반추동물 사료의 저장 기간을 연장시켜 주고 병원성 미생물에 의한 질병을 예방하기 위해 항균 활성이 필요하다. 대조 실험에서 E. coli O157, S. paratyphi, L. monocytogenes, S. aureus와 같은 병원성 미생물은 배양 후 48시간까지 증가하다가 점차 감소하는 경향을 보였다. 사료에 첨가된 scoria, charcoal, stevia, CLA는 오히려 병원성 미생물의 증가를 초래했지만, 생강은 항균 활성을 나타내어 병원성 미생물의 성장을 억제하는 강한 항균력을 가지고 있었다. 반추위 박테리아의 수는 charcoal과 germanium 첨가구에서 가장 많았으며, scoria는 대조구와 비슷했다. 그러나 생강, stevia, CLA 첨가구에서는 대조구에 비해 유의적으로 적었다. 따라서 생강은 병원성균과 반추위 박테리아, 프로토조아를 억제하는데 효과적이었고, stevia와 CLA는 병원성균에는 효과가 없었지만 반추위 박테리아와 프로토조아의 증식을 억제하는 것으로 나타났다. 따라서 이러한 활성 물질을 반추동물용 사료 첨가제로 사용할 때 적절한 첨가 수준 결정이 중요할 것으로 판단된다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>병원성 미생물의 성장률과 항균활성 시험</h2> <p>병원성 미생물 배양액에 생리활성물질을 각각 \( 0.10 \% \) 첨가하였을 때, 미생물의 성장률을 조사한 결과는 Fig. 1에서와 같다.</p> <p>대조구의 결과로 볼 때, 공시한 병원성 미생물들(E. coli O157, S. paratyphi, L. monocytogenes와 S. aureus)의 성장은 배양 후 48 시간까지 지속적으로 증가하다가 점차 감소하는 경향을 보였으며, 생리활성 물질로서 scoria, charcoal, stevia 및 CLA 첨가구에서는 병원성 미생물이 오히려 더욱 증가되었으나, 생강 첨가구에서는 항균활성을 나타내어 배양기간 동안 병원성 미생물이 거의 자라지 못하는 강한 항균력을 가지고 있어 병원성 미생물의 성장을 억제시키는 사료첨가제로서의 개발 가능성이 있는 것으로 사료된다. 반추동물사료에서 병원성 미생물에 대한 항균활성은 사료의 저장기간을 연장시켜 주고 병원성 미생물에 의한 설사방지와 대사성 질병 등의 예방 효과 때문에 사료 첨가제로서의 개발 과정 중에 필수적으로 점검하는 항목 중의 하나다. 그러나 생리활성 물질로서 scoria, charcoal, stevia 및 CLA 첨가가 오히려 병원성 미생물의 성장을 촉진시킨 결과를 구체적으로 확인하기 위해서는 병원성 미생물 세포막의 구조나 병원성 미생물의 종에 따른 보다 더 구체적인 연구가 수행되어야 할 것으로 생각된다.</p> <p>공시 생리활성물질의 병원성 미생물 4종에 대한 paper \( \operatorname{disc} \) 법 활성 시험결과는 Fig. 2에서와 같다. 병원성 미생물 성장률 시험에서 배양액에 생리활성물질을 각각 \( 0.10 \% \) 첨가하였을 때, 성장 억제 효과가 있었던 생강 첨가구에서 전혀 항균활성 효과를 나타내지 못한 반면 배지중 stevia \( 10 \% \) 첨가구와 CLA \( 10 \% \) 첨가구에서 E. coli 에 대해서 positive control구와 비슷한 크기의 clear zone이 형성되었고 다른 처리구에서는 항균활성 효과가 전혀 없는 것으로 상이한 결과를 보였다. 이러한 결과가 극히 미량으로 수행되는 paper disc법에 의한 항균활성 구명시험의 한계인지 아니면 또 다른 원인이 있었는지는 추가적인 연구가 더 수행되어야 할것으로 생각된다.</p> <h2>반추위 미생물 수</h2> <p>반추위액이 첨가된 Dehority's artificial media에 생리활성물질을 각각 \( 1.00 \% \) 씩 첨가하여 혐기 배양시켰을 때, 반추위 미생물(박테리아, 프로토조아, 곰팡이)의 수를 측정한 결과는 Table 3에서와 같다.</p> <p>반추위 박테리아의 수는 charcoal 첨가구와 germanium 첨가구에서 가장 많았고, scoria 첨가구에서는 대조구와 차이가 없었으나 생강, stevia 및 CLA 첨가구에서는 대조구에 비해 유의적\( (\mathrm{P}<0.05) \)으로 적었다.</p> <p>반추위액 배양액 중, 살아있는 프로토조아의 수는 germanium, charcoal 및 scoria 첨가구에서는 대조구와 차이가 없었으나, 생강, stevia 및 CLA 첨가구에서는 대조구에 비해 유의적 \( (\mathrm{P}<0.05) \)으로 적은 것으로 나타났다. 죽은 프로토조아의 수는 생강과 scoria 첨가구에서 가장 많았고( \( (\mathrm{P}<0.05) \), stevia와 나머지 처리구간에는 비슷한 수준이었다. 메탄을 생성하는 세균들의 \( 30 \% \) 이상이 프로토조아의 세포벽에 붙어서 생장하는 특징을 가지고 있어, 본 시험의 결과로 볼 때, 생강과 stevia 및 CLA를 이용하여, 특히 생강 첨가구에서는 살아있는 프로토조아의 수는 적고, 죽은 프로토조아 수는 많은 것으로 나타나, 반추위내에서 메탄을 생성하는 균들의 서식처인 프로토조아를 억제함으로써 메탄 생성량을 저감 시킬 수 있을 것으로 생각된다. 반추위 곰퐝이의 수는 대조구에서 가장 적었으며 \( (\mathrm{P}<0.05) \) 다른 처리구에서는 차이가 나타나지 않아 본 시험에서 사용된 생리활성물질이 반추위 곰팡이는 오히려 증식시키는 결과를 나타내었다.</p> <p>이상의 결과를 종합해 보면, 생강은 병원성균 뿐만 아니라 반추위 박테리아 및 프로토조아도 억제하고, stevia 및 CLA는 병원균에 대한 항균효과는 없었으나 반추위 박테리아와 프로토조아의 증식을 억제하는 것으로 나타나 이들 생리활성물질을 반추동물용 첨가제로서 사용할 경우, 적절한 첨가 수준 결정이 매우 중요할 것으로 사료된다.</p>