임목류 미세번식에서 성숙목의 분화능이 낮다는 문제가 있음을 확인했다. Greenwood (1987)은 성숙단계로 가는 4가지 발달 단계를 제안했다. 가장 높은 배발생 조직이 0.55%에서 유도되었으며, 이는 전배에서 초기 자엽단계로 전이되는 단계였다. 얻어진 5개의 배발생 조직은 증식율에 차이가 있었지만 모두 체세포배를 형성하였고, 80-150 µM ABA 처리가 필요했다. 이들은 1% 농도의 gellan gum에서 성숙되었으며, 생장조절제 무처리 조건에서는 정상적인 배발달 경로를 통해 발아하였다. 어린 식물체는 인공 상토에서 순화하여 묘목으로 육성되었습니다 (Fig. 2B).
<p>자에서 \( 0.55 \% \) 의 가장 높은 배발생 조직이 유도되었다. 조직검경 결과 이 시기의 접합자배는 전배 (proembryos)에서 초기 자엽단계로 전이되는 상태로 나타났다. 배발생조직은 세포질이 충만하고 잘 발달된 배병 (suspensor)을 나타내어 비배발생 조직과 구별되었다. 얻어진 \(5 \) 개의 배발생 조직은 증식율의 차이가 있었으나 모두 체세포배를형성하였으며, \( 80-150 \mu \mathrm { M } \) ABA처리가 필요하고, 고농도 gellan gum \( (1 \%) \) 에서 성숙되었다. 체세포배는 생장조절제 무처리 조건에서 정상적인 배발달 경로를 통해 발아되었다. 재분화 된 어린 식물체는 인공 상토에서 순화하여 묘목으로 육성하였다 (Fig. 2B).</p> <h2>상변화 (Phase change)</h2> <p>임목류 미세번식의 가장 큰 어려움은 성숙목의 분화능이 현저히 낮다는 것이다. 그러나 대부분의 수종에서 중요한 특성들은 성숙기 (adult stage)에 도달해야만 발현된다. 나무가 나이가 들고 성숙해지면 영양 번식체의 발근력이 점차 감소하기 때문에 산림수종의 무성번식 (조직배양을 포함)은 상변화를 잘 이해할 필요가 있다 .</p> <p>Greenwood ( \(1987 \))는 성숙상에 이르는 \(4 \)가지 발달 단계를 제안하였다. 이것은 형태형성 등의 독특성에 의해 특징 지울 수 있다. 배발생단계, 유묘단계 (유시상과 밀접하게 관련), 천이단계 (유시기에서 성숙기로 넘어가는 단계로 생식능을 얻는 단계를 포함) 및 성숙상 단계 (생식능이 최고에 달하고, 묘고나 직경생장 능력은 최저가 됨) 등이다.</p> <p>상변화와 관련하여 몇 가지 정의를 숙지할 필요가 있다. 상변화란 배 (embryo)로부터 시작하여 유시기와 성숙기를 거쳐 식물이 발달해가는 과정에 관련한 생리적 변화이다. 노화 (aging)는 나이듦 혹은 가령 (加龄)을 뜻하며 식물의 개체발생적 혹은 연대기적 나이가 들어가면서 나타나는 표현형적 변화를 뜻한다. 개체발생적 노화 (ontogenetic aging)란 배로부터 출발하여 성숙기로 발전해가는 과정에서 나타나는 노화를 뜻한다. 이와 비슷한 용어로 연대기적 노화 (chronological aging)가 있는데 이것은 실생묘이든 영양번식체이든 어떤 개체 식물의 일생을 통하여 지속적으로 나타나는 노화를 의미한다. 이것의 특징은 종자기원이나 영양번식 기원에 관계없이 그 식물체가 생장한 기간에 의해 결정되는 노화를 뜻한다. 보다 자세한 설명은 다음에 기술하였다.</p> <p>상변화에는 담쟁이나 유칼리나무의 경우처럼 때때로 잎 모양이 특징적으로 변하기도 한다. 유시 특성을 지닌 조직을 이용하면 성숙목의 번식이나 배양이 촉진되는데 이것은 검증된 성숙한 우량한 나무 (유전자형)의 성공적인 번식을 위해 매우 중요한 내용이다. 위치효과 (position effect)를 고려한다면 유시특성은 대부분의 나무의 뿌리에 가까운 기저부에 있다. 이곳은 개체 발생적으로 어린 조직이 있는 곳이다. 반면 성숙된 조직은 개체 발생적으로 늙은 그러나 연대기적으로는 젊은 (발달이나 생리적 요소의 기능으로 볼 때) 상태인 식물의 외면에 존재한다. 나무의 맨 꼭대기 상단부의 정아나 줄기 조직이 이에 해당한다고 볼 수 있다. 유시조직을 얻기가 어려우면 노화의 역전 (reversion)이나 부분적 재유령화 (partial rejuvenation) 처리가 도움을 줄 수 있다. 야외에서는 가지치기, 전정,근맹아지의 이용, 어린대목으로의 접목, 생장조절제 살포,황화처리 및 수경재배를 통한 부정아유도, 잠아 (epicormic bud)유도 등이 있다. 기내 방법으로는 잠아가 있는 절편의 배양, 반복된 계대배양, 유시대목으로 미세접목, 부정아유도, 체세포배형성, 수평배양 (horizontal culture) 등을 시도할 수 있다.</p>