본 연구에서는 동결건조 분말의 블루베리, 아로니아, 귀리, 단호박, 생강을 사용하여 추출물을 제조하였다. 시료 \( 5 \mathrm { ~g } \)에 \( 80 \% \) 메탄올을 \( 100 \mathrm { ml } \) 넣고 90초간 균질화한 후 여과지에 3회 반복 여과하여 추출하였으며 페놀 함량 측정은 Folin-Ciocalteu 의 변형 방법으로 하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h3>실험재료</h3> <p>본 연구에 사용한 블루베리와 아로니아는 동결건조 분말이었으며, 귀리는 귀리 쌀을 갈아 볶은 형태를 실험에 사용하였다. 또 단호박과 생강은 원료를 건조하여 분쇄한 형태의 중간소재를 구입하여 사용하였다. 미국산 블루베리는 (주)자연그대로(Korea)에서 국내산은 전북 고창에서 재배된 (주)하랑농장(Korea)의 것을 구매하였다. 아로니아의 경우 (주)갑당 약초(Korea)에서 폴란드산과 경북 고령에서 재배된 국내산 원료의 동결건조 분말을 구매하였다. 볶은 귀리가루는 외국산으로 (주)건우에프피(Korea)에서 캐나다산을 제공받았으며, (주)바른약초(Korea)에서 국내산을 구매하였다. 단호박 분말은 (주)푸른터(Korea)에서 제조한 중국산과 국내산 단호박을 가공한 분말을 사용하였다. 생강의 경우 (주)갑당약초에서 판매하는 국내산과 중국산 생강분말을 구매하여 사용하였다.</p> <h3>추출물 제조</h3> <p>추출은 시료 \( 5 \mathrm { ~g } \)에 \( 80 \% \) 메탄올을 \( 100 \mathrm { ml } \) 넣고 분쇄기 (Hanil Co., Korea)에 90초 동안 균질화한 뒤 Whatman No. 2 여과지(Whatman Intl. Ltd., England)로 여과하여 사용하였으며, 3번 반복하여 추출하였다. 불순물로 인해 추출이 어려운 경우 원심분리 \( (8,870 \times g) \)로 제거 후 추출하였다. 추출물은 rotary evaporator (BÜCHI, Switzeland)를 이용 감압농축하고, \( 50 \%( \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 메탄올에 녹인 후, 냉동 보관하였으며, 총페놀, 총플라보노이드, 총안토시아닌 및 항산화능을 측정하는데 사용하였다.</p> <h3>총페놀 함량</h3> <p>총페놀 함량은 Folin-Ciocalteu 방법을 변형하여 측정 하였다. 96 well plate (SPL, Korea)에 시료 \( 10 \mu l \)와 증류수 \( 100 \mu l \)를 혼합한 후 Folin-Ciocalteu's 용액(Sigma, USA) \( 10 \mu \mathrm { l } \) 를 넣고 균질화 하여 \(6 \) 분간 반응시켰다. 그 후 \( 7 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) \( \mathrm { Na } _ { 2 } \mathrm { CO } _ { 3 } \) (Sigma) \( 80 \mu \mathrm { l } \)를 넣고 균질화 한 후 실온에서 \(90 \)분간 반응시킨 뒤 \( 750 \mathrm { ~nm } \)에서 \(96 \) well microplate reader (iMark, Bio-Rad Laboratories, USA)를 이용하여 흡광도를 \(3 \)회 반복 측정하였다. 표준물질로 gallic acid (Sigma)를 사용하여 표준곡선을 구하고, mg gallic acid equivalent (GAE)/ \(100 \) g dried sample으로 함량을 표기하였다.</p>