간 세포의 괴사는 간조직 내 효소 AST와 ALT의 혈액으로의 유출 및 pericentral necrosis를 관찰함으로써 확인할 수 있다. 특히, 혈장 중 AST와 ALT의 활성도 상승은 간 손상으로 인한 간세포의 괴사와 간조직의 파괴를 나타내는 지표이다. \( \mathrm { CCl } _ { 4 } \)를 투여한 군에서 간손상이 확인되며, 이는 \( \mathrm { CCl } _ { 4 } \)가 간 대사 이상과 간세포손상을 초래하기 때문으로 분석되었다.
<h2>간 조직의 병리학적 측정</h2> <p>간 조직을 \( 10 \% \) formaldehyde-phosphate buffer로 하루 정도 고정시킨 후, \( 70 \% \) alcohol에서 \( 100 \% \) alcohol까지 순차적으로 탈수하였다. \( 100 \% \) xylene 처리 후, paraffin으로 포매하여 microtome을 이용하여 \( 5 \mu \mathrm { m } \)의 조직 절편을 제작하였다. 이 절편을 hematoxylin-eosin (H \&E)으로 염색한 후, 광학현미경으로 관찰하였다.</p> <h2>통계처리</h2> <p>본 실험에 대한 모든 실험 결과는 평균치와 표준편차로 나타내었고, 통계적 유의성은 Student's \( t \)-test를 이용하여 검정하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>혈청의 Asparate aminotransferase (AST) 및 Alanine aminotransferase (ALT)의 활성도 변화</h2> <p>간 조직의 손상은 세포 내부에 존재하는 효소가 혈액으로 유출되는 것을 측정하거나 pericentral necrosis를 관찰함으로써 확인할 수 있다. 따라서 간으로부터 혈액에 방출된 간의 효소 활성도 측정은 간 손상 연구에 있어서 가장 유용한 방법 중의 하나이며, 특히 혈장 중 AST와 ALT 등의 효소 활성도의 상승은 간 손상으로 인한 간세포의 괴사와 간조직의 파괴가 진행됨에 따라 transaminase가 혈중으로 유리되어 높은 활성을 나타내는 것이므로 간세포의 변성 및 괴사의 지표가 된다.</p> <p>Aminotransferase는 a-amino acid에서 a-keto acid까지 \( a \)-amino group의 전달에 촉매 작용을 한다. 또한, transaminase라고 불리는 이 효소는 일반적으로 \( \mathrm { NH } _ { 4 } { } ^ { + } \)로 전환하가 위해 여러 가지 아미노산에서 a-ketoglutarate까지 a-amino group들을 보낸다. AST는 이 효소들 중에서 a-ketoglutarate에 aspartate의 amino group을 전달하는 촉매작용을 한다. ALT는 a-ketogiutarate에 alanine의 아미노기를 전달하는 촉매 작용을 한다.</p> <p>Table 2는 혈청 중 AST 및 ALT 활성정도를 나타낸 것이다. \( \mathrm { CCl } _ { 4 } \)를 투여한 군에서 혈청 AST, ALT 활성이 증가하는 경향은 \( \mathrm { CCl } _ { 4 } \)에 의한 간 손상 유발물질이 간의 대사이상을 초래하여 간세포손상이 초래되기 때문인 것으로 사료된다고 보고하고 있다.</p> <p>본 실험에서 AST 활성의 경우, 정상군에 비해 \( \mathrm { CCl } _ { 4 } \) 투여군에서 \( \mathrm { CCl } _ { 4 } \)의 간 장애 유발로 인해 효소 활성이 약 7배 증가하여 Takaharu와 Kiyonori의 보고와 일치하였으며, 음양곽과 \( \mathrm { CCl } _ { 4 } \)투여 군에서는 \( 54.28 \% \) 감소하여 음양곽의 활성 감소 효과를 확인할 수 있었다.</p>