2009년 7, 8원경 경북 울릉군 울릉읍에서 건조한 잎을 사용하여 메탄올 추출물(472.7g)과 \(\mathrm { n } - \mathrm { hexane } \) 추출물(154.22g), \( \mathrm { EtOAc }\) 추출물(74.66g), \(\mathrm { n } - \mathrm { BuOH } \)추출물(87.84g), 물 추출물(155.98g)을 얻었다. 이를 동결 건조하여 용매를 제거한 뒤 Folin-Ciocalteu phenol reagent를 사용하여 총 폴리페놀 함량을 측정하고 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH)를 사용하여 전자공여능을 측정하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>재료</h2> <p>본 실험에 사용한 섬쑥부쟁이 (Aster glehni Fr. Schm.)는 2009년 7, 8원경 경북 울릉군 울릉읍에서 건조된 잎을 구입하여 실험재료로 사용하였다.</p> <h2>시료 추출 및 용매분획</h2> <p>시료의 추출은 섬쑥부쟁이 5kg 을 시료 중량의 10 배양인 \( 70 \% \) 메탄올을 가하여 상은에서 1주일간 3회 추출한 다음 filter paper(Whatman No. 2)로 여과하였고, 얻어진 여액은 감압농축하여 메탄올 추출물 \( (472.7 \mathrm { ~g } ) \) 을 얻었다. 섬쑥부쟁이 메탄올 추출물을 물에 현탁 후, 현탁액과 n-hexane을 1:1 비율로 분획 깔데기에 넣고 n-hexane층과 물층으로 분획하였고, n-hexane층을 다시 감압 농축하여 \( 154.22 \mathrm { ~g } \) 를 얻었다. 이상의 등일한 과정을 \( \mathrm { EtOAc } , \mathrm { n } - \mathrm { BuOH } \), 물로 순차적으로 가하여 각각 \( 74.66 \mathrm { ~g } , 87.84 \mathrm { ~g } , 155.98 \mathrm { ~g } \) 의 분획물을 얻은 후, 동결 건조하여 용매를 제거한 뒤 실험에 사용하였다(Fig. 1).</p> <h2>총 폴리페놀 함량 측정</h2> <p>폴리폐놀 정량은 \( \mathrm { AOAC } [1] \) 에 준하여 정량하였다. 즉, 100 배 희석한 시료용액 \( 3 \mathrm { ~mL } \) 에 Folin-Ciocalteu phenol reagent</p> <p>시약 \( 1 \mathrm { ~mL } \) 를 가하고, \( 1 \mathrm { ~N } \mathrm { HCl } 0.2 \mathrm { ~mL } \) 을 넣은 후, 포화용액 \( \mathrm { Na } _ { 2 } \mathrm { CO } _ { 3 } 1 \mathrm { ~mL } \) 를 가하여 혼합한 후 1 시간 실온에서 방치하고, \( 640 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정한 후, 표준물질인 tannic acid 로 미리 작성한 표준곡선의 흡광도 값과 비교하여 폴리페놀 함량을 산출하였다.</p> <h2>전자공여능 측정</h2> <p>전자공여능(EDA: clectron donating ability)은 기존에 보고된 방법을 변형하여 96 well plate에 맞게 수정하여 측정 하였다. 각 시료용액 \( 2 \mathrm { ~mL } \) 에 \( 0.2 \mathrm { mM } \) 의 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH) \( 1 \mathrm { ~mL } \) 넣고 교반한 후 30 분간 방치한 다음 \( 517 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하였다. 전자공여능은 시료 용액의 첨가군과 무침가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.</p>