본 연구는 양조 부산물인 주박이 피부의 주름억제 즉, 피부의 항노화 효과를 앋아보기 위해 진행하였고, 그 결과 주박은 항산화 활성 효능에서 약 \( 40-43 \% \) radical 소거능을 보임으로써 항산화 활성의 효과를 나타내었고, 세포의 증식 및 피부의 구성인자인 collagen의 합성을 촉진하는 것을 알 수 있었다. 마지막으로 RT-PCR을 이용한 collagen의 직접적인 분해인자인 MMP-1의 mRNA level에서의 발현을 측정했을 때, 농도의존적 억제의 결과를 확인 할 수 있어 주박은 피부의 주름 예방 및 완화할 수 있는 효과를 입증하였고, 피부주름 개선을 위한 천연소재로서의 가능성을 입증하였다.
<h2>주박에 의한 collagen 생합성 촉진효과</h2> <h2>주박에 의한 collagen 생합성 촉진효과</h2> <p>피부를 구성하는 주성분인 collagen은 피부, 골, 인대, 연골및 치아 등에 높은 농도로 존재하고 있으며, 특허, 섬유아세포 에서 세포외기질을 구성하는 중요한 구성요소이다. Collagen은 피부의 기계적 견고성, 결합조직의 저항력과 조직의 결합력, 세포 접착의 지탱, 세포분할과 분화의 유도 등 다양한 기능을 하고 있다. Collagen은 피부의 주름과 밀접한 관계를 가지고 있기 때문에, collagen 부족은 주름의 유발로 이어진다. 그러므로 collagen의 합성을 촉진하는 소재의 발견은 화장품원료로서의 이용이 매우 크다고 볼 수 있다. Collagen은 전구체인 procollagen으로부터 합성이 시작되며, procollgagen은 아미노 말단과 카복시 말단에 propeptide라 불리는 peptide sequence를 가지고 있다. Propeptide는 소포체내에서 pro-collagen의 folding을 도와줌과 동시에 collagen 중합반응이 일어날 때 collagen 분자로부터 분리 된다. 따라서, collagen 생합성의 양은 propeptide의 양을 측정함으로써 그 생합성 효.과를 유추할 수 있다. Fig. 4의 결과에서 섬유아세포에 주박을 다양한 농도로 처리헸을 때, 농도의존적으로 pro-collagen의 양이 증가하는 것을 확인할 수 있었고, 비처리군의 procollagen의 양을 \( 100 \% \) 로 했을 때 주박의 최대농도 처리군인 \( 500 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 의 농도에서 \( 42.5 \% \) 증가함을 확인할 수 있었다. 따라서, 주박은 섬유아세포의 collagen 합성 촉진 작용을 하고, 이러한 결과는 Fig. 2에서 보여졌듯이 세포의 중식효과가 일어난 것과 어느 정도 연관성을 가진다고 판단된다.</p> <h2>주박에 의한 MMP-1 유전자 발현의 억제</h2> <p>피부세포의 결합조직을 구성하는 성분 중 collagen은 약 \( 90 \% \) 정도를 차지하는 중요한 구성 단백질이다. Collagen은 trypsin 등의 단백질 분해효소에는 영향을 받지는 않지만,collagenase의 영향에 의해 분해된다[9]. Collagen을 분해하는 주요 효소중에는 전사인자인 AP-1에 의해 유도되는 MMP-1에 의해 일어나는 것이 일반적이다[8-9]. MMP-1은 type I col-lagenase 로도 불리며, 세포외기질을 분해할 뿐만 아니라 특이적으로 type I procollagen을 분해함으로써 collagen의 합성을 억제하는 분해인자로 알려져 있다. 그러므로, MMP-1 활성의 억제는 곧 collagen 분해를 감소시켜 피부탄 력의 유지 및 주름형성을 억제 할 수 있으리라 판단되어 mRNA level에서의 MMP-1 유전자의 발현 변화를 측정하였다(Fig. 5). 그 결과, 섬유아세포에 처리된 주박의 농도가 증가할수록 비처리군에 비해 MMP-1의 유전자 발현이 농도의존적으로 억제되는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 조직 특이적 억제자로 알려진 TIMP는 특이적으로 MMPs를 불활성화 시켜 생물학적으로 평형상태를 유지시킨다고 알려져 있다.TIMP-1은 MMP-1의 억제자로서 MMP-1의 활성을 조절하고 내인성 파괴시스템으로부터 collagen과 elastin을 보호하는 역할을 하고 있는 것으로 알려져 있다. 그러나 본 연구 결과에서 collagen 분해효소 억제 유전자로 앝려진 TIMP-1의 유전자 발현에는 영향이 없었다. 따라서, 주박은 collagen의 직접적인 분해요소인 MMP-1의 발현을 mRNA level에서 억제함으로써, 피부 주름의 형성을 억제하는 것으로 판단되고, 이는 주박을 이용한 피부주름개선 화장품의 개발의 가능성을 제시 한다. 그러나, 정확한 주박의 피부개선 분자기작에 대한 연구는 미흡하며, 앞으로 구체적인 관련 연구가 더 진행되어야 할 것 이다.</p> <p>본 연구는 양조 부산물인 주박이 피부의 주름억제 즉, 피부의 항노화 효과를 앋아보기 위해 진행하였다. 그 결과 주박은 항산화 활성 효능에서 약 \( 40-43 \% \) radical 소거능을 보임으로써 항산화 활성의 효과를 나타내었다. 또한, 주박은 세포의 증식및 피부의 구성인자인 collagen의 합성을 촉진하는 것을 알 수 있었다. 세포 증식의 경우 주박의 비처리군에 비해 약 \( 26 \% \)의 증식율을 보였고, collagen 합성의 경우 비처리군에 비해 약 \( 42.5 \% \) 의 증가를 나타내었다. 마지막으로 RT-PCR을 이용한 collagen의 직접적인 분해인자인 MMP-1의 mRNA level에서의 발현을 측정했을 때, 농도의존적 억제의 결과를 확인 할 수 있었다. 따라서, 본 연구를 통해서 주박은 피부의 주름 예방 및 완화할 수 있는 효과를 입증하였고, 주박을 이용한 피부주름 개선을 위한 천연소재로서의 가능성을 입증하였다.</p>