모든 균주에서 투명환이 생성되었고, 그 중 G kaustophilus DSM 7263가 가장 넓은 투명환을 나타내었으며 8종의 균주를 액체배지에서 배양하여 배양 상등액의 효소활성을 측정한 결과, G 8종의 균주를 액체배지에서 배양하여 배양 상등액의 효소활성을 측정한 결과, G kaustophilus DSM 7263가 가장 높은 활성을 나타내어(data not shown), 이 균주를 내열성 lipase 생산 균주로 최종 선별하였다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>내열성 lipase 생산균주의 선별</h2> <p>고온성 균주로 알려진 Geobacillus 속 표준균주 8종(G. caldoxylosilyticus, G. gargensis, G. jurassicus, G. kaustophilus, G. lituanicus, G. pallidus, G. stearothermophilus, G. subterraneus)을 \( 1 \% \) trybutylin을 첨가한 nutrient agar 배지에서 배양하고 생성되는 투명환으로 lipase 생성균을 1차 선별 하였다. 그 결과, 모든 균주에서 투명환이 생성되었고, 그 중 G. kaustophilus DSM 7263가 가장 넓은 투명환을 나타내었다. 8종의 균주를 액체배지에서 배양하여 배양 상등액의 효소활성을 측정한 결과, G. kaustophilus DSM 7263가 가장 높은 활성을 나타내어(data not shown), 이 균주를 내열성 lipase 생산 균주로 최종 선별하였다.</p> <h2>효소 생산을 위한 탄소원의 영향</h2> <p>G. kaustophilus DSM 7263의 lipase 생산을 위해 탄소원의 영향을 조사하였다. 탄소원으로 olive oil, lard oil. fish oil, sesame oil, soybean oil, grapeseed oil, canola oil등의 각종 천연 오일을 최소배지에 최종 농도가 \( 0.5 \% \)가 되게 첨가하고 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \)에서 36시간 배양한 후 조효소액을 취하여 lipase 활성을 측정하였다. Lipase 활성 측정 결과, olive oil이 가장 활성이 높았고 fish oil, sesame oil에서도 \( 95\% \) 이상의 높은 활성을 보였으며 soybeen oil과 canola oil에서는 약 \( 50 \% \) 의 활성을 나타냈다. 반면 lard oil과 grapeseed oil에서는 상대적으로 낮은 활성을 보였다. 가장 높은 활성을 보인 olive oil에 대해서 최소 배지에 \( 0.1 \%\), \(0.5 \%\), \( 1.0 \%\), \(1.5 \%\), \(2.0 \% \)의 다양한 농도로 첨가하고, 배양시간대별로 lipase 활성을 측정하였다. 그 결과 Lipase 활성은 olive oil 농도 \( 0.5 \% \)에서 가장 높은 활성을 나타냈고 균의 생육 정지기인 18시간에서 36시간까지 높은 활성을 유지하였다. 따라서 lipase 생산을 위해서는 \( 0.5 \% \)의 olive oil 농도가 가장 적합한 것으로 판단되었다.</p>