실험 재료는 국산 돼지감자로부터 추출된 이눌린을 건조하여 사용하였다. 실험에 사용한 균주는 장내 4종류의 유익한 미생물과 2종류의 혐기성 유해균, 호기성 유해균이며 사용배지는 RCM broth, MRS broth, Nutrient broth 세가지를 사용했다. 그 후 국산 돼지감자로부터 추출한 이눌린 \( 5 \mathrm{~g}\)을 증류수 \( 50 \mathrm{~ml}\)와 함께 혼합한 후 \( 70^{\circ} \mathrm{C} \)로 가온해서 용해한 다음 여과하여 액체배양 하였다. 실험을 설계할 때 시험동물은 로스\(\times\) Ross)계통의 성감별을 실시한 부화 1일령 수컷 브로일러 120수를 4처리구× 3반복으로 완전임의 배치하여 사용하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>실험 재료</h2> <p>실험에 사용된 재료는 국산 돼지감자로부터 French 에 의해서 제시된 열수, 냉각추출방법으로 평균 중합도(degree of polymerisation, DP) 26을 지닌 이눌린을 추출, 건조하였으며, 비타민 E (a-tocopheryl acetate)와 이눌린을 \( 70^{\circ} \mathrm{C} \)의 따뜻한 물과 혼합하여 고압균질기(T25 Basic, IKA, German)를 이용하여 고압균질물을 수득하고, 상기 고압균질물에 장용피복재로써 슈레테릭(Sureteric; Colorcon, UK)을 압축공기로 쏘아서 초미세분체 피복물(고압균질물 9: 슈레테릭을 제조하고, 분무건조기(B-191, Buchi, Sweiss)에 의해서 건조하여, 브로일러 사료첨가용 미세캡슐화-이눌로프리바이오틱스(microencapsulated-inuloprebiotics)를 제조하였으며, 미세캡슐화-이눌로프리바이오틱스의 입자는 100-200\(~\mu \mathrm{m} \)이며, 비타민 E \( 0.08 \% \) 및 이눌린 \(90\%\) 이상을 함유하였다.</p> <h2>미생물 체외 배양</h2> <h3>사용 균주 및 배지</h3> <p>상기 이눌린에 대한 미생물 체외배양 효과를 알아보기 위하여 장내 4종류의 유익한 미생물 즉, 2종류의 혐기성 유익균(Bifidobacterium longum, Bifidobacterium bifidum), 2종류의 호기성 유익균(Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus casei) 그리고 2종류의 유해한 미생물로서 혐기성 유해균(Clostridum perfin-gens), 호기성 유해균(Staphylococcus aureus)을 한국식품연구원으로부터 분양받아 계대배양하여 사용하였으며, 사용 배지는 RCM broth, MRS broth, Nutrient broth (Difco, USA)이었다.</p> <h3>액체 배양</h3> <p>미생물의 성장능력에 관한 이눌린의 효과를 알아보기 위해서 국산 돼지감자로부터 추출한 이눌린 \( 5 \mathrm{~g} \)을 증류수 \( 50 \mathrm{~ml} \)와 함께 혼합한 후 \( 70^{\circ} \mathrm{C} \)로 가온해서 용해한 다음에 여과지(Whatman No.2)를 사용하여 여과하였다. 여과된 이눌린 추출물을 멸균필터(membrane filter sterilized, pore size \( 0.2 ~\mu \mathrm{m}) \)로 제균, 감압농축하여 미생물배양용 이눌린을 조제하였다. 액체배지 \( 10 \mathrm{~ml} \)에 활성화된 균주 \( 100 ~\mu \mathrm{l} \)를 분주하고, 제균, 감압농축한 이눌린을 각각 \( 0,0.3 \%, 0.5 \%\) (\(\mathrm{wt}/\mathrm{vol}\)) 농도로 조절하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 24시간 배양하면서, 각각 0, 10, 15, 20, 24, 36, 48시간 째 배지에서 Spectrophotometer를 이용하여 미생물의 증식을 알아보고자 \( 660 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 혐기성 균주에 대한 모든 처리는 anaerobic chamber (\(5\%\) hydrogen, \( 5 \% ~\mathrm{CO}_{2} \), balanced nitrogen., Sheldon Manufacturing Inc., Cornelius, OR, UK)에서 수행하였다. 혐기성 균주의 배양은 Gas-PakⓇ system (BBL microbiology system,. Cockeysville, USA)을 이용하여 혐기적인 조건하에서 실시하였다.</p> <h2>시험 동물 및 실험 설계</h2> <p>로스(Ross \(\times\) Ross)계통의 성감별을 실시한 부화 1일령 수컷 브로일러 120수를 4처리구× 3반복으로 완전임의 배치하였다. 5개의 처리구는 T1 (대조구), T2 (이눌로프리바이오틱스 \( 0.5 \% \) 첨가구), T3 (이눌로프리바이오틱스 \( 0.7 \% \) 첨가구), T4 (이눌로프리바이오틱스 \( 1.0 \% \) 첨가구)로 구분하였으며, 각 처리구 당 30수씩 배치하였고 반복구 당 10수씩으로 조절하였다.</p>