지질 추출을 위해서 Folch et al.방법을 이용하고, Dittmer and Wells의 방법으로 함량을 측정하였다. AOAC 방법과 Pak과 Araya방법에 따라 식이섬유, 수용성과 불용성 탄수화물을 분석하였다. . 지방산 추출및 분석에 기체크로마토그래피를 이용한다.
<h2>지질 추출 및 분석</h2> <p>지질은 Folch et al. 법에 따라 클로로포름:메탄올(2:1)을 이용하여 추출하였고, Dittmer and Wells의 방법에 따라 총 지질함량을 측정하였다. 지질시료에 \( 2 \mathrm { ml } \) 의 dichromate solution \( \left (2.5 \mathrm { ~g } \mathrm { ~K } _ { 2 } \mathrm { Cr } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 7 } , 1 \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { SO } _ { 4 } \right ) \) 을 넣은 후 45 분 동안 중탕하였다. 실온에서 식힌 후 \( 10 \mathrm { ml } \) 의 증류수를 첨가하여 발색되도록 하여 \( 350 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하였고, 기준시약으로는 \( 1 \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \) 의 palmitic acid를 사용하였다.</p> <h2>식이섬유 분석</h2> <p>식이섬유, 수용성 및 불용성 탄수화물은 AOAC 방법과 이를 일부 수정한 Pak과 Araya방법에 따라 분석하였다.</p> <h2>지방산 추출 및 분석</h2> <p>Methylation을 위해 각 시료에 chloroform:methanol (2:1, \( \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 을 첨가하여 20 분간 추출하였다. \( 0.58 \% \mathrm { NaCl } 5 \mathrm { ml } \) 을 첨가하여 10 분간 추출 후 \( 2,000 \mathrm { rpm } \) 에서 5 분간 원심분리하였다. 분리된 아래층 액을 pasteur pipet을 이용하여 다른 튜브에 옮긴 후 \( \mathrm { N } _ { 2 } \) 를 이용하여 건조하였다. 건조된 시료에 \( 0.5 \mathrm { ml } \) toluene과 \( 2 \mathrm { ml } \) 의 \( 0.5 \mathrm { ~N } \mathrm { NaOH } \) 을 넣고 5 분간 중탕한 후 식히고, \( \mathrm { BF } _ { 3 } \mathrm { MeOH } \) 첨가한 후 3 분간 중탕하였다. \( 15 \mathrm { ml } \) 의 petroleum ether와 \( 20 \mathrm { ml } \) 의 물을 넣고 5 분 동안 sonication한 후 정치시켰고, 상층액을 뽑아 \( \mathrm { N } _ { 2 } \) 를 이용하여 건조하였다. 건조된 시료를 \( 1 \mathrm { ml } \) 의 핵산에 녹이고 \( 1.5 \mathrm { ml } \) amber bottle에 옮긴 후 \( 1 \mu \mathrm { l } \) 를 기체크로마토그래피에 주입하였다.</p>