양파 껍질 추출물의 항산화 활성 검증을 위해 다양한 분석을 시행하였다. 폴리페놀 화합물 함량은 Follin-Dennis의 방법을, DPPH 에 대한 전자 공여능은 Abe 등과 Yamaguchi 등의 방법을, SOD 유사활성은 Marklund와 Marklund의 방법을 Yen과 Chen 의 방법을 변형하여 분석했다.
<h2>양파껍질 추출물의 항산화 활성 검증</h2><h3>항산화 시료 제조</h3><p>추출물을 \( 50 \% \) 발효주정으로 용해하여 \( 10,30,50,100 \mu \mathrm{g} / \) \( \mathrm{ml} \) 의 농도가 되도록 제작하여 시료로 사용하였다.</p><h3>페놀성 화합물 함량 분석</h3><p>폴리페놀 화합물 함량은 Follin-Dennis의 방법을 사용하여 분석하였다. 증류수 \( 1.56 \mathrm{ml} \) 에 각각 농도로 희석된 추출물 \( 40 \mu \mathrm{l} \) 를 넣고, \( 2 \mathrm{~N} \) Follin-Ciocalteu's reagent (Sigma chemical Co., MO, USA) \(100 \mu \mathrm{l}\) 를 주입하여 5분간 반응시킨 다음, \( 20 \% \) sodium carbonate \( 300 \mu \mathrm{l} \) 첨가하고 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 30 분간 반응시켰다. 반응 종료 후, 반응액의 흡광도를 \( 750 \mathrm{~nm} \) 에서 측정하고, gallic acid를 사용하여 검량곡선을 작성한 후 계산식에 활용하였다.</p><h3>DPPH radical 소거능</h3><p>시료의 항산화 효과를 측정하기 위해 DPPH 에 대한 전자 공여능은 Abe 등과 Yamaguchi 등의 방법을 이용하여 측정하였다. \( 150 \mu \mathrm{M}\) DPPH 용액 \( 1 \mathrm{ml} \) 에 농도별로 조제한 시료 \( 200 \mu \mathrm{l} \) 와 ethanol \( 800 \mu \mathrm{l} \) 를 혼합하고, vortex mixer로 10초간 진탕 한 후 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) 의 암실에서 30 분간 반응시켰다. 반응시킨 후 spectrophotometer 을 이용하여 \( 517 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하였고, 비교 항산화 물질로 ascorbic acid 를 이용하였다.</p><h3>Superoxidase dismutase (SOD) 유사활성</h3><p>SOD 유사활성은 Marklund와 Marklund의 방법에 따라 시행하였다. 각 농도별로 희석한 시료 \( 0.2 \mathrm{ml} \) 에 tris-\( \mathrm{HCl} \) buffer \( 3 \mathrm{ml} \) (\(50 \mathrm{mM}\) trihydroxymethyl aminomethane, \( 10 \mathrm{mM} \) EDTA, \( \mathrm{pH} 8.5)\) 와 \( 7.2 \mathrm{mM} \) pyrogallol \( 0.2 \mathrm{ml} \) 를 혼합하여 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 10 분간 반응시켰다. \( 1 \mathrm{~N}\) \(\mathrm{HCl}\) \(1 \mathrm{ml} \) 로 반응 정지시킨 후 반응액 중 산화된 pyrogallol의 흡광도를 \( 420 \mathrm{~nm} \) 에서 측정하였으며, 비교 항산화 물질로는 ascorbic acid를 같은 농도로 제조하여 SOD 유사활성을 비교하였다.</p><h3>환원력 측정</h3><p>양파껍질 추출물의 환원력은 Yen과 Chen 의 방법을 변하여 이용하였다. 각 농도별로 희석한 시료 \( 0.25 \mathrm{ml} \) 와 \( 200\mathrm{mM} \) sodium phosphate buffer ( \( \mathrm{pH} 6.6 \) ) \( 0.25 \mathrm{ml} \) 그리고 potas-sium ferricyaide \( (10 \mathrm{mg} / \mathrm{ml}) 0.25 \mathrm{ml} \) 를 혼합하여 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 20분간 반응시킨 후 TCA \((100 \mathrm{mg} / \mathrm{ml}) \) 시약 \( 0.25 \mathrm{ml} \) 를 첨가하고 \( 1,350 \mathrm{rpm} \) 에서 15 분간 원심분리 하였다. 원심분리 후 상층액 \( 0.5 \mathrm{ml} \) 와 증류수 \( 0.5 \mathrm{ml} \) 그리고 \( 0.1 \% \) ferric chloride \( 0.1 \mathrm{ml} \) 를 혼합한 후 \( 700 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하였다. 비교 항산화 물질로는 ascorbic acid를 이용하였으며 환원력의 값은 흡광도 값으로 표시하였다.</p>