Phenomenex사의 Luna C18 컬럼을 이용하여 O-Desmethyl astemizole, hydroxyebastine, terfenadine alcohol 및 내부표준물질을 분리하였으며, 이동상은 water:acetonitrile (50:50, v/v)에 0.1% formic acid를 첨가하여 사용하였다. 유속은 0.2ml/min로 유지하며, QTrap 4000 LC/MS/MS system을 이용하여 검출하였다. MRM 모드를 이용한 정량 분석에서는 각 물질의 선택 질량을 사용하였다. CYP2J2 활성 억제에 대한 저해제의 IC50를 구하기 위해, aripiprazole, haloperidol, miconazole 및 terfenadine 화합물의 농도를 변경하며 저해 연구를 수행하였고, 이를 비선형 최소자승 회귀분석법으로 분석하였다.
<h2>LC/MS/MS 분석</h2> <p>O-Desmethyl astemizole, hydroxyebastine, terfenadine al-cohol 및 내부표준물질을 분리하기 위해 Phenomenex 사의 Luna C18 컬럼( \( 2 \times 50 athrm { ~mm } , 3 \mu \mathrm { m } ) \) 을 사용하였고, 이동상은 wa-ter:acetonitrile \( (50: 50, \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 에 \( 0.1 \% \) formic acid를 첨가하여 사용하였다. 이 때 이동상의 유속은 \( 0.2 \mathrm { ml } / \mathrm { min } \) 으로 유지하였으며, 탠덤질량분석기(QTrap 4000 LC/MS/MS system, Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)를 이용하여 검출 하였다. 탠덤질량분석시 이온소스는 전기분무법(electrospray, positive mode)을 사용하였고, 이온화 전압은 \( 5.5 \mathrm { kV } \), 탈용매화 온도는 \( 550 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 오리피스 및 링 전압은 각각 \( 80 \mathrm { ~V } \) 및 400 \( \mathrm { V } \) 로 조정하였다. 질소가스 흐름 속도의 분무가스는 \( 1.04 \) \( l / \mathrm { min } \), 커튼가스는 \( 1.44l / \mathrm { min } \) 및 보조가스는 \( 4.0l / \mathrm { min } \) 으로 조정하였고, 충돌가스(질소) 에너지 값(collision energy)은 35(O-desmethyl astemizole), 42 (hydroxyebastine, terfena-dine), 36 (terfenadine alcohol), 및 \( 25 \mathrm { eV } \) (chlorpropamide) 이었다. 분석 물질의 정량을 위하여 MRM (multiple reaction monitoring) 정량 모드를 이용하였고, O-desmethyl astemi-zole, hydroxyebastine, terfenadine alcohol, chlorpropamide, 및 terfenadine의 선택 질량으로서는 각각 \( m / z \quad 445>204 \), \( 486>167,488>452,227>175 \), 및 \( 472>436 \) 를 사용하였다. 데이터 분석을 위해서는 Analyst software (version 1.4)를 사용하였다.</p> <h2>데이터 해석</h2> <p>CYP2J2 동혀소에 특이한 기질 약물로부터 대사체 생성에 대한 저해제의 CYP2J2 활성 억제에 대한 경수( \( \left . \mathrm { IC } _ { 50 } \right ) \) 는, 스크리닝 단계에서 저해능을 보인 화합물(aripiprazole, haloper-idol, miconazole 및 terfenadine)의 농도를 달리하면서 \( (0 ~ 200 \mu \mathrm { M } ) \), 효.소 활성 저해 연구를 수행 후 약동학 분석 프로그램인 WinNonlin (Version 2.0, Pharsight, Apex)을 이용하여 비선형 최소자승 회거분석법을 이용하여 산출하였다.</p>