MOP1 단백질이 Rickettsia australis의 외막 단백질 A와 동일한 서열을 가짐을 발견하였고, 이는 LC/ESI-MS를 이용한 내부서열 분석 결과와 일치한다. Pseudomoans sp.MN \(5\) 균주는 여러 단백실을 생성해 망간 산화를 수행하며, \( \mathrm { OmpC } \) 와 \( \mathrm { OmpF } \) 단백질들이 이 과정에 관여한다는 것을 확인하였다. 그러나 일부 연구에서는 망간 흡수에 \( \mathrm { ABC } \) transporter가 관여한다는 결과도 발견되었다. 이 연구를 통해 망간산화 단백질의 서열과 일부 기능이 밝혀졌지만, 더 많은 유전자와 단백질에 대한 연구가 필요하다. Pseudomonas sp. MN \(5 \)는 다양한 당을 이용하지 못하며, 항생제에 높은 감수성을 보이고 중금속에 대해 높은 내성을 가지고 있다.
<p>활성 밴드 중 가장 크기가 작은 MOP1을 PVDF 막에 trans-blotting 한 후 \( \mathrm { N } \)-말단 단백질 서열분석기를 이용하여 단백질의 서열을 분석을 한 결과, 이 단백질의 서열이 SPFVG로, Rickettsia australis의 outer membrane protein A와 \( 18.5 \) bits (identitics \( 100 \%, 5 / 5) \) 의 score를 나타내어 LC/ESI-MS를 이 용한 내부서열 분석결과와 같이 막 단백질임을 확인하였다. 따라서 본 실험에 사용된 Pseudomonas sp. MN \(5 \)의 망간산화 단백질은 막 단백진과 연관이 있고, Brouwers가 \(1999 \)년에 보고한 것처럽 막 단백질 중 외막의 porin 단백질 과 type Ⅱ secretion system protein 그리고 gencral secretion pathway protein과 연관이 있는 것으로 추정된다. 또 균주에 따라 다양한 유전자가 망간 산화에 관련된다는 보고와, porin 단백질 중 \( \mathrm { OmpC } \) 와 \( \mathrm { OmpF } \) 가 양이온의 투과에 관여를 한다는 사실에 비추어 볼 때, 본 실험에 사용된 Pseudomoans sp. MN \(5 \)도 하나가 아닌 다양한 단백실을 세포막에 만들어 망간을 산화시키고, 또 \( \mathrm { OmpC } \) 와 \( \mathrm { OmpF } \) 중 하나 또는 두 단백질 모두가 망간의 산화에 관여할 것이라 생각된다. 그러나 일부 연구에서 망간의 흡수 기작에 type I se-cretion system인 \( \mathrm { ABC } \) transporter가 관여한다는 보고도 있어, 망간 산화 균은 균주에 따라 outer membrane protein 과 독자적 또는 연관성 있는 조절기작에 의해 망간을 산화시키고 에너지를 획득할 것으로 생각된다. 본 연구를 통해 지금까지 밝혀시지 않았던 망간산화 단백질의 서열과 그 peptide늘의 기능을 일부 확인하였지만, 망간 산화에 관여하는 유전자를 찾고 그 유전자에 의해 나타나는 단백질들의 정화한 기능과 성진을 밝히기 위해 추가적인연구가 진행되어야 할 것으로 판단된다.</p> <h1>요약</h1> <p>충청남도 병천면 일대의 \(6 \) 곳의 토양시료를 채취하여 망간을 산화하는 균주들을 순수분리 하고, 이 중 망간 산화능이 가장 우수한 한 균주를 최종 선별하여 본 실험에 사용하였다. 최종 선별된 균주의 생리, 생화학적 특성을 조사하고, \( 16 \mathrm { ~S } \) rRNA 염기 서열분석 등을 통하여 동정한 결과 최종 선별된 균주는 Pseudomonas sp. MN \(5 \)로 확인되었다. Pseudomonas sp. MN \(5 \)은 fructose와 maltose를 제외한 다양한 당을 이용하지 못하였으며, 항생제인 kanamycin, chloramphenicol, strepto-mycin 그리고 tetracycline에는 높은 감수성을 보이고, 리튬,<망간, 바륨과 같은 중금속에 대해서는 \( \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \) 단위의 높은 내성을 나타냈다. 그리고 Pseudomonas sp. MN \(5 \)의 망간산화 최적 \( \mathrm { pH } \) 는 \( 7.5 \) 이고, 망간산화 활성이 proteinase \( \mathrm { K } \) 와 가열처리를 한 시료에서 저해되었다. Pseudomonas sp. MN \(5 \)가 생성하는 망간산화 단백진을 ammonium sulfate precipitation, HiTrap Q FF ion exchange chromatography 그리고 G \(3000 \)sw xL gel filtration chromatography를 통해서 정제한 결과, \( 15 \mathrm { kDa } , \(46.7 \) \mathrm { kDa } \) 그리고 \( 63.5 \mathrm { kDa } \) 의 세종류의 man-ganese oxidizing protein가 확인되었고, 내부서열과 \( \mathrm { N } \)-말단 서열 분석 결과 Pseudomonas sp. MN \(5 \)가 생성하는 망간산화 단백질은 외막의 porin 단백질인 것으로 추정되었다.</p>