대장균은 시료에 멸균수를 가해 균질화하여 각 희석단계별 시료를 취해 CFU/g으로 나타내었고 균주의 배양은 공시균주를 lactose broth에 1백금을 접종하여 진타배양 한 후 새로운 액체배지에 접종하고 진탕배양 시킨 후 이 균주 배양액으로 사용하였다. 전처리 방법은 국내산 선식용 곡류원료 3종을 물과 E. coli 균배양액에 넣어 드라이 오븐에 건조시켜 원료 사용하였다. 일반 가정용 수도수를 사용해 세척횟수 1~3회로 설정하고 세척수량은 원료대비 130, 160,200%로 설정하였다. 또한 온도는 찬물과 온수로 설정해 염수 농도를 달리하여 3,5,7,10% 세척구간으로 설정해 3회 반복 실험 하였다.
<h2>배지 및 시약</h2> <p>실험에 사용된 대장균 및 대장균군용 배지는 3M 주식회사 Petrifilm \( ^ {\mathrm { TM } } \) aerobic count plate, E. colikoliform plate를 사용하였다.</p> <h2>대장균</h2> <p>시료 \( 25 \mathrm { ~g } \)에 멸균수 \( 225 \mathrm { ~ml } \)를 가한 후 균질화 하여 \( 1 \mathrm { ~ml } \)를 각 희석단계별 시료를 Petrifilm \( ^ {\mathrm { TM } } \) E.coli/coliform plate에 \( 1 \mathrm { ~ml } \) 씩 취하여 \( 35 ^ {\circ } \mathrm { C } \), \(24 \mathrm { ~hr } \) 배양 Standard Plate Count에 의하여 \( \mathrm { CFU } / \mathrm { g } \)으로 나타내었다.</p> <h2>균주의 배양</h2> <p>공시균주를 lactose broth (LB, Difco, USA) \( 10 \mathrm { ~ml } \)에 1백금이 접종하여 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 \( 24 \mathrm { ~hr } \) 진탕배양 \( (100 \mathrm { ~rpm } ) \) 한 후 이 균 현탁액 \( 0.1 \mathrm { ~ml } \)를 다시 새로운 액체배지(lactose broth) \( 100 \mathrm { ~ml } \)에 접종하고 \( 24 \mathrm { ~hr } \) 진탕배양 \( (37 ^ {\circ } \mathrm { C } \), \(100 \mathrm { ~rpm } ) \)시킨 후 이 균주 배양액으로 사용하였다. E. coli균 KCTC1682를 배양하여 사용하였다.</p> <h2>전처리 방법</h2> <p>원산지가 국내산인 선식용 곡류원료 3종 검정콩, 찹쌀, 수수를 각각 \( 10 \mathrm { ~g } \) 물 \( 10 \mathrm { ~ml } \)와 E. coli 균배양액 \( 1 \mathrm { ~ml } \)를 넣고 드라이오븐에서 \( 24 \mathrm { ~hr } \) 건조 시켜 원료사용 하였다.</p> <h2>세척방법 조건에 따른 방법 설정</h2> <p>일반 가정용 수도수를 사용하여, 세척횟수 1, 2, 3회로 설정하였고, 세척수량은 원료대비 \( 130,160,200 \% \)로 설정하였다. 또한 세척 수 온도는 찬물과 온수 \( \left (40 ^ {\circ } \mathrm { C } \right ) \)로 설정하였으며, 염수 농도를 각각 달리하여 \(3, 5, 7, 10 \% \) 세척구간으로 설정하여 3회 반복 실험 하였다.</p>