생화학적 성상을 검토하기 위해 alkaline peptone수, TCBS agar 및 TSI 및 LIM agar 등의 배양 양상 및 집락의 색깔, hemolysin 생성능 등 주 동의 방법에 따라 검토한 결과 V. parahemolyticus가 8균주로 가장 많았고, 7균주의 V. mimicus, 6균주의 V. damsela, 5균주의 V. ounificus 그리고 4균주의 V. alginolyticus 순으로 분리 되었다. 또한 heat-labile entertotoxin(trh), thermostable direct hemolysin-like hemolysin(tdir) 및 choleratoxin(ctx) 등의 병원성 인자들은 비브리오속균이 생산하는 식중독 유발 enterotoxin으로 유전자 검출 실시 결과 parahemolyticus 에서 4주로 가장 많았다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>비브리오속균의 선정</h2> <p>해산물을 주 동의 방법에 따라 alkaline peptone수, TCBS agar 및 TSI 및 LIM agar 등의 배양 양상 및 집락의 색깔, hemolysin 생성능 등의 생화학적 성상을 검토한 곁과 Table 3과 같이 5종의 바브리오속 30균주가 분류 되었다. V. parahemolyticus가 8균주로 가장 많았으며, 그 뒤로 7균주의 V. mimicus, 6균주의 V. damsela, 5균주의 V. ounificus 그리고 4균주의 V. alginolyticus 순으로 분리 되어 독소 유전자 검출에 사용하였다.</p> <h2>Enterotoxin 유전자의 검출</h2> <p>비브리오속균이 생산하는 식줌독 유발 enterotoxin으로는 heat-labile entertotoxin(trh), thermostable direct hemolysin-like hemolysin(tdir) 및 choleratoxin(ctx) 동의 병원성 인자들이다. 30종의 비브뢰오속간을 대상오로 식줌독올 야기하는 이들 enterotoxin 유전자의 검출을 실시한 결과, Table 4와 같았다. 독소를 생산하는 균주는 총 17주로 \( 56.6 \% \) 로 비교적 높게 나타났다. 이 중에서 ctx는 V. parahemolyticus 에서 4주로 가장 많았고 그 다음흘 V. vuinificus 애서 2주, V.alginolyticus 에서 1주가 검출되었다. tdh는 V. parahemolyticus에서 2주, V. udmificus, V. nimicus, V. damsela 및 V. alginoly-hcus 등에서 각각 1 주씩 검출되었다. trh의 경우, V. vulnificus에서 2균주로 가장 많았다. 그리고 V. damsela, V. parahemoly-ficus 등에서 각각 1주씩 검출되었다. Table 3에서 분리된 비율이 \( 16.6 \% \)로 비교적 낮았던 V. mlmifichis에서는 분리 균주 모두에서 하나씩의 독소 유전자가 검출됟에 따라 다른 비브리오균속보다는 독소 유전자가 검출 빈도가 높은 것으로 나타났다. 그 다음으로는 V. parahemolyticus가 \( 87.5 \% \) 로 나타났으며, V. mimicus가 가장 낮았다. 또한, 분리 균주중에서 검출된 독소의 종류별로 살펴보면 c|x \( 23.3 \% \), tah \( 20 \% \)및 trh \( 13.3 \% \)로 두드러진 차이는 없었으나 ctx가 가장 많이 검출되었다.</p> <h2>Enterotoxin 유전자가 검출된 균주의 PCR 결과</h2> <p>식중독을 야기하는 enterotoxin 유전자가 검출된 균주들을 PCR한 결과, ctx 유전자의 DNA를 증폭시킨 결과는 Fig. 1과 같았다. Fig. 1의 lane c 에서 i 까지의 7균주 즉, V. oulnificus-2, V. inulnificus-4, V. parahemolyficus-1, V. para-hemoyticus-2, V. parahaemoltyics-4, V. parahemolyticus-8 및 V. alginolyticus-4 에서는 lane b의ctx 유전자가 검출된 V. paraliemolyticus A92와 동일한 \( 302 \mathrm{bp} \) 의 뚜렷한 band가 관찰되었다. Lane j 에서 q 까지에서는 ctx 유전자가 검출되지 않은 균주들이다. tdh 유전자의 DNA를 증폭시킨 결과는 Fig. 2와 같았다. Fig. 2의 lane f 에서 i 까지의 V. para-hemolyticus-3, V. parahemolyticus-5, V. mimicus- 1 및 V. dam-sela-1와 lane 1 과 lane m의 V. vuluificus- 1와 V, alginolyticus-1 등 6균주에서는 lane b와 마찬가지로 뚜렷하게 증폭된 \( 400 \mathrm{bp} \) 의 band가 관찰되었으며, lane b에서 e가지 그리고 lane j, k, n및 o에서는 tdh gene이 검출되지 않아 아무런 band도 관찰되지 않았다. 또한, trh 유전자의 경우는 Fig. 3과 같았다. Fig. 3의 Lane d에서 g까지의 V. milnificus-5, V. damseln-2, V. vulnificus-6 및 V. parahemolyticus-7 에서는 \( 554 \mathrm{bp} \)의 뚜렷한. band가 관찰되었으나, lane a와 c 는 ctx gene이 검출되지 않았음을 보여주었다. 또한, 본 실험에 사용된 분리균주에서는 PCR결과 같은 크기의 하나의 band 만이 관찰됨에 마라 single- stranded DNA로 사료된다.</p>