당귀 열수추출물을 농도별 \( (0,0.5,1,2,4 \mu \mathrm { g } / \mu \mathrm { l } ) \)로 2 시간 처리하고 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 를 2 시간 처리 후 cell cycle phase에 함유된 DNA 함량과 형태학적 변화를 관찰하였다. 결과는 \( 0.5-1 \mu \mathrm { g } / \mu \mathrm { l } \) 처리가 apoptotic cell의 분포가 가장 적고 효과적인 것으로 나타났으며, 고농도 \( (2 \mu \mathrm { g } / \mu \mathrm { l } \) 이상)로 처리한 경우 apoptotic body가 많이 생겼다. 또한 Folin-Denis법으로 추출물에 함유된 페놀성 화합물을 측정해 표준물질(gallic acid)로 환산하였고 당귀 추출물에 함유량이 높았고 DPPH 라디칼 소거능이 우수하였다.
<p>Fig. 3B와 Table 3에서는 시료를 농도 별 \( (0,0.5,1,2,4 \mu \mathrm { g } / \mu \) 1)로 2 시간 처리하고 난 후 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 를 2 시간 처리 후의 cell cycle 의 각 phase에 함유된 DNA 함량을 나타내고 있다. Apopotic cell (sub-G1 cell)은 control 처리에서는 \( 14.5 \% \) 였고, \( 0.5,1 \), 2. \( 4 \mu \mathrm { g } / \mu \mathrm { l } \) 처리에서 각각 \( 8.5,6.4,20.6,25 \% \) 로 \( 1 \mu \mathrm { g } / \mu \mathrm { l } \) 처리 농도에서 가장 적은 apoptotic cell이 존재하였다. \( 2 \mu \mathrm { g } / \mathrm {\mu l } \) 이상의 높은 농도에서는 apoptotic cell의 분포가 많았다.</p> <p>세포의 형태학적 변화를 Hoechst33258로 염색하여 형광현미경으로 관찰하였다. Fig. 4A에서는 당귀 열수추출물을 \( 1 \mathrm {\mu g } / \mathrm {\mu l } \) 농도로 2 시간 처리하고 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 처리시간에 따른 형태학적 변화를 조사하였다. 시료가 처리되지 않은 배지에서 생육한 SK-N-SH 신경모세포가 시료가 처리된 배지에서 생육한 세포에 비하여 응축되거나 쪼개진 apoptotic body를 관찰 할 수 있었다.</p> <p>Fig. 4B 에서는 당귀 열수추출물 농도별 \( (0,0.5,1,2,4 \mu \mathrm { g } / \mu \mathrm { l } ) \)로 2 시간 처리하고 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 를 2 시간 처리에 따른 형태학적 변화를 조사하였다. 당귀 열수추출물이 처리되지 않은 SK-N-SH 세포가 열수추출물이 처리된 세포에 비하여 응축된 apoptotic body가 더 많았다. 그리고 시료 처리 농도에 따라서도 고농도 \( (2 \mu \mathrm { g } / \mu \mathrm { l } \) 이상)로 처리한 경우 apoptotic body가 많이 생겨, \( 0.5-1 \mu \mathrm { g } / \mu \mathrm { l } \) 처리가 효과적임을 나타내고 있다.</p> <h2>열수추출물의 항산화 효과</h2> <p>당귀 열수추출물과 건지황 열수추출물의 항산화능을 DPPH법으로 측정하였다. 당귀 열수추출물, 당귀 증숙 추출물, 건지황 열수추출물, 건지황 증숙추출물을 각각 \( 0.5 \) \( \mathrm { mg } / \mathrm { ml } , 0.25 \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \) 두 농도로 처리하였다. DPPH 라디칼 소거능은 당귀 추출물이 건지황 추출물보다 좋았으며 당귀 열수추출물의 DPPH 라디칼 소거율이 약 \( 40 \% \) 로 가장 우수하였다.</p> <p>또한, 이들 추출물에 함유된 총 페놀성 화합물을 Folin-Denis법으로 측정하여 표준물질(gallic acid)로 환산하였다. 추출물 \( 5 \mathrm { mg } \) 에 함유된 페놀 함량은 당귀 열수추출물이 약 196 \( \mu \mathrm { g } \) 으로 가장 높았고, 증숙추출물에 각각 \( 126 \mu \mathrm { g } , 170 \mathrm { ug } \) 함유되어 있었다. 건지황 추출물에는 당귀 추출물보다 낮은 함량이 함유되어 있었다.</p>