능이버섯에서 fibrin 분해활성물질을 분리정제하여 정제된 효소의 특성을 측정하였다.그 결과 단일 peak를 얻었고 활성은 11.3배 증가하였으며 수율은 49.5%이었다. 또한 12% SDS-PAGE로 전기영동한 결과 단일 band를 얻었고 분자량은 29,300 Da로 확인되었다. 혈전용해효소는 pH가 높아질수록 효소활성이 증가하고 알카리성에서도 안정하며 60\(^\circ \mathrm{C}\) 이상의 온도에서 효소활성이 급격히 실활하기 시작하였으며 80\(^\circ \mathrm{C}\)에서도 25%의 상대활성을 보였다.
<h1>요 약</h1> <p>능이버섯[Sarcodon aspratus(Berk.) S.Ito]의 fibrin 분해활성물질을 분리정제하기 위하여 \( \left ( \mathrm { NH } _ { 4 } \right )_ { 2 } \mathrm { SO } _ { 4 } \) 침전법, DE52 anion exchange column chromatography, Sephacryl-S200 gel filtration chromatography 및 Mono S cation FPLC를 행하였으며 정제된 효소의 특성을 측정하였다. 혈전용해효소의 활성물질은 DE52 anion exchange column chroma-tography에서 \( \mathrm { NaCl } \)의 농도가 \( 0.2 \mathrm { M } \) 정도에서 용출되었으며 계속된 Sephacryl-S200 gel filtration chromatography 및 Mono S cation FPLC를 실시한 결과 단일 peak를 얻었고 혈전용해효소의 특이활성은 \( 55.2 \mathrm { U } / \mathrm { mg } \) protein으로 조효소액에 비하여 11.3배 증가하였으며 수율은 \( 49.5 \% \)이었다. 또한 Mono S cation FPLC에서 얻은 활성획분을 \( 12 \% \) SDS-PAGE로 전기영동한 결과 단일 band를 얻었으며 gel filtration의 결과와 비교함으로서 정제된 능이의 혈전용해효소의 분자량은 \( 29,300 \mathrm { Da } \)인 것으로 확인되었다. 능이로부터 정제한 혈전용해효소는 \( \mathrm { pH } \)가 높아질수록 효소활성이 증가하였으며 \( \mathrm { pH } ~10.5 \)의 알카리성에서도 안정하였으며 \( { 60 } ^ {\circ } \mathrm { C } \) 이상의 온도에서는 효소활성이 급격히 실활하기 시작하였지만 \( 80 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서도 \( 25 \% \)의 상대활성을 보였다. 또한 본 효소는 \( \mathrm { Cu } ^ { 2 + } \) 이온 및 \( \mathrm { Co } ^ { 3 + } \) 이온 등 중금속에 의하여 \( 68 \% \) 및 \( 38 \% \) 활성이 저해되었으며 \( \mathrm { Ca } ^ { 2 + } \) 이온 또는 \( \mathrm { Mg } ^ { 2 + } \)의 chelator인 EDTA 및 serine protease inhibitor인 PMSF에 의하여 활성이 저해되었었다. 이러한 결과들은 능이의 혈전용해효소가 \( \mathrm { Ca } ^ { 2 + } \) 또는 \( \mathrm { Mg } ^ { 2 + } \)에 의하여 활성이 증가하는 serine protease임을 암시해 주고 있다.</p>