햄스터를 대상으로 pentobarbital sodium으로 마취 후 왼쪽 협낭에 체중당 \(5 \mathrm{g}\)의 hydroxyapatite 소결체를 놓고 Fehland intestinal forceps로 고정한 후 이중봉합을 실시하는 실험을 진행하였다. 대조군에서는 hydroxyapatite 없이 같은 과정을 실시하였으며, 그 결과를 Student t-test를 통해 분석하였다.
<h1>재료 및 방법</h1><h2>재료</h2><p>참치뼈는 (주)동원산업 (창원)의 수산가공 공장에서 참치의 어육가공 처리 후 남은 어뼈를 구입하여 사용하였다.</p><h2>시험물질의 제조</h2><p>시험물질로 사용한 Hydroxyapatite 소결체는 강도가 가장 우수한 것으로 Kim 등의 방법에 따라 참치뼈를 \( 1 \% \) \( \mathrm{NaOH} \) 수용액에 첨가한 후 \( 80^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 7시간 반응시켜 참치뼈에 포함되어 있는 유기물 등을 제거한 후, 2시간 흐르는 물에서 수세하여 건조하였다. 이를 \( 850^{\circ} \mathrm{C} \) (전기로, 동원이화학, 부산)에서 3시간 하소 (calcination)하여 추출한 hydroxyapatite를 체가름 (\(200 \mathrm{mesh}\), \(75 \mathrm{um}\))하여 3일 동안 습식밀링 (wet milling)한 다음, \( 1350^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 3시간 소결한 시편을 분쇄하여 사용하였다.</p><h2>실험동물 및 사육환경</h2><p>삼육실험동물 연구소 (오산)에서 입수한 \( 5 \sim 6 \) 주령의 Syrian 햄스터를 1주간 순화시킨 후 건강하고 발육양호한 14마리의 동물을 군간 체중이 고르게 배치한 후 대조군 및 참치배 유래의 hydroxyapatite 소결체 용량군으로 군당 수컷 7마리씩 분리하였다. 실험개시시의 체중범위는 \(110 \sim 130 \mathrm{g} \) 이었다. 실험기간중의 사육환경은 온도 \( 23 \pm 2^{\circ} \mathrm{C} \), 습도 \( 50 \pm 20 \% \) 및 12시간 조명 (P.M. 7:00~A.M. 7:00)이었으며, 사료는 실험동물용 펠렛사료 (삼양사료주식회사, 천안)를 사용하였고, 물은 상수도수를 자유 섭취시켰다.</p><h2>구강점막자극 시험</h2><p>Syrian 햄스터를 예비실험을 통하여 적정기간 층분히 마취될 수 있는 농도인 \(90\mathrm{mg} / \mathrm{kg}\) BW의 pentobarbital so-dium으로 마취한 후 왼쪽 협낭 (cheek pouch)을 조심스럽게 끌어 당겨 생리식염수로 세정한 뒤 체중 \(\mathrm{kg} \) 당 \(5 \mathrm{g} \)의 hydroxyapatite 소결체 시료를 협낭의 맨 밑바닥에 놓이도록 하여 시료가 들어갈 수 있도록 주머니를 만든 뒤 Fehland intestinal forceps로 고정시켜 멸균된 견제 봉합사(Silk No. 1)를 사용하여 simple continuous suture로 일단 봉합한 후 다시 continuous everting matters suture로 이중봉합(double suture)을 실시하였다. 대조군도 7마리의 햄스터를 이용하여 hydroxyapatite 소결체 분말을 넣지 않고 생리식염수만을 투여한 후 동일한 처치를 실시하였다. 14일간 체중 및 임상 증상의 변화를 관찰하고 14일 후에 pentobarbital sodium으로 안락사 시킨 후 시료와 접촉된 협낭을 조심스럽게 끌어당겨 육안적으로 병변유무를 확인한 다음 협낭을 절제하고 고르게 편 뒤 \( 10\% \) buffered formalin에 고정시켜 탈수, 파라핀 포매 등의 일반적인 조직처리과정을 거친 다음 \(4 \sim 5 \mathrm{um} \) 두께의 파라핀 절편을 만들어 Hematoxylin & Eosin (H & E) 염색을 실시한 후 광학현미경 (Nicon Co., Japan)으로 관찰하였다.</p><h2>통계학적 처리</h2><p>시험결과는 Student t-test를 이용하여 대조값과 비교, 분석하였다. 전 항목에 대하여 \( \mathrm{P}<0.05 \) 의 수준에서 유의성을 검증하였다.</p>