맥문동의 추출방법은 용액을 첨가하여 초음파분해와 필터과정을 반복하여 헥산, 에틸아세테이트, 메탄올 등의 추출물들을 얻는다. 생맥문동을 찌고 음건과정을 반복하여 포제맥문동을 제조한 후 용액 첨가 및 회수, 필터과정을 거쳐 추출물들을 얻는다. 실험에 사용하기 위해 맥문동에서 추출한 10가지 추출물은 최종농도가 200\(\mu\mathrm{g}/\mathrm{ml}\) 가 되도록 dimethly sulphoxide 로 희석시켰다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>맥문동 추출물</h2> <p>맥문동은 2009년 5월에 충북지역에서 재배된 후 거심하여 건조한 것을 구입하여 사용한 것으로 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 의 열풍 건조기에서 5 일 동안 건조한 것을 사용하였다. 먼저, 건조맥문동 \( 1,676.42 \) \( \mathrm{g} \) 을 믹서기(한일, 한국)로 완전히 분쇄한 다음, 건물중량의 3 배에 해당하는 용매로 3 회 추출하여 회전증발기로 농축하였다. 구체적인 추출방법은 다음과 같다. 맥문동 \( 1,676.42 \mathrm{~g} \) 에 혝산 (hexane) 용액을3 배 첨가하여 1 시간동안 초음파분해 시킨 후, Whatamn No. 2 여과지로 필터하였으며, 이와 동일한 방 법을 3회 반복하여 얻은 추출물을 회전증발기로 농축하여 헥산 추출물(LP-H1과 2)을 확보하였다. 그리고, 에틸아세테이트 (LP-E), \( 100 \% \) 메탄올(LP-M),\ \(80\%\) 메탄올(LP-M80),\(50\%\) 메탄올(LP-M50), \( 20 \% \) 메탄올(LP-M20)도 헥산 추출물과 유사한 방법으로 추출하였다. LP2E17P5는 에틸아세테이트 추출물인\( \mathrm{LP}-\mathrm{E} \) 를 \( \mathrm{H}-\mathrm{CH}_{2} \mathrm{Cl}_{2}, \mathrm{CH}_{2} \mathrm{Cl}_{2} \)-Aceton, \( \mathrm{CH}_{2} \mathrm{Cl}_{2}-\mathrm{MeOH}, \mathrm{CHCl}_{3}- \) \( \mathrm{MeOH} \) 을 이용하여 LP2EF1부터 LP2EF75까지 75개 추출물을 확보한 후 \( \mathrm{LP} 2 \mathrm{EF} 17 \) 추출물을 \( \mathrm{CH}_{2} \mathrm{Cl}_{2} \)-Aceton을 이용하여 순수분리하여 확보하였다.</p> <p>포제맥문동을 만들기 위하여, 먼저 \( 20 \mathrm{~kg} \) 의 생맥문동을 약 1 시간 동안 전통 곡주에 침전 시킨 후, \( 300/\sim400^{\circ} \mathrm{C} \) 수증기를 이용하여 약 20 ~ 30분 동안 찌고, 1-3일 동안 음건하였다. 건조된 맥문동은 전통곡주 침전과 수증기 가열과정을 반복한 후 다시 건조하였다. 이러한 과정을 9회 반복하여 완전한 포제맥문동을 제조하였다. 포제맥문동의 추출을 위해, 포제맥문동 \( 1 \mathrm{~kg} \) 을 믹서기로 완전히 분쇄한 다음 \( 80 \% \) 메탄올 31 를 첨가하여 1 시간 동안 초음파분해를 실시한 후 용액을 회수하고, 남은 찌꺼기에 \( 80 \% \) 메탄올을 첨가하여 3회 반복하여 추출하였다.\( 80 \% \) 메탄올 추출물은 Whatamn No. 2 여과지로 푈터하였으며, \( 80 \% \) 메탄올 추출물과 동량의 헥산을 분획에 첨가하여 실온에서 일정한 시간 동안 배양한 후 헥산층을 회수하였다. 이러한 방법을 3 회 반복하여 헥산추출물을 확보하였다(LP9M80-H1과 2). \( \mathrm{CHCl3} \) 와 부탄올(BuOH) 추출물도 헥산추출물과 동일한 방법으로 분획하여 각각의 추출물 LP9M80-C와 LP9M80-B를 얻었다. \( 80 \% \) 메탄올 추출물은 헥산, \( \mathrm{CHCl}_{3} \)와 부탄올 \( (\mathrm{BuOH}) \) 분획으로 추출한 다음 남은 액체를 회전농축기로 농축하여 확보하였다(LP9M80). 준비된 맥문동에서 추출한 10 가지의 추출물인 LP-H, LP-E, LP-M, LP-M80, LP-M50,LP-H2O, LP9M80-H, LP9M80-C, LP9M80-B, LP9M80은 최종농도가 \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 가 되도록 dimethly sulphoxide (DMSO, Sigma, USA)로 희석시켜 실험에 사용하였다.</p>