본 연구는 B. bassiana Bb08가 생산하는 진딧물 살충대사산물의 치대 생산을 위해 박스벤켄 디자인과 표면반응분석을 이용하였으며, 균배양액은 원심분리한 후 상등액을 여과하여 3령의 진딧물들에게 살포안 뒤, 죽은 진딧물의 수를 계수하여 살충율을 계산하였다. 통계분석한 결과, 최적의 배양조건은 온도 \( 26.2 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 배지 초기 \( \mathrm { pH } ~5.9 \), 플라스크 진탕 속도 \( 209.0 \mathrm { ~rpm } \), 균배양 시간 5.9일이었으며, 6일째 기대 살충율은 \( 89.4 \% \)로 나타났다.
<h2>일별 최적점 변화</h2> <p>6일 동안의 진딧물 살충력에 대해 최대로 하는 최적점이 일별로 어떻게 변화하는지 살펴보았다. 이를 위해 6일 동안의 진딧물 살충력을 반응표면분석을 실시하였다. 6일 동안 유도된 최적점은 정준형분석(canonical analysis)을 통해 살충력을 최대로 유도하는 값으로 판정되었다. Table 6과 Fig. 3은 6회의 반응표면분석 결과에 따른 최적점들의 변화를 보여준다. 관찰일이 길어질수록 진딧물의 살충력이 상승하게 되는데, 4일 이후로 최적점에 큰 변화가 없다는 점을 볼 수 있다. 즉, 4일 이후부터 temperature는 \( 26.2-26.3 ^ {\circ } \mathrm { C } , \mathrm { pH } \)는 5.7-5.9, shaking speed는 \(209.0-209.8 \mathrm { ~rpm } \), culture time은 5.3-5.8 days 수준에서 최적점이 결정되며, 일별 최적점의 변화가 크지 않았다.</p> <h2>살충력비교</h2> <p>본 연구에 사용된 B. bassiana Bb08 배양여과액의 살충력을 다른 논문과 비교하고자 하였다. 그러나 대부분의 다른 논문들은 배양여과액을 직접 살충력 측정에 사용하지 않고, 균배양액으로부터 정제된 대사산물을 사용하였고, 대상 곤충이 진딧물이 아닌 다른 곤충들이었거나, 살충력을 측정하기 위한 생물검정 방법이 상이하여, 본 연구의 B. bassiana Bb08 배양여과액의 살충력과 비교할 수 없었다. 한편 배양여과액으로 직접 살충율을 측정한 다른 논문들의 경 우를 보면, B. bassiana SF205균주의 배양여과액을 목화진딧물을 대상으로 살충력을 측정한 결과, 배양여과액의 희석 배수에 따라 \(31.5-94.3 \% \)의 살충율을 보였다. 그러나 이 경우 사용한 살충력 측정방법은 본 논문의 경우와 상이하였고, B. bassiana SF205균주의 주된 살충물질은 chitinase이 었다. 또 다른 경우는 Lecanicillium lecanii의 배양여과액으로 어린 선충(Heterodera glycines Ichinohe의 second stage juvenile)으로 살충력을 측정한 결과 L. lecanii 균주에 따라 \( 2.0-20.7 \% \) 의 살충력을 보였다.</p> <p>본 논문의 통계적 최적화 후 B. bassiana Bb08 배양여과액은 살충력 \( 89.368 \% \)이었으며, 배양여과액내의 살충물질은 chitinase가 아니 다른 물질로 사료되며, 그 물질 규명은 앞으로 흥미로운 연구가 될 것으로 기대된다.</p> <h1>요 약</h1> <p>본 연구에서는 B. bassiana Bb08가 생산하는 진딧물 살충대사산물의 최대 생산을 위하여 박스벤켄(Box-Behnken) 디자인과 표면반응분석을 이용한 통계적 방법을 사용하였다. 균 배양을 위한 배지는 옥수수분말, 미강, 옥수수침지액분말로 구성되었다. 균배양액은 원심분리 후 상등액을 \( 0.45 \mu \mathrm { m } \) 막여과지로 여과한 후 3 령의 목화진딧물에 살포하였고, 6일 동안 매일 죽은 진딧물 수를 계수하여 살충율을 계산하였다. 통계분석한 결과 최적의 배양조건은 온도 \( 26.2 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 배지 초기 \( \mathrm { pH } ~5.9 \), 플라스크 진탕 속도 \( 209.0 \mathrm { ~rpm } \), 그리고 균배양 시간은 5.9일로 나타났다. 여과액 살포 후 4, 5, 그리고 6일째 기대 살충율은 각각 76.8, 84.9, 그리고 \( 89.4 \% \)이었다, 배양조건 4가지 모두 살충성 대사산물 생산에 유의한 영향을 미쳤고, 영향이 큰 요인 순서는 온도, \( \mathrm { pH } \), 배양시간, 진탕속도의 순서로 분석되었다.</p>