한국인의 3대 사망원인을 암, 뇌혈관질환, 심장질환으로 통계청이 보고하고 있는 만큼 최근 현대인들은 남녀노소 불구하고 성인병의 예방과 치료에 관심이 높아지고 있다. 그러므로 본 논문에서는 식품섭취를 통해 혈전증을 사전에 예방 또는 개선할 수 있도록 청국장에서 Bacillus amyloliquefaciens를 선발하여 미생물이 생산하는 혈전분해 효소를 분리 및 정제하고 이화학적 특성을 조사한 결과 청국장이나 Natto에서 분리한 균주들과 비교했을 때, protease type 및 혈전분해 효소의 분자량에서 상이한 결과를 확인했다.
<h1>서 론</h1><p>청국장은 우리나라 전통 대두발효식품 중의 하나로서 콩을 삶고 볏짚을 덮어 \( 40-45^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 2-3일간 발효한다. 청국장 발효에 관여하는 주요 미생물로서 Bacillus subtilis, B. licheniformis , B. amyloliquefaciens, B. pumilus 등이 널리 알려져 있다. 청국장의 영양성분으로는 단백질뿐만 아니라 isoflavone, phytic acid, trypsin inhibitor, 식이섬유, 올리고당 등 각종 생리활성 물질이 함유되어 있다. 이와 같은 생리활성 물질로 인한 청국장의 기능성에는 항돌연변이, 항고혈압, 콜레스테롤 저하, 항산화, 면역증강, 혈전분해 등에 효과가 있다고 보고되어 있다.</p><p>최근 현대인들은 생활수준의 향상과 더불어 건강에 대한 관심도 높아져 가고 있다. 남녀노소를 불구하고 성인병의 발병률이 높아짐에 따라 성인병의 예방과 치료에 대한 관심도 높아지고 있는 실정이다. 우리나라 통계청이 발표한 2011년 사망원인 통계결과에 의하면 한국인의 3대 사망원인은 암, 뇌혈관질환, 심장질환으로 총 사망자 수의 \( 47.4 \% \) 라고 보고하였다. 이와 같이 고혈압, 동맥경화, 심장병, 뇌졸중과 같은 심혈관계 질환으로 인한 사망률이 비교적 높은 편이다.</p><p>심혈관계 질환은 fibrinogen이 활성화된 thrombin에 의해서 전환된 불용성의 중합체인 혈전(fibrin)을 형성하여 발생된다. 불용성의 중합체인 혈전은 plasminogen이 활성화되어 plasmin에 의하여 분해되지만, 과도한 혈전이 생성되면 혈전용해(fibrinolysis)의 불균형으로 혈관 내에 혈전이 축적되어 혈전증을 유발하여 심혈관계 질환의 원인이 되는 것으로 알려져있다. 이러한 혈전증을 치료하기 위하여 plasminogen activator로써 작용을 하는 streptokinase, urokinase 및 tissue plasminogen activator (t-PA) 등의 혈전용해제가 개발되어 사용되고 있다. 하지만 이와 같은 제품은 반감기가 짧을 뿐만 아니라 전신출혈 등의 부작용을 나타내며 경구용으로 사용하기는 부적합하며, 가격이 매우 높은 단점을 가지고 있다.</p><p>일본에서는 전통식품인 natto에서 우수한 혈전분해 활성을 가지는 nattokinase를 분리하여 보고하였으며, 국내에서도 발효식품인 청국장, 메주, 된장, 김치, 젖갈 등에서 nattokinase와 유사한 특성의 혈전분해 효소를 생산하는 미생물에 관한 연구결과가 보고되어 있다. 또한, 혈전분해 효소를 생산하는 미생물은 주로 Bacillus sp. 균주인 것으로 보고되어 있다.</p><p>따라서 식품섭취를 통해 혈전증을 사전에 예방하거나 개선할 수 있도록 본 연구에서는 전통적 방법으로 제조한 청국장에서 혈전분해 효소활성이 우수한 Bacillus amyloliquefaciens를 선발 및 동정하였으며, 선발미생물이 생산하는 혈전분해 효소를 분리 및 정제하고 이화학적 특성을 조사하였다. Natto나 청국장에서 분리한 균주들과 비교하였을때, 혈전분해 효소의 분자량 및 protease type에서 상이한 결과로 확인하였으므로 이에 관한 연구결과를 보고하고자 한다.</p>