유채 형질전환 방법은 칼을 이용하여 자엽 절편체를 자른 다음 30초 간 A. tumefaciens 응액에 접종 후 멸균된 여과지에서 용액을 제거하여 각 용액이 첨가된 MS 배지에서 공동 배양하였다. 공동 배양을 마친 유채 자엽 절편체는 캘러스 분화를 유도하였으며 유도된 캘러스는 각 용액이 첨가된 배지에서 형질전환이 된 갤러스로부터 shoot이 유도되도록 하였다. 또한 새로운 shoot 유도배지로 계대배양하며 형질전환이 된 shoot만을 절단하여 뿌리 유도배지에서 뿌리의 형성을 유도하였다.
<h3>형질전환 및 재분화</h3> <p>유채 형질전환 방법은 Prem과 Mohan ( \(2008 \))의 방법을 기초로 하여 실협을 수행하였다. 날카로운 칼을 이용하여 유채 \( 1 \sim 2 \mathrm { ~mm } \)의 엽병을 남긴 자엽 절편체를 자른 다음, 준비된 A. tumefaciens 응액에 약 \(30 \)초간 접종시킨 후, 멸균된 여과지에서 과다한 용액을 제거하고, \( 5 \mathrm { mg } \mathrm { /L } \\mathrm { AgNO } _ { 3 } \), \( 0.75 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \\mathrm { BAP } , 0.2 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \\mathrm { NAA } , 0.01 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \\mathrm { GA } _ { 3 } \)가 첨가된 \( \mathrm { MS } \) 배지에서 \( 23 \pm 1 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 암 조건에서 2 일간 공동 배양하였다. 공동배양을 마친 유채 자엽 절편체는 생장조절제의 조성이 동일하고 \( 500 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) carbenicillin 이 첨가된 MS 배지에 옮겨 장일 조건 ( \(16 \)h day/ \(8 \)h dark)에서 캘러스 분화를 유도하였다. 유도된 캘러스는 \( 5 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \\mathrm { AgNO } _ { 3 } , 3 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \\mathrm { BAP } \), \( 0.2 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \\mathrm { NAA } , 0.01 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \\mathrm { GA } _ { 3 } , 500 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) carbenicillin, \( 4 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \\)phosphinothricin 이 첨가된 shoot를 유도하는 배지에 옮겨서 형질전환이 된 캘러스로부터 shoot가 유도되도록 하였다. \( 2 \)주 정도마다 새로운 shoot 유도배지로 계대배양하면서 형질전환이 된 shoot만율 절단하여 phosphinothricin 농도가 \( 8 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 인 선발배지에서 선발한 후에 \( 1 / 2 \mathrm { MS } \) 배지에 \( 1 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \\mathrm { IBA } , 500 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) carbenicillin 가 포함된 뿌리 유도배지에서 뿌리의 형성올 유도하였다. 뿌리가 발달된 개체는 토양으로 옮겨 \( 23 \pm 1 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 장일 조건 ( \(16 \)hr day/ \(8 \)hr dark)에서 순화시켰다.</p>