주박은 술 빚는 과정에서 남는 천연소재로, 다양한 영양분을 함유하고 있다. 이 연구에서는 피부 섬유아세포를 사용하여 주박이 피부에 미치는 항노화 효과를 연구하였다. 주박이 피부 주름 형성에 영향을 미칠 수 있음을 보여주는 연구는 현재까지 부족한 상황이다. 본 연구에서는 주박이 MMP-1 유전자의 발현을 억제하고 콜라겐의 생성을 촉진하는 효과를 확인하였다. 주박 \(50 \mathrm {g}\)에 \(50\%\) 주정 \(150 \mathrm {ml}\)을 첨가하고, \(150 \mathrm {rpm}\)에서 48시간 동안 반응시킨 후, 동결 건조하여 분말로 만들어 실험에 사용하였다.
<p>주박(Korean rice wine cake)은 청주, 약주 등의 술을 빚고 남은 양조 부산물로써, 알코올, 혀.소, 유기물 등을 포함하는 천연소재이다. 일본에서는 식용, 합성소주와 소주의 향미액원료, 사료 첨가제 등으로 일부 사용되고 있으나 다른 분야의 기능성 산업화에는 미흡한 실정이다. 양조 과정 중에 첨가되는 주박 미생물들은 균체 자체로서 풍부한 영양분을 함유하고 있다. 주박은 피부와 연관이 있는 것으로 생각되고 있는데, 민간에서 주류생산 및 주박을 다루는 사람들의 손은 일반인들에 비해 횔씬 부드러운 것으로 알려져 있다. 즉, 주박이 피부주름에 연관이 있는 것으로 추측되고 있지만, 현재까지 피부에 미치는 효과기전의 연구의 보고는 미비한 실정이다.</p> <p>이에 본 연구는, 피부 섬유아세포를 이용하여 주박이 피부에 미치는 항노화 효과에 관한 연구를 수행하였고, 피부노화 의 직접적인 원인인 MMP-1의 유전자 발현과 피부의 주요 구성인자인 콜라겐의 생합성 촉진 효과에 대해 검증하였고, 이 를 보고하고자 한다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>실험재료</h2> <p>시료의 추출은 다음과 같이 추출하였다. 주박 \( 50 \mathrm { ~g } \) 에 \( 50 \% \)주정 \( 150 \mathrm { ml } \) 을 첨가하여 \( 150 \mathrm { rpm } \) 으로 48 시간 동안 반응하여 여과한 후, 감압농축하여 동견건조 한 분말을 본 실험의 시료로 사용하였다. 세포 배양을 위한 배양액인 Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM)은 Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)에서 구입하였고, Fetal Bovine Serum (FBS)과 penicillin-streptomycin은 Lonza (Walkersville, MD, USA) 에서 구입하였다. Collagen의 생합성 양을 측정하기 위해서 사용한 Procollagen Type-I C-Peptide (PIP) EIA kit는 TAKARA Bio Inc. (Shiga, Japan)에서 구입하여 실험을 하였다.</p> <h2>세포배양</h2> <p>인간 섬유아세포인 HS27세포는 정해영 교수(부산대학교) 로부터 분양 받았으며, \( 10 \% \) FBS와 100 unit/ml의 pen-icillin-streptomycin이 첨가된 DMEM 배지에서 2-3일마다 배양액을 교환해 주었으며, 배양 환경은 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 로 유지되는 \( 5 \% \) \( \mathrm { CO } _ { 2 } \) 배양기에서 배양하였다.</p> <h2>\( \begin {array} { ccc } \text { DPPH } & \text { (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical } & \text { 소거능 } \\ \text { 측정 } & & \end {array} \)</h2> <p>주박의 항산화 효과는 DPPH를 이용하여 라디컬 소거효과를 측정하였다. \( 0.2 \mathrm { mM } \mathrm { DPPH } \) 알크올 용액에 주박을 농도별로 앝코올에 희석하여 혼합한 후, \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 분간 반웅시킨후,microplate reader를 이용하여 \( 517 \mathrm { ~nm } \) 의 흡광도에서 측정하였다.</p>