생쥐에거 PTZ를 투여하여 10분 이내에 전신성 경련을 관찰할 수 있었다. 항경련 유도제를 비교한 결과 모든 유도체들이 경련 억제 효과가 있었으나 T-4가 가장 효과가 좋았다. MES를 시행하여 경련을 유발시키면 자극 후 경련 반응이 즉각적으로 나타났다. 경련이 발생한 쥐는 대조군과 비교해 해마부 및 피질부 모두에서 NOS가 증가되었다.
<h1>결 과</h1> <p>정상적인 활동을 보이는 생쥐에 PTZ 투여로 경련을 유발하였다. 그림 2 의 A는 PTZ 투여 전의 생쥐 사진이며, PTZ를 생쥐의 복강에 투여하면 대개 10 분 내에 전신성 경련이 관찰되었다. 긴장성 경련의 전형적인 자세를 그림 2의 B에 제시하였다. 이후 점차 경련에서 벗어나며 활동성이 떨어진 상태가 지속되었다.</p> <p>PTZ를 투여하기 15분전에 tropinone 유도체를 복강내로 투여하고 경련의 정도를 비교하여 그림 3 의 A에 제시하였다. 대조군에 비하여 사용한 모든 유도체들이 경련 억제효과를 보였으며, 특히 T-4가 가장 큰 경련 억제효과를 보였다. PTZ를 투여한 후 경련이 나타날 때까지의 시간을 비교한 결과는 그림 3의 B에 제시하였다. 경련의 onset time은 대조군에 비하여 T-1, T-2, 및 T-3는 차이가 없었으나 T-4는 유의하게 증가시켰다. 이러한 결과는 PTZ에 의한 유발 경련에 있어 T-4 유도체가 항경련 효과가 가장 크게 나타남을 보여주었다.</p> <p>MES를 시행하여 경련을 유발시키면 자극 후 즉각적인 경련 반응을 나타내었다. 그림 4 의 A는 생쥐의 양측 결막에 전기자극전극을 이용하여 MES test 과정을 제시하였다. 자극 직후 나타나는 전형적인 긴장성 경련 자세를 그림 4 의 B에 제시하였다. 시간이 지남에 따라 긴장성-간대성 경련을 보이다가 활동성이 감소한 상태가 지속되었다. Tropinone 유도체를 MES 자극하기 15 분전에 전처치하고 항경련 효과를 비교하였다. Tropinone 유도체에 따른 경련정도의 비교를 그림 5의 A에 제시하였다. T-1에서 경련억제효과가 가장 크게 나타났다. 경련 후 회복되는 시간을 비교한 결과는 그림 5의 B에 제시하였다. T-1에서 회복시간이 가장 빨랐으며 T-2, T-3, T-4의 순서로 회복시간이 길어졌다. 따라서 MES에 의한 경련에서는 T-1의 항경련 효과가 가장 크게 나타났다.</p> <p>경련이 발생하면 뇌조직의 손상이 동반되므로 tropinone 유도체의 항경련 효과가 뇌조직 보호에도 작용하는가를 알아보기 위하여 nNOS의 발현을 조사하였다. 경련을 유발한 각 실험동물에서 실험 후 6시간 뒤에 실험동물을 희생시키고 뇌를 차가운 생리식염수에서 적출하여 해마부와 피질부를 분리하여 단백질을 전기영동하였다. 경련을 유발하지 않은 생쥐와 PTZ 및 MES에 의한 경련 유발 실험동물을 비교한 것이 그림 6에 제시되어 있다. nNOS의 항체를 사용하여 비교한 결과 대조군에 비하여 경련을 유발한 생쥐는 NOS의 발현이 증가하였다. 정량적인 비교를 위하여 densitograpm을 한 결과를 그림 6 의 B에 제시하였다. 대조군에 비하여 PTZ 및 MES로 경련을 유발한 생쥐의 뇌조직에서 해마부 및 피질부 모두에서 NOS 발현이 증가된 양상을 보였다. 그림 6은 4마리에서 관찰한 결과 중에서 대표적인 결과를 제시하였으며 PTZ와 MES에 의한 경련동물에서 모두 대조군에 비하여 nNOS 발현은 증가하였다.</p>