a-Glucosidase 활성억제 효과는 Tibbot의 방법으로 측정했다. a-Glucosidase 활성억제 효과는 생성된 9-nitrophenol(PNP) 양을 \( 400 \mathrm { ~nm } \) 에서 spec-trophotometer로 흡광도를 측정하여 저해율을 산출하였다.아질산염 소거능은Gray와 Dugan의 방법을 변형하여 실시하였다. 아질산염 소거능은실온에 방치한 후 \( 520 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하여 잔존하는 아질산염을 구하였다.
<p>SOD activity \( ( \%)=(1-A / B) \times 100 \)</p> <p>A: 시료 첨가구의 흡광도 B: 시료 무첨가구의 흡광도</p> <h1>a-Glucosidase 활성억제 효과 측정</h1> <p>감태 효소분해산물의 a-glucosidase 활성억제 효과는 Tibbot의 방법[33]에 따라 측정하였다. 기질 용액은 \( 50 \mathrm { mM } \) sodium succinate buffer \(( \mathrm { pH } \) 4.2)에 \( \mathrm {\rho } \)-nitrophenol-a-D-gluco-pyranoside (PNPG, Sigma)를 용해시켜 \( 1 \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \) 의 농도로 기질을 만들고, 기질용액 \( 0.2 \mathrm { ml } \) 과 효소액(Sigma) \( 0.075 \) \( \mathrm { unit/ml } \) 혼합하여 대조구는 \( 0.1 \mathrm { ml } \) TE buffer \( ( \mathrm { pH } 8.0) \), 반응구는 시료 \( 0.1 \mathrm { ml } \) 을 넣어 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 분간 반응시킨 후, \( 1 \mathrm { ~N } \) \( \mathrm { NaOH } 0.1 \mathrm { ml } \) 를 첨가하여 발색시켰다. Positive control로는 acarbose를 사용하여 실험하였다. a-Glucosidase 효소 활성측정은 생성된 9-nitrophenol (PNP) 양을 \( 400 \mathrm { ~nm } \) 에서 spec-trophotometer로 흡광도를 측정하여 다음의 식으로 저해율을 산출하였다.</p> <p>저해율 \( ( \%)=[1-( \) 반응구의 \( \mathrm {\rho } \)-nitrophenol생 성량/대조구의 p-nitrophenol생성량 \( )] \times 100 \)</p> <h1>아질산염 소거능 측정</h1> <p>감태 효소분해산물의 아질산염 소거능은 Gray와 Dugan의 방법을 변형하여 측정하였다. 아질산염 소거능은 아질산염용액에 시료 용액을 가하고 여기에 \( 0.1 \mathrm { ~N } \mathrm { HCl } \) 및 \( 0.2 \mathrm { M } \) 구연산완충용액을 사용하여 반응 용액의 \( \mathrm { pH } \) 를 각각 \( 1.2,3.0 \) 및 \( 6.0 \) 으로 조정하여 사용하였다. 반응물을 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 1 시간 동안 반응시킨 후 Griess 시약을 가하여 15 분간 실온에 방치시킨 다음 \( 520 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하여 잔존하는 아질산염을 구하였다. 아질산염 소거능은 다음 식에 따라 계산하였다.</p>