단백질을 여러 효소로 분해시켜 얻은 가수분해물 중에서 ACE 저해활성이 가장 우수한 것은 이온교환 크로마토그래피를 한 결과, 염농도에 따라 4개의 획분으로 분리되었으며이것을 역상 HPLC에서 3개의 획분으로 분리되었으며, 이들 중에서 ACE 저해활성이 가장 높은 획분 B를 재분리하여 2개의 획분을 얻어 아미노산 서열을 결정한 결과 헥사펩타이드임을 확인하였다.
<h1>요약</h1> <p>수산가공율의 증가에 따라 원료어 처리시 대량으로 발생하는 비가식부분의 하나인 대구의 간을 효율적으로 이용하기 위하여 단백질을 효소적으로 가수분해한 후 한외여과막을 이용하여 분자량별로 분획하였으며, 이들 가수분해물 중 ACE 저해활성이 높은 펩타이드는 이온교환 크로마토그래피, 겔 크로마토그래피 및 HPLC로 분리 정제하여 그 아미노산 서열을 결정하였다.</p> <p>대구의 간 단백질을 여러 효소로 분해시켜 얻은 가수분해물 중에서 ACE 저해활성이 가장 우수한 것은 \( \alpha \)-chymotrypsin으로 2시간 가수분해시킨 가수분해물이었으며, 이 가수분해물을 한외여과막으로 분자량 10,5 및 \( 1 \mathrm { ~kDa } \)의 3종류로 분리하여 ACE 저해활성을 측정한 결과 \( 1 \mathrm { kDa } \)의 막을 통과하여 분리된 가수분해물의 \( \mathrm { IC } _ { 50 } \) 값이 \( 1.31 \mathrm { mg } / \mathrm { m } \ell \)로 가장 높았다. 이 획분으로 SP-Sephadex C-25를 사용하여 이온교환 크로마토그래피를 한 결과, 염농도에 따라 4개의 획분으로 분리되었으며 ACE 저해활성은 \( 0.25 \sim 0.5 \mathrm { M } \mathrm { ~NaCl } \)용액에서 용출된 획분이 \( 0.99 \mathrm { mg } / \mathrm { m } \ell \) 로 가장 높았다. 이 획분을 이용하여 Sephadex G-15로 겔여과를 하여 5개의 획분으로 분리하였으며, 이중 획분 Ⅲ에서 \( 0.56 \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \)으로 활성이 가장 높았다. 이것을 역상 HPLC에서 3개의 획분으로 분리되었으며, 이들 중에서 ACE 저해활성이 가장 높은 획분 B를 재분리하여 2개의 획분을 얻어 아미노산 서열을 결정한 결과 Met-Ile-Pro-Pro-Tyr-Tyr \( \left ( \mathrm { IC } _ { 50 } = 10.9 \mu \mathrm { M } \right . \) )와 Gly-Leu-Arg-Asn-Gly-Ile \( \left ( \mathrm { IC } _ { 50 } =35.0 \mu \mathrm { M } \right ) \)의 hexapeptide임을 확인하였다.</p>