H-E 염색은 세포의 apoptosis 과정을 진한 색상으로 나타내며, 세포질은 산성 호성을 보이고 핵의 응축 정도는 세포마다 다르다. TUNEL 염색은 첨단체에 선택적으로 양성 반응을 나타내며, 상피단계를 쉽게 구별할 수 있게 한다. 방사선 조사 후, TUNEL 양성세포는 최고치를 보이고 18시간 후에 급격히 감소한다. 또한, 방사선 조사용량이 증가함에 따라 TUNEL 양성세포 수도 비례하여 증가한다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>조직학적 변화</h2> <p>H-E 염색상에서 apoptosis 발생세포의 핵은 진하게 염색되었으며 세포질은 산성호성을 나타냈으나 핵의 응축 정도는 세포마다 차이가 있었으며, TUNEL 염색에서는 강한 양성반응을 나타내는 세포로 관찰되었다. 방사선 비조사 대조군에서도 정조세포 및 일부 분열중인 정모세포에서 apoptosis 양성세포가 관찰되었으며 정자세포와 지지세포에서는 특이적인 이상이 없었다. TUNEL-PAS 이중염색의 결과, 첨단체(acrosome)에 선택적으로 적색의 양성반응을 나타냈으며 첨단체의 확장 각도를 명확하게 관찰할 수 있어 각 상피단계의 구별이 용이하였다(Fig. 1).</p> <h2>방사선 조사 후 시간경과 및 조사용량 따른 TUNEL 양성 세포변화</h2> <p>TUNEL 양성세포의 시간에 따른 변화를 보면 방사선 조사 후에 최고치를 나타내었고 18 시간(1.094 \( \pm 0.081) \) 에 빠르게 감소하였으며(Fig. 1) 기존 보고와 유사하였다. 방사선 조사용량의 증가에 따른 변화를 관찰하기 위하여 \( 0-8 \mathrm { ~Gy } \) 의 방사선을 조사하고 8 시간 뒤에 변화를 관찰한 결과 방사선 조사군의 TUNEL 양성세포 수는 방사선 조사용량에 비례하여 증가하였다(Fig. 2). TUNEL 양성세포는 정조세포와 정모세포에서 주로 관찰되었으며 특히 정조세포에서 그 수가 많았다. 비조사대조군에서 \( 0.315 \pm 0.065 \) 개의 양성세포가 관찰되었으며, \( 0.5 \) \( \mathrm { Gy } \) 조사군에서 \( 0.684 \pm 0.137,1 \mathrm { ~Gy } \) 조사군에서 \( 0.881 \pm 0.092,2 \)<p>\( \mathrm { Gy } \) 조사군에서 \( 1.007 \pm 0.231,4 \mathrm { ~Gy } \) 조사군에서 \( 1.162 \pm 0.067 \) 그리고 \( 8 \mathrm { ~Gy } \) 조사군에서 \( 1.959 \pm 0.338 \) 개의 양성세포가 관찰되었다. 각 조사선량에 따라 측정된 TUNEL 양성세포의 평균값이 linear-quadratic model \( \left ( \mathrm { Y } = \mathrm { aD } { } ^ { 2 } + \mathrm { bD } + \mathrm { c } \right ) \) 에 잘 맞고 이에 적용하면 용량-반응의 관계식은 \( \mathrm { Y } =(-0.014 \pm 0.009) \mathrm { D } ^ { 2 } + (0.31 \pm 0.697) \) \( \mathrm { D } + 0.3575 \left (r ^ { 2 } =0.9, \mathrm { Y } = \right . \) 고환정세관 한 개당 TUNEL 양성세포의 수, \( \mathrm { D } = \) 방사선량 \( \mathrm { Gy } \) 이었다. 용량별 변화 관찰 시점은 popto- sis가 확연히 증가하면서 시간경과에 따른 정세관 발달주기변화에 영향이 가장 적은 방사선 조사 후 8 시간이 적절하였다. 방사선 비조사 대조군에서도 비교적 많은 양성세포가 관찰된 것은 고환의 경우 정조세포의 증식과 분화과정 중의 생리적 apoptosis의 결과라는 보고와 일치하였다.</p>