Fridovich 방법에 기반하여 SOD 활성을 측정하였으며, 이는 superoxide anion의 감소로 인한 cytochrome c의 변화속도 감소로 판단하였다. 또한, Nose의 방법을 이용하여 linoleic acid를 기질로 삼아 시료의 지질 과산화물 생성 억제 효과를 측정하였다. 특히 시험관에 linoleic acid와 시료를 넣고, 일정 시간 동안 산화를 촉진시킨 후, chloroform/acetic acid와 증류수, 전분 시액을 첨가하여 sodium thiosulfate 용액으로 역적정하여 POV를 측정하였다.
<h2>Superoxide dismutase(SOD) 활성 측정</h2> <p>SOD의 활성 측정은 Fridovich 방법에 준해서 측정하였다. Xanthine/xanthine oxidase 반응으로 생성된 sup-eroxide anion에 의해 cytochrome c가 환원되는 것을 측정하였고, SOD에 의하여 superoxide anion의 양이 감소하여 cytochrome c의 변화속도가 감소하는 것으로 SOD 활성을 측정하였다.</p> <p>Cyochrome c, \( 38 \mathrm { mg } \), \(2 \mu \mathrm { M } \) xanthine \( 10 \mathrm { ~mL } \)( \(0.001 \mathrm { ~N } \mathrm { NaOH } \)), \(50 \mathrm { mM } \) sodium phosphate buffer \( ( \mathrm { pH 7.8 } \), \(0.1 \mathrm { mM } \) EDTA) \( 100 \mathrm { ~mL } \) 를 혼합한 기질액 \( 2 \mathrm { ~mL } \) 에 희석한 시료를 넣고 2분간 안정화 시킨 후 xanthine oxidase ( \( 0.2 \mathrm { unit } / \mathrm { mL } \), \( 0.1 \mathrm { mM } \) EDTA) \( 50 \mu \mathrm { L } \) 를 cuvette에 넣고 혼합하여 spec-trophotometer(UV-2100, Shimagu cO. Japan)를 이용하여 \( 550 \mathrm { ~nm } \) 에서 2분간 흡광도를 측정하였다.</p> <h2>Peroxide value(POV) 측정</h2> <p>시료의 지질 과산화물 생성 억제 효과를 linoleic acid를 기질로 사용하여 Nose의 방법에 따라 POV를 측정하였다. Linoleic acid \( 100 \mu \mathrm { L } \) 와 각 시료 ( \( 5 \mathrm { mg } / \mathrm { mL } \)) \(10 \mu \mathrm { L } \)를 \( 1.6 \mathrm { ~cm } \times 6 \mathrm { ~cm } \) 의 시험관에 넣어 \( 50 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 항온기에서 24시간 저장하여 산화를 촉진시킨 후 chloroform/acetic acid( \(2:3, \mathrm { v } / \mathrm { v } \)) \(35 \mathrm { ~mL } \) 를 첨가하고 1분간 격렬하게 혼합한 후 암소에서 5분간 방치시키고, 여기에 증류수 \( 75 \mathrm { ~mL } \) 와 전분 시액 \(1 \mathrm { mL } \) 를 첨가하고, \( 0.01 \mathrm { ~N } \) sodium thiosulfate 용액으로 요오드를 역적정하여 POV를 측정하였다.</p>