시료 농도 증가는 세포 밀도 감소와 세포막 변형 등을 일으키며, 이는 키조개, 참치지느러미, 오징어 내장 등 해양생물의 메탄올 분획층에서 가장 높은 quinone reductase 활성 효과와 일치한다. 특히, \(20 \mu \mathrm {g} / \mathrm {ml}\) 최저 농도에서도 \(1.7\)배의 활성 효과를 보이는데, 이는 시료 중 가장 높은 활성 효과를 보인다. 군소내장의 QR 유도 활성 효과는 매우 높으며, AKMM층에서의 생리활성 물질 추적을 통해 식품산업에서 암 예방 효과를 지닌 기능성 식품 개발에 중요한 자료가 될 것으로 예상된다.
<h2>AKMH층의 처리에 따른 암세포의 형태학적 변화</h2> <p>암세포 성장 억제 효과에서 가장 높은 효과를 나타낸 meth-anol 분획층인 AKMM층의 처리가 암세포의 형태에 어떠한 영향을 주는지 알아보기 위해 각 세포주에 여러 농도의 AKMM층을 48시간 동안 처리한 후 위상차현미경으로 형태학적인 관찰을 하였다. Fig. 5 는 HepG2 세포주에 농도별로 시료를 첨가한 후의 세포형태의 변화를 관찰한 결과이다. 시료 농도의 증가에 따라 의존적으로 현저한 세포 밀도의 감소현상과 세포막의 shrinking 및 blebbing 현상 등의 형태학적 변화가 나타났으며 암세포들의 부차력 상실과 파괴된 세포 잔여물들이 뚜렷하게 관찰되었다.</p> <h2>Quinone reductase 유도 활성 증가 효과</h2> <p>본 연구에 사용된 quinone reductase \( ( \mathrm { QR } ) \)는 phase II 무독화 효소중의 하나로 돌연변이 또는 발암물질 등에 의한 DNA 와의 상호작용을 차단하는 효소이며 \( \mathrm { NAD } ( \mathrm { P } ) \mathrm { H } \) 를 이용하여 quinone류의 환원을 촉매하는 flavoprotein의 일종이다. 특히 \( \mathrm { QR } \) 은 phase II 효소계의 지표효소로서 다양한 종류의 항암물질에 의해 그 환성이 유도되어 암예방을 선도하는 특성을 가지고 있어서 암 예방 물질의 탐색에 많이 사용되어 왔다. 암세포 성장 억제 효과에 사용된 4종의 암세포 중 유일하게 quinone reductase를 가지고 있는 간암 세포인 \( \mathrm { HepG } 2 \) 세포주를 사용하여 군소내장의 \( \mathrm { QR } \) 유도 활성 증가 효과를 측정하였으며 그 결과는 Fig. 6과 같다. HepG2 암세포 주에 대한 용매별 군소내장 분획물을 각각 \( 20,40,60,80 \) 및 \( 100 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)씩 첨가했을 때, \( \mathrm { AKMM } \)층이 가장 높은 효과를 보인 암세포 성장 억제 효과의 결과와 같이 \( \mathrm { AKMM } \)층에서 가장 높은 \( \mathrm { QR } \) 유도 활성 증가 효과를 나타내었다. 대조군을 1로 했을 경우 \( \mathrm { AKMM } \)층에서 그 효과가 농도 의존적으로 유의성 있게 증가하였으며 \( 40 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 첨가 했을 때 이미 \( 2.0 \) 배의 \( \mathrm { QR } \) 유도 활성 증가 효과를 보였고 \( 80 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 첨가 했을 때 \( 2.2 \)배 그리고 최종농도인 \( 100 \mathrm {\mu g } / \mathrm { ml } \) 첨가 했을 때에는 대조군에 비해 \( \mathrm { AKMM } \)층이 \( 2.4 \)배의 높은 \( \mathrm { QR } \) 유도 활성을 나타내었다. 그러나 다른 모든 분획층에서는 대부분 1에 가까운 수치를 나타내어 \( \mathrm { QR } \) 유도 활성 증가 효과를 거의 볼 수 없었다. 이상의 결과에서 군소내장 분획물 중 \( \mathrm { AKMM } \)층에서 가장 높은 유의성 있는 \( \mathrm { QR } \) 유도 활성을 보였으므로 methanol 분획층인 \( \mathrm { AKMM } \)층에서 암 예방 효소계인 quinone reductase의 inducer가 주로 존재함을 추정할 수 있었다. 이러한 결과는 본 연구실에서 연구된 다른 시료들과 비교해 볼 때, 키조개, 참치지느러미, 오징어내장 등의 해양생물이 주로 메탄올 분획층에서 가장 높은 \( \mathrm { QR } \) 활성 효과를 나타낸 결과와 일치하였고, 시료의 농도를 비교하여 볼 때 최저농도인 \( 20 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 에서 이미 \( 1.7 \)배의 \( \mathrm { QR } \) 유도 활성을 나타내어 위의 해양 동물 중 가장 높은 \( \mathrm { QR } \) 유도 활성 효과에 해당되었다. 특히, 폐기되어지는 부산물인 오징어내장의 실험결과와 비교해볼 때 오징어내장은 시료 최종농도인 \( 270 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)에서 2배의 효과를 보여 군소내장의 \( \mathrm { QR } \) 유도 활성효과는 매우 높다고 할 수 있다. 앞으로 더욱 더 심도 있는 연구를 통해 군소내장 분획물중 methanol 분획층인 \( \mathrm { AKMM } \)층에서의 생리활성 물질을 추적, 보완하여 그 구조를 동정함으로서 식품산업에 있어서의 암 예방 효과를 지닌 기능성 식품개발에 매우 중요한 자료가 될 수 있을 것으로 사료된다.</p>