심장 채혈로 얻은 혈청으로부터 당화 헤모글로빈 함량을 산출하였으며, Frings 등의 방법에 따라 혈액 중 지질 함량 분석하였고, 측정용 kit를 사용한 혈중 효소 활성도 측정과 일부 간 조직의 가열과 냉각의 과정을 거쳐 간장 조직의 글리코겐 함량을 측정하였다.
<h2>혈당 및 당화 헤모글로빈 측정</h2> <p>실험 사육 최종일에 심장 채혈하여 얻은 혈청으로부터 혈당 측정은 glucose 측정용 kit시약(AM 201-k, Asan, Korea)으로 측정하였다. 당화 헤모글로빈 함량은 Hemoglobin A1c(Glycosylated hemoglobin, Asan, Korea)를 이용하여 EDTA가 처리된 전혈에 Helena laboratories kit시약을 사용하여 microcolumn chromatography법으로 측정하였다. 총 hemo-globin에 대한 당화 헤모글로빈의 흡광도비에 의해 당화 hemoglobin 함량을 산출하였다.</p> <h2>혈액 중 지질 함량 분석</h2> <p>혈액 중의 총 지질(total lipid) 함량은 Frings 등의 방법에 따라 혈청 \( 20 \mu{l} \)에 phospho-vanillin 시약을 첨가한 후 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 15분간 배양한 후 시료 무첨가구를 대조로 하여 파장 \( 540 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다.</p> <p>혈액 중의 총 콜레스테롤(total cholesterol), 중성지방(triglyceride) 및 high density lipoprotein cholesterol (HDL-C) 함량은 각각의 해당 kit를 사용하여 측정하였다. 즉, 총 콜레스테롤 측정용 kit시약(AM 202-k, Asan, Korea), 중성 지방 측정용 kit시약(AM 157S-k, Asan, Korea) 및 HDL-C 측정용 kit시약(AM 203-k, Asan, Korea)을 사용하여 혈청 중의 함량을 측정하였다.</p> <p>LDL (low density lipoprotein) 콜레스테롤은 Friedewald 등의 방법에 따라 총콜레스테롤 함량에서 HDL 콜레스테롤과 중성지질 /5 를 합한 값을 제하여 줌으로써 산출하였다. VLDL (very low density lipoprotein) 콜레스테롤 함량은 혈청 총 콜레스테롤에서 HDL 콜레스테롤과 LDL 콜레스테롤의 합을 제하여 산출하였다.<p>동맥경화지수(atherogenic index, AI)는 Haglund 등의 방법에 따라 [(Total cholesterol)-(HDL-C)]/HDL-C식에 의하여, 심혈관 위험지수(cardiac risk factor, CRF)는 Kang 등의 방법에 따라 총 콜레스테롤 함량을 HDL 콜레스테롤 함량으로 나눈 값으로부터 산출하였다.</p> <h2>혈중 효소 활성 측정</h2> <p>GOT (glutamic oxaloacetic transaminase) 측정용 kit (PⅢ3150, Fugi, Japan) 및 GPT (glutamic pyruvic transaminase) 측정용 kit (PⅢ 3250, Fugi, Japan)로 혈액분석기(DRI-Chem 3500Ⅰ, Fugi, Japan)에서 분석하여, 혈청 \( 1 \mathrm{ml} \) 당 Karmen unit로 표시하였다. \( \gamma \)-GTP ( \( \gamma \)-gutamyltranspeptidase, AM 150, Asan, Korea) 활성도는 해당 kit를 사용하여 측정하였다.</p> <h2>간장 조직의 글리코겐 함량 측정</h2> <p>간 조직의 글리코겐 함량 측정을 위하여 간 조직 \( 0.2 \mathrm{~g} \) 에 \( 30 \% \) KOH \(1 \mathrm{ml} \)를 첨가한 후 \( 98^{\circ} \mathrm{C} \)의 수욕상에서 20분간 가열한 후 얼음으로 냉각을 하였다. 여기에 \( 95 \% \) ethanol \( 1.25 \mathrm{ml} \)를 첨가하여 혼합한 다음 \( 98^{\circ} \mathrm{C} \) 수욕상에서 5분간 가열한 후 빙수중에서 냉각 하였다. 상층액을 버린 후 침전물에 증류수 \( 5 \mathrm{ml} \)를 가하여 침전물을 용해시킨 다음 이 용액 \( 0.5 \mathrm{ml} \)를 취하고 \( 4.5 \mathrm{ml} \)의 증류수를 더한 후 잘 혼합하였다. 이중 \( 1 \mathrm{ml} \)를 취해 \( 0.2 \% \) anthrone 용액을 \( 2 \mathrm{ml} \) 첨가하여 \( 98^{\circ} \mathrm{C} \)의 수욕상에서 10분간 가열을 한 후 식혀서 \( 620 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도 값을 측정하였다.</p>