GC/MS 분석 결과, dinitrophenyl selenoether peak은 L-SeMet를 첨가하지 않은 시료(sample 1)에서 관찰되었고, 효소를 첨가하지 않은 시료(sample 2), 효소를 \( 100 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 10 분간 전 처리 한 시료(sample 4)에서는 관찰되지 않았다. 이를 통해 human CGL의 효소반응에 의해 methylselenol이 생성된 것이 확인되었다.
<p>기준물질과 동일한 시간에서 \( \mathrm { GC } \) peak가 관찰되었고, MS 분석결과 dinitrophenyl selenoether로 확인되었다(Fig. 4B, sample 1). 또한 효소를 첨가하지 않은 시료와 기질인 L- \( \mathrm { SeMet } \) 를 첨가하지 않은 시료 그리고 효소를 \( 100 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 10 분간 전 처리 한 시료들을 이용한 동일 실험에서는 dinitrophenyl selenoether의 peak가 관찰되지 않았다(Fig. 4B, sample 2 4). 이와 같은 대조군 실험을 통하여 실험군에서 \( \mathrm { GC } / \mathrm { MS } \) 로 분석된 dinitrophenyl selenoether의 전구체인 methylselenol 은 L-SeMet로부터 물리적 또는 화학적인 반응에 의해 생성된 것이 아니라, human CGL의 효소반응에 의해서 생성된 것으로 확인하였다. 또한 human CGL은 PLP를 보효소로 사용하는 효소이므로, PLP와 결합하여 PLP 의존 효소만을 특이적으로 억제하는 hydroxylamine을 전 처리한 시료도 대조군으로 준비하였다. 결과 \( \mathrm { GC } / \mathrm { MS } \) 분석에서 dinitrophenyl selenoether가 검출되지 않았다(Fig. 4B, sample 5). 이는 methylselenol이 PLP 의존 효소에 의해 생성된 것을 의미하고, human CGL에서 PLP의 제거에 의해 human CGL이 촉매하는 여려 반응처럼 methylselenol의 형성 활성도 억제됨을 확인할 수 있었다. 또한 DL-propargylglycine은 human CGL의 활성자리에 있는 tyrosine \( { } ^ { 114 } \) 잔기의 hydroxyl group과 공유 결합하여, vinyl ether를 형성하고, 활성자리 주변 아미노산 잔기 (aspartic acid \( ^ { 161 } \), lysine \( ^ { 212 } \), serine \( { } ^ { 340 } \), arginine \( ^ { 375 } \) )들과 수소결합을 형성함에 의하여 활성자리의 3 차 구조의 변형을 유발함으로써 활성을 억제한다. 이렇게 human CGL에 대한 특이성 억제제인 DL-propargylglycine을 전 처리한 시료에서도 역시 dinitrophenyl selenoether는 검출되지 않았다(Fig. 4B, sample 6). 이러한 결과는 기존에 보고된 여러 효소가 관여하는 transmethylation 대사 경로가 아닌 human CGL의 \( \alpha, \gamma \)-elimination 반응을 통하여 직접적으로 \( \mathrm { CH } _ { 3 } \mathrm { SeH } \) 을 형성하는 반응을 촉매할 수 있음을 처음으로 확인하였다(Fig. 5). 이와 같이 독성물질인 L-SeMet을 신속한 분해할 수 있고, 항암력을 갖는 methylselenol을 직접 생성할 수 있는 human CGL의 능력은 생화학적 또는 의약적으로 다양한 응용이 가능할 것으로 판단된다.</p>