본 연구에서는 혈압실험을 위해 \( 300 - 330 \mathrm{~g} \) 수컷 흰쥐를 사용했으며, 실험 하루 전 \( 15 \mu \mathrm{g} / \mathrm{Kg} \mathrm{Na}_{2} \mathrm{HAsO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) 접종 시켰다. 혈압측정 실험에서는 혈압 측정을 위해 각각 경정맥과 총경동맥에 polyethlene tube을 삽입하였으며, 이후 대동맥의 수축, 이완 반응을 보기 위해 Magnus 관에 넣은 후 arsenic acetate를 처리했다. 혈관의 수축과 이완반응은 Kreb's solution 세척 후 관측되었으며, 실험에 있어 대조군과 처리군의 차이는 t-test 통해 분석되었다.
<h1>재료 및 방법</h1><h2>비소 스트레스 실험</h2><p>혈압실험에 사용한 흰쥐는 \( 300-330 \mathrm{~g} \) 수컷(Sprague Dawley Rat, 효창사이언스, 한국)을 사용하였고, 실험 하루 전에 \( 15 \mu \mathrm{g} / \mathrm{Kg} \mathrm{Na}_{2} \mathrm{HAsO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) (Sigma, USA)를 복강 주사하여 생장실에서 12시간동안 유지시켰다. 대조군은 생리식염수를 처리하여 헐압측정에 비교분석하였다.</p><h2>혈관수축제에 의한 대동맥의 수축력 변화</h2><p>실험에 사용한 횐쥐를 pentobarbital sodium \( (35 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \), 복막강내 투여)으로 마취시킨 후 약물주입과 혈압측정을 위해 각각 경정맥과 총경동맥에 polyethlene tube를 삽입 하였다. 기관삽관 후 인공호흡기(Narco Biosystems, V5 \( \mathrm{Kg} \) )를 사용하여 \( 12-13 \mathrm{~cm} \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) 의 흡기시 양압을 가하면서 분당 50회로 인공호흡을 실시하였고, Gillespie 등의 방법에 따라 구리막대를 이용하여 뇌척수를 파괴시켰다. 횐쥐의 경련을 막기 위해 d-tubocurarine \( (1 \mathrm{mg} / \mathrm{Kg} \), Sigma) 을 복강주사 하였다. 혈압이 안정되기를 기다렸다가 헐관 수축제로 vasopressin (2 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{Kg} \), Sigma)과 phenyleprine \( (150 \mu \mathrm{g} / \mathrm{Kg}\), Sigma)을 각각 투여하여 혈압의 변화를 비교하였다.</p><h2>Organ bath에 헐관걸기</h2><p>마취시킨 횐쥐의 복부대동맥을 절단하여 사혈시키고 하행성 횽부대동맥을 적출하였다. 동맥 혈관은 Kreb's solution 속에서 \( 4 \mathrm{~mm} \) 길이로 steel triangle에 걸어 Magnus 관에 매단 후 환합가스 \( \left(95 \% \mathrm{O}_{2}, 5 \% \mathrm{CO}_{2}\right) \) 를 공급하면서 \( \mathrm{pH} \) 와 온도는 각각 7.4와 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)로 유지시켰다. 실험에 사용 한 수정한 Kreb's solution의 조성(\(\mathrm{mM}\))은 \( \mathrm{NaCl} 115.0, \mathrm{KCl} 4.7, \mathrm{CaCl}_{2} 2.5, \mathrm{MgCl}_{2} 1.2, \mathrm{NaHCO}_{3} 25.0, \mathrm{KH}_{2} \mathrm{PO}_{4} 1.2 \), Dextrose 10.0. 였으며, 혈관고리절편은 \( 2.0 \mathrm{~g} \)의 기저장력하에서 60분간 안정화시킨 후 혈관의 수축과 이완 반응은 force displacement transducer (Narco Biosystems, Myograph F-60)을 사용하여 computerized Chart4 (PowerLab 8SP)를 이용하여 수축력을 측정하였다.</p><h2>대동맥의 수축과 이완반응</h2><p>실험에 사용한 흉부 대동맥은 Magnus 관에 넣은 후 arsenic acetate를 각각 0, 0.5, 1,2 및 \( 4 \mathrm{mM} \) 로 1시간동안 처리하였다. Kreb's solution으로 3회 세척 후 1, 3, 5 및 8시간 뒤에 각각 혈관의 수축과 이완반응을 관찰하였다.</p><p>비소처리에 따른 혈관의 수축반응은 혈관의 내피유무에 따라 phenylephrine을 \( 10^{-9} \sim 10^{-5.5} \mathrm{M} \) 의 처리로 나타나는 혈관의 수축력을 측정하였다. 대동맥의 이완실험은 최대 수축반응의 \( 85 \% \) 를 보이는 phenylephrine \( \left(10^{-6} \mathrm{M}\right) \) 을 처리하고 이어 내피를 제거한 후 내피 비의존성 sodium nitroprusside \( \left(10^{-9} \sim 10^{-5} \mathrm{M}\right) \) 반응을 조사하였고, 내피를 제거하지 않은 혈관은 내피의존성 acetylcholine \( \left(10^{-9} \sim 10^{-5} \mathrm{M}\right) \)을 처리하여 이완반응의 변화를 조사하였다.</p><h2>실험약물 및 데이터 분석</h2><p>Vasopressin, phenylephrine, sodium nitroprusside, vasopressin, acetylcholine 등은 Sigma 사의 시약을 사용하였고, 나머지 시약들은 실험용 일급시약을 사용하였다. 각 측정치는 평균치 \( \pm \) 표준오차로 나타내었고, 대조군과 처리군의 차이는 t-test를 이용하여 \( \mathrm{p}<0.05 \) 미만일 때 유의성이 있다고 처리하였다.</p>