건조 인삼의 동체를 조분쇄해 볼밀을 이용해 미세분말로 갈았다. 분리 화합물의 정량분석을 위해 UPLC가 부착된 3200 QTRAP LC,MS,MS system을 이용했고, 칼럼은 ACQUITY BEH C18을 사용했다. 칼럼유속은 \( 0.5 \mathrm { ~mL } / \mathrm { min } \)이고, 주입량은 \( 5 \mu \mathrm { L } \) 이다. 최적화된 질량분석은 MRM mode 분석법을 이용해 분리된 물질의 선구이온을 선택하고 선택된 선구이온에 대해 생성이온을 분석하고 정량분석에 적용했다.
<h3>UPLC-ESI-MS/MS 분석</h3> <p>건조된 인삼의 동체를 조분쇄하여, 볼밀(Retsch MM400 mixer mill, Haan, Germany)을 이용-하여 미세분말로 갈았다. \( 2 \mathrm { ~mL } \) 튜브에 인삼분말 \( 100 \mathrm { mg } \) 에 \( 80 \% \mathrm { MeOH } (1 \mathrm { ~mL } ) \) 을 넣고 초음파 추출기(Bransonic 3510R-DTH, Branson Ultrasonics Co., Danbury, \( \mathrm { CT } \), USA)를 이용하여 \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 분간 추출을 진행하였다. 원심분리기(HITACHI koki Co. Ltd. Tokyo, Japan)를 이용하여 \( 13,500 \times \mathrm { g } \) 으로 5 분간 원심분리 하였다. 상등액 ( \( 1 \mathrm { ~mL } \)) 을 취하여 감압 회전식 증발기(Eyela NVC-2100, Tokyo, Japan)를 이용하여 용매를 제거하였다. 얻어진 추출물을 \( \mathrm { MeOH } (1 \mathrm { ~mL } ) \) 에 녹인 뒤, \( 0.2 \mu \mathrm { m } \) 필터(Chromdisc Co., Daegu, Korea)로 여과하여 기기분석에 사용하였다. 분리된 화합물의 정량분석을 위하여, UPLC가 부착된 3200 QTRAP LC/MS/MS system을 사용하였으며, 컬럼은 ACQUITY BEH C18 \( (2.1 \mathrm { ~mm } \times 100 \mathrm { ~mm } , 1.7 \mu \mathrm { m } ) \) 을 사용하였다. 컬럼의 오븐 온도는 \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 로 설정하였으며 이동상 용매 시스템은 \( 0.1 \% \) formic acid 수용액 (A)와 MeCN (B)로 이루어졌으며 이동상은 위의 조건과 같은 조건으로 진행하였다. 컬럼 유속은 \( 0.5 \mathrm { ~mL } / \mathrm { min } \) 이며, 주입량은 \( 5 \mu \mathrm { L } \) 이였다. 최적화된 질량분석은 Negative ion mode에서의 Multiple Reaction Monitoring (MRM mode)의 분석법을 이용하여 분리된 물질의 선구이온(precursor ion)을 선택 후, 선택된 선구이온에 대하여 충돌 에너지를 적용하고 생성이온(product ion)을 분석하여 정랑분석에 적용하였다. 분석 시에 사용된 기기의 중요 parameter 값은 Table 2과 같다. 장비 분석 및 데이터 수집에는 BioAnalyst \( { } ^ {\mathrm { TM } } \) (Ver.1.4.2, AB SCIEX) 프로그램을 사용하였다.</p>