silica gel plate \( (50 \times 50 \) \( \mathrm{mm} \) )로 \( \mathrm{CHCl}_{3} \) : ethyl formate : ethyl acetic acid : methanol \( (5: 2: 5: 0.5, \mathrm{v} / \mathrm{v} / \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 의 용매를 사용해서 용출액을 전개하고 \( 10 \% \) \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{SO}_{4} \) 를 분무하여 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \) 부근에서 발색시켰다. Melting point 및 \( [\alpha]^{D} \) 측정하는데 미량융점 측정장치를 이용하였으며, \( [\alpha]^{\mathrm{D}} \)는 polarimeter로 측정하였다. IR spectrum은 알칼리 정제법을 이용하였고 FAB-mass spectrum은 neg-ative ion FAB-mass spectrum을 이용하여 측정하였다. 분석시료를 감압, 건조하여 자동원소분석기를 통해 원소를 분석했으며 \( \mathrm{O} \)는 분자량을 기준으로 환산하였다.
<h2>Thin layer chromatography</h2> <p>Column에 의해 분리된 용출액을 silica gel plate \( (50 \times 50 \) \( \mathrm{mm} \) )로 \( \mathrm{CHCl}_{3} \) : ethyl formate : ethyl acetic acid : methanol \( (5: 2: 5: 0.5, \mathrm{v} / \mathrm{v} / \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 의 용매를 사용하여 전개한 다음 \( 10 \% \) \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{SO}_{4} \) 를 분무하여 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \) 부근에서 발색 시켰다.</p> <h2>Melting point 및 \( [\alpha]^{D} \) 측정</h2> <p>융해점은 시료 \( 1 \mathrm{mg} \) 을 취하여 미량융점 측정장치를 이용하여 측정하였으며, \( [\alpha]^{\mathrm{D}} \) 는 시료 \( 5 \mathrm{mg} \) 을 \( \mathrm{Me}_{2} \mathrm{O} \) 및 methanol에 용해하여 polarimeter에 의해 측정하였다.</p> <p>\( [a]^{\mathrm{D}}=\frac{100 \times \mathrm{A}}{\mathrm{B} \times \mathrm{L}}\left({ }^{0}\right) \)</p> <ul> <li>A : 선광각</li> <li>B : \(1 \mathrm{ml} \) 속에 함유된 시료양</li> <li>L : 측정 Cell의 크기</li></ul> <h2>Infrared spectrum (IR) 측정</h2> <p>IR spectrum은 할로겐화 알칼리 정제법을 이용하였다. 순수 분리된 시료 \( 1 \mathrm{mg} \) 을 KBr \( 100 \mathrm{mg} \) 분말과 잘 섞어 배합하고 압력을 가해 가압 정제를 만들어 측정하였다.</p> <h2>핵자기 공명 분광기(Nuclear Magnetic Resonance: NMR) spectrum 측정</h2> <p>\( { }^{1} \)H 및 \( { }^{13} \)C-NMR spectrum은 FT 방법(Pulse Fourier Transform method)을 이용하여 순수정제물 \( 10 \mathrm{mg} \) 을 측정 용매 \( \mathrm{CDCl}_{3}+\mathrm{DMSO}-\mathrm{D}_{6}-\mathrm{D}_{2} \mathrm{O} \) 에 \( 5 \sim 20 \% (\mathrm{w} / \mathrm{v}) \) 비율로 용해시키고 TMS (Tertamethylsilane: \( \left.\left(\mathrm{CH}_{3}\right)_{4} \mathrm{Si}\right) \) 를 기준 물질로 하여 H-NMR (\(300 \mathrm{MHz}\)), C-NMR (\(75 \mathrm{MHz}\))로 측정하였다.</p> <h2>FAB-mass spectrum 측정</h2> <p>고체시료 \( 1 \mathrm{mg} \) 을 감압상태 \( \left(10^{-4} \sim 10^{-6} \mathrm{mmHg}\right) \) 에서 neg-ative ion FAB-mass spectrum을 이용하여 화학적 분석법에 의해 측정하였다. 이 때 측정 용매로써는 thioglycerol을 사용하였으며, 측정 조건에서 emitter 전류는 \( 22 \sim 28 \mathrm{eV} \) 이며, 이온 원의 가속가압이 \( 6 \sim 7 \mathrm{kV}\)에서 질량분석을 하였다.</p> <h2>원소 분석</h2> <p>분석 시료 \( 1 \mathrm{mg} \) 을 취해 48 시간 감압, 건조하여 완전히 수분을 제거하고 자동원소분석기로 시료에 함유된 \( \mathrm{C} \) 및 \( \mathrm{H} \) 의 양을 분석하였으며, \( \mathrm{O} \) 는 분자량을 기준으로 계산치에 의해 환산하였다.</p>