페부상재균, 여드름 발생균인 Propionebacterium acnes, 세균각막염 원인균인 Staphylococcus epidermidis, 식중독 원인균인 Staphylococcus aureus, 그리고 병원성 대장균인 Escherichia coli 등의 표준균주를 사용하여 항균력을 측정하였다. 항균력 측정은 paper disc법을 이용하며, 각각의 시료용액에 phenolics 농도를 조절하여 분주한 후, clear zone의 생성 유무와 직경을 측정하여 항균활성을 계산하였다.
<h2>피부상재균에 대한 항균활성 검색</h2> <p>실험에 사용한 균주는 페부상재균으로써 여드름의 발생에 관여하는 Propionebacterium acnes와 세균각막염, 안검결막염 등의 원인균인 Staphylococcus epidermidis 표준균주인 KCTC 1917와 Candida albicans 표준균주인 KCTC 7965와 피부상재균으로써 페부표면에서 쉅게 발견되고, 공기 및 토양 등의 자연계에 광범위하게 분포하고 있어 식품에 쉽게 오염되기 때문에 식중독의 원인균이 되기도 하는 Staphylococcus aureus 표준균주인 KCTC 1039 및 병원성 대장균인 Escherichia coli 표준균주 \( \mathrm { KCTC } 1039 \)를 사용하였다. 균주의 배양은 \( S \) epidermidis의 배양에는 Nutrient Medium을 사용하였고, C. albicans의 배양에는 YM Medium을, S. aureus 및 E. coli의 배양에는 Nutrient Medium을 사용하여 배양은 agar plate상으로 37의 BOD incubator에서 24-48시간 동안 실시하였다.</p> <p>항균력 측정은 paper disc법을 이용하여 생육 저해환(Clear zone)을 측정하였다. 즉, 평판배지에 배양된 각 균주를 1 백금이 취해서 액체배지 \( 10 \mathrm { ~mL } \) 에서 18-24시간 배양하여 활성화시킨후 다시 액체배지 \( 10 \mathrm { ~mL } \) 에 균액을 \( 0.1 \mathrm { ~mL } \) 접종하여 36시간 본 배양한 후 평팬배지 1 개당 균수가 약 \( 1 \times 10 ^ { 7 } \) cells되게 접종하여 멸균 면봉으로 균일하게 도말하였다. Disc method에 의한 항균활성 검색은 최적배지 agar plate에 준비한 균 배양액 \( 100 \mu \mathrm { L } \)를 분주하여 멸균 유리봉으로 도말한 다음, 멸균된 지름 \( 8 \mathrm { ~mm } \) 크기의 disc paper를 올려놓고 \( 0.45 \mu \mathrm { m } \) membrane filter로 제균한 시료용액 \( 100 \mu \mathrm { L } \) 에 phenolics 농도가 \( 50,100,150 \) 및 \( 200 \mu \mathrm { g } \) \( 100 \mu \mathrm { L } \) 가 되도록 각각 분주하였다. 대조구로는 멸균수 \( 100 \mu \mathrm { L } \)를 흡수시켜 24시간 동안 배양하여, disc 주위의 clear zone 생성 유무와 직경을 측정함으로써 항균활성을 계산하였다.</p> <h2>통계처리</h2> <p>모든 실험은 6회 이상 반복 측정하였고 자료의 통계처리는 SPSS 23 for windows (Statistical Package for Social Science, SPSS Inc., Chicago, IL, USA)를 이용하여 평균 \( \pm \) 표준편차(mean \( \pm \) standard deviation)로 표시하였고 분산분석 Duncan's multiple range test, one-way ANOVA를 실시하여 시료 간의 유의차를 \( p<0.05 \) 수준으로 비교 분석하였다.</p>