EG를 이용하여 RAT의 급성 중독을 유도하였고, 그 결과 EG 중독에 따른 ER chaperones의 발현이 증가하거나 감소함을 확인할 수 있었다.RT-PCR 수행결과, Lung은 발현양상이 감소하는 경향을 보였고, Kidney는 감소하다 증가하는 양상, Stomach에서는 EG를 적용한 시간에만 증가하고 그 이후에는 감소하였다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <p>EG의 중독 사례는 자동차 부동액을 직접 교체하거나 잔디를 직접 깍는 미국에서 일년에 5,000 명 정도의 빈도로 발생되지만 국내에서는 드물다. 그러나 부주의한 보관으로 개나 고양이 등의 동물들의 사례가 빈번하고, EG 자체로는 낮은 독성을 보이나 간이나 신장에서 강한 독성을 띠는 대사산물을 생성한다. EG는 소화기계에서 흡수가 빠르고 4시간 안에 최고치에 달한다. 중독 후 초기에는 중추신경계와 대사장애가 나타나고, 빈호흡, 저혈압, 경련 및 폐침윤 등이 뒤따른다. 세뇨관의 손상으로 신세뇨관 괴사 및 출혈성 괴사를 일으키기도 한다.</p> <p>우선 EG를 이용한 rat의 급성 중독에 따른 주요 장기에서의 조직변화를 관찰하기 위해 rat를 관류고정한 후 조직을 절취하여 파라핀으로 포매하였다. 이를 절편하여 슬라이드에 붙여 H&E 염색을 수행하였다. 조직은 EG 처리군의 4시간과 12시간으로 나누었으나 조직변화의 시간 차이는 없어 12시간 처리군만을 확인하였다(Fig. 1)</p> <p>Lung은 폐포 벽이 약간 두꺼워지고 세포의 밀도가 높아진 것을 관찰하였고, liver는 중심정맥이 비교적 둥근 모양이며 간세포판(hepatic cell plate)이 방사상 구조로 길게 퍼지는 모양을 이루고 있는데 EG 처리군에서는 중심정맥이 변형되고 간세포판도 사방으로 퍼지지 못한 모양으로 관찰되었다. Kidney에서는 cortex 부분의 glomerulus를 중심으로 관찰한 결과 대조군에서 glomerulus가 모양이 흐트러지고 이루고 있는 모세혈관이나 혈관사이세포들이 감소하였다(Fig. 1C). EG의 경구투여로 인한 첫 번째 접촉부위이며 빠른 흡수가 일어나는 위는 위의 몸통부분을 이루는 가장 넓은 부위를 관찰하였다. 대조군에서는 고유위샘은 오목 pit이 선명하고 깊숙한 구조이며 세포배열이 규칙인데 반해 비교군에서는 pit이 거의 보이지 않고 융합되어 있으며 각 세포층의 배열이 짧고 불규칙해졌다.</p> <p>EG 이용한 rat의 급성 중독 유도 후 발생 된 주요 장기의 변화 및 괴사가 ER chaperones와 ER signaling sensors 유전자들의 발현조절에 관여하는지 확인하기 위하여 RT-PCR을 수행하였다. Total RNA를 주요 조직(lung, liver, stom-ach, kidney)에서 분리하였다. BiP은 ER lumen에서 미숙하거나 불안전한 단백질의 folding과 assembly를 돕는 general chaperon, calnexin은 ER lumen에서 당단백질의 folding과 assembly를 돕는 lectin chaperone, ERp29, ATF6, IRE1, PERK를 사용하였다.</p> <p>Lung에서는 소포체 샤페론 및 소포체 스트레스 센서들의 전체 발현양상이 감소함을 보이나 IRE1의 EG처리 4시간에서 증가하였다가 12시간에 감소하며 PERK는 크게 변화하지 않았다. 모든 유전자의 발현이 감소하는 것은 부동액의 급성중독에 의해 새로운 단백질 합성이 일어나지 않기 때문에 소포체 lumen에서 단백질 합성에 관련된 모든 유전자들이 활성이 떨어진 것으로 추정된다. Liver에서는 전체적인 발현양상이 증가하였다. 특히 IRE1과 PERK의 발현은 EG 처리 4시간에 많이 증가하고 있음을 확인하였으며 이는 간에서의 EG의 대사와 관련 있을 것으로 추정된다.Kidney에서는 전체적인 발현 양상이 감소하는 가운데 ERp29의 발현이 EG 처리 4시간에 감소 후 12시간에 다시 증가하는 양상을 보였다. Stomach에서의 발현 양상은 EG 처리 4시간에는 증가함을 보이지만 12시간에는 감소하였다. 그러나 PERK는 다른 발현 양상과 다르게 감소하였다가 증가하는 양상을 보였다.</p>