M. hominis PG21을 MF에 노출시킨 결과 \(0.5\sim 64 \mu \mathrm{g/ml}\)의 5가지 농도로 돌연변이가 생성되었고, 그 균들을 배양하여 DNA를 분리한 후 quinolones의 내성과 관련된 QRDR에 대한 PCR과 염기서열 분석을 실시, 표준균주인 M. hominis PG21과 농도 별로 유도된 돌연변이 균주들을 배양하여 감수성 시험을 통해 Table 3과 같은 결과를 얻었다.
<h1>결 과</h1> <h2>인공 돌연변이 유도</h2> <p>표준균주인 M. hominis PG21을 MF에 노출시켰을 때 최초의 돌연변이주는 \( 0.5 \mathrm { ~ \mu g } / \mathrm { ml } ( \mathrm { M } 1) \)에서 생성되었으며, 이 균을 단계적으로 항생제에 노출시킨 결과 \( 4,8,16,32,64 \mathrm { ~ \mu g } / \mathrm { ml } \)에 해당하는 \( \mathrm { M } 4, \mathrm { M } 8, \mathrm { M } 16, \mathrm { M } 32, \mathrm { M } 64 \) 균들이 만들어졌다.<h2>\( \mathrm { PCR } \) 과 염기서열분석</h2> <p>MF 농도 별로 생성된 균들을 배양하여 DNA를 분리한 후 quinolones의 내성과 관계가 있는 QRDR 부위의 gyrA, gyrB, parC, parE 유전자를 PCR하였고, 그 산물의 염기 서열을 표준균주인 M. hominis PG21의 염기서열과 비교, 분석하였다. 그 결과 최초의 돌연변이주인 M1에서는 GyrA의 163 번째 아미노산이 alanine에서 threonine으로, ParE의 445번째 아미노산이 proline에서 glutamine으로 치환되어 있었고, M4, M8에서는 GyrA의 153번 위치의 serine이 leucine으로, M16, M32에서는 ParC의 91번 위치의 serine이 isoleucine으로, M64에서는 GyrB의 450번째 valine이 phenylalanine으로 치환된 것이 추가로 관찰되었다(Table 2).<h2>항생제 감수성 시험</h2> <p>표준균주인 M. hominis PG21과 농도 별로 유도된 돌연변이 균주들을 배양하여 AK, CL, GM, CF, LF, MF, OF, SF에 대한 감수성 시험을 하여 Table 3과 같은 결과를 얻었다. AK에 대한 MIC는 표준균주와 돌연변이 균주 모두 \( 4 ~ \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 였으며, CL에 대한 MIC 범위는 표준균주의 경우 \( 64 \mathrm { ~ \mu g } / \mathrm { ml } \), 돌연변이 균주는 \(64-128 ~ \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ,\)GM에 대한 MIC는 각각 \( 0.5 \mathrm {\mu g } / \mathrm { ml } , 0.5-1 \) \( \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ,\) CF는  \(0.5, 2-64 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ,\) LF는  \(0.5, 1-64 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } , \) MF는 \( 0.25,0.5-64 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ,\) OF는 \( 0.5,2-64 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } , \) SF는  \( 0.25, 0.5-128\mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 이었다.</p>