RT-PCR로 DADLE 처리 한 U937 암세포주의 세포 주기 변화를 관찰한 결과, 세포 주기를 조절하는 cdk2, cdk4가 DADLE 처리 농도에 따라 감소했고 p27과 p16 유전자 발현도 감소하였다. 이는 cell cycle arrest와 연관된 것으로 생각된다. 세포 주기 중 G1기, G2, M기가 억제되는 것으로 보아 세포 수명에도 영향을 줄 것으로 보인다. DADLE 같은 동면유발물질에 대한 연구를 수행하여 세포 주기 억제를 통한 life-time 증가 등 다양한 기술 개발을 시도할 수 있다.
<h2>DADLE 의 처리와 세포 주기의 연관성</h2><p>DADLE의 처리에 의해 U937 암세포주에서의 세포 주기 변화를 더욱 자세히 알아보고자 RT-PCR에 의해 세포 주기와 관련된 여러 유전자들의 발현을 알아보았다. 세포주기의 조절인자는 크게 cyclin과 cdk가 알려겨 있으며, cyclin은 각각의 세포주기 조절 단백질이며 cdk는 각각의 세포주기의 cyclin과 결합하여 다양한 조합을 만들어서 각 세포주기 단계를 조절한다. Cyclin은 A, B, C, D1, D2, D3, E의 7종이 알려져 있으며, cdk는 2,3,4,5,6 그리고 cdc2가 알려져 있다. Fig. 4에서 보는 바와 같이 cyclin E 또는 cyclin A와 결합하여 세포 주기를 조절하는 것으로 알려진 cdk2의 발현이 감소하였으며, cyclin D와 복합체를 이루는 cdk4 역시 발현이 DADLE 처리 농도 의존적으로 크게 감소한 것을 관찰할 수 있었다. 또한 cyclin D와 복합체를 이루는 cdk6의 발현도 DADLE 처리 농도 의존적으로 감소하였다. 하지만, cyclin 집단은 E 외에는 그다지 큰 변화를 보이지 않았으며, 오직 cyclin E만 처리농도 의존적으로 감소하였다.</p><p>뿐만 아니라 p53은 cyclin E/cdk2 와 cyclin A/cdk2 를 억제하는 p21의 발현에 큰 영향을 주는 것으로 알려져 있다. p21과 구조적으로 유사한 p16 및 p27은 기질 단백질들이 cyclin에 결합하지 못하도록 하는 cdk 억제자의 한 종류이다. DADLE를 처리한 경우 특히 p27과 p16 유전자의 발현이 크게 감소하였으며, 이 결과 역시 DADLE의 처리에 의한 cell cycle arrest와 어떤 연관성이 있는 것으로 사료된다. 아울러, telomere는 세포의 노화와 수명에 밀접한 연관성을 가지고 있어, 이의 발현에 관련된 c-myc 및 hTR 등의 유전자 발현을 분석해보았다. 그 결과 telomere 재배열과 관련된 c-myc의 감소와 telomerase reverse transcriptase인 TERT의 발현 감소를 관찰하였으며, telomerase associated protein인 TEP-1의 발현이 크게 증가하였다. 이는 U937에 DADLE를 처리한 경우 세포 주기 중 G1기와 G2/M기의 억제뿐만 아니라 세포의 수명에도 영향을 주는 것을 알 수 있었다.</p><p>이상 세포 주기의 억제를 통한 life-time을 증가시킬 가능성에 대한 결과는 DADLE 같은 동면유발물질에 대한 생화학적, 분자생물학적 연구가 부족한 상태에서 단정할 수 없으나 이를 이용한 장기의 장기간 보관 기술 개발, 손상된 장기의 생존 확률 증가 및 저온 수술 기술 개발에 의한 질병 치료 등으로 접근하고 있다. 그리고 궁극적으로 동면 메카니즘의 구명을 통한 수명연장 등에 대한 연구도 진행되고 있어 보다 다양한 접근을 통한 연구가 요구되고 있다.</p>