토양 미생물복원제의 미생물 성질을 알아보기 위해 genomic DNA를 추출하고 DGGE를 실행했다. 여기서 동정된 대부분의 클론들은 uncultured bacterium으로 확인되었다. 또한, pH를 보정한 토양미생물 복원제와 촉진제가 첨가된 유류로 오염된 토양(DSP-3, \( 422. 2 \pm 54. 8 \mu \mathrm { g } / \mathrm { kg } \))의 활성 값이 다른 조건에 비해 높았음을 확인하였다.
<p>수분함량은 DS, DSP, DSP-1, DSP-2, 그리고 DSP-3가 각각 17.6, 23.5, 23.4, 21.5, 그리고 \( 19.1 \% \)로 나타났다. 초기 토양의 오염농도를 \( 15,000 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \) 되도록 디젤을 첨가하고 미생물 복원제를 \( 20 \% \)( \( \mathrm { w } / \mathrm { w } \)), 촉진제 \( 500 \mathrm { ~mL } \)를 첨가하고 \( \mathrm { pH } \)를 보정한 토양들의 TPH를 20일 후에 측정하였다. 그 결과, 초기 토양의 TPH는 \( 13398.5 \pm 245.7 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \) 였고, DS, DSP, DSP-1, DSP-2, 그리고 DSP-3는 \( 8707.7 \pm 591.7, 4235.4 \pm 83.1, 4396.3 \pm 11.4, 5903.1 \pm 492.4 \), 그리고 \( 4465.1 \pm 64.4 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \)였다. 20일 후에는 \( \mathrm { pH } \)를 보정한 토양미생물 복원제를 넣은 유류로 오염된 토양에서의 TPH 저감효과가 가장 뛰어난 것을 확인할 수 있었다. 10일 경과한 후의 결과를 살펴보면, DSP-1의 저감율은 \( 54.9 \% \)로 토양미생물 복원제를 넣은 유류토양 DSP( \(41.8 \% \)), \( \mathrm { pH } \) 보정한 토양미생물 복원제와 촉진제를 넣은 유류토양 DSP-3( \(37.9 \% \)), 토양미생물 복원제와 촉진제를 넣은 유류토양 DSP-2( \(28.7 \% \)), 유류로만 오염된 토양 DS( \(12.7 \% \)) 보다 저감율이 높은 것을 확인할 수 있었다.</p> <h2>DGGE를 이용한 미생물복원제의 동정</h2> <p>토양 미생물복원제에 들어있는 미생물의 성상을 알아보기 위해 시료로부터 총 genomic DNA를 추출한 후 DGGE를 수행하였다. DGGE fingerprints로부터 8개의 band를 선택하여 동정한 결과, Clone 들은 대부분은 토양에서 나오는 균으로서 아직 uncultured bacterium이 대부분이였다. 그 중에서도 Clone S2는 Leptospirillum sp.와 \(99 \% \)의 높은 유사성을 보였고, S3 Clone은 carbon dioxide-utilizing 미생물과 \(95 \% \)의 유사도를 보였다. S4는 금속광산에 존재하는 Acidiphilium sp.와 \(98 \% \)의 유사도를 보였으며, S9는 탄화수소계 유기화합물을 분해하는 미생물로 알려져있는 Pseudomonas sp.와 \( 96 \% \)의 높은 유사도가 있는 것으로 나타났다.</p> <h2>토양의 미생물 활성측정</h2> <p>탈수소 효소 활성(DHA)은 미생물의 호흡활동과 밀접한 관련이 있으며, 미생물의 활성 측정 할 수 있는 우수한 방법 중의 하나이다. 본 연구에서도 각 실험 조건 별 미생물 활성을 비교하기 위해 DHA를 측정 하였다. 실험이 10일 경과된 후 탈수소 효소 활성을 측정한 결과 \( \mathrm { pH } \)를 보정하고 토양미생물 복원제를 넣은 유류로 오염된 토양(DSP-1, \(894.2 \pm 174.3 \mu \mathrm { g } / \mathrm { kg } ) \)의 활성 값이 다른 조건들에 비해 매우 높은 것을 확인할 수 있었다. 또한 \( \mathrm { pH } \)를 보정한 토양미생물 복원제와 촉진제를 넣은 유류로 오염된 토양(DSP-3, \( 422.2 \pm 54.8 \mu \mathrm { g } / \mathrm { kg } \) )도 DSP-1에 비해 활성 값이 다소 낮지만 다른 조건들에 비해서는 높은 것을 확인 할 수 있었다. \( \mathrm { pH } \)를 보정한 DSP-1과 DSP-3의 토양은 \( \mathrm { pH } \)를 보정하지 않은 DSP, DSP-2의 토양에 비해 미생물 활성 값이 매우 높은 것을 확인하였다. 이는 미생물이 성장하는데 있어 산성화된 환경에선 미생물의 활성이 저하되는 것을 알 수 있었다. 시간이 지날수록 탈수소 효소 활성 값이 떨어지는 것을 확인하였는데 이는 유류저감과 시간경과에 따른 미생물의 탄소원 부족으로 인한 결과로 판단된다.</p>