답즙산에 대하여 콜레스테롤 저하 활성을 가지는 균주를 screening한 결과, 균주의 활성은 콜레스테롤 혼합물의 동화능력에 의한 것으로 추정되며, 가열살균한 경우에도 생균보다는 떨어지지만 제거 능력이 있음을 확인했다. 담즙산은 탈결합되어 지질의 용해와 흡수 활성을 떨어뜨리기 때문에 혈중 콜레스테롤의 농도를 조절하는데 중요한 역할을 하는것으로 나타났다. 그러므로 본 균주에서 콜레스테롤의 동화 및 탈결합 활성이 동시에 존재함을 확인할 수 있었다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>In vitro 콜레스테롤 저하 활성에 의한 유산균 screening</h2> <p>담즙산에 대하여 저항성을 갖는 유산균주들로부터 콜레스테롤 저하 활성을 갖는 균주를 screening하였다. 약 50 개의 유산균주들로부터 \( 0.2 \% \) sodium thioglycolate, \( 0.2 \% \) sodium taurocholate, \( 0.3 \% \) cholesterol를 첨가한 MRS배지에서 성장성이 보이는 Lactobacillus plantarum CBT 1209와 Lactobacillus rhamnosus 1702 균주를 얻었다. 이러한 생균의 유산균 저항 능력은 여러 논문에 보고된 바 있으며 콜레스테롤을 조절하는 유산균 스크리닝 방법으로 이용된다. 두 유산균의 반응 특성을 알아보기 위하여 콜레스테롤 제거와 탈결합 test를 수행하였다(Fig. 1). 생균 1209와 1702 균주는 콜레스테롤 함유 MRS 배지에서 24 시간 배양 한 후 콜레스테롤 측정용 kit로 분석한 결과 \( 20.4 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) 의 콜레스테롤을 \( 15.4 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) 와 \( 11.9 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) 로 각각 \( 25 \%, 42 \% \)나 감소시켰다(Fig. 1A). 그러나 이들 열처리 균주들은 감소력이 약하여 각각 대조군에 비해 \( 12 \% \) 와 \( 21 \% \) 감소시켰다(Fig. 1B).</p> <p>Liong와 Shah는 L. acidophilus 들이 콜레스테롤을 배지에서 동화하는대 가열살균한 균도 생균의 \( 10 \sim 20 \% \) 정도 제거하는 것을 보고하였다. 또한 Kimoto 등은 L. lactis subsp.lactis가 배지에서 콜레스테롤을 동화하는데 가열살균한 균이 생균의 \( 25 \% \) 정도 제거한다고 보고하였다[9]. 따라서 본 균주의 활성은 이들 보고 \( [9,12] \) 와 같이 콜레스테롤 혼합물의 동화능력(assimilation capacity)에 의한 것으로 추정할 수 있었으며 이들 가열살균한 균도 생균에 비해 떨어지나 제거 능력을 어느 정도 가지고 있음을 알 수 있었다.</p> <p>담즙산은 장내에서 지질 등 지용성물질을 유화시켜 체내로 흡수되도록 도와준다. 장내의 경우, 담즙산 분해대사에서 가장 중요한 반응 중 하나는 미생물이 지용성물질에 결합된 담즙산(conjugated bile acid)을 탈결합시키는 것이다. 탈결합된 담즙산은 지질의 용해와 흡수 활성을 떨어뜨리기 때문에 이러한 반응은 혈중 콜레스테롤의 농도를 조절하는데 매우 중요한 작용의 하나이다. 1209 와 1702 균주를 배양하여 배지 내에 해리된 담즙산 정도를 O-phthalaldehyde를 사용하여 측정하였다. 초기 사람의 담즙산인 콜릭산의 농도가 \( 0.56 \mathrm{mM} \) 에서 24 시간 배양동안 \( 0.62 \mathrm{mM} \) 와 \( 0.6 \mathrm{mM} \)로 증가하여(Fig. 1) 이러한 담즙산이 탈결합되는 반응을 확인하였다. 따라서 본 Lactobacillus rhamnosus CBT 1702와 Lactobacillus plantarum CBT 1209는 콜레스테롤의 동화와 탈결합 활성이 동시에 있음을 확인할 수 있었다.</p>