FDA 및 Bergey's manual을 근거로, 분리한 변패 원인균의 특성을 조사하였다. 형태학적 및 생화학적 시험, BHI배지 배양, peptone water 접종 등을 통해 생화학적 특성을 확인하고, 용혈성 유무를 확인하기 위해 배양 후 집락 주변의 투명환 생성 여부를 확인했다. 피부 혈관 투과성 항진을 조사하기 위해 항진에 따른 spot 생성 유무를 확인하고 배양액을 공급한 후 설사 유무를 확인했다.
<h2>분리한 변패 원인균의 특성 연구</h2> <p>분리된 변패 원인균의 형태학적 및 기본적인 생화학적 특성조사를 위해 FDA 및 Bergey's manual을 근거로 하여, 형태학적 및 생화학적 시험, Gram staining, oxidase, cata-lase, indole, hemolysis, MR-VP test, citrate, TSI test 등을 반복 실시하였다. 또한 분리간주 각각의 생육곡선을 나타내기 위해 BHI배지 \(200 \mathrm { ml } \)에 \(1 \%( \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \)접종하여 \(37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 배양하면서 일정시간 간격으로 \(600 \mathrm { ~nm } \)에서의 흡광도를 측정하였다. 또한 분리된 균주를 \( \mathrm { pH } 2.0-10.0 \) 까지 1.0단위로 조정한 peptone water에 한 백금이씩 접종하여 \(37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 24시간 진탕배양한 후, 균의 증식여부를 확인하였다. 분리균주의 온도에 의한 영향은, 분리균주를 BHI broth에 \(37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)로 24시간 배양한 균액을 \( \mathrm { pH } 7.0 \)으로 조절하여 제조한 peptone water에 한 백금이 씩 접종하여 \(20-45 ^ {\circ } \mathrm { C } \)의 온도구간에서 48시간동안 진탕배양한 후 중식여부를 확인하였다.</p> <h2>용혈성 유무 실험</h2> <p>BHI agar 사면배지에서 24시간 배양한 균을 한 백금이 취하여 혈액평판배지 (sheep blood agar)에 획선하고, \(37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 24시간 배양 후 집락주변의 투명환 생성여부를 통해 확인하였다.</p> <h2>피부혈관 투과성 항진 실험</h2> <p>실험동물로 Sprague-Dawley계 동물을 효창 사이언스 (대구)로부터 구입하여, 1주일간 표준식이로 순화과정을 거친 후 실험에 사용하였다. BHI broth에서 \(37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 24시간 배양한 분리균주의 배양액 \(0.1 \mathrm { ml } \)씩을 흰쥐 (평균체중 \(250 \mathrm { ~g } \))의 털을 깎은 등피 중간층 피하에 주사하고, 6시간 경과 후 흰쥐의 등 피부를 잘라 내피 쪽에서의 혈관투과성항진에 따른 spot 생성 유무를 관찰하였다.</p> <h2>설사유무 실험</h2> <p>실험동물로 생쥐는 ICR계를, 횐쥐는 Sprague-Dawley계 동물을 효창 사이언스 (대구)로부터 구입하여, 1주일간 표준 식이로 순화과정을 거친 후 실험에 사용하였다. 분리된 각각의 균주를 BHI broth \(100 \mathrm { ml } \)에 한 백금이 접종하여 \(37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 24시간 배양한 후, \(600 \mathrm { ~nm } \) 에서의 O.D. (optical density)값을 동일하게 맞추고, 배양액을 \(0.85 \% \) 생리식염수에 10배 희석하여 공급한 후, 설사유무를 3일간 확인하였다.</p>