tdh 유전자는 PCR법과 DNA probe hy-bridization법의 결과로 검출해 26균주가 양성, 1균주가 tdh 음성, trh2 urease 양성으로 나타났으며 tdh 유전자 양성 16균주의 RFLP 양상은 모든 균주가 tdh 유전자를 보유하고 있었다. 혈청형 O6:46 4균주 모두에서 ORF 8 양성을 나타내어 새롭게 나타난 유행균주일 가능성을 시사하였고 혈청형 non O3: K6 균주에서는 혈청형에 따라 세분할 수 있었고 혈청형 O3:K6와 non O3:K6와 전혀 다른 RAPD 양상을 나타내어 AP-PCR법으로 혈청형 O3: K6 유행균주와 non O3:K6을 감별할 수 있었다.
<h2>병원성 유전자의 보유상황 및 TDH 생성성</h2> <p>PCR법과 DNA probe법의 두 가지 방법으로 tdh, trh1 및 trh2 유전자를 검출한 결과는 다음과 같다. tdh 유전자는 실험균주 27균주 중에서 26균주가 PCR법과 DNA probe hy-bridization법의 결과에서 양성으로 나타났으며, 27균주 중에서 26균주는 urease를 생성하지 않았으나, 일본 환자유래 혈청형 O3:K6 1균주만이 tdh 유전자 음성, trh2 유전자 양성으로 urease 양성을 나타났다.</p> <p>또한 혈청형 non O3:K6를 제외한 혈청형 O3: K6 16균주를 대상으로 RPLA 실험에 의한 TDH 생성성을 살펴본 결과는 Table 3과 같이 균주에 따라 TDH 생성 역가는 다소 차이는 있었으나 전 균주가 256배에서 2,048배 정도로 나타났으며, 특히 일본분리주의 경우 1,024배에서 2,048배로 TDH 생성성의 역가가 상당히 높았다. tdh 유전자 양성 16균주의 RFLP 양상은 모든 균주가 \( 11.5 \mathrm { ~kb } \) 와 \( 4.3 \mathrm { ~kb } \) HindⅢ DNA 단편위에 tdh 유전자를 보유하고 있었다.</p> <h2>유전자형별</h2> <p>ORF 8의 DNA-specific oligonucleotide primer에서 혈청형 O3:K6 16균주에서 증폭되었으나, 혈청형 non O3: K6 균주인 혈청형 O4:K9, O3:57, O5:K15, O4:12 및 O1:K38 균주에서 ORF 8은 음성이었으며, 특히 혈청형 O6:46 4균주 모두에서 ORF 8 양성을 나타내어 새롭게 나타난 유행균주일 가능성을 시사하였다.</p> <p>한국 및 일본에서 분리된 환자유래의 혈청형 O3:K6 17균주와 혈청형 non O3:K6의 10균주에 대한 유전자형별을 AP-PCR을 이용한 RAPD법과 PFGE법으로 실시한 결과는 다음과 같았다. RAPD법에서 혈청형 O3:K6 17균주에서는 OPE-16 primer에 의해 A, B, C, D, E의 5종류로 OPP-16, OPK-01, OPK-04 및 OPP-03 primer에 의해 각각 A, B, C 의 3종류로 각각 분류할 수 있었다. 따라서 4종류의 primers의 분류를 조합하여 8형 (A, B, C, D, E, F, G 및 H형)으로 분류할 수 있었으며, 한국유래균주는 C형이 주류를 이루었으나 일본 유래균주는 4가지 primers의 조합에서는 B, E, F, G, H형으로 세분할 수 있었다. 한국유래균주와 일본유래균주의 RAPD법에서 4종류의 primers의 조합에서 완전하게 일치하는 것은 B형으로 한국유래 3균주와 일본유래 1균주가 완전하게 일치하였다. 또한 혈청형 non O3: K6 균주에서는 혈청형에 따라 각각 a, b, c, d, e, f로 세분할 수 있었고 혈청형 O3:K6와 non O3:K6와 전혀 다른 RAPD 양상을 나타내어 AP-PCR법으로 혈청형 O3: K6 유행균주와 non O3:K6을 감별할 수 있었다.</p>