중국산 산사자 메탄올 추출물의 세포독성 실험을 위해 3T3-L1 지방세포에 처리한 결과 이미 보고된 천연물 메탄올 추출물에 비해 세포독성이 낮게 나타났으며, 지방세포의 중성지방 생성을 억제하는 결과를 얻어 항비만 효과를 나타내는 기능성 식품 및 의약품 개발을 위한 천연 식물 자원으로 이용될 수 있을 것이다. 중국산 산사자 추출물을 고지방식이로 비만이 유도된 실험동물을 대상으로 급여할 경우 체중 증가가 억제되는 것을 확인할 수 있었고, 간 무게가 감소하는 경향을 나타내었으며, 혈청 내 총 콜레스테롤과 중성 지방 함량을 감소시킬 수 있음을 확인하였다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>중국산 산사자 메탄올 추출물의 세포독성</h2> <p>중국산 산사자 메탄올 추출물의 세포독성은 3T3-L1 지방세 포에 \( 0-2,000 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) 농도 범위의 중국산 산사자 추출물을 처리한 후 MTT assay를 수행하여 확인하였으며 중국산 산사자 추출물 대신 DMSO를 사용한 대조구의 cell viability에 대한 백분율로 나타내었다(Fig. 1). 3T3-L1 지방세포에 200, 400, 600, 800, 1,000\( \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \)의 중국산 산사자 추출물을 처리한 후 대조구와 비교하였을 때 3T3-L1 지방세포의 cell viability는 각각 \( 99 \%\), \(98 \%\), \(96 \%\), \(95 \%\), \(90 \% \)였으며 \( 2,000 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \)의 중국산 산사자 추출물을 처리하였을 때는 \( 80 \% \)의 cell viability를 나타내었다 \( (p<0.05) \). 따라서 고농도의 중국산 산사자 추출물 \( (1,000 \mathrm{ug} / \mathrm{ml}\), \(2,000 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) )을 처리하였을 때도 3T3-L1 지방세포는 \( 80 \% \) 이상의 cell viability를 나타내므로 본 실험에 사용한 중국산 산사자 추출물의 세포독성은 매우 낮은 것으로 생각된다. 또한 산사자 메탄올 추출물은 이미 보고된 천연물 메탄올 추출물에 비해 세포독성의 유효범위가 넓을 뿐만아니라 세포독성도 낮게 나타났다.</p> <h2>중국산 산사자 메탄올 추출물이 지방세포에 미치는 영향</h2> <p>중국산 산사자 메탄올 추출물이 지방세포의 중성지방에 미치는 영향은 중성지방만을 붉은색으로 염색하는 Oil-red O 염색법으로 중성지방 함량을 측정하여 확인하였으며 대조구의 중성지방 함량에 대한 백분율로 나타내었다(Fig. 2). 3T3-L1 지방세포에 중국산 산사자 메탄올 추출물을 \( 0-2,000 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \)의 농도로 처리하였을 때 3T3-L1 지방세포의 중성지방 함량은 \( 200 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \)과 \( 400 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \)의 농도에서는 대조구와 큰 차이를 나타내지 않았으나 \( 600-2,000 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \)의 농도범위에서는 대조구에 비해 유의적으로 감소하였다 \( (p<0.05) \). 따라서 중국산 산사자 메탄올 추출물은 3T3-L1 지방세포에 대한 세포독성이 낮을 뿐만 아니라 지방세포의 중성지방 생성을 억제할 수 있기 때문에 중국산 산사자는 항비만 효과를 나타내는 기능성 식품 및 의약품 개발을 위한 천연 식물 자원으로 이용될 수 있을 것이다.