전 세계적으로 약용 및 식용으로 사용되는 버섯은 항암 활성 및 면역기능 증강 활성이 있으며, 그 중 상황버섯 자실체는 독성이 없어 식품 원재료로 사용 가능하고, 면역력 강화, 항산화, 항혈전, 항돌연변이 활성 등의 생리활성이 있다. 최근 상황버섯 균사체 이용에 관한 연구 및 개발들이 집중되고 있어, 본 연구팀은 36종의 한약재를 대상으로 P. baumii 균사체를 접종하여 고체발효를 성공하였고, 고체발효 후 항혈전 활성과 항산화 활성의 증가와 인간 대장암세포 성장억제 효과를 확인하였다.
<h1>서 론</h1> <p>버섯은 전 세계적으로 약용 및 식용으로 널리 이용되고 있으며 다양한 생리기능 조절작용과 항암 활성이 알려져 있다. 그 중에서도 상황버섯은 항암 활성 및 면역기능 증강 활성이 우수한 것으로 보고되어 있다. 뽕나무 줄기 등에 자생하는 진휽버섯속 백색 부후균인 상황버섯은, 갓 표면을 제외하고는 모두 황색을 나타내어 상황이라 불리며 전 세계적으로는 약 220 여종이 존재한다. 이 중 국내에서는 Phellinus linteus, P. baumuii, P. gilvus, P. igniarius 등의 7종이 존재하며 P. baumii와 P. linteus가 가장 일반적으로 재배, 유통되고 있다. 상황버섯 자실체는 독성이 없어 식품 원재료로 사용 가능하며, 면역력 강화, 급성알러지 억제, 항산화, 항혈전, 항고혈압, 항돌연변이 활성 및 암, 심장병 등의 성인병 예방과 개선효과를 나타내는 것으로 알려져 있다. 최근에는, 자실체 이외에 상황버섯 균사체에서도 항혈전 활성, 항산화 및 항암작용, 위궤양 완화효과 및 항염증 작용, 치매 관련 \( \beta \)-secretase저해 활성 등의 생리활성이 보고되면서, 경제적이면서도 배양이 용이한 상황버섯 균사체 이용에 관한 연구가 집중되고 있는 실정이다. 이와 더불어, 버섯의 강력한 섬유소 분해능 및 고체발효 능력을 이용하여 새로운 기능성 생물소재를 개발하고자 하는 시도가 있으며, 특히 생리활성이 우수한 다양한 한약재에 유용 버섯균 사체를 접종하여 새로운 생리활성물질 개발 및 기존 한약재의 생리활성을 강화하려는 연구가 진행되고 있다.</p> <p>본 연구팀에서도 최근 항산화 및 항혈전 활성이 우수하다고 알려진 36 종의 한약재를 대상으로 P. baumii 균사체를 접종하여 고체발효를 성공하였으며, 고체발효에 의해 골쇄보, 천련자, 도엽, 와송의 경우 항혈전 활성이 발효전에 비하여 \( 14 \sim 32 \% \) 증가되었고, 원지, 현삼, 백지, 향부자, 골쇄보 및 육종용에서는 항산화 활성이 발효전에 비해 \( 20 \sim 60 \% \) 정도 증가됨을 보고한 바 있다. 본 연구에서는, P. baumii 균사체를 이용한 한약재 고체발효 추출물의 암세포 성장억제 효과를 확인하고자, 36 종의 한약재 및 이들의 고체발효 한약재 추출물을 대상으로 인간 대장암세포 성장억제능과 인간 적혈구 용혈활성을 각각 평가하였다. 그 결과 일부의 고체발효 한약재 추출물이 정상세포에는 독성이 거의 나타나지 않으면서 대장암세포의 성장을 특이적으로 억제함을 확인하였다. 본 연구는 유용버섯을 이용한 한약재 고체발효가 새로운 생물자원 개발에 이용될 수 있음을 제시하고 있다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>사용균주, 배지, 종균, 한약재 및 세포주</h2> <p>Phellinus baumii (장수상황버섯)는 (주)바이온에서 보관중인 균주를 Potato dextrose agar (Difco Co., USA) 배지에서 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 20 일 배양하여 사용하였고 4 주 간격으로 계대배양 하였다. 36종의 한약재는 2007년 및 2009년 대구 한약재시장에서 구입하여 사용하였으며, 사용부위 및 이들의 고체발효. 정도는 Table 1에 나타내었다. 한약재는 사용 전 흐르는물에 30초간 수세하여 불순물을 제거한 후 탈수하여 사용하였으며, 한약재에 접종할 종균은 이미 보고한 방법과 동일하게 준비하였다. 암세포 성장억제능 평가에는 인간 대장암 세포주 HCT116를 이용하였고, 정상세포에 대한 독성평가를 위해서는 인간 embryonic kidney 유래의HEK-293 세포, 마우스 지방 전구세포인3T3-L1 및 조골 전구세포 MC3T3-E1을 이용하였으며, 이들은 American Type Culture Collection(ATCC, Manassas, VA, USA)에서 구입하여 사용하였다.</p>