다른 점액세균 균주들과 달리 C. crocatus는 항상 함께 분리되는 동반 세균이 있으며, 현미경 관찰 결과, 모서리 부분에서는 동반 세균이 적거나 잘 관찰되지 않는 모습을 보였다. 멀균 바늘로 새로운 STE 배지에 옮기는 방식으로 6균주들의 동반 세균이 제거된 균주를 순수 분리하려 했지만, 5균주들의 경우 동반 세균을 제거할 수 없었다. 그러나 경북 청도의 토양에서 분리한 KYC2823 균주는 동반 세균을 완전히 제거한 상태의 균주를 얻을 수 있었고, 다양한 배양 조건에서도 동반 세균의 존재가 전혀 관찰되지 않았다.
<p>C. crocatus는 다른 점액세균 균주들과는 달리 분리과정에서 Sphingobacterium과 유사한 동반 세균이 항상 함께 분리되는 것으로 알려져 있다. 현미경 관찰 결과 본 연구에서 일차적으로 분리된 균주들도 모두가 Fig. 1E에서 보인 바와 같이 동반 세균으로 추정되는 다른 세균이 존재함을 확인할 수 있었다. C. crocatus가 함께 존재하지 않으면 동반 세균은 계속 자랄 수 없기 때문에 동반 세균의 생존에는 C. crocatus가 반드시 필요하지만, 동반 세균이 없어도 정상적으로 성장하며 자실체를 형성하는 균주가 존재하는 것으로 보아 C. crocatus는 균주에 따라서는 동반 세균의 존재를 반드시 필요로 하지 않는 경우가 있는 것으로 보인다. 본 연구에서 관찰된 동반 세균도 점액세균에 비해 크기가 작은 간균으로 형태적으로는 다른 연구자에 의해 보고된 동반 세균과 유사하였다. 하지만 순수 분리할 경우 동반세포가 사멸하는 까닭에 현재로서는 이들이 다른 연구자들에 의해 보고된 동반세균과 동일한 종류인지는 확실하지 않다.</p> <p>일차 분리된 균주들의 집락을 현미경으로 관찰하였을 때, 모서리 부분에서는 동반 세균이 다른 부분에 비해 적거나 잘 관찰되지 않는 모습을 보였다. 아마도 이러한 현상은 집락의 모서리 부분에서 개별 점액세균들이 활주운동에 의해 밖으로 이동한 반면에 대부분의 동반 세균들은 집락 안에서 다른 점액세균과 머물러 있음으로써 발생한 것으로 보인다. 본 연구에서는 이러한 특성을 이용하여 집락의 모서리 부분에 위치한 점액세균을 멀균된 바늘로 채취하여 새로운 STE 배지에 옮기는 방식으로 일차적으로 분리된 6균주들을 대상으로 동반 세균이 제거된 C. crocatus 균주를 순수 분리하고자 하였다. 그 결과 다른 5 균주들의 경우에는 여러 번의 시도에도 불구하고 동반 세균을 제거할 수 없었지만, 경북 청도의 토양에서 분리한 균주 KYC2823의 경우에는 동반 세균을 완전히 제거한 상태의 균주를 얻을 수 있었다. 순수 분리한 균주 KYC2823은 다른 균주들과는 달리 다양한 배양 조건에서 동반 세균의 존재가 전혀 관찰되지 않았다(Fig. 1D).</p> <h2>분리균주 KYC2823의 특성 및 동정</h2> <p>순수 분리한 균주 KYC2823은 STE 배지에서 E. coli를 영양분으로 이용하여 성장할 수 있었지만 셀룰로오스를 이용해서는 자랄 수 없는 용균성 점액세균으로, STE 배지 이외에도 WCE, CY 배지에서 성장할 수 있었다. 세포의 모양은 표준균주로 제안된 C. crocatus Cm c5와 같이 Chondromyces 특유의 간균형태였으며(Fig. 1D), 활주운동성을 가져 점액세균 고유의 집락 형상을 이루었다. 자실체 형태는 전통적으로 점액세균의 분류 및 동정에서 가장 중요한 기준이 되어왔는데, C. crocatus의 경우에는 다른 점액 세균과 확연히 구분되는 독특한 형태의 자실체를 형성한다. 이에 더해, C. crocatus의 집락은 다른 점액세균과는 구별되는 독특한 향을 발산한다. KYC2823은 WCE 배지에서 Cm c5 균주와 동일하게 C. crocatus 특유의 자실체를 형성하였으며(Fig. 1B), C. crocatus 집락 특유의 향을 발산하였다. 또한, 균주 KYC2823의 16S rDNA 염기서열 \( (1,546 \mathrm { bp } ) \)을 분석한 결과 KYC 2823은 표준균주 Cm c5의 16S rDNA 염기서열과 \( 99.8 \% \)의 동일함을 보였다(Fig. 2). 따라서 이러한 형태적, 생리적, 분자생물학적 특성들에 기초하여 본 연구에서는 균주 KYC2823을 C. crocatus로 최종 동정하였다.</p>