신경줄기세포에 의한 신경 조직 재생은 신경세포의 생성뿐만 아니라 그 위치와 시냅스의 형성과 축삭 및 수상돌기의 회복과 같은 일련의 현상의 발생 순서까지 고려해야 한다는 점에서 다른 장기의 재생보다 복잡하다. 이에 본 논문은 Sham operation과 좌골신경 절단 후 5개월이 지난 실험군으로 구분한 Sprague Dawley계 횐쥐 70마리를 사용하여, 동맥내 배양한 신경줄기세포를 이식하여 Schwann cell로 분화하고 수초의 재생을 일으킬 수 있는지 규명하고자 하였다.
<p>그러나, 신경줄기세포의 이식에 의한 치료 법을 확립하는데 가장 중요한 과제의 하나는 어떻게 신선한 신경줄기세포를 신속하게 채취하여 적절한 환경에서 배양한 후 이식하는가 하는 일이다. 이미 연구자들의 노력으로 신경줄기세포 및 신경전구세포를 조절하는 방법을 개발하는 데 성공하였으며 이렇게 얻은 신경줄기세포의 이식을 검토하기 시작하였다. 또한, 신경줄기세포 이식에 의한 신경 조직의 복구는 다른 장기의 재생보다 복잡한 문제를 안고 있다. 신경세포 그 자체의 생성뿐만 아니라 신경세포가 정상으로 기능을 발휘하기 위하여 있어야할 위치로 이동하여야 하며, 시냅스의 형성이나 축삭이나 수상돌기의 회복과 같은 일련의 현상이 질서 있게 일어나야 한다. 따라서, 본 연구에서는 오랫동안 절단된 말초신경을 동맥내에서 배양한 신경줄기세포로 이식하여 말초신경에서 신경줄기세포가 Schwann cell로 분화한 후 수초의 재생을 일으킬 수 있는지를 형태학적으로 규명하고자 하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>실험동물</h2> <p>실험동물은 Sprague Dawley계 횐쥐(몸무게 \( 200 \mathrm { ~g } \) 이상,생후 12 주, 효창사이언스) 70 마리를 암수 구별 없이 사용하였다. 구입 후 14 일 동안 실험실 환경(온도 22~25ํ 습도 \( 60 \sim 80 \% \)) 에서 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 실험동물사료(삼양유지제품)와 물은 자유로이 먹게 하였고 자연채광하에서 횐쥐용 케이지에 5 마리씩 넣어서 사육하였다.</p> <h2>실험방법</h2> <p>실험동물은 Sham operation단 실시한 대조군과 우즉 좌골신경 절단 후 5 개월이 지난 실험군으로 구분하였다. 각 실험군은 동맥내 배양한 신경줄기세포(neural stem cell)를 이식한 후 10 일군, 20 일군, 30 일군, 40 일, 50 일군으로 구분하여 각 군 당 10 마리씩을 배정하였다.</p> <p>실험군은 \( \mathrm { kg } \) 당 \( 50 \mathrm { mg } \) 의 ketamine(유한양행)을 복강내로 주사하여 마취시키고 둔부의 중심부를 \( 2 \mathrm { ~cm } \) 가량 절개하여 좌골신경을 확인한 후 중심부에서 \( 1 \mathrm { ~cm } \) 자르고 피부를 봉합하고 gentamycin \( 0.1 \mathrm { ~m } \ell \) (대성미 생물연구소, \( 50 \mathrm { mg } / \mathrm { m \ell } ) \) )을 근육주사 하였다. 수술 5 개월 후 다시 수술부위를 열어 배양한 신경줄기세포가 들어 있는 동맥을 미세수술봉합사 \( (9 / 0 \) Safil B.Braun Surgical AG)를 이용하여 양쪽 신경단을 미세감자로 잡고 수술용 현미경 하에서 봉합한 후 시간 경과에 따라서 절단된 신경이 재생되는 과정을 면역조직화학적 및 미세구조적으로 조사하였다.</p>