Cisplatin에 의한 활성산소종의 과생성이 청각 유모세포 손상을 초래하는 것으로 밝혀졌다. GSH와 NAC의 전처리는 다양한 농도의 cisplatin에 의하여 유발된 청각 유모세포의 손상과 배열의 파괴를 현저히 보호하였고, immunocytochemistry 방법을 통해 TNF- \( \alpha \) 발현이 Deiters 세포, Hensen's 세포, Pillar 세포, spiral ganglion neurons, 및 cochlear nerve에서 관찰되었다. 항산화제 GSH와 NAC의 전처리는 cisplatin에 의한 organ of Corti의 청각 유모세포 손상을 보호하는 효과가 있었고, cisplatin에 의한 염증성 사이토카인 TNF- \( \alpha \) 발현이 관찰되었다.
<h2>항산화제가 cisplatin에 의한 organ of Corti의 청각 유모세포 손상에 미치는 영향</h2> <p>Cisplatin에 의한 활성산소종의 과생성은 산화적 스트레스기전을 통하여 세포 손상을 초래한다. 렛트에서 분리한 organ of Corti의 청각유모세포 손상에 대한 활성산소종의 역할을 확인하기 위하여 대표적 항산화제인 GSH \( (15 \mathrm { ~mM } ) \)와 NAC \((15 \mathrm { ~mM } ) \)를 각각 1시간 전처리하고, 다양한 농도의 cisplatin \( (20-50 ~ \mu \mathrm { M } ) \)을 30 시간 처리한 후에 phalloidin-TRITC 염색을 시행하였다. 항산화제 GSH와 NAC의 전처리는 다양한 농도의 cisplatin에 의하여 유발된 청각 유모세포의 손상과 배열의 파괴를 현저히 보호하였다. Fig. 6B에서는 각 실험군에서 임의로 정한 3개의 구역에서 GSH와 NAC에 의한 organ of Corti 청각 유모세포의 보호 효과를 phalloidin-TRITC 염색 세포 수로 정량화하여 도식화 한 결과이다.</p> <h2>Cisplatin처리에 의한 청각유모세포의 TNF- \( \alpha \) 발현</h2> <p>Cisplatin에 의한 청각유모세포 손상은 염증성 사이토카인 TNF- \( \alpha \), IL-1 \( \beta \) 및 IL-6 등의 분비와 유관함을 확인하였기 때문에, cisplatin을 처리한 cochlear explant에서 cisplatin에 의한TNF- \( \alpha \)의 발현을 immunocytochemistry 방법을 통하여 조사하였다. 렛트 코르티기관 청각유모세포는 palloidin-TRTTC, DAPI 그리고 anti-TNF- \( \alpha \) 항체를 이용하여 면역형광을 시행한 후에 형광현미경으로 관찰하였다. Cisplatin에 의한 TNF- \( \alpha \) 발현은 cochlear explant의 Hair cell zone에 위치한 Deiters 세포(white arrow)와 Hensen's 세포(red arrow)에 현저하였으며, 외측 및 내측 Pillar 세포, spiral ganglion neurons, 및 cochlear nerve에서도 관찰되었다. 그러나 claudius 세포에서 TNF- \( \alpha \) 발현은 관찰할 수 없었다.</p> <h1>고 찰</h1> <p>청각유모세포는 최종적인 세포 분화 이후에 소음, 이독성 약물 및 노화 등에 의한 손상으로부터 영원히 재생하지 않는 특징을 가진다. 중추신경계의 신경세포와도 유사한 특징을 가진 청각유모세포는 성장, 분화 그리고 사멸 기전이 아직까지 명확히 밝혀져 있지 않다. Cisplatin은 다양한 종류의 항암치료에 사용하고 있으나 이독성과 신장독성 등의 심각한 부작용을 초래할 수 있기 때문에 효과적인 암치료를 위한 사용에 제한을 받고 있다. Cisplatin의 이독성에 관련된 연구는 in vitro, ex vivo 및 in vivo 에서 활발하게 진행되고 있다. Cisplatin에 의한 이독성 기전은 활성산소종 생성에 의한 lip-id peroxydation 증가, 미토콘드리아 기능 이상, DNA 손상등이 잘 밝혀져 있다. 그러나, cisplatin에 의한 염증성 사이토카인 생성과 이에 연관된 청각 유모세포 손상에 대한 연구는 아직까지 미비하다.</p>