R4누룩 추출물과 분획물의 항혈전 활성을 평가하기 위해 트롬빈시간 및 혈액응고검사 aPTT을 측정하였고 시료 대조군으로는 아스피린, 용매 대조군으로는 DMSO를 사용하였다. 결과는 SPSS 21.0버전을 이용하여 mean\( \pm \)SD로 나타냈다.
<p>R4누룩 추출물 및 분획물의 항혈전 활성은 혈액응고 저해활성과 혈소판 응집저해 활성을 측정하여 평가하였다. 혈액응고 저해활성은 혈액 응고반응에서 중추적 역할을 수행하는 thrombin의 활성을 평가하는 thrombin time (TT), 외인성 응고계(II, V, VII 및 X 인자)의 응고 활성을 종합적으로 측정하는 prothrombin time (PT) 및 내인성 경로에 의한 혈액응고활성을 평가하는 activated partial thromboplastin time aPTT을 측정하였다. 각각의 측정은 기존의 보고와 동일하게 실시하였으며, 시료 대조군으로는 아스피린(Sigma Co., St. Louis, MO, USA)을 용매 대조군으로는 DMSO를 사용하였으며, TT, PT 및 aPTT연장활성은 각각 3회 이상 반복한 시료 실험의 평균치를 용매 대조구인 DMSO 의 실험 평균치의 비로 나타내었다. 실험 결과는 SPSS 21.0버전을 사용하여 mean \( \pm \)SD로 나타내었으며, 각 군간의 차이는 ANOVA로 분석하였으며, Duncan 다중비교 검증 법으로 통계적 유의성 검정을 조사하였다. 유의수준은 p \(< \)0.05 로 하였다. 혈액응고 저해활성 분석결과, 대조구로 사용된 aspirin (1.5 \( \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \))은 TT, PT, aPTT를 무첨가구에 비해 각각 1.7배 연장시켜 우수한 항혈전 효과를 확인하였 다. 한편 R4 누룩의 ethanol 및 열수 추출물 (5 \( \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \))은 TT에서 약한 연장활성이 나타났으나, PT및 aPTT의 변화는 나타나지 않았다. 그러나 ethanol 추출물의 순차적 분획물에서는 다양한 혈액응고 저해활성이 나타났으 며, ethylacetate 분획에서는 대조구에 비해 각각2.0배, 2.6배, 1.9배 연장된 TT, PT, aPTT를 나타내었으며, 농도의 존적인 저해활성과 함께 7 \( \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \)농도에서는 대조구에 비 해 각각 4.5배, 5.1 배, 15배 연장된 TT, PT, aPTT를 나타내어 내인성 경로에 의한 혈액응고인자 저해가 매우 강력함을 확인하였다. 열수 추출물의 경우 ethylacetate 분획에서1.5배 연장된 TT를 나타내었으나, ethanol 추출물의 분획물보다 낮은 활성을 나타내었다. 이는 열수 추출 동안의 활성물질의 손실 및 실활에 기인하는 것으로 판단되며, 실제 ethanol 추출물의 ethylacetate 분획물을 100 \( ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 1시간 열처리 이후 잔존 활성을 평가한 결과 열처리전과 비교하여 60 \( \% \)정도의 aPTT활성을 나타냄을 확인하였다. 상기의 결과는, 항혈전 활성물질 회수를 위해서는 ethanol 추출이 적합하며, R4 누룩의 ethylacetate 분획은 기존 한방자원보다 우수하며, 강력한 혈액응고인자 저해활성이 알려진 흑마늘의 ethylacetate 분획과 유사하였다.</p>