ABEE의 농도에 의한 환원력과 지질과산화, hydroxyl radical에 의한 DNA damage, 세포 성장에 대한 항산화 효과를 조사하였다. 결과 ABEE는 0.0025% 이상의 농도에서 대조군과 비교하여 유의적인 항산화 효과를 보였고, Fenton 반응에 의하여 발생된 hydroxyl radical이 ABEE 0.05% 이상에서 농도 의존적으로 억제되는 것이 확인되었으며, MTT assay를 통해 ABEE 0.01% 이하의 농도에서 대조군과 비교하여 어떠한 독성효과도 없는 것으로 나타났다.
<h2>통계처리</h2> <p>각 실험은 3회 이상 반복실험을 통하여 그 결과를 얻어 각각의 시료농도에 대해 평균 \( \pm \) 표준편차로 나타내었다. 각 시료 농도군에 대한 유의검정은 대조군과 비교하여 Student's t test 한 후 \( { } ^ { * } p<0.05, { } ^ { * * } p<0.01, { } ^ { * * * } p<0.001 \)값을 통계적으로 유의성 있는 결과로 간주하였다.</p> <h1>결 과</h1> <h2>ABEE의 환원력과 지질과산화에 대한 항산화 효과</h2> <p>환원력을 알아본 Fig. 1A에서는 ABEE의 농도에 의존하여 환원력이 증가 하는 것을 관찰할 수 있었다. 또한 지질과산화 억제효과를 알아본 Fig. 1B에서는 양성 대조군으로 알려진 Vitamin E가 \( 0.01 \% \)에서 \( 63 \% \)의 지질과산화 억제효과를 보여주었으며, ABEE는 \( 0.0025 \% \) 이상의 농도에서 대조군과 비교하여 유의적인 억제효과를 확인 할 수 있었다.</p> <h2>Hydroxyl radical에 의한 DNA damage에 대한 ABEE의 보호 효과</h2> <p>EA-HY-926 세포로부터 분리한 genomic DNA를 이용하여 Fenton 반응에 의하여 발생된 hydroxyl radical에 의한 DNA의 산화적 손상에 대한 ABEE의 항산화 효과를 조사하였다. Fig. 2에서 나타난 것과 같이 Fenton 반응에 의하여 발생된 hydroxyl radical이 ABEE \( 0.05 \% \)이상에서 농도 의존적으로 억제되는 것이 확인되었다. 대조군(control)에서는 공시험군(blank)에 비하여 Fig. 2에서 DNA가 hydroxyl radical에 노출되면서 산화에 의해 DNA가 분해되는 것이 관찰되었다. 반면, ABEE를 \( 0.000625,0.00125,0.0025,0.005,0.01 \% \)의 농도 별로 처리한 군은 ABEE가 hydroxyl radical에 의한 genomic DNA 의 산화적 손상이 억제하였다.</p> <h2>세포 성장에 대한 ABEE의 효과</h2> <p>ABEE가 세포독성에 미치는 농도를 조사하기 위하여 MTT assay를 수행 하였다. RAW 264.7와 EA-HY-926 세포에 대한 ABEE의 세포독성을 측정한 결과, Fig. 3 (A) RAW 264.7, (B) EA-HY-926 세포에서 보는 바와 같이 ABEE \(0.01 \% \) 이하의 농도에서 대조군과 비교 하였을 때 어떠한 독성효과도 없는 것으로 나타났다.</p> <h2>Nitric oxide (NO) 생성에 대한 ABEE의 효과</h2> <p>EA-HY-926 세포로부터 생성되는 NO와 LPS (lipopolysaccharide)에 의해 RAW 264.7세포에서 생성되는 NO에 대한 ABEE의 억제효과를 세포배양액으로부터 Griess assay 방법으로 측정하였다. ABEE는 \( 0.000625,0.00125,0.0025,0.005 \), \( 0.01 \% \) 의 처리 농도로 세포에 처리 하였다. ABEE로 \( 0.01 \% \)를 처리한 세포군에서 NO의 생성 함량은 공시험군과 비교 했을 때 약 \( 40 \% \) 증가 되었다. Fig. 4A에서 나타난 것과 같이, ABEE는 \( 0.0025 \% \) 이상의 농도에서 혈관내피세포에서 농도에 따라 NO생성을 증가 시켰다. Fig. 4B에서 보는 바와 같이 아사이베리 EtOH 추출물을 처리한 group과 LPS를 처리한 세포군과 비교 했을 때 \( 0.000625 \% \) 이상의 농도에서 NO 생성이 유의적으로 억제 되는 것으로 나타났다.</p>