에틸아세테이트 추출물은 높은 항산화 활성도를 보여주었으며, 이를 바탕으로 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 추가적인 분획을 진행하였다. 특히, 에틸아세테이트와 부탄올은 9일 동안의 실험 기간 동안 흡광도의 변화를 보이지 않았음으로써, 기존 항산화제인 BHA, BHT, \( \alpha \)-tocopherol와 비슷한 지속적인 과산화 지질 형성 억제능을 확인하였다. 이 결과는 에틸아세테이트와 부탄올의 효과적인 항산화 성능을 시사한다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <p>초석잠의 메탄올 추출물에서 total polyphenols과 flavo-noids의 함량을 측정하여 Table 1에 나타내었으며, 활성 성분에 대한 특성을 검토하고자 특성이 다른 유기 용매인 헥산, 클로르포름, 에틸아세테이트, 및 부탄올순으로 순차적으로 추출물을 용출하여 얻은 수율을 Fig. 2에 나타내었다.</p> <p>건조시켜 가루 상태의 초석잠 뿌리(Stachys sieboldii MIQ.) \( 696.6 \mathrm{~g} \)을 메탄올로 추출하여 \( 86.37 \mathrm{~g}(12.4 \%) \)의 추출물을 얻었으며 이 중 \( 86.37 \mathrm{~g} \)을 취하여 헥산 추출물에서 \( 2.86 \mathrm{~g}(3.31 \%) \), 클로르포롬, \( 3.27 \mathrm{~g}(3.79 \%) \), 에틸아세테이트, \( 1.23 \mathrm{~g}(1.42 \%) \), 부탄올, \( 9.79 \mathrm{~g}(11.34 \%) \), 증류수, \( 59.77 \mathrm{~g}(69.19 \%) \)의 추출물을 각각 얻었다. 그 중 에틸아세테이트의 추출물에서 높은 항산화 활성도를 보여 칼럼 크로마토그래피를 이용하여 다시 분획하였다.</p> <h2>DPPH에 의한 항산화 환성도 측정</h2> <p>각 용매별로 추출한 시료의 DPPH에 의한 자유 라디칼 소거작용을 측정하여 라디칼의 \( 50 \% \) 를 소거시키는 농도 값을 IC50으로 표시하였으며 Fig. 3에 각 추출 시료의 비교 값을 나타내었다. 증류수가 \( 200 \mu \mathrm{g} \) 으로 가장 낮은 값을 보였고 헥산 \( (100 \mu \mathrm{g}) \), 클로르포름 \( (80 \mu \mathrm{g}) \), 메탄올 \( (25 \mu \mathrm{g}) \), 부탄올 \( (10 \mu \mathrm{g}) \), 에틸아세테이트 \( (2.8 \mu \mathrm{g}) \) 의 순으로 높은 소거능을 보이고 있다. 특히 에틸아세테이트와 부탄올 추출물은 대조군으로 사용된 기존의 항산화제인 BHA \( (20.6 \mu \mathrm{g}) \), BHT \( (100 \mu \mathrm{g}), \alpha \)-tocopherol\( (21.8 \mu \mathrm{g}) \)에 비해 높은 활성도를 나타내고 있음을 알 수 있었다.</p> <h2>과산화 지질(linoleic acid) 형성 억제능 측정</h2> <p>활성 산소는 우리 몸의 지질(주로 불포화 지방산)과 결합하여 과산화 지질로 변화된다. 이러한 과산화 지질은 생체 내에서 효소를 불활성화 시키고 호르몬 생 합성을 저하시킬 뿐 아니라, 외부 환경이나 자극에 대한 방어능력을 상실하게 하여 각종 성인병을 유발시킨다. 특히 linoleic acid \( \left(\mathrm{C}_{18} \mathrm{H}_{32} \mathrm{O}_{2}\right) \) 는 2개의 이중결합을 가지는 불포화지방산으로 공기 중에서 산화되기 쉬운 건성유이다. 각 분획별 초석잠 추출물을 이용하여 이러한 과산화 지질(linoleic acid)에 대한 형성 억제능을 측정하고 결과를 Fig. 4에 나타내었다. Control이 2일부터 급격한 산화를 보이고 있지만 용매 추출물들은 3일 동안 흡광도가 0.1~0.2 사이로 큰 변화를 나타내지 않았다. 하지만 4 일부터 증류수, 메탄올, 헥산, 클로르포름 순으로 급격한 흡광도의 변화를 보이며 산화가 되어감을 보였다. 에틸아세테이트와 부탄올은 대조군으로 사용된 기존의 항산화제인 BHA, BHT, \( \alpha \)-tocoph-erol와 비슷하게 9일 동안 흡광도의 변화를 보이지 않으면서 지속적인 과산화 지질 형성 억제능을 보여 주고 있었다.</p>