WEAS의 암세포 증식 억제의 정도를 다양한 암세포들을 대상으로 MTT assay를 통하여 조사하였으며,조사된 모든 종류의 암세포에서 WEAS 처리 농도 의존적으로 증식억제 효과를 보였으나, \( 1 \% \) 처리군에서 백혈병세포인 U937 및 HL60에서 \( 50 \% \) 이상의 중식억제 효과가 있었으며, 간암세포에서는 약 \( 10 \% \), 직장암세포에서는 \(20-40\% \)정도의 중식 억제를 보여주었다.
<h1>결 과</h1> <h2>WEAS가 여러 암세포의 증식에 미치는 영향</h2> <p>WEAS의 암세포 증식 억제의 정도를 다양한 암세포들을 대상으로 MTT assay를 통하여 조사하였나. Fig. 1의 결과에서 볼 수 있듯이 조사된 모든 종류의 암세포에서 WEAS 처리 농도 의존적으로 증식억제 효과를 보였으나, \( 1 \% \) 처리군에서 백혈병세포인 U937 및 HL60에서 \( 50 \% \) 이상의 중식억제 효과가 있었으며, 간암세포에서는 약 \( 10 \% \), 직장암세포에서는 \(20-40\% \)정도의 중식 억제를 보여주었다. 즉 WEAS는조사된 암세포들 중 특히 인체 백혈병세포에서 감수성이 높게 나타났음을 알 수 있었다.</p> <h2>WEAS의 처리에 의한 U937 세포의 중식억제, apoptosis 유발 및 미토콘드리아 기능 손상</h2> <p>이상의 결과에서 WEAS에 대한 감수성이 백혈병세포에서 가장 높았으며, 이러한 증식억제 효과가 apoptosis 유발과 연계성이 있을 것으로 예측되어, U937 세포를 대상으로 WEAS의 세포독성 정도 및 형태적 변화 관찰을 실시하였다. Fig. 2B에 나타낸 바와 같이, 일반적인 세포독성의 지표로 사용되는 LDH 유리의 정도는 WEAS 처리 농도가 증가할수록 동일 조건에서의 증식 억제효과(Fig. 2A)와 매우 연관성이 있는 결과를 보여주었다. Fig. 2C에서 볼 수 있듯이, WEAS 처리 농도가 증가할수록 U937 세포의 밀도는 매우 감소되었으며, 전체적으로 세포가 다소 길어지면서 불규칙적인 모양을 보여주었다. 또한 DAPI 염색에 의한 핵 모양의 변화에서도 전형적인 apoptosis가 일어난 세포에서 관찰되는 염색질의 응축에 의한 apoptotic body의 형성이 WEAS 처리 농도 의존적으로 증가하였음을 알 수 있었다. 아울러 apoptosis 유도의 또 다른 지표인 DNA 단편화 역시 WEAS 처리 농도가 높아질수록 증가되는 경향성을 보여주었으며(Fig. 3A), apoptosis가 일어난 세포의 집단으로 평가되는 세포주기 sub-G1기에 속하는 세포의 빈도도 WEAS 처리 농도의존적으로 현저하게 증가되었다(Fig. 3B). 이러한 WEAS 처리에 의하 U937세포의 apoptosis 유발은 세포 내 에너지 생산 기관으로 세포의 생존에 중요한 기능을 주행하는 미토콘드리아의 손상과 연계성을 가지는지를 조사하기 위하여 JC-1 염색에 의한 MMP 소실의 정도를 조사한 결과, Fig. 3C에 제시한 바와 같이 WEAS 처리에 의한 U937세포의 apoptosis 유발은 미토콘드리아 기능 손상과 연계성을 가지고 있음을 확인할 수 있었다.</p>