동결 및 열풍건조된 누에분말과 이들의 발효 누에분말의 미네랄 함량은 AOAC 분석 방법으로 측정했으며, 지방산 분석은 Garces와 Mancha의 방법을 따라 진행하였다. 지방산의 비율은 총 지방산에 대한 각 지방산의 면적 비율로 표현되었다. 또한, 분해 후 감압농축된 시료는 Biochrom 30을 사용하여 아미노산을 분석하였고, 이를 위해 시료를 구연산dilution buffer를 이용해 \( \mathrm{pH} 2. 20 \)에 조절하여 분석하였다.
<h2>Mineral 함량 측정</h2> <p>동결 및 열풍건조 누에분말 및 이들 발효 누에분말의 미네랄 함량은 AOAC분석 방법에 준하여 측정하였다. 즉, 이들 시료 분말 \( 1 \mathrm{~g} \)씩을 각 \( 550^{\circ} \mathrm{C} \) 회화로에서 3시간 회화 시킨 후 \( 6 \mathrm{~N} \) \(\mathrm{HCl} \)에 용해시켜 완전히 산분해 시켜 수욕상에서 산을 완전히 제거하고, 이 건고물에 \( 3 \mathrm{~N} \) \(\mathrm{HCl} \)를 가하여 Whatman No. 4 여과지로 1차 여과하고 \( 0.2 \mu \mathrm{m} \) 필터로 여과시켜 원소 종류에 따라 각각 일정비율로 희석한 후 원자흡광 분광광도계 (AAnalyst 300, Perkin Elmer, Norwalk CT, USA)를 이용하여 측정하였다.</p> <h2>지방산 조성 분석</h2> <p>동결 및 열풍건조누에 분말의 지방산 분석은 Garces 및 Mancha 방법으로 행하였다. 즉, 동결 및 열풍건조누에 분말 \( 1 \mathrm{~g} \)에 \( 15 \mathrm{ml} \) chloroform 및 \( 7.5 \mathrm{ml} \) methanol 혼합액(2 : 1)을 넣고 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 30분간 가온 추출한 후 chloroform 및 methanol 혼합액 (2: 1)으로 \( 25 \mathrm{ml} \)로 맞추어 여과 시켰다. 여과 한 용액에 \( 4.5 \mathrm{ml} \)의 증류수를 가하여 혼합시킨 후, \( 3,000 \mathrm{rpm} \)에서 15분간 원심분리 하여 상층액을 버리고 chloroform 층을 질소가스 하에서 농축하여 \( 5 \mathrm{ml} \)의 석유에테르로 다시 용해하였다. 추출된 지질 용액에 methanol : \(\mathrm{HCl} \) (5:1, \(\ v/v\% \)) 용액을 가하여 \( 65^{\circ} \mathrm{C} \)에서 3시간 methylation 한 후 hexane으로 지방산 methylester를 추출하였다. 지방산 분석은 Omega-Wax capil-lary column \( (30 \mathrm{~m} \times 0.25 \mu \mathrm{m} \), Supelco, USA)을 사용하여 Gas chromatography (GC-17A, Shimadsu, Koyto, Japan)로 분석하였다. 캐리어 가스는 헬륨을 사용하였고, injection 온도는 \( 250^{\circ} \mathrm{C} \), oven 온도는 \( 180^{\circ} \mathrm{C} \) 및 detection 온도는 \( 260^{\circ} \mathrm{C} \)로 하였다. 지방산 분석 결과는 각 지방산 표준물질과 동일한 re-tention time에 검출된 것으로 하였으며, 이때 검출된 총 지방산의 면적에 대한 각 지방산의 면적 비율(%)로 나타내었다.</p> <h2>아미노산 분석</h2> <p>구성 아미노산 분석은 시료 \( 0.2 \mathrm{~g} \)에 \( 15 \mathrm{ml} \) performic acid, \( 6 \mathrm{~N} \) \(\mathrm{HCl}\) \(15 \mathrm{ml} \)를 가하여, \( 110^{\circ} \mathrm{C} \) dry oven에서 24시간 이상 동안 산 가수분해 시켰다. 분해 된 시료를 \( 55^{\circ} \mathrm{C} \) Water bath에서 감압농축 한 후 \( \mathrm{pH} 2.20 \) 구연산dilution buffer로 \( 25 \mathrm{ml} \)에 volumetric flask에 정용하여 일정량을 아미노산 자동분석기 Biochrom 30 (Biochrom, UK)를 이용하여 분석하였다.</p>