Elastase는 단백질인 비특이적 가수 분해 효소로서, 기질 단백질인 콜라겐을 분해하고, 각종 약용 식물로부터 elastase 저해활성을 측정한 결과, 대부분이 저해활성을 나타낸 것과 비교 시 율피 아세톤 추출물이 높은 저해율을 나타내었다. 콜라겐은 대부분이 피부의 진피층에 존재하며, 피부 전체 건조중량의 대부분을 차지하고 있기 때문에, 피부를 지지하는데 큰 역할을 하지만, 자연 노화의 세포 활성의 감소와 같은 내적 요인에 의해 콜라겐의 생합성이 감소되고, 태양 광선에 의한 활성 산소종의 증가 및 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가와 같은 외적 요인에 의해 분해가 가속화되어 피부 기질이 파괴되면서 주름이 생성된다.
<h1>결 과</h1> <h2>Elastase 저해활성 측정</h2> <p>Elastase는 단백질인 엘라스틴을 분해하는 효소로 다른 중요한 기질 단백질인 콜라겐을 분해할 수 있는 비특이적 가수 분해 효소이다. 피부의 진피조직 속에는 collagen과 피부의 탄력성에 관련된 elastin이 그물망 구조를 형성하고 있는데, elas-tin이 elastase에 의해 분해되어 피부의 그물망 구조 결합이 끊어짐으로, elastase가 주름생성의 주원인 효소로 알려져 있다. Elastase 저해제는 피부 주름을 개선하는 작용을 나타내고, ursolic acid등이 elastase 저해제로 이용되고 있다. 이러한 주름 생성과 관련한 elastase 저해활성을 측정한 결과 Fig. 1과 같다. 율피 열수 추출물 \( 100 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) 의 경우 \( 10.0 \% \) 이하의 낮은 활성을 나타낸 반면 율피 아세톤 및 에탄올 추출물 \( 100 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) 의 경우 \( 51.0 \%, 35.4 \% \) 의 elastase 저해활성을 나타내었다. 특히 율피 아세톤 추출물의 경우 동일 농도의 대조군인 ursolic acid 보다 elastase 저해활성이 높은 것으로 나타났으며, Kwak 등의 각종 약용 식물로부터 elastase 저해활성을 측정한 결과, 대부분이 \( 100 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) 에서 \( 30 \% \) 미만의 저해활성을 나타낸 것과 비교 시 율피 아세톤 추출물이 높은 저해율을 나타내었다.</p> <h2>Collagenase 저해활성 측정</h2> <p>콜라겐은 대부분 피부의 진피층에 존재하며, 피부 전체 건조중량의 약 70 80\%를 차지하고 있어, 세포외 기질의 대부분을 차지하면서 피부를 지지하는 역할을 한다. 그러나 자연 노화에 따른 세포 활성의 감소와 같은 내적 요인에 의해 콜라겐의 생합성이 감소되고, 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스의 증가 및 태양 광선에 의한 활성 산소종의 증가와 같은 외적 요인에 의해 분해가 가속화되어 피부 기질이 파괴되면서 주름이 생성된다. 본 실험에서 율피 추출물에 대한 collagenase 저해활성을 측정한 결과 \( 50 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) 에서 열수추출물의 경우 \( 63.8 \% \) 의 저해활성을 나타낸 반면, 아세톤 및 에탄올 추출물의 경우 \( 96.4 \%, 94.3 \% \) 의 저해활성을 나타내어 대조군으로 사용한 EGCG \( 50 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) 에서의 저해효과보다 우수한 결과를 보였고, Kang 등의 토사자, 음양곽, 건지황이 \( 250 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) 에서 각각 \( 40 \%, 37.5 \%, 35 \% \) 로 나타나 율피추출물의 collagenase 저해활성이 더 우수함을 확인할 수 있었다(Fig. 2).</p> <h2>Tyrosinase 저해능</h2> <p>Tyrosinase는 피부 멜라닌 생성에 있어서 매우 중요한 역할을 하고 있으며, 이런 tyrosine 활성 억제제는 피부 내에서의 melanin polymer 합성을 효과적으로 저해할 수 있어 피부 미백제의 개발에 있어서 tyrosinase 활성억제 실험은 유용한 평가법으로 인정되고 있다. 이렇게 피부 내에서 멜라닌 중합체 생합성을 효과적으로 저해할 수 있는 tyrosinase 저해활성을 측정한 결과 Fig. 3과 같이 나타내었다. 율피 용매별 추출물의 tyrosinase 저해능은 collagenase 저해활성과 같이 아세톤 및 에탄올 추출물이 열수 추출물보다 높은 tyrosinase 저해 활성을 나타내었으며, 그 효과는 \( 500 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) 에서 아세톤 추출물이 \( 47.2 \% \), 에탄올 추출물이 \( 45.8 \% \) 의 효과를 나타내었으며, 대조군으로 사용한 L-ascorbic acid는 \( 90 \% \) 로 가장 높은 ty-rosinase 활성 억제율을 나타내었다. 이는 기능성 화장품원료로 사용되는 알부틴의 \( \mathrm{IC}_{50} \) 이 \( 2.04 \% \) 와 비교시 율피 추출물의 tyrosinase의 활성억제율이 우수한 것으로 나타났다.</p>