우리나라 전역에서 볼 수 있는 인동덩굴은 반상록활엽 덩굴성 관목으로, 한약재명으로 "금은화"라고 한다. 이 연구는 항균, 항염증, 항당뇨 등의 효능과 항산화 효능을 갖는 인동덩굴 추출물의 피부 광노화에 대한 세포 보호 효과를 확인하고자 하는 연구이다. 항산화 평가법을 사용하여 경동시장에서 구입한 인동덩굴의 ROS에 대한 항산화능을 재평가하고, 광노화로 인한 세포 손상에 대한 세포 보호 효과를 조사하여 항산화 기능성 화장품 소재로서 개발 가능성을 확인하고자 한다.
<p>본 연구에서 사용한 인동덩굴(Lonicera japonica Thunb.)은 우리나라 전역의 산에서 자라는 반상록활엽 덩굴성 관목으로, 한약재명으로는 “금은화”라고 한다. 예로부터 인동덩굴의 줄기, 꽃, 열매 등은 고열, 급성 간염, 염증 등에 약용으로 사용되어왔지만 약간 독성이 있어 오래 먹으면 좋지 않다고 알려져 있다. 인동덩굴 추출물의 효능으로 항균, 항염증, 항당뇨에 대한 연구가 일부 보고되었다. 인동덩굴의 항산화 효능은 라디칼 소거능으로 확인된 바가 있으나, 피부에서 생성되는 ROS와 이에 따른 손상에 대한 연구로는 진행되지 않았다. 다시 말해, 실제로 피부 세포 및 조직에서 나타나는 다양한 종류의 활성산소종 생성 시스템인 \( \mathrm { Fe } ^ { 3 + } - \mathrm { EDTA } / \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 계에서의 총 항산화능 평가나 광노화의 중요한 실험 모델 중 하나인 광증감 반응으로 생성되는 \( { } ^ { 1 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 등의 활성산소에 의해 개시되는 세포막 파괴와 세포 손상에 대한 세포 보호 효과에 대한 연구는 매우 미흡한 실정이다. 따라서 본 연구에서는 상기에 제시된 항산화능 평가와 함께 피부 각질 형성 세포인 HaCaT 세포에서 과산화수소 및 자외선으로 유도된 산화적 스트레스에 대한 인동덩굴 추출물 및 분획물에 대한 세포 보호효과를 조사하였다.</p> <p>본 연구는 피부 광노화에서 중요한 항산화 평가법을 이용하여 식물유래 천연 항산화제로서 인동덩굴의 각종 ROS에대한 항산화능을 재평가함으로써 화장품에서 꼭 필요한 항산화 기능성 화장품 소재로서 개발 가능성이 있는지를 확인하고자 하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>기기 및 시약</h2> <p>UV-visible spectrophotometer는 Cary 50 (Varian, Australia), 화학발광기는 6-channel LB9505 LT (Berthold, Germany)를 사용하였다. HPLC는 Shim-pack VP-ODS C18 column ( \( 250 \mathrm { ~mm } \times 4.6 \mathrm { ~mm } , 5 \mu \mathrm { m } ) \) (Shimadzu, Japan) 제품을 사용하였다. Free radical 소거 활성에 사용한 1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), EDTA, luminol, Folin-ciocalteu's phenol reagent은 Sigma chemical Co. (USA)에서 구입하였다. 기타 \( \mathrm { FeCl } _ { 3 } \cdot 6 \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } \) 는 Junsei Chemical Co. (Japan) 제품을, \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 는 Dae Jung Chemical \& Metals (Korea)사 제품을 사용하였다. 에탄올( \( \mathrm { EtOH } ) \), 메탄올 \( ( \mathrm { MeOH } ) \), 에틸아세테이트(EtOAc), n-헥산 등 각종 용매는 시판 특급시약을 사용하였다. 비교물질로 사용한 ( + )- \( \alpha \)-tocopherol (1,000 IU vitamin E/g), L-ascorbic acid, apigenin, caffeic acid, coumaric acid, luteolin은 Sigma Chemical Co. (USA)에서 구입하였다. 실험에 사용한 인동덩굴은 2017년 4월 서울 경동시장에서 구입하여 사용하였다.</p>