\( \mathrm { pH } \)의 변화는 효소 활력측정을 위한 시료를 채취한 후 \( \mathrm { pH } \) meter를 이용하여 측정하였다. Cellulase 효소의 활력 측정은 Miller 등의 방법에 따라 DNS 법을 이용해 \( 550 \mathrm { nm } \)에서 흡광도를 측정하는 방식으로 진행하였으며, Xylanase, Avicelase, Amylase의 활력도 이와 동일한 방법으로 측정하였다.
<p>\( \mathrm { pH } \) 변화는 각 발효시간대별 gas 발생량 측정과 미생물 성장량과 효소 활력측정을 위한 시료를 채취한 다음 \( \mathrm { pH } \) meter (Mettler Toledo, MP230)를 이용하여 측정하였다.</p> <p>효소활력 측정에서 Cellulase 효소의 활력 측정은 Miller등의 방법에 따라, 조효소액 \( 0.5 \mathrm { ~ml } \)과 기질용액으로 \( 2 \% \) \( ( \mathrm { W } / \mathrm { V } ) \)의 CMC 용액이 현탁된 \( 0.1 \mathrm { ~M } \) acetate buffer ( \( \mathrm { pH~ } 5.0) \)를 혼합하여 \( 1 \mathrm { ~ml } \)이 되게 한 후, \( 55 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 30분간 반응시키고 \( 100 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 5분간 진탕하여 반응을 중지시킨 다음 상등액내의 환원당의 양을 DNS (dinitrosalicylic acid)법을 이용하여 \( 550 \mathrm { nm } \)에서 흡광도를 측정하였다. Cellulase의 \(1 \mathrm { ~unit } \)는 1분당 \( 1 \mathrm { ~ \mu mol } \)의 glucose를 생성하는 효소의 양으로 하였다. Xylanase 활력은 기질용액을 \( 0.1 \mathrm { ~M } \) acetate buffer에 \( 2 \% \) \( ( \mathrm { W } / \mathrm { V } ) \) oat spelt xylan 현탁액이 되게 하여 cellulase 활력 측정방법과 동일한 방법으로 측정하였다. Xylanase의 \(1 \mathrm { ~unit } \)는 1분당 \( 1 \mathrm { ~ \mu mol } \)의 xylose를 생성하는 효소의 양으로 하였다. Avicelase 활력은 기질용액을 \( 0.1 \mathrm { ~M } \) acetate buffer에 5 \( \% \) \( ( \mathrm { W } / \mathrm { V } ) \) avicel 용액이 되게 하여 cellulase 활력 측정방법과 동일한 방법으로 측정하였다. Avicelase의 \(1 \mathrm { ~unit } \)는 1분당 \( 1 \mathrm { ~ \mu mol } \)의 glucose를 생성하는 효소의 양으로 하였다. Amylase의 활력은 기질용액을 \( 0.1 \mathrm { ~M } \) acetate buffer에 \( 1 \% \) \( ( \mathrm { W } / \mathrm { V } ) \) starch용액이 되게 하여 cellulase 활력방법과 동일한 방법으로 측정하였으나, 반응시간을 \( 55 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 2시간으로 하였다. Amylase의 \(1 \mathrm { ~unit } \)는 1분당 \( 1 \mathrm { ~ \mu mol } \)의 glucose를 생성하는 효소의 양으로 하였다.</p>