U937 세포에 대한 PMA, FSB, TFS 처리 후의 전반적인 형태 변화를 분석하였고, PMA에 대한 농도별 처리로 인한 COX-1과 COX-2의 표현 변화를 관찰하였다. COX-1은 변화가 없었지만 COX-2는 \(40 \mathrm { nM }\)에서 강한 발현을 확인하였다. 특히, PMA로 인해 과발현된 COX-2는 FSB 및 TFS 선처리로 현저히 감소하였고, TFS 선처리의 경우 COX-2 발현 억제가 증가함을 확인하였다.
<h2>세포 형태에 미치는 PMA, FSB 및 TFS의 영향</h2> <p>PMA와 FSB 및 TFS의 처리에 따른 U937 세포의 전체적인 형태 변화를 알아보기 위하여 PMA 를 1시간 선처리한 다음 FSB 및 TFS를 6시간 처리하였을 경우 Fig. 1E에서 보는 바와 같이 세포의 밀도도 감소하지 않았으며 세포의 형태에도 변화가 없음을 알 수 있었다. 또한 Fig. 1F에서 나타난 바와 같이 U937 세포 핵의 형태적 변화를 관찰하였올 경우, 염색질 응축에 의한 apoptosis가 일어난 세포에서 전형적으로 관찰되는 apoptotic body가 관찰되지 않았고 핵의 형태가 뚜렷하게 정상으로 염색되었다. 이는 PMA와 FSB 및 TFS의 처리에 따른 세포 증식 결과와 잘 부합되는 결과였다.</p> <h2>COXs의 발현에 미치는 PMA의 영향</h2> <p>U937 세포에서 PMA 처리농도 또는 시간에 따른 COX-2 단백질의 발현 정도를 Western blotting으로 관찰하였다. PMA를 농도별로 6시간 동안 처리하였을 경우 COX-1의 경우는 아무런 변화가 관찰되지 않았지만 COX-2의 경우는 \( 40 \mathrm { nM } \)의 농도에서부터 강하게 발현되는 것을 확인할 수 있었다. 다음으로 PMA 처리시간에 따른 COX-2의 발현정도를 관찰한 결과 PMA 처리 2시간까지는 아무런 변화가 나타나지 않았지만 4시간부터 COX-2의 발현이 나타나기 시작하여 6시간에서는 현저하게 증가하는 것을 관찰할 수 있었다. 이상의 결과를 살펴볼 때 PMA는 U937세포에서 증식 및 COX-1의 발현에는 큰 영향을 미치지 못하지만 염증발현에 중요한 역할을 하는 COX-2의 발현을 증가시켰음을 알 수 있었다.</p> <h2>PMA에 의한 COX-2의 발현 증가에 미치는 FSB 및 TFS 의 영향</h2> <p>인체의 거의 모든 세포에서 COX-2의 과발현은 여러 가지 질병을 일으키는 요인이 되는 것으로 밝혀지면서 이러한 염증매개인자의 억제에 관한 연구가 많이 진행되고 있는 실정이다. 따라서 U937 세포에서 PMA에 의한 COX-2의 과발현 현상에 대한 FSB 및 TFS의 영향을 관찰하기 위하여 FSB 및 TFS를 \( 2 \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \)의 농도로 단독 처리하였을 경우와 PMA를 1시간 선처리한 후 FSB 및 TFS를 처리하여 6시간 경과 후의 COX-1 및 COX-2의 발현 정도를 Western blot 및 RT-PCR 방법으로 관찰하였다. COX-1의 경우는 아무런 변화가 없었지만 PMA에 의해서 과발현된 COX-2의 경우는 단백실 및 mRNA 발현 모두에서 FSB 및 TFS의 선처리에 의해서 현저히 감소하는 것으로 나타났다. 특히 FSB에 비해서 TFS를 선처리하였을 경우 COX-2 발현의 억제정도가 증가하는 것으로 관찰되었다.</p>