H-rasV12, K-rasBV12, N-rasN12 유전자를 삽입해 형질전환된 Rat2 세포주에 YH3938 및 YH3945를 도입하여 증식효과를 조사하였다. 이때 YH3938과 YH3945는 발암원성 Ras에 의한 세포 형태 변화를 선택적으로 억제하였으나, 정상 Rat2와 Rat2-K-Ras의 증식에는 미치지 못하였다.
<h1>결 과</h1> <h2>Farnesyl transferase 억제제인 YH3938 및 YH3945가 발암원성 Ras에 의한 세포의 증식에 미치는 영향</h2> <p>Rat2에 발암원성 H-rasV12, K-rasBV12, N-rasN12의 유전자가 삽입된 plasmid를 도입시켜 형질전환시킨 세포주를 사용하여 YH3938 및 YH3945가 형질전환된 세포의 증식에 미치는 영향을 조사하였다. 먼저 YH3938이 미치는 영향을 살펴보면, Rat2-H-Ras의 증식은 농도 의존적으로 억제되었다(Fig. 1A). \( 1 \mu \mathrm{M} \) 의 YH3938에 의해 Rat2-H-Ras는 약 \( 68 \% \) 정도 증식이 억제되었다. \( \mathrm{ED}_{50} \) 은 약 \( 30 \mathrm{nM} \) 로써 보고된 다른 FTI에 비해 높은 efficacy를 보였다. 반면에 정상적인 Rat2와 Rat2-K-Ras의 증식에 거의 영향을 주지 않았다. Rat2-N-Ras의 경우도 \( 0.5 \) \( \mu \mathrm{M} \) 의 농도까지는 거의 영향을 받지 않으나 \( 1 \mu \mathrm{M} \) 의 YH3938에 의해 약 \( 40 \% \) 가량 증식이 억제되었다. 따라서 YH3938은 정상세포의 세포증식에는 거의 영향을 미치지 않으나 H-RasV12에 의해 형질전환된 세포의 증식을 선택적으로 억제함을 알 수 있었다. 또한 YH3945에 의한 영향을 살펴보면, Rat2-H-Ras의 증식은 농도 의존적으로 억제되었다(Fig. 1B). 그러나 정상적인 Rat2와 Rat2-K-Ras의 증식에 거의 영향을 주지 않았으며, Rat2-N-Ras에는 YH3938과는 달리 세포증식에는 큰 영향이 없음을 알 수 있었다. 이상의 결과로부터 YH3938과 YH3945가 선택적으로 발암원성 H-Ras, K-Ras, N-Ras에 의해 형질전환된 세포의 증식에 효과가 있다는 것을 알 수 있었다.</p> <h2>Farnesyl transferase 억제제인 YH3938 및 YH3945가 발암원성 Ras에 의한 세포의 형태에 미치는 영향</h2> <p>다음으로 이들 Rat2, Rat2-H-Ras, Rat2-K-Ras, Rat2-N-Ras 세포 형태에 대한 YH3938 및 YH3945의 영향을 조사하였다. Fig. 2에서 보는 바와 같이, 정상 섬유아세포의 성장은 세포의 접촉에 의해 세포증식이 억제되어 전형적인 형태인 편평하고 단층의 형태로 관찰되었다. 그러나 발암원성 ras의 유전자를 넣어 형질전환시킨 세포들에서는 세포의 접촉에 의한 억제가 관찰되지 않았고 다른 세포 위에 또 다른 세포가 겹쳐 자라는 전형적인 형질전환된 세포의 형태를 나타내었다. 이어 YH3938 및 YH3945의 영향을 살펴보면, Rat2-H-Ras의 세포는 YH3938 및 YH3945 저농도인 \( 0.1~ \mu \mathrm{M} \)에서도 겹쳐자라는 세포가 거의 관찰되지 않았고 대조군인 Rat2와 유사한 정상적인 세포 형태로 바뀐 것을 알 수 있었다. 반면에 Rat2-K-Ras, Rat2-N-Ras의 모양에는 거의 영향이 없었다. 그러나 고농도인 \( 1.0~ \mu \mathrm{M} \)로 처리한 경우에는 YH3938에서는 Rat2-H-Ras와 Rat2-N-Ras에서 효과가 있어 세포 형태가 정상화되었으나, 역시 Rat2-K-Ras에는 아무런 영향이 없었다. 그러나 YH3945는 YH3938과는 달리 Rat2-N-Ras에 약한 정도의 효과만 지닌다는 것을 알 수 있었다. 이러한 결과는 YH3938과 YH3945가 발암원성 Ras에 의한 세포 형태 변화에 Ras isoform을 선택적으로 농도의존적으로 억제하는 효과가 있음을 알 수 있었다.</p>