2주령 된 40마리의 랫트 실험에서 온도와 습도는 표준 조건하에 유지하며 1주간 안정 식 이후 30마리의 랫트에게 고콜레스테롤 식이를 공급하며 잔여 10마리의 랫트는 대조군으로 실험을 진행했다. 실험군은 고콜레스테롤 식이를 4주간 진행 후 고콜레스테롤혈증이 유도되는 확인하였고 다음 30마리는 실험군을 좀 더 세분화시켜 3군으로 나누어 7주 동안 고콜레스테롤 식이만 공급한 군, 고콜레스테롤 식이에 살아있는 랩을 첨가하여 공급한 군, 가열살균한 랩과 고콜레스테롤 식이를 함께 공급한 군으로 실험하였다.
<h2>동물실혐</h2> <p>2주령 된 40마리의 랫트(Male Sprague-Dawley)을 (주)대한바이오링크(Seoul, Korea)에서 구입하고, 온도와 습도는 표준 조건 하에서 유지하고 (주)삼양사료 (Seoul. Korea)의 사료를 1 주간 식이하였다. 1 주간의 안정 식이 후, 30 마리의 rat에게는 고콜레스테롤 식이 (hypercholesterolemic diet, HCD)를 공급하였고, 나머지 10 마리의 랫트는 대조군으로써 기존의 사료를 공급하되 고콜레스테롤 식이와 같은 형태로 식이하기 위하여 분쇄하여 가루로 공급하였다. 고콜레스테롤식이의 조성은 Table 1 과 같다. 실험군은 고콜레스테롤 식이를 4 주간 식이한 뒤, 고콜레스테롤혈증이 유도되는 지 확인하였다. 다음 30 마리의 랫트 실험군을 좀 더 세분화시켜 3군으로 나누어 7주 동안 고콜레스테롤 식이만 공급한 \( \mathrm{HCD} \) 군, 고콜레스테롤 식이에 살아있는 \( \mathrm{LAB} \) 을 첨가하여 공급한 LLAB군, 가열살균한 LAB와 고콜레스테롤 식이를 함께 공급한 HKLAB군으로 실험하였다.</p> <p>랫트의 체중은 실험 기간 중 1 주간 간격으로 측정하였고, 식이량은 최초에 주어진 식이의 양에서 식이 후 남은 잔여물의 양을 빼서 계산하였다. 식이효율(food efficiency ratio, FER)은 식이 섭취량과 체중 증가량의 상관관계를 나타내는 지표로, 식이 섭취량에 대한 체중 증가량 (체중증가량 \( (\mathrm{g}) \) /식이섭취량 \( (\mathrm{g})) \) 으로 계산하였다. 랫트는 희생시키기 전 24시간 동안 절식시켰다. 전혈은 꼬리의 정맥으로부터 채혈하고, 혈액의 응고를 막기 위해 \( 1 \%\) EDTA와 식염수가 혼합된 용액에 보관하였다. 혈장은 \( 2,000 \times g \) 에서 15 분 동안 저속으로 원심분리하여 전혈로부터 분리하였으며, 혈중 콜레스테롤의 농도는 in vitro 상의 실험과 같은 방법으로 화인하였다. 동맥 경화지수(atherogenic index, \( \mathrm{AI} \) )와 심장위험인자(cardiac risk factor, \( \mathrm{CRF}) \) 는 아래의 식으로 계산하였다.</p> <p>\( \mathrm{AI}=( \) 총 콜레스테롤 \( -\mathrm{HDL} \) 콜레스테롤 \( ) / \mathrm{HDL} \) 콜레스테롤</p> <p>\( \mathrm{CRF}= \) 총 콜레스테롤/\(\mathrm{HDL} \) 콜레스테롤</p> <h2>대변의 담즙산 농도</h2> <p>콜레스테롤 식이에 의해 변화된 변 중 담즙산의 양을 확인하였다. 변 중 담즙산의 양은 gas-liquid chromatography (GLC)로 확인하였다.</p> <h2>통계처리</h2> <p>모든 실험결과는 SPSS(Statistical Package for Social Science 12.0) 프로그램을 이용하여 평균값(mean)과 표준편차(SD)를 계산하였다. 각 군 간에 차이를 살펴보기 위하여 유의수준은 \( \mathrm{p}<0.05 \) 에서 One-way ANOVA를 사용하여 분산 분석하였다. 유의한 차이가 있는 경우 Duncan's multiple range test를 실시하여 각 군별 차이를 검증하였다.</p>