금붕어 뇌조직을 \(1:3(\mathrm{v}/\mathrm{v})\)의 비율로 끓는물에 5분간 끓인 후 냉각하고 초산을 첨가하여 균질기로 파쇄하고 시료를 \(4^ {\circ } \mathrm{C}\)에서 \(10,000\times\, g\)로 원심분리하여 생리활성물질을 추출하고 HPLC를 사용하여 물질을 정제하고 비교, 분석하였다. 대조군으로 방사선을 조사하지 않은 금붕어 열마리의 뇌조직도 동일한 과정을 거쳐 추출, 정제하였다.
<p>여기서 \( \left ( \mu_ {\mathrm { en } } / \rho \right )_ {\mathrm { m } } \)은 임의의 매질 \( \mathrm { m } \)에 대한 비하전입자의 질량에너지 흡수계수이고, \( ( \mu \mathrm { en } / \rho)_ {\mathrm { a } } \)는 공기에 대한 비하전입자의 질량에너지 흡수계수이며, \( X \) 는 조사선량이다. \( \left ( \mu_ {\mathrm { en } } / \rho \right )_ {\mathrm { m } } \) 와 \( \left ( \mu_ {\mathrm { en } } / \right . \) \( \rho)_ {\mathrm { a } } \)는 각각 \( 3.267 \mathrm { E } ^ { -03 } \, \mathrm { ~m } ^ { 2 } / \mathrm { kg } , 2.966 \mathrm { E } ^ { -03 } \, \mathrm { ~m } ^ { 2 } / \mathrm { kg } \)을 사용하였다.</p> <h2>추출 및 정제</h2> <p>방사선에 피폭된 금붕어 뇌에 존재하는 생리활성 아민의 변화를 알아보기 위해 금붕어 뇌를 절취하여 생리활성물질을 다음과 같은 과정으로 추출하였다. 금붕어 10마리분의 뇌 조직을 \( 1:3( \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \)의 비율로 끓는 물에 5 분간 끓인 후 냉각시켰다. 최종 농도가 \( 5 \% \) 초산용액이 되도록 초산을 첨가한 후 homogenizer (PT10-35, KINEMATICA AG, switzerland)로 조직을 파쇄한 뒤 시료를 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 30분 동안 \( 10,000 \times \, g \)로 원심분리를 하였다. 침전물은 다시 한 번 \( 5 \% \) 초산용액을 넣고 homogenizer로 추출하여 처음과 같은 조건으로 원심 분리하였다. 상층액을 처음 분리한 상층액과 함께 \( 5 \mathrm { ml } \)까지 농축시킨 후, Diode-Array Detector ( \( 220, 254 \) 및 \( 280 \, \mathrm { nm } \))가 연결된 HPLC를 사용하여 물질을 정제하고 비교◦분석하였다. 대조군으로서 방사선을 조사하지 않은 금붕어 10마리 분의 뇌 조직도 위와 동일한 과정을 거쳐 추출하고 정제하였다.</p>