국내에서 승인된 유전자 변형 생물체는 농업용 작물이 대부분으로 환경정화용 유전자 변형 생물체는 식물수목류를 대상으로 개발단계이다. 환경위해성 평가가 이루어지고 있지 않으므로 환경정화용 유전자 변형 생물체의 환경위해성 평가기술 개발 연구가 필요하며, 그중 Organomercurial lyase 유전자를 도입하여 형질전환 식물체를 선발하고 그 특성을 조사하기 위한 연구를 수행하고 있다.
<p>현재까지 국내에서 상업화들 위하여 승인된 유전자변형 생물체는 국내 수입 콩, 옥수수, 면화, 유채, 감자, 알팔파 등 농업용 작물이 대부분이다. 국내에서도 다양한 유전자변형 생물체 연구가 수행되고 있으나 아직 실용화 단계에는 이르지 못하고 있으며 (Woo et al. 2006), 격리포장 단계에서 환경위해성율 평가 중인 유전자변형생물체도 벼, 고추, 배추, 들깨 등 농업용이다 (김동헌 2008). 환경정화용 유전자변형 생물체는 식물수목류를 대상으로 개발단계이고, 아직 환경 위해성 평가가 이루지고 있지는 않지만 환경정화용이 환경 정화 효과 검정을 위하여 환경에 방출될 가능성에 대비하여 환경정화용 유전자변형생물체의 환경위해성 평가기술 개발 연구가 필요할 것으로 여겨진다.</p> <p>본 연구에서는 환경정회용 유전자변형생물체의 환경위해성 평가연구를 위한 형질전환 식물체를 확보하기 위하여 생태 환경변화에 따른 유전자 변화 연구 모델식물로 이용되는 까마중에 수은 무독화 관련 유전자인 Organomercurial lyase 유전자 \( ( \operatorname { merB } ) \) 를 도입하여 형진전환체를 선발하고 그 특성을 조사하기 위한 것이다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>식물체 재료</h2> <p>한국생명공학연구원 식물유전체연구센터로부터 분양받은 까마중 종자를 중성세제에 5-10분 세척하고, Tween \( 20 \mathrm { TM } \)이 2-3방율 첨가된 2% sodium hypochlorite에 7 분간 침지한</p> <p>후 멸균수로 세척하였다. 멸균 처리한 종자를 MS 기본 고체배지 (Murashige and Skoog 1962)에 치상하여 발아 \( (25 \pm 1 \mathrm { C } , 16 \mathrm { hr } \) day/8hr dark) 시켰다. 발아 후 l주일된 잎 절편을 Agrobacterium과 공동 배양 하였다.</p> <h2>균주</h2> <p>본 실험에 사용된 A. tumefaciens 균주는 환경정화용 관련 수은무독화 유전자인 \( \operatorname { merB } \) 유전자를 함유하고 있으며 (Choi 2007), 국립산립과학원 형질전환연구실로부터 공여 받았다. Agrobacterium tumefaciens 균주는 kanamycin \( 50 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \), rifampicin \( 50 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 가 함유된 \( 50 \mathrm { ~mL } \) LB배지에서 균 농도가 \( \mathrm { OD } _ { 600 } = \) \( 0.7 \) 인 대수기까지 배양하여 한빈 원심분리한 후 \( 20 \mathrm { ~mL } \) 의 \( 0.85 \% \mathrm { NaCl } \) 로 세척하고, 잎 절편과 공동 배양하였다.</p>