영실 추출물에 함유된 페놀성 화합물은 항산화효과 등의 생리활성기능을 가지고 있다. 이에 그 함량을 조사한 결과, \( 70 \% \) 농도의 ethanol을 용매로 하여 24시간 교반 추출하였을 때 영실 추출물을 최적조건으로 용출할 수 있었다. 그리고 영실 추출물을 이용한 H. pylori에 대한 항균활성을 \( 70 \% \) 에탄올 추출물을 이용하여 측정하였을 때, 추출된 phenol성 물질을 \(200 ~ \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)의 농도로 첨가하였을 때 \( 14 \mathrm { ~mm } \)의 저해환이 나타났다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>영실 추출물의 총 페놀화합물 함량</h2> <p>페놀성 화합물은 식물계에 널리 분포되어 있는 2차 대사산물의 하나로 다양한 구조와 분자량을 가지며, phenolic hy-droxyl (OH)기를 가지기 때문에 단백질 및 기타 거대 분자들과 결합하여 항산화효과 등의 생리활성기능을 가지는 것으로 알려져 있어 영실 추출물에 함유된 페놀성 화합물의 함량을 조사하였다. 영실 추출물을 식품에 적용하기 위하여 인체에 유해하지 않으며 비교적 phenol성 물질 용해도가 높은 ethanol을 추출용매로 하여 Fig. 1에서와 같이 다양한 농도로 phenol성 물질을 추출하였다. 또한 시간에 따른 phenol성 물질의 용출량의 변화에서는 Fig. 2에서와 같이 6시간에서 24시간까지 용출량이 증가하다가 24시간 이후에는 용출량의 변화가 거의 나타나지 않았다. 따라서 영실 추출물의 용출 최적조건은 \( 70 \% \) 농도의 ethanol을 용매로 하여 24시간 교반 추출하였을 때이라 할 수 있겠다. Clark 등은 식물체에 함유된 페놀성 물질이 항균활성을 나타낸다고 보고하였는데, 영실을 \( 70 \% \) ethanol을 추출용매로 하여 24시간 교반한 추출물에서 비교적 높은 페놀성 물질의 함량이 나타나 천연 항균제 및 생리활성 물질로의 활용가능성을 추측할 수 있었다.</p> <h2>영실 추출물의 H. pylori에 대한 항균활성 측정</h2> <p>영실 추출물을 이용한 H. pylori에 대한 항균활성은 \( 70 \% \) 에탄올 추출물을 이용하여 측정하였다. 그 결과 Table 1과 같이 \( 100 ~ \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 이하의 저농도에서는 영실의 항균활성이 나타나지 않았으며, 추출된 phenol성 물질을 \( 150 ~ \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)의 농도로 첨가하였을 때 \( 12 \mathrm { ~mm } \), \(200 ~ \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)의 농도일 때 \( 14 \mathrm { ~mm } \)의 저해환이 나타났다.</p> <h2>영실 추출물의 분리 및 정제</h2> <h3>영실 추출물의 분리 및 H. pylori에 대한 항균활성 측정</h3> <p>건조된 영실 \( 5 \mathrm { ~kg } \)을 \( 70 \% \) ethanol로 추출한 후 Sephadex LH-20 open column chromatography를 이용하여 \(70 \% \) etha-nol 용매로 용출시켜, silica TLC plate를 이용하여 전개한 후 \( 10 \% \), \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { SO } _ { 4 } \)로 발색시켜 phenol성 물질의 유무를 확인하고, 1차 분획하여 A, B, C, D, E 5가지 1차 분획물을 획득하고 phenol성 물질의 함량을 측정한 결과 Table 2와 같이 D 분획물에서 \(3139 ~ \mu \mathrm { g } / \mathrm { g } \)으로 가장 높은 함량을 나타내었다. H. pylori에 대한 1차 분획물의 항균활성을 측정한 결과 Table 2에서와 같이 D 분획물에서 \( 16 \mathrm { ~mm } \)의 저해환을 관찰할 수 있었으나, 나머지 분획물에서 저해환을 관찰 할 수 없었다.</p>