E.coli 균에서 에스터라제 EM2L8 유전자를 발현하고 활성을 분석 결과, \( 40-45 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 최적의 효소활성을 보였고 저온 적응효소인 것으로 밝혔으며, \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 장기보관해도 효소활성이 전혀 줄어들지 않았다. DMSO의 경우 \( 40 \% \) 농도까지 첨가해도 효소활성이 유지되는 것으로 나타났다.
<h1>요 약</h1> <p>에스터라제 EM2L8 유전자를 E. coli 균에서 발현하고 에스터라제 활성을 분석한 결과, \( 40-45 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 최적의 효소활성을 보였다. \( 15 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 최대활성의 \( 45 \% \) 활성을 보였고 \( 15-45 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 사이의 활성화에너지는 \( 4.9 \mathrm { kcal } / \mathrm { mol } \) 로 계산됨으로써 전형적인 저온 적응효소인 것으로 밝혀젔다. 또한, \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 장기보관해도 효소활성이 전혀 줄어들지 않음을 통해서 저온에서 안정한 효소임을 알게 되었다. 반응액에 에탄올, 메탄올, 아세톤을 15% 농도까지 첨가해도 효소활성이 줄어들지 않았으며 DMSO의 겅우, \( 40 \% \) 농도까지 첨가해도 효소활성이 유지되는 것으로 나타났다. 이 효소 40 U을 Tris- HCI 용액(1.2 mL, pH 9.0)에 넣고 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 (R,S)-ECHB(0.5%, 38 mM)의 분해반응을 수행한 결과, 기질이 가수분해되어 CHBacid 가 생성되머 기질의 분해속도는 \( 6.8 \mu \mathrm { mole } / \mathrm { h } \) 로 계산되었다. (R)-ECHB 보다 (S)-ECHB 기질을 빠르게 분해하였으며 전환수율이 80%일 때, e.e.s 값이 40%로 측정 되었다. 반응액에 DMSO를 \( 10 \%( \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 농도로 각각 첨가한 결과, 기질의 분해 속도는 \( 10.4 \mu \mathrm { mole } / \mathrm { h } \) 로 증가되었다. 하지만 DMSO의 유무와 상관없이 전환수율에 따른 e.e.s 값은 유사하게 나타났다. 결론적으로 이 효소는 저온과 각종 유기용매 하에서도 높은 안정성과 활성을 갖고 있기 때문에 각종 의약품의 유기합성공정에서 효소촉매로 활용될 수 있을 것으로 기대된다.</p>