\( n \)-hexane/acetonitrile 분배법은 고기류의 지질을 제거하기 위해 고려되었으며, 계란과 우유의 경우 지질 함량이 낮아 dichloromethane을 이용한 액-액 분배법이 고려되었다. 이외에도 Prochloraz와 대사물의 2,4,6-TCP 분해율을 확인하기 위해 prochloraz를 사용하여 BTS44595 및 BTS44596 표준용액에 대해 분해 조건을 설정하고 분해 및 회수율을 확인하였다.
<h2>고기류 추출물 중 지질 제거효율 검토</h2> <p>고기류의 지질을 제거하기 위해 \( n \)-hexane/acetonitrile 분배법을 검토하였다. Acetonitrile이 포화된 \( n \)-hexane \( 30 \mathrm{~mL} \) 에 prochloraz 및 각 대사물의 표준용액 \( 10 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}, 1 \mathrm{~mL} \) 을 첨가한 후 \( n \) -hexane이 포화된 acetonitrile \( 30 \mathrm{~mL} \) 를 이용하여 2회 분배 추출하였으며, \( 1 \% \) formic acid를 함유하고 \( n \)-hexane이 포화된 acetonitrile를 이용하는 방법도 검토하였다. 또한, 지질 제거 효과를 검증하기 위해 고기류 중 지방함량이 가장 높은 돼지고기 \( 10 \mathrm{~g} \) 에 추출용매 acetone 또는 acetonitrile \( 100 \mathrm{~mL} \) 첨가하여 30 분 동안 \( 200 \mathrm{rpm} \) 에서 진탕 추출하고 농축한 후 추출 고형물의 무게를 측정 후 확립된 \( n \)-hexane/acetonitrile 분배법을 통해 제거된 지질의 양을 측정하였다.</p> <h2>우유 및 계란 추출물의 액-액 분배법 검토</h2> <p>계란과 우유는 지질함량이 낮기 때문에 \( n \)-hexane/acetonitrile 분배법이 아닌 dichloromethane를 이용한 액-액 분배법을 검토하였다. 각 표준원액 \( 10 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}, 1 \mathrm{~mL} \) 씩 첨가한 후 분배조건을 확인하였다. 첫번째 분배 방법은 추출 후 포화식염수 \( 50 \mathrm{~mL} \) 와 과량의 물을 넣은 후 dichloromethane \( 50 \mathrm{~mL} \) 로 두 번 분배하는 방법이었고 두번째 검토한 분배법은 추출액을 농축한 다음 포화식염수 \( 50 \mathrm{~mL} \) 와 증류수 \( 200 \mathrm{~mL} \) 첨가 후 dichloromethane으로 \( 50 \mathrm{~mL} \) 로 두 번 분배하는 방법이었다.</p> <h2>Prochloraz 및 대사물의 \(2,4,6\)-TCP로 분해조건 설정</h2> <p>최적의 열분해 온도를 확립하기 위해 prochloraz 표준용액 \( 1 \mu \mathrm{g} \)/ \( \mathrm{mL}\) , \(1 \mathrm{~mL} \) 를 분해용 vial에 담은 후 질소 건조하고 pyridine hydrochloride \( 5 \mathrm{~g} \) 첨가한 다음 분해온도 200, 210 또는 220 \( { }^{\circ} \mathrm{C}\) 에서 1 시간씩 가열한 후 상온에서 방치하고 \( 0.2 \mathrm{M} \mathrm{HCl} \) 수용액 \( 20 \mathrm{~mL} \)에 재용해한 다음 dichloromethane \( 50 \mathrm{~mL} \) 으로 \(2\)번 분배하였다. 분배액 농축 중 2,4,6-TCP의 휘발소실을 방지하기 위해 분배액에 \( 2 \% \) diethylene glycol \( 0.2 \mathrm{~mL} \) 를 첨가 후 감압농축하고 ethyl acetate \( 2 \mathrm{~mL} \) 로 재용해하여 기기 분석하였다. 분해 시간을 확립하기 위해 \( 200^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 20분, 40분, 60분의 가열시간을 검토하였다. Prochloraz 뿐 아니라 대사물의 2,4,6-TCP 분해율을 확인하기 위혜 prochloraz를 이용해 확립된 분해조건 하에서 BTS44595 및 BTS44596 표준용액 \( 1 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}\), \(1 \mathrm{~mL} \) 를 이용해 분해 밎 회수율을 확인하였다.</p>