MTT 분석법을 사용하여 수산물 및 수산 발효식품의 열수 추출물 첨가에 의한 항암효과를 조사한 결과, 열수 추출물 첨가가 세포 독성을 억제하는 항암효과를 나타내었다. 이는 dye exclusion test나 \( \left[{ }^{3} \mathrm{H}\right]- \) thymidine uptake assay와 비교하여 재현성이 우수하고 간편하게 세포독성여부를 대량검색할 수 있는 방법으로 사용되고 있다. 전어밤젓의 methanol 추출물 첨가로 인한 항암효과 실험에서 농도 \( 1000 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)에서 높은 저해률을 보였다. 전어밤젓은 DHA와 EPA를 다량 함유하고 있어서 성인병 예방과 순환계질환에 탁월한 효과가 있다고 나온다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>수산물 및 수산 발효식품의 열수 추출물 첨가에 의한 항암효과</h2> <p>\( 3 \)-(\( 4 \),\( 5 \)-dimethylthiazol-\( 2 \)-yl)-\(2 \),\(5 \)-diphenyl tetrazolium bromide(MTT) 분석법은 살아있는 세포 내 미토콘드리아의 dehydrogenase에 의해서 생성되는 formazan을 spectrophotometer를 이용하여 측정람으로써 세포에 대한 독성을 조사하는 방법으로서, 각종 항암제에 대한 in vitro 세포독성에 관한 연구에서 사용되어온 dye exclusion test나 \( \left[{ }^{3} \mathrm{H}\right]- \) thymidine uptake assay와 비교 시 실험 조작이 매우 간편 하고 재현성이 우수하여 세포독성여부 대량검색이나 초기 검색단계에 적당한 방법으로 많이 이용되고 있다. 세포독성은 비특이적 방어기전으로서 암세포에 직접적으로 손상을 줄 뿐만 아니라 동물 생체내 림프구나 대식세포와 같이 표적세포에 대하여 세포독성효과를 나타내는 작동세포를 자극함으로써 그 세포독성효과를 항진시키는 것으로 보고 되어 있다. 그러므로, 본 연구에서는 MTT assay로 젓갈 종류별 시료를 최종농도 \( (0 \mu \mathrm{g}, 63 \mu \mathrm{g}, 125 \mu \mathrm{g}, 250 \mu \mathrm{g} \), \( 500 \mu \mathrm{g} \), \( 1000 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}) \)별로 각각 조제하여 HepG2 인체 간암세포의 생존저해 효과를 알아 보았는데, 이중 암세포에 대한 독성효과가 더 이상 크게 증가하지 않는 농도인 \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)을 선택하여 여러 종류의 젓갈에 대한 세포독성효과를 Fig. \( 1 \)에, 나타내었다. 개불은 \( 79.3 \% \) 로 가장 높은 세포독성효과를 나타내었으며, 명태식해 \( 76 \% \), 헤시코 \( 62.1 \% \), 가자미식해 \( 60.5 \% \), 오징어식해 \( 54.8 \% \)이었다. 개불의 세포독성 효과는 당단백질의 면역자극에 의해 항암효과를 나타냈다는 보고가 있었는데, 본 연구에서도 가장 강한 세포독성을 나타내었으나, 그 원인 물질에 대한 규명은 계속적인 연구를 통해 규명되어야 할 것으로 기대된다. 반면 전어밤젓에서의 저해율은 \( 6.2 \% \) 로 가장 낮은 저해율을 보여 암세포 성장 저해 효과를 관찰할 수 없었다.</p> <h2>개불 열수 추출물의 농도별 첨가에 따른 항암효과</h2> <p>저해효과가 가장 높게 나타났던 개불의 농도별 저해율을 알아보기 위해 그 결과를 Fig. 2에 나타내었다. 각각의 농도 \( (0 \mu \mathrm{g}, 63 \mu \mathrm{g}, 125 \mu \mathrm{g}, 250 \mu \mathrm{g}, 500 \mu \mathrm{g}, 1000 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}) \)에서 \( 46.4 \% \), \( 68.8 \%, 73.5 \%, 79.3 \%, 94.5 \% \)로 나타났다. 