A549 인체 폐암세포의 성장에 미치는 길경 수용액 추출물의 영향을 알아보기 위해 48시간동안 다양한 농도의 길경 추출물을 처리한 후 MTT assay를 사용해 암세포의 성장억제 효과를 알아봤다. 암세포의 성장 억제 효과는 길경 추출물의 농도 증가에 다른 암세포의 심한 형태적 변형과도 관련이 있었는데, 저농도 처리군에서는 전체적으로 세포질이 응축되면서 짧고 많은 가지를 친 듯한 모양으로 변형 되었으며, 이런 dendrite-like한 형태가 더 신장되면서 고농도 처리군에서는 암세포들의 부착력이 사라졌음을 알 수 있었다. 이상의 길경 추출물에 따른 암세포의 성장 억제 효과가 암세포의 apoptosis 유발과 연관성이 있다고 기대돼 DNA flow cytometry를 사용하여 apoptosis 유발의 정도를 정량적으로 분석했다. 결과는 길경 수용액 추출물의 처리에 따른 암세포 성장 억제는 apoptosis 생성과 밀접한 연관성이 있다고 여겨진다.
<h1>결과 및 고찰</h1><h2>암세포의 성장에 미치는 길경 추출물의 영향</h2><p>A549 인체 폐암세포의 성장에 미치는 길경 수용액 추출물의 영향을 알아보기 위하여 48시간동안 다양한 농도의 길경 추출물을 처리한 후 MTT assay를 이용하여 암세포의 성장억제 효과를 살펴보았다. 길경 추출물이 함유된 배지에서 자란 암세포는 Fig. 1에서 볼 수 있듯이 처리 농도 의존적으로 성장억제의 효과가 뚜렷하게 관찰되었다. 특히 \( 1.0 \)\( \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 이상의 처리 농도군에서는 대조군에 비하여 \(60\%\) 이상의 성장억제 현상을 관찰할 수 있었으며, \( 2.0 \) \( \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 처리군에서는 \( 70 \% \) 정도의 성장억제 효과가 있었다. 이러한 암세포의 성장 억제 효과는 길경 추출물의 농도 증가에 다른 암세포의 심한 형태적 변형과도 연관성이 있었는데, 저농도 처리군에서는 전체적으로 세포질이 응축되면서 짧고 많은 가지를 친 듯한 모양으로 바꿔었으며, 이러한 dendrite-like한 형태가 더욱 신장되면서 고농도 처리군에서는 암세포들의 부착력이 상실되었음을 알 수 있었다(data not shown).</p><h2>길경에 의한 apoptosis 유발</h2><p>이상의 길경 추출물에 의한 암세포의 성장 억제 효과가 암세포의 apoptosis 유발과 연관성이 있을 것으로 기대되어 DNA flow cytometry를 이용하여 apoptosis 유발의 정도를 정량적으로 분석하였다. 이를 위하여 실험 방법에 서술한 것처럼 정상 및 길경 추출물이 함유된 배지에서 자란 세포들을 고정한 후, 핵산에 특이적으로 결합하는 형광물질인 PI로 염색하여 DNA flow cytometry로 분석한 결과는 Fig. 2와 같다. 즉 정상 배지에서 자란 암세포의 자연적 apoptosis 유발 현상은 \( 2.5 \% \) 전후였으나, 길경 추출물의 처리 48시간 후 sub-G1기에 속하는 세포의 빈도가 급격히 증가되어 \( 1.2 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 및 \( 1.6 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 처리군에서는 각각 약 \( 16.2 \% \) 및 \( 23.5 \% \) 의 암세포가 apoptosis의 과정을 통하여 사멸되었음을 알 수 있었다. 따라서 길경의 처리에 의한 apoptosis 유발의 직접적인 증거를 제시하기 위하여 정상 및 길경 추출물이 함유된 배지에서 배양된 암세포를 대상으로 핵의 형태적인 변화를 조사하였다. Fig. 3은 DAPI 염색에 의한 핵의 형태에 미치는 길경 추출물의 영향을 나타낸 결과로서, 길경 추출물이 처리된 배지에서 자란 암세포의 경우 정상배지에서 자란 세포들에서 관찰할 수 없는 apoptosis 유발 특이적인 핵 내 DNA 단편화에 의한 apoptotic body의 출현이 길경 추출물 처리 농도 의존적으로 증가됨을 알 수 있었다. 이상의 결과는 길경 수용액 추출물의 처리에 의한 암세포 성장 억제는 apoptosis 유발과 밀접한 연관성이 있음을 보여 주는 것으로 사료된다.</p>