MDA-MB-231은 estrogen receptor를 발현하지 않기 때문에 다른 유방암세포와는 전사활성기전이 다를 가능성이 있음을 가정하고 synthetic 4 ERE-tk-luciferase의 효과를 조사했다. 그 결과 estradiol과 TCPOBOP를 동시에 처리했을 때 transfection된 plasmid는 trnas-activation 효과를 촉진시킬 수 있었다. 한편, prostaglandin은 ER transaction의 효과를 촉진시켰는데, 이는 estrogen에 의해 유전자의 발현을 조절할 수 있음을 알려준다. PPAR \gamma\(\Upsilon\) 단백질을 증가시켜도 ER과의 interaction에는 한계가 있을 것이다.
<p>MCF-7 세포와는 달리, MDA-MB-231세포는 estrogen receptor를 발현하지 않는 유방암세포이기 때문에, xen-iotic nuclear receptor에 의해서 영항을 받는 estrogen receptor의 전사활성기전이 endogenous ( \(ER\) )을 발현하는 유방암세포와는 다를 가능성이 있다는 가정을 두고 \( E R \) expression plasmid를 transfection한 다음 estrogen에 의한 synthetic 4 ERE-tk-luciferase의 transactivation화를 조사하였다. MCF-7 유방암세포에서와 같이, estrogen에 의한 ER의 transactivation효과를 최대화하기 위하여 Phenol Red, Hydrocortisone, insulin, 그리고 Glutathione을 제거한 배양액에서 약 35일 동안 Weaning시킨 후 약 \( 80 \% \) 의 confluency에 도달한 MCF-7 유방암 세포에 \(h-ER\) (\( \alpha \) ex-pression plasmid), 각각의 xenobiotic orphan nuclear re-ceptor expression plasmid, 그리고 synthetic 4ERE-tk-luciferase reporter plasmid를 transiently cotransfection하였다. Ex-ogenous estrogen receptor의 매개에 의한 \( 4 E R E-t k- \) luciferase의 활성이 \( 10 \mathrm{nM} \) 의 17-beta-estradiol에 의해 8배 증가되었으나 TCPOBOP에 의해서는 ethanol에 의한 반응과 차이가 나지 않았다 (Fig. 3A). 특히 Hep G2 또는 MCF-7 유방암세포에서와는 달리, estradiol과 TCPOBOP를 동시에 처리하였을 며 \( 50 \mathrm{ng} \) 의 transfection된 CAR ex-pression plasmid는 estrogen에 의해 증가된 ER trans-activaton효과를 약 \( 15 \% \) 촉진시켰다 (Fig. 3A). MCF-7 유방암세포에서와는 달리, estradiol과 rifampicin을 동시에 처리하였을 때 \( \mathrm{SXR} \) expression plasmid의 transfection 여부와 상관없이 rifampicin은 17-beta-estradiol에 의해 증가된 ER transactivaton의 호과를 변화시키지 못하였다 (Fig. 3B). PPAR \( y \) expression plasmid를 transfection하지 않은 상대에서도 17- \( \beta \)-estradiol과 prostaglandin을 동시에 처리하였을 때, prostaglandin이 17 - \( \beta \)-estradiol에 의해 증가된 ER transactivaton의 효과를 약 \(25\%\)촉진시켰다 (Fig. 3C). 이는 endogenous PPAR \( \gamma \) 단벽 질이 MDA-MB-231 세포에서 발현될 뿐만 아니라 estrogen에 의해 배개되는 유전자의 발현을 조절할 수 있는 가능성을 시사한다. 외부로부터 PPAR \( \gamma \) expression plasmid를 transfection시켰을 때에도 더 이상 증가하지 않고 endogenous PPAR \( \gamma \) 과 동일한 촉진효과를 보였다 (Fig. 3C). 이에 대한 이유는 분명하지 않으나 MDA-MB-231 유방암세포에서는 endogenous estro-gen receptor가 발현되지 않는다는 점과, ER이 다른 핵 수용체들과 다양하고 복잡한 cross-talk에 관련 할 수 있는 가능성을 감안 할 때 PPAR \( \gamma \) 단백질의 발현을 증가시켜도 ER과의 cross-talk interaction에 한계가 발생될 수 있을 것으로 추정된다.</p>