간 산화능을 측정하였다(Fig. \(2 \)). 그 결과 Pseudomonas sp. MN \(5 \)의 망간 산화능은 세포외 분비물질인 세포배양액에서 김출되지 않았고, 초음파로 세균을 용균 시킨 시료에서 망간산화능이 검출되어 망간산화기작은 세포내부에 존재하는 단백질에 의해 이루어지는 것으로 화인되었다. 이와 같이 세포내 효소에 의해 망간산화가 진행되는 균이 Pseudomonas, Citrobacter, Arthrobacter에서 이미 보고된 바 있다. 그러나 Leptothrix 가 생성하는 망간산화물은 세포외 분비효소에 의해서 만들어진다고 밝혀져있어 미생물에 따라 망간산화에 관련된 물질이 다양하게 존재하는 것으로 추정된다.</p> <p>망간을 산화하는 물질이 단백질인지를 확인하기 위해 단백질 분해효소인 proteinase \( \mathrm { K } \) 를 처러한 것과 \( 100 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 로 \(5 \)분가열 처리를 한 후의 망간 산화능을 즉정한 결과 proteinase</p> <p>\( \mathrm { K } \) 와 가열 처리를 한 것의 망간 산화능이 차리하지 않은 것에비해 각각 \( 1.6 \% \) 와 \( 0.8 \% \) 만아 남아있어(Table \(4 \)) Pseudomonas sp. MN \(5 \)의 망간 산화능은 Okazaki의 결과와 유사하게 단백질에 의해 나타난 것임을 확인 하였다.</p> <p>또 완충액의 \( \mathrm { pH } \) 가 망간 산화능에 미치는 영향을 조사하 기 위하여 \( 10 \mathrm { mM } \) HEPES-NaOH 완충액을 \( \mathrm { pH } 4, \mathrm { pH } 5, \mathrm { pH } \) 6, \( \mathrm { pH } \) 7, \( \mathrm { pH } \) 7.5, \( \mathrm { pH } \) 8, \( \mathrm { pH } \) 9, \( \mathrm { pH } 10 \) 으로 즈정하여 \( \mathrm { pH } \) 에 따른 망간 산화능을 측정하였다(Fig. 3). 그 결과 \( \mathrm { pH } 4 \sim 6 \) 의 산성 \( \mathrm { pH } \) 에서는 망간 산화능이 저조하였고 \( \mathrm { pH } 7 \sim 10 \) 에서 망간 산화능이 우수하여 Pseudomonas sp. MN5의 망간 산화는 중성부터 약 알카리성에서 잘 이루어짐을 확인하였다. 이 결과는 역시 Okazaki의 \( \mathrm { pH } \) 범위와 일치되는 결과이다.</p>