다양한 항암제의 개발이 이루어져 왔으나 강한 독성에 따른 다양한 부작용이 많이 보고되어 최근에는 항암제에 의한 부작용을 최소화하고 항암효과를 증진시키는 항암보조제 의 효과가 인정되어 임상에 적용되고 있어 AYS 의 암세포에 대한 세포독성 유무와 AYS를 항암보조제로 활용할 가능성을 타진코자 기준 시관 항암제와 AYS를 혼용한 혼합약제가 암 세포에 대해 항암효과를 증진시킬 수 있는지를 조사했고 그 결과 AYS 와 기존 항암제의 혼합물들이 기존 항암제 보다 더욱 강하게 대장암 HT29 세포의 생육을 억제시킨 것으로 조사되었다.
<p>오늘날 다양한 항암제의 개발이 이루어져 왔으나, 대부분의 항암제는 독성이 강하여, 이에 따른 부작용으로 피로, 통증, 메스꺼움, 구토, 골수기능장애, 혈구감소, 머리털 감소와 신경독소 등 환자에 따라 다양하게 보고되고 있다. 또한 장기적으로 사용되는 단일 항암제는 다재내성세포를 출현 \) 시킬 가능성 때문에 작용이 다른 2 종 이상의 약제를 사용한 복합처방을 행하는 경우도 있다. 그러나 복합처방 녁시 세포독성이 강한 항암제로 구성된 경우 그에 따른 부작용을 감수할 수밖에 없는 실정이다. 다행히 최근에는 항암제에 의한 부작용을 최소화하고 항암효과를 증진시키는 물질을 혼합하는 항암보조제 의 효과가 인정되어 임상에 적용되고 있다.</p><p>항진균제들 중에는 항암활성을 가지는 물질들이 다수 알려져 있으며, Rhanella aquatilis AY2000이 생산하는 당단백질성 물질인 anti-yeast substance (AYS)도 Candida albicans에 항진균 작용을 가진다. 따라서 AYS 의 암세포에 대한 세포독성 유무와 AYS를 항암보조제로 활 용할 가능성을 타진코자 기준 시관 항암제와 AYS를 혼용하 여 이 혼합약제가 암 세포에 대해 항암효과를 증진시킬 수 있는지를 조사하였다. 먼저 AYS의 암세포에 대한 세포독성 은 인체의 Jurkat T세포, 마우스의 sarcoma 180 세포 및 인체 대장암 HT20 세포를 대상으로 하였다. 이들 암세포는 \( 10 \% \) \( \mathrm{FBS} \) 가 함유된 RPMI1640배지를 96-well microplate에 \( 1 \times 10^{5} \) cells \( { }^{\prime} \mathrm{ml} \) 가 되도록 넣고, \( \mathrm{CO}_{2} \) incubator \( \left(37^{\circ} \mathrm{C}\right) \) 에서 24시간 동안 배양시켰다. 배양된 각각의 암세포에선 상층액 을 제거시힌 후 일정한 농도로 희석된 각 항암물질 (AYS나 시판 항암약제)을 첨가하여 \( \mathrm{CO}_{2} \) incubator \( \left(37^{\circ} \mathrm{C}\right) \) 에서 일정한 기간(1~3일) 동안 배양시킨 후 생육된 세포의 수는 MTT 법으로 측정하였다. 또한 항암활성은 항암제가 함유되지 않은 대조군의 암세포 생육과 비교하였으며 암세포의 생육 억제율(\%)은 Cell growth inhibition \( (\%)=100- \) (Sample \( \mathrm{A}_{550} \) / Control \( \left.\mathrm{A}_{550}\right) \times 100 \) 로 나타내있다. 그 결괴 인체 Jurkat T 세포와 마우스의 sarcoma 세포는 각각 \( \operatorname{AYS}(500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}) \) 처리에서 \( 20 \% \) 이하의 세포생육억제로 거의 항암작용이 나타나지 않았으나, 인체 대장암 HT29세포는 AYS \( (250 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}) \) 처리에서 24 시간 후에는 \( 22.2 \%, 48 \) 시간 후에는 약 \( 38 \% \) 의 세 포생육이 억제되었다. 따라서 AYS가 인체 대장암 세포에 생육억제 작용을 나타내었으므로 AYS의 농도를 증가시키고, 대장암 세포의 배양 시간을 더 늘러서 AYS농도에 의존적으로 대장암 세포의 생육을 억제시키는지를 검토하였다. 그 결과 \( 62.5-500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 AYS로 처리된 대장암 세포들은 배양시간 \( (48 \) 과 \( 72 \mathrm{hr}) \)에 따라 농도 의존적으로 그 생육을 억제시켰다. 또한 AYS와 기존 항암제의 혼합처리에 따른 대장암 세포에 대한 병용효과를 측정하기 위해 Canfield 등이 기술한 방법[4]으로 행하였다. 즉, AYS와 기존 항암제 가 함유된 96-well microplate에 인체 대장암 \( \mathrm{HT} 29 \) 세포 \( \left(1 \times 10^{5} \mathrm{cells} / \mathrm{ml}\right) \) 를 접종한 후 \( \mathrm{CO}_{2} \) incubator \( \left(5 \% \mathrm{CO}_{2}\right. \), \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) )에서 3 일간 배양시킨 후 MTT 법으로 세포 수를 측정 하고, AYS와 기존 항암제에 대한 fractional inhibitory concentrations (FIC)과 SFIC(sum FIC; fractional inhibitory concentrations)를 산출하여 이들 2 종의 약제에 대한 상호작 용을 검토하였다. 이때 사용된 약제의 농도는 AYS는 \( 500 \mu \mathrm{g} / \) \( \mathrm{ml} \), etoposide는 \( 50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \), 그 외 paclitaxel, 5-fluorouracil 과 doxorubicin은 각각 \( 20 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 이 사용되었다. 그 결과 AYS 와 기존 항암제의 혼합물들이 각각의 기존 항암제 보다 더욱 강하게 대장암 HT29 세포의 생육을 억제시켰다.</p>