피부암을 유발하는 멜라닌의 과잉생산을 억제하려면 tyrosinase를 저해활성해야 하며, 이를 억제하는 천연물질 중에는 당유자에 함유된 naringin과 heperigin이 큰 역할을 한다고 판단된다.
<h2>Tyrosinase 저해활성</h2> <p>피부를 자외선이나 외부의 자극으로부터 보호하는 역할을 하는 멜라닌은 피부 안의 멜라노사이트에서 생합성되며 tyrosine이 활성효소인 tyrosinase 그리고 기질로 \( _\mathrm{L}-\text{dopa}\), \( _\mathrm{L}-\text{tyrosine}\) 과 반응하여 생성된다. 하지만 멜라닌이 과하게 생성되면 피부의 신진대사가 느려져 기미, 주근깨를 형성하며 피부암을 유발하는 큰 요인이 된다. 따라서 tyrosinase를 저해하여 멜라닌의 과잉생산을 억제하는 천연물질을 찾아낼 필요가 있다. \( _\mathrm{L}-\text{Tyrosine}\), \( _\mathrm{L}-\text{dopa}\)를 기질로 하여 tyrosinase 저해활성을 조사한 결과는 Figure 1과 같다. \( _\mathrm{L}-\text{Tyrosine}\)을 기질로 한 경우 에탄올 농도가 증가할수록 활성이 증가하여 \( 80 \% \) 에탄올 추출물이 가장 우수한 활성을 보여 \( 500 ~\mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \)의 농도에서 \( 80 \% \) 가까운 높은 수치를 나타냈다. \( 80 \% \) 에탄올 추출물에 비하여 \( 100 \% \) 에탄올 추출물에 서는 오히려 저해능이 감소하는 경향이 나타났지만 \( 40 \%\), \(60 \%\), \(80 \%\), \(100 \% \) 에탄올 추출물에서 대조군으로 사용된 arbutin보다 뛰어난 결과를 보였으며 저농도 에탄올로 추출할 경우에도 어느 정도 저해활성이 있는 것을 확인할 수 있었다. 이는 제주도에서 자생하는 조릿대 추출물의 tyrosinase 저해활성이 \( 20 \% \) 에탄올부터 추출 농도가 높아짐에 따라 활성이 증가하여 \( 60 \% \) 에탄올을 기준으로 감소한다는 보고와 일부 일치하였다. \( _\mathrm{L}-\text{Dopa}\)를 기질로 하여 tyrosinase 저해활성을 측정한 결과 \( _\mathrm{L}-\text{tyrosine}\)을 기질로 한 경우와 유사한 경향이 나타났으나 물, \( 20 \%, 80 \%, 100 \%, 40 \% \) 에탄올 추출물 순서였으며 \( 60 \% \) 에탄올이 다른 추출물보다 높은 활성을 나타냈을 뿐만 아니라 arbutin보다 더 높은 저해 활성을 보여주었다. 이 결과는 10종의 약용식물을 메탄올로 추출하여 \( 500 ~\mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 농도에서 가장 우수한 활성을 나타낸 Glycyrrhiza glabra 뿌리 추출물의 \( 65.67 \% \) 과 당귤(Citrus sinesis) 껍질 에탄올 추출물에서 \( 250 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 농도에서 \( 50 \% \) 정도의 활성을 나타낸 실험 결과와 비교해볼 때 당유자 잎 추출물이 더 높은 수치임을 확인할 수 있었다. 그리고 페놀 화합물 함량 간의 정의 상관관계가 \( _\mathrm{L}-\text{tyrosine}\), \( _\mathrm{L}-\text{dopa}\)를 기질로 한 경우 각각 -0.691, -0.486으로 나타났으며 (Table 6) \( _\mathrm{L}-\text{tyrosine}\)을 기질로 한 경우 유의한 상관관계 (\( p<0.01 \))가 성립되어 어느 정도 페놀 화합물이 저해 활성에 기여하고 있는 것을 확인할 수 있었다. 감귤류인 핫사쿠(Citrus hassaku)에서 분리된 naringin, heperigin이 높은 저해 활성을 보이는 연구가 보고되었으며, 환원력 측정과 같이 당유자에 함유되어 있는 naringin, heperigin이 tyro-sinase 저해활성에 큰 역할을 한다고 판단된다.</p>