IGF-I이 엔드로젠 수용체 coactivator 유전자의 단백질 발현에 미치는 영향을 알아보기 위해 실험한 결과 GRIP-1의 단백질 발현이 IGF-I에 의해 \( 45 \% \)증가하였다. 또한 IGF-I이 엔드로젠 수용체 coactivator mRNA 발현에 어떠한 영향을 미치는지 알아보기 위해 실험한 결과 C2C12 세포에 IGF-I을 처리하면 통제군에 비해 발현이 \( 50 \% \) 유의하게 증가하으나 SB203580, PD98059를 각각 IGF-I과 함께 처리한다면 유의한 차이는 아니지만 ARA70 mRNA 발현 증가 수준이 감소하는 경향을 보였다.
<h1>결과</h1> <h2>단백질 발현</h2> <p>IGF-I이 엔드로젠 수용체 coactivator 유전자의 단백질 발현에 미치는 영향을 알아보기 위하여 C2C12 세포에 분화를 유도하면서 IGF-I을 처리하고, IGF-I에 의한 엔드로젠 수용체 coactivator 단백질 발현의 변화에 있어 p38 MAPK와 ERK1/2의 역할을 알아보기 위해 IGF-I과 SB203580, 또는 PD98059를 각각 함께 처리하여 western blot을 실시하였다. 그 결과 Fig. 1에 제시된 바와 같이 통제군과 비교하였을 때 GRIP-1의 단백질 발현이 IGF-I에 의해 \( 45 \% \)증가하였다. 그러나 p38 MAPK와 ERK1/2 경로 억제제인 SB203580과 PD98059를 각각 IGF-I과 함께 처리한 결과 IGF-I에 의한 GRIP-1 단백질 발현의 증가가 현저히 감소되었다. 엔드로젠 수용체의 또 다른 coactivator 중 하나인 SRC-1의 단백질 발현을 알아본 결과 IGF-I을 처리하였을 때 SRC-1의 단백질 발현은 통제군에 비해 \( 45 \% \)증가하였다. 반면에 SB203580과 PD98059를 각각 IGF-I과 함께 처리한 결과 IGF-I만을 처리한 그룹에 비해 단백질 발현이 현저하게 감소되었다. Fig. 3에 제시된 바와 같이 C2C12세포에 IGF-I을 처리하자 엔드로젠 수용체의 가강 특이적인 coactivator로 알려진 ARA70의 단백질 발현은 통제군과 비교하였을 때 \( 85 \% \) 유의하게 증가하였다. 그러나 SB203580과 PD98059를 각각 IGF-I과 함께 처리하자 IGF-I에 의해 발현이 증가된 ARA70 단백질 발현이 현저히 감소되었다.</p> <h2>mRNA 발현</h2> <p>IGF-I이 엔드로젠 수용체 coactivator mRNA 발현에 어떠한 영향을 미치는지 알아보기 위해 C2Cl2세포에 분화를 유도하면서 \( 250 \mathrm{ng} / \mathrm{ml} \)의 IGF-I을 5분간 처리하였다. 또한 IGF-I에 의한 coactivator mRNA 발현의 변화에 있어 IGF-I 의 하부신호전달 경로 중 하나인 p38 MAPK와 ERK1/2 신호전달 경로의 역할을 알아보기 위해 IGF-I 을 SB203580, 또는 PD98059와 함께 각각 5분간 처리하여 real-time PCR분석을 실시하였다. Fig. 4에 제시된 바와 같이 IGF-I을 처리한 세포에서는 통제군과 비교하였을 때 GRIP-1의 mRNA 발현이 \( 64 \% \) 유의하게 증가하였다. 그러나 SB203580과 PD98059를 각각 IGF-I과 함께 처리하였을 때에는 IGF-I만을 처리한 그룹에 비해 GRIP-1 mRNA 발현이 감소하는 경향을 보였으나 유의한 차이를 보이지는 않았다. Fig. 5에 제시된 바와 같이 IGF-I을 처리하자 SRC-1의 mRNA발현은 통제군에 비해 \( 36 \% \) 유의하게 증가하였다. 반면에, SB203580과 PD98059를 각각 IGF-I과 함께 처리한 결과 IGF-I에 의해 발현이 증가된 SRC-1의 mRNA발현을 감소시켰으나 유의한 차이를 보이지 않았다. IGF-I에 의한 ARA70 mRNA 발현의 변화를 살펴보기 위해 C2C12 세포에 IGF-I을 처리한 결과 통제군에 비해 발현이 \( 50 \% \) 유의하게 증가하였다. 그러나 SB203580, PD98059를 각각 IGF-I과 함께 처리한 결과 IGF-I만을 처리하였을 때 유도된 ARA70 mRNA 발현 증가 수준이 감소하는 경향을 보였으나 유의한 차이는 볼 수 없었다.</p>