알러지성 기관지 천식을 유도하기 위한 감작 및 유발 실험은 마우스를 대상으로 Kung 등의 방법을 수정하여 실행하였으며, 본 실험에 사용한 아로마 오일은 프랑킨센스 에센셜 오일로, OVA/Alum로 전신 감작시킨 후 21일부터 8주간 0.3% BSEO를 1주일에 3회, 1회 30분씩 분무하여 흡입시켰다. 실험군과 함께 PBS만을 흡입시킨 음성 대조군, 감작 유발시킨 대조군, 감작 유발시킨 후 formoterol을 흡입시킨 양성대조군으로 생쥐군을 지정하여 실험하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <p>알러지성 기관지 천식을 유도하기 위한 감작 및 유발 실험은 6 주령 체중 \( 20 \pm 2 \mathrm{~g} \) 의 \( \mathrm{BALB} / \mathrm{c} \) 마우스를 대상으로 Kung 등의 방법을 수정하여 실행하였다. \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 난알부민(OVA, chicken egg ovalbumin; Grade IV)과 \( 10 \% \) (w/v) aluminum potassium sulfate (Alum; Sigma) 를 PBS로 용해한 후 혼합하여, 이 혼합물을 \( 10 \mathrm{~N} \mathrm{NaOH} \) 로 \( \mathrm{pH} \) 를 6.5 로 조정하여 상온에서 1 시간 동안 방치하고 \( 750 \mathrm{G} \) 에서 5 분 동안 원심분리하였다. 이 OVA/Alum 침전물을 증류수를 가하여 원래의 양으로 용해한 후 \( 100 \mu \mathrm{g} \mathrm{OVA} \) 를 \( 0.2 \) \( \mathrm{mL} \) 로 조정하여 준비한 후 실험 시작 1 일에 복강 내로 주사하여 전신감작을 시킨 후 실험 시작 14 일에 \( 10 \% \) chloral hydrate (Fluka, USA)로 생쥐를 마취한 후 난알부민( 500 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) 100 \mu \mathrm{L} \) 를 기도투여하여 면역 유발시켰다. 실험 시작 21 일부터 \( 250 \times 300 \times 250 \mathrm{~mm} \) 의 polycarbonate 재질 chamber (DJ-435, Daejong Inc., Republic of Korea)안에서 8 주 동안, 1 주일에 3 일, 1 일에 30 분 Buxco Aerosol Delivery System (NE-CT10, Buxco Co., USA)를 이용하여 \( 1 \sim 4 \) 주간은 \( 2.5 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \mathrm{OVA} / \mathrm{PBS} \) 용액, 그리고 5 8주간은 \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) OVA/PBS 용액을 aerosol화하여 분무하여 흡입시키고 12 주째 희생시켜 실험에 사용하였다.</p> <h2>프랑킨센스 에센셜 오일 흡입</h2> <p>본 실험에 사용한 아로마 오일은 프랑킨센스 에센셜 오일 (B. sacra essential oil; BSEO)로 Tisserand (Aromatherapy Products Ltd. Brighton, England)가 생산한 오일을 사용하였다. OVA/Alum로 전신 감작시킨 후 21 일부터 8 주간 0.3% BSEO 를 1 주일에 3 회, 1 회 30 분씩 분무하여 흡입시켰다. 대조군에는 PBS를 동량 사용하였으며 12 주째 희생시켜 실험에 사용하였다.</p> <h2>실험군의 분류</h2> <p>본 실험에서는 실험 1 일에 alum을 PBS 에 용해한 후 복강주사하고, 14 일에는 PBS만을 기관내 투여한 후 21 일부터 8 주간, 1 주일에 3 일, 1 회 30 분간 PBS만을 흡입시킨 정상 생쥐군을 음성 대조군 (Nr) 으로 지정하였고, OVA / alum 으로 감작 유발시킨 생쥐군을 대조군(OVA-CT)으로, OVA Valum으로 감작 유발시킨 후 지속성 베타 2 항진제로 사용되는 formoterol \( (1 \mathrm{mg} / \mathrm{L}) \) 을 흡입시킨 생쥐군을 양성대조군(OVA / FT) 으로, OVA / alum 으로 감작 유발시킨 후 0.3% BSEO 를 흡입시킨 생쥐군을 실험군으로 지정하여 총 4 군, 각 6 마리로 나누어 실험하였다.</p>