Bcl-2 family 유전자 중 apoptosis 유발과 관련이 있는 Bax의 경우 resveratrol의 처리에 의하여 다소 발현이 증가, apoptosis 억제와 관련이 있는 \(\mathrm{Bcl-X_L}\)의 발현은 resveratrol 처리 농도 의존적으로 감소, Bcl-2의 경우 큰 변화 없음을 알수 있었고, resveratrol의 처리에 의한 apoptosis 유발에서 PARP 및 \(\beta\)-cataenin 등과 같은 단백질의 분해가 동반되며, 이는 resveratrol에 의한 caspase와 같은 효소의 활성화에 기인된 것으로 추정되고, Sp-1 및 PCNA 단백질이 resveratrol에 의한 apoptosis 유도 표시 단백질로 사용될 수 있음을 의미한다.
<h2>Bcl-2 family의 발현에 미치는 resveratrol의 영향</h2> <p>한편 apoptosis는 다양한 유전자의 발현에 의하여 조절되는데 그중 가장 중요한 유전자로 알려진 Bcl-2 family에 속하는 유전자 산물들은 apoptosis를 직접적으로 유발하거나 억제하는데 관여하며, 그들 사이의 상대적인 유전자 발현의 양적 차이에 의해 apoptosis 유발 여부가 결정 되어진다. Bcl-2 family의 대표적 유전자인 Bcl-2 member에 속하는 유전자 산물들은 anti-apoptotic 인자로서 apoptosis의 유발을 억제하는 기능을 가지며, Bax member에 속하는 유전자들은 pro-apoptotic 인자로 apoptosis의 유발과 관계가 있다. 이들은 세포 내 소기관 중 mitochondria로부터의 cytochromec를 유리시켜 종양억제 유전자인 p53, cysteine-related pro-tease인 caspase, DNA의 단편화와 연관된 endonuclease 등의 활성을 조절한다. 이들은 서로 dimer의 형태로 존재하며 그들의 발현 수준에 변화가 초래되면 apoptosis가 유발되는 것으로 알려져 있다. 따라서 resveratrol의 처리에 의한 A549 폐암세포의 apoptosis 유발이 Bcl-2 family의 발현 변화와 관련이 있는 것인지를 조사하기 위하여 Bcl-2 family에 속하는 몇 가지 유전자들의 전사 수준에 미치는 resveratrol의 영향을 조사하였다. Fig. 3B에 나타낸 바와 같이 apoptosis 유발과 관련이 있는 Bax의 경우 resveratrol의 처리에 의하여 다소 발현이 증가하였으며, apoptosis 억제와 관련이 있는 \(\mathrm{Bcl-X_L}\)의 발현은 resveratrol 처리 농도 의존적으로 매우 감소되었으며 Bcl-2의 경우 큰 변화는 없었다. 즉 resveratrol 처리에 의한 Bax 유전자의 상대적인 발현의 증가가 apoptosis 유발과 어느 정도 관련성이 있음을 알 수 있었다.</p> <h2>Sp-1, PCNA 및 \(\beta\)-catenin 단백질의 발현에 미치는 res-vetarol의 영향</h2> <p>세포내외의 어떤 신호 전달에 의한 apoptosis 유발과정에는 다양한 protease 들의 활성화로 특정 단백질의 분해 현상을 관찰할 수 있으며, 이는 apoptosis가 유발되었다는 생화학적 지표로 많이 사용되어지고 있다. 가장 많이 사용되어지는 apoptosis 표적 단백질로는 poly (ADP-ribose) polymerase (PARP), \(\beta\)-cataenin 및 Rad 51 등이 있으며, 이들 단백질의 분해는 대부분의 apoptosis 유발에 가장 중요한 역할을 하는 caspase의 활성화에 의한 것으로 알려져 있다. 그리고 최근 연구에 의하면 전사조절인자인 Sp-1 단백질 역시 활성화된 caspase의 기질이 될 수가 있으며, 세포주기 진행에 중요한 조절인자인 proliferating cell nuclear antigen (PCNA) 단백질도 apoptosis가 유발되었을 경우 발현의 감소가 동반될 수 있는 것으로 보고되어져 오고 있다. 그리고 resveratrol에 의한 apoptosis 유발에서 PARP 및 \(\beta\)-cataenin 등과 같은 단백질의 분해가 동반되는 사실은 이미 선행연구에서 보고된 바 있으며, 본 연구에서도 resveratrol의 처리에 의하여 \(\beta\)-cataenin의 발현이 감소함을 확인하였다. 따라서 부가적으로 Sp-1 및 PCNA와 같은 단백질이 resveratrol 처리 의한 apoptosis 유발과정에서 분해될 수 있을 지의 여부를 조사하였으며, Fig. 4 의 결과에서 알 수 있듯이 resveratrol의 처리 시간과 농도가 증가될수록 두 단백질 모두 절단된 분절화 현상을 뚜렷하게 관찰할 수 있었다. 이는 아마도 resveratrol에 의한 caspase와 같은 효소의 활성화에 기인된 것으로 추정되며, Sp-1 및 PCNA 단백질이 resveratrol에 의한 apoptosis 유도 표시 단백질로 사용될 수 있음을 의미한다. 아울러 이러한 단백질들이 어떤 경로를 통하여 분해되는지에 관한 추가적인 연구가 필요할 것으로 생각된다.</p>