다양한 한약재들에 대한 발효 방법을 연구한 결과들이다. 단일 또는 복합 한약재, 그리고 전탕된 한약재에 대해 세균, 곰팡이, 버섯류를 활용한 액체 또는 고체 형태의 호기성 및 혐기성 발효 방법이 제시되었다(Table 3). 한 예로, 동백의 잎과 꽃을 그늘에서 15시간 방치하고, 물에 30분간 담갔다가 \( 25^{\circ} \mathrm{C}, 85 \% \)의 조건에서 4시간 동안 발효시킨 후, \( 80^{\circ} \mathrm{C} \)에서 60분간 건조하여 제품을 만들었다[15]. 또한, oryzae를 멸균된 쌀에 접종하여 균사체를 형성시킨 후, 멸균된 쌀과 P. linteus 균사체를 혼합하여 총 중량이 51가 되게 만든 후 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \)에서 11일간 발효시켰다[10]. 석창포의 경우에는 누룩 활성화액에 포함된 미생물을 과일, 곡류, 당류 및 물로 이루어진 배지에서 3차례에 걸쳐 발효시켜 최적의 활성도를 가진 미생물을 사용하였다. 이러한 방법들을 통해 각각의 한약재의 발효 과정을 최적화하였다.
<h3>한약재의 발효</h3> <p>한약재의 발효에 있어서 구체적으로 정형화된 방법은 아직 정립되어 있지 않으나, 한약재별로는 단미 한약재, 복합 한약재, 또는 전탕된 한약재를 사용하였고, 세균, 곰팡이, 버섯류를 사용하여 호기성 혹은 혐기성의 조건에서 액체 혹은 고체의 형태로 발효하는 등 다양한 방법이 제시되었다(Table 3).</p> <h3>단미 한약재를 이용한 발효</h3> <p>동백의 잎과 꽃을 그늘에 15 시간 방치한 후, 30 분 정도 비빈 다음 \( 25^{\circ} \mathrm{C}, 85 \% \) 의 수분 조건에서 4 시간 정도 발효 과정을 거친 후, \( 80^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 60 분 동안 건조하여 제품을 만들었다[15]. 오가피를 발효하는 방법으로는 오가피 추출물 11 에 포도당 \( 10 \mathrm{~g} \) 을 가해 멸균하고 유산균액 \( 10 \mathrm{ml} \) 를 가하여 \( 30 \sim 32^{\circ} \mathrm{C} \) 를 유지하면서 30 일간 배양하였다. 이를 다시 멸균한 다음, \( 60^{\circ} \mathrm{C} \)이하에서 진공 건조하여 오가피 발효물로 제작하였다[6].</p> <p>배는 육질 부분을 제거하고 과피와 씨방만을 이용하여 알코올 발효하였다. 이러한 과정은 배의 과피와 씨방을 세척한 후 이를 파쇄, 압착하여 배즙을 형성하는 착즙 단계와 배즙에 설탕을 첨가하여 \( 25^{\circ} \) Brix로 당도를 높이는 보당 단계를 거쳐,효모를 \( 0.5 \sim 1 \%(\mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 첨가하고 \( 23 \sim 25^{\circ} \mathrm{C} \) 의 혐기적인 조건에서 \( 4 \sim 5 \) 일간 배양하는 알코올 발효 단계를 거친다. 알코올 발효가 완료된 배즙을 \( 1.5 \) 기압, \( 90 \sim 95^{\circ} \mathrm{C} \) 의 조건에서 알코올을 제거하고, \( 20 \mu \mathrm{m}, 5 \mu \mathrm{m}, 2 \mu \mathrm{m}, 0.45 \mu \mathrm{m} \) 기공의 여과기로 순차적으로 여과한 후, 저온 살균을 통해 발효물을 제조하였다[14]. 상황버섯의 균사체를 이용하여 알코올의 수득율을 높이기 위해 쌀을 기본으로 한 발효 배지를 사용하였다. 우선A. oryzae를 멸균된 \( 1.2 \mathrm{~kg} \) 의 쌀에 접종하여 충분히 균사체를 형성시킨 후, \( 3 \mathrm{~kg} \) 의 멸균된 쌀과 \( 90 \mathrm{~g} \) 의 P. linteus 균사체를 혼합하고 멸균된 물을 부어 총 51 가 되게 하여 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 11 일간 발효시켰다[10].</p> <p>석창포의 발효 시에는 누룩 활성화액에 포함된 미생물을 과일과 곡류의 혼합물, 당류 및 물로 이루어진 혼합 배지에서1 차, 2 차 및 3 차 발효시켜서 최적의 활성도를 갖는 미생물을 사용하였다. 혼합 표준용액에 누룩 활성화액 또는 증류수를각각 \( 80 \%, 60 \%, 50 \% \) 의 비율로 첨가하여 발효에 사용하였다 [28]. 송이버섯과 동충하초로 발효한 경우를 보면, 한약 재료를 정선하여 혼합한 후 \( 1.2 \) 배의 증류수를 넣고 멸균, 냉각시킨 후 송이버섯 균사체와 동충하초 균사체 현탁액을 각각 \( 5 \% \) \( (\mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 씩 접종하여 \( 24^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 7 일간 통기성으로 암 배양하였다. 배양액을 재차 멸간하고 유산균과 효모를 각각 \( 0.5 \% \) 씩 접종하여 \( 24^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 36 48 시간 발효(최종 \( \mathrm{pH} 4.0 \) )하여 추출에 사용하였다[17].</p>