\(20\mathrm{g}/\mathrm{L}\)유청에 \(5.0\mathrm{g}/\mathrm{LH}_{2}\mathrm{PO}_{4},0.1\mathrm{g}/\mathrm{L}\mathrm{MgSO}_{4}\cdot7\mathrm{H}_{2}\mathrm{O},1\mathrm{mL}\)의 미량 미네랄 용액을 첨가한 유청배지를 생물반응기에서 working volume \(3\mathrm{L},30^{\circ}\mathrm{C},500\mathrm{rpm},1.0\mathrm{vvm}\) 으로 72시간 동안 회분배양하였다.
<p>회분 배양은 \( 5 \mathrm { ~L } \) 생물반응기(KF-5, KFC, Inchon, Korea)에서 working volume \( 3 \mathrm { ~L } \) 로 하여 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } , 500 \mathrm { rpm } , 1.0 \) vvm으로 72시간 동안 배양을 실시하였다. 유청 배지는 Dlamini와 Peiris 의 방법 [1]을 이용하여 \( 20 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \) 유청에 \( 5.0 \) \( \mathrm { g } / \mathrm { LH } _ { 2 } \mathrm { PO } _ { 4 } , 0.1 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \mathrm { MgSO } _ { 4 } \cdot 7 \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } , 1 \mathrm { ~mL } \) 의 trace mineral solution을 첨가하여 사용하였다.</p> <h2>유청 배지에 탄소원 첨가</h2> <p>Glucose, galactose, fructose 그리고 sucrose를 유청 배지 (whey lactose)에 첨가되는 탄소원으로 사용하였다. 총 \( 20 \mathrm { ~g } / \) \( \mathrm { L } \) 의 탄소원 중 첨가된 탄소원은 \( 0 \%(20 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \) whey lactoe \( ) \), \( 25 \%(15 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \) whey lactose, \( 5 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \) 첨가탄소원), \( 50 \%(10 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \) whey lactose, \( 10 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \) 첨가탄소원), \( 75 \%(5 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \) whey lactose, \( 15 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \) 첨가탄소원) 그리고 \( 100 \% \) (20g/L첨가탄소원)로 유청 배지에 첨가하였다. 탄소원은 증류수에 용해하여 따로 멸균하여 배지에 첨가하였다. 배양은 진탕 배양기에서 \( 200 \mathrm { rpm } \) 으로 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } , 24 \) 시간 동안 배양한 seed culture를 250 \( \mathrm { mL } \) baffled Erlenmeyer flask에 \( 50 \mathrm { ~mL } \) 각 배지에 \( 5 \% \) 의 양으로 접종하여 같은 조건으로 72 시간 동안 배양하였으며 건조균체중량(DCW, Dry Cell Weight, \( \mathrm { g } \) dcw/L), 점도 (Viscosity, cP), PS-7의 생산량 \( ( \mathrm { g } / \mathrm { L } ) \) 을 측정하였다.</p>