피부 상재균인 그람 양성 균주 3종, 그람 음성 균주 2종, 효모균 1종, 그리고 여드름의 원인균인 P를 대상으로 감초성분의 항균활성을 측정했다. P. ovale에 대해서는 특별히 pityrosporum 배지를 사용해 배양했다. 항균활성은 disc diffusion assay를 이용해 측정했으며, 각 시료의 흡수된 paper disc를 균주에 밀착한 후 측정된 저해환을 통해 비교했다. 또한, 합성 방부제인 메틸 파라벤과 프로필 파라벤을 대조군으로 사용했다.
<h2>감초 성분의 항균활성 측정</h2> <p>본 실험에 사용된 균주는 피부 상재균으로, 그람 양성 균주 3 종, 그람 음성 균주 2 종 및 효모균 1 종으로 총 6 종의 균주이며, 여드름의 원인균인 \( P \). acnes KCCM41747와 비듬균인 P. ovale KCCM11894, 호기성 그람 양성균주인 \( S \).aureus KCCM11335, B. subtilis KCCM11779, 호기성 그람 음성균주인 E. coli KCCM40271, P. aeruginosa KCCM11804를 한국 미생물 보존센터(KCCM, Seoul, Korea)에서 분양받아 사용하였다.</p> <p>P. acnes의 배양 배지는 reinforced clostridial (RC) 배지(Merck, Germany)를 사용하였으며 균을 배양 배지에 접종한 후 anaerobic jar에서 gaspack system (Merck Anaerocult \( { } ^ {\mathbb {\otimes } } \) Gaspacksystem, Germany)을 사용하여 밀봉하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \( 72 \mathrm { ~h } \) 동안 혐기성 배양하였다. 호기성 그람 양성균주인 \( S \). aureus, B. subtilis와 그람 음성균주인 E. coli, P. aeruginosa 는 Mueller-Hinton 배지(Merck, Germany)를 사용하였으며 균을 접종한 후 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) incubator에서 \( 24 \mathrm { ~h } \) 배양하였다. 또한 비 듬균인 P. ovale 는 pityrosporum 배지(Malt extract agar \( 6 \% \), ox-bile \( 2 \% \), tween-40 \( 1 \% \), glycerol mono-oleate \( 0.25 \% \) )를 사용하였으며 균을 접종한 뒤 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \( 24 \mathrm { ~h } \) 동안 동안 배양하여 사용하였다.</p> <h2>Disc diffusion assay에 의한 항균활성 측정</h2> <p>감초성분의 항균활성은 시험 균주를 대상으로 disc diffusion assay로 측정하였다. 대조군으로는 합성 방부제인 메틸 파라벤과 프로필 파라벤을 사용하였다. 배양된 균주는 \( 1 \times 10 ^ { 7 } \) \( \mathrm { CFU } / \mathrm { ml } \) 으로 조절한 후 본 실험에 사용하였다. 평판배지에 배양된 각 균주를 멸균 면봉을 이용하여 \( 100 \mu \mathrm { l } \) 씩 도말하여 준비하였고, 시료를 disc 당 \( 0.5,2.5 \mathrm { mg } \) 이 되도록 paper disc (diamerter \( 8 \mathrm { ~mm } \), Roshi kaisha. Ltd., Tokyo, Japan)에 천천히 흡수시킨 뒤, 건조과정을 거쳐 용매를 휘발시켰다. 각각의 시료가 흡수된 paper disc를 균주를 도말한 평판배지 위에 밀착시킨 상태로 배양한 후 disc 주변에 생성된 저해환(clear zone, mm)을 측정하여 항균활성을 비교하였다.</p>