에탄올 추출물의 경우 공진단 에탄올 추출물에서 가장 높은 수율의 추출물이, 곰피 에탄올 추출물에서 가장 낮은 수율의 추출물이 획득되었으며 열수 추출물의 경우 공진단 열수 추출물에서 가장 높은 수율이 획득되었고, 다시마 열수 추출물에서 가장 낮은 수율 추출물이 획득되었다. 에스트로겐 유사물질은 에스트로겐을 모방해 세포 내에 있는 에스트로겐 수용체와 결합하고 DNA의 특정 염기서열인 estrogen re-sponsive element (ERE)를 인식하여 결합하므로 에스트로겐 유사활성이 가장 높게 나타난 다시마 열수 추출물을 공진단 제조의 원료로 첨가하는 방법으로 해조공진단을 제조하여, 갱년기를 인위적으로 유도한 실험 동물에 투여한 후 갱년기에 나타나는 혈소판 웅집 및 혈중 지질 조성변화를 검토하였다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>공진단 및 갈조류 추출물의 추출수율</h2> <p>공진단 및 갈조류를 \( 80 \% \) 에탄올 혹은 3 차 증류수로 \( 80^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 8시간 동안 추출하고 농축시킨 후 획득한 에탄올 혹은 열수추출물의 수율은 Table 2에 나타내었다. 그 결과, 에탄올 추출물의 경우 \( 13 \sim 61 \% \)의 수율을 나타냈으며, 열수 추출물의 경우 \( 10 \sim 57 \% \)의 수율을 나타내었다. 에탄올 추출물의 경우 공진단 에탄올 추출물에서 \( 61 \% \)로 가장 높은 수율의 추출물이 획득되었고, 곰피 에탄올 추출물에서 \( 13 \% \)로 가장 낮은 수율의 추출물이 획득되었다. 열수 추출물의 경우 공진단 열수 추출물에서 \( 57 \% \)로 가장 높은 수율이 획득되었고, 다시마 열수 추출물에서 \( 10 \% \)로 가장 낮은 수율 추출물이 획득되었다.</p> <h2>갈조류 추출물의 에스트로겐 유사활성 측정</h2> <p>생물체내로 유입된 에스트로겐 유사물질은 에스트로겐을 모방하여 세포 내에 있는 에스트로겐 수용체(estrogen re-ceptor, ER)와 결합하고 DNA의 특정 염기서열인 estrogen re-sponsive element (ERE)를 인식하여 결합한다. 이러한 DNA상의 반응인자의 전사를 증대시키고 결국 특정 단백질의 발현을 유도하여 에스트로겐 유사물질에 의한 세포반응을 유도하는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서는 에스트로겐 수용체를 발현하는 것으로 알려진 인체 유방암 세포주 MCF7에 에스트로겐에 반응성을 나타내도록 고안된 CAT리포터 플라스미드인 pDsCAT-ERE119-Ad2MLP를 도입한 in vitro 검출시스템을 사용하여 에스트로겐 유사활성을 측정한 결과를 Fig. 1 에 나타내었다. 공진단 추출물에 대한 에스트로겐 유사활성을 측정한 결과, 통계적으로 유의한 에스트로겐 유사활성이 나타나지 않았다. 한편, 갈조류 추출물에 대하여 에스트로겐 유사활성을 측정한 결과, 곰피 열수 추출물은 대조군과 비교하여 통계적으로 유의한 에스트로겐 유사활성이 나타나지 않았으나, 다시마 및 미역 열수 추출물의 경우, 통계적으로 유의한 에스트로겐 유사활성을 나타내었다. 한편, 이들 세 추출물 을 1:1:1 (w:w:w)로. 혼합한 혼합물인 Three mixture (1:1:1)도 \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 의 농도에서 통계적으로 유의한 에스트로겐 유사활성이 나타났으나, 이러한 결과는 주로. 다시마 열수 추출물의 높은 에스트로겐 유사활성에 기인한 것으로 판단되었다. 에탄올만을 처리한 음성 대조군과 비교하여 다시마 열수 추출물은 3.0배, 미역 열수 추출물은 1.5배, three mix (1:1:1)은 3.1배의 에스트로겐 유사활성을 나타냈으며, 다시마 열수 추출물은 양성 대조군인 \( 17 \beta \) - estradiol의 \( 10^{-7} \mathrm{M} \) 농도에서의 활성보다 더 높은 활성을 보였다. 갈조류인 다시마, 미역, 곰피 에탄을 추출물의 에스트로겐 유사활성을 측정한 결과, 모든 농도에서 통계적으로 유의한 에스트로겐 유사활성을 나타내지 않았다. 따라서, 에스트로겐 유사활성이 가장 높게 나타난 다시마 열수 추출물을 공진단 제조의 원료로 첨가하는 방법으로 해조공진단을 제조하여, 갱년기를 인위적으로 유도한 실험 동물에 투여한 후 갱년기에 나타나는 혈소판 웅집 및 혈중 지질 조성변화를 검토하였다.</p>