U2OS 세포에 \( 200 \mu \mathrm { M } \)의 \( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)와 다양한 농도의 HDL을 24시간 처리한 후, \( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)에 의해 생성된 세포 내의 ferritin과 ferritin iron에 대한 HDL의 영향을 조사하였다. 실험 결과, \( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)에 의해 증가한 ferritin과 ferritin iron의 농도가 HDL에 의해 농도 의존적으로 감소하는 것이 확인되었다. 이러한 결과는 HDL이 \( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)로부터 생성된 자유 라디칼에 대한 항산화 효과를 통해 ferritin의 손상과 자유 철의 방출을 저해하는 것으로 해석되었다.
<h2>HDL의 ferritin 함량 및 ferritin iron 농도에 대한 효과</h2> <p>\( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)는 세포 내에서 free radical을 생성하여 산화에 의한 스트레스 손상을 유도하며, heme oxygenase (HO)를 포함하는 몇몇 스트레스에 반응하는 단백질을 활성화시키는 것으로 알려져 있다. HO는 반응속도를 제한시키는 마이크로솜 효소 (rate-limiting microsomal enzyme)이며, 헴(heme)을 가수분해하여 일산화탄소, 철(iron), 그리고 빌리베르딘(biliverdin)를 형성하는 것으로 알려져 있다. Ferritin은 철분을 저장하며, 철분 대사를 조절하는 가장 기본적인 단백질로 알려져 있다. 세포가 호흡을 할 때 산소를 소비하면서 한 분자의 fer-rous iron을 ferric form으로 전환하여, 무독한 상태로 저장한다. 저장된 iron은 ferritin으로부터 방출되고, 생합성 과정에 이용된다. Free radical 생성에 의해 ferritin의 손상이 유도되면 세포는 free iron을 방출하게 되어 산화적 손상을 상승시키게 된다.</p> <p>U2OS 세포에 \( 200 \mu \mathrm { M } \)의 \( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)를 24시간 동안 처리하여 시간에 따른 세포내의 ferritin의 함량과 ferritin iron의 농도 변화를 조사하였다. 그 결과 \( 200 \mu \mathrm { M } \) 농도의 \( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)를 24시간 동안 처리 시 control에 비하여 ferritin의 함량은 \( 60 \% \) (3.1 \( \pm 0.05 \) \( \left .10 ^ { -1 } \mathrm { pg } / \mathrm {\mu g } \right ) \)가 증가하였다. 그리고 \( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)에 의한 세포내의 fer-ritin iron의 농도는 control에 비하여 \( 89 \%~(3.1 \pm 0.05 \mathrm { pmol } / \mathrm {\mu g } ) \)가 증가하였다. 이 결과는 \( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)에 의해 생성된 산화적 스트레스에 세포가 저항성을 높이기 위해 세포내의 ferritin과 ferritir iron을 증가시킨 것으로 사료된다(Fig. 3).</p> <p>\( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)에 의해 생성된 세포내의 ferritin과 ferritin iron에 대한 HDL의 영향을 조사하기 위해 U2OS 세포에 \( 200 \mu \mathrm { M } \)의 \( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)와 HDL을 농도 별로 함께 처리하여 24시간 후 ferritin 함량 및 ferritin iron의 농도를 측정하였다. 그 결과 \( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)에 의해 증가되었던 ferritin 함량 및 ferritin iron의 농도가 HDL에 의해 농도 의존적으로 감소하였다. \( 200 \mu \mathrm { M } \) 농도의 \( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)를 처리하였을 경우 control에 비하여 \( 36 \% \) 증가하였던 ferritin의 함량은 \( 10 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 농도의 HDL에 의해 \( 10.5 \%~(0.54 \pm 0.001 \mathrm { ~pg } / \mu \mathrm { g } ) \)의 증가를 보였다. 그리고 \( 200 \mu \mathrm { M } \) 농도의 \( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)에 의해 \( 89 \% \)가 증가한 ferritin iron의 농도는 DHL에 의해 \( 29 \%~(1.02 \pm 0.001 \) \( \mathrm { pmol } / \mu \mathrm { g } ) \)의 증가를 보였다. 이 결과는 \( \mathrm { CoCl } _ { 2 } \)에 의해 생성된 free radical을 HDL이 항산화 효과를 통해 저해함으로써 ferri-tin의 손상과 free iron의 방출을 억제하는 것으로 사료된다 (Fig. 3).</p>