항생제 내성 미생물의 증가에 따라 probiotic biocontrol agent로서 비병원성 세균(유산균, Pseudomonas 등) 을 이용하여 어병균에 길항 작용을 하는 미생물을 사용하여 어병균을 제어하자는 대안을 제시하였고, 본 연구에서는 fish probiotic bacteria를 탐색하고자 하였고, 환경 친화적인 방법개발의 하나로 해양 미생물 군집 중에서 어병 균의 길항작용을 하는 미생물을 찾고자 시도한 결과 여러 종의 미생물군집들 중에서 한 종류만을 찾을 수 있었다. 여러 종의 해산어를 대상으로 아가미, 장, 표피 등에서 분리한 결과, 방어의 장내에서 추출된 B. amyloliquefaciens H41이 V. anguillarum NCMB1에 저해능을 나타내었으나 다른 균주인 B. amyloliquefaciens KCTC1724는 저해능이 나타내지 않아 균마다 감수성이 다르다. 이에 본 연구에서는 병원성이 있는 대표적인 균에만 저해능을 검토하였으나 다양한 해양 균들을 대상으로 시험해 볼 필요가 있음을 확인했다.
<h1>고 찰</h1><p>어류 양식 산업에서의 질병발생은 세계적으로, 지리적으로도 많은 차이를 나타내고 있으며 항생제 사용에 따른 비용이나 관리 등이 매우 심각한 현실이다. 이미 백신이 개발되고 상용화 되고 있으나 모든 어류의 질병을 통제하지는 못한다. 더구나 치어의 경우 만족할만한 면역효과를 얻을 수 없을 뿐만 아니라 반드시 백신에 반응한다고도 할 수 없는 실정이다. 지속적인 항생물질이나 화학요법제의 경우 그 방법의 선택이 중요하며 주사에 의한 백신은 대량 사육 어류나 작은 어류의 경우 비실용적이라는 점이 지적되었으며 항생제 다량 사용이 내성균을 생성하게 되어 그 심각성은 인체에까지도 전이 된다는 점이다. Gram은 항생제 내성 미생물의 증가에 따른 문제점을 해결할 수 있는 방법으로 pro-biotic biocontrol agent로서 비병원성 세균, 이를테면 유산균을 사용하는 방법이라든지 Pseudomonas등을 이용하여 어병균에 길항 작용을 하는 미생물을 사용하여 어병균을 제어하자는 대안을 제시하였다. 또한, 이러한 목적을 달성하기 위하여 fish probiotic bacteria 를 탐색하는데 관심을 높이게 만들었다.</p><p>Vibrio anguillarum 은 세계적으로 자연산이나 양식 어류의 패혈을 일으키는 주요 어병균이다. 따라서 이를 구제하기 위한 다각적인 시도도 이루어지고 있는 실정이다. 최근에는 육지 양식어류 질병을 자외선을 이용하여 물고기의 질병을 일으키는 기생충과, 곰팡이, 세균, 바이러스 등을 죽이는데 상당한 효과를 본 것으로 보고되었으며 오존을 이용한 살균소독법도 이용 가능하다.</p><p>본 과정에서는 환경 친화적인 방법개발의 하나로 해양 미생물 군집 중에서 어병 균의 길항작용을 하는 미생물을 찾고자 시도한 결과 여러 종의 미생물군집들 중에서 한 종류만을 찾을 수 있었다. 이미 살아있는 어류의 여러 부위에 많은 종류의 미생물이 분포되고 있음이 입증되었으므로 본 과정에서도 여러 종류의 해산어를 대상으로 아가미, 장, 표피 등에서 분리를 시도한 결과 방어의 장내에서 추출된 가검물의 배양과정에서 B. amyloliquefaciens H41를 분리할 수 있었는데 분리에 사용한 어류는 자연산이었다. 이 분리 균만이 V. anguillarum의 생육에 영향을 미치는 것을 확인 할 수 있었는데 이러한 성과로 볼 때 자연산 어류의 부착세균 군집 중에서 어병 균의 biocontrol에 이용할 수 있는 균주의 탐색이 가능할 것으로 보였다.</p><p>본 과정에서 저해능에 대한 감수성 비교를 위하여 분리균과 표준균주를 동시에 시험한 결과 분리균주는 V. anguillarum NCMB1에 저해능을 나타내었으나 B. amyloliquefaciens KCTC1724 균주는 저해능을 나타내지 않아 균마다 감수성에 대한 차이를 볼 수 있었으며 이 결과는 앞으로도 다양한 균종의 분리를 요구하는 부분이기도 하다.</p><p>Westerdahl은 어류의 여러 부위를 달리하여 어병균 억제 균의 분포를 관찰하였는데 어류의 위, 위 유문부, 십이지장, 공장, 직장 등에 분포된 균총 중에서 저해 균들의 분리를 보고하였는데 각각의 부위에서는 분리된 균수가 달랐으며 특히 십이지장에서 많은 균의 분리 결과를 발표하였다. 이 같은 보고를 볼 때 어류의 장이 어병균 생육 억제 균의 분리에 도움이 될 것으로 판단되어졌으나 본 과정에서는 내장의 부위를 구분하지 않아 정확하게 어떤 부위라고 판단 할 수는 없었다. 앞으로는 부위별로 분리를 시도하면 좋은 결과를 얻을 수 있을 것으로 기대되며 다양한 어종을 대상으로 분리를 시도하면 다른 어병 균에 저해를 나타내는 균의 분리도 가능 할 것으로 생각되었다.</p><p>해양 세균 중에는 여러 균이 있으나 본 과정에서는 병원성이 알려져 있는 대표적인 균에만 저해능을 검토하였으나 다양한 해양 균들을 대상으로 시험해 볼 필요가 있는 것으로 사료되며 이미 보고 된 자료에서 해양 미생물들 간의 길항사례를 제시하였으며 특히 본 균이 어류의 장에서 분리되었으므로 양식 어류의 여러 병원체의 biocontrol 면에서 지속적인 균의 분리를 시도한다면 의외로 좋은 결과를 얻을 수 있을 것으로 판단된다. Gram 등이 해산어의 정상 균총 중에서 길항작용을 하는 biocontrol 목적을 위한 가능성을 제시하였으며 본 과정에서도 시판중인 해산어를 중심으로 분리를 시도한 결과 본 분리균을 분리 할 수 있었는데 지속적인 분리를 통하여 다양한 균종의 분리를 시도해 볼 필요가 있다고 사료된다. 앞으로 본 균에 의한 생육저해 물질을 정제 과정 등을 통하여 물리화학적 성상 및 특성 등을 밝혀 볼 예정으로 이는 다음 과정에서 밝힐 예정이다.</p>