부정근 증식을 IBA 농도에 따라 조사하였다. 고체배지와 액체배지에 Sucrose를 첨가하고, IBA는 첨가하여 4주간 배양한 후 부정근의 생중량과 건중량을 조사하였다. 또한 2단계 배양에 따른 부정근 증식을 조사하였으며, IBA는 \( 3.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 로 첨가하고 나머지는 \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 로 첨가하여 4주간 배양한 후 부정근의 생중량과 건중량을 조사하였다.
<h2>IBA 농도에 따른 부정근유도</h2> <p>부정근의 근단을 \( 1 \mathrm { ~cm } \) 로 절단하여 sucrose는 \( 30 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \) 로 동일하게 첨가하고 IBA가 \( 0,0.1,0.5,1.0,3.0 \) 그리고 \( 5.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 가 첨가된 MS 배지 위에 10 개씩 각각 30 개의 절편을 치상한 다음 배양 4 주후에 부정근의 유도개수와 길이 그리고 생중량을 각각 조사하였다. 절편은 식물생장조절제의 처리에 따라 petri dish당 10 개씩, 총 30 개씩 각각 치상하였고 \( 22 \pm 1 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 암배양 하였다.</p> <h2>Sucrose농도에 따른 부정근증식</h2> <p>고체배지조건에서 확립한 IBA의 \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 를 기본으로 하여 sucrose가 \( 0,10,30,50 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \) 첨가된 액체배지를 조성하였다. 부정근 \( 1 \mathrm { ~g } \) 을 취해서 위에 제조된 배지에 접종하여 \( 22 \pm 1 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 암배양 하였다. 배양용기는 \( 250 \mathrm { ~mL } \) 의 삼각플라스크(Horex, Germany)를 사용하였고, 배지는 \( 100 \mathrm { ~mL } \) 를 첨가하였다. 배양은 4 주간 \( 110 \mathrm { rpm } \) 으로 액체 배양 하였으며, 4주후 생중량과 건중량을 조사하였다.</p> <h2>2 단계 배양에 따른 부정근 증식</h2> <p>황칠나무의 부정근 \( 10 \mathrm { ~g } \) 을 취해 \( 5 \mathrm { ~L } \) 용적의 풍선형 생물반응기에 \( 4 \mathrm { ~L } \) 의 액체배지(1/2MS salts, \( 3 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \mathrm { IBA } , 30 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \) sucrose)를 넣고 접종하여 \( 22 \pm 1 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 암 배양 하였다. 그 후 하나의 배양기에는 계속해서 IBA가 \( 3.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 첨가된 배지를 첨가해 주었고 다른 하나는 IBA의 농도를 \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 로 낮추어 첨가하였다. 배지 첨가주기는 2 주 간격으로 1 회 첨가하였다. 암 조건에서 4 주간 배양 후 부정근의 생중량과 건중량을 비교하였다.</p>