청목노상 잎 시료의 callus 형성에 대한 연구 결과, Murashige와 Skoog의 MS배지와 saccharose, 2,4-D를 이용하였다. 배양시간에 따른 callus 증식 실험 결과, 20일이 적절한 시간으로 확인되었다. 배양온도에 따른 실험에서는 \( 27 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 가 가장 적합한 온도로 판단되었다. 추가로, 생장조절제로서 NAA, 2,4-D, kinetin, BA를 이용하여 callus 형성에 대한 실험을 진행하였으며, 특히 NAA, 2,4-D 및 BA의 농도에 따라서 캘러스 성장률에 변화가 있었음을 확인하였다.
<h2>청목노상의 callus유도를 위한 spot 배양</h2> <p>청목노상 잎 시료를 이용한 callus 유도는 Murashige와 Skoog의 MS배지를 사용하여, 탄소원으로 saccharose를 \( 30 \mathrm { ~g } / l \)의 농도로 처리하였으며, 생장조절제로서 2,4-di-chlorophenoxy acetic acid (2,4-D)를 \( 2 \mathrm { mg } / l \)의 농도로 처리된 배지에 시료를 치상하고 \( 27 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 암배양 하였다. MS고체배지를 이용하여 1개월간 배양한 결과 Fig. 3과 같이 잎으로부터 유도된 청목노상 callus \( 12.5 \mathrm { ~g } \)을 얻을 수 있었다.</p> <h2>청목노상의 callus 평판배양에 미치는 배양시간의 영향</h2> <p>Spot 배양에서 획득한 청목노상 callus를 증식시킬 목적으로 캘러스(callus) 배양에 미치는 배양시간을 조사하기 위하여 생장조절제로서 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D)를 2 \( \mathrm { mg } / \mathrm { l } \) 의 농도로 처리된 MS배지에 spot 접종하고 30 일간 배양 시킨 결과, Fig. 4 에서와 같이 20 일 배양 시 callus 생체중량이 \( 0.98 \pm 0.2 \mathrm { ~g } \)으로 자랐으며, 이후 배양 30 일까지 배양 callus의 중량 변화는 크게 나타나지 않아 20 일 배양이 최적인 것으로 판단하였다.</p> <h2>청목노상의 callus 평판배양에 미치는 배양온도의 영향</h2> <p>청목노상의 캘러스 배양을 위한 최적 배양온도를 조사하기 위하여 생장조절제로서 2,4-dichlorophenoxy acetic acid (2,4-D)를 \( 2 \mathrm { mg } / I \)의 농도로 처리된 MS 배지에 callus를 접종하 고 \( 25 \sim 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 까지 다양한 온도에서 20 일간 배양시킨 결과, Fig. 5 에서와 같이 \( 27 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 배양하였을 때 callus 생체중이 \( 1.05 \pm 0.1 \mathrm { ~g } \) 으로 자라 최적 배양온도는 \( 27 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 로 정하였으나, \( 25 \sim 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \)의 배양온도 구간에서의 온도 간 차이는 거의 없는 것으로 판단되었다.</p> <h2>청목노상 callus 평판배양을 위한 생장조절제 단독 처리의 영향</h2> <p>청목노상의 callus 형성에 미치는 생장조절제의 영향을 규명하기 위해 auxin으로써 2,4-D와 NAA를 사용하였고, cyto-kinin으로써 kinetin과 BA를 \( 1 \sim 3 \mathrm { mg } / \mathrm { l } \) 의 농도로 혼합 조제한 MS배지에 치상하여 callus 형성양상을 조사한 결과, Table 1 과 같이 나타났다. NAA, 2,4-D, kinetin 등은 \( 2 \mathrm { mg } / I \)의 농도로 \( 27 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 20일간 배양했을 때, \( 1 \mathrm { mg } / \mathrm { l } \)이나 \( 3 \mathrm { mg } / I \) 의 농도보다 높은 캘러스 성장률을 확인 할 수 있었고, BA의 경우 \( 1 \mathrm { mg } / \mathrm { l } \) 농도에서 상대적으로 높은 캘러스 성장률을 나타냈으며, Kinetin은 NAA, 2, 4-D, BA와 같은 생장조절제보다 캘러스 형성률이 미흡한 것으로 나타났다.</p>