배양상등액을 ammonium sulfate로 처리, 제조한 조효소액을 사용하여 반응 \( \mathrm{pH} \) 와 온도가 효소활성에 미치는 영향을 조사한 결과 xylanase의 최적반응 온도는 65\(^\circ \mathrm{C}\), pH 는 5.5로 확인되었으며 sodium phosphate 완충용액에서 활성이 높았다. 분리균의 효소에 의한 농산 부산물의 분해물을 조사한 결과 분리균 YB-1107 의 배양액 중의 xylanase 활성은 고온 에서 높은 것을 알 수 있었으며 xylose나 mannose가 탐지되지않은 것은 Cellulosimicrobium sp.HY-13와 HY-12의 효소와 유사한 현상으로 보인다.
<h2>효소 반응특성</h2> <p>배양상등액을 ammonium sulfate로 처리한 후 투석하여 제조한 조효소액을 사용하여 반응 \( \mathrm{pH} \) 와 온도가 효소활성에 미치는 영향을 조사하였다(Fig. 3). 그 결과 xylanase의 최적반응 온도는 \( 65^{\circ} \mathrm{C}, \mathrm{pH} \) 는 \( 5.5 \) 로 확인되었으며, sodium citrate 완충용액보다는 sodium phosphate 완충용액에서 활성이 높았다. Mannanase는 \( 55^{\circ} \mathrm{C} \) 와 \( \mathrm{pH} 6.5 \) 에서 최대 활성을 보였으며 조효소액을 여러 온도에서 각각 1 시간 방치한 후에 잔존활성을 측정한 결과 mannanase는 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) 에서는 \( 90 \% \) 정도의 활성을 유지하였으나 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 이상에서는 급격하게 실활되었고, xylanase는 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 까지 안정하게 유지되는 것으로 나타났다(결과 미제시). 한편 Cellulosimicrobium sp. HY-13 의 정제 mannanase는 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 와 \( \mathrm{pH} \) 7.0에서, xylanase는 \( 55^{\circ} \mathrm{C} \) 와 \( \mathrm{pH} 6.0 \) 에서 각각 최대활성을 보이는 것으로 알려졌으며, HY-12의 정제 xylanase는 \( 60^{\circ} \mathrm{C} \) 와 \( \mathrm{pH} 6.0 \) 에서 최 대활성을 보이는 것으로 확인되었다. 또한 C. cellulans 분리균의 배양액은 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 와 \( \mathrm{pH} \) 5.6에서 xylanase의 최대활성을 보이는 것으로 보고되었다. 따라서 분리균 YB-1107 의 배양액 중의 xylanase 활성은 이들 효소들에 비해 고온 에서 높은 것을 알 수 있다.</p> <p>분리균의 효소에 의한 농산 부산물의 분해물을 조사하기 위해 조효소액을 사용하여 쌀기울, 밀기울, PKM 및 xylan과 \( \mathrm{LBG}^{\text {}} \) 을 분해한 후 생성된 분해산물을 조사하였다. 그 결과 Fig. 4에 보인 바와 같이 mannanase 조효소액에 의해 mannobiose 보다 이동도가 낮은 LBG의 분해산물이 확인되었고, 미강과 밀기울도 mannanase 에 분해되어 mannobiose와 mannotriose와 이동도가 유사한 분해산물이 관찰되었으나 PKM의 경우는 분해산물이 탐지될 수준은 아니었다. Xylanase 조효소액에 의해 xylan이 분해되어 xylose와 xylotetraose의 사이의 이동도를 갖는 여러개 올리고당이 생성되었으며 xylose 보다 이동도가 빠른 물질도 생성되었다. Xylan은 xylanase에 의해 분해될 경우 xylose 보다 이동도가 빠른 분해산물이 생성될 수 없는뎨, xylose 보다 이동도가 빠른 물질이 생성된 것은 반응에 사용한 조효소액에 xylanase외에 xylan의 분해에 관여하는 다른 효소가 존재하기 때문으로 판단된다. 미강과 밀기울도 xylanase에 의해 분해되어 xylotriose및 xylotetraose와 이동도가 유사한 올리고당이 분해산물로 관찰되었다. \( \mathrm{PKM} \) 은 xylanase에 의해서도 관찰 가능한 수준으로 분해산물이 생성되지 않았다. 분리균이 생산하는 xylanase와 mannanase 효소액에 의해서 xylan이나 LBG가 분해되었을 때 xylose나 mannose가 탐지되지않은 것은 Cellulosimicrobium sp. HY-13와 HY-12의 효소 와 유사한 현상이나, LBG로부터 mannose를 분해산물로 생성하는 Bacillus subtilis WL-3의 mannanase와는 다른 성질을 보였다.</p>