3T3-L1 adipocytes 세포의 대두부산물 처리 결과 두유와 침지수는 \(95\%\) 이상의 세포독성을 보였고 순물 처리시 \( 10 \mathrm {~ppm} , 25 \mathrm { ~ppm }, 100 \mathrm {~ppm}\)농도에서 각각 \(95.21 \% \), \( 92.12 \% \), \( 88.65 \% \)의 세포독성을 보였고 높은 농도처리시 세포 생존율이 감소하였다. 또한 두부부산물에 포함되어진 이소플라본이 전지방세포의 지방세포분화와 지방세포 형성을 억제하는 주요 인자임을 확인하였으로 상대적으로 적은 두유 및 순물에서도 유사한 분화억제효능이 있음을 알 수 있다.
<h2>대두부산물의 세포 생존율 측정</h2> <p>두부부산물 처리에 따른 3T3-L1 adipocytes 세포 생존율을 조사하기 위하여 \( 10 \mathrm { ~ppm } , 25 \mathrm { ~ppm } , 100 \mathrm { ~ppm } \) 농도의 대두부산물을 처리 한 후, 대조군과 비교하여 MTT분석을 하였다. 두유와 침지수는 고농도인 \( 100 \mathrm { ~ppm } \)농도 처리 시에 \(95 \% \) 이상의 cell viability를 보였으며 순물 처리시에는 \( 10 \mathrm { ~ppm } \)에서 \( 95.21 \%, 25 \mathrm { ~ppm } \) 에서 \( 92.12 \%, 100 \mathrm { ~ppm } \)에서 \( 88.65 \% \) 의 cell viability \( (p<0.05) \)를 보여 높은 농도 처리시에 세포 생존율이 일부 감소하는 것을 확인하였다.</p> <h2>지방 분화 억제 효능에 미치는 영향</h2> <p>3T3-L1 adipocytes의 분화 억제 효능에 미치는 영향을 분석하기 위하여 배양된 세포에 분화유도물질과 함께 침지수, 두유 및 순물 추출물을 각각 \( 10 \mathrm { ~ppm } , 25 \mathrm { ~ppm } , 100 \mathrm { ~ppm } \)의 농도로 처리하였다. 분화유도과정이 끝난 후 세포를 Oil Red O 염색하여 현미경으로 관찰한 후 지방함량을 정량하였다. 분화유도물질을 처리하지 않은 세포와 분화유도물질을 처리한 세포를 대조군으로 하였다. 분화유도물질을 처리한 세포와 비교하여 두유추출물을 처리한 군은 \( 10 \mathrm { ~ppm } \)에서 \( 92.77 \% \), \( 25 \mathrm { ~ppm } \)에서 \( 87.62 \% \), 그리고 \( 100 \mathrm { ~ppm } \)에서 \( 85.59 \% \), 순물 추출물을 처리한 군은 \( 10 \mathrm { ~ppm } \)에서 \( 94.42 \%, 25 \mathrm { ~ppm } \)에서 \( 87.09 \% \), \( 100 \mathrm { ~ppm } \)에서 \( 79.14 \% \)로 나타나 처리 농도가 증가함에 따라 지방세포 내 지방함량이 유의성 있게 감소되었다(Fig. 4A). 마찬가지로 Oil Red O 염색 후 현미경 관찰 시에도 추출물 농도가 증가함에 따라 염색된 지방함량이 감소함을 확인할 수 있었다. 따라서 두유와 순물의 경우 처리농도가 증가할수록 지방세포 분화 억제 효능이 나타남을 확인하였으며, 침지수의 경우는 \( 10 \mathrm { ~ppm } \)의 저농도 처리 시에도 \( 85.54 \% \)의 지방세포 분화 억제 효능이 나타남을 확인하였다. 또한 대두의 daidzein과 genistein을 \( 10 ~ \mu \mathrm { M } , 25 ~ \mu \mathrm { M } \)을 처리한 결과 대두에 함유된 isoflavone은 농도 의존적으로 분화억제 효능이 감소함을 확인하였다. 결과적으로 두부부산물에 포함되어진 isoflavone이 전지방세포의 지방세포 분화와 지방세포 형성을 억제하는 주요 인자임을 확인하였으며 위의 두 성분이 상대적으로 적은 두유 및 순물에서도 유사한 분화억제효능이 있음으로 보아 daidzein과 genistein 외에 또 다른 phytochemical이 존재하고 있음을 의미한다.</p>