고래회충유충증은 고래회충과에 속하는 유충에 의해 발생하는 감염이다. 이 감염은 주로 고래회충인 Anisakis simplex 제3기 유충에 의해 일어난다. A. simplex 성충은 바다포유류의 소화관에서 기생하며, 인간은 해산어류를 섭취할 때 감염된다. 이 감염은 급성 복통을 일으키거나 위장관에 침입하여 호산구성 육아종을 형성한다. 최근에는 A. simplex 유충 감염이 알레르기 반응을 유발한다는 것이 알려져 식품알레르겐으로 주목받고 있다. 고래회충과의 유충을 구분하기 위해 rDNA 정보가 활용되고 있다. 특히 ITS1-5.8S-ITS2 rDNA의 PCR product에 대한 RFLP 및 SSCP 분석은 종 동정에 성공적으로 사용되었고 또한 18S rDNA의 안정성과 변이성으로 인해 18S rDNA의 분석이 더 효과적인 도구로 사용될 수 있다. 본 연구에서는 고등어, 숭어, 넙치, 아나고, 참돔 등에서 수집한 유충들의 rDNA를 분석하여 감별진단법으로 활용 가능성을 확인하고자 한다.
<h1>서 론</h1> <p>고래회충유충증(Anisakidosis)은 고래회충과(Anisakidae)에 속하는 Anisakis simplex, Contracaecum, Pseudoterranova, Hysterothylacium 등의 유충에 의한 감염을 의미하나 대부분 Anisakis simplex (고래회충) 제3기 유충(L3)에 의해 일어난다. A. simplex 성충은 고래, 돌고래, 바다표범, 물개와 같은 바다포유류의 소화관에서 기생하며 사람은 운반숙주인 붕장어, 고등어, 조기, 멸치 오징어 등의 해산어류를 생식하거나 불충분하게 조리하여 섭취할 때 감염된다. 섭취된 유충은 급성 복통을 일으키거나 위장관 계통에 침입하여 호산구성 육아종을 형성한다. 최근에는 A. simplex 유충 감염이 알레르기 반응을 유도한다는 것이 밝혀져 새로운 식품알레르겐의 일종으로 주목받고 있다. 고래회충과에 속하는 여러 종의 유충들은 형태학적으로 매우 유사할 뿐만 아니라 다른 인체 기생 선류 유충과 혈청학적 교차반응도 높게 나타난다. 더구나 인체 감염시에는 충체의 수가 제한되거나, 충체의 일부만으로 진단하여야 하는 경우도 있으므로 보다 정확한 진단 방법이 필요하다.</p> <p>고래회충과의 유충을 구분하기 위한 시도로 ribosomal DNA (rDNA) 정보가 주목받고 있다. rDNA 가운데 유전자 지표로 가장 흔히 이용되는 ITS1-5.8S-ITS2 rDNA의 PCR product에 대한 RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism) 및 single-strand conformationn poly-morphism (SSCP) 분석은 고래회충과 Hysterothylacium adun-cum, Contracaecum osculatum 등의 종 동정에 성공적으로 적용되었다. 또 ITS-1과 ITS-2 PCR product의 sequence 및 SSCP 분석은 Contracaecum 및 A. simplex 종복합체의 자매종 확인에도 유용한 것으로 밝혀겼다. 뿐만아니라 PCR-RFLP 분석은 채집 장소에 무관하게 A. simplex 종 내에서 동일한 패턴을 보여 종구분에 유용한 것으로 드러났다. 그러나 고래회충유충증은 A. simplex 유충뿐만 아니라 Contracaecum, Pseudoterranova 등에 의해서도 발생하므로 이들에 대한 종 수준에서의 분자생물학적 진단을 위해서는 염기서열 변이가 심한 ITS보다 좀더 안정적인 \( 18 \mathrm { ~S } \mathrm { rDNA } \)가 보다 효과적인 도구가 될 가능성이 높다. 18 rDNA는 크기가 \( 1,800-2,000 \mathrm { bp } \) 이며, 염기서열이 매우 안정적으로 보존된 영역(highly conserved region)과 변이가 매우 심한 영역(highly variable region)으로 구성되어있어 18 rRNA/rDNA sequences 분석은 진핵생물의 초기 진화과정을 밝히는 분석도구로써 뿐만 아니라 여러 분류군사이의 근연관계를 밝히는 분자 지표로써도 널리 이용되고 있다.</p> <p>본 실험에서는 부산지역에서 횟감으로 흔히 사용되는 고등어(Scomber japonicus), 숭어(Mugil cephalus), 넙치(Paralichthys olivaceus), 아나고(Astroconger myriaster), 참돔(Pagrus major) 등 5종의 어류에서 수집한 A. simplex, Contracaecum type A, type prime 과 outgroup으로 Goezia spp.의 I8S rDNA의 PCR product에 대한 RFLP를 시행하여 감별진단법으로서의 활용 가능성을 확인해 보고자 하였다.</p>