노랑봄 품종의 callus colony를 대상으로 BA, zeatin 및 NAA가 단용 또는 혼용 첨가된 MS배지에 치상하여 callus colony의 반응을 조사한 결과, Code D 배지에서는 callus의 지속과 약간의 갈변현상만 관찰되었고, Code H 배지에서는 신초와 뿌리가 재분화되었고, Code l 배지에서는 신초가 재분화되었다. 이러한 반응의 차이는 callus 유도 과정 중의 배양환경이 callus의 속성에 영향을 미치는 것으로 나타났으며, 재분화된 신초는 PGR 무첨가 MS 배지에 계대배양함으로써 양호하게 뿌리를 발생시킬 수 있었다.
<p>노랑봄 품종의 callus colony를 대상으로 유래한 배지 code별로 구분한 후 (See the medium codes in table 2) BA, zeatin 및 NAA가 단용 또는 혼용 첨가된 MS배지에 치상하여 callus colony의 반응을 조사하였다 (Table 3, Figure 3Bc). Code D 배지에서 유래한 callus colony는 callus의 지속과 약간의 갈변현상만 관찰되었을 뿐 신초 또는 뿌리 재분화는 관찰 할 수 없었다 (Figure 3Bc lower dishes). Code H 배지에서 유래한 callus colony는 BA \( 2.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 와 NAA \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 첨가배지에서 \( 2.9 \% \) 와 \( 22.7 \% \) 의 빈도로 각각 신초와 뿌리가 재분화 되었고 다른 배지에서는 callus 생장만 지속되었다. Code l 배지에서 생장한 colony는 BA \( 2.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 와 NAA \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 첨가 배지에서 \( 1.4 \% \) 빈도로, BA \( 5.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 와 NAA \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 첨가 배지에서는 \( 4.3 \% \)의 빈도로 각각 신초가 재분화 (Figure 3Bf, g)되었으며, 각각의 배지에서 뿌리 재분화 (Figure 3Bf, e) 빈도는 \( 22.7 \% \) 와 \( 11.7 \% \) 였다.</p> <p>Callus source에 따른 이러한 반응의 차이는 callus가 어떠한 배양 환경을 거쳐 생장되어 왔는가 즉, callus 유도 과정 중의 배양환경이 callus의 속성에 영향을 미침으로써 최종적 재분화 효율에도 역시 영향을 미친다는 것을 시사한다고 할 수 있다. 따라서 배추 원형질체 배양 시 원형질체로부터 신초유기용 재료로 사용될 callus 형성까지 각 간계의 배양환경을 신초 분화에 유리한 방향으로 주의 깊게 조절하여야 할 것으로 판단된다. 재분화된 신초는 PGR 무첨가 MS 배지에 계대배양함으로써 양호하게 뿌리를 발생시킬 수 있었으며 (Figure 3Bh), 완전히 발근한 재분화 개체는 기내에서 감습 조절함으로써 순화시켰고 기외 이식 후 정상 식물체로 생장하였다 (Figure 3Bi).</p> <p>배추가 속해 있는 B. rapa 종은 원형질체 배양뿐 만 아니라 각 기관의 절편 배양으로부터도 식물체 재분화가 상당히 어려운 것으로 알려져 있다 (Murata and Orton 1987; Jain et al. 1988; Narasimhulu and Chopra 1988; Ren et al. 2000). 본 연구에서 얻어진 최고 \( 4.3 \% \) 빈도의 배추 단독 원형질체 배양을 통한 식물체 재분화 결과는 본 연구의 최종 목적인 웅성불임 세포질잡종 (cybrid) 획득을 위한 원형질체 융합 연구에 적용하기에는 충분하지 않은 빈도일 수 있다. 그러나 본 연구의 결과는 과거 보고된 배추 단독 원형질체 배양을 통한 재분화 효율에 비하면 상당히 개선된 결과이며 다량의 callus colony를 비교적 손쉽게 획득할 수 있는 방법을 제시하였다는 측면에서 의미 있다고 사료된다. 본 연구에서 얻어진 callus colony를 재료로 보다 다양한 외생 PGR 조합 처리, ethylene 억제제의 사용 및 Murata와 Orton (1987)이 언급한 바와 같이 배지 내 당 조절 등을 검토한다면 보다 향상된 빈도로 배추 원형질체로부터 식물체를 재분화 시킬 수 있을 것으로 기대한다.</p>