세포 생존율을 MTT방법으로 분석한 결과 파프리카 추출물을 처리한 경우 유의미한 차이가 없었으나, 비타민 C의 경우 세포 생존율을 약 60% 정도 증가시키는 것을 관찰하였다. 그러나 라이코펜과 베타-카로틴은 세포 생존율을 감소시키는 것으로 관찰되었다. 항산화 효과는 비타민 C가 세포 생존율 및 증식을 증가시키는 것을 말한다. 자외선을 조사했을 경우 파프리카 추출물과 비타민 C의 보호효과에 의하여 세포 고사율이 줄어들었다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <p>세포 생존율은 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) 방법으로 분석하였다. 파프리카 추출물만 처리한 경우 세포 생존율은 처리하지 않은 대조군과 통계적으로 유의미한 차이를 나타내지 않았으나 비타민 C 의 경우 \( 10 \sim 20 \mathrm{mM} \) 에서 약 \( 60 \% \) 정도 증가시키는 것을 관찰하였다(Fig. 1A and B, open circles). 그러나 라이코펜과 베타-카로틴의 경우 상대적인 고농도에서 약 \( 20 \sim 25 \% \) 정도 감소시키는것으로 관찰되었다(Fig. 1C and D, open circles). 배양세포에 UVB \( 200 \mathrm{~J} / \mathrm{m}^{2} \) 을 조사한 후 24 시간 동안 다양한 농도의 파프리카 추출물 또는 성분을 처리하여 세포 유전독성에 대한 추출물의 효과를 분석하였다. UVB \( \left(200 \mathrm{~J} / \mathrm{m}^{2}\right) \) 에 의해 정상 대조군보다 약 \( 40 \% \) 감소된 세포 생존율은 파프리카 추출이나 비타민 C의 후처리에 의해 각각 \( 10 \% \) 와 \( 35 \% \) 의 회복을 보였다(Fig. 1A and B, closed circles). 그러나 UVB 조사 후 라이코펜이나 베타-카로틴을 후 처리하면 이러한 회복 효과를 보이지 않고, 오히려 각각 \( 20,30 \% \) 정도의 세포 생존율의 추가적인 감소를 보였다(Fig. 1C and D, closed circles). 비타민 C가 세포 생존율 및 증식을 증가시키는 것은 항산화 효과로 해석되어왔으며, 라이코펜의 세포 생존율 감소 효과 중 하나는 connexin 43 수준의 증가로 해석된 바 있으나, 본 연구에서 규명된 베타-카로틴의 세포 생존율 감소 현상이 HaCaT 세포에서만 특이하게 나타난 것인지는 추후의 연구에서 규명하고자 한다.</p> <p>자외선에 의한 세포고사에서 파프리카 추출물, 비타민 C, 라이코펜과 베타-카로틴의 효과를 알아보기 위해 세포고사 때 나타나는 핵 분절화 현상을 DAPI 염색을 통해 분석하고 그 결과를 세포고사율로 제시하였다. 파프리카 추출물이 나 비타민 C만 처리했을 경우 처리하지 않은 대조군과 큰 차이를 나타내지 않았다(Fig. 2A and B, open circles). 그러나 UVB를 조사한 후 파프리카 추출물이나 비타민C를 처리한 경우 정상배지 처리군에 비해 농도 의존적으로 세포고사율이 각각 \( 24,42 \% \) 정도까지 감소하는 것을 확인할 수 있었다(Fig. 2A and B, closed circles). 라이코펜과 베타-카로틴만 처리했을 경우 농도 의존적으로 처리하지 않은 대조군에 비해 세포고사율이 점차 증가하였다(Fig. 2C and D, open circles). UVB를 조사한 후 라이코펜과 베타-카로틴을 처리한 경우에도 상대적인 고농도에서 세포고사율이 각각 \( 30,40 \% \) 정도 증가하는 것을 확인할 수 있었다(Fig. 2C and D, closed circles). 이와 같은 결과는 자외선을 조사한 후 파프리카 추출물과 비타민 C를 처리한 경우 파프리카 추출물과 비타민 C의 보호효과에 의하여 세포 고사를 일으키는 세포가 현저히 줄어드는 현상을 나타냈다. 이 결과는 세포 생존율(Fig. 1A and B)과 거의 일치하는 것으로 보아 파프리카 추출물과 비타민 C 가 자외선에 의한 세포고사를 보호하는 효과를 지닌 것으로 생각된다. 그러나 라이코펜과 베타-카로틴을 처리하면 라이코펜과 베타-카로틴이 가진 세포독성에 의해 세포고사가 더욱 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 이 결과들은 또한 apoptosis의 다른 분석법인 internucleosomal DNA ladder 양상에서도 정상적으로 확인되었다(data not shown).</p>