프로젝트에서 TLC와 HPLC를 통해 quercetin 배당체로 추정된 PA5 및 PA6의 LC/ESI-MS/MS를 분석하였다. PA5의 경우 negative ion 모드에서 분자 이온 \( [\mathrm{M}-\mathrm{H}]^{-} \)가 \( \mathrm{m} / \mathrm{z} \) 433에서 관찰되었고, 이는 glucoside 단위의 소실로 인한 이온 피이크 \( (\mathrm{m} / \mathrm{z} 433 \rightarrow \mathrm{m} / \mathrm{z} 301) \)를 표현하였다. PA6의 LC/ESI-MS/MS 분석결과는 negative ion 모드에서 분자 이온 \( \left[\mathrm{M}-\mathrm{H}^{-}\right. \)가 \( \mathrm{m} / \mathrm{z} \) 447에서 나타났고, 이는 역시 glucoside 단위의 소실로 인한 이온 피이크 \( (\mathrm{m} / \mathrm{z} 447 \rightarrow \mathrm{m} / \mathrm{z} 301) \)를 나타내었다. 추가적으로 \( { }^{1} \mathrm{H} \)NMR 분석을 실시하여 PA6의 구조를 보다 정확히 확인하였고, 분석 결과는 다음과 같았다: \( \delta \mathrm{ppm} 7.34, 7.33-7.29, 6.91, 6.38, 6.21, 5.35, 4.23-4.21, 3.76-3.73, 3.32, 0.94 \). 이들의 분석 결과를 통해, PA6는 quercetin 3-O- \( \alpha \) -L-rhamnoside (quercitrin)로 식별되었다.
<h3>PA5 (HPLC peak 2 of ethyl acetate fraction):</h3> <p>TLC와 HPLC를 통해 quercetin 배당체로 추정한 PA5 (HPLC peak2)의 LC/MS/MS를 측정하였다. LC/ESI-MS/MS를 이용하여 분석한 결과, negative ion 모드에서 분자 이온 \( [\mathrm{M}-\mathrm{H}]^{-} \)가 \( \mathrm{m} / \mathrm{z} \) 433에서 나타났으며, glucoside 단위의 소실로 인한 이온 피이크 \( (\mathrm{m} / \mathrm{z} 433 \rightarrow \mathrm{m} / \mathrm{z} 301) \) 를 나타내었다. 또한 보다 정확한 구조 분석을 위하여 \( { }^{1} \mathrm{H}\) NMR 분석을 실시한 결과 (Fig.6), (400 MHz, CD \( \left.{ }_{3} \mathrm{OD}\right) \delta \mathrm{ppm} 7.53(1 \mathrm{H}, \mathrm{d}, J=1.82 \mathrm{~Hz} \), \( \left.\mathrm{H}-2^{\prime}\right), 7.49\left(1 \mathrm{H}, \mathrm{dd}, J=8.36,3.91 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-6^{\prime}\right), 6.90(1 \mathrm{H} \), d, \( \left.J=8.36 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-5^{\prime}\right), 6.40(1 \mathrm{H}, \mathrm{d}, J=1.48 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-8), 6.21 \) (1H, d, \( J=1.72 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-6), 5.47 \) (1H, s, H-1"), \( 4.33 \) (1H, d, \( \left.J=2.61 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-4^{\prime \prime}\right), 3.91\left(1 \mathrm{H}, \mathrm{d}, J=2.84 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-2^{\prime \prime}\right) \), \( 3.87\left(1 \mathrm{H}, \mathrm{d}, J=4.11 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-3^{\prime \prime}\right), 3.51(1 \mathrm{H}, \mathrm{dd}, J=3.91 \), \( \left.2.12 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-5^{\prime \prime}\right) \) 로 나타났다. 따라서 PA5는 quercetin-3- \( \alpha \)-L-arabinofuranoside (avicularin)로 확인되었다.</p> <h3>PA6 (HPLC peak 3 of ethyl acetate fraction):</h3> <p>TLC와 HPLC를 통해 quercetin 배당체로 추정한 PA6 (HPLC peak 3)을 LC/ESI-MS/MS를 이용하여 분석한 결과, negative ion 모드에서 분자 이온 \( \left[\mathrm{M}-\mathrm{H}^{-}\right. \)가 \( \mathrm{m} / \mathrm{z} \) 447에서 나타났으며, glucoside 단위의 소실로 인한 이온 피이크 \( (\mathrm{m} / \mathrm{z} 447 \rightarrow \mathrm{m} / \mathrm{z} \) \( 301) \) 를 나타내었다. 또한 보다 정확한 구조 분석을 위하여 \( { }^{1} \mathrm{H} \)NMR 분석을 실시한 결과(Fig. 7), \( \left(400 \mathrm{MHz}, \mathrm{CD}_{3} \mathrm{OD}\right) \) \( \delta \mathrm{ppm} 7.34\left(1 \mathrm{H}, \mathrm{d}, J=2.08 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-2^{\prime}\right), 7.33-7.29(1 \mathrm{H}, \mathrm{m} \), \( \left.\mathrm{H}-6^{\prime}\right), 6.91\left(1 \mathrm{H}, \mathrm{d}, J=8.29 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-5^{\prime}\right), 6.38(1 \mathrm{H}, \mathrm{d}, J= \) \( 2.09 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-8), 6.21(1 \mathrm{H}, \mathrm{d}, J=2.08 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-6), 5.35(1 \mathrm{H} \), d, \( \left.J=1.58 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-1^{\prime \prime}\right), 4.23-4.21\left(1 \mathrm{H}, \mathrm{m}, \mathrm{H}-2^{\prime \prime}\right), 3.76-3.73 \) (1H, m, H-3"), \( 3.32 \) (2H, m, H-4", 5"), \( 0.94(1 \mathrm{H}, \mathrm{d}, J= \) \( 6.10 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-6^{\prime \prime} \) 로 나타났다. 따라서 PA6은 quercetin 3-O- \( \alpha \) -L-rhamnoside (quercitrin)로 확인되었다.</p>