대한민국은 직접 분석 가능하다는 장점을 가진 LC/MS법으로 마이크로시스틴을 분석한 조류 예보제를 실시하고 있으나 해당 방법은 전처리에 긴 시간이 소요되며 시료가 다량으로 필요하다는 단점이 있다. 이에 따라 남조류 밀도 수준에는 해당 방법을 적용시키기 어렵기 때문에 마이크로시스틴 검출 시간이 적게 소요되는 Real-Time PCR법이 효과적이라고 할 수 있다.
<p>Real-Time PCR법 시험결과도 LC/MS법 결과와 마찬가지로 BAC 여과 이후부터 독성이 검출되지 않았다. 그러나 6월 19일 LC/MS법에서는 검출되지 않았던 사여과 시료가 Real-Time PCR법에서는 검출되었는데 이는 LC/MS법의 경우 마이크로시스틴이 저농도로 존재하는 경우 다른 용존 유기물의 방해로 인해 감도가 떨어졌기 때문인 것으로 판단된다.</p> <p>우리나라는 1998년부터 상수원수를 중심으로 조류 예보제를 실시하고 있으며, 2009년 조류 예보제 시행계획에 따르면 남조류 세포수가 \( 5,000 \mathrm { ~cells } / \mathrm { ml } \) 이상일 때 조류경보를 발령함과 동시에 LC/MS에 의한 마이크로시스틴 정량분석을 권장하고 있다. 하지만, LC/MS에 의한 분석방법은 마이크로시스틴의 직접적인 분석이 가능하다는 장점은 있으나, 전처리에 있어서 많은 시간이 소요되며 다량의 시료를 필요로 한다. 따라서, 조류 경보가 발생되기 전의 상대적으로 낮은 남조류 밀도 수준에서는 LC/MS 분석법을 적용하기 어렵다. 반면에 물금, 매리 상수원수(표층수) 시료를 대상으로 실시한 TOX2P/TOX2M primer쌍에 의한 Real-Time PCR법은 조류 경보 발령단계 이전의 밀도 수준에서도 매우 효과적이고 신속하게 검출하였는데 이는 기존의 시험방법인 LC/MS 분석법보다 최대 8일 정도 분석시간을 단축시키는 것으로 확인되었다. 물론 TOX2P/TOX2M primer 이외의 다른 primer에서도 마이크로시스틴 독성이 검출되었다는 보고가 있으나 본 실험에서는 검출되지 않았는데 이는 Microcystis spp.. 속의 환경적인 생장조건 및 생태학적 인자 등이 차이로 인해 기인된 것으로 판단된다.</p> <p>결과적으로 TOX2P/TOX2M primer쌍에 기초한 Real-Time PCR법은 LC/MS법 그리고 남조류 세포수와의 농도정량에 대한 적절한 호환이 이루어진다면 우리시 상수원수의 마이크로시스틴에 대한 효율적인 검출방법으로 적용될 수 있을 것으로 판단된다.</p> <h1>초록 : Real-Time PCR법과 LC/MS법을 이용한 수계중의 마이크로시스틴 검출방법 비교연구</h1> <p>현장의 환경 시료를 대상으로 Real-Time PCR법과 LC/MS법을 이용하여 마이크로시스틴 검출방법을 비교 연구하였다. 3종류의 primer쌍을 이용하여 3종의 Microcystis aeruginosa 표준균주를 대상으로 Real-Time PCR법을 실시한 결과 TOX2P/TOX2M primer를 이용한 균주에서만 마이크로시스틴이 검출되었다. 2009년 6~9월 사이에 남조류가 발생한 상수원수 시료를 정립된 Real-Time PCR법과 기존의 LC/MS법으로 실험한 결과 11개 시료 모두 에서 마이크로시스틴이 검출되었고, 농도는 \( 5.98 \sim 219.0 ~ \mu g / \mathrm { l } \) 범위로 조사되었다. 정수처리 공정별 실험에서는 BAC 여과 단계에서 마이크로시스틴이 완전히 제거되는 것으로 나타넜다. 실험결과 Real-Time PCR법은 기존의 표준시험방법인 LC/MS법 보다 분석시간을 많이 단축시키는 것으로 나타나 효과적인 마이크로시스틴 검출방법임을 알 수 있었다.</p>