고농도의 과산화수소로 오랜 시간 노출시키면 항산화 능력이 증가하는 것을 확인하였고, 25 passage에서 35 passage 단계에서 항산화 효소의 발현 정도가 급격히 감소하므로 노화가 진행되었음을 추측할 수 있었다. 또한 35 passage에서 500 \(\mu\mathrm{m}\) 이상의 농도를 1 시간동안 노출시켰을 때 Cu/Zn SOD가 거의 발현되지 않았고, 30 분 동안 노출시켰을 때 500 \(\mu\mathrm{m}\)의 농도까지 방어 할 수 있는 능력을 가질수 있었다.
<h1>요 약</h1> <p>생체는 산소를 소비하는 대사 과정 중에 초산화물(superoxide, \( \mathrm { O } _ { 2 } ^ { - } ) \), 과산화수소 \( \left ( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \right ) \), 수산 라디칼 \( ( \mathrm { OH } ) \)과 같은 다양한 활성산소(reactive oxygen)들을 생성하게 되며, 그 중에서도 hydrogen peroxide \( \left ( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \right ) \)는 biological membrane을 자유롭게 통과하며, 세포내에서 hydroxyl radical 등의 반응성이 큰 활성 산소종(reactive oxygen species, ROS)을 발생시키는 작용을 하는 강력한 산화제이다. 세포를 계대 배양(5, 15, 25, 35 passage)하여 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \)를 농도별 \( (100 ~ \mu \mathrm { M } , 500 ~ \mu \mathrm { M } \), \( 1 \mathrm { ~mM } , 5 \mathrm { ~mM } ) \)로 처리하고, 또한 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \)의 처리 시간(30 분, 1 시간)을 변화시킴으로써, Hepatoma 세포주에서 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 처리에 의한 \( \mathrm { Cu } / \mathrm { Zn } \) SOD의 발현을 Northern blot을 통하여 다음과 같이 분석하였다. 1)Hepatoma 세포주에서 시간별, 농도별로 산화제를 처리 했을 때 각각의 경우에서 발현양의 차이는 적었지만, 오랜 시간동안 고농도의 산화제에 노출시켰을 때 항산화 능력이 증가한다는 것을 확인할 수 있었다. 2)계대 배양을 증가시키는 것은 노화가 진행된다는 것을 의미하므로, 산화제를 처리 했을 때 25 passage에서 35 passage 단계에서 항산화 효소의 발현 정도가 급격히 감소되는 것으로 미루어 보아 이 단계에서 노화가 진행되었음을 추측할 수 있었다. 3)동일한 시간과 농도로 처리했을 때 각각의 passage의 발현 level에서 보이는 양상과는 다르게 35 passage에서는 \( 500 \mu \mathrm { M } \)이상의 농도를 1 시간동안 노출시켰을 경우에 \( \mathrm { Cu } / \mathrm { Zn } \) SOD가 거의 발현되지 않았으며, 30 분 동안 노출시켰을 때에는 \( 500 ~ \mu \mathrm { M } \)의 농도까지 방어 할 수 있는 능력을 가진 것으로 보인다.</p>