PBMC 내 면역세포 종류와 분포를 분석한 결과 BSEO군에서 T세포비율과 B세포 비율이 감소하였는데 이는 BSEO가 T세포의 항원 인식과 세포내로의 활성화 신호를 억제하고 B세포 수 감소로 체액성 면역반응에 관여하는 항체 생산 분비를 억제해서 알러지성 염증을 억제하고 유발을 지연시킨다는 것을 보여준다.
<h2>PBMC 내 면역세포 변화에 미치는 영향</h2> <p>최근의 연구에서 천식군과 정상군에 대해 peripheral blood mononuclear cell(PBMC)에서 잘 알려진 염증 매개물질인 IL-9, IL-4와 IL-5, IL-13, IL-10 및 IFN\( \gamma\) 의 변화들이 보고되었으며, 또한 알러지성 천식에서 항원에 의해 자극된 PBMCs 의 증가와 이들 세포들이 생성하는 Th1 및 Th2 사이토카인 또는 케모카인의 생산량의 증가가 보고되었다.</p> <p>본 연구에서 PBMC 내 면역세포의 종류와 분포를 FACScan 실험을 수행하여 세포수를 백분율\(\%)\)로 분석하였다(Fig. 6). 본 연구결과 \( \mathrm{T} \) 세포인 \( \mathrm{CD} 3 \mathrm{e}^{+} / \mathrm{CD} 19^{-} \)세포비율은 정상군은 \( 60.2 \pm 0.20 \% \) 이며 OVA-CT군은 정상군에 비하여 \( 80.9 \pm 2.35 \% \) 로 증가되었고, OVA-FT군은 \( 58.7 \pm 10.60 \% \),OVA-BSEO군은 \( 57.8 \pm 5.40 \% \) 로 OVA-CT군에 비하여 각각 유의하게 감소되었다(Fig. 6). 이에 비해 B세포인 \( \mathrm{CD} 19^{+} \)세포 비율은 정상군은 \( 21.9 \pm 0.50 \% \) 이며 정상군에 비해 OVA-CT군은 \( 14.1 \pm 4.00 \% \) 로 감소되었고 OVA-FT군은 \( 18.6 \pm 2.50 \% \),OVA-BSEO군은 \( 24.8 \pm 3.45 \% \) 로 OVA-CT군에 비하여 각각 유의하게 증가되어 T세포의 수에 의존하여 변화되는 것을 확인하였다(Fig. 6A).</p> <p>CD69 는 T cell과 B cell, 대식세포, NK 세포 등에서 발현되며, 세포의 활성화 marker로, \( \mathrm{CD}3^{+} / \mathrm{CD}69^{+} \)세포수의 평가는 천식모델에서 호산구 침윤의 표지로 사용되며, 본 연구 결과 \( \mathrm{CD}^{+} / \mathrm{CD} 69^{+} \)세포 비율은 정상군은 \( 1.2 \pm 0.36 \% \) 이며 정상군에 비해 OVA-CT 군은 \( 2.4 \pm 0.11 \%, OVA-FT군은 \( 2.6 \pm 0.25 \% \) 로 증가하였고 OVA-BSEO군은 \( 2.2 \pm 0.36 \% \) 로 나타나 OVA-CT군과 OVA-FT군에 비하여 감소되었다(Fig.6B). 이러한 결과로 BSEO가 PBMC내 호산구 수의 증가를 억제하는 것으로 확인 되었다.</p> <p>\( \mathrm{B}220^{+} / \mathrm{CD}23^{+} \)세포 비율은 정상군은 \( 12.4 \pm 0.20 \% \) 이며 정상군은 OVA-CT군에 비해 \( 21.5 \pm 2.75 \% \) 로 증가되었고 OVA-FT군은 \( 10.1 \pm 0.65 \%\), OVA-BSEO군은 \( 17.2 \pm 0.70 \% \) 로 나타나 OVA-CT군에 비하여 각각 감소하였으나 유의성은 없었다(Fig. 6).