본 연구는 국내 육성 거베라 신품종의 배양 엽병으로부터 callus의 유도와 식물체 재분화에 영향을 미치는 적절한 식물생장조절제와 배양환경을 파악하기 위한 것이다. 절화용 거베라 품종 '화이트 데이', '송송이', '러브송'의 기내배양중인 엽병을 사용하였고, 이들 엽병을 성장한 어린 묘의 엽병을 약 1cm로 절단하여 MS배지에 배양하였다.
<p>따라서 본 실험은 거베라의 형질전환시스템을 확립하기 위한 기초자를 얻기 위하여 국내에서 육성한 거베라 신품종의 배양중인 엽병으로부터 callus의 유기 및 식물체 재분화에 미치는 적정 식물생장조절제의 종류, 조합, 농도 및 배양환경을 구명코자 수행하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>시험재료</h2> <p>시험재료는 경남농업기술원 화훼육종연구소에서 최근 육종한 절화용의 백색 반겹꽃 '화이트 데이', 절화용의 오렌지색 홑꽃 '송송이', 그리고 절화용의 적색 중 소륜계 '러브송' 등 3품종의 기내배양중인 엽병을 이용하였다.</p> <h2>배양방법</h2> <p>이들 3품종의 엽병을 기내 배양하여 성장한 어린 묘의 엽병을 \( 1 \mathrm { ~cm } \) 정도 절단하여 MS배지(Murashige and Skoog 기본배지)에 치상하였다.</p> <p>Callus유도를 위한 적정배지조건을 규명하기 위하여 MS배지에 식물생장조절물질 NAA, BAP, TDZ, 그리고 2iP를 각각 \(0.1, 0.5, 1.0, 2.0 \mathrm { ~mg } / \mathrm { L } \) 농도로 혼용한 배지에 배양하여 4주 후 그 결과를 관찰하였다. 식물체 재분화 조건을 검토하기 위하여는 식물생장조절물질로는 IAA, BA, 그리고 Zeatin을 \( 0.1,0.5,1.0 \mathrm { ~mg } / \mathrm { L } \) 농도로 혼용한 배지에 배양하여 6주 후 그 결과를 관찰하였다. 또 식물체 재분화에 있어 분화식물의 배양기간을 구명하기 위하여 분화배지에 배양 21, 25, 28, 32, 38일의 엽병을 실험재료로 비교하였고, 또 MS배지의 적정농도를 알아보기 위하여 \( 1, 1 / 2 \mathrm { MS } \) 로 나누어 그 결과를 관찰하였다. Callus 유도 및 식물체 재분화를 위하여 3반복으로 처리하였으며, 반복 당 엽병을 20개체를 치상한 후 조사하였다.</p> <p>Callus 유도를 위하여 4주 동안 암배양을 실시하였고, 식물체 재분화를 위하여 1주일 동안 암배양 하였으며, 그 후 명배양하였다. 배양환경은 \( 25 \pm 1 { } ^ {\circ } \mathrm { C } \), \(16/8 \)시간(명/암)의 일장조건 하에서 \( 1,500 \mathrm { ~Lux } \) 광조건으로 배양하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>배양 엽병조직으로부터 callus 유도</h2> <p>육성한 거베라 3품종 ‘화이트데이', '송송이' 그리고 '러브송'의 배양엽병조직으로부터 callus의 유도에 미치는 식물생장조절제의 영향을 검토하기 위하여 실시한 실험 결과는 Table 1과 같다. 배양엽병을 치상 1주일이 경과하면서 엽병이 부풀어지면서 엽병의 아래쪽 절단면으로부터 callus가 유도되기 시작하였다(Fig. 1). Callus의 형성은 품종 간 큰 차는 없었으나 그 중 '화이트데이'에서 양호한 경향이었다. 식물생장조절제의 종류, 농도 및 조합의 영향은 MS 배지에 NAA \( 0.1 \mathrm { ~mg } / \mathrm { L } + \mathrm { TDZ } ~0.5 \mathrm { ~mg } / \mathrm { L } \)의 혼용처리에서 타 처리구에 비하여 양호한 callus의 형성을 관찰할 수 있었다.</p>