동결 보존한 꽃잎 \( 0.5 \mathrm { ~g } \)를 마쇄하고 EDTA, ascorbic acid, PVPP가 포함된 \( 25 \mathrm { ~mM } \mathrm { ~K-P } \) buffer로 균질화한 후 원심분리하여 CAT, APX, GR 활성을 측정하였다.
<p>상대수분함량 \( ( \%) = ( \mathrm { FW } - \mathrm { DW } ) /( \mathrm { TW } - \mathrm { DW } ) \times 100 \)</p> <h2>항산화 효소 활성의 측정</h2> <p>동결 보존한 꽃잎 \( 0.5 \mathrm { ~g } \)을 마쇄한 후, \( 0.4 \mathrm { ~mM } \) EDTA, \( 1 \mathrm { ~mM } \) ascorbic acid, \( 2 \% \mathrm { (W/V) } \) polyvinylpolypyrrolidone (PVPP)가 포함된 \( 25 \mathrm { ~mM } \mathrm { ~K-P } \) buffer \( (pH 7.8) \( 5 \mathrm { ~mL } \)를 가해, 조직분쇄기로 약 30초간 균질화한 후, 원심분리 ( \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } , 15,000 \times \mathrm { g } \), 20분간)를 하였다. 상청액을 이중의 miracloth여과 한 것을 조효소액으로 하여, catalase (CAT), ascorbate peroxidase (APX), glutathione reductase (GR) 활성측정에 이용하였다. 효소 활성의 측정은 분광 광도계 UV-2450 (Shimadzu, Japan)을 이용해, 단위시간 내의 흡광도의 변화로부터 이뤄졌다.</p> <p>CAT 활성의 측정은 Aebi (1974) 방법에 준해 실시하였다. 조효 소액 \( 0.05 \mathrm { ~mL } \)를 \( 10 \mathrm { ~mM~ } \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \)가 포함된 \( 50 \mathrm { ~mM~ } \mathrm { K } - \mathrm { P } \) buffer (pH 7.0) \( 0.95 \mathrm { ~mL } \)에 첨가해, \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \)의 분해를 \( 240 \mathrm { ~nm } \)의 흡광도 감소속도로부터 구했다.</p> <p>APX 활성의 측정은 Nakano와 Asada (1981) 방법에 준해 실시하였다. 조효소액 \( 0.05 \mathrm { ~mL } \)에 \( 100 \mathrm { ~mM~ } \) ascorbic acid \( 0.25 \mathrm { ~mL } , 0.4 \mathrm { ~mM } \) EDTA \( 0.25 \mathrm { ~mL } , 10 \mathrm { ~mM~ } \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } ~0.01 \mathrm { ~mL } , 100 \mathrm { ~mM~ } \mathrm { K } - \mathrm { P } \) buffer (pH 7.0) \( 0.25 \mathrm { ~mL } \), 증류수 \( 0.19 \mathrm { ~mL } \)를 첨가해, \( 290 \mathrm { ~nm } \)의 흡광도 감소로부터 산출하였다.</p>