전기미각계를 이용하여 혀 끝과 입 안 여섯 부위에서 미각 역치를 측정하였으며, TAS1R3과 GNAT3 유전자의 특정 부위를 Primer3 프로그램으로 제작한 프라이머를 이용해 증폭하였다. 이 연구는 19세 이상의 정상 성인 100명과 미각 장애 환자 50명을 대상으로 대구가톨릭대학교병원에서 수행되었다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>대상</h2> <p>본 연구는 자원자 모집 광고를 통해 모집된 19 세 이상의 정상 성인 남녀 100 명과 미각 장애로 대구가톨릭대학교병원 이비인후과 후각-미각클리닉으로 내원한 50명의 환자를 대상으로 하였다. 대상자에게 시행된 모든 검사들은 대구가톨릭대학교병원 임상시험 심사위원회(Institutional Reviewer Board, IRB)의 승인 하에 모든 대상에서 미각 검사 및 미각 유전자 분석 연구에 대한 동의서를 받았으며, 미각과 연관된 개인의 습성과 복용중인 약물, 코, 귀, 구강, 위장관, 침분비 등 미각에 영향을 미치는 질환에 대한 설문지를 작성하게 하였다. 검사 1 시간 전에는 흡연을 금하였으며, 물을 제외한 음료 및 식사를 못하도록 하였다. 모든 대상에서 전기미각검사와 유전자 분석을 시행하였다.</p> <h2>전기미각검사</h2> <p>전기미각계(electrogustometer, TR-06, Rion, Japan)를 사용 하여 혀끝에서 \( 2 \mathrm { ~cm } \) 떨어진 변연부위, 입새유두(foliate papil-la) 근처, 연구개 부위의 각각 좌우 총 6 군데에서 미각 역치를 측정하였다. 피험자를 편안한 자세로 의자에 앉힌 후 불관전극을 피검자의 목부분에 살며시 끼웠다. 전기미각계의 응답용 버튼 스위치를 잡게 하고 단극도자를 측정부위에 위치시킨 후 기기의 다이얼을 한 단계씩 올리며 피검자로 하여금 처음 미각의 변화를 느끼는 순간에 응답용 버튼 스위치를 누르게 하였다. 이와 같은 과정을 5 분 간격으로 3 회 실시하여 평균치 를 구하여 그 부위에 대한 전기미각역치로 정하였다.</p> <h2>유전자 다형성 분석</h2> <p>실험 대상들의 말초혈액에서 \( 10 \mathrm { ml } \) 의 정맥혈을 채혈하여 FlexiGene DNA kit (Qiagen, Inc., USA)를 이용하여 genomic \( \mathrm { DNA } \) 를 추출하였다. 각 \( \mathrm { DNA } \) 의 양은 분광계(spectrometer)로 측정하여 \( 25 \mathrm { ng } / \mu \mathrm { l } \) 로 균일하게 희석시켰다. TAS1R3 유전자 프로모터 영역의 \( \operatorname { rs307355 } ( \mathrm { C }< \mathrm { T } ) \) 및 \( \mathrm { rs35744813 } ( \mathrm { C }< \mathrm { T } ) \) 와 \( G N A T 3 \) 유전자의 \( \mathrm { rs } 7792845( \mathrm { ~T }< \mathrm { C } ) \) 와 \( \mathrm { rs } 1524600( \mathrm { ~T }< \mathrm { C } ) \) 부위를 특이적으로 증폭할 수 있는 프라이머를 Primer3 프로그램을 이용하여 제작하였으며, 각 프라이머 의 염기서열은 아래와 같다.</p>