본 장은 은이온흡착 cartridge의 파속류에 함유된 황화합물의 제거 효율 및 잔류 농약의 회수율 실험의 재료 및 방법을 소개한다. 이를 위해 각 시료를 식품공전의 잔류농약 시료조제방법으로 전처리하고, 제조된 농약들을 파속류에 살포 후 전처리 및 은이온흡착 cartridge에서 정제한 후 GC/ECD로 분석하여 각 농약의 회수율을 산출하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>시약 및 농약</h2> <p>표준물질은 Dr. Ehrenstorfer Reference Material사 제품을 구입하여 농도별로 조제하여 사용하였고, 실험에 사용된 시약 중 acetonitrile, acetone, hexane은 Merck사 PRA급을 사용하였으며 \( \mathrm{NaCl} \) 은 삼천사 제품을 사용하였다. \( \mathrm{AgNO}_{3} \) 는 Junsei chemical사 제품 \( 10 \mathrm{~g} \) 을 \( 50 \mathrm{ml} \) 증류수에 녹여 사용하였으며, Florosil cartridge ( \( 1 \mathrm{~g} \) packing, \( 6 \mathrm{ml} \) tube)는 Varian사의 제품을 사용하였다. 본 연구에 적용한 농약은 농약 안전사용 기준이 설정되고 MRL이 고시되어 있는 농약들 중 검출빈도가 높고 농산물중의 잔류허용기준이 설정된 농약 성분들을 선정하여 각각 G1, G2, G3 3개 그룹으로 합성하였다. 그 목록은 Table 1에서 보는 바와 같다.</p> <h2>실험 재료</h2> <p>실험에 사용된 양파, 대파, 쪽파는 부산 연제구 거제시장 및 대형유통매장에서 판매되는 제품 중 친환경 무농약인증 농산물을 사용하여 시료중의 잔류농약으로 인한 분석결과의 간섭을 최소화 하였다.</p> <h2>은이온흡착 cartridge 조제</h2> <p>\( \mathrm{AgNO}_{3} 10 \mathrm{~g} \) 을 \( 50 \mathrm{ml} \) 증류수에 녹인 \( \mathrm{AgNO}_{3} \) 용액 \( 3 \mathrm{ml} \) 을 Varian사 Florosil cartridge ( \( 1 \mathrm{~g} \) packing, \( 6 \mathrm{ml} \) tube)에 가해 초당 2~3방울 속도로 유출하였다. 이때 Varian사의 VAC ELUT SPS 24 감압기를 이용하여 유속을 조절하였다. 이후 Florosil cartridge에 acetone \( 6 \mathrm{ml} \) 를 가한 후 감압장치를 이용 하여 초당 2~3방울 속도로 유출하였다.</p> <h2>시료의 전처리 및 정제</h2> <p>본 실험에서 제조한 은이온흡착 cartridge를 이용하여 양파, 대파 및 쪽파에 함유되어 있는 황화합물의 제거 효율 및 잔류 농약의 회수율을 조사하기 위하여, 각 시료를 식품공전의 잔류농약 시료조제방법으로 전처리하였다. 즉, 시료 \( 50 \mathrm{~g} \) 에 acetonitrile \( 100 \mathrm{ml} \) 을 가하고 5,000 rpm의 homogenizer에서 3분간 blending한 후 \( \mathrm{NaCl} 6 \mathrm{~g} \) 을 넣고 shaking하였다. 그리고 \( 3,000 \mathrm{rpm} \) 에서 5분간 원심분리한 상등액(acetonitrile층) \( 4 \mathrm{ml} \) \( (2 \mathrm{~g}), 8 \mathrm{ml}(4 \mathrm{~g}), 12 \mathrm{ml}(6 \mathrm{~g}) \) 및 \( 20 \mathrm{ml}(10 \mathrm{~g}) \) 을 각각 취하여 감압 농축하였다. 정제과정은, 우선 은이온흡착 artridge에 hexane+acetone 혼합액(20:80) \( 6 \mathrm{ml} \) 를 가하여 초당 2~3방울 속도로 용출시킨 후, 전처리한 농축액을hexane+acetone 혼합액(20:80) \( 2 \mathrm{ml} \) 로 2회 녹여 초당 \( 1 \sim 2 \) 방울 속도로 용출하고 hexane+acetone 혼합액(20:80) \( 6 \mathrm{ml} \) 를 동일한 속도로 다시 용출시켰다. 용출액은 질소미세농축기를 이용하여 농축하고 그 잔사를 acetone \( 2 \mathrm{ml} \) 에 녹여서 GC/ECD 분석용 시험액으로 하였다.</p> <h2>회수율</h2> <p>파속류의 잔류농약분석시 유기황화합물 등의 방해물질의 제거에 이용한 은이온흡착 cartridge에서 각 농약의 회수율을 측정하기 위하여 일반 재배농가에서 많이 사용되고 있는 농약 40종을 각각 G1, G2 및 G3 그룹으로 분류하였다. 회수율은 양파 3점, 대파 3점, 쪽파 3점에 각각의 농약을 \( 1 \mathrm{ppm} \) 수준으로 혼합 조제하여 각 성분별 3반복으로 살포한 후 이들을 시료로 하여 전처리하고 은이온흡착 cartridge에서 정제한 후 GC/ECD로 분석하여 각 농약의 회수율을 산출하였다.</p> <h2>GC/ECD에 의한 분석</h2> <p>HP 8690 GC에 DB5 capillary column (i.d \( 0.25 \mathrm{~mm} \times \) film thickness \( 0.25 \mu \mathrm{m} \times 30 \mathrm{~m} \) )을 장착하여 inlet temp. \( 250^{\circ} \mathrm{C} \), de-tector temp. \( 320^{\circ} \mathrm{C} \), 그리고 oven은 initial temp. \( 80^{\circ} \mathrm{C} \) (2분 간)에서 \( 15^{\circ} \mathrm{C} / \mathrm{min} \) 으로 \( 180^{\circ} \mathrm{C}, 4^{\circ} \mathrm{C} / \) 분으로 250 (4분 간), \( 10^{\circ} \mathrm{C} / 분\)으로 \( 300^{\circ} \mathrm{C} \) (6분 간)로 상승시켰다.</p>