20주령의 암컷 Sprague-Dewley 흰쥐를 대상으로 4주간 고지방 식이를 적용하여 고지혈증을 유발시킨 실험을 수행하였다. 각 실험 군은 8마리로 구성되었고, 식이는 매일 오후 4시에 일괄적으로 제공되었다. 또한, 식이 섭취량의 오차를 최소화하기 위해 급여량을 기록하고 손실량을 보정하였다. 실험 종료일에는 실험동물을 마취시킨 후 심장에서 채혈을 진행하였다.
<h2>실험동물의 식이 및 사육</h2> <p>실험동물은 부산 신라대학교 마린바이오 센터 사육실에서 사육한 생후 20주령(평균체중: \( 261.7 \mathrm { ~g } \) )의 Sprague-Dewley 계 암컷 흰쥐를 4주간 고지방 식이(대조식이: \( 5 \% \) 돈지, \( 5 \% \) 옥수수유, \( 0.1 \% \) 콜레스테롤)로 고지혈증을 유발 시킨 후 평균체중 \( 289.3 \pm 30.2 \mathrm { ~g } \) 의 동물을 한 군에 8마리씩 3군으로 나뉘었다. 실험 식이의 조성은 Table 1과 같다.</p> <p>실험군은 대조군(고지방 식이), 일반 청국장군(고지방식이에 청국장 첨가군) 및 상황버섯 청국장군(고지방식이에 상황버섯 청국장 첨가군)등 3군으로 나누어 해당식이로 4주간 사육을 하였다. 동물 사육실의 사육 조건은 온도 \( 22 \pm 2 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 습도 \( 50 \sim 60 \% \) 로 유지시키고, 명암은 12시간(07:00 19:00)을 광주기로 자동 조절하였으며 물과 사료는 자유 급식을 하였다.</p> <h2>식이 섭취량, 식이 효율 및 체중 증가</h2> <p>실험기간 동안 식이는 매일 오후 4시에 일괄적으로 급여를 하였으며 식이 섭취량의 오차를 최소화 하고자 손실량을 측정하여 보정하였으며 급여량을 기록하여 같은 기간 동안에 섭취한 식이량으로 나누어 산출 하였다. 식이효율은 아래와 같이 계산하였다.</p> <p>식이효율(Food efficiency ratio: FER) = 체중증가량 \( ( \mathrm { g } ) / \) 식이 섭취량 \( ( \mathrm { g } ) \times 100 \)</p> <h2>시료 채취 및 분석</h2> <p>4주간 실험 종료일에는 16시간 절식시킨 실험동물을 ethyl ether로 마취시킨 다음 심장에서 채혈을 하였다. 채혈한 혈액은 실온에서 30분간 응고 시킨 후, \(3,000 \mathrm { rpm } \)에서 20분간 원심분리한 혈청을 분석 시료로 사용하였으며 장기는 개복 후 즉시 때어 생리식염수로 혈액을 씻은 다음 무게를 측정하였다. 변의 수집은 실험종료 전 4일간 변을 모아서 이물질을 제거한 후 무게를 측정한 뒤 2시간 건조하여 분석시료로 사용하였다.</p> <p>혈청의 중성지질, 인지질, 총 콜레스테롤 및 HDL-콜레스테롤은 자동 생화학 분석기(Autohumalyzer 900S, Germany)로 측정하였고, LDL-콜레스테롤 농도는 (Polymedco NY) kit 시약으로 측정하였다. 동맥경화지수(atherogenic index: AI는 Haglund 등의 방법에 따라서 AI=(Total cholesterol - L-cholesterol)/HDL-cholesterol 식으로 계산하였으며 혈액의 hemoglobin은 cyanmethemoglobin 법[7]으로 추출하여 지질 측정용으로 사용하였다. 간조직과 변의 총지질은 Phospho-vanillin 법, 간조직의 중성지질과 총 콜레스테롤 농도는 Kittldir (ASAN PHARM: 체외진단 키트시약 회사)으로 측정하였다.</p>