본 실험에서 가임 서울배추 내혼 계통 실생의 떡잎, 하배축 그리고 본잎으로부터 떼어낸 원형질체를 2,4-D, NAA, BA 등의 구성이 다른 4부류의 액체 배지에서 언급한 바와 같이 명배양한 뒤 세포분열율과 micro-callus 생장을 조사하였다.
<h2>배추 원형질체로부터 세포분열 유도와 micro-callus 생장</h2> <p>일반적으로 cytokinin은 세포분열을 유도할 수 있으며 auxin과 혼용돠었을 때 특히 효과적이다는 점과, 세푸분열을 지속시켜 callus 생장을 유도하기 위해 공급하는 외생 식물</p> <p>생장조절제 (PGR)의 효과는 PGR의 종류와 농도뿐 아니라 내생 auxin과 cytokinin의 비율에 크게 의존한다는 점은 잘 알려진 사실이다 (Pierik 1987). 배추과 식물에서 원형질체 배양 시 세포분열을 유도하고 micro-callus로 생상을 지속시키기 위해 2,4-D, NAA, BA, kinetin 등의 PGR을 적절히 혼용하여 사용하였다 (Jee and Chung 1989b; Han and Kim 1990; Kirti et al. 1995; Lian and Lim 2001; In et al. 2008). 본 실험에서도 가임 서울배추 내혼 계통 실생의 떡잎, 하배축 및 본잎을으로부터 분리한 원형질체를 2,4-D, NAA 및 BA 등의 조성이 다른 4종류의 액체 배지에서 언급한 바와 같이 광조절을 하면서 배양 (명배양)한 후 세포분열율과 micro-callus 생장을 조사하였다 (Table 1). 세포분열율과 micro-callus 생장 모두 2,4-D \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \), NAA \( ~0.5 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 및 BA \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \)가 첨가된 배지에서 떡잎 유래 원형질체를 배양했을 때 각각 \( 33.4 \% \) 와 8.5 score로 가장 늪았다. Han과 Kim (1990) 및 Lian과 Lim (2001)은 배추 원형질체를 단독 배양하거나 융합친으로 활용하기 위해 원형질체를 분리할 때 본잎을 재료로 이용하는 것이 그 수율이 높을지라도 초기 세포분열과 이어지는 micro-callus 생장을 위해서는 떡잎을 재료로 하는 것이 보다 효과적이며, 초기 세포분열율이 높다고 하더라도 이것이 다음 단계인 micro-callus 생장으로 반드시 이어지지 않는 다는 것을 나타낸다고 할 수 있다. 또한 인자처리의 강도 \( \left ( \omega ^ { 2 } \right ) \)를 분석한 결과 예측한 바와 같이 세포분열 및 micro-callus 생장 모두에 PGR } 영향이 약 \( 66 \% \)로 가장 크고 다음으로 절편의 종류에 따른 영향이 각각 \( 13 \% \) 와 \( 15 \% \) 였다. 따라서 배추 원형질체 배양 시 초기 세포분열 유도와 지속적 micro-callus로의 생장을 위해서는 배지의 조성, 특히 PGR } 을 조절하는 것이 효과적이라고 할 수 있다.</p>