ABTS 양이온 라디칼과 \( \mathrm { Fe } ^ { 3 + } \) 환원력, 총페놀 함량을 Re 방법, Oyaizu 방법, Folin-Ciocalteu 방법으로 측정하여 양이온 라디칼 소거활성, \( \mathrm { Fe } ^ { 3 + } \) 환원력, 총페놀 함량을 구하였다.
<p>양이온 라디칼 소거활성: 2,2'-azinobis-(3-ethyl-benzothiazoline)- sulfonic acid (ABTS) 라디칼의 소거활성은 Re 등의 방법으로 측정하였다. ABTS 용액(ABTS \( 7.4 \mathrm { mM } \), potassium persulfate \( 2.6 \mathrm { mM } ) \)을 15시간 동안 암소에서 반응시켜 ABTS 양이온 라디칼을 형성시킨 후 \( 414 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도가 1.5가 되도록 ABTS 용액을 희석하였다. 효소 반응액 \( 0.1 \mathrm { ~mL } \) 에 ABTS 라디칼 용액 \( 3 \mathrm { ~mL } \) 를 혼합한 후 실온에서 1.5 시간 반응시킨 다음 \( 414 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하여 양이온 라디칼 소거활성을 계산하였다.</p> <h2>환원력</h2> <p>\( \mathrm { Fe } ^ { 3 + } \) 이온을 환원시키는 능력을 Oyaizu의 방법으로 측정하였다. 인산 완충액 \( (0.2 \mathrm { M } , \mathrm { pH } 6.6\)) \( 2.5 \mathrm { ~mL } \) 에 효소 반응액 \( 1 \mathrm { ~mL } \) 를 넣고 \( 1 \% \) potassium ferricyanide (III) 용액을 \( 2.5 \mathrm { ~mL } \) 첨가하여 \( 50 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 20분간 반응시킨 후 \( 10 \% \) trichloroacetic acid 용액을 \( 2.5 \mathrm { ~mL } \) 추가한 다음 원심분리 \( (2,500 \times g, 5 \) 분)하였다. 상등액 \( 2.5 \mathrm { ~mL } \) 와 증류수 \( 2.5 \mathrm { ~mL } \) 를 혼합하고 \( 0.1 \% \) ferric chloride 용액 \( 0.5 \mathrm { ~mL } \) 와 반응시킨 후 \( 700 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하여 환원력으로 나타내었다.</p> <h2>총페놀 함량</h2> <p>효소 반응액의 총페놀 함량은 Folin과 Denis의 방법으로 측정하였다. 효소 반응액 \( 1 \mathrm { ~mL } \) 에 Folin-Ciocalteu 시약 \( 2 \mathrm { ~mL } \) 를 넣은 후 실온에서 3 분 동안 반응시킨 다음 \( 2 \mathrm { ~mL } \) 의 \( 10 \% \) sodium carbonate 용액을 넣어 1 시간 정치시키고 \( 760 \mathrm { ~nm } \) 에서의 흡광도를 측정하여 총페놀 화합물의 함량을 계산하였다. 총페놀 화합물의 함량은 gallic acid를 표준물질로 하여 환산하였다.</p>