MPTP는 \( 10 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 를 6일간 복강주사하고 selenium yeast는 \( 4 \% \) Tween 80 에 현탁하여 10 일간 경구투여 한 23-28 g의 4주된 ICR계 수컷 mouse를 사용하였다. 전봉위에 올려놓고 sample을 투여하면서 4 분 이상 낙하하지 않는 경우를 작용 없음이라고 판정하였다. 실험동물에서 뇌를 적출하여 대뇌, 흑색질로 분리하여 mitochondria ,TBARS, cytosol 분획을 분리한 다음 함량을 측정하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>시료제조</h2> <p>MPTP는 Sigma사에서 구입하였으며 selenium은 selenium yeast \( (540 \mu \mathrm{g} / \mathrm{g}) \) 를 (주)대우약품에서 공급받아 사용하였다.</p> <h2>실험동물 및 실험설계</h2> <p>실험동물은 대한 BioLink(충북음성)로부터 분양받은 체중 22- \( 25 \mathrm{~g} \) 의 ICR계 mouse를 본 대학 동물사에서 일정한 조건(온도 : \( 22 \pm 1^{\circ} \mathrm{C} \), 습도 : \( 55 \pm 3 \% \), 명암 : 12시간 light/dark cycle)으로 1주 동안 고형 사료로 적응시킨 후 사용하였다. MPTP는 \( 10 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 를 6일간 복강주사하고 3 일간 질병 유발 기간을 주었으며 selenium yeast는 \( 4 \% \) Tween 80 에 현탁(25, \( 50,100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{kg}) \) 하여 10 일간 경구투여 하였으며 투여 마지막 날 12 시간동안 사료를 제거하고 물만 섭취케 하였다.</p> <h2>중추신경계에 미치는 영향 - 운동기능에 미치는 영향</h2> <p>회전봉법 - MPTP를 \( 10 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 을 6일간 복강 주사하고 selenium yeast를 용량별로 10 일간 경구투여하며 \( 1,3,6 \), 9일째 실험한다. 체중 23-28 g의 4주된 ICR계 수컷 mouse를 사용하여 전봉(직경 \( 3 \mathrm{~cm} \), 매분 6회전)위에 올려놓고 2 분 이상 떨어지지 않는 동물을 골라 1 군 5 마리고 하여 실험하였으며 sample을 투여하면서 4 분 이상 낙하하지 않는 경우를 작용 없음이라고 판정하였다.</p> <h2>Monoamine oxidase 활성에 미치는 영향</h2> <p>체혈을 마친 실험동물에서 뇌를 적출하여 대뇌, 흑색질로 분리하여 mitochondria 분획을 분리한 다음 monoamine oxidase A (MAO-A)의 함량은 Welyer와 Salach의 방법, monoamine oxidase B (MAO-B)의 함량은 Kalaria 등의 방법에 준하였다.</p> <h2>지질과산화 함량에 미치는 영향</h2> <p>\( \mathrm{CO}_{2} \) gas로 치사시킨 쥐의 혈액을 대동맥으로부터 취하여 \( 3,000 \mathrm{rpm} \) 에서 15 분간 원심분리하여 헐액 중의 thiobarbituric</p> <p>acid reactive substances (TBARS)의 함량측정은 Suenatsu 등의 방법으로, 적츨한 뇌를 대뇌 흑색질로 분리한 다음 뇌 조직에서 TBARS의 함량측정은 Ohkawa 등의 방법에 준하였다.</p> <h2>뇌조직 중 항산화 효소계에 미치는 영향</h2> <p>체혈을 마친 실험동물에서 뇌를 적출하여 대뇌, 흑색질로 분리하여 cytosol 분획을 분리한 다음 glutathione reductase(GR)의 햠량은 Mize와 Langdon 의 방법, superoxide dismutase (SOD)의 활성은 \( \mathrm{GaO} \) 등의 방법 [, catalase의 활성은 Aebi의 방법, glutathione peroxidase의 활성은 Paglia와 Valentine의 방법에 준하였다.</p> <h2>단백질 정량 및 통계 처리</h2> <p>단백질의 정량은 bovine serum albumin (Sigma Fr.IV)을 표준품으로 하여 Lowry 등의 방법에 따라 측정하였으며 실험결과는 평균치±표준편차로 표시하였고 통계적 유의성은 Duncan's new multiple range test를 이용하였다. P값이 \( 5 \% \) 미만일 때 통계적으로 유의성이 있다고 판정하였다.</p>