무기물과 유리 양이온을 측정할 때 \( 1 \mathrm { ~g } \)의 시료를 \( 40\mathrm { ml } \)의 삼원용액에 가한 후 hot plate(350\(^\circ \mathrm{C}\))에 올려 가열분해한 후 ICP 기기로 무기물과 양이온 함량을 정량하였다. 그 후 \( 10 \mathrm { ~g } \)의 시료를 \( 150 \mathrm { ml } \)의 혼합유기용매에 가열분해한 후 GC-17A로 지방산 조성을 분석하였다.
<h3>무기물과 유리 양이온의 측정</h3> <p>시료 \( 1 \mathrm { ~g } \) 을 삼각플라스크에 넣은 후 ternary sloution 40 \( \mathrm { ml } \)을 가한 후 삼각플라스크를 hot plate \( \left (350 ^ {\circ } \mathrm { C } \right ) \)에 올린 후 가열분해시켰다. 가열분해된 시료를 \( 100 \mathrm { ml } \) 플라스크에 넣어 증류수를 첨가하여 \( 100 \mathrm { ml } \)로 맞춘 후 이 혼합액을 \( \mathrm { ICP } \) 기기(AtomScan-25, Thermo Jarrell Ash Corporation (TJA),USA)에 넣어 무기물과 양이온 함량을 정량하였다.</p> <h3>지방산 조성의 분석</h3> <p>시료 \( 10 \mathrm { ~g } \)에 혼합유기용매 \( 150 \mathrm { ml } \)를 넣고 균질기 \( (2,500 \) \( \mathrm { rpm } \) )로 3분간 마쇄하여 여과(Whatman No.1 \( 185 \mathrm { ~mm } \) )한 후 그 잔사에 다시 혼합유기용매 \( 100 \mathrm { ml } \)를 이용하여 마쇄, 용출시켰다. 이 여액에 물을 \( 1 / 3 \)정도(총여액의 \( 1 / 3 \) ) 가하여 원심 분리(Union 5KR, Made in KOREA; 3,000 rpm, \( 10 \mathrm { ~min } \) )한 후 하층(lipid layer)을 취하여 sodium sulfate anhydrous를 기용하여 남은 수분을 흡착 여과한 후 여액을 evaporatorBUCHI Rotavapor R-200,Swiss; \( 55 ^ {\circ } \mathrm { C } , 25 \mathrm { ~min } \) )를 이용하여 지질을 추출하였다. 지질 추출후 \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 이하에서 질소가스를 주입하면서 농축한 후 \( 1.0 \sim 2.0 \mathrm { mg } \)의 농축 지질에 \( 4 \% \) sulfuricacid \( \left (40 \mathrm { ml } \mathrm { H } \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { SO } _ { 4 } / 1000 \mathrm { ml } \right . \) methanol)용액 \( 3 \mathrm { ml } \)를 가하여 밀봉한 다음 water both \( \left (90 ^ {\circ } \mathrm { C } \right ) \)에서 20 분간 가열(5분마다 흔들어 줌)하여 실온에서 냉각한 후 다시 증류수 \( 1 \mathrm { ml } \)를 가하여 흔들고 여기에 hexane \( 2 \mathrm { ml } \)를 넣고 흔든 후 하층을 제거하였다. 3회 반복하여 \( 2 \mathrm { ml } \)의 증류수를 넣어 하층을 제거하고 여액에 sodium sulfate anhydrous를 적당량 넣어 흔든 후 상등액 \( 2.5 \sim 3 \) 쓸 취하여 \( \mathrm { GLC } \left ( \mathrm { HP } 6890 ^ { + } \mathrm { GLC } \right ) \)를 이용하여 지방산을 분석하였다. 이때 \( \mathrm { GLC } \)의 조건은 Table 1 과 같다.</p>