정수공정별 바이러스 제거율을 확인하기 위해 filter는 수중에서 negative charge를 띄고 있는 바이러스를 포함한 수중의 모든 유기물질을 흡착할 수 있도록 제조된 것으로 표면자체가 positive charge를 띄고 있고 원수·전오존수는 \( 100 \mathrm { ~l } \), 침전수는 \( 300 \mathrm { ~l } \), 여과수 · 후오존수 · BAC 처리수 그리고 정수는 \( 1,000 \mathrm { ~l } \) 를 기준으로 환산하였으며 3회 반복 실험하였다.
<h2>정수공정별 바이러스 제거율 조사</h2> <p>실험은 3차 증류수 \(30 \mathrm { ~l } \)에 \( 3 \times 10 ^ { 7 } \mathrm { PFU } \) 의 바이러스를 혼합하여 정량펌프를 이용, \( 3 \mathrm { ~ml } / \mathrm { min } \) 의 속도로 원수 유입조에 주입하였다. 시료 채수는 미국 EPA의 ICR 및 환경부에서 권 장하는 표준필터장치를 조합하여 사용하였다. 시료 채수는 \(1 \)-MDS filter를 이용하여 원수·전오존은 \( 200 \sim300 \mathrm { ~l } \) 를 침전 · 여과 · 후오존 · BAC 여과 그리고 정수는 \(1,600 \mathrm { ~l } \) 이상을 여과하였다. 본 실험에 사용된 filter는 수중에서 negative charge를 띄고 있는 바이러스를 포함한 수중의 모든 유기물질을 흡착할 수 있도록 제조된 것으로 표면자체가 positive charge를 띄고 있다. 채수한 시료의 전처리는 미국 EPA의 ICR) 방법 및 환경부에서 정한 표준시험방법에 준하여 수행하였다. 멸균 튜브가 장착된 연동펌프(peristaltic pump)를 사용하여 \( 50 \mathrm { ~mM } \) glycine이 함유된 \( 1.5 \% \) Beef extract 완충액( \( \mathrm { pH } 9.5 \))을 여과지가 장착된 Housing filter내로 밀어 넣어 \(1 \) 분간 정체시킨 후 \(3 \)회 반복하여 용출시켰다. 먼저 탈리된 용출액의 \( \mathrm { pH } \) 를 \( 7.0 \sim 7.5 \) 로 조정하고 \( 1 \mathrm { ~M } \mathrm { ~HCl } \) 로 \( 3.5 \pm 0.1 \)로 조절한 후 실온에서 \(30 \) 분간 교반시켜 침전물의 생성 유무를 확인하였다. 탈리액을 \( 2,500 \times \mathrm { g } , 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 15 분간 원심분리하고 상등액을 제거한 후 \( 0.15 \mathrm { M } \) PBS (Phosphate Bufferd Saline, \( \mathrm { pH } 9.4 \)) \( 30 \mathrm { ~ml } \) 를 첨가한 후 완전히 용해시켰다. 용해된 침전물을 \( 7,000 \times g \) 로 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \(10 \) 분간 원심분리 한 후, 상등액만 취하여 \( 1 \mathrm { ~M } \mathrm { ~HCl } \) 로 \( \mathrm { pH } ~ 7.0 \sim 7.5 \) 로 조정하였다. 미생물오염을 제거하기 위해 구경 \( 0.22 \mu \mathrm { m } \) 멸균 필터를 이용하여 상등액을 여과하였다. 여과시킨 상등액을 \( 3 \sim6 \)일간 배양된 세포배양 플라스크 \( \left (25 \mathrm { ~cm } ^ { 2 } \right ) \) 의 BGM 세포주에 접종하였다. 음성대조구 및 양성대조구는 각각 \( 0.15 \mathrm { ~M } \mathrm { ~Na } _ { 2 } \mathrm { HPO } _ { 4 } \cdot 7 \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } ( \mathrm { pH } 7.4 \)) 용액과 순화된 poliovirus type III를 \( 0.15 \mathrm { ~M } \mathrm { ~Na } _ { 2 } \mathrm { HPO } _ { 4 } \cdot 7 \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } \) 용액으로 희석하여 시료 접종량과 동일하게 접종하였다. 배양기에서 BGM 세포에 시료를 흡착시켜 15 분 간격으로 배양용기를 좌우로 가볍게 기울여 접종된 시료가 골고루 세포에 흡착되도록 하였다. 접종 \( 80 \sim 120 \)분 후 세포 배양플라스크에 \( 2 \% \) Fetal Bovine Serum (FBS)가 함유된 \( \mathrm { MEM } / \mathrm { L } -15 \) 배지를 분주한 후 14일간 배양하며 세포병변현상을 관찰하였다. 원수·전오존수는 \( 100 \mathrm { ~l } \), 침전수는 \( 300 \mathrm { ~l } \), 여과수 · 후오존수 · BAC 처리수 그리고 정수는 \( 1,000 \mathrm { ~l } \) 를 기준으로 환산하였으며 3회 반복 실험하였다.</p>