DWP-04를 투여한 후 GaIN 처리로 간독성 유도된 동물에 대한 지질과산화 함량 변화를 관찰한 결과, DWP-04가 GaIN에 의해 생성되는 지질과산화물을 감소시켜 간 손상을 억제시키는 것을 알 수 있었다. 또한, 지질과산화 억제 효과가 어떤 기전을 통해 나타나는지를 알아보기 위해 활성산소 생성계인 cytosol 효소계와 microsomal 효소계에 미치는 DWP-04의 효과를 관찰한 결과, 효소계의 활성이 증가하여 oxygen free radical이 생성되는 것을 DWP-04가 저지하여 지질과산화 반응을 억제시키는 것으로 생각된다.
<h2>지질과산화물의 함량에 미치는 영향</h2> <p>DWP-04를 \(50, 100, 200 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \)을 2주간 경구 부여한 후 GaIN 처리로 의해 간독성이 유도된 실험동물에 대한 간조직중의 지질과산화 함량변화를 실험한 결과가 Fig. 1과 같다. 정상쥐에 GaIN을 투여함으로씨 과산화물이 현저히 증가되던 것이 DWP-04의 투여에 의해 현저히 감소하였다. 일반적으로 생체조직 세포막의 손상은 세포막 구성성분인 polyunsaturated fatty acid의 과산화가 그 한가지 요인으로 지적되고 있는데, 지질과산화의 생체 외적인 요인뿐만 아니라 내적인 요인에 의하여 생성된 oxygen free radical들 때문에 야기되며, 세포의 성분이나 기질, 특히 불포화지방산이 다량 존재하는 세포막에 연쇄적인 과산화적 손상을 입힌다. 또한 생체는 free radical의 독작용을 저지시켜주는 free radical scavenging system이 존재하고 있고 여러가지 손상으로부터 보호받고 있다. 그러나 어떠한 원인에 의해 free radical generating system과 scavenging system 사이의 불균형이 초래되어 질때에는 조직의 손상, 발암, 염증, 성인병 및 노화등과 갈이 여러가지 독작용을 유발한다고 한다. 지질과 산화는 자동산화 반응에 의한 다가 불포화지방산에 산소가 부가된 생산물의 총징이다. 이것은 병태 생리 현상이나 조직의손상 정도를 나타내는 지표이다. 지질과산화는 불포화 지방산 구성성분이 많고 인지질의 함량이 풍부한 mitochondria, microsome, erythrocyte 및 platelet 등의 막에서 십게 일어날수 있다. 지질과산화는 세포막의 투과성을 항진시키고 전반적인 세포독성을 초래하여 세포기능을 저하시켜 괴사에 관여하여 노화 현상이나 이에 따른 여러 가지 질환의 병리현상을 유발하여 발암의 과정에도 관여할것이라고 Ahokas등 은 보고하였다. 본 실험의 결과 DWP-04의 투여가 GaIN에 의해 생성되는 지질과산화물을 감소시킴으로서 지질과 산화반응에 의한 간 손상을 억제시키는 것으로 사료된다.</p> <h2>활성 산소 생성계에 미치는 영향</h2> <p>체내에 투여되어진 약물 및 독성물질의 대사과정은 phase I 반응과 phase II 반웅으로 나눌 수 있으며, Table 1에서 DWP-04가 GaIN에 의하여 유도된 지질과산화의 억제효과가 어떠한 기전에 의하여 나타나는가를 검토할 목적으로 간장에서 일어나는 활성산소의 생성계인 phase I 반응 중 cytosol 효소계 및 microsomal 효소계에 미치는 DWP-04의 효과를 관찰한 성적이 Table 2이다. DWP-04를 2주간 전처리하고 마지막날 GaIN을 투여하였을 때 cytosolic 효소인 xanthine oxidase (XO)와 aldehyde oxidase (AO)의 활성이 GaIN의 투여로서 현저히 증가되던 것이 DWP-04를 전처리 \( (100,200 \) \( \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \) ) 하므로서 용량의존적으로 유의성 있게 억제되었다. 한편 microsomal화소계인 aminopyrine N-demethylase (AD) 및 aniline hydroxylase (AH) 의 활성도 유사한 결과를 관찰할수 있었다. XO는 모든 생물 종에 분포하며, 동물조직에서는 간과 소장의 세포질에 주로 존재하는것으로 purine과 py-rimidine을 산화시키고, hypoxanthine을 산화시켜 xanthine을 만들며 xanthine로부터 uric acid 생성에 관여한다. 이때 생성된 oxygen free radical은 과산화지질을 유도하는것으로 알려져 있다. AO도 XO와 물리화학적인 구조나 성질이 유사하며, XO와 마찬가지로 oxygen free radical을 생성시키는 효소이다. 또한microsomal 효소계에서 phase 1단계에 관여하는 cytochrome P450은 mixed function oxidase로서 독성물질의 결합하는 형태 및 존재조직에 따라 서로 다른 spectrum을 나타내는데 aninopyine을 기질로하여 formal-dehyde를 생성하는 type1과 aniline을 기질로하여 p-amino-phenol을 생성하는 type II로 분류하고 있으며 이는 micro-somal계의 활성산소 생성에 관여하고 있다. 이에 본 실험의 결과 GaIN투여로 인해 cytosol 및 microsomal 효소계의 활성이 증가되어 superoxide anion, hydroxyl radical 및 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \)와 같은 oxygen free radical이 생성이 증가되는 것을 DWP-04 의 투여로서 이러한 과정을 저지시켜 지질과산화반응을 억제시키는 것으로 생각된다.</p>