TF-1, TF-2, TF-3 및 orlistat의 처리농도가 증가함에 따라 porcine pancreatic lipase에 대한 저해효과가 증가하였다. 그리고 \( 10 \mu \mathrm { g } \) \( / \mathrm { ml } \) 제조한 후 NIH-3T3 L1의 지방세포로의 분화에 미치는 영향을 조사한 결과, TF-1, TF-3를 처리한 실험구에서는 대조구에 비해 지방세포 분화능이 각각 76.75, 60.19 \( \% \) 로 나타났고, TF-2를 처리한 실험구에서는 \( 24.84 \% \) 의 지방세포 분화도를 나타내었다. 따라서 백자인 추출물 TF-1, TF-2, TF-3은 porcine pancreatic lipase에 대한 저해효과뿐만 아니라 지방세포 분화를 저해하는 효과도 가지고 있음을 확인할 수 있었다.
<h2>백자인 추출물의 pancreatic lipase에 대한 저해효과</h2> <p>최종 분리된 활성물질 TF-1, TF-2, TF-3 및 orlistat를 최종 반응농도별(1~250 \( \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ) \) 로 제조하여 porcine pancreatic lipase에 대한 저해효과롤 측정하였다. Fig. 2에 나타난 바와 같이 활성물질 및 orlistat의 처리농도가 증가함에 따라 lipase에 저해효과도 증가함을 알 수 있었다. Porcine pancreatic lipase에 대한 저해효과는 TF-2보다 TF-1, TF-3가 다소 우수한 것으로 나타났으나, 대조구로 사용한 orlistat 보다는 다소 저해효과가 낮은 것으로 조사되었다. 이 때 각 활성물질 TF-1, TF-2, TF-3 및 orlistat의 porcine pancreatic lipase에 대한 \( \mathrm { IC } _ { 50 } \) 값은 각각 44.7, 98.7, 46.1 및 \( 27.6 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 이었다. 이와 같은 결과로 보아 본 실험에서 탐색한 백자인 추출물 TF-1, TF-2, TF-3은 비록 시판되고 있는 orlistat보다는 lipase에 대한 활성저해능을 다소 떨어지더라도 좀 더 순수하게 정제된 후에는 그 활성이 더욱 높아질 것으로 예상된다.</p> <h2>백자인 추출물의 지방세포 분화에 대한 저해효과</h2> <p>백자인 추출물 TF-1, TF-2, TF-3 및 orlistat의 농도를 \( 10 \mu \mathrm { g } \) \( / \mathrm { ml } \) 제조한 후, 미분화상태 전구 지방세포인 NIH-3T3 L1의 지방세포로의 분화에 미치는 영향을 조사하였다. NIH-3T3 L1이 지방세포로 분화되는 정도의 측정은 지방세포 내 lipid droplet 형성정도로 측정하였다. 즉 지방세포 내 lipid droplet을 Oil red O 시약으로 염색하여 isopropanol로 용출시켜 \( 510 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정한 결과, Table 3에서 보는 바와 같이 TF-1, TF-3를 처리한 실험구에서는 대조구에 비해 지방세포 분화능이 각각 76.75, 60.19 \( \% \) 로 나타났다. 반면, TF-2를 처리한 실험구에서는 \( 24.84 \% \) 의 지방세포 분화도를 나타내었으며, orlistat를 처리한 실험구에서는 \( 23.88 \% \) 의 분화도를 나타내는 것으로 조사되었으므로 TF-2 및 orlistat의 경우 지방세포 분화 저해정도가 우수함을 확인할 수 있었다. 따라서 활성물질 TF-2 가 지방세포 분화의 지표로 사용되는 lipid droplet의 형성을 억제함으로써 지방세포 분화를 저해하는 효과도 가지고 있음을 확인할 수 있었다.</p> <h1>요 약</h1> <p>Pancreatic lipase의 활성을 저해하는 물질을 탐색하고자 국내의 식용 또는 약용식물의 추출물을 대상으로 lipase 활성에 대한 저해능력이 있는 식물추출물은 탐색한 결과 대복피, 계혈등, 오배자 및 백자인의 식물추출물을 선정하였다.</p> <p>Pancreatic lipase에 대한 저해활성이 우수한 백자인으로 부터 클로로포름 용매추출, 실리카겔 컬럼크로마토그라피, 세파덱스 LH-20 컬럼크로마토그라피와 고속액체크로마토그 라피를 실시하여 pancreatic lipase에 대한 저해활성 물질로 TF-1, TF-2, TF-3를 분리하였다. 이들을 대상으로 porcine pancreatic lipase에 대한 저해효과를 측정한 결과, 활성물질 TF-1, TF-2, TF-3 및 orlistat의 porcine pancreatic lipase에 대한 \( \mathrm { IC } _ { 50 } \) 값은 각각 44.7, 98.7, 46.1 및 \( 27.6 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 인 것으로 나타났다. 활성물질 TF-2와 orlistat의 경우에는 \( 10 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 의 농도에서 NIH-3T3 L1의 지방세포로의 분화에도 억제효과가 있음을 입증하였다.</p>