36개의 한약재 추출물과 발효 한약재 추출물을 대상으로 인간 적혈구 용혈활성을 평가한 결과, 50\(\mu\mathrm{g}/\mathrm{ml}\) 농도에서 10% 이상의 용혈현상을 나타낸 한약재는 감국(11%)과 견우자(67%) 2종이었고, 150\(\mu\mathrm{g}/\mathrm{ml}\) 농도에서 12종의 한약재가 20% 이상의 용혈활성을 나타냈으며, 특히 백과, 신이 및 견우자 추출물은 각각 80.8%, 93.4%, 99.4%의 강력한 용혈활성을 보였다. 반면 발효에 사용된 장수상황버섯 균사체 추출물은 50\(\mu\mathrm{g}/\mathrm{ml}\) 농도에서 3.56%의 용혈활성을 나타냈다.
<h2>한약재 추출물 및 발효 한약재 추출물의 인간 적혈구 용혈활성</h2> <p>36 종 한약재 추출물과 발효 한약재 추출물을 대상으로 인간 적혈구에 대한 용혈활성을 평가하였다. 먼저 \( 50 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 농도에서 \( 10 \% \) 이상의 용혈을 나타낸 한약재는 감국 \( (11 \%) \)과 견우자 \( (67 \%) \) 2종이었으며, 발효 한약재중에는 골쇄보에서 \( 11 \% \) 의 용혈현상을 나타내었다(result not shown). 그러나 \( 150 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 농도에서는 12 종의 한약재가 \( 20 \% \) 이상의 용혈활성을 나타내었으며, 특히 백과, 신이 및 견우자 추출물은 각각 \( 80.8,93.4 \) 및 \( 99.4 \% \) 의 강력한 용혈활성을 보였다. 한편, 발효에 이용된 장수상황버섯 균사체 추출물은 \( 150 \mathrm {\mu g } / \mathrm { ml } \) 농도에서 \( 3.56 \% \) 의 무시할 만한 용혈활성을 나타내었음에도 불구하고, 고체발효 한약재의 경우에는 거의 모든 한약재에서 용혈활성이 증가되었다. 발효에 의해 용혈활성이 감소된 경우는 백렴, 삼칠, 행인 및 괄루근의 4 종이었다. 일반적으로 한약재의 경우 찌거나 발효에 의해 saponin성분들이 증가되고, 이에 따라 항암활성 및 용혈활성이 증가됨을 고려할 때, 이러한 결과는 한약재의 고체발효 동안 사포닌 성분의 급격한 증가 때문에 나타나는 현상으로 이해되며, 향후 관련성분의 탐색이 필요하다. 따라서 한약재 고체발효과정을 통해 한약재의 다양한 성분 변화와 이에 따른 생리활성의 변화가 나타남을 확인하였으며, 본 실험에서는 고체발효에 의해 대장암세포 성장억제능이 의미있게 증가된 골쇄보, 구기자 및 패모를 대상으로 항암활성 및 정상세포에 대한 독성정도를 추가적으로 조사하였다.</p> <h2>고체발효 골쇄보, 구기자, 패모의 정상세포 및 대장암세포 생육억제 활성</h2> <p>HCT116 대장암세포에 대한 골쇄보, 구기자 및 패모 추출물의 농도별 생육억제능을 평가하였으며, 그 결과 \( 50 \% \) 생육억제능을 나타내는 \( \mathrm { IC } _ { 50 } \)는 각각 394, 917 및 \( 149 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 로 계산되었다. 그러나 고체 발효시킨 골쇄보, 구기자 및 패모 추출물의 경우에는 각각 28, 85 및 \( 80 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 의 \( \mathrm { IC } _ { 50 } \) 를 나타내었다. 이는 골쇄보, 구기자 및 패모의 고체발효 과정 중 암세포 성장억제 활성물질이 생산되었음을 의미하며, 발효 골쇄보가 가장 강력한 암세포 성장억제능을 가짐을 알 수 있었다. 반면 인간 및 마우스 유래의 정상세포 HEK-293, 3T3-L1 및 MC3T3-E1에 대해 골쇄보, 구기자 및 패모 추출물을 처리한 경우 \( 200 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 농도까지 세포독성은 나타나지 않았으며, 오히려 \( 200 \mathrm {\mu g } / \mathrm { ml } \) 의 고농도에서는 이들 세포들의 성장을 촉진하는 것으로 나타났다. 또한 고체발효한 골쇄보, 구기자 및 패모 추출물 역시 정상세포들에 대해 심각한 세포독성을 나타내지 않았으며, 골쇄보 \( (200 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ) \) 의 경우 HEK-293 세포에서 35 \%, 구기자 \( (200 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ) \) 의 경우 MC3T3-E1세포에서 \(30 \% \)의 세포성장 억제를 나타내었다. 그러나 대장암 세포에 대한 발효 골쇄보 및 구기자의 \( \mathrm { IC } _ { 50 } \) 가 \(28 \) 및 \( 85 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)임을 고려할 때(Table 3), \( 100 \sim 200 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 처리농도 범위에서는 정상세포에 대한 세포독성은 미미하여 대장암세포에 우선적으로 세포독성을 나타낼 것으로 예상된다.</p>