그람 양성균인 균주 WJ-1은 KACC에 KACC 92086로 기탁하였고, 고체배지의 형태 관찰 및 현미경 관찰결과 포자를 형성하며, API ZYM strip과 API 20NE strip을 이용한 효소생산분석과 탄소원의 이용에 관한 관찰로 WJ-1의 생리적 특성을 확인하였고, 16S rRNA 유전자 염기서열을 토대로 EzTaxon database에 등록되어 있는 표준균주들의 16S rRNA 유전자 염기서열들과의 상동성 조사 결과, WJ-1은 방선균속의 표준균주들과 \( 99 \% \) 이상의 높은 상동성을 보였다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>Xylanase 생산 균주 WJ-1의 분리 및 형태적 특성</h2> <p>Xylan 분해능을 보이는 균주 중 가장 분해능력이 탁월한 균주를 선별하여 WJ-1로 명명하고(Fig. \( 1 \mathrm { ~A } \)), Korean Agricultural Culture Collection (KACC)에 Streptomyces glaucescens subsp. WJ-1 (KACC 92086)으로 기탁하였다. 균주 WJ- 1 은 그람 양성균이며, 고체배지의 형태 관찰 및 현미경 관찰결과 포자를 형성하는 것으로 확인되었다. 균주 WJ-1은 \( 0-7 \% \) 사이의 \( \mathrm { NaCl } \) 농도에서는 자라는 반면, \( \mathrm { NaCl } \) 농도가 \( 8 \% \) 이상에서는 자라지 않았다. 또한 \( 20-50 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 활발한 성장이 관찰되었고, \( 55 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서는 약한 성장, 그 이상 온도에서는 성장이 관찰되지 않았다. 균주 WJ-1은 ISP-2, IPS-4, YMPD, R2YE 등의 고체배지에서는 흰색의 기균사 및 회색의 포자를 형성하는 반면, LB 고체배지 및 xylan 함유 LB 고체배지에서는 기균사와 포자를 형성하지 못하는 것으로 관찰되었다. 균주 WJ-1의 배지별 형태분화의 특성은 Table \( 1 \)에 정리하였다.</p> <h2>균주 WJ-1의 생리적 특성</h2> <p>균주 WJ-1의 API ZYM strip을 이용한 효소생산분석 결과는 Table 2에 비교하였고, API 20NE strip을 이용한 효소 생산 및 탄소원의 이용에 관한 관찰 결과는 Table 3에 나타내었다. 균주 WJ-1의 주요 cellular fatty acid는 \( \mathrm { C } _ { 15: 0 } \) anteiso ( \( 42.99 \% \))이며, 기타 분석한 cellular fatty acid 성분을 Table \( 4 \) 에 나타내었다.</p> <h2>균주 WJ-1의 계통발생학적 연관관계 규명</h2> <p>균주 WJ-1의 16S rRNA 유전자 염기서열은 PCR 법으로 증폭된 유전자 단편 (1,422 bp) 를 분석하여 결정하였으며, GenBank에 JN578483으로 등록하였다. 16S rRNA 유전자 염기서열을 토대로 EzTaxon database에 등록되어 있는 표준균주들의 16S rRNA 유전자 염기서열들과의 상동성 조사 결과, WJ-1은 S. spinoveruucosus NBRC14228 ( \( 99.225 \% \)), S. minutiscleroticus NBRC13000 ( \( 99.156 \% \)), S. glaucescens NBRC12774 ( \( 99.015 \% \)), S. purpurascens NBRC13077 ( \( 99.015 \% \)), S. lusitamus NBRC13464 ( \( 99.015 \% \)), S. gancidicus NBRC15412 ( \( 99.015 \% \)) 등의 방선균속의 표준균주들과 \( 99 \% \) 이상의 높은 상동성을 보였다. PHYLIP suit 프로그램의 NJ 법을 사용하여 phylogenetic tree를 제작한 결과, 균주 WJ1은 S. glaucescens NBRC 12774와 독립된 branch ( \( 100 \% \) bootstrap value)를 형성하였다(Fig. \( 1 \mathrm { ~B } \)). 이는 MP 프로그램을 이용한 tree에서도 동일하였다(결과 미제시).</p>