중국 전통한약재의 간 기능 향상 성능을 실험하기 위해 대조군인 사염화탄소 처리 집단과 자보양영환 추출물을 투여한 실험군간의 MDA함량을 비교하고, P450과 같은 효소의 효소 활성도를 비교하였다. 비교 결과 자보양영환 추출물이 간 기능 개선에 영향을 준다는 결과를 얻었다.
<p>본 실험결과는 간 기능 향상효과가 있는 것으로 알려진 중국 전통한약재인 Fructus schisandrae, Swertia chirata 그리고 Teucrium stocksianum의 투여로 인해 증가된 이들 효소의 활성이 유의하게 감소된다고 보고한 결과와 일치함을 보여준다. 이상의 결과들에서 자보양영환 추출물이 사염화탄소 투여에 의해 증가된 혈청의 간기능 지표들(AST, ALT, ALP )의 활성을 현저히 감소시키는 결과를 볼 때 자보양영환 추출물은 사염화탄소에 의해 유도된 간세포 손상을 어느 정도 회복시키는 효과가 있음을 시사해준다. 간 독성 물질인 사염화탄소는 독성 중간대사산물인 trichloromethyl \( \left(\mathrm{CCl}_{3} \cdot\right) \), trichloromethyl peroxy \( \left(\mathrm{CCl}_{3} \mathrm{O}_{2} \cdot\right) \), 혹은 chlorine \( (\mathrm{Cl} \cdot) \)과 같은 free rad-ical을 형성하여 lipid peroxidation을 증가시킬 뿐만 아니라, cytochrome P450의 파괴로 인하여 liver microsomal cytochrome P450과 연관된 효소들이 급격히 감소되며 결국에는 liver necrosis를 유발한다. 따라서 위에서 얻어진 혈청의 간 기능 지표 효소들의 결과를 뒷받침하기 위하여 간 조직의 lipid peroxidation 및 이물질대사효소들의 활성을 측정하였다. 간 조직의 지질과산화 지표로 이용되는 thiobarbituric acid (TBA) 반응성 물질의 함량은 NADPH와 \( \mathrm{ADP}-\mathrm{Fe}^{2+} \)를 첨가하여 지질과산화 반응을 유도한 후 malondialdehyde (MDA) 생성량을 측정하였다. 정상군의 MDA 함량은 \( 10 \mathrm{~nmol} / \mathrm{mg} \) protein을 나타낸 반면 사염화탄소의 단독 투여군은 \( 14 \mathrm{~nmol} / \mathrm{mg} \) protein으로 정상군에 비해 유의한 증가를 나타내었다. 이는 사염화탄소가 체내에서 free radical을 형성하도록 유도하고 그로 인해 세포막의 불포화지방산을 산화시킴으로써 막 기능을 파괴하게 된다. 즉 사염화탄소 투여군의 간 microsome에서 지질 과산화 생성물이 중가되었다는 것을 암시해 준다. 반면 자보양영환 추출물을 투여한 JAE300, JAE600 및 JAE1200 실험군은 각각 11, 10, 그리고 \( 9 \mathrm{~nmol} / \mathrm{mg} \) protein으로 모든실험군들이 사염화탄소를 투여한 대조군에 비해 유의한 감소를 나타내면서 정상군과 유사한 수준으로 회복시킴을 관찰하였다. 사염화탄소는 지질과산화의 지표인 MDA수준을 증가시키며 반면 간 기능 회복효과가 있는 Schisandra chinensis의 추출물이나 \( \alpha \)-tocopherol을 처리한 경우 증가된 MDA 수준을 감소시키는 것을 보여주었으며, 이는 JAE가 사염화탄소로 유도되는 MDA 수준을 감소시키는 본 실험결과와 일치함을 보여주었다. 본 연구에서 자보양영환 추출물을 투여한 경우 지질과산화물 생성을 억제하는 것은 자보양영환의 약재 조성물 중 항산화 활성이 높은 인삼 및 백작약과 산수유 등이 포함되어 있으므로 이들의 항산화 작용으로 간 조직의 산화적 손상이 방지되는 것으로 사료된다. 간 독성물질인 사염화탄소는 lipid peroxidation 및 liver necrosis롤 우발하며 cytochrome P450 및 그와 연관된 효소의 파괴로 효소 활성도가 현저히 감소되는테, 본 연구 결과에서도 사염화탄소의 단독투여군의 cytochrome P450과 P450 reductase는 \( 0.51 \mathrm{~nmole} / \mathrm{mg} \)protein 및 \( 24 \mathrm{~nmole} / \mathrm{min} / \mathrm{mg} \) protein으로 정상군 \( 0.79 \mathrm{~nmole} / \mathrm{mg} \)protein 및 \( 42 \mathrm{~nmole} / \mathrm{min} / \mathrm{mg} \) protein)에 비해 유의한 감소가 확인되었다. 반면 자보양영환 추출물을 투여한 실험군들에서는 두 가지 효소 값이 \( 0.62 \sim 0.65 \mathrm{~nmole/} \)\( \mathrm{mg} \) protein 및 \( 37 \sim 45 \mathrm{~nmole} / \mathrm{min} / \mathrm{mg} \) protein 내외로 대조군에 비해 모두 유의한 증가를 나타내었으나 정상군의수준으로 회복되지는 않았다. 이외에도 수컷 wis-tar rat에서 \( \mathrm{CCl}_{4} \)를 투여한 경우 cytochrome P450 및 \( \mathrm{b}_{5} \)가 모두 감소되었으나 eugenol을 처리한 경우 이들 phase I component의 감소를 유의하게 억제하였고 \( \mathrm{CCl}_{4} \)에 의해 유도된 microsomal lipid에 대한 손상 및 TBARS의 축적에 의한 peroxidative damage에 대해 보호효과를 나타낸 연구결과가 있다. 또한 송악(Hedera rhombea) 추출물의 투여시 사염화탄소의 독성으로 감소되었던 cytochrome P450의 7-ethoxyresorufin-O-deethylation (EROD) 및 7-benzyl-oxyresorufin-O-dealkylation (BROD) 활성이 회복됨을 보고한 바 있다. 이러한 연구결과와 마찬가지로 본 실험에서도 자보양영환 추출물의 투여는 해독작용에 관여하는 이 물질대사효소의 활성을 증가시켜 간 보호 효과를 나타내는 것으로 사료된다.</p> <p>이상의 결과를 종합해 볼 때 자보양영환의 물 추출물은 항산화 효과가 탁월하므로 이물질대사효소(cytochrome P450 및 P450 reductase)의 수준을 정상적인 수준으로 회복시키는 동시에 free radical의 소거작용으로 지질과산화물 생성을 억제하여 간 보호효과를 나타내는 것으로 판단된다. 또한 본 연구에서 사용된 투여농도들 중에 자보양영환의 물 추출물 \( 300 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 투여는 간기능 지표효소들의 회복정도가 미약한 반면 600 및 \( 1200 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 의 투여한 경우 정상적인 수준으로 회복되므로 자보양영환의 물 추출물은 600\( 1200 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 의 처리농도가 손상된 간 기능의 회복에 가장 좋은 것으로 판단된다.</p>