7종의 식물병원성 진균의 균사체 성장억제 능력을 조사하기 위해 B. licheniformis K11의 항진균 spectrum을 검사하였다. \(50\%\) PDA, \(50\%\) nutrient agar를 함유한 평판배지에서 28\(^\circ \mathrm{C}\) 48시간 배양 후 B. licheniformis K11을 선별하여 증식선단까지의 거리를 관측하였다.
<h3>식물병원성 진균의 균사체 성장억제 측정</h3> <p>PGPR균주 B. licheniformis K11의 항진균 spectrum을 조사하기 위해 Table 1 의 7종의 식물병원성진균을 대상으로 균사체 성장억제능을 조사하였다. 성장억제거리 조사방법은 \( 50 \% \) potato dextrose agar(PDA)와 \( 50 \% \) nutrient agar를 함유한 평판배지의 우측에 식물병원성 진균들을 \( 6 \mathrm { ~mm } \) 크기의 disc로 접종하여 \( 28 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 48 시간 배양 후 \( 4 \mathrm { ~cm } \) 의 간격에 B. licheniformis K11을 획선하여 \( 28 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 배양하여 서로간의 증식선단까지의 거리를 측정, 비교 하였다.</p> <h3>B. lichniformis \( \mathrm { K } 11 \) 이 생산하는 항진균성 물질의 조사</h3> <p>B. lichniformis K11이 생산하는 항진균성 물질의 생산을 확인하기 위해 균사체 성장억제거리 측정에서 가장 강력히 억제된 Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici(KACC 40037)을 대상으로 항진균성 물질을 조사하였다. 항진균성 물질의 곰팡이 성장억제 활성은 건조균체량 측정 방법으로 조사하였으며, non-siderophore 항징균성 물질의 생산을 확인하기 위해 많이 이용된 유기용매 분획방법을 사용하였다. 건조균체량을 측정하기 위해서 B. lichenformis K11를 nutrient broth에 접종하고 3 일간 진탕배양 후 배양상등액을 회수하였으며, \( 50 \mathrm { ml } \) PDB 에 여과한 배양상등액 \( 25 \mathrm { ml } \) 를 흔합 후 미리 준비해둔 F. oxysporium의 분생포자(conidia) \( 100 \mu 1 \) 를 접종하여 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } , 4 \) 일간 배양하였다. 이 배양액을 Whatman No. 2에 여과하여 \( 80 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 1 시간 건조한 후 건조균체량을 촉정하였고, 대조군은 nutrient broth를 \( 25 \mathrm { ml } \) 첨가하여 F .oxysporium 을 배양한 것으로 하여 비교하였다. 추가적으로 균사의 성장을 눈으로 확인하기 위해 여과한 배양상등액 10 \( \mathrm { ml } \) 를 \( 45 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 로 식혀둔 \( 15 \mathrm { ml } ) PDA에 흔합하여 고체배지를 만든 후, \( 6 \mathrm { ~mm } )disc 크기의 F. oxysporium를 고체배지 중앙에 계대하고 \( 28 ^ {\circ } \mathrm { C } , 4 \) 일간 배양한 후 균사체의 성장에 따른 곰팡이 성장억제 활성을 확인하였다. 대조군은 배양상등액 대신 \( 10 \mathrm { ml } \) nutrient broth와 흔합한 고체배지를 사용하였다.</p>