BT군은 인산삼칼슘으로 구성된 치과용 골이식재로 상용화된 제품(Syncera \( { }^{\circledR} \), 오스코텍, 한국)으로 입자의 직경이 0.4-1.0 mm인 구형의 분말형태를 연구에 활용되었습니다. 조직학적 분석을 위해 골이식 8주 후 모든 실험군을 안락사시키고 주변 조직을 포함한 관심 부위를 채취하였다. 그 후 채취한 검체를 \( 10 \% \) 중성 포르말린 용액에 48시간 동안 담갔다. 또한 각 표본은 포름산-구연산 나트륨 방법을 사용하여 탈염을 거쳤으며 이후 이식 부위의 중앙 영역을 중심으로 배향되었습니다. 두께 \( 3 \mathrm{~mm} \)의 총 5개의 연속된 절편을 조심스럽게 추출하고 물로 세척한 다음 조직 처리기를 사용하여 파라핀에 포매 처리하여 블록을 생성했습니다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>실험동물</h2> <p>실험에 사용된 동물은 24주령의 Sprageu-Dawley계 랫드 30마리로 4주령을 (주)샘타코 바이오 코리아에서 구입하여 임계결손군(CD군, \( \mathrm{n}=10) \), 베타 삼인산칼슘 이식군(BT군, \( \mathrm{n}=10) \) 및 돼지 해면질골 이식군(PCB군, \( \mathrm{n}=10) \) 으로 분류하였으며, 실험동물은 온도 \( 23 \pm 3^{\circ} \mathrm{C} \) 와 습도 \( 50 \pm 10 \% \) 의 조건하에서 사료와 음수를 자유급식하며 20 주간 사육되었다. 동물의 사육과 실험은 전남대학교 동물실험 지침에 따라 수행되었다.</p> <h2>골이식재</h2> <p>BT군은 삼인산칼슘을 소재로 제작된 물질로 현재 치과용 골이식재로 상용화된 제품(Syncera \( { }^{\circledR} \), 오스코텍, 한국)으로 입자의 직경이 0.4-1.0 mm인 구형의 분말형태를 사용하였다. 그리고 PCB군의 골이식재는 돼지의 해면질골을 처리하여 제작된 생체세라믹 물질(TS-GBB \( { }^{\mathbb{R}} \), 태산솔루젼스, 한국)을 사용하였다.</p> <h2>골결손모델의 수술</h2> <p>Ketamine \( \mathrm{HCl} \) (케타민50주 \( { }^{\circledR} \), 유한양행, 한국) \( 40 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 과 xylazine (Rompun \( { }^{\mathbb{R}} \), 한국바이엘, 한국) \( 10 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 을 합제하여 복강내 주사하여 마취를 실시하였고 마취 후 atropine sul- fate (황산아트로핀 \( { }^{\mathbb{R}} \), 휴온스, 한국) \( 0.05 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 을 피하주사로, enrofloxacin (바이트릴 50 주 \( { }^{\circledR} \), 한국바이엘, 한국) \( 2.5 \) \( \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 을 예방적 차원에서 근육 주사하였다. 두개결손부를 형성하기 위하여 직경 \( 8 \mathrm{~mm} \) 크기의 bone trephine bur를 수술용 모터(Surgic XT Plus, Shanghai NSK international trading INC, Japan)에 연결하여 두개부 중앙에 전층 결손부를 형성하였다.</p> <p>CD군에는 이식재의 사용 없이 결손부 상방의 골막을 당겨 흡수성 봉합사(3-0 SURGISORB \( { }^{\mathbb{R}} \), Samyang Co., LTD, Korea)를 이용하여 연속봉합법으로 봉합하였다. PCB군에는 TS-GBB \( { }^{\circledR} \) 블록을 ronguer로 최대한 균일한 크기로 잘게 부수어 두개골 결손부에 이식하였고, BT군에는 Syncera \( { }^{\mathbb{R}} \) 구형의 분말형태를 두개골 결손부에 이식하였으며 이식 후 두 군 모두 골막을 단순결절봉합 하였다. PCB 및 BT군 모두 골이식 시 피브린글루(Greenplast \( { }^{R} \), 녹십자, 한국)를 사용하여 지혈의 효과를 얻음과 동시에 골이식재가 이식부위에서 다른 부위로 흩어지는 것을 방지해 주었다. 마지막으로 모든 군의 피부는 비흡수성 봉합사(3-0 black silk, AILEE CO., LTD, Korea)를 이용하여 단순결절 봉합법으로 봉합한 후 술부를 소독하였다.</p> <h2>평가방법</h2> <h3>방사선학적 평가</h3> <p>골이식 후 4 주와 6주에는 모든 실험군의 랫드를 주사마취 후에 치과용 방사선 장비(Port-X, 제노레이, 한국)와 오랄 센서(Digi-X Sensor, 한진디지엑스, 한국)를 이용하여 \( 70 \mathrm{kVp}, 0.15 \) \( \mathrm{mAs} \) 조건에서 촬영하였고, 8 주차에는 모든 실험군을 희생시킨 후 가검물을 채취하여 이전과 동일한 조건으로 방사선촬영을 실시하였다. 영상분석은 TINA 2.10e. 이미지 소프트웨어(Raytest, Straubenhardt, Germany)를 이용하여 흡광도 (Optical density)를 측정하여 골밀도를 평가하였다.</p> <h2>Micro-CT 평가</h2> <p>골이식 후 8 주차에 모든 실험군을 희생시켜 Micro-CT(skyscan 1172 Desktop X-ray Microtomograph, Skyscan, Belgium)를 이용하여 \( 50 \mathrm{kV}, 200 \mu \mathrm{A} \) 의 조건으로 스캔한 후에 NRecon Ver.1.4.4 (Skyscan, Belgium)를 이용하여 이미지화시켜 각 실험군의 결손부의 단면 영상을 추출하여 평가하였다.</p> <h3>조직병리학적 평가</h3> <p>조직검사를 위하여 골이식 후 8 주차에 모든 실험군을 희생한 후 주위조직을 포함하여 결손부를 채취하고 \( 10 \% \) 중성 포르말린 용액에 2일간 고정하였다. 각각의 표본은 포름산-구연산 나트륨 방법으로 탈회를 시행한 후 이식부의 중앙부를 중심으로 \( 3 \mathrm{~mm} \) 두께의 절편 5군데를 연속적으로 뽑아내어 수세한 후 조직 가공기를 이용하여 파라핀으로 포매한 후 블록을 만들었다. 이 블록을 유합체와 평행하게 종단으로 다공체와 골조직이 포함되도록 4-5\( \mu \mathrm{m} \) 두께로 조직절편을 만들어 Hematoxylin-Eosin 염색을 실시하여 광학현미경을 통하여 이식부위의 염증세포 침윤, 신생모세혈관 증식, 섬유화, 파골 및 골모세포의 활성, 신생골 형성 및 골 성숙정도를 평가하였다.</p> <h3>통계 처리</h3> <p>통계적인 분석은 one-way ANOVA (SPSS version \( 14.0 \mathrm{~K} \) )를 사용하여 실시하였고, CD, BT 및 PCB군에서의 골형성정도를 시기별로 비교하기 위해 Bonferroni 검정법을 이용하여 분석하였다. 통계적 분석은 유의차 수준 \( 0.05 \) 에서 결과에 대한 가설 검정을 실시하였다.</p>