신규 콘택트렌즈 소재의 생체적합성 조사를 위하여 흰쥐의 섬유아세포액을 배양하여 한천중층시험과 세포의 성장저해시험을 수행한 결과 한천중층시험에서 용해지수는 0과 지대지수는 1로 확인되었으며 식품의약품안전청 고시 기준에 적합한 것으로 나타났다. 성장저해시험에서는 mono-ester 중합렌즈, di-ester 중합렌즈 모두 \( 29 \% \) 미만의 저해율이 확인되어 소프트 콘택트렌즈로서 안정성을 확인할 수 있었고, 나아가 콘택트렌즈에 사용될 신소재로서의 개발 가능성을 보여 주었다.
<p>한천중층시험에서 흰쥐의 섬유아세포 L-929세포는 일반적으로 어떤 물질의 독성을 판단할 때 기준이 되는 세포로서 한국식품의약품안전청과 외국의 연구소에서 독성 평가 시에 사용되는 세포주이다. Eagle MEM 배양액(\(10\%\) FBS)에 \( 1 \mathrm{~mL} \) 당 \( 5 \times 10^{5} \) 의 세포농도로 조제한 흰쥐의 섬유아세포액(L-929)을 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 24시간 배양하였다. 배양 후 배양 접시의 액체 성분을 흡입 제거 후 Eagle 배양액에 한천을 \( 1.5 \% \) 넣은 것을 약 \( 12 \mathrm{~mL} \) 씩 배양접시에 중층 하였다. 이 한천 평판 위에 \( 0.02 \% \) 뉴트럴레드. 인산완충생리식염주사액 \( 3 \mathrm{~mL} \) 를 넣은 다음 \( 5 \% \) 탄산가스장치를 사용하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 2~3시간 배양하였다. 배양 후 과량의 염색액을 제거하고 다시 \( 5 \% \) 탄산가스배양장치를 사용하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 4시간 배양하였다. 배양 후 세포가 충분히 색소를 흡수한 평판을 2개씩 사용하여 각 평판 위에 콘택트렌즈와 양성대조 및 음성 대조 1 개씩을 한천배지 위에 올려놓았다. 양성대조는 NTG(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine)를 직경 \( 8 \mathrm{~mm} \) 의 원형여과지에 1 매당 \( 30 \sim 50 \mu \mathrm{g} \) 을 적신 것을 사용하였다. 음성대조는 양성대조에 사용한 똑같은 여과생리 식염주사약을 적신 것을 사용하였고 이 평판을 \(5\%\) 탄산가스배양장치를 써서 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 24 시간 배양 하였다. 배양세포의 반응은 배양 접시를 백색의 배경에서 관찰할 때 적색으로 염색된 세포가 검체의 밑 부분 및 주변에서 염색성이 저하되어 있는가에 의하여 판정하도록 했으며 Fig. 2에 나타내었다. 그리고 식품의약품안전청에서 고시한 판정으로 양성과 음성 대조가 정확할 때 다음의 판정에 의하여 4개의 검체 모두가 용해지수는 0 , 지대지수는 1이하여야 한다고 고시를 하고 있다. 용해도가 관찰 되지 않을 경우 용해지수는 0으로 탈색 zone은 검체의 바로 밑 부분의 영역에 해당할 때 지대지수는 1로서 나타낸다. 이 실험으로 용해지수는 0과 지대지수는 1로 확인 되었으며 식품의약품안전청 고시 기준에 적합한 것으로 나타났다.</p> <p>배양세포의 증식저해시험은 세계 각국에서 법적으로 이 시험을 반드시 하도록 규정하고 있으며 국내에서도 한국 식품의약품안전청 에서 1999년 3월부터 이 검사를 시행하도록 고시하여 현재 시행중이다. Control은 M사의 제품을 사용 하였으며 HEMA에 새로운 첨가제로 mono-ester \( 2.5 \% \sim15 \% \) 가 첨가된 콘택트렌즈와 di-ester \( 2.5 \% \sim 15 \% \) 까지 모두 10개의 콘택트렌즈를 배양세포의 증식저해실험에 수행하였고 Fig. 3 에 나타내었다. Soft contact lens는 \( 29 \% \) 미만의 저해율을 나타내면 콘택트렌즈로서 안전성이 인정된다. 전반적으로 합성해서 만든 itaconic acid계 monomer의 비율이 높아질수록 세포의 성장저해율이 높게 나타나고 있지만 \( 20 \% \) 미만으로 나타났다.</p> <p>이상에서 기존에 널리 이용되는 monomer인 HEMA에 새로운 첨가제로 itaconic acid로부터 합성한 ester계 monomer를 새로운 additive로 사용하여 열중합반응으로 제작한 우수한 함수율과 산소투과도 값을 가지는 신규 콘택트렌즈 소재의 생체적합성 조사를 위하여 한천중층시험(agar overlay test)과 세포의 성장저해시험(growth inhibition test)을 수행한 결과 한천중층시험에서는 용해지수 0 , 지대지수 1 로 나타났으며 성장저해시험에서는 mono-ester 중합렌즈의 경우에 \( 16.5 \% \sim 19.8 \% \) 의 저해율과 di-ester 중합렌즈의 경우에 \( 13.9 \%\sim  20.3\%\)의 저해율을 나타냈다. 용해지수와 지대지수에서 식품의약품안전청 고시 기준에 의거할 때 콘택트렌즈로서 안전한 것으로 나타났으며 세포의 성장저해시험에서는 모두 \( 29 \% \) 미만으로 확인 되어 soft contact lens로서 안전성을 확인 할 수 있었으며 앞으로 콘택트렌즈에 사용될 신소재로서의 개발 가능성을 보여 주었다.</p>