가수분해도가 전반적으로 낮은 것은 대구 간의 지방이 효소 활성에 영향을 미치기 때문이다. 가수분해도와 ACE 저해 활성 사이의 상관관계는 없으며, 이는 효소가 기질에 작용하는 위치와 아미노산 종류의 차이 때문이라고 판단된다. 대구 간 단백질을 \( \alpha \)-chymotrypsin으로 가수분해하여 얻은 가수분해물은 ACE 저해제로 활용 가능할 것으로 예상되며, 이를 위한 최적 조건을 규명하기 위한 연구가 진행되었다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>대구의 간 단백질의 가수분해</h2> <p>대구의 간 단백질에 대한 시판 효소의 가수분해활성을 측정한 결과는 Fig. 1에 나타내었다. 즉, pronase E로 가수 분해시켰을 때 가수분해도가 약 \( 50 \% \)로 가장 높게 나타났으며, 그 이외의 효소들로 가수분해시켰을 때에는 약 \( 34 \% \)에서 \( 40 \% \)로 큰 차이가 없었다. 이와 같이 가수분해도가 전체적으로 낮은 이유는 대구의 간에 포함되어 있는 지방이 이들 효소의 활성에 영향을 미쳐 가수분해도가 낮게 나타난 것으로 판단된다.</p> <h2>효소에 따른 가수분해물의 ACE 저해활성</h2> <p>대구의 간 단백질을 각 효소별로 시간에 따라 가수분해하여 동결건조한 가수분해물의 ACE 저해활성을 측정한 결과는 Table 2에 나타내었다. 즉, 가수분해물의 ACE 저해활성은 가수분해도가 상대적으로 낮은 \( \alpha \)-chymotrypsin으로 2시간 동안 가수분해시킨 가수분해물에서 \( \mathrm{IC}_{50} \) 값이 \( 1.64 \)\( \mathrm{mg} / \mathrm{m} \ell \) 로 가장 높았으며, 가수분해도가 가장 높은 pronase \( \mathrm{E} \)로 2시간 동안 가수분해시킨 가수분해물의 \( \mathrm{IC}_{50} \) 값은 \( 1.79 \)\( \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)으로 나타났다. 이 결과는 가수분해도와 ACE 저해활성과는 상관관계가 없음을 보여주는 것으로 이러한 원인은 기질의 차이 뿐만 아니라 각 효소가 기질에 작용하는 절단 부위가 다르기 때문에 N말단 및 C말단에 위치하는 아미노산의 종류가 달라지므로 ACE 저해활성이 다르게 나타나는 것으로 판단된다.</p> <p>Wako 등은 오징어의 간과 몸통육을 자가분해시켜 얻은 추출물에서 ACE 저해활성을 측정한 결과 \( \mathrm{IC}_{50} \) 값이 \( 1.42 \mathrm{mg} /\mathrm{m \ell} \)였다고 하였으며, Yeo 등은 한외여과막으로 참치 자숙액을 분자량 \( 5,000 \mathrm{Da} \) 이하로 분리하여 그 분획물의 \( \mathrm{IC}_{50} \) 값을 측정한 결과 \( 1.79 \mathrm{mg} / \mathrm{m \ell} \) 로 본 연구에서와 유사한 결과를 보고하였다. 따라서, 본 연구에서 \( \alpha \)-chymotrypsin으로 대구의 간을 가수분해하여 얻은 가수분해물은 ACE 저해제로서 활용이 가능할 것으로 판단된다.</p> <h2>최적의 가수분해 조건</h2> <p>대구의 간 단백질을 여러 효소로 가수분해시켜 ACE 저해활성을 측정하였을 때 가장 뛰어난 활성을 보인 \( \alpha \)-chymotrypsin 가수분해물을 제조하기 위한 최적조건을 규명하기 위하여 기질에 대한 효소비, 기질 변화에 대한 활성을 측정한 결과는 Fig. 2와 Fig. 3에 나타내었다. 즉, 효소비가 증가할수록 가수분해활성은 증가하였으나, \( 100: 1 \) 이상에서는 효소의 농도를 변화시켜도 가수분해활성은 큰 값으로 증가되지 않았다. 또한, 기질농도는 \( 0.2 \% \)에서 가수분해활성이 \( 43 \% \)로 가장 높았으나 기질농도 \( 1 \% \)에 비해 큰 차이가 없었으므로 대량 처리시 경제적인 효과를 감안할 때 \( 1 \% \) 기질농도가 적합하다고 판단되었다.</p>