Sakaguchi 등은 Xenopus laevis의 in vitro 실험을 통해 bFGF가 망막색소상푀의 형질분화와 렌즈의 재생에 중요한 역할을 하는 것을 발견하였다. 본 연구에서는 HGF와 bFGF의 조합이 간, 소화관, 골격형성 등 다양한 반웅을 유도할 수 있음을 제시하였지만, 이들 기관의 형성은 복잡한 발생과정과 많은 성장인자 및 대사물질이 필요하다. 그러나 본 연구방법에서는 약 1주일의 장기 배양 과정에서 이미 형성된 기관이 퇴화하는 문제가 발생하였다. 결론적으로, Xenopus 동물극분리편을 HGF와 bFGF로 배양하면 신경조직, 눈, 근육 등의 분화율이 각각 단독 처리시보다 더 높아진다는 결과를 확인하였다. 이 결과는 bFGF의 신경유도능과 HGF의 세포증식 및 분화능 증가의 결과로 해석되었다.
<p>다음으로 Sakaguchi등은 Xenopus laevis의 in vitro 실험에서 bFGF 가 망막색소상푀의 형질분화와 렌즈의 재생을 유도하는 중요한 인자로 작용한다고 하였으며, 본 연구에서의 눈의 분화는 bFGF 의 이러한 작용의 영향일 것으로 생각 된다. 단일클론항체 \( 40 \mathrm { ~A } 11 \) 와 25F5를 사용한 정상배와 흔합처리한 분리편에서 주로 망막색소상피층이 뚜럿이 염색된 것을 관찰하였으며 단일클론항체 \( 40 \mathrm { ~A } 11 \) 과 25F5가 모두 \( \mathrm { Y } 3 \mathrm { H } \) 군에 속하는 항체로서 눈의 RPE65를 인식한 것을 뜻하며 눈의 망막색소상피가 분화하였다는 것을 의미한다.</p> <p>HGF 와 bFGF의 조합에 의해 간, 소화관, 골격형성 등 다 양한 반웅을 기대할 수 있으나 이들 기관이 출현하기까지는 장기간의 배양, 즉 발생이 더욱 진행된 배의 상태가 요구되 고 발생이 진행됨에 따라 현재까지 밝혀지지 않은 수많은 성 장인자와 대사물질이 차례로 요구됨에도 불구하고 본 실험 과 같은 배양방법에 의해서는 stage 43 이상의 장기간 배양, 즉 1 주일 정도의 배양에 의해 이미 동물극 분리배양편 내에 서 형성되었던 기관들도 퇴축되어 버리므로 상기의 후기 발 생 기관분화를 확인하는 것은 매우 어려운 일이다.</p> <p>결론적으로, Xenopus 동물극분리편을 \( \mathrm { HGF } \) 와 \( \mathrm { bFGF } \) 의 복 합처리 배양했을 때 HGF 와 bFGF 각 각의 단독처리시 보다 신경조직과 눈, 그리고 근육 등의 기관 분화율이 더 높은 것 으로 나타났으며 이는 bFGF 의 강한 신경유도능과 HGF의 강한 세포증식 및 분화능에 대한 상승작용의 결과로 생각된다.</p>6,7 통합<h1>요약</h1> <p>FGFs는 Xenopus의 초기 배발생에서 중배엽 형성, 전후축 패턴형성, scatter factor로서 낭배기의 기관형성에 관여하는 등 다양한 기능을 가지고 있는 것으로 알려져 있다. 그 중 bFGF 는 배양 분리편으로부터 다양한 기관을 유도해낼 수 있 으며 그 효과는 처리시간 및 농도 의존적이라고 알려져 왔다. 본 연구는 Xenopus의 예정표피역을 분리하여 bFGF와 HGF 을 단독 및 복합처리 하였을 때 기관분화 및 유도효과를 검토하기 위하여 실시하였다. 단독처리 및 복합 처리된 배양 역에 동물극 분리편을 정상배가 st. 43 에 이를 때까지 \( 20 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 3 일간 배양하여 조직학적 및 면역조직화학적 방법으로 조직의 분화양상을 확인하였다. 성장인자는bFGF를 \( 0,0.5,1.10 \). \( 50 \mathrm { ng } / \mathrm { ml } \) 의 농도와 HGF를 \( 0,1,10,50,100 \mathrm { ng } / \mathrm { ml } \) 의 농도로 조합하여 처리한 결과 bFGF 단독처리 때보다 HGF 와의 혼합처리에서 기관분화율의 상숭효과가 관찰되었다. 분화된 기관은 \( 1 \mathrm { ng } / \mathrm { ml } \) 의 \( \mathrm { bFGF } \) 와 \( 10 \mathrm { ng } / \mathrm { ml } \) 의 HGF, \( 10 \mathrm { ng } / \mathrm { ml } \) 의 bFGF와 \( 1 \mathrm { ng } / \mathrm { ml } \) 의 HGF 의 농도에서 매우 다양한 것으로 나타났다. 눈은 1 과 \( 10 \mathrm { ng } / \mathrm { ml } \) 의 bFGF, 그리고 1 과 \( 10 \mathrm { ng } / \mathrm { ml } \) 의 HGF 농도조합에서 높은 비율로 분화하였다. 또한 분리편 배양에 의해 유도된 눈과 정상 배의 눈에서 RPE65를 인식하는 단일클론 항체 \( 40 \mathrm { ~A } 11,25 \mathrm { ~F } 5 \) 를 사용하여 AP 반응이 강하 게 나타나 눈의 유도블 확인할 수 있었다.</p>