농축단계에서는 MWCO의 차이에도 불구하고 permeate로 빠지는 고형물의 양이 거의 일정하였지만 발염 과정인 투석에서는 각 모듈의 특성에 의해 고형물의 회수율이 좌우되었다. 따라서 permeate에서의 제품의 선신을 줄이고 retentate로 제품을 회수하기 위해서는 투석과정에서의 고형물 회수율을 기준으로 한외여과 막 모듈을 선택해야 한다. 그러므로 난황 단백질의 가수분해물에서 sialic acid의 함량 및 회수율을 향상시키는 한외여과막을 선택할때에는 MWCO의 특성 뿐만 아니라 투석과정에서 고형물의 손실을 최소화 시킬 수 있는 모듈이 선택되어야 한다.
<h2>한외여과와 투석에 의한 sialic산의 회수</h2> <p>투과속도의 관점에서 보면 \( \mathrm { MWCO } \) 가 높을수록 유리함을 알 수 있다. 하지만 sialic acid를 포함하고 있는 제품은 분자 량이 2000 이상의 물질임으로 최대한 permeate로 빠지는 손실을 최소화하여야 한다. 따라서 한외여과막의 조업에서 원료중의 고형물과 sialic acid가 permeate와 retentate로 분리되는 것을 조사하여 수지(balance)를 살펴보았다. 본 실험에서 사용한 4종류의 모듈에 대한 총 고형물(total solid)의 수지 즉 permeate와 retentate의 양을 조사하였고, 이것을 Table3 에 결과블 나타내었다. 원료에 있는 총 고형물의 양은 모든경우에 \( 352 \mathrm { ~g } \) 의 시료에 대해 한외여과를 실시하였다. 농축단계에서 총고형물의 회수율은 모듈간에 약간의 차이를 보이지만, 전반적으로 회수율에서 많은 차이는 없었음을 알 수있었다. 즉 이것은 사용한 마의 \( \mathrm { MWCO } \) 의 차이에도 분구하 고 pcrmeate로 빠지는 고형물의 양은 거의 일정하다는 것을의미한다. 농축단계에서는 고형물이 막 표면에 일정한 젤을형성함으로써 permeate로 고형물의 손실이 \( \mathrm { MWCO } \) 의 차이에도 불구하고 일정함을 나타낸다.</p> <p>하지난 발염 과정인 투석에서는 고형물의 회수에서는 많은 차이를 나타내고 있다. Amicon 모듈을 사용한 겅우가 투석과정에서의 회수율이 가장 높았고, 회수율은 Millipore 모듈을 사용한 경우에 비해서 약 2 배 정도 높았다. 그리고 고형 물의 회수율은 각 모듈의 특성에 의해 좌우되었고, MWCO 가 작율수록 회수율이 증가하는 경향은 보이지 않았다. 즉, AMT 모듈의 MWCO 2,000이었지만, 다른 모둔에 비해 고형 물의 회수육이 높지 않음을 알 수 있다. 투석과정에서 고형물의 회수율이 차이가 나는 이유는 농축 단계와는 달리 투석과 정은 계속적으로 증류수를 공급함으로써 농축단계에 비해 막표면에 젤의 형성이 약화될 것으로 기대된다. 따라서 MWCO 와 막의 형태에 의해서 회수율에 차이가 생기는 것으로 생각 된다. 따라서 permeate에서의 제품의 선신을 줄이고 retentate 로 제품을 최대한 회수하기 위해서는 투석과정에서의 고형 물 회수율이 한외여과 막 모듈율 선택하는 기준이 된다고 생 각되다. 따라서 본 실헙에서는 위의 결과로부터 MWCO 3000 이고 spiral-wound 형태인 Amicon 모듈이 가장 좋은 회수율 을 나타냄을 알 수 있었다.</p> <h2>한외여과막의 종류에 따른 sialic acid의 순도에 미치는 영향</h2> <p>한외여과 조업에서 농축과 투석의 과정이 끝난 후에 reten-tate에 포함된 고형물 중에 포함된 sialic acid의 함량을 조사 하였다. Fig. 7은 sialic acid의 함량과 retentate의 회수율을 함께 나타내었다. 익 때 원료인 효소 분해에 의한 가수분해물 의 용액에서 sialic acid의 함량은 \( 0.45 \% \) 였다. 한외여과 후에 retentate에서 sialic acid의 합량은 원료에 비해 5 배 가량 증 가한 \( 2.2 \% \) 정도였다. Sialic acid는 원료 중에 \( 1.58 \mathrm { ~g } \) 이었고 최 종제품 중애는 \( 1.06 \mathrm { ~g } \) 를 회수하였다. 따라서 sialic acid의 회 수율은 \( 67 \% \) 였다. 고형물의 회수율은 막 모듈에 따라서 다른 특성을 보였지만, Fig. 7에서 알 수 있듯이 sialic acid의 함량 은 모듈에 관계없이 일정한 경향을 보였으며 제품의 수율은 MWCO 3000인 Amicon 모듈을 사용한 경우가 가장 우수함 을 알 수 있다. 이상의 결과로부터 난황 단백질의 가수분해물 에서 sialic acid의 핚량 및 회수율을 향상시키는 한외여과막 율 선택하는데 있어 \( \mathrm { MWCO } \) 의 특성 뿐만아니라 투석과정에 서 고형물의 손실을 최소화시킬수 있는 모듈이 선택되어져야 한다. 향후 연구에서는 투석과정에서 고형물의 손실에 대한 원인을 규명하는 작업이 진행될 것이다.</p>