부산의 임상 실험실로부터 ESBL 유전자를 포함하는 Klebsiella pneumoniae 균주를 수집하여 항생제 내성 패턴을 조사하였다. 이후 재조합된 균주들을 이용하여 3세대 cephalosporin 항생제에 대한 최소억제농도를 측정하고 비교 분석하였다. 결론적으로, conjugant 균주와 transformant 균주는 모두 세 가지의 내성유전자를 가졌으나, conjugant 균주의 MIC 값이 transformant 균주의 MIC 값보다 높게 나타났다.
<h1>요약</h1><p>우리는 ESBL 유전자를 포함하는 세균의 항생제 내성 패턴을 조사하기 위해서 부산에 있는 임상실험실로부터 Klebsiella pneumoniae 한 균주를 수집하였다. 그 세균은 이중 디스크 확산법에 의해 ESBL을 생성하는 Klebsiella pneumo-niae라는 것이 밝혀졌고 PCR과 DNA 염기서열분석을 통하여 세 가지의 ESBL gene (TEM-1, SHV-12, CTX-M-15)이 포함되어 있다는 것이 확인 되었다. 그리고 그 세 가지 유전자의 특징을 알아내기 위해서 우리는 이 균주로부터 교차접합시험, 형질전환시험, 클로닝(SHV-12 gene) 등을 이용하여 재조합균주를 배양하였다. 이렇게 각기 재조합된 균주들을 한천평판희석법을 이용하여 3세대 cephalosporin 항생제 (ceftazidime, cefotaxime, ceftriaxone)에 대한 최소억제농도의 측정하고 비교 분석 하였다. Klebsiella pneumoniae (NO. 60031)의 MIC는 ceftazidime \( (30 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}) \), cefotaxime \( (30 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}) \), ceftriaxone \( (30 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}) \) 이 각각 \( \geq 256 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}\), \(128 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}\), \(128 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 이었고, E. coli \( \mathrm{RG}176^{\mathrm{Na}} \) 에 교차접합 시킨 conjugant 균주의 MIC는 ceftazidime, cefotaxime, ceftriax-one이 각각 \( \geq 256 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}\), \(64 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}\), \(128 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 이었다. E. coli DH 5\(\alpha \) 에 형질전환 시킨 transformant 균주의 MIC는 cef-tazidime, cefotaxime, ceftriaxone이 각각 \( 128 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}\), \(32 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}\), \(32 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 를 나타내었고, SHV-12 gene 만을 분리하여 E. coli DH 5\(\alpha \) 에 클로닝 시킨 균주는 ceftazidime, cefotaxime, ceftriaxone이 각각 \( 128 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}\), \(8 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}\), \(32 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 을 나타내었다. 결국 conjugant 균주와 transformant 균주는 세 가지의 내성유전자를 가졌다는 공통점은 있으나 conjugant 균주의 MIC가 transformant 균주의 MIC보다 높게 나타나는 차이점을 보였다. 또한 SHV-12 gene 만을 분리하여 E. coli DH5a에 클로닝 시킨 균주는 ceftazidime, ceftriaxone에 내성을 발현 하였지만 cefotaxime에 대해서는 내성을 발현하지 않았다.</p>