본 연구자들은 지시균주를 김치로부터 분리하여 계통발생학적으로 동정한 CK0155 균주를 지시균으로 사용하여 Leuconostoc 및 Weissella 속으로 동정된 378균주의 지시균 생육저해활성을 검토하였고, 생육저지환 생성이 확인된 균주는 agar disk diffusion method를 이용하여 지시균 생육저해활성을 재확인하였다으며, 종(species) 수준에서의 생리적 특성과도 깊은 관계가 있는 것으로 추정하고 있음을 나타내고 있다.
<h1>Lb. sakei 생육저해활성 보유 Leuconostoc 및 Weissella 속 균주 선발</h1> <p>생육저해활성 보유 미생물의 선발을 시도하는 경우, 많은 연구자들은 저해활성의 확인을 위한 대상 지시균주를 기탁 기관으로부터 분양받아 실험을 진행하였다. 그러나 미생물의 생리활성은 종(species)보다는 균주(strain) 특이적인 현상으로 나타내는 경우가 빈번하다. 따라서 본 연구자들은 지시균주를 김치로부터 분리하여 계통발생학적으로 Lb. sakei로 동정한 CK0155 균주를 지시균으로 사용하여 Leuconostoc 및 Weissella 속으로 동정된 378균주의 지시균 생육저해활성을 검토하였다. 전배양한 지시균주를 약 \( 10 ^ { 5 } \mathrm { CFU } / \mathrm { mL } \) 농도로 희석하여 MRS 한천배지에 \( 200 \mu \mathrm { L } \) 도말하여 건조시킨 다음, 약 \( 10 ^ { 8 } \mathrm { CFU } / \mathrm { mL } \) 농도의 실험균주를 백금이를 이용해 획선접종하여 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 24시간 배양 후 생육저지환의 생성 유무로 생육저해활성을 확인하였다. 생육저지환 생성이 확인된 균주는 agar disk diffusion method를 이용하여 지시균 생육저해활성을 재확인하였다.</p> <p>Leuconostoc 속 148균주, Weissella 속 230균주의 Lb. sakei 생육저해활성을 검토한 결과, Leuconostoc 속 23 균주, Weissella 속 45균주로 총 68균주가 선발되었다. 김치로부터 가장 높은 빈도로 분리된 Leuconostoc 속 균주는 Lc. mesenteroides로 88균주가 분리되었지만 \( 10 \% \)의 균주가 저해활성을 나타내었고, 11균주가 분리된 Lc. lactis는 10균주가 생육저해활성을 가지고 있어 가장 높은 빈도로 저해활성을 나타내었다. Weissella 속의 경우에는 W. cibaria가 가장 많이 분리되었고, 활성을 보유한 균주도 33균주로 가장 많은 수가 선발되었다. W. confusa는 31균주가 분리되었지만, 11 균주가 활성을 나타내어 Weissella 속에서 가장 높은 \( 35 \% \)의 선발빈도를 나타내었다. 한편 W. koreensis는 W. cibaria 다음으로 많은 63균주가 분리되었지만, 활성을 나타낸 균주는 분리되지 않았다. Lb. sakei의 생육저해는 Lc . mesenteroides, Lc. citreum, W. cibaria, W. confusa의 경우에는 균주 특이적 현상으로 분석되지만, Lc. lactis의 경우 \( 91 \% \)의 확률로 생육저해활성을 나타내고 W. koreensis의 경우에는 63균주 중에서 생육저해를 보이는 균주가 없다는 점을 고려하면 종(species) 수준에서의 생리적 특성과도 깊은 관계가 있는 것으로 추정된다.</p>