가시오가피는 강원도 양구군 고지대에서 재배해 잎, 뿌리, 줄기 및 열매 부분으로 나누어 건조시켜 판매하고 있는 것을 직접 구입하여 분쇄 후 시료로 사용,발효된 가시오가피 분말을 증류수에 \( 1 \%\) (\(\mathrm{w} / \mathrm{v} \)) 농도로 희석하여 교반한 후 \( \mathrm{pH} \) meter (Methrohm 691, Swiss)로 직접 \( \mathrm{pH} \)를 측정, 페놀성 화합물의 함량은 Folin-Denis법으로 비색시켜 spectrophotometer의 \( 760 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정,Flavonoid 함량은 Jia 등의 방법에 따라 각 발효된 분말을 \( 1 \% \) 농도로 만든 시료에 정제수와 \(5\%\) \( \mathrm{NaNO}_{2} \) 용액 및 \( 10 \% \) \( \mathrm{AlCl}_{3}\) \(\cdot\) \(6 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \)를 잘 혼합하여 반응시킨 용액을 spectropho-tometer의 \( 510 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>실험재료</h2> <p>본 실험에 사용한 가시오가피(Acanthopanax senticosus)는 2010년 11월에 강원도 양구군 고지대에서 재배해 잎, 뿌리, 줄기 및 열매 부분으로 나누어 건조시켜 판매하고 있는 것을 직접 구입하여 분쇄 후 시료로 사용하였다. 가시오가피 분말 시료에 3종류의 곰팡이 균주 Aspergillus oryzae KCCM 11372 (A. oryzae), Aspergillus kawachii KCCM 32819 (A. kawachii), Monascus purpureus KCCM 12002 (M. purpureus)를 한국 미생물보존센터로부터 분양 받아 가시오가피 발효에 사용하였다. 가시오가피의 잎, 뿌리, 줄기, 열매 분말을 전 배양 한 곰팡이 균사체에 \( 5 \%\) (\(\mathrm{v} / \mathrm{w} \)) 수준으로 섞은 다음 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 3일간 발효시켰다. 이때 발효과정 중에서 건조를 막기 위하여 멸균된 증류수를 일정량 뿌려주면서 발효를 진행시켰다. 발효된 시료는 완전히 건조시킨 후 분석에 사용하였다.</p> <h2>발효 가시오가피 분말의 \( \mathrm{pH} \) 및 산도 측정</h2> <p>발효된 가시오가피 분말을 증류수에 \( 1 \%\) (\(\mathrm{w} / \mathrm{v} \)) 농도로 희석하여 교반한 후 \( \mathrm{pH} \) meter (Methrohm 691, Swiss)로 직접 \( \mathrm{pH} \)를 측정하였다. 산도 측정은 \( 10 \% \) 시료액 \( 10 \mathrm{ml} \)을 취하고 증류수 \( 50 \mathrm{ml} \)를 가한 후 잘 흔들어 \( 1 \% \) phenolphthalein 용액 \(4 \sim 5\) 방울 떨어트리고 \( 0.1 \mathrm{~N} \mathrm{~NaOH} \)로 적정한 후 그 소모량을 측정하여 총 산도로 환산하였다. 추출물의 총 산도는 acetic acid 값인 0.0006을 계산식에 적용하였다.</p> <p>Total acidity (acetic acid, \(\%\), \(\mathrm{w}/\mathrm{v}\)) \( =[( \) titrated \( 0.1 \mathrm{~N} \mathrm{~NaOH} \mathrm{~ml} \times 0.0006) / \) sample \( \mathrm{ml}] \times 100 \)</p> <h2>페놀성 화합물 함량 측정</h2> <p>페놀성 화합물의 함량은 Folin-ciocalteu's phenol reagent를 이용한 Folin-Denis법으로 비색시켜 spectrophotometer (Hitachi U-2900, Tokyo, Japan)의 \( 760 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 이 때 함량은 tannic acid를 일정 농도 (\(0\)-\(500 ~\mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \))로 하여 시료와 동일한 방법으로 측정한 표준곡선으로부터 계산하였다.</p> <h2>Flavonoid 함량 측정</h2> <p>Flavonoid 함량은 Jia 등의 방법에 따라 각 발효된 분말을 \( 1 \% \) 농도로 만든 시료에 정제수와 \(5\%\) \( \mathrm{NaNO}_{2} \) 용액 및 \( 10 \% \) \( \mathrm{AlCl}_{3}\) \(\cdot\) \(6 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \)를 잘 혼합하여 반응시킨 용액을 spectropho-tometer (Hitachi U-2900)의 \( 510 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 이 때 함량은 표준 물질로서 (+)-catechin hydrate을 일정 농도(\(20\)-\(200 ~\mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}\))로 시료와 동일한 방법으로 측정하여 작성한 표준곡선으로부터 계산하였다.</p>