산복사나무 열매 생체 \( 40 \mathrm { ~kg } \) 에 대하여 \( 100 \% \mathrm { MeOH } \) 용액(45 \( \mathrm { L } ) \), \(80 \% \mathrm { MeOH } \) 수용액 \( (45 \mathrm { ~L } \times 3) \) 을 가하여 실온에서 \(24 \) 시간 \(3 \)회 추출한 후 여과지로 여과하고 물 \( (3 \mathrm { L } ) \) 분획은 다시 \( n \)- \( \mathrm { BuOH } \) \( (3 \mathrm { L } \times 3) \) 로 분배 추출하였다.
<h2>재료 및 방법</h2> <h3>실험재료</h3> <p>본 실험에 사용한 산복사나무(Prunus davidiana) 열매는 \(2013 \)년 \(6 \)월 장수 약초(Anyang, Korea)에서 구입하였고, 우석대학교 약학대학 김대근 교수가 동정하였다. 표본시료(KFMMEL- \( 201306 \))는 경희대학교 능성 소재 및 대사공학 실험실에 보관되어 있다.</p> <h3>시약 및 기기</h3> <p>Open column chromatography (c.c.)용 \( \mathrm { SiO } _ { 2 } \)은 Kiesel gel \( 60 \) (Merck, Darmstadt, Germany)을 ODS gel은 LiChroprep RP- \( 18 \) (Merck)을 사용하였다. TLC는 Kiesel gel \( 60 \mathrm { ~F } _ { 254 } \) 와 RP- \(18 \) \( \mathrm { F } _ { 254 \mathrm { S } } \) (Merck)를 사용하였고, \( \mathrm { TLC } \) 상의 물질 검출은 UV lamp (Spectroline, Model ENF- \( 240 \) C/F, Spectronics Corporation, Westbury, NY, USA)로 확인 후, \( 10 \% \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { SO } _ { 4 } \)를 분무한 후 가열하여 발색양상을 조사하였다. NMR spectrum은 Varian Inova AS \( 400 \) (Varian, Palo Alto, CA, USA)으로 측정하였고, IR spectrum은 Perkin model \( 599 \) B (Waltham, MA, USA)로 측정하였다. 비선광도는 polarimeter P- \( 1020 \) (JASCO, Tokyo, Japan)로 측정하였으며, Electronic ionization mass spectrometry (EI/MS)는 JEOL JMS 505-WA (Tokyo, Japan)으로 측정하였다. 융점은 Fisher-Johns 융점 측정기(Fisher Scientific, Miami, FL, USA) 를 사용하여 측정하였고, 미보정하였다.</p> <h3>추출 및 분획</h3> <p>산복사나무 열매 생체 \( 40 \mathrm { ~kg } \) 에 대하여 \( 100 \% \mathrm { MeOH } \) 용액(45 \( \mathrm { L } ) \), \(80 \% \mathrm { MeOH } \) 수용액 \( (45 \mathrm { ~L } \times 3) \) 을 가하여 실온에서 \(24 \) 시간 \(3 \)회 추출한 후 여과지로 여과하였다. 얻어진 추출물을 감압 농축하여 \( \mathrm { MeOH } \) 추출물 \( (2.7 \mathrm { kg } ) \) 을 얻었다. 얻어진 추출물은 물( \( 3 \)L)와 \( \mathrm { EtOAc } \) \((4 \mathrm { L } \times 3) \) 로 분배 추출하였고, 물 \( (3 \mathrm { L } ) \) 분획은 다시 \( n \)- \( \mathrm { BuOH } \) \( (3 \mathrm { L } \times 3) \) 로 분배 추출하였다. 각 층을 감압 농축하여 \( \mathrm { EtOAc } \) 분획(PDFE, \( 135.6 \mathrm { g } ) \), \( n \)- \( \mathrm { BuOH } \) 분획(PDFB, \( 208.8 \mathrm { g } \) ) 및 물 분획(PDFH, \( 2.36 \mathrm { kg } ) \) 을 얻었다.</p>