야위버섯의 구성성분을 분석하기 위해 조선대학교 생물공학 실험실에서 생산한 야위버섯 자실체를 시료로 사용했다. 조단백질, 조지방, 탄수화물, 회분 그리고 수분 등의 일반 성분을 측정하고 무기성분과, 구성아미노산 분석을 실시하였다. 유리아미노산은 absolute ethanol \( 1 \mathrm { ml } \)에 시료 \( 200 \mathrm { mg } \)을 첨가하여 상온에서 \(24\)시간 교반하여 추출하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>일반 성분 분석</h2> <p>본 실험에 사용한 아위버섯 자실체는 조선대학교 생물공학 실험실에서 생산한 것을 시료로 사용하였다. 수분, 회분, 탄수화물, 조지방, 조단백질은 식품공전의 일반성분 시험법에 따라 측정하였다.</p> <h2>무기성분의 분석</h2> <p>시료 \( 7.5 \mathrm { ~g } \)에 증류수 \( 500 \mathrm { ml } \)을 가하여 \( 100 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 24시간 가열 교반하여 여과 한 후 용액화된 시료의 주원소 및 미량 원소의 농도를 측정할 수 있는 flame and furnace, 4-lamp turret, Quadline background correction, GFTV로 된 원자 흡광 분광분석기(UNICAM 989)를 이용하여 분석을 하였다.</p> <h2>구성아미노산의 분석</h2> <p>아위버섯의 구성 아미노산 분석을 위한 시료의 전처리는 다음과 같은 방법으로 하였다. 시료 \( 1 \mathrm { ~g } \)을 아미노산 분석기 loading buffer (Lithium citrate \( \mathrm { pH } 2.2 \) ) \( 5 \mathrm { ml } \)에 넣고 초음파 추출을 30 분간 시행한 후 \( 0.45 \mu \mathrm { m } \) filter로 여과한 후 \( 10 \% \) \( \mathrm { SSA } \) (5-sulphosalicylic acid) \( 1 \mathrm { ml } \)과 위 시료 \( 1 \mathrm { ml } \)을 흔합한 후 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 1시간 방치하여 침전된 단백질을 제거한 후 여과 하였다.</p> <p>이 중 \( 10 \mathrm { mg } \) 을 취하여 PICO-tag 방법을 이용하여 PITC labeling한 후 얻은 시료 \( 400 \mu \mathrm { L } \) 중에서 \( 50 \mu \mathrm { L } \) 을 취하여 HPLC (Waters 510)를 이용하여 분석하였다. column은 High Reso-lution Column Bio 20 PEEK Lithium이며 유속은 buffer 250 \( \mathrm { ml } / \mathrm { hr } \), ninhydrin \( 20 \mathrm { ml } / \mathrm { hr } \) 이고 압력은 Buffer \( 55 \mathrm { bar } \), nin-hydrin 12 bar의 조건으로 구성 아미노산 분석을 하였다.</p> <h2>유리아미노산의 분석</h2> <p>시료 \( 200 \mathrm { mg } \) 을 absolute ethanol \( 1 \mathrm { ml } \)에 첨가하여 혼합한 후 상온에서 24시간 동안 교반하여 유리아미노산을 추출한다. 혼합액을 원심분리하여 상징액 \( 0.5 \mathrm { ml } \)을 취하여 Dowex 50 -X8 resin (200-400 mesh) column (made in a Pasteur pi-pette)을 통과 시킨다음 \( 10 X \) column volumn의 증류수로 column washing하고, \( 10 \mathrm { X } \) column volumn의 absolute eth-anol로 protein, phenolic compound, carbohydrates, lipid를 제거하고, \( 10 \mathrm { X } \) column volumn의 \( 2 \mathrm { ~N } \) ammonium hydroxide로 유리아미노산을 용출한다. Column 용출액은 rotary evap-orator를 이용하여 evaporation 시키고, 건조된 시료는 \( \mathrm { pH } \) \( 2.2 \) lithium citrate loading buffer를 이용하여 녹인 후 \( 0.2 \mu \mathrm { m } \) filter로 여과하였다.</p>