염류의 농축에 따른 Cochlodinium polykrikoides의 살조효과를 비교 분석하였으며, 이를 위해 해수의 주요 11가지 이온을 대상으로 농도를 조절하였다. 이 외에도 다른 적조생물에 대한 이온의 살조 및 성장제한 효과도 검토했다. 또한, 적조발생해역인 마산만의 표층수에서 분리한 Kordia algicida는 적조생물에 대한 종 특이적인 살조능력을 보여 신속 신종으로 분류되었다.
<h2>살조할성에 미치는 Salts의 효과</h2> <p>염류의 농축에 따른 Cochlodinium polykrikoides의 살조효과를 비교하기 위하여 다음과 같이 수행하였다. 실험에 사용된 염류는 해수의 주된 구성성분인 11가지 \( \left ( \mathrm { NH } _ { 3 } , \mathrm { Mg } , \mathrm { Ca } , \mathrm { Na } \right . \), \( \mathrm { K } , \mathrm { Li } , \mathrm { Al } , \mathrm { Mn } , \mathrm { Fe } , \mathrm { Co } , \mathrm { Zn } \) )를 대상으로 \( 1 ~ \mu \mathrm { M } \sim 1,000 \mathrm { ~mM } \)까지 농도를 조절하여 염류의 농축에 따른 적조생물의 영향을 조사하였다.</p> <p>멸균된 48-well plate에 이온 당 \( 0.001,0.01,0.1,1,10,100 \), \( 250,500,1000 \mathrm { ~mM } \)까지 농도를 조절하여 첨가하였으며 C. polykrikoides의 세포는 well당 \(1,000 \mathrm { ~cells/ml } \)이 되도록 조절하여 첨가하였다. 또한 각각의 염류농도는 신뢰성을 확보하기 위하여 3개의 반복수를 갖도록 하였다. 세포의 형태적인 변화는 조류배양기에서 배양하며 일정시간 간격으로 도립현미경 하에서 관찰하였다. 형태적 변화의 관찰기준은 세포의 운동성감소, 사슬의 해리, 세포의 확장, 세포의 파괴정도를 기록하였다. 또한 C. polykrikoides 이외에 Gymnodinium san-guieum 및 Skeletoneama costatum을 대상으로 5가지 이온 \( \left ( \mathrm { NH } _ { 3 } \right . \), \( \mathrm { Mg } , \mathrm { Ca } , \mathrm { Na } , \mathrm { K } ) \)에 의한 살조 및 성장제한 효과를 상기에 기술된 방법에 따라 조사하였다.</p> <h2>화학분석</h2> <p>별도의 시험에서 암모니아 이온의 분석은 Phenate 방법을 이용하였으며 \( \mathrm { MeOH } \) 추출물과 GPC 활성 분획물의 ICP/MS(Perkinelmer Co.) 분석은 한국수도시험연구원에 의뢰하여 수행하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>Kordia algicida 배양액에 의한 살조특성</h2> <p>살조세균으로 분리된 Kordia algicida는 적조발생해역인 마산만의 표층수에서 분리하였다. 적조생물과 미생물을 함께 배양하였을 때 K. algicida는 적조생물에 대한 종 특이적인 살조능력을 나타내었으며 분류학적 특성조사에 의하여 신속 신종으로 명명되었다.</p> <p>균체가 제거된 K. algicida의 배양액을 Cochlodinium poly-krikoides의 배양액내에 접종하였을 때 2시간이내에 대부분의 세포를 사멸시켰다. 시간의 경과에 따른 C. polykri-koides의 사멸과정은 초기에 세포내 기관의 파괴와 함께 세포가 팽창되었으며 이후 사슬의 분리와 함께 세포가 용혈되는 현상을 관찰할 수 있었다. 이와 반대로 배양액으로 사용된 ZoBell 2216E 액체배지가 첨가된 대조구에서는 사멸현상이 관찰되지 않았다. 이는 적조생물을 특이적으로 사멸시키는 물질이 살조세균으로부터 생성되었음을 의미한다. Gymno-dinium sanguieum은 미생물과의 공조배양동안 성장의 제한 및 사멸현상이 관찰되지 않았으나 Zobell 2216E배지에서 배양된 K. algicida의 배양여과액은 C. polykrikoides와 동일한 과정을 통하여 사멸되었음을 확인하였다. 미생물배양여액을 이용한 편모조류의 사멸과정은 Lovejoy 등이 보고한 Gymnodinium의 사멸과정과 일치하였다. 살조원인물질은 Pseudoalteromonas sp.가 생산하는 것으로 아직 물질의 동정 및 특성에 대하여 명확히 밝혀진 바 없다.</p>