버섯 균사체 배양액을 추가한 사료는 초기 6주 동안은 대조군과 비슷한 결과를 보였으나, 이후 9주와 12주에서는 높은 활성을 나타냈다. 이는 어종에 따라 B-glucan 배출 기간에 차이가 있음을 나타내며, 시간이 지남에 따라 비특이적 면역계를 지속적으로 자극해 lysozyme 활성을 증가시키는 것으로 보인다. 이러한 결과는 체액성 면역계를 담당하는 lysozyme의 활성 증가를 통해 버섯 균사체 배양 추출물이 면역기능 향상에 기여함을 시사한다. 또한, 실험군에서는 식세포의 활성이 높아짐으로서, 버섯 균사체 배양액의 생리활성물질이 어류의 비특이적 세포성 면역기능 강화에 중요한 역할을 할 것으로 예상된다.
<h2>라이소자임 활성</h2> <p>lysozyme 은 비 특이적 방어기작들 중에 대표적인 것으로 자연계에 넓게 분포하는 효소로서, 이 효소는 peptidoglycan 이라는 세규의 세포벽 성분을 분해하는 작용을 가지고 있으며, 이외에도 옵소닌, 항바이러스, 항암작용 등에도 관여를 하는 것으로서 보고 되고 있다[9]. 버섯 균사체 혼합 배양액을 첨가 사료룰 공급한 결과 6주 까지는 대조구와 실험구의 거의 비슷한 값을 보였지만 9주와 12주에서는 대조구에 비해 높은 수치를 나타냈다. 실험구의 경우 지속적으로 증가하다가 12주에는 다소 낮아지는 경향을 보였지만 대조구에 비해 높은 수치를 나타냈다(Fig. 3). 이는 버섯 균사체 배양액 성분 중에 \( \beta \)-glucan 성분에 의한것으로 사료되다. B-glucan 경구투여는 주사에 의한 투여와 마찬가지로 많은 어종에서 lysozyme 의 활성이 증가 되었고 [2,24], Won 등[23]은 7주 동안 4가지 농도가 다른 \( \beta-1,3 / 1,6- \) linked glucan 을 첨가한 사료를 부여한 결과 6주까지는 ly-sozyme 증가 하다가 7 주에서는 대조구와 비숫한 수치로 감소한다고 하였다. 또한 박 등[16]은 주사법으로 3일 간격으로 \( \beta \)-glucan 을 2번 접종 하였을 때 1차 접종 보다 2차 접종 때 더 높은 lysozyme 활성을 보였다고 하였다. 또한 박 등[15]이 잉어와 넙치에 5주간 B-glucan 을 투여한 결과도 lysozyme 활성이 증가하였다고 보고하였고, Yoshida[24]는 African catifish 에서는 투여 후 50일 까지도 lysozyme 활성이 높았다고 보고했다. 이는 어종에 따라 어체내의 B-glucan 을 배출하는 기간에 차이가 나며, 기간이 길어질수록 비 특이적 면역계를 지속적으로 자극함으로서 lysozyme 의 활성을 증가 시킨다고 사료된다. 체액성 면역계를 담당하고 있는 lyso-zyme 의 활성이 증가하는 것으로 보아 버섯 균사체 배양 추출물이 면역 기능 향상에 효과가 있을 것으로 사료된다.</p> <h2>식세포 활성 산소 측정</h2> <p>두신 식세포의 살균 작용의 지표로 널리 이용되고 있는 \( \mathrm { O } _ { 2 } \) 생성능의 조사하여 식세포 활성을 알아보았다. 식세포는 병원체가 침입하여 자극하면 활성산소 \( \left ( \mathrm { O } _ { 2 } \right ) \) 와 같은 reactive oxygen species (ROS)를 생산하는데, 이 물진늘이 강력한 살균 효과가 있는 것으로 알려져 있다[5]. 상황버섯과 운지버섯 균사체 복합 배양액 첨가사료를 12주간 투여하면서 식세포의 활성 산소를 측정 결과를 Fig. 4에 나타내었다. 실험 시작 6주 까지는 비슷한 값을 나타냈지만, 9주와 12주에서는 실험구가 대조구에 비해 높은 활성을 보였다. 특히 9주에서 실힘구가 가장 좋은 활성을 나타냈고 12주에는 다소 낮아지는 활성을 나타냈지만 대조구에 비해 높은 활성을 보였다. 12주 후 활성이 낮아지는 현상은 버섯 균사체 혼합 배양물의 첨가사료에서의 투여시기에 관련하여 기초 자료로서 활용 할 수 있을 것으로 여겨지며, 추후 더 많은 실험을 통해서 버섯 균사체 혼합 배양물의 첨가 농도와 시기에 관련된 연구가 진행 되어져야 할 것이다 버섯균사체 혼합배양액 첨가 사료를 투여한 실험구에서 식세포의 높은 활성이 나타난 것으로 보아 버섯 균사체 배양액에 함유되어 있는 생리활성물질 성분이 어류의 비특이적 세포성 면역기능 중강에 중요한 역할을 갈 것으로 기대된다. 이와 유사한 결과로, Won 등[23]은 7주 동안 4가지 농도가 다른 \( \beta-1,3 / 1,6 \)-linked glucan 을 첨가한 사료를 투여한 결과 0.05% 와 0.1% 첨가구에서 7주째 까지 다른 실험구에 비해 비교적 높은 활성을 나타냈으며, 박 등[15] 은 \( \beta \)-glucan 첨가사료 투여기간 동안 마크로파아지와 호중구수는 투여기간에는 증간, 무투여기간에는 감소하는 경향을 보였지만, 재 투여 후에는 급격히 상승하여 높은 활성을 유지하였다고 보고 하였다. 또한 Baulny 등[2]은 yeast glucan 을 35일간 경구 투여한 turbot 에서도 1 일 째와 14 일 째에 NBT 환원능이 유의 하게 향상된다고 하였다.</p>