ERIC fingerprinting과 ribotyping-PCR과정에 대해 기술하고 RAPD과 Typing 방법들의 분리력 비교결과를 설명하고 있다. 이를 통해 DG122를 이용한 RAPD와 ribotyping-PCR의 결과를 종합할 경우 13가지의 유형으로 모두 분리할 수 있는 결과를 얻었다.
<h1>결과 및 고찰</h1><h2>ERIC fingerprinting</h2><p>ERIC fingerprinting을 위해서는 DG111(ERICR)과 DG112(ERIC2) primer를 사용하였고(Table 1) 13종의 리스테리아 표준균주를 9가지 유형으로 분리할 수 있었다(Fig. 1.). 그러나 7가지 L. monocytogenes중 3가지가 동일한 유형을 보였고 L. innocua, L. grayi, L. murrayi를 구별하지 못하였다(Table 3).</p><h2>ribotyping-PCR</h2><p>ribotyping-PCR을 위해서는 DG109(Rib-F)와 DG110 (Rib-R)primer를 사용하였고(Table 1) 13종의 리스테리아 표준균주를 7가지 유형으로 분리할 수 있었다(Fig. 2.). 검사한 L. monocytogenes 중 ATCC 19114와 ATCC 19115가 동일 유형으로 나타났고 ATCC 19117과 19118이 동일 유형을 보였다. 그리고 L. monocytogenes HPB#410, L. monocytogenes ATCC 35152, L. ivanovii, L. seeligeri 가 동일 유형을 보였다(Table 3).</p><h2>RAPD</h2><p>우리는 앞선 연구에서 리스테리아균의 RAPD에 적합한 primer를 선정하기 위해 31가지의 primer를 대상으로 분리력을 비교하여 이중 6가지의 우수한 primer를 선별하여 보고한 바 있다. 그 결과에 의하면 이중 DG122(Lis 11)을 이용한 RAPD 결과는 L. monocytogenes ATCC 19115와 L. monocytogenes ATCC 19117이 동일한 유형으로 나타났으며 L. innocua와 L. grayi가 동일한 유형을 보였다(Table 3). 그러나 DG107(primer 6)을 이용한 RAPD 결과는 L. monocytogenes HPB#10과 ATCC 35152를 구분하지 못하고 L. grayi와 L. murrayi를 구분하지 못하였다(Table 3).</p><h2>Typing 방법들의 분리력 비교</h2><p>비교한 3가지 방법은 \(D\)값에 있어 2가지 RAPD가 모두 0.9743, ERIC fingerprinting이 0.9230, ribotyping-PCR이 0.8846으로 RAPD가 ERIC fingerprinting과 ribotyping-PCR에 비해 높은 \(D\)값을 보였다. 이들 방법 중 단일방법으로 13가지 리스테리아 표준균주 모두를 분리할 수 있는 방법은 없었다. 그러나 RAPD(DG122)와 ribotyping-PCR 2가지를 종합하거나(composite 1) 2가지 RAPD 결과를 종 합하여 판단할 경우(composite 2)는 13가지 유형으로 모두 분리할 수 있었다(Table 3). 반면 RAPD(DG122)와 ERIC fingerprinting의 결과를 종합할 경우(composite 3), DG107을 이용한 RAPD와 ribotyping-PCR을 종합한 경우(composite 5), 그리고 ERIC fingerprinting과 ribotyping-PCR을 종합한 경우(composite 6)에는 RAPD를 단독으로 실시한 것과 마찬가지로 11가지 유형으로만 분리할 수 있었다. 또한 RAPD (DG107)와 ERIC fingerprinting을 종합할 경우 12가지 유형으로 분리할 수 있었다(composite 4).</p><p>결론적으로 리스테리아균의 경우 각 방법을 단독으로 행할 경우는 RAPD가 ERIC fingerprinting이나 ribotyping-PCR보다 분리력이 뛰어나 typing에 더 적합한 것으로 판단되나 이 역시도 13가지를 모두 다른 유형으로 분리하지는 못했다. 그러나 RAPD를 ribotyping-PCR과 병행하여 사용하거나 2가지 primer를 이용하여 각각의 RAPD를 행한 후 이를 종합적으로 판단할 경우는 13가지를 모두 다른 유형으로 분리하는 것이 가능하였다. 따라서 야생주를 이용한 typing에는 2가지 RAPD를 종합하거나 DG122를 이용한 RAPD와 ribotyping-PCR 결과를 종합해서 판단하는 것이 유용할 것으로 판단된다.</p><h1>요 약</h1><p>리스테리아를 보다 효과적으로 typing할 수 있는 방법을 찾기 위해 표준균주 13종을 대상으로 하여 RAPD, ERIC (Enterobacterial repetitive intergenic consensus) fingerprinting, ribotyping-PCR의 분리력을 비교해 보았다. DG107(primer 6) 또는 DG122(Lis 11) primer를 이용한 RAPD의 경우 11가지의 유형으로 분류되는 반면, ERIC fingerprinting 은 9가지, ribotyping-PCR은 7가지씩의 유형을 보였다. 그러나 2가지 primer를 이용하여 각각 행한 RAPD 결과를 종합하거나, DG122를 이용한 RAPD와 ribotyping-PCR의 결과를 종합할 경우 13가지의 유형으로 모두 분리할 수 있었다.</p>