섬유아세포에 H. pylori 항원을 노출시켰을 때 만들어지는 TGF- \( \beta 1 \) 과 \( \mathrm { NO } \) 를 정랑분석해서 H. pylori와 섬유아세포의 관계를 알아보고자 했다. 또한 이 세포에서 pylori 항원이나 그람음성균,그람양성균을 노출시켰을때 TGF- \( \beta \) 1과 \( \mathrm { NO } \) 를 정량 분석하여 섬유아세포로 부터의 TGF- \( \beta \) 1과 \( \mathrm { NO } \) 생성양상을 알아보고자 했다.LSP와 SEB에 중복 노출된 경우 48시간 이내에는 감소하지만 72시간이 지나면 증가한다.
<p>/0.1 \% naphthylethylenediamine dihydrochloride (Sigma, St. Louis, USA) \( / 2.5 \% \) phosphoric acid(Junsei, Osaka, Ja-pan)] \( 0.1 \mathrm { ml } \) 씩을 작용시킨 후 실온에서 10분 동안 방치하였다. Optical density는 microplate reader (Model 550 microplate reader, Bio-Rad, Richmond, USA.)를 이용하여 \( 540 \mathrm { rm } \) 에서 측정하였다. 표춘곡선은 sodium nitrite (Ha-yashi, Tokyo, Japan)로 작성하였다.</p> <h3>통계학적 분석</h3> <p>실험성적은 평균 또는 평균표준편차로 나타냈으며 각 군간의 통계학적 검정에는 Student's t-test를 사용하고 \( p \) 값이 \( 0.05 \) 이하일 때 의의 있는 차로 간주하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <p>본 실혐에서는 섬유아세포에 H. pylori 항원을 노출시켰을 때 생성되어 나타나는 TGF- \( \beta 1 \) 과 \( \mathrm { NO } \) 를 정랑분석하여 H. pylori 감염시 생체내 섬유아세포가 나타내는 이들 물질의 생성능올 관찰함으로서 H. pylori와 섬유아세포의 관계를 이해하고자 하였다. 또한 이들 세포에 H. pylori 항원이나, 그람 음성균의 세포벽 성분인 lipopolysaccharide (LPS), 그람 양성균인 황색포도상구균의 staphylococcal enterotoxin \( \mathrm { B } ( \mathrm { SEB } ) \)를 단독 노출 혹은 혼합 노출시켜 배양시켰을 때 나타나는 TGF- \( \beta \) 1과 \( \mathrm { NO } \) 를 정량적으로 분석함으로서 독소의 종류 및 배양시간에 따른 차이를 알아봄으로서 중복 감염으로 인한 섬유아세포로 부터의 TGF- \( \beta \) 1과 \( \mathrm { NO } \) 생성양상을 관찰하고자 하였다. LPS틀 작용시켜 TGF- \( \beta 1 \)의 생성변화를 밨을 때 투여량이 낮을 때 \( (0.01,0.1 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ) \) 에는 배양증간시점(48시간)에서 상승되었고 투여량이 높을 때에는 배양초기(24 시간)에 상승되었지만 배양후기(72시간)에는 투여량이 낮을 때와 마찬가지로 LPS 비노랄군보다 감소하고 있다. 이와 같은 경향은 SEB를 작용시켰을 때에도 유사하게 나타났다. 즉 장시간 세균독소노출에 의해서 섬유아세포에서의 TGF- \( \beta 1 \)의 생성이 저해되었다고 볼 수 있다. 세포공포독소(Vac)생성 양성인 H. pylori 균 분해물을 낮은 투여량 \( (0.01 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ) \)로 작용시켰을 때 24시간 째 와 72시간 째 에서 대조 군 보다 유의한 감소를 보이고 있다. 그러나 투여량이 높아지게 되면 48 시간 째에서 상승효과를 보이고 72시간 째에서 감소폭이 좁아지거나 오히려 그 생성이 증가하고 있다. 이는 Vac( + ) H. pylori 균분해물의 양적 변화에 따라 TGF- \( \beta 1 \)의 생성이 차이를 나타낼 수 있음을 의미한다. 세포공포독소(Vac) 음성인 H. pylori 균 분해물을 작용시켰을 때에는 48시간째에서의 증가와 72시간 째에서의 감소가 모든 dose에서 나타났다. 따라서 H. pylori 균 분해물에 의해서도 노출된 량이나 시간에 따라 TGF- \( \beta 1 \) 의 생성억제가 나타남을 보인 결과로 해석된다. \( \mathrm { Vac } ( + ) \) H. pylori균 분해물과 LPS를 중복으로 작용시켰을 때의 TGF \( \beta 1 \) 의 생성변화는 균 분해물 단독 노출에 비하여 모돈 시간대에서 감소를 보인다. \( \mathrm { SEB } \) 와의 중복노출에 의해서는 48 시간까지 증가를 보이다가 72시간에는 다시 감소를 보인다. LPS 및 SEB와의 중복노출에서는 베양초기에는 증가하지만 48시간 째부터 낮아지게 된다. 이는 H. pylori 균 분해물이 섬유아세포에 작용될 때 다른 세균의 독소가 흔재됨으로서 TGF- \( \beta 1 \) 의 생성이 더욱 억제될 수 있음을 보여준 결과로 생각된다. \( \operatorname { Vac } (-) \)H. pylori균 분해물과 LPS를 중복으로 작용시켰을 때의 TGF \( \beta 1 \) 의 생성변화는 균 분해물 단독 노훌에 비하여 48시간 째 까지 감소를 보이고 있다. SEB와의 중복노출에 의해서는 단독노출에 비하여 48시간까지 감소를 보이다가 72시간에는 증가롤 보인다. LPS 및 \( \mathrm { SEB } \) 와의 중복노출에서도 48시간까지 감소를 보이다가 72시간에는 증가를 보인다. 따라서 \( \operatorname { Vac } (-) \) H. pylori균 분해믈의 경우는 중복노출에 의해서 72시간 째 에 모두 중가를 보임으로서 \( \mathrm { Vac } ( + ) \) H. pylori균 분해물의 경우와는 다른 양상을 나타냈다.</p>