자가수정을 통해 얻은 유채 형질전환 식물체의 T1 종자와 대조군의 종자는 특정 비율로 혼합된 토양에 파종되어 일정 온도와 광주기에서 배양되었다. 그 후 반응이 끝나고 나면 0.9%의 NaCl와 헥산을 이용해 세 차례 추출하여 상층액을 모았다. 그리고 이를 GC-2010에 장착된 DB-23 컬럼을 이용하여 GC 분석을 진행하였고, 지방산은 표준 시료와의 체류 시간 및 피크 면적을 비교하여 분석하였다.
<h3>형질전환 유채의 후대검정</h3> <p>자가수정에 의해 얻어진 유채 형질전환 식물체의 \( \mathrm { T } _ { 1 } \) 종자와 대조군의 종자를 토양 (펄라이트:질석:상토 1:2:3, \( \mathrm { v } / \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 에 파종하여 \( 23 \pm 1 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 장일 조건 ( \(16 \mathrm { h } \) day / \(8 \mathrm { h } \) dark)에서 배양하였다. 발아 후, 약 \(10 \)일 정도 배양한 식물체에 \( 0.3 \% \) 바스타 액제 (Bayer cropscience, Korea)를 살포하였으며, 형질전환 식물체의 생존 여부에 따라서 제초제에 대한 저항성 여부를 판별하였다.</p> <h3>Gas chromatography를 이용한 종자 지방산 성분 및 함량 측정</h3> <p>완전히 말린 각 품종의 종자는 \( 1 \\mathrm { ml } \)의 \( 2.5 \% \) 황산이 들어있는 메탄올에 넣고 \( 10 \mu \mathrm { l } \)의 내부 표준 물질, \( \mathrm { C17:0 \\textrm { TAG } } \) \( (50 \mu \mathrm { g } ) \) 를 첨가한 후 \( 95 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \(1 \)시간 \(30 \)분간 반응시킨다. 반응이 끝난 다음, \( 1.5 \mathrm { ml } \) 의 \( 0.9 \% \) 의 \( \mathrm { NaCl } \) 넣고 각 \( 2 \mathrm { ml } \)의 헥산 (haxane)을 이용하여 세 번 추출하여 상층액을 모았다. 모아진 헥산 용액은 질소가스를 이용하여 농축시켜 지방산 methyl esters를 학보하였다. \( \mathrm { GC } \) 분석은 DB- \(23 \) column (30 m X \( 0.25 \mathrm { ~mm } , 0.25 \) um film thickness; J&W Scientific, Folsom. CA, USA)이 장착된 GC- \(2010 \) (Shimadzu, Japan)을 이용해서 수행하였다. 운반 기체는 헬륨 \( (1 \mathrm { ml } / \mathrm { min } ) \)을 사용하였고, split은 \( 1 / 30 \) 되도록 하였다. 각각의 지방산은 표준 시료의 체류 시간과 peak의 면적을 비교하여 분석하였다.</p>