Colony의 표면은 둥글며, 매끄럽고, catalase 양성 및 oxydase 음성으로 확인되었으며, glucose를 이용하여 산을 생성하는 Serratia marcescesns 균주로 동정되었다. 배양시간 조사 결과, 균체생육은 9시간이 최대로 나타났으며 이후 감소하였고, 효소생성은 9시간 이후에는 변화가 적어 최적 배양시간을 9시간으로 설정하였다. 또한, 균주의 배양온도에 따른 균체생육과 효소생성 조사에서 \(20^{\circ} \mathrm{C}\)와 \(40^{\circ} \mathrm{C}\)에서는 효소생성이 나타나지 않았고, \(30^{\circ} \mathrm{C}\)에서 균체생육과 효소생성이 가장 높게 나타났다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>균주의 동정</h2> <p>흰개미의 장으로부터 분리된 균은 그람음성의 운동성을 가진 통성혐기성 간균으로 내생포자를 형성하지 않았다. Colony의 표면은 둥글며, 매끄러웠고, catalase는 양성, oxydase는 음성, glucose를 이용하여 산을 생성하였다. 특히 붉은 색소를 분비하는 것이 특징적이다. 더욱 정확한 균 동정을 위해 16S rRNA를 이용하여 동정한 결과 Serratia marcescesns와 \(99\%\) 유사성을 보였다. 따라서 본 균주 S. marcescesns strain TM-3215 로 명명하였다.</p> <h2>배양시간</h2> <p>본 균주의 균체생육과 효소생성에 미치는 배양시간의 영향을 조사한 결과, Fig. 2 와 같이 균체생육은 9 시간이 최대였고 이후에는 감소하였다. 그리고 효소생성은 9시간 이후 효소생성의 변화가 적어 최적 배양시간은 9시간으로 하였다.</p> <p>다른 연구자들에 의한 S. marcescens의 효소생성 결과 Matsumoto 등이 24시간, 최 등이 30시간, Kim과 Oh가 45 시간, 김 등에서는 72시간이라고 보고하였다. 이에 비해 본 균주는 9시간으로 배양시간이 훨씬 적게 소요되는 것으로 나타났다.</p> <h2>배양온도의 영향</h2> <p>본 균주의 배양온도에 따른 균체생육과 효소생성을 조사하기 위해 \( 20 \sim 40^{\circ} \mathrm{C} \) 의 온도 범위에서 9시간 동안 배양하여 측정한 결과 Fig. 3A 와 같이 균체생육과 효소생성 모두 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 가장 높게 나타났고, \( 20^{\circ} \mathrm{C} \) 와 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 에서는 효소생성을 나타나지 않았다. 이 결과는 Kim과 Oh, 김 등, Lyerly와 Kreger에서와 같이 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 효소생성이 높았다는 결과와 일치 하였다.</p> <h2>초기 \( \mathrm{pH} \) 의 영향</h2> <p>배양액의 초기 \( \mathrm{pH} \) 에 따른 균체생육과 효소생성의 변화를 조사하기 위해 \( \mathrm{pH} 4.0 \sim 10.0 \) 까지 조절한 후 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) 에 9시간 동안 배양한 결과, Fig. 3B와 같이 균체생육은 \( \mathrm{pH} 6.0 \) 이후로 감소하였고, 효소생성은 \( \mathrm{pH} 8.0 \) 까지 꾸준히 증가하였다. 이후 효소생성의 큰 변화가 거의 없음을 알 수 있다. 이 결과는 효소생성에 있어 배지의 \( \mathrm{pH} \) 를 7.2로 사용한 Lyerly와 Kreger, \(\mathrm{pH} 8.0 \)을 사용한 김 등의 결과와 유사하지만 본 균주가 더 높은 알칼리 범위에서 효소생성이 유지되는 것으로 나타났다.</p> <h2>탄소원의 영향</h2> <p>에너지원 및 탄소기본구조로 사용되는 균체생육과 효소생성에 미치는 탄소원의 영향을 조사하기 위해 탄소원을 각각 \( 0.5 \%(\mathrm{w} / \mathrm{v}) \) 되게 한 후 \( \mathrm{pH} 8.0\), \(30^{\circ} \mathrm{C} \) 에 9시간 동안 배양하여 측정한 결과 Fig. 4A 와 같다. 효소생성에서 starch를 첨가하였을 때 최대 효소생성을 보였고, 다음으로 lactose, fructose의 순으로 효소생성이 나타났지만 탄소원을 첨가하지 않은 배지보다 효소생성이 낮았다. 그리고 sucrose, glucose는 균체생육은 높았지만 효소생성은 나타나지 않았다. 탄소원 중 효소생성이 높은 starch의 농도는 비교적 모든 농도에서 효소생성을 보였으며, 그 중 Fig. 4B와 같이 \( 0.8 \% \) 였을 때 가장 높았다. 본 균주의 실험결과와 달리 Kim과 Oh, 김 등, Lyerly와 Kreger에서는 glucose에서 효소생성이 높게 나타나 본 균주와 상이하였다.</p>