출생 후 21일부터 60일까지의 4주령 Sprague-Dawley 수컷 흰쥐를 대조군과 운동군으로 나누어 실험을 진행했다. 운동그룹의 흰쥐는 소형동물용 트레드밀에서 점증적인 부하로 운동하게 했다. 신경세포 생성에 대한 검사를 위해 체중당 \( 50 \mathrm{mg} \)의 BrdU를 모든 그룹의 동물들에게 운동 시작 30분 전에 피하 주입했다. 또한, 기억력 검사를 위해 트레드밀 운동이 종료되는 3일 전부터 step-through passive avoidance 검사를 실시했다.
<h1>재료 및 방법</h1><h2>실험 동물</h2><p>흰쥐의 청소년기는 출생 후 21일부터 60일까지로, 본실험에서는 4주령의 Sprague-Dawley 수컷 흰쥐를 이용하였다. 동물들은 3일간의 환경 적응 기간을 거치게 하였고, 4마리당 한 개의 사육케이스 \( (38 \times 28 \times 18 \mathrm{~cm}) \)에 넣고 항온 \( \left(20 \pm 2^{\circ} \mathrm{C}\right) \),항습 \( (60 \%) \)이 유지되며, 12시간 간격으로 낮과 밤을 교대시키는 동일한 실험실 환경에서 사육되었다. 이들 흰쥐들은 대조군 \( (\mathrm{n}=10) \)과 운동군 \( (\mathrm{n}=10) \)으로 분류되었다.</p><h2>운동 프로토콜(protocol)</h2><p>운동그룹의 동물들은 소형동물용 트레드밀에서 점증적인 부하를 이용하여 운동하도록 하였다. 점증부하 운동수행은 경사도 \( 0 \% \)에서 초기 5분간은 \( 2 \mathrm{~m} / \mathrm{min} \) 속도, 그 다음 5분간은 \( 5 \mathrm{~m} / \mathrm{min} \) 속도, 그리고 \( 8 \mathrm{~m} / \mathrm{min} \) 속도에서 20분간 총 30분 달리기를 하루 일회씩 주 5회로 4주간 실시되었다. 흰쥐에서 위와 같은 트레드밀 속도 및 경사도는 저강도 운동으로 분류되며 해마의 신경세포생성에 있어서 가장 효과적인 강도로 보고된 바 있다. 신경세포 생성의 면역조직화학법 검사를 위해 체중당 \( 50 \mathrm{mg} \)의 BrdU (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA)를 운동프로그램 시작 첫날 운동 시작 30분 전에 모든 그룹의 동물들에게 피하 주입하였다.</p><h2>기억력 검사</h2><p>기억력 검사를 위해 트레드밀 운동종료 3 일 전부터step-through passive avoidance 검사를 실시하였다. 이 장치는 두 개의 방으로 구성되어있는데, 하나는 밝은 공간인 반면에 나머지 하나는 어두운 공간이다. 어두운 공간의 방바닥에 전기충격을 가할 수 있는 강철 스테인레스가 설치되어 있다. Acquisition trial에서 각각의 흰쥐를 밝은 공간의 방에 60초간 있게 한 다음에 밝은 공간의 방과 어두운 공간의 방을 막고 있는 문을 열어주었다. 그리고 흰쥐가 어두운 공간에 들어갈 때 가지의 시간(initial latency time)을 기록하였다. 흰쥐가 어두운 방에 들어가자마자 문을 닫고 전기충격( \( 75 \mathrm{~V| \), \( 0.2 \mathrm{~mA} \),\( 50 \mathrm{~Hz}) \)을 2초간 주었다. 그리고 5초가 지난 다음에 흰쥐를 꺼내 사육장 케이스로 옮겼다. 72시간 후 acquisition trial과 동일한 방식의 실험을 진행하였다. 이때 밝은 방에서 어두운 방으로 들어가는 시간(retention latency time)을 기록하였다. 만약 기억력이 손상되지 않았다면 기억력이 손상된 흰쥐보다 전기충격을 받게 되는 어두운 방으로 들어가는 시간이 길어진다.</p>