본 연구는 에스트로겐 수용체를 발현하는 인체 유방암 세포주에 에스트로겐 반응성을 나타내도록 고안된 CAT 리포터 pDsCAT-ERE119-Ad2MLP를 도입한 in vitro 검출시스템을 이용하여 해양생물 추출물로부터 에스트로겐 유사활성 검증을 진행하였으며, 본 실험에서 사용한 해조류 시료들은 국내 자생 또는 야식되는 시료를 구입하여 사용하였다. 미역 등 해조류는 건조시킨 후 ethanol을 첨가하여 추출을 진행하였으며, 이를 다시 hexane 등을 이용해 분획한 후 speed vacuum evaporation으로 농축시켜 각각 용매에 대한 분획물을 제조하였다.
<h1>서 론</h1> <p>우리나라에 분포하는 해조류는 750여 종으로 보고되고 있으며 그. 중 산업적으로 식용 또는 공업용으로 이용되고 있는 해조류는 30여 종 이내이다. 해조류에는 녹조류, 홍조류, 및 갈조류가 있으며 이들은 얕은 바다의 서식지를 풍요롭게 하고 있다. 녹조류의 대표적인 식품인 파래(Enteromarpha)는 항산화 효과가 우수하며, 지질과산화물이 단백질과 결합하는 반응을 매우 효과적으로 저해한다고 보고되었다. 홍조류인 김(Porphyra tenera)은 신경종양, 간암 및 유방암세포의 성장억제 효과가 탁월한 것으로 알려졌다. 갈조류에는 미역(Undaria pinnatifida), 다시마(Laminaria japonica), 모자반(Sargassum) 등이 있으며, 이들은 항암활성과 angiotensin-I converting enzyme 저해와 관련된 고혈압 억제 활성을 갖는 것으로 알려져 있다.</p> <p>한편 혈중 에스트로겐 농도가 \( 5 \mathrm { pg } / \mathrm { ml } \) 이하인 폐경 여성은 그 이상의 혈중 농도를 보이는 여성에 비해 척추 골절과 대퇴부 골절의 상대적 위험이 2.5배 증가되므로 이를 예방하기 위하여 혈중 에스트로겐 농도를 인위적으로 상승시키는 것이 필요하다. 건강기능식품 소재로 활용되는 일부 식물의 추출물 중에는 여성호르몬인 estrogen과 화학적 구조와 활성이 유사한 phytoestrogen을 포함하고 있으며, phytoestrogen은 합성 estrogen과 달리 부작용이 적은 것으로 알려져 있다. Phytoestrogen을 섭취한 여성의 경우 폐경증후군(postmenopausal syndrome) 증상인 심혈관계 질환, 치매와 골다공증을 예방 및 완화시키고, 진행 중인 골다공증의 치료에도 효과가 있다고 보고되었다.</p> <p>본 연구진은 이전 연구에서 에스트로겐 수용체를 발현하는 인체 유방암 세포주에 에스트로겐에 반응성을 나타내도록 고안된 CAT (chloramphenicol acetyltransferase) 리포터인 pDsCAT-ERE119-Ad2MLP를 도입한 in vitro 검출시스템을 사용하여 해양생물 추출물로부터 에스트로겐 유사활성을 검증하여 보고하였다.</p> <p>본 연구에서는 확립된 in vitro 검출시스템을 이용하여 갈조류인 미역(Undaria pinnatifida), 다시마(Laminaria japonica), 곰피(Eckonia stolonifera) 및 돌자반(Porphyra suborbiculate)의 에탄올 추출물로부터 hexane, methanol, \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } \) 및 butanol 분획물을 제조하였고 이들의 에스트로겐 유사활성을 검증하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>재료</h2> <p>본 실험에 사용한 해조류 시료들은 국내에서 자생 또는 양식되는 갈조류의 생시료를 구입하여 부착물을 제거하고 수세 및 건조시킨 후 분쇄한 다음 밀봉하여 보관하면서 사용하였다.</p> <h2>해조류 추출물의 제조 및 용매에 따른 분획</h2> <p>미역(Undaria pinnatifida), 다시마(Laminaria japonica), 곰피(Ecklonia stolonifera) 및 돌자반(Porphyra suborbiculate)의 건조 분말시료에 10배량 \( ( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \)의 \( 80 \% \) ethanol을 첨가하여 \( 80 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 8시간 동안 추출을 행하였으며, 추출액을 지름 \( 150 \mathrm { ~mm } \)의 여과지(Advantec, Japan)로 2회 여과하여 에탄올 추출시료로 하였다. 에탄올 추출시료를 다시 hexane, methanol, \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } \), butanol 등을 이용하여 Fig. 1에 나타낸 방법으로 분획을 행한 후, speed vacuum evaporation으로 농축하여 각각의 용매에 대한 분획물을 제조하였다.</p>