Salmonella 야생주에서 immuno-blotting을 통해 0M과 1M의 NaCl이 첨가된 LB에서 생육 단계의 정지기까지 배양한 결과, 1M의 NaCl이 첨가되었을 때 OmpW 단백질 발현이 급격히 감소하는 것을 확인하였으며 이를 통해 ompW 유전자의 발현에 NaCl의 농도가 중요한 인자라는 것을 증명하였다. 삼투환경 변화에 따른 \( \mathrm { OmpW } \) 발현의 변화가 지니는 생물학적 의미는 추후 지속적으로 연구할 필요가 있다.
<p>Reporter 유전자를 사용한 간접적인 방법 대신에 직접적으로 \( \mathrm { OmpW } \) 의 발현 변화를 관찰하기 위하여 \( 0 \mathrm { M } \) 과 \( 1 \mathrm { M } \) 의 \( \mathrm { NaCl } \) 이 첨가된 \( \mathrm { LB } \) 에서 생육 단계의 정지기까지 배양한 Salmonella 야생주에서의 \( \mathrm { OmpW } \) 단백질 발현을 immuno-blotting을 통해 확인하였다. \( 1 \mathrm { M } \) 의 \( \mathrm { NaCl } \) 이 첨가되었을 때 \( \mathrm { OmpW } \) 의 발현이 급격히 감소하는 것을 확인하였으며 이를 통해 ompW 유전자의 발현에 \( \mathrm { NaCl } \) 의 농도 즉, 삼투 환경이 중요한 인자라고 판단할 수 있었다(Fig \( 3 \mathrm { ~A } ) \). 이를 토대로 각기 다른 삼투 환경에서의 생육에 \( \mathrm { OmpW } \) 단백질이 영향을 미칠 수도 있을 것이라 추측하고, 야생주와 CK10 Salmonella 균주를 \( 0.1 \mathrm { M } \) 과 \( 1 \mathrm { M } \) 의 \( \mathrm { NaCl } \) 이 첨가된 \( \mathrm { LB } \) 액체배지에서 배양하면서 \( 600 \mathrm { ~nm } \) 파장에서의 흡광도를 측정하여 생육을 관찰하였다(Fig. 3B). 두 균주 모두 높은 농도의 \( \mathrm { NaCl } \) 이 첨가되었을 때 그 생장이 다소 지연되는 것을 확인하였으나, 야생주와 CK10 돌연변이주 사이의 생육 양상 차이는 관찰할 수 없었다. 이를 통해 \( \mathrm { OmpW } \) 단백질의 발현은 \( \mathrm { NaCl } \) 의 농도에 의해 조절되지만, Salmonella의 생육에는 큰 영향을 미치지 않는다고 판단하였다. 이러한 결과들을 토대로 향후 세포 외부의 삼투와 관련하여 \( \mathrm { OmpW } \) 단백질의 정확한 기능 규명이이루어져야 할 것으로 판단된다. 무엇보다도 어떠한 조절 기작을 통해 ompW 유전자의 발현을 조절하는지를 규명하기위해서는 ompW promoter 부위에 작용하는 조절인자를 찾는 후속연구가 필요하다.</p> <h2>요 약</h2> <p>Salmoenella를 포함한 그람 음성 세균의 외막 단백질들은 외부 환경 조건에 따라 그 발현에 변화가 생기는 경우가 많으며, 이렇게 발현된 외막 단백질들은 수송에 관여하는 통로, 외부 물질의 인지, 병원체의 부착인자 등 다양한 기능을 가진다. 본 연구에서는 이러한 외막 단백질 중 소수성 porin으로 알려진 \( \mathrm { OmpW } \) 단백질에 주목하였다. ompW 유전자가 결손된 돌연변이주를 구축하여 \( \mathrm { CK } 10 \) 으로 명명하였으며, 야생주와 그 표현형적 특징을 비교한 결과 SDS에 대한 내성이 다소 증가함을 확인할 수 있었다. \( \mathrm { OmpW } \) 특이적인 다클론성항체를 조제하여 \( \mathrm { OmpW } \) 단백질의 발현연구에 사용하였다. \( \mathrm { NaCl } \) 의 농도가 높아질수록 \( \mathrm { OmpW } \) 단백질의 발현이 감소하였으며, \( \mathrm { OmpW } \) 의 발현이 최대인 조건은 \( \mathrm { NaCl } \) 이 배지에 첨가되지 않았을 경우이다. 따라서 \( \mathrm { OmpW } \) 는 Salmonella 균이 삼투환경에 대응하는데 관여할 것으로 예상되어 일차적으로 균의 생육을 조사한 결과, 다양한 삼투환경 하에서 Salmonella의 생육에는 \( \mathrm { OmpW } \) 단백질의 결손이 큰 영향을 미치지는 않는 것을 확인하였다. 삼투환경 변화에 따른 \( \mathrm { OmpW } \) 발현의 변화가 지니는 생물학적 의미는 앞으로 연구해야 할 숙제로 남는다.</p>