원유를 함유하는 배지에 n-alkane 계열의 다양한 탄화수소원을 첨가하여 KCL-1 균주를 5일 동안 진탕배양한 후, \( 600 \mathrm { nm } \) 에서 흡광도를 측정하여 균 생육도를 확인하였다. 균 배양액을 원심분리하여 상층의 흡광도 측정으로 배양시간에 따른 유화력을 보았고 원유의 분해능은 균주가 분해하고 남은 원유를 추출하여 대조구와 무게를 비교함으로써 알아보았다.
<p>또한 bezene, toluene, xylene 및 n-alkane 계열 \( \mathrm { C } _ { 10 } \) 에서 \( \mathrm { C } _ { 28 } \) 까지의 각기 다른 탄화수소원의 분해 및 균생육도를 조사하기 위하여 \( 10 \mathrm { m } \ell \) 의 C-배지에 각각 \( 0.1 \% \) 씩 첨가하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 \( 200 \mathrm { rpm } \)으로 5일간 배양시킨 후 \( 600 \mathrm { nm } \) 에서 흡광도를 측정하여 균 생육도를 확인하였다.</p> <h2>Crude oil 분해능 측정</h2> <p>선별된 균주의 crude oil 분해능을 촉진시킬 수 있는 인자를 탐색하기 위하여, crude oil를 함유하고 있는 \( 10 \mathrm { m } \ell \) 의 C-배지에 n-alkane계열 \( \mathrm { C } _ { 10 } \) 에서 \( \mathrm { C } _ { 28 } \) 까지의 각기 다른 탄화수소원을 첨가시켜 5일간 진탕배양 시킨 후 균체의 성장은 \( 600 \mathrm { nm } \)에서 흡광도로 측정하였다. 이때 배양에 사용된 원유의 분해능을 측정하기 위하여 chloroform-methanol(2:1 \( \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 추출용매를 동량 혼합하여 원유성분을 완전히 추출한 후 진공 건조기를 사용하여 chloroform 용매를 완전히 제거시켜 대조구(균체 무첨가)와의 무게차이를 측정하여 상대 중량비로 나타내었다. KCL-1 균주의 배양 시간에 따른 유화력의 변화를 보기위해 균배양액을 원심분리한 후 상층액을 얻어 사용하였다. 유화력 측정은 \( 0.5 \mathrm { M } \mathrm { ~NaCl } \) 이 첨가된 \( 20 \mathrm { mM } \) Tris- \( \mathrm { HCl } \) 완충용액 \( ( \mathrm { pH } 7.8) ~5 \mathrm { m } \ell \) 에 상층액 \( 1 \mathrm { m \ell } \)를 가하고, 기질로서 \( 2 \% \) crude oil를 첨가하여 1분간 강하게 교반한 다음 10분간 정치시켜 중간부위의 반응액 \( 2 m \) 를 취하여 \( 610 \mathrm { nm } \) 에서 흡광도 측정값으로 나타내었다.</p>