GaIN을 투여하여 DWP-04를 2주간 전처리하면 해독계인 효소의 활성이 용량의존적으로 유의성 있게 증가하는 것이 관찰되었다. SOD는 xenobiotics로 인하여 생성된 superoxide anion을 제거하는 역할을 하며, 다양한 xenobiotics의 대사를 촉진하는 중요한 역할을 한다. GSH 농도를 측정하였을 때 간독성의 유발로 인해 정상군에 비하여 현저히 감소되는것을 볼 수 있었고 DWP-04를 실험동물에 경구로 투여하고 D-galactosamine으로 간독성을 유발하여 GalN의 단독투여는 대조군에 비하여 혈중 간기능 지표효소 및 간조직에서의 지질과산화의 함량이 현저히 증가하였으나, DWP-04의 전처리로 현저히 감소함을 알 수 있었다.
<h2>활성산소의 해독계에 미치는 영향</h2> <p>DWP-04의 전처리가 GaIN에 의하여 유도된 간독성이 경감되는 과정에 활성산소의 해독계에 어떠한 영향을 주는가를 관찰한 성적이 Table 3이다. DWP-04를 2주간 전처리하고 마지막날 GaIN을 투여하였을 때 해독계인 효소의 활성이 GaIN의 투여로서 정상군에 비하여 현저히 억제되던 것이 DWP-04를 전처리 \( (100,200 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } ) \) 하므로서 용량의존적으로 유의성 있게 증가되었다. Phasea II 반응은 phase I 반응을 거친 약물이나 내인성 및 외인성 물질에 glucuronic acid, sulfate, glutathione의 결합에 의한 작용과 superoxide dis-mutase를 통하여 대사되어진다. 그 중 superoxide dismutase (SOD)는 xenobiotics로 인하여 생성된 superoxide anion을 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 로 전환시키는 효소로 생체내 해독 과정에 관여하는 효소 중 하나이다. 또한 catalase는 체내에서 지방의 자동 산화 및 유기물의 산화로 생기는 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 를 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } \) 와 \( \mathrm { O } _ { 2 } \) 로 분해하여 무독화 시키는 radical scavenging enzyme로 물로 변환시켜 생성된 활성 산소를 체외로 배설시킨다. Glutathione peroxidase 역시 catalase와 같은 기능을 수행하는 효소로 glutathione을 기질로 하여 유리기를 물로 변환시켜 생성된 활성 산소를 체외로 배설시킨다. 이러한 radical scavenging enzyme의 활성 은 GaIN의 간독성 유발에 의해 감소하는 경향을 보였으며 DWP-04의 전처리 군에서 개선되었다. 또 다른 해독계로서, 첵내에서 일차적으로 산화대사된 후 제2단계인 conjugation단계를 거쳐서 무독화되는 최종 과정에서 필연적으로 gluta-thione이 요구되는데 이를 이용하여 체내 독성물질을 전이 분해시키는 GST의 역할을 생각할 수 있다. 이상의 결과로 볼 때 DWP-04의 투여가 GST, SOD와 catalase 활성을 증가시켜 oxygen free radical의 생성을 억제시키므로서 GaIN에 의하여 나타나는 지질과산화를 억제함으로 간 손상을 완화시켜 간을 보호하는 것으로 사료된다.</p> <h2>Glutathione 생성계 활성에 미치는 영향</h2> <p>Glutathione (GSH) 농도와 glutathione 생성계를 측정한 결과를 Table 4에 나타내었다. GaIN 단독투여군의 GSH 농도가 유의적으로 감소하였는데, 이는 GaIN 투여시 간조직의 GSH 함량이 감소된다는 Rikans와 Kosanke의 보고와 유사하였다. 이에 DWP-04를 전처리하고 GaIN을 투여하므로서 GaIN 단독투여군보다 유의성 있게 개선되었다. 친전자성 물질들과 활성 산소 및 과산화물의 최중적 무독화 과정에서 필연적으로 glutathione이 요구되는데 이 물질의 함량에 따라 독성 발현의 유무를 판단할 수 있다. gluta-thione은 간과 신장에서 glutamic acid, cysteine 및 glycine을 기질로 \( \gamma \)-glutamylcysteine synthetase ( \( \gamma \)-GCS)와 gluta-thione synthetase에 의해 합성된다. 본 논문에서는 GaIN으로 유발된 간독성에 대한 DWP-04의 독성억제를 알아보기 위해 GSH 농도를 측정한 결과 간독성의 유발로 인해 정상군에 비하여 현저히 감소되었다. GSH의 세포내 함량 유지에는 GSH 활성 효소인 \( \gamma \)-GCS와 해독 반응후 생성되는 산화형 GSH의 재환원 효소인 glutathione reductase (GR)이 관여한다. 간독성 유발에 의한 GSH의 함량 감소를 경감시키는 기전을 알아불 목적으로 \( \gamma \)-GCS의 활성과 GR의 활성을 관찰한 결과 GaIN의 간독성에 의해 GR의 활성은 별다른 유의성을 나타내지 못하였다. 그러나 합성에 관여하는 \( v- \)GCS 의 활성은 증가되었다. 이로 보아 GalN에 의한 간독성을 DWP-04의 전처리로 억제되는 것은 \( \gamma \)-GCS의 활성을 증가시켜 GSH 농도를 증가시키므로서 phase II과정의 해독계에 영향을 주어 GaIN 투여로 인한 지질과산화 반응을 억제시키는 것으로 사료된다.</p> <h1>요 약</h1> <p>간기능 보호 작용이 있는 것으로 알려진 DDB, selenium과 glutathione의 혼합제제인 DWP-04의 간보호 작용을 검토할 목적으로 DWP-04를 실험동물에 경구로 투여하고서 D-galactosamine으로 간독성을 유발하여 혈액의 변동 및 간조직에서의 활성산소 생성계 및 해독계의 활성에 미치는 영향을 관찰한 결과 GalN의 단독투여는 대조군에 비하여 혈중 간기능 지표효소 및 간조직에서의 지질과산화의 함량이 현저히 증가하였으나, DWP-04의 전처리로 현저히 감소되었다. GaIN의 단독 투여로 활성산소의 생성계인 phase 1 계의 효소가 현저히 증가하던 것이 DWP-04의 처리로 억제되었으며 해독계인 phase II계의 효소는 GaIN의 투여로 대조군에 비하여 억제되던 것이 DWP-04의 전처리로 정상군에는 미치지 않으나 유의성 있게 증가되었다. 간조직중 glutathine의 함량은 GalN의 투여로 현저히 억제되었으며 DWP-04의 투여로 증가하였는데 이러한 결과는 DWP-04의 투여로 glutathione peroxidase의 활성보다는 \( \gamma \)-glutamylcysteine synthetase의 활성을 조절한 결과로 생각된다. 이상의 결과를 종합하여 볼때 DWP-04의 투여는 활성산소의 생성 및 해독계를 조절하므로서 GalN으로 인한 간손상을 보호하는 효과가 있는 것으로 사료된다.</p>