본 연구는 GMO 식품의 식품적 안전성 검정을 위해 Agrobacterium 형질전환 방법으로 칼슘 함량이 증가된 T3 종자를 생쥐의 사료로 섭취시켜보고 기초자료로 사용하고자 한다.
<h1>서 론</h1> <p>벼(Oryza sativa L.)는 주식으로 이용하고 있으나, 쌀의 칼슘함량은 현미가 \( 11 \sim 13 \mathrm { mg } / 100 \mathrm { ~g } \) 백미가 \( 6 \sim 9 \mathrm { mg } / 100 \mathrm { ~g } \)으로 다른 채소와 과일 등과 같이 그 함량이 그리 높지 않다. 따라서 만약 첨단 유전공학기술을 토대로 한 칼슘이 증가된 쌀의 생산이 가능해진다면 식품학적인 가치가 충분히 있는 기능성 식량자원의 확보가 가능하게 될 것이다. 또한 어린이나 현대인에게 부족해지기 쉬운 칼슘섭취가 용이해져 칼슘부족으로 야기될 수 있는 각종 질병 예방에도 기여할 수 있을 것이다. 지금까지 칼슘 함량을 증가시키는 CAX 1 유전자에 의해 형질전환체를 획득한 작물은 감자, 토마토, 당근 등에서 목적유전자의 확인과 발현 여부를 검정하여 후대검정실험 보고를 하였다. 또한 형질전환된 당근을 이용하여 칼슘함량 분석과 식품학적인 결과가 보고되었다. CAX 유전자 중에서 가장 칼슘 치환능력이 높은 CAX 1 유전자는 형질전환 벼가 보고되어 있으며, 모품종인 일품벼와 CAX 1이 도입된 \( \mathrm { T } _ { 3 } \) 세대의 6계통 대상으로 종자 내 칼슘은 분석한 바 모품종보다 2.7~7.5배 높았다고 하였다. 따라서 본 연구는 Agrobacterium 형질전환 방법에 의한 \( \mathrm { Ca } ^ { 2 + } \) transporter인 \( \mathrm { Ca } ^ { 2 + } / \mathrm { H } ^ { + } \)antiporter 유전자로 벼에 도입하여 형질전환체를 만들어 칼슘 함량이 증가된 \( \mathrm { T } _ { 3 } \) 종자를 이용하여 생쥐의 사료로 섭취시켜서 GMO (genetically modified organisms) 식품의 식품적 안전성에 대한 기초자료로 이용하고자 한다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>GMO 안정성 검정을 위한 생쥐의 사료 조제 및 사육</h2> <p>본 연구는 Agrobacterium vector를 이용한 Arabidopsis thaliana \( \mathrm { Ca } ^ { 2 + } / \mathrm { H } ^ { + } \)수송체 CAX 1 (cation exchanger 1) 유전자가 \( \mathrm { T } _ { 2 } \) 식물체에서 PCR밴드가 확인된 식물체 \( \mathrm { T } _ { 3 } \) 종자의 현미를 이용하였다. GMO식품의 식품적 안정성 검정을 위한 실험동물은 오리엔트바이오(주)에서 구입한 ICR계 3주령 암컷 생쥐(charles river)를 4일간 경북대학교 생명자원과학대학의 동물실에서 순화하여 사용하였다. Isolator Rack Cage System (MSRS, millenium-SPF rack system 주)오리엔트바이오)을 사용하고 동물실 내 명암은 12시간으로 조절시켰으며 실내온도는 \( 23 \sim 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 내외로 유지하며, 습도는 \( 60 \% \)로 유지하고 환풍기를 24시간 가동하여 공기를 순환시켰다. 사료와 제조용 사료를 각각 사용하였고 물은 증류수를 자유롭게 섭취하도록 하였다.</p>