이 연구에서는 천궁의 근경을 국립원예특작과학원 약용삭물과로부터 받아 정진태 연구사가 동정하였으며, 경희대학교 천연물화학실험실에 표준 시료를 보관하였다. 여러 충진제를 이용한 칼럼크로마토그래피를 이용하였으며, 박층크로마토그래피에서는 UV lamp를 이용해 검출하였다. 또한, EtOAc 분획물과 n-BuOH 분획물에 대해 칼럼크로마토그래피를 수행, 결과적으로 5종의 지질화합물을 성공적으로 분리하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>시험 약재</h2> <p>본 실험에 사용한 천궁의 근경은 농촌진흥청 국립원예특작과학원 약용삭물과로부터 제공 받았으며, 정진태 연구사가 동정하였다. 표준 시료는 경희대학교 천연물화학실험실에 보관되어 있다.</p> <h2>시약 및 기기</h2> <p>칼럼크로마토그래피에 사용한 충진제는 silica gel (Kiesel gel \(60 \), Merck, Darmstadt, Germany), ocatdecyl silica gel (LiChroprep RP- \(18 \), \(40 \)- \(60 \) \( \mu \mathrm { m } \), Merck)과 Sephadex LH- \(20 \) (Amersham Biosciences, Uppsala, Sweden)을 사용하였다. 박층크로마토그래피는 Kiesel gel \( 60 \mathrm { ~F } _ { 254 } \) 와 RP- \(18 \) \( \mathrm { F } _ { 254 { } ^ { S } } \) (Merck)를 사용하였으며, UV lamp (Spectroline Model ENF- \(240 \) C/F, Spectronics Corporation, Westbury, NY, USA)를 사용하여 검출하였으며, \( 10 \% \) 황산을 적신 후 가열하여 발색하였다. \( { } ^ { 1 } \mathrm { H } \) NMR 과 \( { } ^ { 13 } \mathrm { C } \) NMR 스펙트럼은 Bruker Avance 600 (Billerica, MA, USA)로, IR 스펙트럼은 Perkin Elmer Spectrum One FT-IR spectrometer (Buckinghamshire, England)로, 질량분석 스펙트럼은 JEOL JMSAX- \(700 \) mass spectrometer (Tokyo, Japan)로 측정하였다.</p> <h2>지질화합물의 분리</h2> <p>건조한 천궁 근경 분말 \( (10 \mathrm { ~kg } ) \)을 \( 70 \% \) ethanol (EtOH, \(54 \mathrm { ~L } \))로 실온에서 \(15 \)시간 \(2 \)회 반복 추출하였다. 추출액을 여과하고, 여액을 감압 농축하여 추출물 \( (2.1 \mathrm { ~kg } ) \)을 얻었다. 추출물에 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } \) \( (4 \mathrm { ~L } ) \)을 넣어 현탁한 후, EtOAc ( \(4 \mathrm { ~L } \times 3) \)와 \( n \)-BuOH (3.2 L \( \times \)3)로 분획하였다. 얻어진 분획을 감압농축하여 EtOAc 분획물(COE, \( 280 \mathrm { ~g } ), n- \mathrm { BuOH } \) 분획물(COB, \( 125 \mathrm { ~g } ) \) 및 물 분획물(COW, \( 1.695 \mathrm { ~kg } ) \)을 제조하였다. EtOAc 분획물( \( 270 \mathrm { ~g } ) \)과 \( n \) -BuOH 분획물( \( 120 \mathrm { ~g } ) \)에 대하여 silica gel, octadecyl silica gel 및 Sephadex LH- \(20 \)을 정지상으로 사용하여 칼럼크로마토그래피를 반복 수행한 결과 \(5 \)종의 지질화합물을 분리하였다.</p>