양앵두 열수 추출물과 분획물의 항산화 활성은 다음의 3가지 측정에 의해 평가하였다. 첫번째로 DPPH 소거능 측정의 경우, 시료에 \( 2 \times 10^{-4} \mathrm{M} \mathrm{DPPH} \)용액을 넣고 반응시킨 후 흡광도를 측정하였다. 두번째로 Superoxide 제거능 평가는 pyrogallol 자동산화 측정방법을 이용하였고, 마지막으로 환원력 평가는 Oyaizu등의 방법을 변형하여 측정하였다.
<h2>항산화 활성 평가</h2> <p>양앵두 열수 추출물 및 이의 분획물의 항산화 활성은 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) radical 소거능, Su-peroxide제거능 및 환원력 측정에 의해 평가하였다. 먼저 DPPH 소거능의 경우, 다양한 농도로 희석한 시료 \( 20 \mu \mathrm{L} \)에 \( 99.5 \% \)에탄올에 용해시킨 \( 2 \times 10^{-4} \mathrm{M} \mathrm{DPPH} \)용액 \( 380 \mu \mathrm{L} \)를 넣고 혼합하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 30분 동안 반응시키면서, micro-plate reader(Asys Hitech, Expert96, Asys Co., Austria, \( 516 \mathrm{~nm}) \)를 사용하여 5분 간격으로 흡광도를 측정하였다. 대조구로는 butyl hydroxytoluene(BHT) 및 vitamin C(Sigma Co., USA)를 사용하였다. DPPH free radical 소거능은 시료첨가구와 비 첨가구의 백분율로 표시하였으며, \( \mathrm{IC}_{50} \)는 \( 50 \% \) 소거능을 나타내는 농도로 나타내었다. Superoxide제거능 평가는 superoxide와 반응하여 갈변물질을 만드는 pyrogallol 자동산화 측정방법 [13]에 준해 측정하였다. 즉 시료용액 \( 0.2 \mathrm{~mL} \) 에 Tris- \( \mathrm{HCl} \) buffer \( (50 \mathrm{mM} \) tris, \( 10 \mathrm{mM} \) EDTA, ( \( \mathrm{pH} \) \(8.5\))) \( 3 \mathrm{~mL} \)와 \( 7.2 \mathrm{mM} \) pyrogallol \( 0.2 \mathrm{~mL} \)를 가하고, \( 25^{\circ} \mathrm{C} \)에서 10분간 반응시킨 후 \( 1 \mathrm{~N} \mathrm{HCl} 1 \mathrm{~mL} \)로 반응을 정지시킨 후 \( 420 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. Superoxide제거능은 시료 첨가군과 무 첨가군과의 흡광도비로 나타내었으며, 대조구로는 vitamin E(Sigma Co., USA)를 사용하였다. 환원력 평가는 Oyaizu등의 방법을 변형하여 측정하였다. 에탄올에 용해한 시료 \( 2.5 \mathrm{~mL} \)에 \( 0.2 \mathrm{M} \) sodium phosphate buffer( \( \mathrm{pH} \) \(6.6\)) \( 2.5 \mathrm{~mL} \) 와 \( 10 \% \) potassium ferri-cyanide \( 2.5 \mathrm{~mL} \)를 첨가하고 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 20분간 반응시킨 후, \( 10 \% \) trichloroacetic acid \( 2.5 \mathrm{~mL} \)를 첨가하여 반응을 종료하고 \( 4000 \mathrm{rpm} \)에서 10분간 원심분리하여 상등액을 회수하였. 회수한 상등액은 증류수로 2배 희석한 후, 신선하게 조제된 \( 0.1 \% \) ferric chloride 용액과 5:1(v/v)비율로 혼합하고 \(700 \mathrm{nm} \)에서 흡광도를 측정하여 평가하였으며, 대조구로는 BHT와 vitamin C를 사용하였다. Superoxide제거능 평가 및 환원력 평가결과는 3회 반복실험 후 평균과 편차로 나타내었다.</p>