gasoline에서 \( 59.6 \% \)의 제거 효율을 보인 고효율 균주 Pseudomonas putida G8을 사용하여 ( 28 \pm 2 ^ {\circ } \mathrm { C } , 150 \mathrm { rpm } \)으로 45일간 진탕 배양하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>균주 및 배양 조건</h2> <p>본 연구실에서 스크린를 통해 확보된 고효율 균주 Pseudomonas putida KDi19(95.6 \%의 diesel 제거 효율), Pseudomonas sp. K14(78.4 \%의 kerosene 제거 효율), Pseudomonas putida BJ10(99.9 \%의 benzene, toluene, xlyene 제거효율), Pseudomonas putida E41(97.9 \%의 ethyl benzene, xylene 제거효율)을 사용하였으며, 본 연구를 통해 확보된 \( 59.6 \% \) 의 gasoline 제거 효율을 보인 Pseudomonas putida G8도 사용하였다. 사용된 배지는 MSM(Minimal salt medium: \( \mathrm { KH } _ { 2 } \mathrm { PO } _ { 4 } 2.0 \mathrm { ~g } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } , \mathrm { ~K } _ { 2 } \mathrm { HPO } _ { 4 } 2.0 \mathrm { ~g } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } , \mathrm { KNO } _ { 3 } \) \( 1.0 \mathrm { ~g } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } , \left ( \mathrm { NH } _ { 4 } \right )_ { 2 } \mathrm { SO } _ { 4 } 2.0 \mathrm { ~g } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } , \mathrm { NaCl } 0.4 \mathrm { ~g } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } , \mathrm { MgSO } _ { 4 } \) \( \cdot 7 \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } \quad 0.4 \mathrm { ~g } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } , \mathrm { CaCl } _ { 2 } \cdot 2 \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } \quad 0.04 \mathrm { ~g } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } , \mathrm { FeCl } _ { 3 } \cdot 7 \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } \) \( 0.02 \mathrm { ~g } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } \), trace element solution SL-6 \( 1.0 \mathrm { ~mL } \), vitamin solution \( 1.0 \mathrm { ~mL } \), distilled water \( 1.0 \mathrm { ~L } , \mathrm { pH } \) 7.0)로 조성하였다. 배양 조건은 \( 28 \pm 2 ^ {\circ } \mathrm { C } , 150 \mathrm { rpm } \) 으로 45 일간 진탕 배양하였다. 고형 배지 제조 시, 유류에 의한 agar 무름 현상을 방지하기 위하여 MSM에 \( 1.8 \% \) 의 agar powder를 사용하였으며, autoclave 후에 diesel, kerosene, gasoline을 1,000 \( \mathrm { mg } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } \) 의 농도로 각 배지에 여과 멸균 후 첨가하여 제작하였다. 분리된 모든 균주는 \( 28 \pm 2 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 호기 배양하였다.</p>