온도에 대한 경향성을 확인하기 위해 전환율을 비교한 결과 CS- \( \mathrm { H } ^ {\mathrm { R } } \) 은 내열성만을, \( \mathrm { CS } - \mathrm { H } ^ {\mathrm { R } } \mathrm { C } ^ {\mathrm { E } } \) 는 전환율과 내열성을 유지하고 있었고, \( \mathrm { CS } - \mathrm { H } ^ {\mathrm { R } } \) 와 \( \mathrm { CS } - \) \( \mathrm { H } ^ {\mathrm { R } } \mathrm { C } ^ {\mathrm { E } } \) 의 전환율을 비교한 결과, 두 균주 모두 농도에 따라 감소되었다.
<h2>선별된 효소의 활성</h2> <p>열내성이 향상된 \( \mathrm { CS } - \mathrm { H } ^ {\mathrm { R } } \) 와 열내성과 전환율이 향상된 \( \mathrm { CS } - \) \( \mathrm { H } ^ {\mathrm { R } } \mathrm { C } ^ {\mathrm { E } } \) 늘 이용하여 농도에 따른 전환율을 비교하였을 때 두 균주 모두 농도에 따라 감소되는 양상은 유사하게 나타났으 며, \( \mathrm { CS } - \mathrm { H } ^ {\mathrm { R } } \mathrm { C } ^ {\mathrm { B } } \) 의 경우 농도 전반에 걸쳐 전환율이 모균주에 비해 향상되었음을 확인하였다(Fig. 3A).</p> <p>온도에 대한 경향성을 확인하기 위해 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 부터 \( 85 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 까지 \( 20 \mu \mathrm { g } \) 조효소액을 이용하여 유당 \( 20 \mathrm { ~g } /l \) 를 1시간 동안 온도 별로 반응시킨 후 전환율을 비교한 결과 CS- \( \mathrm { H } ^ {\mathrm { R } } \) 은 내열성만을 보여준 반면, \( \mathrm { CS } - \mathrm { H } ^ {\mathrm { R } } \mathrm { C } ^ {\mathrm { E } } \) 는 전환율과 내열성을 잘 유지하고 있는 것을 확인할 수 있었다(Fig. 3B). 두가지 돌연변이 보였으나 다소 열안정성이 \( \mathrm { CS } ^ { - \mathrm { H } ^ {\mathrm { R } } \mathrm { C } ^ {\mathbb { E } } \text { 보다 낫아(data not } } \) shown) 최종선별균주로 \( \mathrm { CS } - \mathrm { H } ^ {\mathrm { R } } \mathrm { C } ^ {\mathrm { E } } \) 를 선정하였으며, \( 70 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 늘 최적온도조건으로 선정하여 이후 실혐에 적용하였다. CS- \( \mathrm { H } ^ {\mathrm { R } } \mathrm { C } ^ {\mathrm { E } } \) 담체를 제조하기 전에 조효소액의 단백질 농도를 결정하기 위하여 효소량을 점차로 증가시켜 반응이 포화될 수 있도록 시험하였다. \( 70 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \( 20 \mathrm { ~g } /l \) 의 유당과 1시간 반응시켰을 경우 조효소액 \( 250 \mu \mathrm { g } \)를 사용하였을 때 최대 전환율을 나타내었다. 그 이상의 농도에서는 전환율이 크게 변하지 않음을 알 수 있었으며, 보효소는 \( 56 \pm 5.1 \%, \operatorname { CS } - \mathrm { H } ^ {\mathrm { R } } \mathrm { C } ^ {\mathbb { E } } \) 는 \( 60 \pm 3.7 \% \) 의 전환율을 보였다(Fig. S2)</p>