DPPH 라디칼은 alcohol 용액 내에서는 DPPH의 질소 원자와 alcohol간에서 Suzuki 등은 Bacillus sp.에서 최적 \( \mathrm { pH } 7.6 \)이었으며 효소의 안정성도 \( \mathrm { pH } 7.0-8.0 \) 사이에서 분리된 효소의 활성 최적 \( \mathrm { pH } \)를 실험한 결과(Fig. 6) \( \mathrm { pH } 7.0 \)에서 가장 높은 활성을 갖는 물질과 반응하면 진보라색의 DPPH의 색깔이 점점 옅어져 흡광도가 감소하고 식품부패균의 생육은 저해하고 유용미생물인 김치 젖산균의 생육은 촉진하는 것으로 나타났다.
<p>분리된 효소의 활성 최적 \( \mathrm { pH } \)를 실험한 결과(Fig. 6) \( \mathrm { pH } 7.0 \)에서 가장 높은 활성을 보였고, \( \mathrm { pH } 6.0 \)의 미산성 영역에서도 높은 활성을 보였다. \( \mathrm { pH } \) 에 대한 효소의 활성은 \( \mathrm { pH } 6.0-7.0 \) 사이의 영역에서는 별 영향을 받지 않았으며 \(6.0 \)이하와 \( \mathrm { pH } 8.0 \)이상의 산, 알칼리 영역에서는 효소활성이 크게 감소했다. Suzuki 등은 Bacillus sp.에서 최적 \( \mathrm { pH } 7.6 \)이었으며 효소의 안정성도 \( \mathrm { pH } 7.0-8.0 \) 사이에서 안정한 것으로 나타났으며, 일반적으로 agarase의 최적 활성 \( \mathrm { pH } \) 는 \( 7.0 \) 부근이었으며, 안정성도 \( \mathrm { pH } ~6.0-8.0 \)사이에서 비교적 효소활성이 안정한 것으로 밝혀져 있다.</p> <h2>DPPH법에 의한 항산화활성 측정</h2> <p>DPPH 라디칼은 alcohol 용액 내에서는 DPPH의 질소 원자와 alcohol간에 수소결합이 형성되기 때문에 다른 유리 라디칼보다 비교적 안정하고, 항산화 활성을 갖는 물질과 반응하면 진보라색의 DPPH의 색깔이 점점 옅어져 흡광도가 감소한다. DPPH 라디할 소거법은 홉광도의 감소를 측정함으로서 radical 소거 활성을 쉅게 즉정 할 수 있다는 장점을 가지고 있어 항산화 활성 측정의 척도로 많이 활용되고 있다. S. paucimobilis AS-1의 배양 상등액에 대한 DPPH 라디칼 소거 활성을 시간대별로 측정한 결과(Fig. 7) S. paucimobilis AS-1은 EDA \ ( \(%) \)가 4시간과 8시간 배양 후 \( 11.4 \% \)와 \( 51.2 \% \)로 각각 증가하였으며, 12시간 배양 후 \( 72.5 \% \)로 최고 활성을 나타내었으며, 24시간과 48시간 배양 후에는 각각 \( 38.1 \% \)와 \( 31.5 \% \)로 점차 감소하는 경향을 나타내었다. 이러한 결과는 생성된 agar hydrolysates 의 형태에 따른 결과로 생각되며, 앞으로 어떤 oligosaccharides가 생성되는지 확인이 요구된다. Giordano 등과 Wang 등은 해양미생물 유래의 agarase에 의하여 생산된 oligosaccharides가 항산화활성이 있다고 보고하였으며, 식품, 화장품 및 의약산업에 oligo-saccharides 이용하기위하여 새로운 agarase효소에 대한 많은 연구가 필요하다.</p> <h2>항균활성 측정</h2> <p>Agar 분해산물의 향균활성은 agar 넣고 배양한 액체 배양액을 원심분리한 후, 균체를 제거한 상층액을 \( 10 \% \)로 희석하여 효소분해물로 사용하였다. 식중독 및 식품 부패균과 김치 발효균은 LB broth (tryptone \( 10 \mathrm { ~g } \), yeast extract \( 5 \mathrm { ~g } , \mathrm { NaCl } \) \( 5 \mathrm { ~g } , \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } ~1,000 \mathrm { ~ml } \))에서 배양하였다. 항균활성은 LB배지에 \( 10 \% \) 효소분해물을 첨가하고 군주배양액을 접종하여 진탕배양하면서 \( 550 \mathrm { ~nm } \)에서 흡광도를 측정하였다(Fig. 8). 식중독 및 식품 부패균은 Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Proteus vulgaris 등은 생육이 대조군에 비하여 \( 10 \% \) 효소분해<p>물을 첨가한 군에서 감소하였으며, 김치 젖산균 Lactobacillus plantarium의 생육은 약간 증가하였다. 이러한 결과는 agar-ase 효소분해물이 식중독균 및 식품부패균의 생육은 저해하고 유용미생물인 김치 젖산균의 생육은 촉진하는 것으로 나타났다. 주등의연구에서도 병원성 미생물에 대해서 강한 항균활성은 나타나지 않는 것으로 보고되었으며, 단지 항충치 활성은 높은 것으로 나타났다. 이러한 항균성 기작이 어떤 올리고당류가 활성에 관계되는지 지속적인 연구가 이루어져야할 것으로 생각된다.</p>