본 논문은 8주간의 실험 동안 마취한 복부 대동맥에서 혈액을 채취하여 혈청을 얻은 후 총 콜레스테롤, 중성지방, HDL-콜레스테롤을 kit로 비색정량하고 총 콜레스테롤에서 HDL-콜레스테롤을 뺀 VLDL + LDL-콜레스테롤 값을 통해 Atherogenic index를 산출했음을 설명하고 있다. Commercial kit를 사용해 TAS를 혈액자동 분석기기로 분석했고, coupled enzyme법으로 GSH-Px 활성을, Marklund 와 Sheri의 방법을 활용해 SOD 활성을 측정했다.
<p>FER \( = \frac {\text { Body weight gain for experimental period } ( \mathrm { g } ) } {\text { Food intake for experimental period } ( \mathrm { g } ) } \)</p> <h2>시료 채취 및 분석</h2> <h3>혈청 분리</h3> <p>실험동물은 8주간의 실험기간이 종료된 후, 12시간 절식시키고 diethyl ether로 마취시켜 복부 대동맥에서 혈액을 채취 하였다. 혈액은 실온에 30분간 방치한 후 \( 2,000 \times g, 4 { } ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 30분간 원심 분리하여 혈청을 얻었으며, 분석이 이루어질 때까지 \( -70 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 보관하였다.</p> <h3>혈청 지질농도 분석</h3> <p>총 콜레스테롤, 중성지방, HDL-콜레스테롤을 kit(Shinyangchemical co., Ltd.)를 이용하여 비색정량하였고, VLDL + LDL-콜레스테롤은 총 콜레스테롤에서 HDL-콜레스테롤을 뺀 값으로 계산하였다. Atherogenic index는 동맥경화의 위험율을 예측할 수 있는 변인으로 산출방법은 다음과 같다.</p> <p>Atherogenic index \( =( \) Total cholesterol-HDL cholesterol \( ) / \) HDL cholesterol</p> <h3>Total antioxidant status (TAS) 측정</h3> <p>TAS는 혈청 안에 존재하는 총 항산화능을 나타내며 Commercial kit (Randox Laboratories Ltd.)를 이용하여 혈액자동 분석기기(Autoanalyzer. Chiron Co.)로 분석하였다. 분석 원리는 \( \mathrm { ABTS } ^ {\circledR } \quad \left (2,2 ^ {\prime } \right . \)-Azino-di-)를 peroxidase 및 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \)와 배양시키면 \( \mathrm { ABTS } ^ {\circledR } \) 양이온기를 생성하는데 이는 매우 안정한 청록색 분자로 600 \( \mathrm { nm } \)에서 측정된다. 검체 중에 존재하는 항산화제에 의해 발색이 억제되고, 그 정도는 항산화제 농도에 비례한다. 정상 antioxidant level은 \( 1.30-1.77 \mathrm { mmol } / 1 \)이다.</p> <h3>Glutathione peroxidase (GSH-Px) 활성 측정</h3> <p>GSH-Px 활성은 Paglia 와 Deagen 의 방법을 수정하여, 과산화수소를 기질로 이용한 coupled enzyme 법으로 측정하였다. 효소활성 단위는 혈청 \( 1 \mathrm { ml } \) 당 1 분 동안 산화된 \( \mathrm { NADPH } \) 의 nmoles로 나타내었다.</p> <h3>Superoxide dismutase (SOD) 활성 측정</h3> <p>Marklund 와 Sheri 의 방법을 이용하였으며, pyrogallol의 autoxidation을 SOD가 억제하는 정도를 통하여 측정하였다. 효소활성 단위는 pyrogaroll autoxidation \( 50 \% \) 방해하는데 필요한 효소의 양으로서 산출하였다.</p>