본 연구에서는 Lentinus lepideus 균주를 사용하여 실험을 진행하였다. 균주는 농촌진홍청 농업과학기술원 응용미생물과에서 분양받았으며, 배양은 PDA 배지에서 \(25^{\circ}\mathrm{C}\)에서 8일 동안 이루어졌다. 배양 후에는 \(4^{\circ}\mathrm{C}\)에서 보존하며, 4주마다 계대배양하여 실험에 사용되었다. 실험에는 PDA 평판 배지에서 생육한 균사체를 이용하여 직경 \(5\mathrm{mm}\)크기의 균사절편을 제작하였다. 이를 \(100\mathrm{mL}\)의 PDB 배지를 넣은 \(300\mathrm{mL}\)의 삼각 플라스크에 접종하였다. 잣버섯의 최적 생장 온도를 조사하기 위해 PDA 배지를 조제하고 \(121^{\circ}\mathrm{C}\)에서 고압 살균한 후, 접종원을 접종하여 \(20,25,30^{\circ}\mathrm{C}\)의 온도에서 8일 동안 배양하였다. 생장 정도는 일일간격으로 관찰되었다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>균주 및 보존</h2> <p>본 연구에 사용한 균주는 Lentinus lepideus (KACC 50120)로 농촌진홍청 농업과학기술원 응용미생물과에서 분양 받아 사용하였으며, potato dextrose agar (PDA)배지에서 \(25 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 8일간 배양한 후 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 보존하였고, 4주마다 계대배양하면서 실험에 사용하였다.</p> <h2>접종원</h2> <p>PDA평판배지에서 생육한 균사체를 직경 \( 5 \mathrm { mm } \) 의 cork borer로 절취한 균사절편 \( 4 \sim 5 \) 개를 \( 100 \mathrm { mL } \) PDB (potato dextrose broth)배지를 넣은 \( 300 \mathrm { mL } \) 삼각플라스크에 접종 하였다. \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } , 110 \mathrm { rpm } \) 으로 7 일간 배양한 다음, 배양액을 균질기로 30 초동안 균질화시켜 본 배양의 접종원으로 사용하였고, 매 실험마다 새로이 배양하여 사용하였다.</p> <h2>배양조건</h2> <p>잣버섯의 균사생육에 가장 좋은 최적 온도를 조사하기 위하여 PDA배지를 조제하여 \( 121 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 15분간 고압살균하고 petri dish에 \( 20 \mathrm { ~mL } \) 씩 분주하여 군힌 다음, 접종원을 접종하고 \( 20,25,30 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 의 온도 범위로 조절된 항온기에서 8일간 배양하면서 균사의 생장 정도를 하루 간격으로 조사하였다.</p> <p>균사생육이 가장 좋은 최적배지를 선발하기 위하여 Table 1에 공시된 9종의 배지를 \( 300 \mathrm { ~mL } \) 삼각플라스크에 각각 \( 100 \mathrm { ~mL } \) 씩 분주한 후, \( 121 ^ {\circ } \mathrm { C } , 15 \)분간 고압 살균한 다음, clean bench에서 무균적으로 균질화된 접종원을 \( 5 \%( \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 접종하여, \( 25 \pm 1 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 로 \( 110 \mathrm { rpm } \) 으로 14 일간 진탕배양하였다.</p> <p>균사체 생육 최적 초기 \( \mathrm { pH } \) 롤 조사하기 위하여 선정된 최적배지(YMG)를 \( 300 \mathrm { ~mL } \) 삼각플라스크에 \( 100 \mathrm { ~mL } \) 씩 분주하여 \( 1 \mathrm { ~N } \mathrm { HCl } \) 과 \( \mathrm { NaOH } \) 로 초기 \( \mathrm { pH } \) 범위를 \( 4.0,4.5,5.0,5.5,6.0,6.5,7.0,7.5 \) 그리고 8.0으로 달리하여 조절한 다음, \(121 { } ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 15 분간 고압 살균하여 무균적으로 균질화된 접종원을 \( 5 \%( \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 접종하여 \( 25 \pm 1 ^ {\circ } \mathrm { C } , 110 \mathrm { rpm } \) 으로 14 일간 진탕배양하였다.</p>