섬바디 부위별 추출물의 항산화 활성은 DPPH, ABTS, nitrite 소거능, 환원력 측정을 통해 확인하였다. 또한 인간 적혈구 용혈 활성 측정을 통해 섬바디 부위별 추출물의 생물학적 효능을 평가하였다. 이러한 방법으로 total polyphenol (TP) 및 total flavonoid 함량을 측정하였으며, rutin과 tannic acid를 표준 시약으로 사용하였다.
<h2>섬바디 부위별 추출물의 항산화 활성</h2> <p>섬바디 부위별 추출물의 항산화 활성은 DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) 활성 음이온 소거능, ABTS [2,2-azobis(3-ethylbenzothiazoline -6- sulfonate)] 활성 양이온 소거능, nitrite 소거능 및 환원력(reducing power) 측정으로 평가 하였다. 활성 평가는 기존의 방법과 동일하게 사용하였으며, 활성 대조구로는 vitamin C (Sigma Co., St. Louis, MO, USA)를, 용매 대조구로는 DMSO를 사용하였다. 각각의 활성 평가는 각각 3회 반복한 실험의 평균과 편차로 표시하였다.</p> <h2>인간 적혈구 용혈활성</h2> <p>섬바디 부위별 추출물의 인간 적혈구 용혈 활성은 PBS로 3회 수세한 인간 적혈구 \( 100 \mu l \)를 96-well microplate에 가하고 다양한 부위 추출물 \( 100 \mu l \)를 가하여 최종농도가 \( 1 \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \)가 되도록 조정한 후 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 30 분간 반응시켰으며, 이후, 반응액을 10 분간 원심분리(1,500 rpm)하여 상등액 \( 100 \mu l \)를 새로운 microtiter plate로 옮긴 후 용혈에 따른 헤모글로빈 유출 정도를 \( 414 \mathrm { ~nm } \)에서 측정하였다[18]. 시료의 용매 대조구로는 DMSO \( (2 \%) \)를 사용하였으며, 적혈구 용혈을 위한 실험 대조구로는 Triton X-100 \( (1 \mathrm { mg } / \mathrm { ml } ) \) 및 amphotericin B를 사용하였다. 용혈 활성은 다음의 수식을 이용하여 계산하였다. Hemolysis \( ( \%) = \left [ \left (A_ { 414 } \mathrm { ~nm } \right . \right . \) in the samples \( -A_ { 414 \mathrm { ~nm } } \) in PBS) \( / \) \( \left (A_ { 414 \mathrm { ~nm } } \right . \) in \( 0.1 \% \) Triton \( X-100-A_ { 414 } \mathrm { ~nm } \) in PBS) \( ) \times 100 \).</p> <h2>추출물의 총 폴리페놀 및 기타 분석</h2> <p>Total polyphenol (TP) 및 Total flavonoid 함량 측정은 기존의 보고된 방법[20]에 따라 측정하였으며, 각각 rutin과 tannic acid를 표준시약으로 사용하였다. 총당 정량은 phenol-sulfuric acid법으로, 환원당 정량의 경우에는 DNS 변법을 이용 하였으며, 각각 sucrose와 glucose를 표준물질로 사용하였다.</p> <h2>통계분석</h2> <p>모든 분석결과는 3회 반복한 실험의 평균과 편차로 나타내었다. 실험 결과는 SPSS 26.0버전을 사용하여 mean \( \pm \mathrm { SD } \)로 나타내었으며, 각 군간의 차이는 일원배치 분산분석(1-way analysis of variance, ANOVA)을 한 후, Duncan's multiple range test에 의하여 \( p<0.05 \) 수준에서 유의성을 검증하였다.</p>