혈청 중의 지질농도 분석은 채취한 혈액을 실온에서 방치 후 원심분리하여 혈청을 분리하고 Dry chemistry analyzer 3500i을 이용하여 중성지방, 총콜레스테롤, Hdl-콜레스테롤의 농도를 측정하였으며, 혈류측정은 Micro Channel Array Flow Analyzer KH-6을 사용하여 응고 방지 처리된 혈액 100\(\mu\mathrm{l}\)l을 주입하여 측정였다. 혈액을 원심분리 하여 혈장을 제거 한후 혈소판 현탁과 세척 및 혈소판 원심분리 과정을 거친 washed platelet을 응집시켜 혈소판 응집력을 측정하였다.
<h2>혈청 중의 지질농도 분석</h2> <p>채취한 혈액은 실온에서 30 분 방치 후 \( 3,000 \mathrm { rpm } \) 에서 10 분간 원심분리 \( \left (4 ^ {\circ } \mathrm { C } \right ) \) 하여 혈청을 분리하였다. 혈청 중 중성지방,총콜레스테롤, Hdl-콜레스테롤 농도는 자동 측정용 slide(FUJI FILM, Japan)를 이용하여 Dry chemistry analyzer 3500i (Fuii, Japan)로 측정하였다.</p> <h2>혈류 측정</h2> <p>혈류 측정은 전혈을 사용 하였고, 채취한 혈액을 헤파린 처리된 튜브를 사용하여 응고를 방지한 후, Micro Channel Array Flow Analyzer KH-6 (MC Lab, Japan)을 이용하여 채취한 혈액 \( 100 \mu \mathrm { ll } \) 를 주입하여 측정하였다.</p> <h2>혈소판 응집력 분석</h2> <p>Ether 마취 후 개복하여 대동맥으로부터 채혈하여 \( 3.2 \% \) so-dium citrate 용액과 \( 1: 9 \) 의 비율로 혼합한 뒤 \( 1,100 \mathrm { rpm } \) 에서 10 분간 원심분리하여 상층의 PRP (platelet rich plasma)를 취하고, \( 3,000 \mathrm { rpm } \) 에서 10 분간 더 원심분리하여 상층에 혈장을 제거한 후 EDTA를 포함하는 washing buffer \( 138 \mathrm { mM } \mathrm { NaCl } \), \( 2.7 \mathrm { mM } \mathrm { KCl } , 12 \mathrm { mM } \mathrm { NaHCO } _ { 3 } , 0.36 \mathrm { mM } \mathrm { NaH } _ { 2 } \mathrm { PO } _ { 4 } , 5.5 \mathrm { mM } \) glucose, \( 1 \mathrm { mM } \) EDTA, \( \mathrm { pH } \) 6.5) \( 5 \mathrm { ml } \) 를 가하고 섞어주어 혈소판을 재 현탁시켰다. 이 혈소판을 다시 \( 3,000 \mathrm { rpm } \) 에서 10 분간 원심분리 한 후, 세척액을 버리고 혈스판을 위의 방법으로 한 번 더 세척하였다. 세척 후 suspending buffer (138 mM NaCl, \( 2.7 \mathrm { mM } \mathrm { KCl } , 12 \mathrm { mM } \mathrm { NaHCO } _ { 3 } , 0.36 \mathrm { mM } \mathrm { NaH } _ { 2 } \mathrm { PO } _ { 4 } , 5.5 \mathrm { mM } \) glucose, \( 0.49 \mathrm { mM } \mathrm { MgCl } _ { 2 } , 0.25 \% \) Gelatin, \( \mathrm { pH } \) 7.4)로 재 현탁시켜 3,000 rpm에서 10 분간 원심분리한 후 다시 suspending buffer로 현탁시켜 washed platelet을 조제하였다. Washed platelet는 suspending buffer로 희석하여 혈소판 수가 \( 5 \times 10 ^ { 8 } / \mathrm { ml } \) 이 되도록 하였고, 응집유도제로 collagen을 \( 2.5 \mu 1 \)가하여 5분간 반응시켜, Whole blood lumi-aggregometer (Chrono-log, U.S.A)를 사용하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 혈소판 응집을 측정하였다.</p>