PT : 시료액을 첨가하여 3분간 가온 후, \( 130 ~ \mu \mathrm { l } \)의 PT를 첨가하고 혈장이 응고될 때까지의 시간을 측정하였고, 대조구조는 아스피린을, 용매 대조구로는 DMSO을 사용하였을 때, DMSO의 경우 18.1초의 응고시간을 나타내었다. aPTT : 시료추출액을 첨가하여 3분간 가온 후, \( 50 ~ \mu \mathrm { l } \)의 aPTT reagent를 첨가하고 다시 3분간 배양하였다. 혈장이 응고될 때까지의 시간을 측정하였고, 용매 대조구로는 시료 대신 DMSO를 사용하였을 때 55.1초의 응고시간을 나타내었다.
<p>PT: 표준혈장 \( 70 ~ \mu \mathrm { l } \)와 다양한 농도의 시료액 \( 10 ~ \mu \mathrm { l } \)를 Amelung coagulometer KC-1A의 튜브에 첨가하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 3분간 가온 후, \( 130 ~ \mu \mathrm { l } \)의 PT reagent (MD Pacific Co., China)를 첨가하고 혈장이 응고될 때까지의 시간을 3회 반복한 실험의 평균치로 나타내었다. 대조구로는 아스피린을 사용하였으며, 용매 대조구로는 DMSO를 사용하였다. DMSO의 경우 18.1초의 응고시간을 나타내었다. 프로트롬빈 저해 효과는 3회 이상 반복한 실험의 평균치로 나타내었으며, 시료 첨가시의 응고시간을 용매 대조구의 응고시간으로 나눈 값으로 나타내었다.</p> <p>aPTT: 혈장 \( 100 ~ \mu \mathrm { l } \)와 다양한 농도의 시료 추출액 \( 10 ~ \mu \mathrm { l } \)를 Amelung coagulometer KC-1A의 튜브에 첨가하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 3분간 가온한 후, \( 50 ~ \mu \mathrm { l } \)의 aPTT reagent (Sigma, ALEXIN \( { } ^ { TM } \)를 첨가하고 다시 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 3분간 배양하였다. 이후 \( 50 ~ \mu \mathrm { l } ~ \mathrm { CaCl } _ { 2 } ~(35~ \mathrm { mM } ) \)을 첨가한 후 혈장이 응고될 때까지의 시간을 측정하였다. 용매 대조구로는 시료 대신 DMSO를 사용하였으며, 이 경우 55.1초의 응고시간을 나타내었다. aPTT의 결과는 3회 반복한 실험의 평균치로 나타내었으며, 시료 첨가시의 응고시간을 용매 대조구의 응고시간으로 나눈 값으로 나타내었다.</p> <h2>기타 분석</h2> <p>팥 추출물의 총 flavonoid의 함량 측정은 기존의 보고에 따라 측정하였으며, 각각의 시료를 18시간 메탄올 교반 추출하고 여과한 추출검액 \( 400 ~ \mu \mathrm { l } \)에 \( 90 \% \) diethylene glycol \( 4 ~ \mathrm { ml } \)를 첨가하고 다시 \( 1 \mathrm { ~N } ~ \mathrm { NaOH } ~40 ~ \mu \mathrm { l } \)를 넣고 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 1시간 반응 후 \( 420 \mathrm { ~nm } \)에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 rutin을 사용하였다. 총 polyphenol 함량은 추출 검액 \( 400 ~ \mu \mathrm { l } \)에 \( 50 ~ \mu \mathrm { l } \)의 Folin-ciocalteau, \( 100 ~ \mu \mathrm { l } \)의 \( \mathrm { Na } _ { 2 } \mathrm { CO } _ { 3 } \) 포화용액을 넣고 실온에서 1시간 방치한 후 \( 725 \mathrm { ~nm } \)에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다. 총당 정량의 경우에는 phenol-sulfuric acid법을, 환원당 정량의 경우에는 DNS 변법을 이용하였다. 각각의 분석결과는 3회 반복한 실험의 평균과 편차로 나타내었다.</p>