BS추출물은 \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 이하의 농도에서는 세포독성이 낮아 세포의 생존율에 영향을 주지 않아 BS추출물의 항염증효과가 세포의 염증성 매개물질의 생성억제가 아니라 BS추출물의 고유한 효과라는 점을 의미, BS추출물을 \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 이상의 농도처리군에서는 농도의존적으로 nitrite의 생성량이 감소되었고 \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 농도처리군에서는 통계학적으로 유의한 감소가 관찰,.BS 추출물로 처리한 실험군에서는 아무런 전처리를 하지 않은 세포의 \( 70.3, 32.2, 25.9 \% \)로 농도의존적인 감소를 나타내 \( 100,200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 BS처리군에서 유의성이 인정되었다.
<h1>결 과</h1> <h2>RAW 264.7세포에 대한 독성</h2> <p>마우스 대식세포인 RAW 264.7에 대한 약재의 세포독성을 알아보기 위하여 MTT assay 를 수행하였다. BS추출물을 농도별 \( (0, 50, 100, 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}) \)로 18시간 동안 처리한 결과, \( 100 \mu \mathrm{g} \) \( / \mathrm{ml} \)의 농도까지는 독성이 나타나지 않았지만, \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 농도에서는 세포의 생존율을 \( 10 \% \) 정도 감소시켰다. BS추출물은 \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 이하의 농도에서는 세포독성이 낮아 기본적으로 세포의 생존율에 영향을 주지 않는다는 사실을 알 수 있었다. 이러한 사실은 BS추출물의 항염증효과가 단순한 세포의 사멸에 의한 세포의 염증성 매개물질의 생성억제가 아니라 BS추출물의 고유한 효과라는 점을 의미한다.</p> <h2>NO, \(\mathrm{PGE}_{2}\), COX의 생성량에 미치는 영향</h2> <p>RAW 264.7 세포에 BS추출물을 전처리하고 LPS를 18시간동안 처리한 후 NO, \(\mathrm{PGE}_{2}\), COX의 생성량의 변화는 Fig. 2, 3, 4에 각각 나타내었다. LPS처리 후 NO의 생성량은 정상세포에 비하여 약 8배 이상 증가되었다. BS추출물을 \( 50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 농도로 처리한 군에서는 LPS로 증가된 nitrite의 생성량이 아무런 처치를 하지 않은 세포에 비하여 차이가 없었으나 \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 이상의 농도처리군에서는 농도의존적으로 nitrite의 생성량이 감소되었고 \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 농도처리군에서는 통계학적으로 유의한 감소가 관찰되었다. \( \mathrm{PGE}_{2} \)의 생성량은 LPS처리에 의하여 정상세포에 비하여 약 14배 이상 증가되었다. BS추출물을 \( 50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 농도로 처리한 군에서는 LPS로 증가된 \( \mathrm{PGE}_{2} \)의 생성량이 무처치 세포에 비하여 차이가 없었으나 \(100\) 및 \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 농도처리군에서는 농도의존적으로 유의하게 각각 \( 55.1 \%, 39.9 \% \) 감소되었다. COX의 생성량은 LPS처리에 의하여 정상세포에 비하여 약 \( 5.6 \) 배 증가되었다. BS추출물을 \( 50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 농도로 처리한 군에서는 LPS로 증가된 COX의 생성량이 무처치 세포에 비하여 유의한 차이가 없었으나 \(100\) 및 \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 농도처리군에서는 농도의존적으로 유의하게 각각 \( 62.5 \%, 52.1 \% \) 수준으로 감소되었다. 이 실험의 결과 BS추출물이 LPS로 유도된 NO, \(\mathrm{PGE}_{2}\), COX의 발현을 효과적으로 감소시키는 것으로 나타났다.</p> <h2>염증성 사이토카인 \( \mathrm{IL}-1\beta\), \( \mathrm{IL}-6\), TNF-\(\alpha \)의 생성량에 미치는 영향</h2> <p>RAW 264.7 세포에 \( 0, 50, 100, 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 BS추출물을 전처리하고 LPS를 18시간 동안 처리한 후 \( \mathrm{IL}-1 \beta, \mathrm{IL}-6\), TNF-\(\alpha \)의 생성량의 변화는 Fig. 5에 나타내었다. LPS처리 후 IL-13의 생성량은 정상세포에 비하여 약 \( 5.8 \) 배 이상 증가되었으며, 여러 농도 \( (50, 100, 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}) \)의 BS 추출물로 처리한 실험군에서는 각각 아무런 처치를 하지 않은 세포에 비하여 \( 49.2, 47.6, 39.2 \% \)로 농도의존적인 \( \mathrm{IL}-1\beta\) 생성량의 감소를 나타내었으며 모든 BS 처리군에서 통계학적 유의성이 인정되었다. LPS처리 후 \( \mathrm{IL}-6\)의 생성량은 겅상세포에 비하여 약 \( 5.3 \) 배 이상 증가되었으며, BS 추출물로 처리한 실험군에서는 아무런 전처리를 하지 않은 세포의 \( 70.3, 32.2, 25.9 \% \)로 전형적인 농도의존적인 감소를 나타내었으며, \( 100,200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 BS처리군에서 통계학적 유의성이 인정되었다. LPS처리 후 TNF-\(\alpha \)의 생성량은 정상대조군 세포의 \( 670 \% \) 이상 증가되었으며, BS추출물로 처리한 실험군에서는 전처리를 하지 않은 세포의 \(84.2, 38.6, 32.3 \% \)로 농도에 비례하여 감소되었으며, \( 100, 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 BS처리군에서는 통계학적 유의성이 인정되었다.</p>