YEPD 배지의 초기 \( \mathrm { pH } \)를 배양온도 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)를 기준으로 조정한 후, 실험구 균주가 대조구 균주에 비해 유의적으로 빠른 비성장속도를 보였다. 초기 \( \mathrm { pH } \) 7에서 실험구 균주는 대조구 균주보다 1.25배 빠른 비성장속도를 보여주었다. 최적 배양조건에서 회분식 플라스크 배양으로 P. farinosa MBY/L1569 균주의 포도당 소모, 균체성장 및 에탄올 생산특성에 대해 실험한 결과 균체는 대수증식기에서 비정상적인 속도로 성장했고 배양 후 28시간이 넘자 성장이 멈추었다.
<p>탄소원으로 포도당이 \( 20 \mathrm { ~g } / \mathrm { l } \) 농도로 첨가된 YEPD 배지의 초기 \( \mathrm { pH } \)를 배양온도 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)를 기준으로 조정한 뒤 비성장속도를 측정하였다(Fig. 2B). 모든 초기 \( \mathrm { pH } \) 조건에서 실험구 균주가 대조구 균주에 비해 유의적으로 빠른 비성장속도를 나타냈다. 실험구 균주는 초기 \( \mathrm { pH } \) 7에서 가장 빠른 비성장속도 \( \left (0.51 \pm 0.05 \mathrm { ~h } ^ { -1 } \right ) \)로 성장하여, 대조구 균주 \( \left (0.40 \pm 0.08 \mathrm { ~h } ^ { -1 } \right ) \)에 비하여 약 1.25배 빠른 비성장속도를 나타냈다.</p> <p>비성장속도가 가장 우수하였던 조건인 배지의 초기 \( \mathrm { pH } \)를 7.0으로 조정한 뒤 포도당을 다른 농도로 첨가하고 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 비성장속도를 측정하였다. 대조구 및 실험구 균주 모두 \( 50 \mathrm { ~g } / \)의 초기 포도당 농도에서 가장 빠른 비성장속도를 나타냈으며, 포도당 농도가 증가할수록 비성장속도가 감소하였다. 대조구 균주는 \( 200 \mathrm { ~g } / \mathrm { l } \)의 초기 포도당 농도에서 \( 0.39 \pm 0.04 \mathrm { ~h } ^ { -1 } \)의 비성장속도를 나타내었으나 MBY/ \( \mathrm { L } 1569 \) 균주는 \( 0.46 \pm 0.01 \mathrm { ~h } ^ { -1 } \)의 비성장속도를 나타내어 대조구 균주보다 고농도의 포도당에 대한 내성도 우수한 것으로 판단되었다. 결론적으로 P. farinosa MBY/L1569 균주는 초기 \( \mathrm { pH } \) 7.0, 포도당 농도 \( 50 \mathrm { ~g } / \mathrm { l } \), 배양온도 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 가장 빠른 비성장속도를 나타내었다.</p> <h2>MBY/L1569 균주의 성장 및 에탄올 생산 특성</h2> <p>대수증식기에서 결정된 비성장속도를 기준으로 설정된 최적 배양조건에서 회분식 플라스크 배양을 통하여 P. farinosa MBY/L1569 균주의 포도당 소모, 균체성장 및 에탄올 생산특성을 조사하였다. 호기적 배양조건에서 균체가 최대로 성장하였을 때는 발효 개시 후 32시간이었으며 세포흡 광도는 \( 22.87 \pm 0.50 \)이었다. 균체는 대수증식기에서 \( 0.50 \pm 0.08 \mathrm { ~h } ^ { -1 } \)의 비성장속도로 성장하였으며 배양 개시 후 28시간 이후에 성장이 정체되었다. 발효 개시 후 36시간이 경과하였을 때 초기에 주입한 포도당이 모두 소모되었고 \( 19.66 \pm 0.68 \mathrm { ~g } / \mathrm { l } \) 에탄올을 생산되어 소모된 포도당 대비 약 \( 40 \% \)의 수율을 나타내었다. 혐기적인 배양의 경우, 발효 개시 후 36시간에서 균체가 최대로 성장하였으며 \( 14.10 \pm 0.46 \)의 세포흡광도를 나타내었다. 균체가 최대로 성장 하였을 때, \( 45.30 \pm 0.64 \mathrm { ~g } / \mathrm { l } \)의 포도당을 소모하였으며, \( 20.60 \pm 1.11 \mathrm { ~g } / \)의 에탄올을 생산하여 소모된 포도당 대비 약 \( 45.5 \% \)의 에탄올 수율을 나타내었다. P. farinosa MBY/L1569 균주는 한국미생물자원센터에 KCTC27753 균주로 기탁하였다.</p>