들깨에 항생제와 제초제에 저항성을 부여하기 위해 형질전환을 수행한 경우, 항생제를 사용한 들깨 형질전환의 선발농도나 형질전환 방법에 유용하게 적용할 수 있다. 또한, Agrobacterium을 이용한 들깨 형질전환 방법은 병저항성과 지방산 생합성 유전자를 들깨에 전달함으로써 병저항성 품종과 지방산 조성이 변화된 들깨 품종을 개발할 수 있으며, 앞으로 다른 유용한 형질의 도입이 가능하게 되어 들깨의 신품종 육성에 기여할 것으로 기대된다.
<h2>형질전환체의 후대 유전분석</h2> <p>\( 0.3 \% \) 제초제를 살포하여 형질전환체로 확인된 76 개체 중에서 pMOG6-Bar 17개체와 pCK-Bar 17개체를 대상으로 T1 종자 파종하여 분리비와 유전자의 후대 유전여부를 확인하였다. 각 계통마다 100 개체의 종자를 파종하였으며 발아된 개체를 대상으로 잎이 4-6엽 정도 되었을 때 \( 0.3 \% \) 의 바스타 제초제를 살포하여 분리비를 검정한 결과는 Table 9 와 같다. 이중에서 \( 3 : 1 \)로 분리되는 개체는 20계통으로 single copy로 유전자가 삽입되었다고 생각되어지며, \( 15 : 1 \)로 분리되는 10계통은 two copy가 삽입된 것으로 생각되었다. 분리비는 \( 3 : 1 \)로 예상되나 P value가 신뢰범위를 넘어서 판별이 불가능한 개체도 4계통이 존재하였다. 정상적으로 생존한 개체를 이용하여 bar 유전자의 후대 유전여부 및 분리비를 검정한 결과는 멘델의 유전분리비를 따라서 정상적으로 유전하는 것을 확인하였다. 일부 발아하지 않은 개체는 겨울에 온실에서 단일조건에 종자를 수확하였기 때문에 종자의 성숙 정도에서 문제가 있었기 때문으로 생각된다.</p> <p>Genomic Southern의 결과 예측한 copy 수와 분리비에서 예상된 삽입유전자의 copy 수를 분석한 결과 single copy로 예상된 6 번과 51 번이 이론치와 일치하였다. 그러나 16 번과 17 번의 경우 Southern blot의 결과는 single copy 였으나 예상 분리비에서 \( 15 : 1 \)로 분리되어 2 copy의 유전자가 삽입된 것으로 판단된 경우와, 12, 62 번같이 Southern blot의 결과는 2 copy 로 예상되었으나 분리비는 \( 3 : 1 \)로 나타난 경우 등 Southern blot과 분리비는 일치하지 않는 경우가 더 많았다. 이와 같은 결과는 형질전환 작물이 도입유전자를 지니고 있으나 발현하지 않기 때문에 나타나는 현상으로 유전자가 복수로 삽입된 개체에서 많이 관찰되었다.</p> <p>항생제와 제초제저항성 유전자를 가지고 형질전환한 경우는 항생제를 이용한 들깨 형질전환시 선발농도나 형질전환 방법에 유용하게 사용될 수 있다. 또한 제초제저항성이 도입된 들깨를 이용시 형질전환 여부의 판별 용이하고 농작물을 재배와 관리할 때에 제초제살포에 의한 잡초 제거가 용이하여 비닐 멀칭 설치가 불필요하다. 이로 인해 노동력 절감, 환경오염방지, 생산량 증대의 효과가 기대되며 육종소재로 사용할 경우 교배후대에서 유전자의 도입 및 발현에 대한 검정이 편리하여 신품종의 육종소요기간 단축과 선발의 효율성을 높일 수 있다. 또한 Agrobacterium 을 이용한 들깨 형질전환 방법은 병저항성과 지방산 생합성 유전자 등을 들깨에 형질전환 함으로 병저항성 품종과 지방산 조성이 변화된 들깨의 품종 육성이 가능하고, 앞으로 다른 유용 형질의 도입이 가능해져서 들깨 신품종육성에 기여할 것으로 생각된다.</p>