이번 실험에서 O1:K1의 생화학적 특징과 Kanagawa 양성 및 urease 생산성은 Table 1과 2를 통해 확인되었다. Bacto urea broth에서 짙은 분홍색으로 변화됨으로써 urease 생산이 확인되었고, 요소농도가 0.2% 첨가된 배지에서 가장 높은 활성이 관찰되었다. 따라서 이번 실험에서의 균주는 구성효소이고, 기질인 요소를 첨가 시 유도 효소가 됨을 알 수 있었다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>균주의 생화학적 성상</h2> <p>본 실험에서 사용한 V. parahaemolyticus의 생화학적 특징을 API 20E kit를 사용하여 확인한 결과로 균주의 생화학적 성상은 Table 1에 나타내었다. 실험에 사용된 균주의 혈청형은 O1:K1이며, Kanagawa 양성으로 확인되었으며, V.pxrahaemolyticus KH410으로 명명하여 사용하였다. 대조균주 K25, K57 혈청형과의 차이점은 구연산 이용 양성, ure-ase 양성, indole 음성, gelatin 양성으로 나타났고, 그외 다른 성상은 표준 균주와 같았다. Honda가 기술한바와 같이 분리원 및 지역에 따라 다양한 양상의 V. parahaemolyticus가 분리될 수 있다는 것으로 볼 때, 혈청형에 따른 생화학적 특성 및 Kanagawa 양성 및 음성과의 관계 및 urease 생산성 여부엔 분리원 및 지역에 따라 다소 차이가 있을 것으로 사료되어졌다.</p> <h2>Urease 생성의 확인</h2> <p>Bacto urea broth에서 균주를 배양하였을 때 짙은 분홍색으로 변화된 V. parahaemolyticus O1:K1 균주를 확인 할 수 있었다. Cai의 보고에 의하면 urease를 생산하는 V.parahaemolyticus는 특정한 혈청형과 관련있다고 주장하였고, 본 연구에서 사용된 균주 중에서는 O1:K1혈청형만이 urease를 생산하였고, 그외 어떤 다른 혈청형의 V. par-ahaemolyticus가 urease를 생산하는 지에 관해서는 앞으로 더 많은 다양한 혈청형을 대상으로 검토하여야 할 것으로 판단된다.</p> <h2>Urease 생산에 영향을 미치는 인자</h2> <h3>요소 농도</h3> <p>요소를 농도별로 조정한 증균용 배지에 전 배양액을 첨가하여 6시간 진탕배양한 후 urease 생산성을 검토한 결과, Table 2에서 보는 바와 같이 요소를 첨가하지 않은 배양 배지에서는 균의 성장도 아주 미약하였고 활성도 극히 미약하였다. 그리고 요소농도가 \( 0.2 \% \) 첨가된 배지에서는 활성이 가장 높았고 \( 0.3 \% \) 이상 첨가시켜 배양시키면 urease 생산이 감소하는 것이 관찰되었다. 이로써 본 실험에 사용된 균주는 구성효소이면서 기질인 요소를 첨가시켜 줄 때, urease를 많이 생성하는 유도 효소임을 알 수 있었다.</p> <h3>초기 \( \mathrm { pH } \)</h3> <p>배양 초기 \( \mathrm { pH } \)별로 균의 생육도를 비교하였을 때 \( \mathrm { pH } 5.5 \)에서 8.0에 걸쳐 높은 생육도를 보였다. Urease 생산능을 검토한 결과 Table 3에서와 같이 \( \mathrm { pH } 5.5,6.0 \)에서 urease의 생산이 가장 많았고 \( \mathrm { pH } 7.0 \)은 8.0보다도 낮은 활성을 나타내었으며 \( \mathrm { pH } 4.5 \)와 \( \mathrm { pH } 9.0 \)도 균의 생육도 및 urease활성이 아주 낮았다. 이로써 urease생성을 위한 최적 \( \mathrm { pH } \) 조건은 5.5임을 알 수 있었다.</p>