MCF-7 유방암세포에 대해 50ng 이상의 SXR plasmid를 transfection하였을 때 오히려 ER transactivaton 효과를 20 \%20% 촉진하였으며 PPAR \gamma\(\Upsilon\) 역시 ER의 synthetic 4ERE-tk-luciferase transactivation 효과를 변화시키지 못한 것으로 나타나 MCF-7 유방암세포에서 CAR, SXR, PPAR \gamma\(\Upsilon\) 과 같은 xenobiotic nuclear receptor에 의한 ER transactivation 효과가 Hep \mathrm { G } 2G2 와는 다르며 estrogen receptor에 의해 매개가 되는 estrogn의 전사활성 조절기전이 Hep G2세포와 다른 경로를 포함하고 있음을 시사한다.
<h2>MCF-7 세포에 있어서 ER transactivation에 대한 CAR, SXR, PPAR \( y \) 의 영향</h2> <p>Estrogen에 의한 ER의 transactivation 효과를 최대화하기 위하여 Phenol Red와 insulin을 게거한 배양액에서 약 \( 3 \sim 5 \)일 동안 Weaning시키 후 약 \( 80 \% \) 의 confluency에 도달한 MCF-7 유낭않세포에 각각의 xenobiotic orphan nuc-lear receptor 발현plasmid, 그리고 synthetic \( 4 E R E-t k- \) luciferase reporter plasmid늘 transiently cotransfection하였다. MCF-7 유방암세포는 endogenous estrogen receptor를 발현하기 때문에 human ER plasmid DNA는 trans-fection에서 제외되었다. Endogenous estrogen receptor의 매개에 의한 4 ERE-tk-lucifcrase의 활성이 \( 10 \mathrm { nM } \) 의 \( 17- \beta \) -estradiol 처리에 의해 15배 증가되었으나 TCPOBOP에 의해서는 ethanol에 의한 반용과 차이가 나지 않았다 (Fig. 2A). 이와 같이 Estrogen hormone에 의한 ER trans-activation 효과가 비교적 낮은 이유는 뚜렷하지 않으나 배양된 세포의 weaning condition 또는 낮은 transfection 효율에 기인한 것으로 추정된다. Hep G2세포에서와는 달리, estradiol과 TCPOBOP를 동시에 처리하였을 때에도 \( \mathrm { CAR } \) expression plasmid의 transfection 여부와 상관없이 TCPOBOP가 17-beta-estradiol에 의해 증가된 ER transactivaton의 효과를 억제하지 않았다 (Fig. 2A). Transfection된 CAR의 양을 \( 250 \mathrm { ng } \) 까지 증가시켜도 estrogen에 의한 synthetic 4ERE-tk-luciferase의 transactivation의 효과를 변화시키지 못하였다 (Fig. 2A). Estradiol과 rifampicin을 동시에 처리하였을 때, \( 10 \mathrm { ng } \) 의 transfection된 SXR expression plas-mid는 CAR의 ER에 대한 효과와 유사하게 (Fig. 2A) ER transactivaton의 효과를 억제 혹은 변화시키지 못하였지만, \( 50 \mathrm { ng } \) 이상의 SXR plasmid를 transfection하였을 때에는 오히려 estrogen에 의한 ER transactivaton 효과를 약 \( 20 \% \) 촉진하였다 (Fig. 2B). MCF-7 유방암세포에 대한 CAR의 ER transactivation효와와 마찬가지로 Prostaglan-din에 의해 활성화 된 PPAR \( \gamma \) 역시 estrogen에 의해 촉진된 ER의 synthetic 4ERE-tk-luciferase transactivation 효과를 변화시키지 못하였다 (Fig. 2C). 이러한 결과는 MCF-7 유방암세포에서는 CAR, SXR, PPAR \( \gamma \) 과 같은 xenobiotic nuclear receptor에 의한 ER transactivation 화과가 Hep \( \mathrm { G } 2 \) 와는 다르게 나타나며, estrogen receptor에 의해 매개되는 estrogn의 전사활성 조절기전이 Hep G2세포와는 다른 경로를 포함하고 있음을 시사한다.</p> <h2>\( \mathrm { MDA } - \mathrm { MB } -231 \) 세포에 있어서 \( \mathrm { ER } \) transactivation에 대한 CAR, SXR, PPAR \( \gamma \) 의 영향</h2>