전통주의 물리·화학적 특성과 생리기능성을 측정하기 위해 에탄올 함량, \(\mathrm{pH}\), 총산, 잔당함량 등을 측정하였다. 잔당함량은 전통주를 감압건조 후 알콜을 제거시켜DNS법으로 정량하여 측정했다. Acetylcholinesterase와 butyrylcholinesterase 저해활성을 주어진 식으로 알아보았다.
<p>또한 acetylcholinesterae는 recombinate human acetyl-cholinesterase (E.C. 3.1.1.7), acetylthiocholine chloride과 5,5'-Dithiobis (2-nitrobenzoic acid) 등은 Sigma사(St, Louis, Mo, USA) 제품을 사용하였다. \( \beta \)-Secretase는 \( \beta \)-secretase FRET Assay Kit (PanVera) 를 사용하였다. Hip-His-Leu, angiotensin-converting enzyme (rabbit lung acetone power), fibrin, DPPH (1, 1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl) 등은 Sigma 사(St, Louis, Mo, USA) 제품을 사용하였고, 기타 시약은 분석용 특급을 사용하였다.</p> <h2>물리 · 화학적 성질 분석</h2> <p>전통주의 물리화학적특성으로 먼저 에탄올 함량은 수증기 증류법에 의한 주정계로 측정하였고 \( \mathrm { PH } \) 는 \( \mathrm { pH } \) meter (Fisher Accumet)로 측정하였으며 총산은 \( 0.1 \mathrm { ~N } - \mathrm { NaOH } \) 로 \( \mathrm { pH } 7.0 \) 이 될때까지 적정하고 호박산으로 환산하여 나타내었다. 또한 잔당(환원당)함량은 전통주 \( 50 \mathrm { ~mL } \) 을 감압 건조하여 알콜을 제거시킨 후 \( 50 \mathrm { ~mL } \) 로 정용하여 DNS법으로 정량 하였다.</p> <h2>생리기능성 측정</h2> <p>먼저 전통주 \( 50 \mathrm { ~mL } \) 을 동결건조 시킨 후 아래와 같이 생리기능성을 측정하였다.</p> <p>Acetylcholinesterase와 butyrylcholinesterase 저해활성 : Acetylcholinesterase 저해활성은 Ellman 등의 방법으로 다음과 같이 측정하였다. \( 110 \mu \mathrm { L } \) 의 \( 0.1 \mathrm { M } \) 인 산완충용액 \( ( \mathrm { pH } \) 7.3), \( 30 \mu \mathrm { L } \) 의 acetylcholinesterase \( (0.8 \mathrm { U } / \mathrm { mL } ), 30 \mu \mathrm { L } \) 의 기질(acetylthilcholine chloride), \( 20 \mu \mathrm { L } \) 의 5,5'-Dthiobis (2-nitrobenzoic acid)와 시료 \( 10 \mu \mathrm { L } \) (동결건조시료 \( 1 \mathrm { mg } \) 을 \( 1 \mathrm { ~mL } \) 의 \( 0.1 \mathrm { M } \) 인산완충용액에 녹인 용액)를 섞은 후 60 분 동안 반응시킨 후 \( 415 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하여 아래식으로 저해활성을 계산하였다.</p> <p>Acetylcholinesterase저해활성 \( ( \%) = \) \[ \left [1- \frac {\text { 기질 과 효소와 시료의 } 60 \text { 분 반응후 흠광도 } \times \text { 대조구 흡광도 } } {\text { 기질과 효소의 } 60 \text { 분 반응후 흡광도-대조구 흡광도 } } \right ] \times 100 \]</p>