2일령 코브종 병아리 100 수를 공시하여 기본 배합 사료를 급여한 대조군에 34수, CS682를 \(0.1\%\)와 \(1\%\)를 첨가한 사료 급여군에 각각 33 수를 배정하였다. 3원 교잡종(Landrace×Yorkshire×Duroc) 이유자돈 72두를 공시하여 기본 배합 사료를 급여한 대조군에 24두, CS682를 \(0.1\%\) 첨가하고 개시체중이 대조군보다 낮은 CS682-1군과 CS682 를 \(0.1\%\) 첨가하고 개시체중이 대조군보다 높은 CS682-2군에 각각 24 마리씩 배정하였다. 본 실험에서 사용된 시료는 조선대학교 약리학 연구실에서 개발한 물질로서, 전남지방 해안에서 분리한 Nocarida sp.CS682 균주의 배양액을 먼저 연속식원심분리기를 이용하여 균사체와 배양 상등액을 분리하였다. 육계의 용량설정은 랫드를 이용한 급성독성 및 아급성 독성 연구를 참고로 용량을 설정하였고, 군 분리는 대조군과 실험군으로 분리하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>시험동물 및 사육환경</h2> <h3>육계</h3> <p>2일령 코브종 병아리 100 수를 공시하여 기본 배합 사료를 급여한 대조군에 34수, CS682를 \(0.1\%\) 와 \(1\%\)를 첨가한 사료 급여군에 각각 33 수를 배정하였다. 시험 기간은 28 일로 \(32^{\circ}\mathrm{C}\) 전 후, 상대습도 \(50-70\%\), 12시간의 명암주기, 환기가 되는 환경에서 사료 및 상수도수를 자유급여 시켰다.</p> <h3>이유자돈</h3> <p>3원 교잡종(Landrace×Yorkshire×Duroc) 이유자돈 72두를 공시하여 기본 배합 사료를 급여한 대조군에 24두, CS682를 \(0.1\%\) 첨가하고 개시체중이 대조군보다 낮은 CS682-1군과 CS682 를 \(0.1\%\) 첨가하고 개시체중이 대조군보다 높은 CS682-2군에 각각 24 마리씩 배정하였다. 시험 기간은 28 일로 \( 28^{\circ}\mathrm{C}\) 전 후, 상대습도 \(50-70\%\), 12시간의 명암주기, 환기가 되는 환경에서 사료 및 상수도수를 자유급여 시켰다.</p> <h2>시험물질</h2> <p>본 실험에서 사용된 시료는 조선대학교 약리학 연구실에서 개발한 물질로서, 전남지방 해안에서 분리한 Nocarida sp.CS682 균주의 배양액을 먼저 연속식원심분리기를 이용하여 균사체와 배양 상등액을 분리하였다. 균사체는 제거하였으며 배양 상등액은 약 6601 를 회수하였다. 회수한 상등액은 약 \(60-65^{\circ}\mathrm{C}\)에서 감압농축하여 1001 수준으로 농축한 후 \(2\%\)에 해당하는 옥수수전분을 첨가한 후 동결건조를 수행하였다. 동결건조 후 분말을 얻었으며, 동결건조 후 성상, 물성개선 및 제품함량을 고려하여 옥수수전분을 첨가하여 완제동결건조된 분말을 조선대학교 약학대학에서 제공받았다.</p> <h2>시험사료의 농도설정 및 투여</h2> <p>육계의 용량설정은 랫드를 이용한 급성독성 및 아급성 독성 연구를 참고로 용량을 설정하였고, 군 분리는 대조군과 실험군으로 분리하였다. 대조군은 육계용 사료만 급여하였고, 실험군은 육계용 사료에 CS682 분말을 첨가한 후 배합기를 이용하여 \(0.1\%\)와 \(1\%\)농도의 균질한 첨가제 사료를 제조하여 급여하였다. 이유자돈의 농도설정은 육계실험 결과를 토대로 경제적인 농도인 \(0.1\%\)를 선택하였다. 대조군은 자돈용 일반사료만 급여하였다. 실험군은 대조군에 비하여 평균체중이 낮은군 (\(0.1\%\)CS682-1)과 높은 군(\(0.1\%\) CS682-2)으로 분리하였고, 자돈용 일반사료에 CS682 분말을 첨가한 후 배합기를 이용하여 \(0.1\%\) 농도의 균질한 첨가제 사료를 제조하여 급여하였다.</p> <h2>평가항목</h2> <h3>육계</h3> <p>일당 증체량</p> <p>최종 체중은 시험 종료 시의 총 체중을 사육두수로 나누어 평균치로 나타냈고, 이 수치에서 개시 체중을 뺀 후 사육일수로 나누어 일당 증체량을 구하였다.</p> <p>일일 사료 섭취량 및 사료효율</p> <p>일일 사료 섭취량은 총사료 급여량에서 잔여 사료를 감하여 사육일수로 나누어 구하였고, 일당 증체량은 사료효율은 일당 증체량을 일일 사료 섭취량으로 나누어 구하였다.</p> <p>일반증상 및 사망률</p> <p>실험 전 기간 동안 매일 1회 이상 일반증상과 사망률을 관찰하였다.</p> <p>부검 및 육안소견</p> <p>시험물질 투여 후 28일째에 \(\mathrm{CO}_{2}\)로 희생시켜 방혈 치사시킨 다음 부검하여 근육(닭가슴살), 흉강 및 복강장기, 위벽점막, 뇌 등의 장기에 대하여 육안적 검사를 실시하였다.</p> <p>혈액학적 평가</p> <p>부검 전날 절식 시킨 후 10 마리를 군별로 무작위 선출하여 23-gauge 주사바늘로 익하정맥에서 채혈하여 헤파린 튜브에 혈액을 수집하였다. 검사항목은 red blood cells (RBC), hemo-globin (HB), hematocrit (HCT), mean corpuscular volume (MCV), mean corpuscular hemoglobin (MCH), mean corpus-cular hemoglobin concentration (MCHC), red cell dis-ribution width (RDW), platelet (PLT), white blood cells (WBC), neutrophils (NE), lymphocytes (LY), monocytes (MO), eosinophils (EO), basophils (BA) 등으로 Hemavet blood analyzer (Drew Scientific Co. USA)를 이용하여 분석하였다.</p> <h3>이유자돈</h3> <p>일당 증체량</p> <p>최종 체중은 시험 종료 시의 총 체중을 사육두수로 나누어 평균치로 나타냈고, 이 수치에서 개시 체중을 뺀 후 사육일수로 나누어 일당 증체량을 구하였다.</p> <p>일일 사료 섭취량, 일일 증체량 및 사료효율</p> <p>일일 사료 섭취량은 총사료 급여량에서 잔여 사료를 감하여 사육일수로 나누어 구하였다. 사료효율은 일당 증체량을 일일 사료 섭취량으로 나누어 구하였다.</p> <p>일반증상 및 사망률</p> <p>실험 전 기간 동안 매일 1회 이상 일반증상과 사망률을 관찰하였다.</p>