Blois의 방법[3]과 Marklund의 방법[27]을 이용하여 전자공여능(EDA)과 Superoxide dismutase (SOD) 유사활성을 각각 측정하였다. EDA는 DPPH를 시료용액에 넣고 교반한 후 517 nm에서 흡광도를 측정하여, SOD 유사활성은 tris-HCl 완충용액과 pyrogallol을 시료용액에 넣고 25\(^\circ \mathrm{C}\)에서 10분간 반응시킨 후 420nm에서 흡광도를 측정하여 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타낸다.
<h3>전자공여능 측정</h3> <p>전자공여능(electron donating ability, EDA)은 Blois의 방법<p>[3]을 변형하여 측정하였다. 각 시료용액 \( 2 \mathrm{ml} \) 에 \( 0.2 \mathrm{mM} \) 의 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH) \( 1 \mathrm{ml} \) 넣고 교반한 후 30분간 방치한 다음 \( 517 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하였다. 전자공여능은 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.</p> <p> <caption>전자공여능 \( (\%)=\left(1-\frac{\text { 시료첨가군의 흡광도 }}{\text { 무첨가군의 흡광도 }}\right) \times 100 \)</caption></p> <h3>Superoxide dismutase (SOD) 유사활성 측정</h3> <p>SOD 유사활성은 Marklund의 방법[27]에 준하여 측정하였다. 각 시료 용액 \( 0.2 \mathrm{ml} \) 에 tris- \( \mathrm{HCl} \) 완충용액(50 mM tris \( +10 \)mM EDTA, pH 8.5) \( 2.6 \mathrm{ml} \) 와 \( 7.2 \mathrm{mM} \) pyrogallol \( 0.2 \mathrm{ml} \) 를 가하여 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 10 분간 반응시킨 후 \( 1 \mathrm{M} \mathrm{HCl} 0.1 \mathrm{ml} \) 를 가하여 반응을 정지시키고 반응액 중 산화된 pyrogallol의 양을 420\( \mathrm{nm} \) 에서 흡광도를 측정하였다. SOD 유사활성은 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.</p> <p> <caption>저해율 \( (\%)=\left(1-\frac{\text { 시료첨가군의 uric acid 생성량 }}{\text { 무첨가군의 uric acid 생성량 }}\right) \times 100 \)</caption></p> <h3>Xanthine oxidase 저해활성 측정</h3> <p>Tyrosinase 저해활성 측정은 Yagi 등의 방법[30]에 따라 측정하였다. 반응구는 \( 0.175 \mathrm{M} \) sodium phosphate buffer \( (\mathrm{pH} \) 6.8) \( 0.5 \mathrm{ml} \) 에 \( 10 \mathrm{mM} \) L-DOPA를 녹인 기질액 \( 0.2 \mathrm{ml} \) 및 시료용액 \( 0.1 \mathrm{ml} \) 의 혼합액에 mushroom tyrosinase \( (110 \mathrm{U} / \mathrm{ml}) 0.2 \)\( \mathrm{ml} \) 을 첨가하여 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 2 분간 반응시켜 반응액 중에 생성된 DOPA chrome을 \( 475 \mathrm{~nm} \) 에서 측정하였다. Tyrosinase 저해활성은 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.</p> <p> <caption>저해율 \( (\%)=\left(1-\frac{\text { 시료첨가군의 흡광도 }}{\text { 무첨가군의 흡광도 }}\right) \times 100 \)</caption></p> <h3>Tyrosinase 저해활성 측정</h3> <p>Tyrosinase 저해활성 측정은 Yagi 등의 방법[30]에 따라 측정하였다. 반응구는 \( 0.175 \mathrm{M} \) sodium phosphate buffer \( (\mathrm{pH} \)6.8) \( 0.5 \mathrm{ml} \) 에 \( 10 \mathrm{mM} \) L-DOPA를 녹인 기질액 \( 0.2 \mathrm{ml} \) 및 시료용액 \( 0.1 \mathrm{ml} \) 의 혼합액에 mushroom tyrosinase \( (110 \mathrm{U} / \mathrm{ml}) 0.2 \)\( \mathrm{ml} \) 을 첨가하여 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 2 분간 반응시켜 반응액 중에 생성된 DOPA chrome을 \( 475 \mathrm{~nm} \) 에서 측정하였다. Tyrosinase 저해활성은 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.</p> <p> <caption>저해율 \( (\%)=\left(1-\frac{\text { 시료첨가군의 흡광도 }}{\text { 무첨가군의 흡광도 }}\right) \times 100 \)</caption></p>