</p> <h2>체중변화와 식이섭취량 및 장기무게</h2> <p>시험기간 동안 실험동물의 체중변화, 식이섭취량, 장기무 게는 Table 2에 나타내었다. 실험식이 급여 전 체중은 실험 구별로 큰 차이를 나타내지 않았으나 급여 2주 후부터는 T0 (AIN-93G 정상식이)군보다 T1 (high fat \( 45 \% \) cal 고지방 식이와 물 \( 100 \mathrm{ul}) \) 군의 체중이 유의적으로 증가하기 시작하였으며 T2 (high fat \( 45 \% \mathrm{cal} \) 고지방식이와 \( 500 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) 중국산 산사자 메탄올 추출물 \( 100 \mathrm{ul} \) )군과 T3 (high fat \( 45 \% \mathrm{cal} \) 고지방식이와 \( 1,000 \mathrm{ug} / \mathrm{ml} \) 중국산 산사자 메탄올 추출물 \( 100 \mathrm{ul}) \) 군의 체중은 유의적으로 감소하였다 \( (p<0.05) \). 특히 T3군은 T0군과 유사한 증체량을 나타내었으며 고지방식이로 비만이 유도된 실험동물을 대상으로 중국산 산사자 추 출물을 급여할 경우 체중 증가가 억제되는 것을 확인할 수 있었다. 실험동물의 식이섭취랑은 모든 실험구에서 유사한 경향을 나타내었다 \( (p<0.05) \).</p> <p>실험동물의 간 무게는 T0군보다 T1군과 T2군에서 높게 나타났으나 T3군에서는 유의적으로 감소하였으며 \( (p<0.05) \) T1과 T2의 신장 무게는 T0보다 낮게 나타났으나 T3군의 신장 무게는 T0군과 유사하게 나타났다 \( (p<0.05) \). Rhee 등은 일반적으로 과도한 지방섭취는 간에서 지질대사의 이상을 초래하여 지질의 침착이 일어나고 이로인해 간 무게가 증가하고 간에서의 지질과 콜레스테롤 함량이 증가한다고 보고하였으며 녹차를 급여할 경우 녹차의 catechin에 의해 간에서 지방합성이 억제되어 항비만 효과를 나타낸다고 보고하였다. 본 실험에서도 정상식이군에 비해 고지방식이군의 간 무게가 증가한 경향을 나타내었으며 중국산 산사자 추출물을 급여한 처리구에서는 간 무게가 감소하는 경향을 나타내었다.</p> <h2>혈청 내 총 콜레스테롤과 중성지방 함량</h2> <p>고지방식이와 중국산 산사자 메탄올 추출물을 급여한 실험 동물(T2, T3)의 혈청 내 총 콜레스테롤(A) 및 중성지방 함량(B) 은 고지방식이만을 급여한 실험동물(T1)의 혈청 내 총 콜레스 테롤 및 중성지방 함량과 비교하여 Fig. 3에 나타내었다. 고지 방식이와 중국산 산사자 메탄올 추출물을 급여한 T3군(\( 143 \mathrm{mg} / \mathrm{dl}) \)의 혈청 내 총 콜레스테롤 함량은 고지방식이만을 급여한 T1군\( (164 \mathrm{mg} / \mathrm{dl}) \)보다 \( 24.47 \% \) 감소하였으며\( (p<0.05) \) 이것은 중국산 산사자 메탄올 추출물의 농도가 높을수록 혈청 내 총 콜레스테롤 함량은 감소한다는 것을 나타낸 결과이다. 고지방 식이와 중국산 산사자 추출물을 급여한 T2군(\(155 \mathrm{mg} / \mathrm{dl}) \)과 T3군\( (142 \mathrm{mg} / \mathrm{dl}) \)의 혈청 내 중성지방 함량은 고지방식이만을 급여한 T1군\( (188 \mathrm{mg} / \mathrm{dl}) \) 보다 유의적으로 낮게 나타났다\( (p< 0.05) \). 따라서 중국산 산사자 추출물은 고지방식이로 비만이 유도된 실험동물의 혈청 내 총 콜레스테롤과 중성 지방 함량을 감소시킬 수 있음을 확인하였다. 이와 같은 결과는 일반적으로 포화지방산이 많이 함유된 동물성지방의 섭취 로 혈중 콜레스테롤 농도가 증가된다는 Kim 등의 연구결과와 일치하며 Rhee 등은 녹차를 급여할 경우 혈중 콜레스테롤 농도가 감소하는데 이는 녹차의 catechin에 의해 micelle 의 용해도가 감소하여 소장에서의 콜레스테롤 흡수가 부분적으로 억제되기 때문이라고 보고하였다.</p>