A549 세포 증식억제 효과는 봉독의 농도 증가에 따른 세포주기 특이적 arrest 유발은 관찰할 수 없었으나 apoptosis 유발에 동반되었고, 봉독 처리에 의한 A549 세포의 증식 억제는 PGE2 의 생성저해와 연관성이 있고, COX-2의 선택적 발현 억제에의한 것임을 확인할 수 있다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>A549 폐암세포의 증식에 미치는 봉독의 영향</h2> <p>봉독에 의한 A549 폐암세포에서 \( \mathrm{PGE}_{2} \) 생성 및 telomerase활성 변화 연관 실험의 수행을 위한 조건 설정을 위하여, 48시간 동안 다양한 농도의 봉독을 처리한 후 MTT assay 및 형태적 변화 관찰을 실시한 결과는 Fig. 1에 나타낸 바와 같다. 결과에서 알 수 있듯이 봉독 처리 농도의 증가에 따라 A549 세포의형태변형 증가와 증식이 억제되어 \( 4 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) 및 \( 5 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) 처리군에서는 대조군에 비하여 각각 약 70% 및 90% 이상의 증식억제 효과를 보였으며, 이는 다른 종류의 암세포에 나타난 선행연구의 결과들과 유사하였다. 또한 이러한 봉독의 A549 세포 증식억제 효과가 세포주기 교란 및 apoptosis유발과 연관성이 있는지를 조사한 결과 Table 2에 나타낸 바와 같이 본 실험의 조건에서 봉독의 농도 증가에 따른 세포주기 특이적 arrest 유발은 관찰할 수 없었으나 sub-G1기에 속하는 세포의 빈도가 다소 증가되어 apoptosis 유발에 동반되었음을 알 수 있었다.</p> <h2>A549 세포에서 PGE2의 생성에 미치는 봉독의 영향</h2> <p>Prostaglandin (PG)는 세포의 분열이나 증식에 영향을 줌으로서 각종 인체 질병의 유발과 진행에 중요한 역할을 함이 최근 밝혀진 바 있으며, PG의 합성에서 크게 2가지 COX isoform이 관여하고 있는데, 대부분의 조직에서 일정한 수준으로 발현되는 COX-1의 경우 인체의 항상성 유지와 연관된 기능수행에 관여하고 있다. 그러나 COX-2는 다양한 성장인자, cytokines, 종양 촉진인자들 등의 자극에 의해 발현이 유도되어 세포 증식을 촉진하고 apoptosis를 억제하며 세포의 유동성 및 부착성을 강화시킴으로서 각종 퇴행성 질환의 발병과 진행에 중요한 역할을 한다. 선행 역학적 조사와 여러종류의 암 조직에서 COX-2가 높은 발현을 유지하는 것이 apoptosis에 대한 저항성 획득과 염증반응과 연관된 세포의 암화에 밀접한 관련이 있을 것으로 보고되어 진 바 있으며, COX-2의 과발현에 의해 암조직에서의 혈관신생 및 전이능이 높아지고,COX-2의 선택적 억제제에 의한 angiogenesis와 종양형성 억제 등의 결과에서 COX-2의 선택적 조절에 의한 암예방 및 항암전략이 대두되고 있다.</p> <p>따라서 봉독 처리에 의한 A549 세포의 증식억제가 COX-2의 발현 저하 및 PG의 생성 변화와의 연관성이 있는지의 여부를 조사하기 위하여 COX-1 및 -2의 발현 변화를 RT-PCR 및 Western blotting 방법으로 조사하였다. Fig. 2A 및 B의 결과에서 알 수 있듯이 COX-1의 mRNA 및 단백질 발현에는 봉독의 처리가 큰 영향을 미치니 못하였으나, COX-2의 경우 전사 및 번역 수준 모두에서 봉독 처리 농도의 증가에 따라 점차적인 발현의 감소를 보여주었다. 이러한 봉독에 의한 COX-2의 선택적 발현 저하가 PG 중, \( \mathrm{PGE}_{2} \)의 생성 저하와 연관성이 있는지를 조사하기 위하여 \( \mathrm{PGE}_{2} \)의 생성에 미치는 봉독의 영향을 조사한 결과는 Fig. 2C에 나타낸 바와 같다. Fig. 2C에 나타낸 바와 같이 A549 세포에서 봉독 처리의 농도가 증가할수록 \( \mathrm{PGE}_{2} \)의 생성이 매우 감소되었으며, \( \mathrm{PGE}_{2} \)의 생성 감소 경향성 은 COX-2의 발현 저하와 유사한 경향성을 보여주었다. 따라서 봉독 처리에 의한 A549 세포의 증식 억제에는 \( \mathrm{PGE}_{2} \)의 생성저해와 연관성이 있으며 이는 COX-2의 선택적 발현 억제에의한 것임을 알 수 있었다.</p>