Mueller Hinton broth 배양균액을 paper disc를 Mueller Hinton agar 표면에 이식하여 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \)와 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 24시간 배양 후 감수성을 판정하고 Kitasato연구소 제품인 진단혈청 13종류를 사용하여 Homma법에 준하여 각각 혼합하여 자연응집이 일어나지 않는 것을 확인하고 3종의 혼합혈청과 각각 혼합하여 약 30초 전 후에 응집의 유무를 관찰하여 강한 응집을 나타내는 것을 양성으로 하여 혈청형별 검사방법을 사용하였다.
<h3>3) 원판확산법</h3> <p>항생제 감수성 검사를 위하여 Mueller Hinton broth 에서 18-24시간 배양한 균액을 표준 백금이를 이용하여 일정량을 Mueller Hinton agar 표면에 균등하게 이식한 후 화염멸균된 forceps를 이용하여 paper disc를 Mueller Hinton agar 표면에 균등한 간격으로 놓고 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 2 시간 두었다가 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 24 시간 배양하여 paper 원판 주변의 균발육저지 범위를 측정하고 표 1 에 준하여 감수성 여부를 판정하였다.</p> <h2>혈청형별 검사방법</h2> <p>진단용 항혈청은 Kitasato연구소 제품인 진단혈청 13종류를 사용하였으며 실험방법은 Homma법에 준하였다.</p> <p>즉 순수배양한 피검균의 큰 집락을 백금선으로 소량 긁어 슬라이드 글라스 위에서 생리식염수와 혼합하여 자연응집이 일어나지 않는 것을 확인한 후 3종의 혼합혈청과 각각 혼합하여 약 30 초 전 후에 응집의 유무를 관찰하여 강한 응집을 나타내는 것을 양성으로 하였다. 각 항혈청을 사용하여 응집반응을 실시하여 양성으로 관찰되면 O형 항원으로 형별하였다. 의심스러운 응집반응이나 2종 이상의 항혈청에 응집한 경우는 피검균액을 \( 120 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 10 분 가열한 후 재검사하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>분리균주</h2> <p>전체 108 균주가 분리되었으며 객담에서 56주 \( (51.85 \%) \), 소변에서 20균주 \( (18.52 \%) \), 화상피부에서 10주 \( (9.26 \%) \), 변</p> <p>에서 4주 \( (3.7 \%) \),혈액에서 3주 \( (2.78 \%) \) 순으로 분리되었으며 기타 검체에서 분리한 15 균주 \( (13.89 \%) \)도 실험에 사용하였다 (표 2).</p> <h2>세포외효소 생성 성적</h2> <p>각 균주들에 대한 세포외 효소 생성양상을 알아보기 위해 protease와 elastase의 생성여부를 검사하였으며 그 결과를 표 3에 나타내었다. 시험한 녹농균 중에서 protease와 elastase를 동시에 생성하는 균주가 전체의 \( 46.30 \% \)인 50균주로 가장 많았으나, 이들 두 효소 모두를 생성하지 않는 균주도 \( 30.55 \% \)인 33균주였다. Protease만을 생성하는 균주는 18주 \( (16.67 \%) \)였으며, 전체적으로 protease를 생성하는 균주는 68 균주로 전체의 \( 62.97 \% \)으로 나타내었다. 반면에 elastase만을 생성하는 균주는 7균주 \( (6.48 \%) \)이고 전체적으로는 57균주 \( (52.78 \%) \)가 이 효소를 생성하는 것으로 나타났다. 각각의 분리부위에 따른 녹농균의 세포외 효소 생성 양상은 객담의 경우 56 균주 중 24균주가 두 효소를 모두를 생성하지 않았으며 화상환자에서 분리한 녹농균의 경우는 10균주 중 7균주가 이 두 효소 모두를 생성하였고, 한 균주를 제외한 나머지 모든 균주가 이 두 효소 중 적어도 하나를 생성하는 것으로 나타났다. 혈액과 분변에서 분리한 균주의 경우는 다른 분리균주와는 다르게 protease보다는 elastase를 대부분 생성하였으며, 혈액 분리주의 경우는 3균주 모두가 elastase를 생성하였고 분변분리주는 4균주 중 3균주가 생성하였으며 protease의 경우 혈액 분리주에서 1균주, 분변분리주에서 2균주만이 생성하였다.</p>