FAB-MS로 446의 분자량이 결정된 화합물 4는 IR 스펙트럼, 1H NMR을 통해 카보닐기, 수산기, 방항족 고리, pyridiyl 고리의 수소 방향성이 확인되었다. 당의 결합위치는 \( \mathrm { gHMBC } \)를 측정해 확인하였는데, anomer proton signa이 \( \mathrm { C } -7 \) 의 oxygenated olefin quaternary carbon signal과 cross peak를 보여 glucose가 7번에 결합하고 있음을 확인하였다. flavonoid 화합문들의 경우 국화꽃 추출문의 주요한 활성 본체임을 확인했다.
<p>화합물 4 는 positive FAB-MS에서 \( m / z 469[ \mathrm { M } + \mathrm { Na } ] ^ { + } \)의 분자 이온 peak가 관측되어 분자량을 446으로 결정하였다. 화합물 2 와 분자량이 \( 162 \mathrm { amu } \) 차이가 나는 것으로부터 육탄당이 한 개 더 존재함을 예상할 수 있었다. IR 스펙트럼으로부터 공역화된 카보닐기 \( \left (1656 \mathrm { ~cm } ^ { -1 } \right ) \), 수산기 \( \left (3394 \mathrm { ~cm } ^ { -1 } \right ) \), 방항족 고리 \( \left (3072 \mathrm { ~cm } ^ { -1 } \right ) \) 가 존재하는 것으로 확인되었다. \( { } ^ { 1 } \mathrm { H } \mathrm { NMR } (400 \mathrm { MHz } \), pyridine \( \left .d_ { 5 } , \delta_ {\mathrm { H } } \right ) \) 과 \( { } ^ { 13 } \mathrm { C } \operatorname { NMR } \left (100 \mathrm { MHz } \right . \), pyridine \( \left .d_ { 5 } , \delta_ {\mathrm { C } } \right ) \) spectrum을 통하여 화합물 2 와 매우 비슷한 구조에 당이 하나 더 결합헸음 을 알 수 있었다. 당에서 유래한 1개의 hemiacetal signal \( \left ( \delta_ {\mathrm { C } } \right . \) \( \left .101.6 ; \delta_ {\mathrm { H } } 5.82,1 \mathrm { H } , \mathrm { d } , J=7.2 \mathrm { ~Hz } \right ), 4 \) 개의 oxygenated methine signal \( \left ( \delta_ {\mathrm { C } } 78.4 ; 77.8 ; 74.8 ; 71.3 ; \delta_ {\mathrm { H } } 3.97 ; 3.48 ; 3.47 ; 3.15 \right ) \), 1 개의 oxygenated methylene signal \( \left ( \delta_ {\mathrm { C } } 62.3 ; \delta_ {\mathrm { H } } 3.94,1 \mathrm { H } \right . \), dd, \( \left .J=12.0,1.6 \mathrm { ~Hz } ; \delta_ {\mathrm { H } } 3.74,1 \mathrm { H } , \quad \mathrm { dd } , J=12.0,5.2 \mathrm { ~Hz } \right ) \) 의 chemical shift 및 anomer proton signal의 결합정수 \( (J=7.2 \mathrm { ~Hz } ) \) 로부터 당의 구조가 \( \beta \)-glucopyranose임을 확인하였다. 당의 결합위치를 확인하기 위하여 \( \mathrm { gHMBC } \) 를 측정하였다. 그 결과 anomer proton signal \( \left ( \delta_ {\mathrm { H } } 5.82, \mathrm { H } -1 \right ) \) 이 \( \mathrm { C } -7 \) 의 oxygenated olefin quaternary carbon signal \( \left ( \delta_ {\mathrm { C } } \right . \) 166.4)과 cross peak를 보 여 glucose가 7번에 결합하고 있음을 알 수 있었다. 위의 data를 문헌값과 비교하여 화합물 4 를 tilianin으로 구조 동정 하였다.</p> <p>Apigenin (1)은 항산화 활성(Agar 등, 2015), 항염 활성 (Tavares 등, 2014), 미백 활성(Karim 등, 2014), 주름개선 활성 (Yu 등, 2015), 간세포보호 활성(Wang 등, 2016), 항암 활성 (Coombs 등, 2016)등이 보고되어 있다. Acacetin (2)은 항산화 활성(Yadav와 Yadava 2013), 항균 활성(Komape 등, 2014), 미백 활성, 주름개선 활성(Karim 등, 2014) 등이 보고되어 있다.Cosmetin (3)은 항산화 활성(Aprotosoaie 등, 2016), 항박테리아 활성(Karlickova 등, 2016), 미백 활성(Bouzaiene 등, 2016)등이 보고되어 있다. Tilianin (4)은 항산화 활성(Kang 등, 1999), 항암 활성(Mohamed 2010), 항알레르기 활성(Xie 등, 2012), 항염 활성(Semwal 과 Semwal 2012), 미백 활성(Thanigaimalai 등2010) 등이 보고되어 있다. 이와 같은 결과를 통해 위의 flavonoid 화합문들이 국화꽃 추출문의 주요한 활성 본체인 것을 확인 하였다. 또한 공통적으로 미백 활성, 항산화 활성, 항염 활성, 주름 개선 활성, 항균 활성, 항알레르기 활성 등의 기능성 화장품과 관련된 다양한 활성을 나타내는 것으로 보아 국화꽃의 기능성 화장품 소재로서의 가능성을 확인하였다.</p>