본 연구에서는 로즈마리 추출물의 S. aureus, E. coli에 대한 항균 효과를 확인하였으며, methanol 추출물과 hexane, ethyl acetate, chloroform 분획물 및 rosmarinic acid에서 S. aureus, E. coli에 대한 높은 항균력을 가짐을 확인할 수 있었다. 또한 보다 정밀한 항균활성 농도를 측정하고자 MIC 측정을 진행하였으며, S. aureaus 균주와 E. coli 균주에 대한 MIC 분석 결과 methanol 추출물 보다 chloroform 분획물에서 더 좋은 활성이 일어남을 알 수 있었다. 추가로 손 세정 효과를 비교해 로즈마리 methanol 추출물이 들어간 물질로 세정한 손이 그렇지 않은 손 보다 세균 수가 감소한 것을 확인할 수 있었고, 우유를 이용한 저장성 연장을 분석해 methanol 추출물을 항균제 및 식품 보존제로서의 이용가능성을 판단하였다.
<h2>로즈마리 추출물 및 단일성분의 균 생육억제 효과</h2> <p>로즈마리 분흭물을 이용하여 S. aureus, E. coli에 대한 항균 효과를 검색한 결과는 Table 3에서 보는 것과 같이 methanol 추출물 \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{disc} \)의 농도에서 S. aureus에 대해 \( 15.4 \mathrm{~mm}\), E. coli에 대해 \( 14.3 \mathrm{~mm} \)의 inhibition zone을 나타냈다. 또한 hexane 분획물에서는 \( 2.5 \mathrm{mg} / \mathrm{disc} \)에서 S. aureus에 대해 \(12 \mathrm{~mm} \), E. coli에 대해 \( 13 \mathrm{~mm} \)의 inhibition zone을 나타냈으며, \(5 \mathrm{mg} / \mathrm{disc} \)의 농도에서 S. aureus에 대해 \( 12.7 \mathrm{~mm} \)의 Inhibition zone을 보였고, ethyl acetate 분획물 \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{disc} \)에서 S. aureus에 대해 \( 13.5 \mathrm{~mm}\), \(2.5 \mathrm{mg} / \mathrm{disc} \)에서 E. coli에 대해 \( 14.3 \mathrm{~mm} \)의 inhibition zone을 보였다. 또한 chloroform 분흭물은 \( 2.5 \mathrm{mg} / \mathrm{disc} \)의 농도에서 S.aureus에 대해 \(15.5 \mathrm{mm}\), \(5 \mathrm{mg} / \mathrm{disc} \)의 농도에서 E. coli에 대해 \( 14.3 \mathrm{~mm} \)를 나타내었으나, buthanol, water 분흭물에서는 inhibition zone이 전혀 나타나지 않아 항균활성이 확인 되지 않았다. 또한 단일물질인 rosmarinic acid 는 S. aureus에 대해 \( 11 \mathrm{~mm}\), E. coll에 대해 \( 10 \mathrm{~mm} \)의 inhibition zone을 형성하여 항균활성을 나타냈지만, 나머지 단일물질들은 inhibition zone을 형성하지 않아 항균활성이 확인 되지 않았다. 이 때 대조군으로 사용한 \( 100 \%\) DMSO는 두 가지 균에 대한 항균활성에 아무런 영향을 미치지 않았다(data not shown). 로즈마리의 methanol 추출물과 hexane, ethyl acetate, chloroform 분획물 및 rosmarinic acid에서 S. aureus, E. coli에 대해서 높은 항균력을 가지는 것으로 나타났으며, 이는 항산화 효과와의 연관성은 없는 것으로 보였다.</p> <h2>최소저해농도 측정(Minimum Inhibitory Concentration)</h2> <p>로즈마리의 추출물과 분획물을 1차 항균 검색시험인 disc diffusion method을 통해 확인 한 후, 보다 정확한 항균활성의 농도를 알아보기 위해 paper disc method에서 우수한 항균력을 보였던 methanol 추출물과 chloroform 분획물을 사용하여 E. coli와 S. aureus 각각의 균주에 대한 최소저해농도(MIC)를 측정한 결과는 Fig. 3,4에 나타내었다. MIC 측정 결과, S. aureaus 균주와 E. coli 균주 모두에서 methanol 추출물은 \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)의 MIC값을 나타내었고 chloroform 분획물은 \( 2 