목형 잎 추출물은 luteolin과 isoorientin(luteolin-6-C-glucoside)을 포함하고 있다. TLC, HPLC 및 LC/ESI-MS/MS 분석을 통해 luteolin과 isoorientin의 비율을 확인하였고, 결과 luteolin은 38.64%, isoorientin은 21.94%로 나타났다.목형 잎 추출물의 에틸아세테이트 분획의 구조를 동정한 결과 분자이온 \( [\mathrm{M}-\mathrm{H}]^{-} \)는 m/z 285에서 나타났고 \( -\mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) 의 소실로 인한 이온 피이크 역시 나타났다.
<h3>목형 잎 추출물의 TLC, HPLC 및 LC/ESI-MS/MS 분석 TLC 및 HPLC를 이용한 목형 잎 추출물의 luteolin 및 isoorientin 분석:</h3> <p>목형 잎 추출물에는 luteolin을 포함하여 luteolin 배당체인 isoorientin (luteolin-6-C-glucoside)이 존재한다고 알려져 있다. 그 중 luteolin은 미백효과의 우수함이 많이 알려져 있지만, isoorientin에 대한 연구는 부족하다. 따라서 목형 잎 추출물의 luteolin 및 isoorientin에 대해 알아보기 위하여 성분분석을 실시하였다</p> <p>목형 잎 추출물의 에틸아세테이트 분획 및 표준물질의 TLC 크로마토그램을 자외선과 NP (2-aminoethyl diphenylbroinate) - PEG (polyethylene glycol)로 표준물질과 비교하여 luteolin (VNT-2, \( \mathrm{R}_{\mathrm{f}} \) value \( =0.88 \) )을 확인하였고, 황산발색으로 luteolin 배당체인 isoorientin으로 예상되는 띠는 VNT-8 \( \left(\mathrm{R}_{\mathrm{f}}\right. \) value = 0.17)로 나타났다(data not shown). 또한 성분확인을 위하여 분리된 띠를 긁어 추출 감압·여과하고 용매를 감압 감압·건조하여 얻은 파우더를 HPLC에 의한 분리 및 retention time 확인, LC/ESI-MS/MS 등에 의한 분자량 등의 분광학적 데이터를 이용하였다.</p> <p>목형 잎 추출물 중 에틸아세테이트 분획을 Table 1 의 조건으로 HPLC를 실시하였다. HPLC 크로마토그램은 Fig. 8 (peak 1; \(21.94 \% \), peak 6; \(38.64 \% \))에 나타내었다. 그 결과 목형 잎 추출물의 에틸아세테이트 분획에 대하여 TLC 크로마토그램에서 확인한 VNT2 (luteolin, \(38.64 \% \))는 peak 6과 일치하였으며, luteolin 배당체인 iroorientin으로 예상되는 VNT-8은 peak 1 (\(21.94 \% \))와 일치함을 확인하였다 (data not shown).</p> <h3>LC/ESI-MS/MS를 이용한 luteolin 및 isoorientin 분석:</h3> <p>목형 잎 추출물의 에틸아세테이트 분획의 luteolin과 isoorientin으로 예상되는 VNT- 2와 VNT-8을 LC/ESI-MS/MS를 이용하여 그 구조를 동정하였다. VNT- 2 는 LC/ESI-MS를 이용한 분석 결과, negative ion 모드에서 분자이온 \( [\mathrm{M}-\mathrm{H}]^{-} \)는 m/z 285에서 나타났으며 \( -\mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) 의 소실로 인한 이온 피이크 (m/z 267)도 나타났다. 또한 Es-Safi 등이 보고한 바와 같이 flavonoid의 아글리콘 형태의 주요 쪼개짐인 \( { }^{0,4} \mathrm{~A}^{-} \) cleavage에 의한 분자이온 \( [\mathrm{M}-\mathrm{H}-108]^{-} \) \(-3 \mathrm{H} \) 가 m/z 174에서 나타나 luteolin 임을 확인하였다. VNT-8은 LC/ESI-MS/MS를 이용한 분석 결과, negative 모드에서 \( [\mathrm{M}-\mathrm{H}]^{-} \)는 m/z 447에서 나타났으며 \( \mathrm{m} / \mathrm{z} \) 357은 hexose의 \( { }^{0,4} \mathrm{X}^{+} \) cleavage에 의한 결과로 보여지며 이는 Pereira 등이 보고한 바와 같이 isoorientin임을 확인하였다.</p>