한천분해활성은 \(40^{\circ}C\)에서 363 units/L로 가장 높았고, \(30^{\circ}C\)에서도 비슷한 결과를 보였다. 가장 높은 활성을 나타내는 조건은 \(20mM\)의 sodium phosphate 완충용액에서 pH 7.0였다. Thalassomonas sp. SL-5와 Agarivarans sp. JA-1 균주를 이용하여 한천올리고당의 산업적 생산이 가능할 것으로 예상된다. 이 한천분해 효소는 중성과 약산성 범위에서 높은 활성을 보인다.
<h2>한천분해 효소의 활성과 온도</h2> <p>한천분해효소가 각 온도별로 보이는 상대활성을 Fig. 5에 나타냈다. 한천분해활성은 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \)에서 363 units/L로 최고치를 나타냈으며 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \)에서도 유사한 수치로 나타났다. 또한 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \)의 반응온도에서 나타난 효소활성을 \( 100 \% \)로 하였을 때 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \)에서 \( 91 \%, 60^{\circ} \mathrm{C} \)에서 \( 82 \%, 70^{\circ} \mathrm{C} \)에서 \( 78 \% \)의 잔존활성을 나타냈으며 \( 80^{\circ} \mathrm{C} \)까지 \( 66 \% \)의 활성을 갖는 것으로 나타났다. 이러한 결과를 토대로 이 연구에서 얻어진 한천분해효소가 Vera 등의 연구결과와는 달리 호열성 효소인 것으로 생각되었다. Fig. 6과 같이 \( 70^{\circ} \mathrm{C} \)에 조효소액을 시간별로 노출시킨 후에 나타나는 활성을 보면 노출 15분 후에 \( 76 \%\), 30분 후에 \( 54 \% \) 등 급격하게 활성이 떨어지는 것으로 나타나 본 효소가 내열성은 가지지는 않는 것으로 생각되어 진다.</p> <h2>\( \mathrm{pH} \)에 따른 한천분해 효소의 활성</h2> <p>각 \( \mathrm{pH} \)에서 보이는 한천분해효소의 활성을 Fig. 7에 나타냈다. 사용한 완충용액과 \( \mathrm{pH} \) 중 최고의 활성을 나타내는 것은 \( 20 \mathrm{~mM} \) sodium phosphate 완충용액에서 \( \mathrm{pH} \) 7.0으로 나타났다. 이는 Bacillus sp. MK03의 \( \mathrm{pH} \) 6.1 보다는 높고 Vibrio sp. JT0107의 \( \mathrm{pH} \) 8.0, Bacillus cereus ASK 202의 \( \mathrm{pH} \) 7.8, pseudomonas sp. PT-5의 \( \mathrm{pH} \) 8.5 보다는 낮은 것이었다. 또한 SL-5가 생산하는 한천분해효소는 \( \mathrm{pH} \) 6.0에서 \( 90 \% \) 이상, \( \mathrm{pH} \) 5.0에서 \( 80 \% \) 정도가 유지되는 반면 \( \mathrm{pH} \) 7.8에서는 \( 60 \% \) 정도의 활성을 나타냈다. 따라서 본 한천분해 효소는 중성과 약산성 범위에서 높은 활성을 보이는 것으로 나타났다.</p> <h2>한천올리고당 가수분해산물의 TLC 분석</h2> <p>Neoagarohexaose를 기질로 하여 Thalassomonas sp. SL-5 균주를 1일 혹은 3일 동안 배양하여 생산한 조효소액과 반응시킨 결과를 Fig. 8에 나타냈다. Neoagarohexaose를 기질로 사용하면 \(\beta\)-agarase는 neoagarotetraose와 neoagarobiose를 생성하며 \(\alpha\)-agarase는 agaropentose와 agarotriose를 생성한다. Thalassomonas sp. SL-5 균주의 한천분해효소는 분해산물의 TLC 분석 결과, neoagarotetraose와 neoagarobiose를 생산하는 것으로 나타나 \( \beta \)-agarase인 것으로 확인되었다. 본 연구의 결과로 확보된 \( \beta \)-agarase 생성 균주 Thalassomonas sp. SL-5와 본 연구진이 이미 확보한 \( \beta \)-agarase 생성 해양성 균주인 Agarivarans sp. JA-1 균주를 이용하여 기능성 한천올리고당의 산업적 생산이 가능할 것으로 기대되어 진다.</p>