</p> <p>Arnold 등[2]은 알러지성 천식 환자의 말초혈액 내 \(\mathrm{CD}^{+} \),\( \mathrm{CD}^{+}, \mathrm{CD}^{+} \)및 \( \mathrm{CD} 56^{+} \)세포의 증가를 보고하였고, Borgonovo 등은 항원 노출 후 수 시간 내 \( \mathrm{CD}^{+} \mathrm{T} \) 세포들이 target기관으로 이동하여 알러지성 염증을 유발하며 이 과정은 특히 항원-특이 T세포들이 말초혈액에서 기관지폐포세척액으로 recruitment됨을 보고하였다. 또한 Zhou 등의 보고에 의하면 알러지성 비염 생쥐 모델의 코점막 내 eotaxin 유전자와 골수 내 CCR3의 발현 연구에서 골수와 말초혈액 내 백혈구수를 검사한 결과, 백혈구 내 호산구의 비율이 정상군에 비하여 현저하게 증가하였고 코점막 내 eotaxin mRNA의 발현과 eotaxin 양성 세포들도 정상군에 비하여 크게 증가하였고 이 세포들이 호산구수에 크게 좌우되는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 백혈구 내 CCR양성 세포 비율이 정상군에 비해 증가하였고 골수 내 백혈구 내 호산구의 비율에 크게 죄우되는 결과를 보고하였다.</p> <p>위의 보고와 본 연구에서 PBMC내 T세포비율은 대조군에 비하여 BSEO군에서 감소되었고, B세포 비율은 T세포에 의존하여 변화하였다. 또한 대조군에 비해 BSEO군에서 호산구 침윤의 표지인 \( \mathrm{CD}3^{+} / \mathrm{CD}69^{+}\), B세포의 표지인 \( \mathrm{B} 220^{+} / \mathrm{CD} 23^{+} \)세포 비율의 감소를 확인하였다. 이는 BSEO 흡입이 말초혈액 내 면역세포 비율을 조절하는 결과로 호산구성 염증세포 침윤으로 인한 기도 내 염증억제(Fig. 2)와 기도 과민반응(Fig. 1) 결과를 나타내는 것으로 판단되어 BSEO가 알러지성 염증 억제에 관여하는 것으로 판단되었다.</p> <p>이상의 결과를 종합해보면 BSEO는 알러지성 천식 모델 생쥐의 폐 조직 내의 \( \mathrm{CD3e}^{+} / \mathrm{CD}19^{-} \), \( \mathrm{B} 220^{+} / \mathrm{CD} 23^{+}, \mathrm{CD11b}^{+} / \mathrm{Gr-1}^{+} \)세포 비율을 억제하였으며 BALF 내의 \( \mathrm{CD}4^{+} / \mathrm{CD}8^{-} \),\( \mathrm{B} 220^{+} / \mathrm{CD} 23^{+}, \mathrm{CD}3^{+} / \mathrm{CCR3}^{+} \)세포비율을 억제하였다. 또한 PBMC내 \( \mathrm{CD3e}^{+} / \mathrm{CD}19^{-} \),\( \mathrm{CD}3^{+} / \mathrm{CD} 69^{+}, \mathrm{B}220^{+} / \mathrm{CD}23^{+} \) 세포비율을 억제하였다. 이상의 결과들은 BSEO가 BALF, 폐 및 PBMC 내의 T세포 수를 유의적으로 감소시켜 알러지성 염증 발생에 관련된 T 세포의 항원 인식과 세포내로의 활성화 신호를 억제하여 알러지성 염증을 억제하는 것으로 판단되며 또한, B 세포 수를 유의적으로 감소시켜 체액성 면역 반응에 관여하는 항체 생산 분비를 억제함으로서 알러지성 염증 유발을 지연시키는 것으로 판단되었다.</p>