Isoflavone 분석은 동결건조 후 분쇄한 시료 1g에 0.1 N HCl 2ml와 acetonitril 10ml를 첨가해 실온에서 2시간 교반하고 여과지로 여과한 여과액을 30\(^\circ \mathrm{C}\) 이하에서 진공농축해 80% methanol 10ml에 용해시킨 후 0.45\(\mu\mathrm{m}\) membrane filter로 여과해 HPLC의 분석시료로 사용했다. 두아청국장의 제조방법을 확립하기 위해 흑두의 침지조건을 실험하니 콩을 3시간 침지 후 2시간 물빼기를 반복하는 것이 수분흡수량이 효율적인 것으로 나타났다.
<h2>Isoflavone 분석</h2> <p>Isoflavone 분석은 동결건조 하여 분쇄한 시료 \( 1 \mathrm { ~g } \)에 0.1 N HCl \(2 \mathrm { ml } \)와 acetonitril (HPLC grade, 99.9%) \( 10 \mathrm { ml } \)를 첨가한 다음 실온에서 2 시간 교반한 후 여과지(No. 4)로 여과하여 그 여과액을 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \)이하에서 진공농축 시켜 \( 80 \% \) meth-anol (HPLC grade, 99.9 \%) \( 10 \mathrm { ml } \)에 용해시킨 다음 \( 0.45 \mu \mathrm { m } \) membrane filter로 다시 여과하여 HPLC의 분석시료로 사용하였다. Isoflavone isomer 분석을 위한 HPLC (LC-10AD, Liquid Chlomatograph)의 칼럼은 YMC-pack ODS-AM-303 \( (5 \mu \mathrm { m } , 25 \mathrm { ~cm } \times 4.6 \mathrm { ~mm } \) i.d \( ) \)을 사용하였고, UV/VIS Detector 유속은 solvent \( 1 \mathrm { ml } / \mathrm { min } \)로 하였다. 파장은 \( 254 \mathrm { ~nm } \)에서 3차 증류수의 \( 0.1 \% \) glacial acetic acid를 용매로 하여 \( 0.1 \% \) gla-cial acetic acid / acetonitrile linear을 이동상으로 하여 line-ar gradient법으로 분석하였다. Isoflavone의 표준품은 일본 후지코 주식회사에서 구입하여 사용하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>흑두의 침지 조건</h2> <p>흑두를 발아시켜 청국장을 제조하는 두아청국장의 제조방법을 확립하기 위하여 먼저 흑두의 침지조건을 검토하였다. 냉수에 6시간 침지시킨 시험구의 발아율은 12시간째에 약 \( 1 \%, 24 \) 시간째에는 약 \( 5 \% \)정도를 나타내었으나 12시간 침지시킨 시험구에서는 발아 12시간째에 \( 30 \% \), 24시간째에는 \( 50 \% \)정도의 발아율을 나타내었다. 그러나 3시간 침지후 2시간 물빼기를 3회 반복한 시험구에서는 발아 12시간째에 \( 50 \% \), 발아 24 시간째에는 \( 80 \% \)정도의 높은 발아율을 나타내었다. 그리고 6시간 및 12시간 침지시킨 흑두의 싹 길이는 불균일하였지만, 3시간 침지 후 2시간 물빼기를 행한 시험구 의 싹 길이는 매우 균일하였다. 이상의 결과로 두아청국장 제조를 위한 콩은 3시간 침지 후 2시간 물빼기를 반복하는 것이 수분흡수량이 보다 효율적인 것으로 생각 되어졌다.</p>