배추흰나비의 발생 단계에 따른 \( 27 \mathrm{kd} \) 특이 큐티클 단백질의 변화를 조사한 결과, 단백질은 용화직후부터 우화직전까지 모든 부위의 큐티클에서 발견되었으며, 양적인 변화는 용 초기에 높은 농도를 보이다가 성충기에 접어들면서 점차 감소하는 경향을 보였다. 그리고 지방체에서 확인된 이 단백질은 용화 후 3일까지는 흉부와 복부에서 확인되었지만 그 이후에는 농도가 급격히 감소하였다. 또한, 용기에서 성충으로 변화하는 과정에서 큐티클 단백질이 날개 큐티클 단백질로 통합되는 경로를 확인하기 위해 중령 말기에 \( { }^{3} \mathrm{H} \)-leucine을 주입하여 이동경로를 조사하였고, 이는 용 초기부터 용화 3일까지 흉부 큐티클의 \( 27 \mathrm{kd} \) 단백질에 통합되는 것을 확인하였다.
<h1>결 과</h1> <p>배추흰나비를 발생단계에 따라 5령말기 (\(5L\)), 전용( \(\mathrm{P_P}) \), 용화직후 \( \left(\mathrm{P}_{0}\right) \), 용1일 \( \left(\mathrm{P}_{1}\right) \), 용3일 \( \left(\mathrm{P}_{3}\right) \), 용5 일 \( \left(\mathrm{P}_{5}\right) \), 용7일( \( \left(\mathrm{P}_{7}\right) \) 및 성충 \( (\mathrm{AD}) \)으로 구분한 후 두부, 흉부 및 복부로 나누어 \( 27 \mathrm{kd} \) 발생 특이 큐티클 단백질의 국소 부위에 따른 질적, 양적 변화를 조사하였다.</p> <p>큐티클에서 용기 특이 큐티클 단백질로 확인된 바 있는 \( 27 \mathrm{kd} \) 단백질은 용화직후부터 우화직전까지 두부, 흉부 및 복부 큐티클에서 모두 확인되고 있어 부위에 따른 질적 변화는 거의 없는 경향을 나타내고 있다. 그러나 용 초기에 비교적 높은 농도를 보이다가 성충기로 감에 따라 서서히 농도가 낮아지는 양적인 변화를 나타내고 있다. 물질대사 및 단백질 합성의 중추적인 역할을 하는 지방체에서 \(27 \mathrm{kd} \) 단백질은 용화 후 \(3\)일까지는 흉부와 복부에서 전시기에 걸쳐 확인되고 있지만 그 이후부터는 농도가 급격히 감소하는 경향을 나타내고 있다.</p> <p>큐티클 단백질의 발생시기 및 부위에 따른 \( 27 \mathrm{kd} \) 용기 특이 큐티클 단백질의 분포를 조사하기 위하여 \( 27 \mathrm{kd} \) 큐티를 단백질의 항체를 사용한 western blot을 실시하였다. 흉부에서는 \( 27 \mathrm{kd} \) 단백질에 대한 반응이 매우 미약하게 확인되었으며, 복부에서는 용\( 3 \)일에 높은 농도를 보이나 그 이후 성충기로 감에 따라 감소하는 경향을 보이고 있다.</p> <p>큐티클 단백질과 용기중 신생합성되는 날개 큐티클 단백질과의 관계를 국소 부위별로 살펴보기 위해 날개가 형성되는 용화\( 5 \)일, 용화\( 7 \)일 및 성충기까지 날개 원기가 위치한 흉부 큐티클과 복부 큐티클 및 날개 큐티클 단백질의 전기영동상과 western blot을 실시하였다. 흉부와 복부 큐티클의 단백질 패턴은 거의 유사하었으며 \( 27 \mathrm{kd} \) 용기 특이 큐티클 단백질은 용화\( 7 \)일부터 사라지고 있으나 날개에서는 용화\( 5 \)일의 발생중인 날개에서 확인되기 시작하여 성충의 날개에서는 높은 농도를 나타내고 있다. 또한 \( 27 \mathrm{kd} \) 단백질에 대한 western blot 반응에 있어서도 흉부와 복부 큐티클에서는 용화\( 5 \)일에는 미약하게 반응을 하고 있으나 그 이후에는 거의 나타나지 않고 있는 반면 용화\( 5 \)일, 용화\(7 \)일 및 성충 날개 큐티클에서는 동질성을 보여주고 있다. 흉부 큐티클과 날개 큐티클의 단백질 패턴을 \( 2 \)차원 전기영동으로 분석해 보면 \( 27 \mathrm{kd} \) 단백질은 용화\( 5 \)일 이후의 흉부 큐티클 및 날개 큐티클에서 모두 하나의 spot으로 관찰되었다.</p> <p>용기에서 성충으로의 변태에 따른 큐티클 단백질이 날개 큐티클 단백질로 통합되는 과정을 조사하기 위해 중령 말기 에 \( { }^{3} \mathrm{H} \)-leucine을 혈강에 주사하여 발생시기에 따른 용기 특이 큐티를 단백질의 이동경로를 조사하였다. 용 초기에 주입된 \( { }^{3} \mathrm{H} \)-leucine은 흉부 큐티클에서는 용화\( 1 \)일부터 \( 27 \mathrm{kd} \) 단백질에 통합되고 있으며 이는 용\( 3 \)일까지 유지되고 있으나 용화\( 5 \)일부터는 이의 농도가 감소하고 있으나 우화직전까지 확인되고 있다. 복부 큐티클에서는 용화\( 1 \)일에 \( 27 \mathrm{kd} \) 단백질에 통합되는 양상을 보여주고 있지만 이의 농도는 매우 미약하며 오히려 우화직전에 이의 농도가 증가하는 패턴을 보여주고 있다. 지방체에서 \( 27 \mathrm{kd} \) 단백질은 종령 말기에 \( 27 \mathrm{kd} \) 단백질과의 통합이 높게 생성되었지만 전용기 및 용화직후에는 다소 감소하는 양상을 보이고 있다. 그러나 용화\( 1 \)일에 다시 높은 통합성을 보이다가 용말기로 가면서 꾸준히 감소하는 경향을 보이고 있다. Epidermis에서도 많은 단백질에 주입된 아미노산이 통합되고 있으며 \( 27 \mathrm{kd} \) 단백질에 대한 통합도 두드러지게 나타나고 있다. 특히 전용기와 용화직후에는 \( { }^{3} \mathrm{H} \)-leucine의 통합이 두드러졌으며 \( 27 \mathrm{kd} \) 단백질과의 통합도 매우 높은 수준을 유지했지만 용발기로 갈수록 이의 통합 정도는 매우 낮은 수준으로 떨어지고 있다. 용말기 및 우화직후 동안 흉부와 복부 큐티클과 날개 큐티클내 \( 27 \mathrm{kd} \) 단백질에 \( { }^{3} \mathrm{H} \)-leucine이 통합되는 과정을 조사해 보면 \( { }^{3} \mathrm{H} \)-leucine은 용말기와 우화직전 흉부 큐티를과 복부 큐티클의 \( 27 \mathrm{kd} \) 단백질에서는 확인되지 않았다. 그러나 우화직전과 직후의 날개 큐티클에 통합되는 패턴을 보여주고 있다.</p>