뇌하수체로부터 RT-PCT방법에 의해 cDNA clone을 획득하였는데 경골어류 growth hormone과 prolactin에 \( \mathrm { A } _ {\mathrm { SL } } , \mathrm { B } _ {\mathrm { SL } } \), \( \mathrm { D } _ {\mathrm { SL } } \)이 보존되어 있다. 돌돔 SL cDNA를 발현벡터에 클로닝한 결과 SDS-PAGE에 의해 분자량 재조합 단백질의 발현을 확인했다.
<h1>요 약</h1> <p>돌돔 (Oplegnathus fasciatus) SL을 암호화하는 cDNA clone을 뇌하수체로부터 RT-PCR 방법에 의해 획득하였다. 돌돔 SL cDNA의 길이는 \( 1636 \mathrm { bp } \) 로서 24 개의 아미노산인 signal peptide와 207개의 aa으로 구성된 mature protein을 암호화하는 \( 696 \mathrm { bp } \) 의 open reading frame을 갖고 있다. 또한, 돌돔 SL 아미노산에는 이황화 결합에 관여하는 7개의 시스테인 잔기 (Cys \( ^ { 5 } , \mathrm { Cys } ^ { 15 } , \mathrm { Cys } ^ { 42 } , \mathrm { Cys } ^ { 65 } , \mathrm { Cys } ^ { 181 } , \mathrm { Cys } ^ { 198 } \) 과 \( \mathrm { Cys } ^ { 206 } \) )와 두 개의 potential N-glycosylation site인 \( \mathrm { Asn } ^ { 121 } \) 과 \( \mathrm { Asn } ^ { 153 } \) 을 확인하였다. 돌돔 SL은 goldfish와 channel catfish를 제외한 다른 경골어류 SL에 아미노산 서열은 \( 61.1 \sim 92.6 \% \), 뉴클레오타이드 서열은 \( 63 \sim 92.6 \% \)의 일치를 나타낸다. 아미노산 서열 alingment에서 돌돔 SL은 다른 어류 \( \mathrm { SL } \) 에 공통적인 4개의 conserved domain ( \( \mathrm { A } _ {\mathrm { SL } } , \mathrm { B } _ {\mathrm { SL } } \) \( \mathrm { C } _ {\mathrm { SL } } \) 과 \( \mathrm { D } _ {\mathrm { SL } } \) )을 갖고 있음을 확인하였다. 이들중 \( \mathrm { A } _ {\mathrm { SL } } , \mathrm { B } _ {\mathrm { SL } } \),과 \( \mathrm { D } _ {\mathrm { SL } } \) 은 경골어류 growth hormone과 prolactin에도 잘 보존 되어 있었다. 재조합 돌돔 SL 단백질을 E. coli에서 생산하기 위해 돌돔 SL cDNA를 발현벡터에 클로닝하여 단백질의 발현을 유도하였다. 발현된 단백질은 SDS-PAGE에 의해 분자량 약 \( 27 \mathrm { kDa } \) 의 재조합 단백질의 발현을 확인하였다.</p>