전라남도산림환경연구소에서 꽃송이 버섯을 제공받아 분쇄기로 세절한 시료를 습식 분해법으로 증류수로 정용하고 여과해 검액으로 사용했는데 원자흡광광도계를 사용했고, 인의 정량은 molybdenum blue 흡광도법으로 비색 정량했다. 유리 아미노산의 형광 유도체화를 위해 PITC를 사용했고, \( 3.9 \times 300 \mathrm{~mm} \) Pico-Tag column을 사용하여 Table 1과 같은 조건에서 분석했다. 구성아미노산은 여과한 여액을 HPLC에 주입해 Pico-Tag column을 이용하여 분석했다. 비타민 분석은 시료 1g을 미량 영양성분 시험법에 따라 처리해 \(20 \mu \mathrm{l}\)을 취해 HPLC (Waters 510)로 분석했다.
<h1>재료 및 방법</h1><h2>재료</h2><p>실험에 사용된 꽃송이버섯은 전라남도 나주시 산포면에 소재한 전라남도산림환경연구소에서 자실체를 제공받아 충분히 건조하여 분쇄기(FM-681(C), HANIL)로 세절한 후 시료로 사용하였다.</p><h2>미네랄 분석</h2><p>미네랄 분석은 꽃송이 시료를 습식분해법으로 분해하여 증류수로 정용하고 여과하여 검액으로 사용하였다. 각 성분의 정량은 원자흡광광도계(Varian Model SpectrAA-300A)를 사용하였으며 인의 정량은 molybdenum blue 흡광도법으로 비색 정량하였다.</p><h2>아미노산 분석</h2><p>유리아미노산 분석은 시료 \( 10 \mathrm{~g} \) 에 \( 75 \% \) ethanol \( 20 \mathrm{ml} \) 를 가하고 이를 환류 냉각장치에 연결하여 \( 80^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 40분간 가열한 뒤, 이를 Büchner funnel을 사용하여 여과하였고 남은 고형물은 \( 75 \% \) ethanol \( 50 \mathrm{ml} \) 로 3회 세척하여 다시 여과하였다. 위의 여과액을 vacuum evaporator로 감압 건조하여 ethanol을 증발시키고 ethyl ether \( 50 \mathrm{ml} \) 로 3회에 걸쳐 재추출하였다. ether층을 회수하여 감압 건조시켜 잔류의 ether를 제거한 후 \( 0.2 \mathrm{M} \) citrate buffer (\(\mathrm{pH} 2.2\))를 가하여 시료 용액으로 사용하였다. 아미노산의 형광 유도체화를 위해 Edman's Reagent인 phenylisothiocyanate(PITC)를 사용하였으며, 이들 유도체를 분리하기 위해 \( 3.9 \times 300 \mathrm{~mm} \) Pico-Tag column을 사용하여 Table 1과 같은 조건에서 분석하였다.</p><p>구성아미노산은 Pico-Tag 방법에 의하여 시료 분말 \( 1 \mathrm{~g} \)에 \(6\mathrm{N}\)-HCl \(10 \mathrm{~ml} \)를 가한 후 \( \mathrm{N}_{2} \) gas로 충전시켜 밀봉하여 \( 110 \pm 5^{\circ} \mathrm{C} \)에서 24시간 가수분해시킨 다음 실온에서 냉각한 후 \(\mathrm{pH} 2.2\)의 sodium citrate buffer \( 3 \mathrm{ml} \)에 용해시켜 \( 0.2 \mu \mathrm{m} \) millipore filter로 여과하였다. 이 여액을 \( 200 \mu \mathrm{l} \)를 취해 HPLC에 주입하여 Pico-Tag column을 이용하여 유리아미노산 분석과 같은 조건에서 분석하였다.</p><h2>비타민 분석</h2><p>비타민 분석은 시료 \( 1 \mathrm{~g} \)를 식품공전의 미량 영양성분 시험법에 따라 처리하여 이 중 \( 20 \mu \mathrm{l} \)을 취해 HPLC (Waters 510)로 분석하였다. HPLC 분석조건은 \( \mathrm{C}_{18} \) column \( (\mu \)Bondapak \( \mathrm{C}_{18}\), \(3.9 \times 300 \mathrm{~mm}\), \(10 \mu \mathrm{m} \))이며 유속은 solvent \(30 \mathrm{ml} / \mathrm{hr} \), ninhydrin \( 20 \mathrm{ml} / \mathrm{hr} \) 이고, 압력은 solvent 55 bar, ninhydrin 12 bar이었다.</p>