본 정제 효소액의 pH나 온도를 각종 butter을 통해 단계별로 조절하여 측정한 결과, 효소의 안정성을 \(4^{\circ}\mathrm{C}\)에서 하루 방치 후 \(80\%\) 이상 유지하는 pH 범위는 5~7이고, \(\mathrm{pH}~5\)에서 \(90\%\) 이상 유지하는 온도는 \(10^{\circ} \mathrm{C}\sim40 ^{\circ} \mathrm{C}\)이다. 또한 최적 반응 활성을 나타내는 pH는 5이며, \(\mathrm{pH}~5\)에서 최적 반응 활성을 보이는 온도는 \(40^{\circ}\mathrm{C}\)이다.
<h2>\( \mathrm { pH } \) 안정성 및 최적 반응 \( \mathrm { pH } \)</h2> <p>\( \mathrm { pH } \) 안정성은 정제 효소액을 각종의 buffer로 \( \mathrm { pH } \)를 2~11로 조절하여 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 24시간 방치한 후 효소의 잔존 활성을 측정함으로 알 수 있었다. 효소 안정성이 \( 80 \% \) 이상을 유지하는 \( \mathrm { pH } \) 범위는 5~7로서 \( \mathrm { pH } \)의 안정 범위는 그렇게 넓은 것이 아니었다. 반면에 \( \mathrm { pH~ } 4 \sim 11 \)까지의 범위에 걸쳐 약 \( 50 \% \) 이상의 안정성을 유지하는 특성을 보였다. 그러나 \( \mathrm { pH } 3 \) 이하에서는 급격히 실활 하며 \( \mathrm { pH~ } 2 \)에서는 완전히 실활 되었다. 또한, 효소 활성의 \( \mathrm { pH } \) 의존성을 검토하기 위하여 각각의 buffer를 사용하여 효소 반응액의 \( \mathrm { pH } \)를 3~10으로 단계적으로 조절하고 그 효소 활성을 측정하였다. 그 결과, 본 효소의 최적 반응 활성을 갖는 \( \mathrm { pH } \)는 5.0이었으며 \( \mathrm { pH~ } 4 \)와 6에서도 \( 90 \% \) 이상의 활성을 나타내었다.</p> <h2>온도 안정성 및 최적 반응 온도</h2> <p>본 정제 효소의 온도 안정성과 최적 반응 온도를 Fig. 5에 나타내었다. 정제 효소액 \( 0.3 \mathrm { ~ml } \)를 포함한 \( 0.01 \mathrm { M } \) acetate buffer \( ( \mathrm { pH~ } 5.0 ) \) \( 2 \mathrm { ~ml } \) 를 각 온도 즉 \( 10 ^ {\circ } \mathrm { C } \sim 70 ^ {\circ } \mathrm { C } \)까지의 각 온도에서 30분간 열처리한 후 \( 10 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 잔존 활성을 측정한 결과, 본 정제 효소는 \( 10 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \)까지는 \( 90 \% \) 이상의 활성을 유지하는 안정성을 보였으나 \( 50 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 이상에서는 급속히 감소하여 \( 70 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서는 완전히 실활 되었다. 또한, 효소의 최적 반응 온도를 측정하기 위하여 정제 효소액 \( 0.3 \mathrm { ~ml } \)가 함유된 상기의 buffer \( 2 \mathrm { ~ml } \)에 \( 0.4 \% \) ampicillin 기질액 \( 1 \mathrm { ~ml } \)를 첨가하여 \( 20 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 \( 70 ^ {\circ } \mathrm { C } \)까지 단계적으로 반응 온도를 조절한 항온기에서 30분간 효소 반응을 행한 후 급랭하여 iodine 시약 \( 5 \mathrm { ~ml } \)를 가하여 실온에서 10분간 방치한 후 \( 540 \mathrm { ~nm } \)에서 흡광도를 측정하여 잔존 활성을 백분율로 산출한 결과, \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 가장 높은 활성을 보였다. 또한 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 및 \( 50 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서는 \( 80 \% \) 이상의 활성을 나타내었다.</p>