12 종류의 항생제 중 penicillin, colistin, bacitracin 및 polymycin 4 종류가 내성을 보였고, Providencia rettgeri 4A3 균의 생육을 조사하기 위해 C-배지에 탄소원인 crude oil \( 1 \% \)를 첨가하고 \( \mathrm { NaCl } \)농도를 달리하여 실험한 결과 \( 2 \% \) 농도에서 가장 성장이 활발하였다.
<h2>균주의 생육특성</h2> <p>항생제 존재하에서의 분리균의 생육을 조사하고자 chloramphenicol을 비롯한 12 종류의 항생제를 사용한 paper disc를 사용하여 배양한 결과를 Fig. 1에 나타내었다. 12 종류의 항생제 중에서 내성을 보이는 것은 penicillin, colistin, bacitracin 및 polymycin 등 4 종류였다. 이는 분리균주의 형질전환을 통한 유전학적인 실험을 수행 할 때에 잘 활용되어질 것으로 생각된다.</p> <p>분리균의 생육을 조사하기 위해 C-배지에 탄소원으로 crude oil \( 1 \% \)를 첨가하고 \( \mathrm { NaCl } \) 농도를 달리하여 Providencia rettgeri 4A3 을 진탕배양하면서 시간별로 시료를 채취하여 균주의 성장을 조사하였다. 그 결과, 본 실험에 사용된 4A3균은 \( \mathrm { NaCl } \) 농도 \( 2 \% \) 에서 가장 성장이 양호하였으며, 3 일 정도의 배양에서 최대성장을 보였다(Fig. 2). \( \mathrm { NaCl } \) 농도 3%, \( 4 \% \) 및 \( 5 \% \) 에서는 균의 생육속도가 느리거나 생육이 저해를 받아 2 일 이상의 배양에서 성장이 점차 억제되는 것으로 확인되었다. 이러한 결과는 유류분해 해양세균인 Klebsiella pmeumoniae L25는 \( \mathrm { NaCl } \) 농도 \( 3.0 \) 및 \( 3.5 \% \) 에서 최대의 성장을 보여 준 결과, Acinetobacter sp.의 \( \mathrm { NaCl } \) 농도는 \( 3 \% \), Xanthomonas campestris M12 및 Pseudomonas maltophilia N246은 \( 3 .0 \)- \( 3.5 \% \)로 보고된 것 보다는 약간 낮은 최적 생육 \( \mathrm { NaCl } \) 농도를 보였다. \( \mathrm { NaCl } \) 농도 \( 5 \% \) 이상에서의 균생육과 유화활성의 감소는 호흡증가 및 스트레스 작용에 의한 원인으로 지적되고 있으며, 또한 염농도가 수계의 모든 생물군집에 중대한 영향을 미치는 환경요인으로 작용하는 것이 보고된 바 있다.</p> <p>분리균인 Providencia rettgeri 4A3의 생육에 미치는 온도의 영향을 검토한 결과를 Fig. 3 에서 보면, \( 26 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 최대로 생육이 왕성함을 나타냈다. \( 32 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 및 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 비슷한 양상으로 생육이 왕성하였으나, \( 26 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서의 생육상태보다는 약간 뒤떨어졌다. 그러나 \( 42 ^ { 2 } \mathrm { C } \) 에서는 생육이 매우 불량하였다. 석유탄화수소의 분해는 매우 광법위한 온도 범위에서 일어날 수 있다고 알려져 있으나, 지금까지의 보고된 것을 보면, Xanthomonas campestris M12, Xanthomonas sp.N246 및 Pseudomonas maltophilia N246 들은 37°C에서, Pseudomonas aeruginosa BYK2는 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 최적 배양온도를 나타내어 유류분해균은 대체로 다양한 온도의 범위에서 잘 생육하는 것으로 나타났으며, 분리균인 Providencia rettgeri 4A3은 Pseudomonas aeruginosa BYK2의 최적 배양온도와 비슷함을 나타내었다.</p>