캡사이신을 섭취하지 않은 그룹은 캡사이신을 섭취한 그룹과 같은 스트레스 상태를 만들기 위해 위약을 투여해 설정했다. 운동그룹은 트레드밀 운동을 실시하도록 했다. 실험 사육은 2주동안 진행했으며 마지막날에는 12시간 이상 질식시켰고 마취 후 복부를 절취해 혈액, 간을 채취한 후 영하 70도에 냉동 보관해 분석을 실시했다. Total glyceride, Total cholesterol와 같은 혈중 지질은 효소법으로 각각 분석했다. 그리고 GSH 효소는 Glutathione level \( 1 \mathrm { mM } \) EDTA에 TCA를 처리한 조직과 0-phthaldehyde를 더해 25분간 실온 반응 후 분석했다.
<p>Capsiaicin 섭취 그룹들은 실험동물의 체중 당 \( 10 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \)의 capsaicin을 \( 3 \% \) ethanol과 \( 10 \% \) tween 80 으로 이루어진 capsaicin saline 용액을 운동 직전에 경구 투여하였다. capsaicin 비섭취군은 capsaicin 섭취 군과 동일한 스트레스를 적용하기 위해 위약을 투여 하였다.</p> <h2>운동 방법</h2> <p>운동그룹들은 트레드밀(Pro-Jog EJ36GLE, Korea Hi-Tech) 운동을 실시하였다. 트레드밀 런넝은 15마리가 동시에 달릴 수 있는 레인을 설치하여 Table 2에서와 간이 실시하였다.</p> <h2>실험 동물의 처리</h2> <p>실험사육 2주간의 최종일에는 12시간 이상 절식시켰고, ether 마춰 후 복부를 절취하여 혈액 및 간을 채취하여 \( -70 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에 냉동 보관하여 분석을 실시하였다.</p> <h2>혈중 지질 분석</h2> <p>Total glyceride, Total cholesterol, High density lip-oprotein cholesterol 및 Low lipoprotein cholesterol의 분석은 Hitachi 7150 (auto system)을 사용하여 효소법으로 각각 분석 하였으며, TG는 Sicdia L TG reagent를 사용하였고, T-C는 Sicdia L T-CHO reagent를 사용하여 검체 및 표준물질의 흡광도를 측정하여 파장 \( 50 \mathrm { ~nm } \)에서 측정하고, 생성된 자색 퀴논(qinone)색소의 흡광도를 측정하여 농도를 구하였다.</p> <h2>항산화 효소 분석</h2> <p>시약은 \( 2 ^ {\prime } , 7 ^ {\prime } \)-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCF-DAdye)는 Molecular Probes (Eugene, OR, USA)에서 구입하여 사용하였다. 항체인 p-Akt, Akt, catalase, SOD는 Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA)로부터 구입하였고, Anti-rabbit Ig G-horseradish peroxidase-conjugated 항체는 Amersham으로부터 구입하여 사용하였다.</p> <h2>GSH/GSSG 효소 분석</h2> <p>측정은 Glutathione level \( 1 \mathrm { mM } \) EDTA가 들어있는 \( 50 \mathrm { mM } \) phosphate buffer에 trichloric acid (TCA)를 치리한 조직을 더하여 0-phthaldehyde을 침가하여 25분 동안 실온에서 반응을 하였다. 또한 GSSG level은 TCA를 치리한 조직에 N-ethyl-maleimide를 침가하여 30분동안 실온에서 반응 후, \( 0.5 \mathrm { ~N } \) \( \mathrm { NaOH } \)와 0 -phthaldehyde를 침가하여 25분간 실온에서 반응하였다. 두 GSH 와 GSSG level은 excitation \( 360 \mathrm { ~nm } \) 및 emis-sion \( 460 \mathrm { ~nm } \)에서 30분간 Fluorescence Microplate reader FL500으로 측정하였다.</p>