MTT는 세포 생육 측정 방법으로, 미토콘드리아 내 dehydrogenase가 MTT를 통해 dark blue formazan을 생성하는 원리를 이용한다. HepG2, HeLa, MCF-7 암세포주와 정상 liver cell에 대한 적채 추출물 및 각 분획물의 암세포 증식 억제 효과는 다양한 농도에서 첨가하였을 때, BOMEE에서 가장 뛰어난 결과를 보였다. 본 연구에서는 quinone reductase (QR) 유도 활성 측정을 보다 신속하고 정확하게 하기 위해 QR 유도활성을 가진 간압세포주인 HepG2를 사용하여 실험을 진행하였다.
<h2>암세포 증식억제에 미치는 적채 분힉믈의 영향</h2> <p>MTT는 세포의 생육을 측정하는 방법으로서 살아있는 세포의 미토콘드리아 내의 dehydrogenase가 황색 수용성 물질인 MTT에 의해 dark blue formazan을 생성하는 원리를 이용한다.</p> <p>HepG2, HeLa 및 MCF-7의 암세포주와 정상 liver cell에 대한 적채 추출물 및 각 분획물의 암세포 증식억제 효과에 대한 결과는 Fig. 1~4와 같다.</p> <p>Fig. 1은 HepG2에 용-배별 각 시료 분획물을 \( 100,200,300 \), \(400\) 및 \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)씩 농도를 증가시키며 첨가하였을 때의 암세포 증식억제 효과를 나타낸 그림이며, 여러 용매분획충 중 BOMEE에서 그 효과가 뛰어났다. 즉, BOMEE의 시료 농도 \( 400 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)을 첨가했을 때 \( 69.22 \% \)의 높은 암세포 증식억제 효과를 보였고, 시료 최종 첨가농도인 \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)를 첨가했을 때는 \( 78.54 \% \)의 높은 억제 효과가 나타났다. HeLa에 대한 암세포 증식억제 실험 결과는 Fig. 2에 나타내었으며, Fig. 1의 HepG2 세포주에 대한 암세포 증식억제 효과와 유사한 결과를 나타내었다. 즉, 시료농도 \( 400 \mathrm{~kg} / \mathrm{ml} \)을 첨가했을 때 BOMEE는 다른 분획물의 경우보다 암세포 증식억제 효과가 월등히 커서 \( 78.82 \% \)의 높은 억제 수치를 보였으며, 최종 첨가농도인 \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)을 첨가했을 때는 \( 89.54 \% \)의 암세포 증식 억제 효과를 나타내었다. Fig. 3은 MCF-7의 결과이며, 이 경우에서도 HepG2와 HeLa세포주의 경우와 같이 첨가한 각 분획층의 효과와 비슷하게 나타났으며, BOMEE를 \( 500 \mu \mathrm{g} / \)\( \mathrm{ml} \)을 첨가했을 때 \( 88.96 \% \)의 암세포 증식억제 효과를 나타내었다. 사용한 세 가지의 암세포주 중 MCF-7과 HeLa에 대해 BOMEE에서 실험에 사용한 다른 분획층보다 제일 그 효과가 컸다고 보겠다. 본 실험에 사용된 적채 분획물이 정상세포에 대해 미치는 세포증식 억제 효과를 검사하기 위하여 정상 liver cell을 이용한 결과는 Fig. 4와 같으며, 적채의 모든 분획총에서 비교적 낮은 세포독성 효과를 볼 수 있었다.</p> <p>이상의 결과에서 볼 때, 3종의 암세포주 모두 비극성 용매 층인 ethyl ether 분획층인 BOMEE에서 다른 분획층에서보다 높은 암세포 중식억제 효과(cytotoxicity)를 나타내었으며, 정상세포인 liver cell에 대한 세포 독성효과는 매우 낮았으므로 본 연구결과를 통해 적채 분획물의 HepG2, HeLa 및 MCF-7 세포주에 대한 암세포주 증식억제효과를 확인할 수 있었다.</p> <h2>Quinone reductase (QR) 유도활성 효과</h2> <p>본 연구에 도입된 quinone reductase (QR) 유도 활성 측정을 보다 신속하고 정확하게 하기 위해 여러 종류의 동물세포 중 본 실험에서는 QR 유도활성을 가진 간압세포주인 HepG2를 사용하여 실험은 행하였으며, 그 결과는 Fig. 5에 나타내었다. HepG2 세포주에 적채시료의 각 분획물을 \(50, 100, 150\) 및 \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 농도로 첨가했을 때 각 첨가물의 농도에 따라서 QR 활성이 증가하는 경향을 보였으며, 특히 hexane 분획층과 ethylether 분획층에서 암 예방효과의 지표인 QR 유도 활성효과롤 나타내었고, 기타 분획 층에서는 거의 영향을 미치지 않았다. BOMH의 경우 용매 대조군을 1.0으로 하여 비교한 결과, \( 50,100,150 \) 및 \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 시료첨가 농도에서 각각 1.58, 1.97, 2.53 및 2.88로 농도 의존적인 높은 QR 유도활성효과를 나타내었으며, BOMEE의 경우에서도 BOMH의 경우와 유사하게 시료첨가농도 \( 50,100,150 \) 및 \( 200 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 첨가에서 각각 1.21, 1.69, 1.84 및 2.15의 비교적 높은 QR 유도활성 효과를 나타내었다.</p> <p>이와 같은 결과는 배[2]에 의해 연구된 여주 분획성분의 항발암 효과에 대한 결과와 비슷하며 본 연구에서 사용한 적채 분획물 중 비극성용매층인 BOMH와 BOMEE 층의 QR 유도효과가 높았으므로 이 분획층에서 quinone reductase inducer가 존재함을 추정할 수 있으며 더욱더 심도있는 연구를 통해 생리활성 물질을 추적하여 그 구조를 동정하므로서 식품의 색에 따른 암예방 유도 효과를 지닌 기능성 식품개발에 매우 중요한 자료가 될 수 있을 것으로 사료된다.</p>