화학점 암 예방법이란 암의 발생을 예방하거나 혹은 암의 진행을 되돌리는 것으로 천연물,합성제재,생물학적 제재를 사용한다. 비 스테로이드성 항염증약, 파이토케미칼, 칼슘 및 비타민이 그 예이다. Phytochemical은 식물유래의 비 영양성 화학제제이며 다른 암 화학예방제제에 비해 부작용이 적다. 암 억제 유전자인 p53 유전자는 전사조절인자로서 세포성장, 세포사멸의 중심 조절자로, 식용 가능한 식물에 함유된 대표적인 물질인 phytochemical가 이를 촉진시킨다.
<h1>서 론</h1> <p>화학적 암 예방법(cancer chemoprevention)은 암의 발생을 예방하거나, 암의 진행을 되돌리거나 혹은 전이 단계로 진행되는 것을 막기 위하여 천연물, 합성제재, 혹은 생물학적 제재를 사용하는 것을 말한다. 현재 암 화학예방법에 많이 사용되고 있는 제재로는 비 스테로이드성 항염증약(NSAID, non-steroidal anti-inflammatory drug), 파이토케미칼(phytochemical), 그 외 칼슘과 비타민 등을 들 수 있다.</p> <p>Phytochemical은 식물유래의 비 영양성 화학제제로서 항염증, 항산화, 항암 기능이 있는 것으로 알려져 있으며, 다른 암 화학예방제제와는 달리 부작용이 적다는 점에서 많은 주목을 받고 있다. 최근 역학 연구에 의하면 곡류, 채소, 과일 등 phytochemical이 풍부한 식물 유래의 음식을 섭취하면, 암의 발생률이 감소한다는 결과가 보고되었다.</p> <p>이러한 식용 가능한 식물에 함유된 대표적인 phytochemical로는 포도껍질이나 포도주에 많이 함유되어 있는 resveratrol, 녹차에 많이 함유되어 있는 catechin 성분 중 하나인 epicatechin gallate, 콩에 함유되어 있는 isoflavone 중의 하나인 genistein, 마늘에 많이 함유되어 있는 sulfide계 화합물 중 하나인 diallyl disulfide, 그리고 벌꿀 등에 많이 함유되어 있는 caffeic acid phenethyl ester등을 예로 들 수 있다. 이들 phytochemical들의 항암 효능과 분자생물학적 기전들이 여러 가지 암을 대상으로 하여 보고된 바 있다.</p> <p>암 억제 유전자인 p53 유전자는 전사조절인자로서 세포성장, 세포사멸의 중심 조절자로서 알려져 있다. 따라서 p53 유전자의 전사조절 대상을 확인하는 것은 p53에 의해 발현되는 세포사멸이나 세포성장 억제를 이해하는데 매우 중요하다. 또한 많은 종류의 다른 phytochemical들이 p53 유전자들의 발현을 촉진하는 것으로 알려져 있다 .</p> <p>본 연구에서는 5종류의 다른 phytochemical과 NSAID의 한 종류인 sulindac sulfide가 암 억제 유전자인 p53의 발헌을 유도하는지 확인하였고, p53 유전자의 선사 대상 유전자가 집적되어 있는 membrane microarray를 이용하여 resveratrol의 처리에 의해 차별적으로 발현되는 유전자 군을 검색하고, 이들 유전자들의 발현이 p53 의존적인지 여부에 대해 확인하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>세포배양 및 시약</h2> <p>대장암 세포주 HCT116는 American Type Culture Collection (ATCC, VA, USA)에서 구입하였고, p53 null인 HCT116 세포주는 Johns Hopkins 의대의 Bert Vogelstein 박사로부터 분양 받았다. 두 종류의 세포주 배양은 \(10 \% \) FBS가 첨가된 McCoy5A 배지를 사용하였으며, 배양은 \(37 ^ {\circ } \mathrm { C } \), \(5 \% \) \( \mathrm { CO } _ { 2 } \) 조건 하의 incubator에서 실시하였다. Resveratrol을 비롯한 시약들은 Sigma사(MO, USA)로부터 구입을 하였다. 각종 항체(anti-p53, anti-ACTIN)는 Santa Cruz사(CA, USA)로부터 구입하여 사용하였다.</p>