LCMS 분석시 Waters ACQUITY QDA가 장착된 Waters e2695를 이용하여 WF, IF, PF, GF, 표준시약을 분석했고 C18 가드컬럼이 있는 Xbridge-C18\((250\times 4.6 \mathrm {~mm}, 5 \mu \mathrm {m})\)을 사용하였다. DPPH 라디칼 소거 활성은 Bondet 방법으로 측정되었고 \(300\mu \mathrm{M}\) 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl를 에탄올에 녹인 용액을 사용한다.
<h2>LCMS 분석</h2> <p>Waters ACQUITY QDA가 장착된 Waters e2695 (Milford)을 사용하여 WF, IF, PF, GF 및 표준 시약을 분석했다. 분석은 C18 가드 컬럼이 있는 Xbridge-C18 \( (250 \times 4.6 \mathrm { ~mm } , 5 \mu \mathrm { m } ) \) 을 사용하여 수행되었다. 이동상 용매는 acetonitrile (용매 A)과 \( 1 \% \) 의 acetic acid를 포함하는 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } \) (용매 B)로 구성했다. 유속은 gradient 조건으로 45 분 동안 \( 0.3 \mathrm { ~mL } / \mathrm { min } \) 으로 일정하게 유지되었으며, 0 분, \( 99 \% \) B ; 0-8 \) 분, \( 99 \% \) 에서 \( 80 \% \) B ; 8-40 분, \( 80 \% \) 에서 \( 70 \% \) B ; 40-45 분, \( 70 \% \) 에서 \( 60 \% \) B 로 설정하였다. 시료 주입 용량은 \( 10 \mu \mathrm { L } \) 였다. 질량 분석기는 electrospray ionization 방식을 적용하였으며, capillary voltage는 \( 0.8 \mathrm { kV } \), cone voltage 는 \( 30 \mathrm { ~V } \), negative scan mode (100-800 Da)를 사용하였다.</p> <h2>DPPH 및 ABTS 라디칼 소거 활성</h2> <p>\( \mathrm { DPPH } \) 라디칼 소거 활성은 Bondet 방법에 따라 일부 수정하여 측정 되었다. \( 300 \mu \mathrm { M } \) 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl (DPPH, Sigma-Aldrich)를 에탄올에 녹여 용액을 준비했다. 용액은 \( 515 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도 값 1.00 으로 조정했다. \( 40 \mu \mathrm { L } \) 의 시료 \( (0.32,1.6 \), \( 8,40,200 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } ) \) 과 \( 760 \mu \mathrm { L } \) 의 DPPH 용액을 혼합했다. 혼합물은 실온의 암실에서 20 분 동안 배양 했다. 흡광도는 \( 515 \mathrm { ~nm } \) 에서 UV/Visible spectrophotometer (Xma-3000PC, HumanCorp, Seoul, Korea)를 사용하여 측정했다. DPPH 라디칼 소거 활성은 다음 식에 따라 계산되었다.</p>