펜톤산화-열수처리 후 생성된 액상가수분해 산물에 있는 당 및 분해산물은 Aminex \( \mathrm { HPX } -87 \mathrm { H } \) column과 refractive index detector가 장착된 HPLC를 이용하여 분석하였으며, 이동상은 \( 5 \mathrm { mM } \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { SO } _ { 4 } \), flow rate은 \( 0.6 \mathrm { ~mL } / \mathrm { min } \) 이었고, 바이오매스의 구조적 특성은 fourier 변환 적외/근적외선 분광계 Spectrum \( 400 \)를 이용하여 분석하였다.
<h2>2.4 액상 및 고형바이오매스의 화학성분 분석</h2> <p>펜톤산화와 펜톤산화-열수처리 후 생성된 액상가수분해 산물에 포함되어 있는 당 및 분해산물은 Aminex \( \mathrm { HPX } -87 \mathrm { H } \) column( \(300 \times 7.8 \mathrm { ~mm } \), Bio-Rad, Hercules, USA)과 refractive index detector(Waters 2414 system; Alliance, USA)가 장착된 HPLC(Waters 2695 system; Alliance, MA, \( \mathrm { USA } \) )를 이용하여 분석하였으며, 이동상은 \( 5 \mathrm { mM } \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { SO } _ { 4 } \), flow rate은 \( 0.6 \mathrm { ~mL } / \mathrm { min } \) 이었다. Total phenolic compounds (TPC)의 함량은 Folin-Ciocalteu method를 이용하여 측정하였다. 액상가수분해산물에 존재하는 올리고머를 확인하기 위해 National Renewable Energy Laboratory(NREL)의 방법에 따라 post-hydrolysis를 수행하였다. 고형바이오매스의 구성성분은 NREL방법(Laboratory Analytical Procedure-Determination of structural carbohydrates and lignin in biomass)에 따라 분석하였다.</p> <h2>2.5 효소가수분해</h2> <p>전건시료 \( 2 \mathrm { ~g } \) 을 삼각 플라스크에 투입한 후, \( 50 \mathrm { mM } \) sodium citrate buffer( \( \mathrm { pH } 4.8 \))을 사용하여 총 부피를 \( 20 \mathrm { ~mL } \) 로 맞추고 \( 121 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \(15 \) 분간 멸균하였다. 효소는 Novozymes의 Cellic \( { } ^ {\circledR } \mathrm { CTec } 2(17.5 \mathrm { FPU } / \mathrm { biomass } ( \mathrm { g } )) \) 를 첨가하였고, \( 50 ^ {\circ } \mathrm { C } , 150 \mathrm { rpm } \) 조건에서 \(96 \) 시간 동안 효소가수분해를 수행하였다.</p> <h2>2.6 바이오매스의 구조적 특성</h2> <p>바이오매스의 구조적 특성은 fourier 변환 적외/근적외선 분광계(FT-IR/NIR) Spectrum \( 400 \)(PerkinElmer, United Kingdom)를 이용하여 분석하였다. 스펙트럼은 \(4000 \)- \(400 \) \( \mathrm { cm } ^ { -1 } \) 범위에서 해상도 \( 4 \mathrm { ~cm } ^ { -1 } \) 로 32 스캔하여 분석하였다. 결정화도 분석은 X'pert PRO Multi purpose X-ray Diffractometer(Panalitical, Netherland)를 이용하여 수행하였다. 분석은 \( 2 \theta = 5 \sim 50 ^ {\circ } \) 범위에서 가속전압 \( 40 \mathrm { kV } \), \( 30 \mathrm { ~m } \) 에서 측정하였다. 시료에 대한 결정성 영역은 Segal 방법을 이용하여 계산하였다.</p>