이 연구에서는 Staphylococcus aureus 균주 99개를 사용하여 독소 유전자와 항생제 내성을 분석하였다. MRSA와 MSSA 균주는 Oxacillin 내성과 mecA 유전자의 유무로 구분되었으며, 독소 유전자의 염기서열은 기존에 알려진 서열과 높은 일치율을 보였다. 최근에 확인된 장독소 유전자의 보유율은 MRSA와 MSSA에서 서로 다르며, 특히 sec, seg, seh와 tst 유전자는 객담과 농으로부터 분리된 MRSA에서 더 높은 보유율을 나타냈다.
<h1>결 과</h1> <h2>mecA 및 독소 유전자 분석</h2> <p>독소 유전자와 항생제 내성을 분석하기 위해 사용된 Staphylococcus aureus는 혈액, 객담, 소변과 농에서 분리한 99개 균주를 사용하였다. Oxacillin에 대한 내성과 mecA 유전자의 보유여부를 이용하여 MRSA와 MSSA균주를 확인하였다. MRSA는 75개 균주(혈액과 객담, 각각 20균주; 소변, 19균주; 농, 16균주)를 그리고 MSSA는 24개 균주(혈액, 8균주; 객담, 4균주; 소변, 10균주; 농, 2균주)를 사용하였다(Table 1).</p> <p>mecA 및 독소유전자에 특이적인 primer를 사용하여 multiplex PCR 실시한 결과 Fig. 1과 같은 DNA 절편을 확인할 수 있었다. 그리고 증폭된 산물의 염기서열은 기존에 앝려진 독소 유전자 염기서열과 \(99.4-100 \% \) 일치하였다.</p> <p>MRSA와 MSSA의 독소 유전자 검출 결과는 Table 3에 나타나 있다. 일반적으로 MRSA 균주들이 MSSA 균주들에 비해 높은 비율로 독소 유전자를 보유하고 있었다.</p> <p>장독소 중 식중독을 유발한다고 알려진 5개의 독소 유전자 중 sec는 MRSA 39개 균주 \( (52 \%) \)가 보유하고 있었으며, seb와 sed는 각각 17개 \( (22.7 \%) \)와 1개 균주에서 확인되었으나 sea와 see 유전자는 검출되지 않았다. 그러나 MSSA에서는 5개 균주 \( (20.8 \%) \)가 sea 유전자를 보유하고 있었다. 최근에 알려진 장독소 seg와 sei 유전자는 MRSA에서는 각각 43개 \( (57.3 \%) \)와 41개 균주 \( (54.7 \%) \), 그리고 MSSA에서는 각각 5개 균주( \( 20.8 \%) \)가 확인되었다.</p> <p>피부 박탈성독소b 유전자(etb)는 MRSA 중 1개 균주가 보유하고 있었다. 독성 쇼크 증상 독소 1 유전자(tst)를 보유한 균주의 비율은 MRSA는 35개 \( (46.7 \%) \) 그리고 MSSA는 5개 균주 \( (20.8 \%) \)였다. Leukocidin 독소 유전자인 pvl은 MRSA에서는 검출되지 않은 반면 MSSA 3개 균주 \( (12.5 \%) \)가 보유하고 있었다. 한편 객담과 농으로부터 분리된 MRSA 균주가 혈액과 소변으로부터 분리된 MRSA에 비해 독소유전자 보유 빈도가 높음을 알 수 있었다. 특히 sec, seg, seh와 tst 유전자는 객담과 농으로부터 분리된 MRSA의 보유율이 \( 62.5-85 \% \)로 혈액과 소변으로부터 분리된 MRSA의 보유율 \( 15.8-50 \% \)에 비해 월등히 높았다.</p> <p>MRSA 중 44개 균주가 2개 이상의 독소 유전자를 보유하고 있었다(Table 4). 특히 17개 균주(객담 분리 균주, 14; 혈액 분리 균주, 3)는 seb, sec, seg, sei와 tst를 동시에 보유하고 있었으며 14개 균주(객담 분리 균주, 2; 소변 분리 균주, 3; 농 분리 균주, 8; 혈액 분리 균주, 1)는 sec, seg, sei와 tst를 동시에 보유하고 있었다.</p>