Metalaxyl의 matrix-matched 표준용액과 chromatogram상의 \( \mathrm { s } / \mathrm { n } \) ratio가 3이상인 농도를 기기검출한계, 10이상인 농도를 기기정량한계로 설정하여, 농도를 분석 후 검량선을 작성하고 직선성을 확인하였고, 5가지의 d-SPE와 SPE- \( \mathrm { NH } _ { 2 } \) cartridge를 이용하여 백출, 우슬 각각의 matrix effect를 검토하였다.
<h2>HPLC-MS/MS 분석법 검증</h2> <p>Metalaxyl의 matrix-matched 표준용액 \( 0.001-0.05 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 를 HPLC-MS/MS 에 \( 2 \mu \mathrm { L } \) 씩 주입하여 chromatogram상의 \( \mathrm { s } / \mathrm { n } \) ratio가 \( 3 \) 이상인 농도를 기기검출한계(ILOD), \( 10 \)이상인 농도를 기기정량한계(ILOQ)로 설정하였다. 재현성을 확인하기 위해서 metalaxyl의 matrix-matched 표준용액 \( 0.001 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 를 반복으로 \( 7 \)번 분석하였다. \( 0.001-0.05 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 의 농도를 분석 후 검량선을 작성하고 직선성을 확인하였다.</p> <h2>정제 조건 검토</h2> <p>\( 5 \)가지의 d-SPE와 \( \mathrm { SPE } \) - \( \mathrm { NH } _ { 2 } \) cartridge를 각각 검토하였다. 먼저 \( 5 \)가지 각각의 d-SPE에 metalaxyl 표준용액 \( 0.1 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 를 \( 1 \mathrm { ~mL } \) 첨가하여 검토하였다. 정제시약으로 흡착제 PSA, C \( 18 \), GCB, Z-Sep이 들어가 있는 다양한 종류 및 조성에 따른 정제효율을 검토하였고 d-SPE tube 구분은 Table \( 1 \)과 같다. 다음으로 SPE- \( \mathrm { NH } _ { 2 } \) cartridge 검토는 acetone/n-hexane의 혼합조성을 이용하여 metalaxyl의 용출 정도를 확인하였다. Acetone/ \( n \)-hexane \(( 5/95, \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) \( 5 \mathrm { ~mL } \) 로 활성화한 후, metalaxyl 표준용액 \( 10 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 를 \( 1 \) \( \mathrm { mL } \) 질소농축 후 acetone/ \( n \)-hexane \( (5 / 95, \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) \( 5 \mathrm { ~mL } \) 로 재용해 된 용액을 카트리지에 첨가한 후 acetone/ \( n \)-hexane \( (5 / 95, \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 두 분획, acetone/ \( n \)-hexane \( (10 / 90, \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 두 분획을 각각 \( 5 \mathrm { ~mL } \)씩 용출시켜 검토 확인하였다. 또한, 보다 최적화된 분석법 확립을 위하여 회수율을 확보한 d-SPE와 \( \mathrm { SPE } - \mathrm { NH } _ { 2 } \) cartridge를 이용하여 백출, 우슬 각각의 matrix effect를 검토하였다. Matrix effect는 다음과 같이 산출하였다.</p>