운동부하를 분석하기 위하여 수컷 흰쥐를 비운동군과 운동군으로 나누어 운동군의 경우에는 간헐적 운동부하 훈련을 실시하였다. 식이섭취량과 체중증가량을 측정하여 식이효율을 계산하였고, 마취 후 심장에서 채혈을 하여 단백질, 알부민, 중성지방, 콜레스테롤 등의 함량을 측정하였다.
<h2>운동부하를 위한 실험동물의 사육 및 식이조성</h2> <p>체중이 \(90 \sim 100 \mathrm{g}\)인 Sprague-Dawley계 3주령 수컷 흰쥐를 (주)샘타코(Osan, Korea)로부터 분양 받아 온도(\( 22 \pm 2^{\circ} \mathrm{C}\)), 습도(\( 50 \pm 5\% \)) 및 명암주기(12시간, 07:00~19:00)가 자동설정된 동물 사육실(DJ1-252-2, Daejong Instrument Industry Co. Ltd., Seoul, Korea)에서 1주간 적응시켰다. 그 후 난괴법에 따라 각 군에 8 마리씩 비운동군(Control), 운동대조군(Ex-con), 운동 \(+\)BHF1 급이군(Ex-BHF1), 운동\(+\)BHF2 급이군(Ex-BHF2)의 4개 군으로 구분하였으며, 사육기간 동안 물과 식이는 자유급이하였다.</p> <h2>운동부하 조건</h2> <p>운동군은 2일 간격으로 일정한 시간(오전 10시)에 소동물용 트레드밀(Pro-jog EJ36GLE, Korea Hi-Tech, Siheung, Korea)을 이용하여 간헐적 운동부하 훈련을 5주 동안 실시하였다. 운동을 시작한 1주에는 경사도 없이 \( 15 \mathrm{m} / \mathrm{min} \)의 속도로 주행을 실시하였으며, 2~5주 동안 \( 15^{\circ} \)의 경사도에서 \( 20 \mathrm{m} / \mathrm{min} \)의 속도로 1회 20분씩 실시하였다.</p> <h2>식이섭취량, 식이효율 및 체중측정</h2> <p>사육기간 동안 식이는 매일 오후 5시에 급이하여 다음날 오전 10시경에 잔량을 조사하여 1일 식이섭취량으로 산출하였다. 물은 수도수를 매일 공급하였으며, 체중은 1주에 1회 일정시간에 측정하였다. 1 일 평균 식이섭취량은 실험사육 5주 간의 총 식이섭취량(\( \mathrm{g} \))을 총 실험일수(day)로 나누어 산출하였으며, 식이효율(food efficiency ratio, FER)은 5주 동안의 체중증가량을 총 식이섭취량으로 나누어 계산하였다.</p> <h2>실험동물의 처리</h2> <p>모든 실험동물은 실험 최종일에 16시간 절식시킨 후, 상기와 동일한 수준의 운동부하를 가한 직후 에테르 마취하여 심장에서 채혈하였다. 혈액은 30분간 빙수 중에 정치시켜 \(980 \times \mathrm{g} \)에서 15분간 원심분리(Mega 17R, HANIL, Incheon, Korea)하여 혈청을 얻었다. 간 조직은 채혈 직후 적출하여 생리식염수로 혈액을 충분히 씻은 다음 흡수지로 물기를 제거하고 액체질소로 급냉동시킨 후 \( -70^{\circ} \mathrm{C} \)에 보관하였다.</p> <h2>혈액 성분 분석</h2> <p>혈청 중 단백질, 알부민, 중성지방, 총 콜레스테롤 및 HDL-콜레스테롤 함량은 효소법에 의한 정량용 kit (Asan pharm. Co., Seoul, Korea) 시약을 사용하여 분석하였다. 글로불린 함량은 단백질 양에서 알부민 함량을 뺀 값으로 계산하였다. 혈청 총 지질 함량은 Frings 등의 방법에 따라 혈청 \( 20 \mu \mathrm{l}\)를 진한 황산으로 분해시키고 phospho-vanillin 시약을 \( 10 \mathrm{ml} \) 첨가하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 15분간 반응시켜 시료 무첨가구를 대조로 하여 \( 540 \mathrm{nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. LDL-C (low density lipoprotein cholesterol) 함량은 혈청 total cholesterol\(-\)(HDL-C \(+\) triglyceride\(/5\))의 계산식에 의해 산출하였고, 총 콜레스테롤 함량을 HDL-콜레스테롤 함량으로 나누어 HTR (ratio of total cholesterol to HDL-C)을 계산하였다.</p>