본 연구에서는 \( \mathrm{HaCaT} \) 세포에 대하여 지모 뿌리의 \( 50\% \) 에탄올 추출물, 에틸아세테이트 분획물 및 아글리콘 분획물을 \( 0.5-256 \mu\mathrm{g/ml} \) 농도로 처리한 후 24시간 이후에 세포 생존율을 측정하였습니다. 실험 결과로서, 지모 뿌리 아글리콘 분획물은 \( ^1\mathrm{O}_2 \)로 유도된 세포 손상과 과산화수소로 유도된 세포 손상에 대해 강력한 세포 보호 효과를 나타내었습니다.
<h2>지모 뿌리 추출물의 세포보호 효과</h2> <p>\( \mathrm { HaCaT } \) 세포 독성 평가: \( \mathrm { HaCaT } \) 세포에 대한 지모 뿌리 추출물의 농도에 따른 세포생존율을 확인하고자 MTT assay를 통해 확인하였고 세포가 \( 80 \% \) 이상 생존한 농도를 실험에 사용하기로 결정하였다. \( \mathrm { HaCaT } \) 세포에 \( 0.5-256 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 농도의 지모 뿌리 \( 50 \% \) 에탄올 추출물, 에틸아세테이트 분획물 및 아글리콘 분획물을 처리 후 \( 24 \mathrm { ~h } \) 뒤 세포 생존율을 확인하였다. 실험 결과, \( 50 \% \) 에탄올 추출물은 \( 16 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \), 에틸아세테이트 분획물은 \( 2 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \), 아글리콘 분획물은 \( 2 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 의 농도에서 \( \mathrm { HaCaT } \) 세포가 \( 80 \% \) 이상 생존율을 나타내었다. 따라서 세포 보호 효과를 확인하기 위한 시료의 최고 농도를 \( 2 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 으로 설정하여 사용하였다(Fig. 6).</p> <p>과산화수소로 유도된 세포 손상에 대한 세포 보호 효과: 과산화수소는 세포 내 \( \mathrm { SOD } \) 로 촉매되는 반응에서 \( \mathrm { O } _ { 2 } { } ^ { - } \)로부터 생성되며, 생성된 과산화수소는 생체 내 미량으로 존재하는 금속 이온과 반응하여 \( \cdot \mathrm { OH } \) 를 생성시켜 산화적 손상을 야기한다. 본 실험에서는 과산화수소로 유도된 세포 손상에 대한 지모 뿌리 \( 50 \% \) 에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획 및 아글리콘 분획의 세포 보호 효과를 확인하였다. 실험결과는 Fig. 7에 나타내었다. 양성대조군으로 과산화수소를 처리한 실험군은 처리하지 않은 군(음성대조군, \( 100 \%) \) 대비 약 \( 78.17 \% \)의 생존율을 나타내었다. \( 50 \% \) 에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획을 처리한 군은 각각 \( 2 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 의 농도에서 세포 생존을 유의적으로 증가시켰으며, 아글리콘 분획을 처리한 군은 \( 0.06 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 이상의 농도에서 세포 생존율을 유의적으로 증가시켰다. \( 50 \% \) 에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획물 및 아글리콘 분획물의 최대 생존율은 각각 \( 86.23,86.59 \) 및 \( 89.70 \% \) 를 나타냈으며, 이 때 과산화수소를 처리한 양성대조군에 비하여 세포 생존율을 각각 \( 8.07,8.42 \) 및 \( 11.53 \% \) 증가시켰다. 본 실험결과를 통해 지모 뿌리 아글리콘 분획물이 \( 50 \% \) 에탄올, 에틸아세테이트 분획물보다 과산화수소로 유도 된 세포 손상에 대한 보호 효능이 있음을 확인하였다. 결론적으로 지모 뿌리 아글리콘 분획물은 \( { } ^ { 1 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 으로 유도된 세포 손상뿐만 아니라 과산화수소로 유도된 세포 손상에 있어서도 세포보호효과가 큼을 확인하였다. 이는 각종 활성산소 생성 시스템에서 측정한 총항산화능과 더불어 세포 수준에서 수행한 다양한 활성산소종으로부터도 세포를 보호하는 효능이 있음을 시사하였다.</p>