자기기입식 설문을 통해 한국인 만성병 역학조사 및 유전체 연구사업의 인구학적 특성, 병력, 흡연력, 음주력 등을 조사하였다. 최소 10시간 이상 금식 후 채혈하여 총 콜레스테롤, 고밀도 콜레스테롤, 저밀도 콜레스테롤, 중성지방, 공복 혈장 포도당, 당화혈색소 등을 측정하였고, 이후 채혈된 혈액은 EDTA 처리된 시험관에 보관하여 DNA를 분리하였다.
<h2>설문조사 및 신체계측</h2> <p>한국인 만성병 역학조사 및 유전체 연구사업의 설문지를 참고한 설문지를 이용하여 자기기입식 방법으로 사회 인구학적 특성, 현재의 병력, 과거력, 흡연력, 음주력 등을 작성하였다. 대상자는 검사 전날 밤부터 최소한 10시간 이상 금식한 공복 상태에서 가벼운 의복을 착용하게 하였고 신장과 체중을 자동신장체중계를 이용하여 동시에 측정하였다. 체질량지수 (body mass index, BMI \( = \mathrm { kg } / \mathrm { m } ^ { 2 } \) )는 측정한 기본 신체 계측기로부터 산출하였다.</p> <h2>임상검사</h2> <p>혈액 검사는 전날 밤부터 최소한 10시간 이상 금식한 공복 상태에서 채혈한 후, 총 콜레스테롤, 고밀도 콜레스테롤, 저밀도 콜레스테롤, 중성지방, 공복 혈장 포도당, 당화혈색소 등을 측정하였다. 당화혈색소, 총 콜레스테롤, 고밀도 콜레스테롤, 저밀도 콜레스테롤, 중성지방은 Histachi Modular D2400 기계(Roche, Tokyo, Japan)를 이용, 측정하였으며, 공복혈당은 Modular Analytics SWA (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Germany)를 이용하여 측정하였다.</p> <h2>채혈 및 DNA 분리</h2> <p>채혈된 혈액은 EDTA (ethylenediaminetetraacetic acid) 처리된 시험관에 넣어 냉장 보관하였다가 실험실로 운반하여 DNA를 분리하였다. DNA 분리는 Genomic DNA isolation kit (Gentra)를 이용하였다. 혈액 \( 2 \mathrm { ~ml } \) 당 \( 6 \mathrm { ~ml } \)의 RBC lysis solution을 넣은 후 5분간 잘 흔들어 주었고, \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 \(3,500 \mathrm { ~rpm } \)의 속도로 5 분간 원심분리한 후, 상등액과 분리하였다. Vortex mixer로 세포 덩어리를 잘 풀어준 후 \( 2 \mathrm { ~ml } \)의 Cell lysis solution을 넣고 10초간 vortex mixer로 다시 잘 섞어준 후 실온에서 10분 이상 방치하였다. Protein precipitation 용액 \( 0.7 \mathrm { ~ml } \)를 넣고 충분히 vortex한 후 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 \( 3,500 \mathrm { ~rpm } \)으로 10분간 원심분리하여 단백질을 포함한 모든 불순물을 가라앉혔다. 상등액을 담은 tube에 \( 2 \mathrm { ~ml } \)의 \( 100 \% \) isopropyl alcohol에 옮겨 DNA가 보일 때까지 섞었다. \(2,500 \mathrm { ~rpm } \)으로 5분 동안 원심분리한 후 상등액은 버리고, 가라앉은 부분을 \( 70 \% \) ethanol로 탈수시켰다. \( 150 ~ \mu \mathrm { l } \) DNA 수용액을 넣어 \( 65 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 \( 2 \sim 3 \)시간 방치한 후 \( -20 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 보관한 후 필요할 때마다 꺼내어 사용하였다.</p>