NGF가 세포막의 high affinity receptor TrkA와 low affinity receptor에 결합하여 신호를 전달하는 것을 분석하기 위해 TMP21의 과발현을 사용한 연구결과, TrkA와 ERK의 인산화가 억제되고 Akt의 인산화가 증가하는 것을 관찰하였으며, 이는 neu-ritic outgrowth에 미치는 억제 효과를 나타냈다. 그러나 NGF 처리를 통한 자극은 감소된 TrkA와 ERK 인산화를 회복시켜주고, Akt 인산화는 촉진하는 것으로 관찰되며 신호전달과정의 억제는 NFG 처리에 의한 신호전달을 극복하지 못하는 것으로 사료되고, 낮은 결합력을 갖는 low affinity 수용체는 \( \mathrm { p } 75 ^ {\mathrm { NK } } \) 로 서 G-protein 수용체 그룹에 속한다. 더불어, TMP21에 의해 증가된 \( \mathrm { p } ^ {\mathrm { NT } } { } ^ {\mathrm { NR } } \) 과 \( \mathrm { RhoA } \) 의 발현 증가는 NGF 처리에의해 감소되고, high affinity 수용체의 반응과 정반대로 나타났다.
<p>체내로 분비된 NGF는 세포막에 분포하는 두 종류의 수용체(high와 low affinity receptor)에 결합하여 세포 내로 신호 를 전달한다. 두 종류의 수용체 중에서, 높은 결합력을 갖는 high affinity 수용체는 TrkA로서 세포질 쪽에 위치한 ty-rosin-kinase domain을 통하여 Akt 혹은 ERK를 거쳐 neu-ritic outgrowth를 유도할 수 있다. 특히, TrkA의 intra-cellular domain은 APP C-terminal과 상호작용을 통해 세포내 신호전달과정을 조절한다. 본 연구에서는 \( \gamma \)-secretase 를 억제하는 TMP21의 과발현이 APP와 TrkA의 상호작용, 그리고 downstream 신호전달 과정에 미치는 영향을 분석하 고자 하였다. 그 결과, TrkA와 ERK의 인산화가 억제되고, \( \mathrm { Akt } \) 의 인산화가 증가되는 것을 관찰할 수 있었으며, 이러한 결과는 TMP21의 가발현에 의해 \( \gamma \)-secretase가 억제되어 full length APP의 증가로 인한 TrkA와 APP의 interaction 증가에 따른 것으로 추정된다. 그러나 NGF 처리를 통한 자 극은 감소된 TrkA와 ERK 인산화를 회복시켜주고, Akt 인산화는 더욱 촉진하는 것으로 관찰되어 TMP21의 과발현에 의한 신호전달과정의 억제는 \( \mathrm { NFG } \) 처리에 의한 신호전달을 극 복하지 못하는 것으로 사료된다.</p> <p>한편, 낮은 결합력을 갖는 low affinity 수용체는 \( \mathrm { p } 75 ^ {\mathrm { NK } } \) 로 서 G-protein 수용체 그륩에 속하며, 세포질부위에 chopper domain과 death domain을 갖고 있으며, RhoA를 거쳐 \( \mathrm { Bcl } 2 / \mathrm { Bax } \) 의 발현을 조절한다. 또한, \( \mathrm { p } ^ {\text { 75 } } \) NTR 는 \( \gamma \) -secretase와 \( \beta \)-secretase에 의해 절단되어 세포질에 RhoA의 증가를 유도한다. 최근, 형질전환마우스를 이용한 \( \mathrm { AD } \) 와 \( \mathrm { p } ^ {\mathrm { NTR } } \) 의 상호관계에 대한 연구 결과는 APPsw/PS1dE9 형질전환마우스에서 \( \mathrm { p } 75 ^ {\mathrm { NTR } } \) 의 과발현은 neocortex에서 퇴행성neurites의 출현, aging의 증가, \( \mathrm { A } \beta \) 축적을 유도하였다[29].그러나 \( \mathrm { p } ^ { 2 } 5 ^ {\mathrm { NIR } } \) 의 결실은 뇌와 혈청에서 soluble \( \mathrm { A } \beta \) 의 감소와 insoluble \( \mathrm { A } \beta \) plaque의 증가를 유도함에 따라 \( \mathrm { p } 75 ^ {\mathrm { NTR } } \) 이 \( \mathrm { A } \beta \) 펩타이드 생성과 길접한 관계에 있음을 보여주고 있다. 또한 \( \mathrm { p } 75 ^ {\mathrm { NTR } } \) 의 proteolytic activity는 PS-1의 \( \mathrm { M } 146 \mathrm { ~V } \) 돌연변이에 의한 \( \gamma \)-secretase의 활성 증가에 의해서도 증가된다. 이러한 연구결과를 바탕으로 본 연구에서는 TMP21의 과발현이 \( \mathrm { p } 5 ^ {\mathrm { NTR } } \) 과 \( \mathrm { p } ^ {\mathrm { NT } } { } ^ {\mathrm { NTR } } \) downstream에 미치는 영향을 분석하였으며, 이러한 결과는 TMP21에 의한 \( \gamma \)-secretase의 활성감소가 \( \mathrm { p } 75 ^ {\mathrm { NTR } } \) 의 pro-teolytic activity 감소를 유도하고 이에 따라 \( \mathrm { p } 75 ^ {\mathrm { NIR } } \) 양이 증가 하는 것으로 추정된다. 또한, \( \mathrm { p } ^ {\text { NI5 } } { } ^ {\mathrm { NI } } \) 의 C-terminal과 상호작용 하는 RhoA-GDI는 \( \mathrm { p } ^ { 2 \mathrm { NTR } } \) 의 증가에 의해 RhoA 형태로 세포 질에서 증가하는 것으로 관찰되었다. 더불어, TMP21에 의해 증가된 \( \mathrm { p } ^ {\mathrm { NT } } { } ^ {\mathrm { NR } } \) 과 \( \mathrm { RhoA } \) 의 발현 증가는 \( \mathrm { NGF } \) 처리에 의해 감소 되었으며, 이러한 양상은 high affinity 수용체의 반웅과 정반 대로 나타났다.</p>