본 실험에서는 혈관의 표적 분자들을 발굴하여 효율적으로 조절 가능한 분자를 탐색하고자 하였는데, Eph-B4가 정맥혈관의 확립에 주요한 역할을 하여 혈관 구조 및 기능을 유지하는 단백질의 발현이 감소된 것으로 알 수 있었다. 본 연구에서 제시된 복합적인 자극인자로 발현의 증감이 뚜렷한 유전자를 찾는 전략은 기능이 알려져 있지 않은 유전자들이 새로운 혈관 표적 단백질 탐색에 효과적으로 이용 가능함을 보여준다.
<h1>고 찰</h1><p>세포 증식 상태에 따라 내피세포의 세포 표면에 존재하는 단백질의 종류가 다르다는 것이 보고 된 이래, 다양한 growth factor들에 의한 유전자 발현 양상 변화에 관심을 가져 왔다. 대부분이 특정 growth factor들에 의해 발현되는 유전자 패턴에 대한 보고가 주를 이루고 있다. 본 연구에서는 다양한 growth factor들에 의해 영향 받을 수 있는 in vivo 조건을 고려하고, 이러한 복합적인 자극들에 의해 공통적으로 나타날 수 있는 혈관의 표적 분자들을 발굴하여, 개개의 growth factor들의 개별화된 표적 분자들 보다 효율적으로 조절될 수 있는 분자를 탐색하고자 하였다.</p><p>포괄적인 유전자 발현 분석을 통해 각 조직에 있는 내피세포들의 발현 패턴이 다양하여 조직의 특성을 나타내는 것으로 최근에 보고 되었다. 흥미롭게도 본 실험에서 특이하게 활성화된 HUVEC에서 Eph-B4의 발현이 강하게 감소되었는데, 이는 Eph-B4가 정맥혈관의 확립에 주요한 역할을 하는 것을 고려할 때, 제대정맥에서 유래된 내피세포가 증식, 이동 모드로 전환됨에 따라 혈관 구조 및 기능을 유지하는 단백질의 발현이 감소된 것으로 생각된다. 올리고 칩을 이용한 분석을 통해 각종 growth factor들에 대한 인간 모세혈관 내피세포의 유전자 발현 패턴이 보고 되었는데, 정량적인 평가가 이루어지지 않아 비교하기 어렵지만, 대체적으로 발현 차이를 보여주는 유전자들이 본 연구에서 제시한 것과 상당히 상이하였다. 유일하게 connective tissue factor의 발현 증가가 일치하는 경우로 관찰되었다. 최근에는 주요한 혈관신생 인자인 VEGF에 의해 활성화된 HUVEC의 유전자 발현 양상이 보고 된 바 있지만, 제시된 유전자 발현 패턴 또한 본 실험 및 앞에서 언급된 모세혈관 내피세포의 유전자 발현 양상과도 상이한 pattern을 보여 주고 있다. 이러한 상이한 결과는 내피세포의 종류, 사용된 chip, 그리고 활성화에 사용된 인자들의 종류 등의 차이에 의해 나타나는 것으로 추정된다. 따라서, 본 연구 결과로부터 얻은 유전자발현 분석에서 나온 결과는 새로운 혈관신생 표적 분자로 개발하기 앞서, 분자, 세포학적인 보다 자세한 연구를 통한 검증이 필요할 것 같다.</p><p>최근에는 혈관 내피세포의 자극 인자로서 염증 유발 인자인 TNF- \( \alpha \), IL- \( \beta \), LPS에 의한 유도되는 유전자 발현을 비교 분석하였을 때, 공통적으로 발현이 조절되는 유전자들도 있지만 상이한 조절을 받는 유전자들도 있는 것이 보고 되어, 이들 인자 중 하나인 TNF- \( \alpha \) 만을 차단하는 것으로는 염증을 완전히 억제 시키지 못한다는 임상 실험 결과를 뒷받침하기도 하였다. 따라서, 본 연구에서 실시한 복합적인 자극인자에 의해 발현의 증감이 현저한 유전자를 탐색하는 전략은 이런 측면에서 효과적인 방법이 될 수 있겠다.</p><p>활성화시키는 조건에서 배양한 세포의 경우 세포의 증식, 이동에 관한 유전자의 발현이 증가된 반면, 세포의 흡착 및 혈관 조직의 유지에 관련한 유전자의 발현이 감소된 점은 예상된 내피세포의 기본적인 특성이 잘 반영된 것으로 생각되며, 이 관점에서 같은 분석 system에서 확인된 기능이 알려져 있지 않은 유전자들이 새로운 혈관 표적 단백질 탐색에 효과적으로 이용될 수 있음을 시사한다.</p>