\( 10 \% \)중성 포르말린에 고정된 비장 조직은 조직 처리기를 사용하여 탈수와 조직 정리,파라핀 침투를 수행한 다음 Caseviewer 소프트웨어를 이용해서 백색수질 수 및 직경을 측정하였다.실험분석결과는 3중으로 측정해서 \(mean \pm \mathrm { SD } \)로 표시했다.\( \mathrm{NO}\)는 염증을 유발하는 초기단계를 조절하는 것으로 알려져 있는데, 연구결과에서 HKSMM을 6주동안 급이한 실험군에서 유의적으로 \(\mathrm{NO}\)가 감소하였다는 것은HKSMM의 급이는 balb/c 마우스에서 염증 초기 단계를 유발하는 \(\mathrm {NO}\)를 감소시켜, 감염부위의 부종과 발적을 감소시킬 수 있다는 것을 말해준다.
<h2>H&E staining을 통한 비장의 백색수질 측정</h2> <p>\( 10 \% \) 중성 포르말린에 고정된 비장 조직은 조직 처리기(Excelsior ES; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA)를 사용하여 탈수, 조직 정리 및 파라핀 침투를 수행하였다. 그런 다음 조직 샘플을 조직 고정 시스템(Histostar, Thermo Fisher Scientifric)을 사용하여 파라핀 블록에 고정하였다. 파라핀 블록을 마이크로톰(microtome)을 이용하여 \( 4 \mu \mathrm { m } \)으로 절단한 후 슬라이드를 제작하기 위해 autos-tainer (Coverstainer; Aglient, Santa Clara, CA, USA)를 이용하여 hematoxlylin&eosin (H&E) 염색을 수행하였다. H&E 염색된 슬라이드는 슬라이드 스캐너(Panoramic SCAN, 3D Histotech, Budapest, Hungary)를 사용하여 이미지를 스캔하였다. 이후, Caseviewer 소프트웨어(3D Histotech, Budapest, Hungary)를 이용하여 백색수질 수 및 직경을 측정하였다.</p> <h2>통계처리</h2> <p>실험의 분석결과는 3 중 측정하여 mean \( \pm \mathrm { SD } \) 로 표시하였다. 통계분석은 SPSS \( 12.0 \) (SPSS Inc., Chicago, IL, USA)과 일원 요인 분산 분석(ANOVA)를 사용하여 수행하였다. 통계적 유의성은 일원분산 분석 후 Duncan's multiple range와 Student's test로 \( p<0.05 \) 수준에서 분석하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>HKSMM의 NO (Nitric oxide)생성 억제 효과</h2> <p>\( \mathrm { HKSMM } \) 의 급이가 Balb/c 마우스에서 \( \mathrm { NO } \) 생성 억제에 미치는 영향을 분석한 결과는 Fig. 1과 같다. Balb/c 마우스에서의 nitric oxide (NO)는 4주차에 모든 군에서 유의적인 차이를 보이지 않았다. 하지만, 6주차의 \( \mathrm { NO } \) 생성억제는 \( \mathrm { HKSMM } \) 을 \( 2,000 \mathrm { mg } / 100 \mathrm { ~g } \) 급이한 \( \mathrm { T } 3 \) 군이 가장 \( \mathrm { NO } \) 생성을 억제한 \( \mathrm { PC } \) 군과 유사한 결과였다. \( \mathrm { T } 2 \) 군 또한 \( \mathrm { NC } \) 군에 비해 유의적으로 \( \mathrm { NO } \) 의 생성을 억제하였으며, \( \mathrm { T } 1 \) 군은 \( \mathrm { NC } \) 군에 비해 유의적인 결과는 보이지 않았다. 감염 부위의 부종과 발적을 감소시키기 위해선 대식세포의 염증 반응을 조절하는 \( \mathrm { NO } \) 생성을 억제하면 된다는 보고가 있다. 또한, \( \mathrm { NO } \) 는 염증을 유발하는 초기단계를 조절하는 것으로 알려져 있는데, 본 연구결과에서 HKSMM을 6주간 급이한 실험군에서 유의적으로 \( \mathrm { NO } \) 가 감소하였다. 따라서, HKSMM의 급이는 balb/c 마우스에서 염증 초기 단계를 유발하는 \( \mathrm { NO } \) 를 감소시켜, 감염부위의 부종과 발적을 감소시킬 수 있음을 시사한다.</p>