황칠나무의 잎과 줄기에서 추출한 물을 이용하여 ALDH 효소의 활성을 Koivula와 Koivusalo의 방법을 변형하여 측정하였다. 이때, 대조구로는 TE buffer를 사용하였고, 양성 대조군에는 50% 농도의 hepos가 사용되었다. ADH 활성 측정과 동일한 방식을 적용하여 ALDH 효소의 활성도를 측정하였다.
<p>\( \begin {array} { c } \text { Relative } \mathrm { ADH } \\ \text { activity } ( \%) \end {array} = \left ( \frac {\text { 실험구의 최대 흡광도 } } {\text { 대조구의 최대 흡광도 } } \right ) \times 100 \)</p> <h2>Acetaldehyde dehydrogenase (ALDH) 활성 측정</h2> <p>황칠나무 잎과 줄기 물 추출물의 \( \mathrm { ALDH } \) 의 효소 활성 측정은 Koivula와 Koivusalo의 방법[15]을 약간 변형하여 측정하였다. 반응 용액은 증류수 \( 2.1 \mathrm { ml } , 1.0 \mathrm { M } \) Tris- \( \mathrm { HCl } \) buffer ( pH 8.0) \( 0.3 \mathrm { ml } , 20 \mathrm { mM } \mathrm { NAD } { } ^ { + } 0.1 \mathrm { ml } , 0.1 \mathrm { M } \) acetalde-hyde \( 0.1 \mathrm { ml } , 3.0 \mathrm { M } \mathrm { KCl } 0.1 \mathrm { ml } \), \( 0.33 \mathrm { M } \) 2-mercaptoethanol \( 0.1 \mathrm { ml } \) 및 시료 \( 0.1 \mathrm { ml } \) 를 혼합하여 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 10 분간 반응시킨 후 \( \mathrm { ALDH } (1 \mathrm { unit } / \mathrm { ml } ) 0.1 \mathrm { ml } \) 를 첨가하여 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 항온수조에서 5 분간 반응시킨 다음 \( 340 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하였다. 대조구는 시료 대신 TE buffer ( \( \mathrm { pH } \) 8.0)를 첨가하여 상대 활성( \%)으로 나타내었고, positive control은 \( \mathrm { ADH } \) 활성 측정과 같이 \( 50 \% \) 농도의 hepos를 사용하였으며, \( \mathrm { ADH } \) 활성 측정식과 동일한 식을 사용하여 \( \mathrm { ALDH } \) 활성 측정을 측정하였다.</p>