DNFB 접촉성 피부염을 일으키는 물질로 왕겨초액의 증류액과 산쑥이나 자소옆 처리액은 실험결과 피부염을 완화시켜주는 결과를 확인할 수 있었다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <p>본 실험에 사용된 재료는 왕겨를 직화식 탄화에 의하여 왕겨초 증류액을 얻었으며, 이를 사용하여 다음과 같은 동물실험을 통하여 접촉성 피부염 활성을 예비검증하였다. 본 실험에 사용한 동물은 외부의 allergen으로서 DNFB를 처리한 마우스로서 피부조직에서 조직병리학적 염색과 피부 중 가장 민감한 귀의 표피의 부종(swelling)의 감소를 측정하는 것으로 접촉성 피부염 효과를 확인하였다.</p> <p>DNFB는 지연형 접촉성 피부염을 일으키는 전형적인 물질로 DNFB의 반복 노출 시, \( \mathrm{CD4}^{+} \)및 \( \mathrm{CD8}^{+}\) T세포 매개성 염증세포의 침윤(infiltration)에 의한 피부 부종과 피부 조직의 비후가 초래되는 것으로 알려져 있으며, DNFB 유발 접촉성 피부염 동물모델은 현재 가장 널리 이용되고 있는 실험동물 모델중 하나이다. 조직학적으로 현저한 염증세포 침윤을 동반한 피부 조직의 비후가 관찰되는 것으로 알려져 있으나, 본 실험에서는 염증세포의 침윤은 비교적 약하게 일어난 반면, 현저한 상피층(epidermis)의 비후로 인한 피부 두께의 증가가 관찰되었다. 한편, C57B/L 마우스는 외부의 화학물질에 의한 아토피 완화의 유도가 잘 알려져 있으며, 본 실험의 결과에서도 피부상피 두께가 대조구에 비교하여 7.8배 증가하는 것으로 나타났다. 한편 마우스의 등 부위에 일차적인 감작화로 접촉성 피부염이 유발되지만(data not shown), 재감작에 의하여 보다 확실한 차이를 얻을 수 있었다. 재감작은 귀 부위를 선택하였으며 이 경우에는 비교적 약한 농도의 \( 0.2 \%\)DNFB로 재감작시켰고, 재감작 후, 격일로 2주간 CVL 또는 산쑥과 자소옆 처리의 CVL 추출물을 처리하였다. 그 결과, 아주 흥미롭게도 DNFB 처리에 의해 상피, 진피 및 피부 전체 두께가 현저하게 감소하였다(data not shown). 특히 상피의 두께는 여러 가지 진피 내부의 면역세포가 표피로 이동하여 이들 표피의 두께의 비후정도가 상이하게 되므로 이의 두께 정도를 비교하였다. Fig. 1에서 보는 바와 같이 접촉성 피부염 유발군보다 1차 왕겨초액 처리군에서는 약 \( 20 \% \)의 수준으로 급격하게 감소하였다. 왕겨초액은 그 특유의 이취가 특이하므로 이를 제거하고자 스크리닝을 수행하여 산쑥과 자소옆을 첨가한 왕겨초액의 항알러지 활성도 동시에 확인하여 보았다. 그 결과, 산쑥은 효과가 없었으나 자소옆은 활성도 있으며(대조군의 약 \( 18 \% \) 수준), 자소옆의 첨가로 인한 masking 효과는 이들을 이용한 향장소재 개발시 매우 유용한 자료로 사용될 수 있다고 판단된다.</p> <p>Fig. 1의 결과를 바탕으로 피부상피를 직접 조직염색학적인 소견을 살펴 본 바, Fig. 2에서 보는 바와 같이 접촉성 피부염 유발군에서는 상피조직의 비후정도가 현저히 발달되어 있었으나 CVL 등 몇 가지 샘플 처리로 인하여 이의 비후정도가 상당 수준 감소함을 알 수 있었다(약 \(18-31\%\)). 이 표본에서 직접 eosinophil의 수적 감소 여부를 살펴 본 결과도 표피의 비후정도가 감소하는 것과 상당히 유사함을 알 수 있었다(data not shown).</p> <p>이상의 결과로서 본 왕겨초액의 증류액 CVL 및 산쑥이나 자소옆 처리액은 DNFB 처리에 의한 마우스에서의 접촉성 피부염 반응을 효과적으로 완화시켜 주는 효과를 확인할 수 있었다. 향후 접촉성 피부염에 관련된 cytokine (IL-4, IL-13, IL-25 등)이나 CCL7 등 chemotactic factors의 발현여부와 matrix metalloproteinase (MMPs)-2,-3, -9의 발현에 대한 mRNA 수준에서의 양적변화에 대한 비교실험의 결과는 왕겨초액을 이용한 향장소재화에 도움이 되리라 판단된다.</p>