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)에서 MIC값을 나타내어 methanol 추출물에서 보다 chloroform 분획물에서 더 좋은 활성을 나타내었다. Cho 등에 의하면 E. coli에 대한 창출과 소목, 하고초 추출물이 \( 3.2 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)에서 MIC값을 나타내었고 희렴 추출물은 \( 3.4 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)에서 MIC값을 나타내어 항균효과가 높은 것으로 보고되었으며 본 실험의 로즈마리 또한 이와 유사한 MIC값을 나타내어 항균효과가 높다고 볼 수 있다. Lee 등에 의하면 S. aureus에 대한 레몬그라스, 꽃잎 oil은 \( 0.625 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)이었고, 로즈마리와 오렌지 oil은 \( 1.250 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)로 S.aureus 또한 유사한 결과를 나타내었다. 항균활성의 경우 methanol 추출물과 소수성의 hexane, chloroform 분획물에서 높은 활성을 보였다. 이는 두 소수성 분획물에 함유된 지질성분과 정유성분에 의한 것으로 사료되며 항균활성 또한 methanol 추출물의 경우 이런 성분들 상호간의 상승 작용에 의한 것으로 생각된다.</p> <h2>로즈마리 메탄올추출물의 손 세정 효과</h2> <p>로즈마리 추출물의 항균력을 비교적 간편하고 신속하게 효과를 알 수 있는 hand plate를 이용하여 알아 본 결과는 Fig. 5와 같다. 실험자 2인의 손을 이용하여 로즈마리 추출물의 향균력을 관찰한 결과 두 사람 모두의 결과에서 대조군 (A), (D)에 비해 \( 1 \% \) 로즈마리 methanol 추출물 (B), (E), \( 5 \% \) 로즈마리 methanol 추출물 (C), (F)에서 각각 농도별로 세균 집락의 색깔과 수를 감소시킨 것을 알 수 있었다. 이에 Duke의 보고와 같이 로즈마리가 항균력이 높다는 것을 볼 수 있으며 손 세정제로의 이용가능성을 보여 주었다.</p> <h2>로즈마리 메탄올추출물의 우유 저장성 연장 효과</h2> <p>Resazurin은 신선유에 대해서는 특유의 청색으로 염색시키고 점차 환원됨에 따라 청색 \( \rightarrow \) 홍자색 \( \rightarrow \) 담홍색 \( \rightarrow \) 무색으로 변화하는 색깔에 의해서 Table 4와 비교하여 세균수를 간접적으로 측정할 수 있다. Resazurin 환원력 실헙의 결과 \( 24 \mathrm{hr} \) 동안 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 항온조에 보관한 B-1는 홍색을 나타냈고 \( 72 \mathrm{hr} \) 동안 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 항온조에 보관한 B-2는 담홍색을 나타내었으며 약간의 악취를 풍겼다. 냉장 보관하여 청색을 나타낸 A-1과 A-2와 비교할 때 \( 24 \mathrm{hr} \) 후인 B-1는 다소 양호한 상태를 유지하고 있었고 \( 72 \mathrm{hr} \) 후인 B-2는 불량한 상태로 나타났다. \( 1 \% \) 시료를 처리한 C-1, C-2의 경우 \( 24 \mathrm{hr} \) 동안 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 항온조에 보관하였지만 A-1과 유사한 청색으로 나타나 상급유를 유지하고 있는 것으로 나타났다. \( 5 \% \) 시료를 처리한 D의 경우 시료 자체의 색이 너무 강해 청색으로의 변화는 나타나지 않았지만 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 항온조에 보관한 B시료에서 나는 악취는 없었으며 로즈마리향이 강하게 풍겨 우유의 품질을 효과적으로 보존한 것으로 사료된다. 위의 결과를 통해 항균제와 식품 보존제 등의 상품화는 경제적이고 그 활성이 우수한 methanol 추출물의 이용이 가장 이상적인 것으로 판단되어 methanol 추출물을 이용하여 항균제와 식품 보존제로의 이용가능성을 측정한 결과 항균제로는 hand plate를 통해 \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)에서 식품 보존제로는 resazurin 환원 실험을 통해 \( 1 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)에서 이용이 가능하리라 생각된다.</p>