시료에 대해 \( 50 \%( \mathrm { w } / \mathrm { w } ) \) 비율로 실리카-알루미나 혼합물을 첨가한 후, \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 30분간 교반하여 반응시켰다. 그 후 paclitaxel의 메탄올 용액에서의 용해도 차이를 이용하여 분별침전을 수행하였고, 그 결과로 얻은 시료의 순도는 \( 44. 3 \% \)로 측정되었다. 또한 paclitaxel 침전물을 얻기 위해 분별침전 용 액에 혼합물을 첨가하여 저온 항온항습기에서 보관하였다.
<p>시료 대비 \( 50 \%( \mathrm { w } / \mathrm { w } ) \) 비율로 첨가하여 \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 분 동안 교반하며 반응시킨 후 여과하였다. 여과액은 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 감압상태에서 건조하여 헥산 침전에 이용하였다. 건조된 시료를 메틸렌 클로라이드에 녹여 헥산 용액에 떨어뜨려 침전을 유도하 여 비극성불순물(non-polar impurity)을 제거하였다(메틸렌클로라이드/헥산 \( = 1 / 10, \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \). 헥산 침전 후 여과를 통하여 paclitaxel 침전물을 회수하고 24 시간 동안 진공건조(UP-2000, EYELA, Japan)하여 분별침전에 이용하였다. 헥산 침전 후 건조된 시료의 순도는 \( 44.3 \% \) 이었다.</p> <h2>분별침전(fractional precipitation)</h2> <p>메탄올 용액에서 paclitaxel의 용해도 차이를 이용한 분별침전 공정의 개략도를 Fig. 2 에 나타내었다. 분별침전을 위하여, 헥산 침전을 통해 얻은 시료(순도: \( 44.3 \% \) )을 메탄올에 녹이고(pure paclitaxel basis: \( 0.5 \%, \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) 메탄올 농도가 \( 61.5 \% \) 가 될 때까지 증류수를 교반 \( (180 \mathrm { rpm } ) \) 하에 한 방울씩 떨어뜨렸다. 반응액 부피당 표면적 \( \left (1007.6 \mathrm { ~mm } ^ { -1 } \right ) \) 증가 및 제타전위 조절을 위하여, Table 1에서 보는 바와 같이 다양한 종류의 실리카-알루미나 혼합물 \( \left ( \mathrm { Al } , \mathrm { Al } _ { 0.8 } \mathrm { Si } _ { 0.2 } , \mathrm { Al } _ { 0.5 } \mathrm { Si } _ { 0.5 } \right . \), \( \left . \mathrm { Al } _ { 0.2 } \mathrm { Si } _ { 0.8 } , \mathrm { Si } \right ) \) 을 제조하여 분별침전에 이용하였다. 제조된 실리카-알루미나 혼합물을 각각 분별침전 용액에 첨가한 후 저온 \( \left (4-7 ^ {\circ } \mathrm { C } \right ) \) 의 항온항습기(KCL-2000W, EYELA, Japan)에 보관하여 paclitaxel 침전물을 얻었다. 분별침전 용액에서의 표면적증가물질(실리카-알루미나)의 제타전위는 ELS-Z (Photal, Japan)를 이용하여 측정하였다. 분별침전 후 침전물을 여과하고 \( 35 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 24 시간 동안 진공오븐(UP-2000, EYELA, Japan)에서 건조하여 HPLC로 분석하였다.</p>