ethidium bromidefh 염색 및 관찰하여 Comet image 분석을 하였다. 페놀성 화학물은 항산화, 항암등의 다양한 생리활성을 가진다. 본 실험에서 복분자의 추출물에서 폴리페놀과 플라보노이드 함량을 측정한 결과 butanol에서 가장 높은 폴리페놀 화합물을 함유하고 있었고, ethylacetate fr. 에서가장 높은 플라보노이드 함량을 나타내었다.
<h2>Image analysis</h2> <p>Comet image 분석을 위해 ethidium bromide \( (20 \mathrm { ~ } \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \), Sigma Co.)로 nucleotide를 염색하여 형광현미경(Leica DMLB, Germany)에서 관찰하고 CCD camera를 통해 보내진 각각의 세포핵 image를 comet image analyzing program인 Komet 5 (Kinetic Imaging Co. UK)로 컴퓨터 상에서 분석하였다. DNA damage 정도는 tail DNA ( \( \% \))로 측정하여 나타냈으며, 각 처리구당 2개의 slide를 제작하여 그 중에서 100개의 세포를 관찰하여 측정하였고 각 처리구는 최소 2회 반복 실험하였다.</p> <h2>통계처리</h2> <p>실험결과의 통계분석은 SAS program을 이용한 분산분석법을 실시하여 Duncan's multiple range test에 의해 시료간의 유의적 차이를 검정하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>총 폴리페놀 함량과 플라보노이드 함량</h2> <p>페놀성 화합물은 식물계에 널리 분포되어 있는 2차 대사산물의 하나로서 다양한 구조와 분자량을 가지며 플라보노이드와 탄닌이 주성분이다. 이들은 phenolic hydroxyl \( ( \mathrm { OH } ) \)기를 갖기 때문에 단백질 및 기타 거대 분자들과 쉽게 결합하며, 항산화, 항암 등의 다양한 생리활성을 가진다. 축합형 탄닌은 녹차를 비롯한 차잎의 주된 폴리페놀 성분으로 알려져 있으며 충치 예방, 고혈압 억제, 항에이즈, 항암, 항산화, 미백효과 등이 보고되어 있다. 본 실험에서는 복분자의 methanol 추출물 및 분획물에 존재하는 총 폴리페놀 함량은 tannic acid를 기준물질로, 총 플라보노이드 함량은 quercetin을 기준물질로 하여 측정하였다. 결과, 복분자의 methanol 추출물은 \( 360.93 \mathrm { ~ } \mu \mathrm { g } / \mathrm { mg } \)으로 나타났으며, 분획물은 butanol, ethyl acetate, water fr. 순으로 각각 \( 546.25 \mathrm { ~ } \mu \mathrm { g } / \mathrm { mg } \), \( 465.51 \mathrm { ~ } \mu \mathrm { g } / \mathrm { mg } \), \(355.43 \mathrm { ~ } \mu \mathrm { g } / \mathrm { mg } \)의 높은 폴리페놀 화합물을 함유하고 있었다(Table 1). 플라보노이드의 함량(Table 2)은 methanol ext.에서 \( 80.84 \mathrm { ~ } \mu \mathrm { g } / \mathrm { mg } \)으로 나타났으며, ethylacetate fr. 은 \( 141.78 \mathrm { ~ } \mu \mathrm { g } / \mathrm { mg } \)으로 분획물 중에서 가장 높은 함량을 나타내었다. 그리고 butanol fr.과 water fr.은 각각 \( 105.42 \mathrm { ~ } \mu \mathrm { g } / \mathrm { mg } \)와 \( 102.46 \mathrm { ~ } \mu \mathrm { g } / \mathrm { mg } \)의 플라보노이드를 함유하고 있었다.</p>