경제 수준의 향상과 함께 동물성 식품 소비량이 증가하면서, 대장암과 비만증 등의 성인병이 증가하게 되었다. 이를 예방하기 위해 가공식품에 식이섬유를 첨가하고 있으며, 알긴산이 풍부하게 함유된 미역, 다시마 등 해조류의 식이섬유에 대한 관심이 새롭게 부각되고 있다. 본 연구에서는 polymannuronate를 부분가수분해하여 분자량별로 제조한 \(40\mathrm{kDa}\), \(10\mathrm{kDa}\) polymannuronate와 전분자량 polymannuronate가 인체 대장암세포의 증식과 DNA 합성에 어떠한 영향을 미치는 지를 검토하고자 한다.
<p>경제 수준의 향상과 함께 국민소득의 향상으로 동물성 식품소비량이 현저히 늘어났으며, 서구화된 식생활로 식이섬유 함량이 적은 가공식품의 섭취가 잦아짐에 따라 대장암과 같은 성인병과 비만증이 증가하게 되었다. 역학적 연구에서 육류와 대장암은 유의적인 양의 상관관계를 가지며, 고섬유식이를 하는 집단에서는 위험도가 감소한다는 것을 확인하였다. 따라서, 이를 예방하기 위하여 지질과 같은 열량원의 가치는 적은 반면 점질 다당류 식이섬유인 알긴산 등의 생리활성 물질이 풍부하게 함유되어 있는 식품인 미역, 다시마와 같은 해조류의 식이섬유에 대한 관심이 새롭게 부각되고 있다. 이러한 이유로 가공식품에는 식이섬유를 첨가하고 있고 식이섬유의 생리작용에 대한 연구가 활발후 진행되고 있다.</p> <p>알긴산은 갈조류의 세포막 또는 세포간 물질로 함유되어 있는 다당류로, mannuronate와 guluronate로 구성되어 있으 며, 중금속의 체외배출작용, 이온교환반응에 의한 혈압 상숭억제작용, 혈중 콜레스테롤 저하작용, 정장 및 변비개선작용, 장내 유해미생물의 증식억제작용 및 항종양성 등과 같은 생리효과를 가진다고 알려져 있다. 특히, 알긴산의 생리효과는 분자량의 크기와 점도에 영향을 받는 것으로 알려겨 있으며, 동물실험 결과, polymannuronate가 많이 함유된 급이군에서 혈청 및 간장 콜레스테롤 저하 등 지질대사 개선이 더 효과가 있다고 하였다. 또한, 염산으로 부분가수분해하여 얻은 polymannuronate는 용해도 및 답즙산 결합능을 현저히 증가시키며, 혈청 및 간장 지질 중의 콜레스테롤 수준에 대하여 유의적인 저감효과를 보였다고 하였다. 그러나, 알긴산과 관련된 실헙은 대부분 in vivo수준이며, 세포수준에서 살펴본 실험은 거의 없 는 실정이다.</p> <p>따라서, 본 연구는 polymannuronate를 부분 가수분해하여 분자량별로 제조한 \( 40 \mathrm { kDa } \), \(10 \mathrm { kDa } \) polymannuronate와 전분자량 polymannuronate가 인체 대장암세포의 증식과 DNA 합성에 어떠한 영향을 미치는지를 검토하고자 하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>재료</h2> <p>본 연구에 사용된 whole molecular-, \( 40 \mathrm { kDa } - \), \(10 \mathrm { kDa } - \) polymannuronate는 (주) KBP (경기도, Korea)에서 제공받아 실험직전에 각 세포배양액에 녹여 사용하였다. 인체 대장암 세포인 HT-29 (KCLB 30038)은 Korea Cell Line Bank (서울,Korea)에서, DLD-1 (ATCC CCL-221)과 WiDr (ATCC CCL-218)는 American Type Culture Collection (Rockville, MD, USA)에서 분양받아 배양하여 실험에 사용하였다. 세포배양 에 사용한 Rosewell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 medium, phosphate buffered saline (PBS), penicillin- streptomycin 등은 Gibco/BRL (Gaitherburg, MD, USA)에서 구입하였다. Fetal bovine serum (FBS)은 Hyclone (Utah, USA) 에서, 세포 증식을 측정하기 위해 사용된 Celltiter 96 AQueous Non-Radioactive Cell Proliferation Assay Kit는 Promega (Wisconsin, USA)에서 구입하였으며, 세포 배양에 사용한 1 회용 멸균 제품은 Corning (NY, USA)에서 구입하여 사용하였다. Minimum Essential Medium Eagle (MEM)등 기타실헙에 필요한 시약은 Sigma (St. Louis, MO, USA)에서 구입 하여 사용하였다.</p>