이 연구는 흑마늘 숙성기간과 S-allylcysteine의 함량, 그리고 고지방 콜레스테롤 식이로 인한 고지혈증 유발 및 흑마늘 급여에 따른 혈중 지질 개선효과를 살펴본다. 통마늘은 스테인리스 밀폐용기에 담겨 70℃, 상대습도 90%의 조건에서 10일, 15일, 20일 동안 숙성되며, HPLC 분석방법[2]을 통해 alliin, deoxyalliin, alliicin, dipeptide 등 마늘 성분의 표준물질이 분석된다.
<p>본 연구는 흑마늘 숙성기간에 따른 S-allylcysteine의 함량을 조사함과 동시에 흰쥐에 고지방 콜레스테롤 식이를 급여하여 고지혈증을 유발시켜 흑마늘을 저농도, 중농도, 고농도로 구분하여 급이한 후 혈중 지질 개선효과를 조사하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>재료</h2> <p>본 연구에 사용한 마늘은 2010년 6월에 경남 남해에서 난지형 마늘을 구매하여 실힘에 사용하였다.</p> <h2>흑마늘의 제조</h2> <p>통마늘을 흐르는 물에 한 번 씻은 다음 스텐레스 제 밀폐용기에 담은 후 온도 \( 70 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 상대습도 \( 90 \% \) 상태로 조걸된 항온항습 숙성실(Asung Co. Seoul, Korea)에 옮겨 10일, 15일,20 일 동안 숙성시켰다. 훅마늘 \( 150 \mathrm { ~g } \) 에 물 \( 375 \mathrm { ml } \) 를 넣은 후 환류 냉각기가 부착된 추출기에서 \( 100 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 15 시간 추출한 후 여과한 다음 추출액 농도를 12 Brix로 조절한 후 실험에 사용하였다.</p> <h2>HPLC에 의한 S-allylcysteine (SAC)의 분석</h2> <h3>흑마늘 추출액의 전처리</h3> <p>흑마늘에 동량의 증류수를 넣어 분쇄하고 착즙한 후 착즙액을 \( 17,600 \times g \) 에서 \( 10,000 \mathrm { rpm } \) 으로 30 분간 원심분리 (HMR-2001V, Hanil Industrial Co., Inchon, Korea)하여 상층액만을 취하여 최종농도가 \( 70 \% \) 가 되도록 에탄올을 가하여 침전을 시킨 후 상층액을 농축하여 에탄올를 제거하였다. 그후 methylene chloride를 넣은 다음 약 20 분간 교반한 후 \(10,000 \mathrm { rpm } \)에서 15분간 원심분리(HMR-2001V, Hanil Industrial Co., Inchon, Korea)하여 물층과 methylene chloride층을 분리하였으며 물층을 rotary vacuum evaporator (N-H Series, Eyela, Japan)로 농축하여 methylene chloride층을 완전히 제거하였다. 분석 시 \( 0.2 \) \( \mu \mathrm { l } \) nylon membrane filter로 여과하여 사용하였다.</p> <p>분석조건은 HPLC 분석방법[2]으로 이동상은 A용매[ \(20 \mathrm { mM } \) sodium phosphate monobasic dihydrate \( + 10 \mathrm { mM } \) so-dium 1-heptane-sulfonic acid, \( \mathrm { pH } 2.1 \) (adjusted with ortho-phosphoric acid \(85 \% \) ]와 B용매[A + acetonitrile \((50:50, \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \)] 로 하여 컬럼오븐의 온도는 \( 38 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 이동상의 유속은 분당 \( 0.4 \mathrm { ml } \)이고 UV 흡광도 \( 208 \mathrm { ~nm } \) 에서 alliin, deoxyalliin, alliicin, dipeptide와 같은 마늘 성분의 표준물질을 분석하였다.</p>