본 실험에 사용된 시험 물질인 두릅순은 새순을 채취하였으며, 두릅 잎은 두릅새순이 완전히 자란 잎을 채취하여 수세하고, 통풍이 잘되는 음지에서 자연 건조 시킨 후 100 mesh 분말로 만들어 시료로 사용하였고, 시료 추출 후 폴리페놀화합물의 함량과 무기물 측정을 각각 흡광도와 원자흡광분광광도계를 이용하여 측정할 수 있도록 하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>실험 재료</h2> <p>본 실험에 사용된 시험 물질인 두릅순은 2008년 3~4월경 경남 양산시 동면 인근에서 자생하는 길이 \( 10 \mathrm{~cm} \) 이하의 식용 적기인 새순을 채취하였으며, 두릅 잎은 두릅새순이 완전히 자란 잎을 채취하여 수세하고, 통풍이 잘되는 음지에서 자연 건조 시킨 후 100 mesh 분말로 만들어 시료로 사용하였다.</p> <h2>시료의 추출 및 수율 측정</h2> <p>수용성 추출물은 두릅 순 및 두릅 잎 건조 분말 시료에 10배 양의 증류수를 가한 후 \( 80^{\circ} \mathrm{C} \) 항온수조에서 3시간씩 교반하면서 3회 반복 추출하였으며, 에탄올 및 메탄올 각 \( 70 \% \) 용매를 수용성 추출물과 동일한 방법으로 추출한 후 추출액을 모아 여과지(Whatman No.2)로 여과시켜 여과액을 rotatory vacuum evaporator로 감압 농축하여 각각의 용매를 제거시킨 후 freeze dryer로 동결건조 하여 추출 수율을 구하였다.</p> <h2>총 폴리페놀 화합물의 함량 측정</h2> <p>총 폴리페놀 화합물의 함량은 페놀성 물질이 phosphomolybdic acid와 반응하여 청색을 나타내는 것을 이용한 Folin-Denis법을 약간 변형시켜 측정하였다. 즉, 시료용액 \( 0.5 \mathrm{~ml} \)에 Folin-ciocalteu's phenol reagent \( 2.5 \mathrm{~ml} \)를 첨가하여 잘 혼합하고 5분간 실온에서 방치하였다. 정확히 5분 반응시킨 후 \( 7.5 \% ~ \mathrm{Na}_{2} \mathrm{CO}_{3}~ 2~ \mathrm{ml} \)를 가하여 혼합하고 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \)에서 5분간 발색시킨 후 \( 760 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 이때 총 폴리페놀 화합물은 tannic acid를 이용하여 작성한 표준곡선으로부터 함량을 구하였다. Tannic acid를 이용한 표준곡선은 tannic acid \( 1 \mathrm{~g} \)을 \( 50 \% \) 메탄올용액 \( 1 \mathrm{~ml} \)에 녹이고 최종농도가 0, 50, 100, 150, 200, 300 및 500 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 용액이 되도록 취하여 위와 같은 방법으로 760\(~nm\)에서 흡광도를 측정하여 작성하였다.</p> <h2>무기물 함량 측정</h2> <p>두릅 순 및 두릅 잎 동결건조 분말의 무기물 함량은 AOAC 분석 방법에 준하여 측정하였다. 즉, 두릅 순 및 두릅 잎 동결건조 분말 \( 1 \mathrm{~g} \)을 각 \( 550^{\circ} \mathrm{C} \) 회화로에서 3 시간 회화시킨 후 \(6~\mathrm{N~HCl}\)에 용해시켜 완전히 산분해 시켜 수욕상에서 산을 완전히 제거하고, 이 건고물에 \(3~ \mathrm{N~HCl}\)를 가하여 Whatman No. 4 여과지로 여과하여 원소 종류에 따라 각각 일정비율로 희석하여 원자흡광 분광광도계(AAnalyst 300, Perkin Elmer, Norwalk, CT, USA)를 이용하여 측정하였다.</p>