3종 소재의 항산화능 보유 유무 및 그 정도를 알아보기 위해 DPPH radical 소거능을 분석 결과 매우 강한 항산화능을 보유함을 확인했으며 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \)와 LPS에 의해 유도된 산화적 스트레스 또한 효과적으로 감소시킴을 확인하였고 Nrf2의 발현 증가에 있어서 HO-1의 발현 유도가 기인할 것으로 판단되었다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>추출물의 항산화능 분석</h2> <p>3종 소재의 항산화능 보유 유무 및 그 정도를 알아보기 위해 먼저 항산화능의 주요 지표 중 하나인 DPPH radical 소거능을 분석하였다. 그 결과 Table 1 에 제시된 바와 같이 MHEE, OCEE, 그리고 PREE 모두 농도 증가에 따른 강한 radical 소거능을 보여 \( 12.8 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 의 시료 처리에 의해 DPPH radical 소거능이 각각 \( 97.32,95.42,95.01 \% \) 로 나타나 양성 대조군으로 사용한 ascrobic acid, 즉 vitamin C의 \( 97.49 \% \) 와 유사한 정도의 활성을 보여 매우 강한 항산화능을 보유함을 확인하였다. 각 소재의 DPPH radical에 대한 \( 50 \% \) 소거 농도를 나타내는 \( \mathrm{IC}_{50} \) 값은 MHEE, OCEE, PREE가 각각 \( 1.10,1.49,1.38 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 으로 나타났다. 이에 각 소재가 보유한 항산화능의 정도 및 기전을 세포 수준에서 확인하고자 하였다.</p> <h2>추출물의 ROS 소거능 분석</h2> <p>DPPH radical 소거능 분석에 의해 각 소재가 보유한 높은 항산화능이 확인됨에 따라 그 작용 기전을 좀 더 자세히 알아보기 위해 먼저 RAW 264.7 cell에 대표적인 산화적 스트레스 유도인자인 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 와 LPS를 각각 처리하여 각 소재의 ROS 소거능을 분석하였다. 그 결과 Fig. 1과 Fig. 2에 제시 한 바와 같이 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \)와 LPS에 의해 각각 유도된 ROS 생성이 소재의 농도별 처리에 의해 효과적으로 저해되는 것으로 나타나 세 소재가 DPPH radical 뿐만 아니라 세포 수준에서 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 와 LPS에 의해 유도된 산화적 스트레스 또한 효과적으로 감소시킴을 확인하였다.</p> <h2>각 추출물이 항산화 효소 HO-1 및 상위 전사인자 Nrf2의 발현에 미치는 영향</h2> <p>강한 항산화능을 보유한 천연 소재들이 Nrf2에 의한 항산화 효소계의 발현 유도를 통해 활성을 나타낸다는 것이 여러 연구를 통해 밝혀짐에 따라 각 소재가 보유한 항산화능의 작용 기작을 알아보고자 하였다. 이를 위해 각 소재가 대표적인 항산화 효소인 HO-1과 그 상위 전사인자인\ Nrf2의 단백질 발현에 미치는 영향을 분석하였다. 그 결과 Fig. 3 에 제시된 바와 같이 \( 10-50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 시료 처리에 의해HO-1 및 상위 전사 인자인 Nrf2의 단백질 발현이 증가되는 것으로 나타나 각 소재에 의한 HO-1의 발현 유도가 Nrf2 의 발현 증가에서 기인할 것으로 판단되었다.</p>