본 논문에서는 울릉도 자생식물 추출물의 NO 생성 저해 기전을 확인하고자 western blot을 실시하여 iNOS의 단백질 발현을 측정했고 \(PGE_{2}\)의 형성 저해 기전을 확인하고자 western blot을 이용하여 COX-2 의 발현을 측정했다. 그 결과 LPS에 의해 증가한 iNOS와 COX-2의 단백질 발현 양이 감소되고 \( \beta \)-actin의 band density 비율에 따라 iNOS 단백질 생성을 \( 60 \% \), COX-2의 단백질 발현을 저해함을 확인했다. 또한 LPS에 의해 활성화된 대식세포로부터 유도되는 염증반응에 대한 억제효과를 조사한 결과 곰취, 미역취, 삼나물 추출물은 염증 예방과 치료에 효과적임을 확인했다.
<h2>iNOS,COX-2의 단백질 발현 저해 효과</h2> <p>iNOS는 평소에는 세포 내에 존재하지 않으나 일단 유도되면 장시간 동안 다량의 NO를 생성하며, 생성된 NO는 혈관 투과성, 부종 등의 염증 반응을 촉진 시킬 뿐만 아니라 염증매개체의 생합성을 촉진하여 염증을 심화시키는 것으로 알려져있다. COX는 cyclooxygenase와 peroxidase 활성을 모두 가지고 있는 효소이다. Cyclooxygenase 기능으로서 arach-idonic acid를 prostagland로 변환하고, peroxidase기능으로서는 endoperoxide를 prostaglandin로 변환시키며, prosta-glanin는 prostaglandins, thromboxane 및 prostacyclins의 전구체로 사용된다.COX-1은 모든 세포에 존재하면서, 정상세포의 항상성을 유지하며, COX-2는 급성염증반응에서 prosta-gladins의 합성에 관여하고, LPS 및 cytokine에 의해 발현이 유도된다. 울릉도 자생식물 추출물에 의한 NO 생성 저해 기전을 확인하기 위해 western blot을 실시하여 iNOS의 단백질 발현을 측정하였으며, \( PGE_ { 2 } \)의 형성 저해 기전을 확인 하기 위해 western blot을 이용하여 COX-2 의 발현을 측정하였다. 그 결과 LPS에 의해 증가된 iNOS와 COX-2의 단백질 발현 양이 농도 의존적으로 유의성 있게 감소되며, \( \beta \)-actin의 band density 비율에 따라 iNOS 단백질 생성을 \( 60 \% \)와 COX-2의 단백질 발현을 \( 60 \% \) 저해함을 확인 하였다. 이를 통해 울릉도 자생식물 추출물은 iNOS를 저해함으로써 NO 생성을 저해함을 알 수 있었으며 \( PGE_ { 2 } \)의 합성 억제를 나타내는 것은 COX-2의 활성 저해에 의한 것임을 알 수 있었다.</p> <h1>초록 : 곰취(Ligularia fischer), 미역취(Solidago virga-aurea), 삼나물(Aruncus dioicus) 복합 추출물의 항염증 효과</h1> <p>본 연구에서는 울릉도 특산 약용 작물 추출물이 항염증에 대한 실험연구가 이루어져 있지 않은 것에 착안하여 LPS에 의해 활성화된 대식세포로부터 유도되는 염증반응에 대한 억제효과를 조사하였다. 울릉도 자생 식물인 곰취, 미역취, 삼나물의 세가지 식물 추출물을 이용하여 피부 염증에 대하여 연구를 하였다. 산화질소와 cytokine의 생산은 면역세포의 대표적인 염증인자이다. 세포는 LPS 처리 후 한 시간 뒤에 곰취, 미역취, 삼나물 \( 70 \% \) 아세톤 추출물을 처리를 하였다. 세포 독성이 나타나지 않는 농도인 \( 1, 10, 100 \mathrm { ug } / \mathrm { ml } \)를 사용하였다. 곰취, 미역취, 삼나물 \( 70 \% \) 아세톤 추출물은 NO, PGE 2, \(TNF- \alpha \), IL-1 \( \beta \), IL-6, iNOS, COX-2의 생성을 저해 시켰다. PGE는 100 \( \mathrm { ug } / \mathrm { ml } \)의 농도에서 \( 60 \% \)에 가까운 저해율을 나타내었다. iNOS와 COX-2 역시 \( 100 \mathrm { ug } / \mathrm { ml } \)의 농도에서 각각 \( 54 \% \), \( 65 \% \)가 저해가 되었다. 게다가 곰취, 미역취, 삼나물 \( 70 \% \) 아세톤 추출물은 염증성 사이토 카인인 \(TNF- \alpha \), IL-1 \( \beta \), IL-6의 생성을 감소 시켰다. 이러한 결과로 곰취, 미역취, 삼나물 추출물은 염증 예방과 치료에 효과적임을 확인 할 수 있었다.</p>