본 실험은 부산지역에서 유통되고 있는 유전자재조합 표시대상 수입식품 및 국내생산 식품 100건을 구입하여 CTAB법 또는 Quiagen DNeasy Plant Maxi Kit를 사용하여 DNA를 추출하여 유전자재조합 식품의 표시제 이행실태 및 표시 감시업무에 도움을 주고 소비자의 알권리 충족을 위한 정보로 활용도가 높다고 사료된다.
<p>본 실험의 결과를 기초로 유전자재조합 식품의 표시제 이행실태 및 표시 감시업무에 도움을 주고 소비자의 알권리 충족을 위한 정보로서 그 활용도가 높다고 사료된다.</p> <h1>재료 밎 방법</h1> <h2>검체 구입</h2> <p>검체는 부산지역에서 유통되고 있는 유전자재조합 표시대상 수입식품 및 국내생산 식품을 대상으로 하였다. 구입 검체는 총 100건으로 콩 함유 가공식품 80 건, 옥수수 함유가공 식품 20건이었다.</p> <p>검체는 생산지별로 국내산 82건, 수입산 18건이었으며 식품유형별로 두유 13건, 된장 14건, 혼합장 6건, 청국장 3건, 춘장 2건, 고추장 1건, 두류가공품 17건, 곡류가공품 5건, 두부류 11건, 영아용◦성장기용 조제식 5건, 기타가공품 3건, 옥수수통조림 6건, 과자류 7건, 옥수수차 3건, 빵류 2건, 옥수수전분 1 건, 면류 1 건 이었다. 한편 수입산의 경우 원산국별로 일본산 11건, 미국산 3건, 프랑스산 2건, 태국산 1 건, 네덜란드산 1 건이었다.</p> <h2>시료 전처리</h2> <p>시료전처리 및 DNA 추출, 분석은 식품의약품안전청에서 고시한 유전자재조합식품 검사지침에 따라 실험하였다. 즉 두유 등 수분함량이 높은 시료는 \(8000×g \)로 15분간 원심 분리 후 얻으진 고형분을 분석 시료로 취하였고, 스낵과자 등 당분 함량이 높은 검체는 증류수를 가하여 당분을 제거한 후 분석 시료로 사용하였다. 된장 등 모든 수분 함유 고형상 시료는 \( 55 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 건조기에서 수분 증발시킨 후 막자사발을 이용하여 완전 마쇄하여 DNA추출에 사용하였다.</p> <h2>DNA 추출</h2> <p>DNA 추출은 cetyl-trimethyl-ammonium-bromide (CTAB) 법과 상용 kit로 추출하는 방법 등이 있으나 CTAB법은 phe-nol, chloroform, isoamylalcohol 등의 유해시약의 사용과 정제조작이 번거로워 상용 kit인 Quiagen DNeasy \( { } ^ {\mathrm { TM } } \) plant maxi kit를 사용하였다.</p> <p>추출된 DNA의 농도 및 순도는 UV/VIS spectrophotometer(Ultrospec 3100 pro, Amersham Pharmacia, England)를 이용하여 \( 230,260,280 \mathrm { ~nm } \)에서 각각 흡광도를 측정한 후 \( \mathrm { O } . D_ { 260 } \)에서 측정값이 1 일때 DNA 농도가 \( 50 \mathrm { ng } / \mathrm { ul } \)가 되도록 추출 DNA의 농도를 계산하였고, 추출 DNA의 순도는 \( \mathrm { O } .D_ { 260 } / \) \( \mathrm { O } .D_ { 280 } \) 이 1.7 ~ 2.0 사이의 것을 시료로 사용하였다. 또한 추출 DNA는 \( 0.8 \% \) agarose gel (TaKaRa LO3, Japan) 상에서 50 volts, 30분간 전기영동하여 DNA 상태를 확인하였으며 이때 marker로는 NHindIII digest (Promega, Madison, USA)를 사용하였다.</p>