기내 발아를 위하여 채집된 종자는 과육을 제거하고 \(10\%\) 상업용 락스로 10분간 표면살균한 다음 멸균수로 3-4회 세척 후 실험에 사용하였으며, 종자의 발아 및 haustorium 발달에 미치는 광 조건의 필요유무, 배양온돌, 배지내 sucrose 농도, phenolic compounds의 영향을 조사하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>식물재료 및 배양배지</h2> <p>겨우살이(Viscum album L. var. coloratum [Kom.] Ohwi) 종자는 2001년 12월 전라북도 무주 적상산에서 채집한 종자를 사용하였다. 기내 발아를 위하여 채집된 종자는 과육을 제거한 다음 \(10\%\) 상업용 락스로 10분간 표면살균한 다음 멸균수로 3-4회 세척 후 실험에 사용하였다. 종자 발아 및 배양에 사용된 배지는 B5(Gamborg et al. 1968) 무기염류에 \(20\mathrm{g/L}\) sucrose 및 \(4\mathrm{g/L}\) Gclrite가 첨가된 배지를 기본배지로 사용하였으며 배양배지의 \(\mathrm{pH}\)는 고압살균전에 \(\mathrm{1N ~NaoH}\) 용액으로 \(5.8\)로 조정하였다.</p> <h2>Haustorium 발달에 미치는 배양환경 요인 영향 조사</h2> <p>종자의 발아 및 haustorium 발달에 미치는 광 조건의 필요유무, 배양온돌, 배지내 sucrose 농도, phenolic compounds의 영향을 조사하였다. 표면살균된 겨우살이 종자를 \( 1 \mathrm { mgl } ^ { -1 } \) BA가 첨가된 B5 배양배지에 치상한 다음 각각 명배양(약 \( 80 \mu \mathrm { mol } \mathrm { m } \mathrm { m } ^ { -2 } \mathrm { ~s } ^ { -1 } \); 광주기 16/8시간) 및 암배양하였다 또한 적정 온도를 조사하기 위하여 표면 살균뇐 종자를 \( 1 \mathrm { mg } ^ { -1 } \) BA가 첨가된 B5 배양배지에 치상한 다음 각각 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } , 23 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 및 \( 20 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 항온기에서 명배양하였다. 아울러 sucrose 농도의 영향을 조사하기 위하여 표면 살균된 종자를 \( 1 \mathrm { mgl } ^ { -1 }\) BA가 첨가된 B5 배양배지에 sucrose를 각각 \(0, 1, 3, 6, 9,\) 및 \(2\%\mathrm{(v/w)}\) 첨가하여 항온기에서 명배양하였다. 또한 haustorium 유도기능을 가지고 있는 phenolic compounds의 영향을 조사하기 위하여 ferulic acid, DMBQ(2,6-dimethoxybenzoquinone), syringic acid를 각각 \(0, 1, 10, 50\) 및 \( 100 \mu \mathrm { M } \) 첨가한 B5 배양배지에 치상하여 배양하였다. 각 처리구는 페트리디쉬당 20개의 종자를 치상하였으며 3개의 반복실험을 통해 4주 배양 후 치상한 종자로부터 haustorium이 발달한 종자수를 조사하여 생장조절제가 미치는 영향을 조사하였다.</p>