세포막의 DR4, DR5, Fas, TNFR-1에 apoptotic ligand인 TRAIL, FasL, TNF-a가 결합하면 apoptosis가 유발된다는 것을 본 연구에서 확인하였다. 이로 인해 AGS 위암세포에서 FS와 FYA가 apoptosis 유발에 death receptor pathway와 mitochondrial pathway가 관여하는 것을 확인하였다. 특히, FS와 FYA는 death receptor 관련 유전자의 발현 증가와 Bcl-2 family의 pro-apoptosis 인자의 발현 증가, anti-apoptosis 인자의 발현 억제, IAP family의 억제를 통해 apoptosis를 유발한다. 이어서 본 연구에서는 AGS 세포에서 caspases의 발현에 미치는 FS 및 FYA의 영향을 조사하였다.
<p>한편, 또 다른 경로로 알려진 extrinsic pathway는 mitochondria 비의존적인 apoptosis 과정으로 tumor necrosis factor (TNF) family의 death receptor들의 활성에 의해 야기되어 death receptor pathway라고도 한다. 세포막에 존제하는 DR4, DR5나 TNF receptor super family에 속하는 Fas, TNFR-1에 각각의 apoptotic ligand인 TRAIL, FasL, TNF-a가 결합하게 되면 Fas-associated with death domain protein (FADD) 또는 TNFRSF1A-associated via death domain (TRADD) 및 procaspase-8이 death-inducing signaling complex (DISC)를 형성하게 되어 caspase-8의 활성화에 의한 caspases cascade에 의하여 apoptosis를 유발하게 된다. 따라서 FS 및 FYA를 처리하였을 때 death receptor에 속하는 유전자들의 발현 변화를 살펴본 결과, FS를 처리한 경우, 처리된 FS의 양이 증가함에 따라 DR5, Fas 및 TRAIL의 발현양이 중가하는 것을 확인하였으며, FYA를 처리한 경우에는 DR5, Fas 및 FasL의 발현양이 증가하였다. 이러한 인자들의 발현 증가는 앞선 결과들과 유사하게 FS보다 FYA를 처리하였을 때 더욱 더 증가함을 알 수 있었다. 이로 인체 위암세포인 AGS에서 FS 및 FYA에 의한 apoptosis에 death receptor pathway에 연 관된 인자들이 관여할 것이라는 것을 유추할 수 있었고, 이상의 결과를 통하여 FS 및 FYA 처리에 의한 apoptosis 유발은 death receptor pathway에 관여하는 death receptor 관련 유전자의 발현 증가와 itochondrial pathway에 관여하는 Bcl-2 family의 pro-apoptosis 인자의 발현 증가 및 anti-apoptosis 인자의 발현 억제, 그리고 IAP family의 억제에 의해 이루어지는 것을 확인하였다.</p> <p>Apoptosis 유발에 결정적인 역할을 하는 것으로 알려진 caspase들은 cysteine protease로 알려져 있다. 일반적으로 비활성 전구체 상태로 존재하지만, apoptosis 신호를 받게 되면 기질에 특이적으로 가지고 있는 aspartate 잔기를 쪼개어 apoptosis 과정에 효과적인 형태로 모양을 바꾸는 가수분해과정을 겪으며 활성을 가지게 된다. Caspase는 크게 caspase-2, -8, -9 및 -10 과 같은 class Ⅰ 이나 caspase-3, -6 그리고 -7과 같은 class Ⅱ 두 가지로 나눌 수 있다. Class Ⅰ 에 속하는 caspase들은 특이적인 분자들과 상호작용하게 되어 신호적 복합체로 연결되고, 이러한 다양한 신호 전달을 통해 class Ⅱ에 속하는 caspase들을 활성화 시켜 apoptosis가 일어나는 동안에 classⅡ 의 caspase들이 세포질에 존재하는 수 백 개의 caspase 표적 단백질의 분해를 유발하게 된다. 많은 선행 연구에서 caspases의 활성화가 apoptosis의 유발에 대한 증거가 될 수 있다고 보고되어 있으므로, 본 연구에서는 AGS 세포에서 caspases의 발현에 미치는 FS 및 FYA의 영향을 조사하였다. Western blotting을 통하여 caspase의 발현 변화를 관찰한 결과, Fig. 7에서 볼 수 있듯이 FS 및 FYA를 처리하였을 때 caspase-3, -8 및 -9 모두 비활성형인 proform이 감소하였음을 확인할 수 있었다.</p> <p>이상의 결과에서 FS 및 FYA를 인체 위암세포인 AGS에 처리하였을 경우 농도 의존적으로 세포의 증식을 강하게 억제하였고, 이러한 세포 증식억제는 apoptosis 유도와 관련이 있음을 확인하였다. 이러한 apoptosis는 세포 표면에 존재하는 Fas에 FasL이 결합하여 일어나는 death receptor pathway 또는 pro-apoptosis 인자인 Bax의 증가와 anti-apoptosis 인자인 Bcl-2의 감소에 의헤 잍어나는 mitochondrial pathway를 통하여 유발될 것이라 유추된다. 특히 이러한 결과는 FS보다 FYA 처리군에서 더욱더 탁월한 효.과를 가지는 것으로 보아, 노란 아가콩이 효과적인 항암제로서의 가능성을 가지는 것을 제시하며, 이는 노란아가콩에 대한 지속적인 연구가 필요할 것이라 사료된다.</p>