Peroxiredoxin (Prx) family는 과산화수소 \( \left(\mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2}\right) \) 또는 alkyl hydroperoxide를 환원시켜 물과 알코올로 만드는 \( 20 \sim 30 \mathrm{kDa} \)의 티올 특이적 항산화효소이다. 포유류의 Prx는 아미노산 염기서열의 유사성과 면역학적 특성에 따라 6가지의 iso-type (Prx 1-6)으로 분류한다. 실험결과는 hPrx 6/Luc 재조합 벡터가 안정적이고 성공적으로 발현함을 제시하고 있기 때문에 향후 이 벡터가 형질전환마우스의 개발에 성공적으로 적용될 수 있음을 제시하고 있다.
<h1>서 론</h1> <p>Peroxiredoxin (Prx) family는 과산화수소 \( \left(\mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2}\right) \) 또는 alkyl hydroperoxide를 환원시켜 물과 알코올로 만드는 \( 20 \sim 30 \mathrm{kDa} \)의 티올 특이적 항산화효소이다. 포유류의 Prx는 아미노산 염기서열의 유사성과 면역학적 특성에 따라 6가지의 iso-type (Prx 1-6)으로 분류한다. 전체 isotype의 Prx는 보존되는 시스테인 잔기(Cys)의 개수에 따라 크게 2-Cys class (Prx 1-5), 1-Cys class (Prx 6) 의 2가지 그룹으로 나눌 수 있다. 모든 isotype의 Prx는 N-말단부분에 하나의 Cys47를 가지고 있고, 2-Cys class는 C-말단에 하나의 Cys를 더 가지고 있다. 또한, Cys 잔기의 정확한 위치에 따라서 typi-cal과 atypical (Prx 5)로 다시 분류되기도 한다. 더불어, Prx 는 각 isotype 별로 세포 내 독특한 분포를 나타낸다. Prx 1, Prx 2, Prx 6 는 주로 세포질에서 분포하고, Prx 3와 Prx 5는 세포소기관에서 발견되며, Prx 4는 endoplasmic reticulum에서 생성되어 세포 밖으로 분비된다.</p> <p>Prx 6 유전자는 염색체 1q2에 위치하고 5개의 엑손으로 이루어져 있으며, \( 25 \mathrm{kDa} \) 의 단백질을 인코딩한다. Prx 6 는 type Ⅱ 폐포상피세포나 간세포와 같은 상피세포에서 발현이 높으 며, 다른 Prx 와는 달리 인지질 과산화물을 환원시키는 성질을 갖고 있다. 특히, Prx 6는 malignancy mesothelioma 와 high-grade squamous cell carcinoma를 비롯한 인간의 폐질환에서도 높은 발현을 나타내어 폐 기능과 상관관계가 깊은것으로 추정된다. 또한, Prx 6는 여러 가지 질병동물모델에서 허혈성심질환-재관류(cardiac ischemia-reperfusion), 과산소유발 폐손상(hyperoxic lung injury), 파라콰트(paraquat)로 유발된 폐와 간 손상, 그리고 상처치유과정에서 급성 산화적 스트레스로부터 세포를 보호하는 기능을 한다. Prx 6가 항산화에 대한 반응효소로 작용함에도 불구하고, 이러한 성질을 이용하여 항산화능을 갖는 물질을 과학적으로 검출하고 정량하고자 하는 시도는 지금까지 없었다.</p> <p>따라서, 본 연구는 Prx 6 promoter의 조절하에 luciferase 유전자를 갖는 hPrx 6/Luc 벡터가 삽입된 형질전환마우스(transgenic mice)를 개발하고, 이를 이용하여 다양한 항산화물질의 스크리닝에 적용하기 위한 최종목적을 달성하기 위한 중간단계로서, 먼저 인간의 폐 상피암세포의 genomic DNA를 이용하여 hPrx 6 promoter를 합성하고, 이를 pTransLucent \( { }^{\mathrm{TM}} \) Reporter 벡터에 삽입하여 hPrx 6/Luc 재조합 벡터를 제조한 후 NCI-H460 세포주에서 이들 벡터의 성공적 발현과 반응성을 확인하고자 하였다. 따라서 본 실험결과는 hPrx 6/Luc 재조합 벡터가 안정적이고 성공적으로 발현함을 제시하고 있기 때문에 향후 이 벡터가 형질전환마우스의 개발에 성공적으로 적용될 수 있음을 제시하고 있다.</p>