항생제 대체제로 프로바이오틱스는 소화, 미생물경쟁, 면역방어 등의 기능을 통해 증체 및 생존율을 향상시키고 프로바이오틱스는 “적당량을 섭취하였을 때 숙주동물에게 건강상이익을 주는 살아있는 미생물”로 정의되고 있다.양돈용 프로바이틱스 유산균은 현재까지 대부분 Lactobacillus spp를 중심으로 연구되어왔고 동물유래 시료로부터 양돈 사료첨가용유산균을 개발하기 위해 ETEC,Salmonella spp,C perfringens등 양돈산업에서 심각한 문제를 일으키는 병원성 세균을 강력히 저해하는 Bifidobacterium유산균을 분리하고자 하였고 분리 유산균의 내산성,돼지소장 상피세포,내담즙성에 대한 부착능력 등을 연구해 양돈 사료첨가용 프로바이오틱스로 적합한 균주를 선발하고자 했다.
<h1>서 론</h1> <p>양돈 산업이 대규모로 산업화되면서 세균에 의한 설사방지를 위하여 항생제의 사용으로 질병감소 및 가축생산성이증대되는 효과를 가져왔으나 항생제의 과다사용으로 인한항생제 내성균의 출현 및 축산물 잔류독성의 문제가 야기되면서 국내에서 항생제의 사료첨가 사용을 금지하기 시작하였다. 항생제 대체제로서 프로바이오틱스는 소화, 미생물경쟁, 면역방어 등의 기능을 통하여 증체 및 생존율을 향상시킬 수 있다.</p> <p>특히 자돈은 이유 후 모체항체의 고갈, 잘 소화되지 않은물질의 섭취로 인한 병원균 성장의 기회제공, 높은 온도 및습도로 인한 면역세포 분비의 억제, 섭취 스트레스[15], 집단 스트레스 등으로 설사 빈도가 높아짐으로써 이유 후20%이상의 높은 치사율을 나타낸다.</p> <p>장독소성대장균(enterotoxigenic E. coli, ETEC)은 특히이유 후 스트레스로 인하여 1주일 경에 작은창자에 주로 감염되어 대장균증을 일으키며 증상은 장관에 부착하여 독소를 생산하며 설사, 탈수, 부종 등을 일으킨다. 이유 후ETEC로 인한 질병발병률이 평균 25% 이상이며 최고 80%에 달한다. Salmonella Typhimurium는 생후 8−12주에살모넬라증을 일으키며 작은창자 및 큰창자에 감염되어 설사를 일으킨다. Clostridium perfringens는 유포자성 그람양성 혐기성 바실러스 형태로써 type A, C가 있으며, 1주가 안된 면역성이 약한 돼지의 작은창자에서 증식하여 치명적인 괴사성 장염, 출혈성 설사를 일으키며 급성의 경우빠르게 치사하기도 한다.</p> <p>프로바이오틱스는 “적당량을 섭취하였을 때 숙주동물에게건강상 이익을 주는 살아있는 미생물”로 정의(FAO/WHO, 1406.060012001)되고 있다. 프로바이오틱스의 알려진 잇점들은 여러 감염증, 알러지병, 염증성질병을 막아주는 것들이다. 또한세균들에 의한 장내 불균형의 위험을 감소시키며, 설사를 막아준다. 프로바이오틱스로 사용 가능한 미생물은위산 및 담즙산에 대한 저항성, 숙주 소장 표피세포의 정착능력 및 증식능력, 안전성 등의 특징을 갖추어야한다. 양돈용 프로바이틱스 유산균(lactic acid bacteria,LAB)은 현재까지 대부분 Lactobacillus spp.를 중심으로 연구되어왔다.</p> <p>본 연구의 목적은 동물유래 시료로부터 양돈 사료첨가용유산균을 개발하기 위하여 ETEC, Salmonella spp., C.perfringens 등 양돈산업에서 심각한 문제를 일으키는 병원성 세균을 강하게 저해하는 Bifidobacterium 유산균을 분리하고자 하였다. 또한 분리 유산균의 내산성, 내담즙성, 돼지소장 상피세포에 대한 부착능력 등을 조사하여 양돈 사료첨가용 프로바이오틱스로써 적합한 균주를 선발하고자 하였다.</p> <h1>실험 재료 및 방법</h1> <h2>균 주</h2> <p>본 연구에서 사용된 여러 유산균들과 이들의 source를Table 1 에 나타내었다. L. pentosus K34는 본 실험실의stock culture로서, S. Gallinarum, S. aureus, E. coli 에 항균력이 높은 균주이다.</p> <p>병원성 살모넬라균으로는 Salmonella Gallinarum [대상(주)으로부터 분양], 수의과학검역원으로부터 분양받은 돼지 가검물로부터 분리된 S. Enteritidis 및 S. enterica serovar.Typhimurium(또는 S. Typhimurium)을 사용하였다. 그리고인수공통전염병균으로 그람양성균인 Staphylococcus aureusATCC 29213, Listeria monocytogenes ATCC 19118,Clostridium perfringens (type C) (수의과학검역원, 돼지 가검물로부터 분리)를 사용하였고, 그람음성균인 EnterotoxigenicE. coli (O15:H11, LT + , Statens Serum Institute, Denmark), Campylobacter jejuni ATCC 43430을 사용하였다.</p>