내독소, mitogen, virus 등에 의해 활성화 되는 대식세포는 면역세포 중 하나로 내재면역반응과 적응면역반응에 있어서 중요한 역할을 한다. 대식세포는 산소대사산물, 지질대사물, 단백질류 등을 분비하는데 본 연구에서는 septicine의 항염증작용을 관찰하였다. 내독소인 LPS는 다양한 염증 및 면역반응 관련 유전자들의 합성이 일어나는데 세포내 정보전달 흐름의 활성이 유도되기 때문이다. 그 결과 septicine의 처리가 LPS로 발생하는 NO의 생성을 막는 것을 볼 수 있었다. 내재면역반응의 중요한 역할인 TNF-a는 염증반응에 관여 하고 있다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <p>면역세포 중 대식세포는 내재면역반응과 적응면역반응에 있어 중요한 역할을 담당하고 있으며, 내독소, mitogen, virus 등에 의해서 활성화 된다. 활성화된 대식세포는 탐식작용을 하고 면역반응을 조절하는 다양한 물질을 분비한다. 이들 물질 중에는 \( \mathrm{NO} \) 와 같은 산소대사산물, \( \mathrm{PG} \) 와 같은 지질대사물 및 단백질류(cytokine 및 chemokine) 등이 있으며, 대식세포는 이들을 생산 분비하여 다양한 생체기능을 수행하게 된다. 따라서 본 연구에서는 생쥐의 대식세포주인 RAW264.7 세포를 이용하여 septicine의 항염증작용을 관찰하였다.</p> <p>먼저, septicine의 RAW264.7 세포 증식에 대한 영향을 알아보기 위해 \( 2,000 \mathrm{nM} \) 의 농도를 최고농도로 하여 RAW264.7 세포에 처리하였다. Septicine을 처리한 24시간 후 세포독성 여부를 MTS 방법으로 확인 한 결과, \( 2,000 \mathrm{nM} \)의 septicine처리는 RAW264.7 세포의 증식을 유의적으로 억제하였으나 \( 1,000\mathrm{nM} \) 까지의 septicine의 처리는 세포증식에의 영향을 끼치지 않은 것을 확인 할 수 있었다. 따라서 이하의 실험에서는 septicine이 RAW264.7 세포의 세포생존율에 영향을 주지 않는 \( 1,000 \mathrm{nM} \) 이하의 농도를 사용하여 실험을 진행하였다. 내독소로 잘 알려진 LPS는 그람음성균의 세포 외막에 존재하며, 대식세포 또는 단핵구에 존재하는 염증성 매개물질의 생성을 증강시키는 것으로 알려져 있다. LPS는 대식세포에 존재하는 toll-like receptor (TLR)-4를 활성화시켜 세포내 정보전달 흐름(intracellular signaling cascades)의 활성이 유도되고 결과적으로 다양하면서도 독특한 염증 및 면역반응 관련 유전자들의 전사합성이 이루어진다. 따라서 본 연구에서는 LPS로 RAW264.7 세포를 자극하여 염증반응을 유도하였다.</p> <p>LPS에 의해 활성화된 RAW264.7 세포의 배양액 중에 생성된 nitrite의 양을 septicine을 대상으로 \( \mathrm{NO} \) 생성 저해활성을 조사하였다. 그 결과 septicine (\(31.2-1,000 \mathrm{nM}\))의 처리가 LPS에 의해 생산되는 \( \mathrm{NO} \) 의 생성을 농도 의존적으로 억제함을 확인 할 수 있었다.</p> <p>IL-6 및 TNF- \( a \) 로 대표되는 염증성 cytokine은 염증 반응을 매개하는 물질로 특히 초기 염증 반응에 깊이 관여하고 있는 것으로 알려져 있다. 주로 단핵구나 대식세포에서 분비되는 IL-6는 B세포가 형질세포로 분화되는 마지막 단계를 활성화시키고, 항체의 분비를 촉진한다. 또한 IL-6는 염증병소에서 증가하는 것으로 알려져 있다. TNF- \( a \)는 LPS 반응의 주요 매개체로 내재면역반응의 중요한 역할을 담당한다. 대식세포나 비만세포에서 분비되는 TNF- \( a \)는 암세포에 세포독성을 나타내며, 만성염증반응과 관련되어 있다.</p>