종양세포에서의 세포사멸은 TRAIL, TNF-\(\alpha\)와 cyclohexamide 그리고 FAS의 외인성 신호전달을 통해 이루어진다. 본 논문에서는 실험을 통해 신장암세포에서 이러한 외인성 신호전달경로에 의한 세포사멸 과정동안 APC가 영향을 미치지 않는다는 것을 확인하였다. 또한 종양세포의 세포사멸과정에서 항암 약물의 병합처리가 진행될 때 APC의 영향 여부를 실험을 통해 검증하였다. 그 결과 Kahweol과 TRAIL 및 kahweol과 melatonin 병합처리에 의한 PARP의 분절이 APC에 의해 부분적으로 억제되는 것을 확인하였고, 이에 결론적으로 항암 약물의 병합처리를 통한 암세포 사멸을 부분적으로 억제시키는 APC의 기능을 알 수 있었다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>신장암세포에서 외인성 세포사멸 신호기전에 의한 세포사멸에서의 APC의 효과 확인</h2> <p>TRAIL, TNF-\(\alpha\)와 cyclohexamide 그리고 FAS는 외인성 신호전달을 통해 종양세포의 사멸을 일으키는 것으로 알려져 있다. 본 연구에서 외인성 신호전달을 통한 세포 사멸에 있어서의 APC의 역할을 확인하였다. 인간의 신장암 세포에 APC를 30분간 전처리한 후, 각각의 세포사멸을 일으키는 \( 100 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) TRAIL, \( 20 \mathrm{ng} / \mathrm{ml}\) TNF-\(\alpha\)와 \( 10 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) cyclohexamide(CHX), 그리고 \( 500 \mathrm{ng} / \mathrm{ml}\) FAS를 24시간 동안 처리하였다. TNF-\(\alpha\)와 CHX, 혹은 FAS에 의한 세포사멸은 인간 신장암세포에서 유의적으로 일어났으나, APC는 이러한 세포사멸을 억제시키지는 못하였다. 인간 신장 암세포는 TRAIL에 저항성을 가지는 암세포로 알려져 있듯이 TRAIL에 의한 세포사멸은 확인할 수 없었다. 본 연구결과를 통해서 APC는 신장암세포에서 외인성 신호전달경로를 통한 세포사멸에는 아무런 영향을 미치지 않는다는 것을 확인하였다.</p> <h2>TRAIL 민감성을 가지는 뇌 암세포인 T98G와 유방암세포인 MDA231세포에서의 APC 세포사멸 조절 여부</h2> <p>APC에 의한 human umbilical vein endothelial(HUVE) 세포의 세포보호(cytoprotective) 능력은 APC에 의한 Egr1/ERK 활성화를 통한 TRAIL 발현 억제 때문에 야기된다. TRAIL에 의한 세포사멸에 APC의 역할을 규명하기 위하여 TRAIL에 민감성을 가지는 인간 뇌암세포인 T98G세포와 인간 유방암세포인 MDA231세포를 사용하여 확인하였다. APC를 30분간 전처리 한 후, \( 30 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \) TRAIL을 24시간 동안 처리하였다. TRAIL은 두 가지 세포에서 모두 세포사멸을 유의적으로 증가시켰으나 APC는 두 가지 세포에서 모두 세포사멸을 억제하지는 못하였다. 본 결과는 TRAIL 매개의 세포사멸에 APC가 아무런 영향을 미치지 못함을 제시한다.</p> <h2>암세포사멸을 위한 약물병합처리에 의한 세포사멸에 있어서의 APC의 조절</h2> <p>외인성 신호전달체계를 통한 종양세포의 사멸 이외의 항암 약물의 병합처리를 통한 종양세포의 사멸에는 APC가 어떠한 영향을 미치는가를 확인해 보았다. 이전 연구에서, 커피의 추출물 중 한 성분인 kahweol과 TRAIL의 병합처리는 신장암 세포에서 유의적인 세포사멸을 일으키는 것으로 본 연구실에서 발표한 바 있다. 또한, kahweol과 생체시계 호르몬으로 알려진 melatonin을 병합 처리하면 역시 종양세포의 사멸을 유도한다고 본 연구실에서 발표하였다. 따라서 이러한 두 가지 약물을 병합처리를 통한 종양세포의 사멸에서의 APC의 역할을 규명하고자 실험하였다. 이전 보고와 같이, 신장암세포에서 두 가지 약물의 병합처리는 유의적인 세포사멸을 일으켰고, 흥미롭게도 APC의 전처리는 이러한 세포사멸을 유의적으로 감소시키는 것을 확인하였다. Apoptosis의 bio-marker인 caspase-3의 기질로 알려진 PARP의 분절을 확인함으로써 APC의 anti-apoptotic 효과를 확인하였다. Kahweol과 TRAIL 및 kahweol과 melatonin 병합처리에 의한 PARP의 분절이 APC에 의해 부분적으로 억제되는 것을 확인하였다.</p> <p>APC에 의한 저산소 상태 brain endothelium에서 직접적인 anti-apoptotic 효과는 p53 전사 억제, Bax/Bcl-2 비율조절 및 caspase-3 활성화 억제를 통하여 야기한다. 본 연구에서는 APC는 외인성 신호전달 경로만을 통한 암세포의 세포사멸에는 아무런 영향을 미치지 않지만, 항암 약물의 병합처리를 통한 암세포 사멸은 부분적으로 억제시키는 기능을 확인할 수 있었다. 비록 본 연구결과에서는 APC의 정확한 anti-apoptotic 기전에 대한 결과는 보다 더 많은 실험이 요구되지만 cell death receptor 매개의 세포 사멸에서는 APC의 세포 보호작용을 확인할 수 없었다. 하지만 항암제와의 병합처리 시 APC의 세포보호 효과 즉 anti-apoptotic 효과를 처음으로 확인하였다. APC에 의한 항암작용 증진 기전 및 효과에 대한 연구는 더 많은 실험을 통하여 이루어져야 한다고 생각된다.</p>