5개 지역의 경작지 토양시료를 평판희석법으로 저 영양 배지인 R2A 배지에 도말한 결과, 총 3,840 개의 균주가 분리되어 이들을 배양하여 10 개의 그룹, 80 개의 아그룹 물질 은행이 제작되었고, 이로부터 프로모터 reporter assay를 통해 p21과 Egr-1의 promoter를 활성화시키는 것으로 알려진 adriamycin과 근사한 활성을 나타내는 YSTC229그룹이 선발되었으며 계속하여 이것의 8 개 아그룹을 대상으로 Egr-1의 promoter 활성을 분석한 결과 YSTC229-GH가 양성 대조물질인 adriamycin에 못지않은 우수한 활성을 보였다. 다양한 암세포에서 Egr-1의 발현이 감소되거나 상대적으로 부족하게 되면 암 형성이 촉진될 수 있기 때문에 Egr-1 발현을 유도하는 활성 물질은 암세포 성장을 억제하는 암 치료제 개발에 유효하게 활용될 수 있을 것으로 추정된다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>암 억제유전자의 발현 촉진 물질 생산 균주의 선발</h2> <p>5개 지역의 경작지 토양시료를 평판희석법으로 저 영양 배지인 R2A 배지에 도말한 결과, 총 3,840 개의 균주가 분리되어 이들을 배양하여 10 개의 그룹, 80 개의 아그룹 물질 은행이 제작되었다. 이로부터 프로모터 reporter assay를 통해 p21과 Egr-1의 promoter를 활성화시키는 것으로 알려진 adriamycin과 근사한 활성을 나타내는 YSTC229그룹이 선발되었으며 계속하여 이것의 8 개 아그룹을 대상으로 Egr-1의 promoter 활성을 분석한 결과 YSTC229-GH가 양성 대조물질인 adriamycin에 못지않은 우수한 활성을 보였다. Fig. 2 는 \( \mathrm{GH} \) 아그룹에 속하는 48 균주의 제균된 배양액을 시료로 처리하여 인간 대장암 세포주인 HCT116 에 처리하여 Egr-1 단백질의 발현을 웨스턴 블로팅으로 검정한 결과이다. Fig. 2에서 보는 바처럼 소수면에서 분리한 YSTC229-SSG5, SSG6, SSG10균주의 배양액을 처리한 암세포에서 음성대조군과 비교하였을 때 Egr-1 단백질 발현이 유의하게 증가되어 있음을 확인할 수 있었다. Egr-1의 발현은 많은 종류의 암세포의 성장을 현저하게 감소시키며, 발암성(tumori-genesis)을 저해시킨다고 보고되었다. 다양한 암세포에서 Egr-1의 발현이 감소되거나 상대적으로 부족하게 되면 암 형성이 촉진될 수 있다. 또한, 사람 섬유육종 HT1080 세포와 골육종 \( \mathrm{SaOS} 2 \) 세포, 신경 교아세포종 U251 세포, 유방암 ZR75-1 세포 등에 Egr-1을 과다 발현시키면 암세포에서의 DNA 합성능이 감소되고 세포성장 속도가 억제되며, 인간 섬유성 육종 세포인 HT1080에 Egr-1 유전자를 도입시키면 TGFß1, fibronectin, PAI-1(plasminogen activator in-hibitor-1) 등의 유전자 발현이 증가되어 암세포 성장이 정지되고 전이 능이 감소된다. 카레의 성분인 커큐민은 Egr-1 유전자의 발현을 증가시켜 인간 뇌 암세포인 U87MG 세포의 성장을 억제시킨다고 보고되었다. 이 외에도 어떤 대사물질에 의해 Egr-1의 발현이 증가되면 세포의 종류와 신호 자극 종류에 따라 세포주기 진행을 억제하는 p21유전자, 세포사멸을 유도하는 p53과 Bax 유전자, 손상된 DNA 수복에 관여하는 Gadd45 유전자, 세포 성장 억제에 관여하는 PTEN 유전자 등의 다양한 암 억제 유전자 발현을 전사 수준(transcriptional level)에서 조절함으로써, 비정상적으로 과도하게 성장하는 세포의 성장 비율을 억제하거나 과다한 DNA 손상을 받은 세포에서 세포사멸을 유도하여, 궁극적으로 암 발생 과정을 억제하는 암 억제(tumor suppressor)기능을 가지는 것으로 보고된 바 있다. 따라서, Egr-1 발현을 유도하는 활성 물질은 암세포 성장을 억제하는 암 치료제 개발에 유효하게 활용될 수 있을 것으로 추정된다.</p>