2002년 세화 수산에서 구입한 김(Porphyra tenera, PT) 40g을 80% ethanol로 추출하여 농축한 후 powder 상태로 만들어 7주령 Sprague-Dawley계 암컷 횐쥐 6군으로 나누어 난소 절제 시술을 실시하고, 김 추출물 50mg/kg 및 200mg/kg를 경구 투여하여 6주간 실험하였다. 각 군의 평균 체중은 192.9 \(\pm\) 1.9 g이며, ether를 사용하여 흰쥐를 마취하였고, 개복한 후에 정맥에서 채혈하여 30분간 방치한 후 3,000rpm, 4\(^\circ \mathrm{C}\)에서 10분간 원심 분리하여 혈청을 분리하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>재료</h2> <p>본 실험에서 사용된 김(Porphyra tenera, PT)은 2002년 세화 수산에서 구입하였으며, 건조된 김 \( 40 \mathrm { ~g } \) 을 \( 80 \% \) ethanol로 추출하여 감압 농축기로 농축한 후 농결 건조하여 powder 상태로 만든 후 동물 실험에 시료로 사용하였다. 수득율은 \( 24.37 \%(9.35 \mathrm { ~g } ) \) 였다.</p> <h2>실험 동물</h2> <p>실험동물은 체중이 평균 \( 180 \mathrm { ~g } \) (7 weeks) 되는 Sprague-Dawley계 암컷 횐쥐를 효창 사이언스(대구)로부터 구입하여 본 실험실에서 고형사료(삼양유지사료)로 사육하였고, 실험시작 전 1 주일 동안 대조군 식이로 적응시킨 후 동물의 체중에 따라 각 군의 평균 체중을 \( 192.9 \pm 1.9 \mathrm { ~g } \) 이 되도록 6~7마리씩 6군으로 나누었다. 즉 실험동물은 난소절제 대조군(OVX-control), 비 난소절제 대조군(Sham), 김 추출물 50 \( \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \) 투여군(OVX-PT50) 및 \( 200 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \) 투여군(OVX- PT200)으로 나누어 6 주간 실험하였다.</p> <p>체중은 실험 사육 기간 중 격일로 오전 중에 측정하고, 식이 섭취량은 매일 식이 잔량을 측정하여 산출하였다. 동물실험실의 사육조건은 온도 \( 24 \pm 2 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 습도 \( 55 \sim 60 \% \) 를 유지시키며 물과 식이는 자유 공급하였고, 실험 시료는 \( 0.9 \% \) 생리 식염수로 용해하여 매일 \( 1 \mathrm { ml } \) 씩 경구 투여하였고, 대조군(OVX-control, Sham)은 동일 용량의 \( 0.9 \% \) 생리 식염수를 투여하였다.</p> <h2>난소 절제 시술</h2> <p>1 주일 동안 주위환경에 적응시켜 체중에 따라 난괴법(Randomized Complete Block Design)에 의해 군을 나누어 난소 절제 수술을 실시하였다. 수술은 ether 마취 후 심마취기에 이르면 복부를 절개하여 난소를 제거하고 절개부는 봉합하였다.</p> <h2>혈청 분리</h2> <p>실험동물을 해부 전 24 시간 절식시킨 후 ether 마취 하에서 개복한 후 정맥에서 채혈하고 실온에서 30 분간 방치 한 후 \( 3,000 \mathrm { rpm } , 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 10 분간 원심 분리하여 혈청을 분리하였고, 실험 시까지 \( -70 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에 보관하였다.</p>