장염비브리오의 장관 감염증은 동남아시아, 유럽, 미국 등에서 유행하는 식중독 원인균으로서 해외여행자 설사증의 주요 원인균이기도 하다. 본 연구에서는 국내에서 분리된 환자유래 장염비브리오균주와 일본 후쿠오카 지역의 환자에서 분리한 장염비브리오균주를 이용하여 병원성 인자와 유전자의 역학적 연구에 도움이 되는 특성을 비교하고자 실험을 진행하였다.
<h1>서 론</h1> <p>장염비브리오(Vibrio parahaemolyticus)의 장관 감염증은 한국, 일본, 대만 등 동남아시아를 비롯하여 유럽, 미국 등에서 유행하는 식중독의 원인균이며 또한 해외여행자 설사증의 주요한 원인균이다. 장염비브리오의 헐청형은 13종의 O 균체항원과 75종의 K 협막항원으로 분류되고 있으며 감염증을 일으키는 혈청형은 다양하다. 장염비브리오의 중요한 병원인자로는 Wagatsuma 혈액한천배지에서 Kanagawa 현상(KP)을 일으키는 내열성 용혈독(thermostable direct he-molysin; TDH)와 TDH 유사독소(TDH-related hemolysin;TRH)의 2종류가 있으며, TDH와 TRH는 세포막에 pore을 형성하는 독소로서 장관독성과 심장독성이 있다. 독소 생성 유전자인 tdh와 trh는 플라즈미드 DNA와 염색체 DNA에 존재한다. 다른 비브리오균종에서는 V. chol-erae non-O1, V. hollisae, V. mimicus가 TDH 유사독소(각각 NAG-rTDH, Vh-rTDH, Vm-TDH)를 생성하는데, Vm-TDH, NAG-rTDH는 내열성으로 TDH와 유사하고, Vh-rTDH는 이열성으로 TRH와 유사하다. trh 유전자는 염기배열이 \( 84 \% \) 의 상동성을 보이는 trh1과 trh2의 두 종류가 있다. 병원성의 역학적 해석에서 trh1 보유균주와 trh2 보유균주는 모두가 설사증에 관계하는 병원성 균주이며 최근에는 해외여행자의 설사증 환자에서 분리되는 장염비브리오 중에서 trh 보유 균주의 분리비율이 높고 urease 생성과 관련성이 보고되고 있다.</p> <p>단일 혈청형에 의한 식중독 발생은 멕시코와 미국 서부해안에서 발생한 O4:K12 균주에 의한 감염증 이외는 보고가 없었다. 1996년 2월 이후부터 캘커타(Calcutta)에서 혈청형 O3:K6 균주가 처음으로 대유행을 하기 시작하여 1998년 이후 O4:K68 및 O1:K untypeable (KUT)의 장염비브리오가 범세계적으로 유행을 하고 있다. 이러한 혈청형의 유행균주는 독특한 open reading frame 8 (ORF 8)을 보유하는 섬유상 파지에 의한 horizontal gene transfer에 의한 것으로 연구되었다.</p> <p>따라서 본 연구는 한국과 일본에서 유행하는 장염비브리오의 병원성 인자와 유전자의 역학적 연구에 도움이 될 특성을 비교하기 위하여 국내에서 분리된 환자유래 장염비브리오균주와 일본 후쿠오카 지역의 환자에서 분리한 장염비브리오균주에 대하여 toxR 유전자의 검출, 혈청형별 검사, 약제 내성의 양상, tdh, trh1 및 trh2 유전자의 보유상태 및 생화학적 성상 중에서 urease 생성성에 대하여 검토하고, 특히 혈청형 O3:K6 장염비브리오 대하여 TDH의 생성성에 대한 검사를 실시하였다. 또한 유전자형별을 검토하기 위하여 tdh 양성균주의 restriction fragment length polymorphism (RFLP)형별, ORF8의 분포, pulsed-field gel electrophoresis (PFGE)법과 random amplified polymorphic DNA (RAPD)법을 실시하여 분석하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>사용 균주</h2> <p>본 연구에서 사용된 균주는 1999년에서 2001년도에 걸쳐서 국내에서 분리된 환자유래의 장염비브리오 18균주, 2002년도에 일본 후쿠오카에서 분리된 환자유래의 장염비브리오 9균주 등 27균주를 대상으로 하였다. 균주는 Ewing의 방법에 따라 생화학적 및 헐청학적인 방법으로 동정하였으며, 최종적인 장염비브리오의 동정은 toxR 유전자의 검출로 확인하였다.</p>