난소절제 수술을 통해 1주일 동안 주위환경에 적응시킨 뒤, 복부를 절개하여 난소를 제거하고 절개부는 봉합하였고, 비 난소절제군은 양측의 난소를 노출 하였다가 절제하지 않고 다시 봉합하는 모의수술(sham operation)을 시행하여 대조군으로 사용하고, 혈액은 혈류 측정을 위해 헤파린 처리된 튜브를 사용하였다. LDL-콜레스테롤은 Friedewald 공식에 의해 산출하고, 동맥경화지수(atherogenic index)와 심혈관위험지수 (cardiac risk factor)는 공식을 이용하여 산출하였고, 혈류 측정은 전혈을 사용하고 헤파린 처리된 튜브로 응고를 방지, 채취한 혈액을 주입해 측정했다.
<h2>난소절제시술</h2> <p>1주일 동안 주위환경에 적응시켜 체중에 따라 난괴법에 의해 군을 나누어 난소절제 수술을 실시하였다. 수술은 에테르로 마취하여 심마취기에 이르면 복부를 절개하여 난소를 제거하고 절개부는 봉합하였다. 수술 후 일주일간 일반 식이로 상처를 회복시킨 후 각 추출물 시료를 증류수에 용해하여 경구 투여하였다. 또한 대조군 설정을 위하여 비 난소절제군은 복막 절개까지 난소절제 수술과 같은 방법으로 시행하고, 양측의 난소를 노출 하였다가 절제하지 않고 복막 속으로 다시 넣어 난소절제와 같은 스트레스를 주고 다시 봉합하는 모의수술(sham operation)을 시행하여, 이들을 대조군으로 사용하였다.</p> <h2>혈액 채취</h2> <p>혈액은 실험동물을 해부 전 24시간 절식시킨 후 에테르 마취 하에 개복한 후 복대동맥에서 채취하여 혈류 측정을 위해 헤파린 처리된 튜브를 사용하고, 혈액응고 실험을 위해 \( 3.2 \% \) sodium citrate를 1:9의 비율로 혼합하여 분석에 사용하였다. 또한 혈액의 생화학적 분석을 위해 상온에서 30 분간 방치한 후, \( 3,000 \mathrm { rpm } \)에서 10 분간 원심 분리하여 혈청을 분리하여 사용하였다.</p> <h2>혈청 중의 지질농도 분석</h2> <p>혈청 중 중성지방, 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤 농도는 자동 측정용 slide (FUJ FILM, JAPAN)를 이용하여 Dry chemistry analyzer 3500i (Fuji, Japan)로 \( 400 \sim 600 \mathrm { ~nm } \) 파장에서 측정하였다. 고밀도 지단백(HDL-cholesterol)의 경우 침전제를 이용하여 유미지립(chylomicron), 저밀도 지단백(low density lipoprotein, LDL) 및 초저밀도 지단백(very low density lipoprotein, VLDL)을 침전시킨 후 상층액에 있는 HDL- 콜레스테롤을 측정하였다. LDL-콜레스테롤은 Friedewald 공식에 의해 산출하였다. 또한 심혈관질환의 위험도 판정에 이용되는 동맥경화지수(atherogenic index)와 심혈관위험지수 (cardiac risk factor)는 다음 공식을 이용하였다.</p> <ul> <li>LDL cholesterol \( = \{\) total cholesterol \( - \) \(( \)HDL-cholesterol \(- \) triglyceride \(/ \)5 \() \) \( \} \)</li> <li>AI \( ( \) atherosclerotic index \( ) \) \( = \) \( ( \) total cholesterol-HDL-cho-lesterol \( ) \) \( / \) HDL-Cholesterol</li> <li>CRF \(( \)cardiac risk factor \() \) \(= \) total cholesterol \(/ \) HDL-cholesterol</li></ul> <h2>혈류 측정</h2> <p>혈류 측정은 전혈을 사용 하였고, 채취한 혈액을 헤파린 처리된 튜브를 사용하여 응고를 방지한 후, Micro Channel Array Flow Analyzer KH-6 (MC Lab, Japan)을 이용하여 채취한 혈액 100 \( \mu \mathrm { l } \)를 주입하여 측정하였다.</p>