즉, 시료의 양을 점차 증가시키면서 HepG2 세포주에 첨가할수록 높은 효과를 얻을 수 있음을 확인하였다. 결과적으로 개불의 농도가 \( 1000 \mu \mathrm{g} / \mathbb{\mathrm {ml}} \)일때 \( 94.5 \% \)로 아주 높은 암세포 저해효과를 나타내었다.</p> <h2>수산물 및 수산 발효식품의 methanol 추출물 첨가에 의한 항암효과</h2> <p>전통 수산 발효식품 및 해조류의 methanol 추출물로 다양한 농도에서 항암활성을 실험하고 더 이상의 항암활성의 큰 증가를 나타내지 않는 농도인 \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 의 농도를 선택하여 다양한 종류의 젓갈에 대한 세포독성효과를 Fig. 3에 나타내었다. 전어밤젓에서의 항암효과가 \( 77.6 \% \)로 가장 높은 세포독성효과를 나타내었으며, 이 외에 가자미식해 \( 65.6 \) \( \% \), 오징어식해 \( 57.6 \% \), 꼴뚜기젓은 \( 57.5 \% \)의 비교적 높은 저해율을 보였고, 토하젓의 경우, 저해율이 \( 41.4 \% \)로 \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 농도에서도 \( 50 \% \) 미만의 항암활성을 나타내었다.</p> <h2>전어밤젓 methanol 추출물의 농도별 첨가에 따른 항암효과</h2> <p>높은 저해율을 보였던 전어밤젓의 공도별 저해율을 알아보기 위해 결과를 Fig. 4에 나타내었다. 전어밤젓의 각각의 농도 \( (0 \mu \mathrm{g}, 63 \mu \mathrm{g}, 125 \mu \mathrm{g}, 250 \mu \mathrm{g}, 500 \mu \mathrm{g}, 1000 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}) \) 에서의 저해율은 \( 35.7 \%, 48.4 \%, 58.4 \%, 77.6 \%, 90 \% \) 로 나타났다. 전어밤젓 \( 1000 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 농도에서 \( 90 \% \) 이상의 높은 저해율을 보여 다른 종류에 비해 가장 효과가 높게 나타났음을 알 수 있다. 이 또한 시료의 농도가 점차 증가함에 따라 저해 효과도 높아진다는 것을 알 수 있다. 이는 전어밤젓의 지방산 함량에 기인하는 것으로 사료된다. 전어밤젓의 전체 지방산중에서 불포화지방산의 함량이 높다는 보고에 의하면, 전어밤젓은 고도의 불포화지방산인 DHA와 EPA를 다량 함유하고 있으며 그중 DHA는 인체의 심장 및 뇌신경에 존재하며 항암효과와 기억력 및 학습력 증진 성인병 예방에 탁월한 효과가 인정되어 있고, EPA는 혈전증, 동백경화, 순환계질환 및 대장암에 효과가 있다고 보고된 바 있다.</p> <h2>암세포를 \( 50 \% \) 이상 저해시킨 수산물 및 수산 발효식품</h2> <p>대조구에 비해 암세포를 \( 50 \% \) 이상 저해시키는 전통 수산 발효식품 및 해조류의 열수 및 methanol 추출물의 시료종류를 Table \( 1 \)에 나타내었다. 다른 종류의 젓갈류보다는 식해류 쪽이 대부분 \( 50 \% \) 이상의 저해율을 나타내어 비교적 높은 세포독성효과를 나타내었다. 이는 소금과 어패류만을 침장원으로 하는 젓갈류와는 달리 식해는 곡류와 여러 부재료를 혼합해 숙성 발효시킨다는 점에서 부재료로 첨가되어지는 마늘, 고춧가루등에 함유 되어 있는 성분들 즉, 마늘은 항암작용을 하는 물질인 allicin을 비롯한 함황 물질과 linoleic acid에 의해 인체 암세포의 성장을 억제할 뿐만 아니라 생명을 연장하는 효과도 관찰된 바 있으 며, 고추의 매운맛 성분인 capsaicine은 위암발생의 원인물질로 여겨져 돌연변이 유발성에 대한 상반된 보고도 있 었으나, 고추 속에는 비타민 C와 carotenoids등이 함유되어 있어 오히려 돌연변이 유발을 억제하는 것으로 보고되고 있어서 이들 부재료의 성분들이 식해 추출물에서 항암 작용을 돕는 것으로 사료된다.</p>