U937 세포에서 PMA 처리를 통해 PGE_2의 생성이 증가하였으나, FS, FBA, FYA 처리에 의해 이 증가가 크게 억제되었음을 확인했다. PMA 처리 시간에 따라 NF-KB의 핵내 이동과 발현이 증가하였고, 이는 PMA 처리 후 2시간에 가장 강하게 발현하였다. 또한, FS, FBA, FYA의 항염증 효과를 비교 분석하기 위해, 이들이 PMA 처리로 인한 염증 유발 인자들의 발현에 미치는 영향을 조사하였다.
<h2>PMA에 의한 PGE2 생성 증가에 미치는 FS, FBA 및 FYA의 영향</h2> <p>U937 세포에서 PMA에 의한 PGE_2 의 생성 증가에 미치는 FS, FBA 및 FYA의 영향을 조사하기 위하여, 먼저 PMA 처리 에 의해서PGE_2 의 생성이 현저하게 증가하는 것을 확인하였 다. 그러나 PMA 처리에 의하여 증가된 PGE_2 의 생성이 FS, FBA및 FYA의 처리에 의하여 현저하게 억제되었는데, PGE_2 의 생성 억제에서는FS에 비해 FBA와 FYA 처리군에서 더욱 회.과적이었다. 이는 FS, FBA 및 FYA에 의한 COX-2의 발현저하에 의한 결과로 추정할 수 있었다.</p> <h2>NF_kBB 의 translocation에 미치는 PMA의 영향</h2> <p>PMA를 시간별로 처리를 하였을 때 핵 안으로 translocation된 NF-KB 의 발현을 퐌찰한 결과, 처리시간 중가에 따라 핵내에 존재하는NF-KB 의 발현이 중가하였으며 특히 PMA 처 리 후 2 시간째에 강하게 발현됨을 확인할 수 있었다. 또한 PMA 처리 후 1 시간 후부터 시간이 지남에 따라 세포질에 존 재하는 IKB 의 발현이 서서히 감소하는 것을 확인할 수 있었 다. 따라서 PMA가 IKB의 인산화를 유발시킴으로써 NF-KB를 핵 안으로 translocation 시킨다는 것을 확인하였다.</p> <h2>FS, FBA 및 FYA에 의한 NF-kB 의 translocation 억제</h2> <p>PMA 처리에 의해 핵 안으로 translocation된 NF-KB 의 발현 변화에 미치는 FS, FBA 및 FYA의 영향을 조사한 결과, PMA 에 의해 핵 안으로 translocation되었던 NF-KB가 FS, FBA 및 FYA의 처리에 의하여 translocation 정도가 현저하게 감소되 었으며, 세포질에서 PMA 처리에 의해 감소되었던 IkB의 발현 이 FS, FBA 및 FYA 처리에 의헤 약간 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 이상의 결과는 FS, FBA 및 FYA가 PMA에 의한 NF-KB의 활성 증가를 현저하게 억제하였음을 의미하는 것이다.</p> <h1>고 찰</h1> <p>Phorbol ester의 일종으로 tumor promoter인 PMA는 diac-ylglycerol과 같이 세포 내 단백질을 인산화 시키는 protein kinase C 활성인자로서 성장인자, 호르몬 및 세포의 성장과 분화를 조절하는 cytokine에 의한 기작을 연구하는데 사용되 며, cytokine 및popolysaccharide와 마찬가지로 여러 세포들 에서 COX-2의 발현 및 PG 의 생성을 촉진시키는 염증유발 인자로 알려져 있다. 본 연구에서는 U937 세포 모 델에서 FS, FBA 및 FYA의 항염증 호능을 확인하기 위하여 PMA 처리에 의해 중가되는 염증 유발 인자들의 발현에 미치 는 이들의 효과를 비교하였다. 이를 위하여 U937 세포의 중식 에 FS, FBA 및 FYA가 어떠한 영향을 미치는 지를 알아보기 위해 MTT assay에 의한 세포 중식 억제 여부를 조사한 결과, 6시간동안 최고 농도인 \( 5 \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \) 에서도 생존율이 \( 80 \% \) 정도 였으며 세포사멸이 유도되지 않는 것을 확인함으로써 세포 증식에 FS, FBA 및 FYA가 직접적으로 큰 영향을 미치지 않았 음을 알 수 있었다. 또한 U937 세포에서 PMA에 대한 COX-2의 발현을 증가 시킬 수 있는 조건을 동시에 설정하기 위하여, PMA를 다양한 농도별로 6시간 동안 처리 하였을 경 우, COX-1의 발현에는 큰 변화가 없었으나, COX-2는 \( 40 \mathrm { nM } \) 이상 처리군에서 강하게 발현이 증가되는 것을 확인하였다. 그리고 \( 40 \mathrm { nM } \) PMA에 의한 COX-2의 발현이 처리 6 시간 후에 가장 발현이 높게 나타났다.</p>