유리아미노산 분성은 Kim 등의 방법을 조금 변경하여 측정했고 무기질 분석도 Kim의 방법을 조금 변경해서 측정했다. 건조된 전초 분말은 \( 1 \mathrm{~g} \)에 발효 주정 50%을 20배 가하고 상온에서 12시간 후 추출했고 총 phenolics 함량은 GAE를 이용해 표준검량곡선을 작성하여 구했다. 총 flavonoids 함량은 (RE)을 이용해 표준검량곡선을 작성해 구했다.
<h2>유리아미노산 분석</h2> <p>유리아미노산 분석은 Kim 등의 방식을 약간 변형하여 측정하였다. 건조된 전초 분말 \( 1 \mathrm{~g} \) 에 증류수 \( 4 \mathrm{~mL} \) 을 가하여 \( 60^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 1 시간 반응시켰다. 가수분해물에 10% 5-sulfosalicylic acid \( 1 \mathrm{~mL} \) 를 첨가하여 \( 4^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 2 시간 방치 후 단백질을 침전시켰다. 이후 3분간 원심분리하여 얻은 상등액을 \( 0.45 \mu \mathrm{m} \) membrane filter로 1 차 여과시켜 \( 60^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 감압 농축하였다. 농축된 시료는 lithium citrate buffer \( (\mathrm{pH} \) 2.2) \( 2 \mathrm{~mL} \) 에 용해 후 최종적으로 \( 0.45 \mu \mathrm{m} \) membrane filter로 여과한 뒤 아미노산 자동분석기 (L-8900, Hitachi High-Technologies Corp., Tokyo, Japan)를 이용하여 분석하였다.</p> <h2>무기질 분석</h2> <p>무기질 분석은 Kim 등의 방법을 약간 변형하여 측정하였다. 건조된 전초 분말 \( 0.5 \mathrm{~g} \) 을 시험관에 칭량하고 여기에 70% 질산 용액을 \( 10 \mathrm{~mL} \) 첨가하여 고압력 마이크로웨이브로 분해하였다. 분해 후 최종 부피가 \( 50 \mathrm{~mL} \) 가 되도록 증류수로 정용하여 liquid chromatography-inductively coupled plasma mass spectrometer (NexION 350 ICP MS, PerkinElmer Inc., Waltham, MA, USA)로 분석하였다.</p> <h2>추출물 제조</h2> <p>건조된 전초 분말 \( 1 \mathrm{~g} \) 에 50% 발효 주정을 20 배 가하고 상온에서 12 시간 추출하였다. 추출물을 원심분리 하여 상등액만을 0.45 \( \mu \mathrm{m} \) membrane filter로 여과하여 18 brix 농도로 농축하였으며, 총 phenolics 및 총 flavonols 함량과 항산화 활성 측정 시료로 사용하였다.</p> <h2>총 phenolics 및 총 flavonoids 함량 분석</h2> <p>총 phenolics 함량은 Folin Denis법을 약간 변형하여 측정하였으며 추출물 \( 0.5 \mathrm{~mL} \) 과 \( 25 \% \mathrm{Na}_{2} \mathrm{CO}_{3} \) 용액 \( 0.5 \mathrm{~mL} \) 를 시험관에 분주하여 3분간 정치시킨 후 \( 2 \mathrm{~N} \) Folin-ciocalteu phenol 시약 \( 0.25 \mathrm{~mL} \) 를 혼합한 다음 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 1 시간 동안 발색 시켜 분광 광도계(UV-1800 240V, Shimadzu Corp., Kyoto, Japan)를 사용하여 \( 750 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하였다. 이때 총 phenolics 함량은 gallic acid (GAE)를 이용해 표준검량곡선을 작성하여 구하였다.</p> <p>총 flavonoids 함량은 Cho 등의 방법을 이용하여 측정하였다. 추출물 \( 0.5 \mathrm{~mL} \) 를 시험관에 취하고 diethylene glycol 1.0 \( \mathrm{mL} \) 를 분주한 후 \( 1 \mathrm{~N} \mathrm{NaOH} 0.01 \mathrm{~mL} \) 를 가하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 항온수조에서 1 시간 방치하였다. 분광 광도계를 이용해 \( 420 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하였으며 이때 총 flavonoids 함량은 rutin (RE)을 이용해 표준검량곡선을 작성하여 구하였다.</p>