균사체 F.pinicola laccase 생산하기 위해 여러종류의 합성배지를 사용하여 균사를 배양하였다.그 결과 탄소원 dextrose, 질소원 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \), 무기질원 \( \mathrm{CaCl}_{2} \), \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \)가 첨가되었을 때 효소 활성이 가장 뛰어난 것을 확인할 수 있었다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>배지의 영향</h2> <p>F. pinicola 균사체로부터 laccase를 생산하기 위하여 여러종류의 합성배지를 사용하여 균사를 배양한 결과를 Fig. 1 에 나타내었다. 실험에 사용된 합성배지 중 \( \mathrm{MCM} \) 을 사용하여 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 8 일 동안 배양하였을 때, \( 114 \mathrm{mU} / \mathrm{mL} \) 로 다른 배지에 비해 활성이 가장 우수함을 알 수 있었다. 이 결과는 Park 등이 보고한 \( F \). fraxinea 중의 laccase가 MCM 배지에서 최대의 활성을 나타낸 결과와 일치하였다.</p> <h2>탄소원의 영향</h2> <p>다양한 종류의 탄소원이 F. pinicola laccase의 생산에 미치는 영향을 조사하기 위하여 복합배지 중 최대 활성을 나타낸 \( \mathrm{MCM} \) 으로부터 dextrose를 제거한 후 각각의 \( 2 \% \) 탄소원을 첨가한 배지에 버섯 균사체를 배양한 후 효소활성을 촉정하였다. 그 결과 \( \mathrm{MCM} \) 의 원 조성인 dextrose가 탄소원으로 첨가되었을 때 다른 탄소원에 비하여 효소활성이 가장 높은 것으로 확인되었다(Table 2). 이 결과는 담자균류로부터 laccase를 생산하기 위한 탄소원중 glucose를 이용한다는 보고와 일치함을 알 수 있었다.</p> <h2>질소원의 영향</h2> <p>각 종류별 질소원이 F. pinicola의 laccase 생산에 미치는 영향을 조사하기 위해 \( \mathrm{MCM} \) 의 질소원을 제거한 후 각 종류의 질소원을 \( 0.4 \% \) 농도로 조정한 배지에 균사체를 배양한 후 효소활성을 측정하였다. 그 결과 peptone이 질소원으로 첨가되었을 때 효소활성이 가장 높은 것으로 확인되었다 (Table 3). \( \mathrm{MCM} \) 의 원 성분인 혼합질소원 \( (0.2 \% \) peptone과 \( 0.2 \% \) yeast extract)을 첨가하였을 때와 \( 0.4 \% \) yeast를 질소원으로 첨가하였을 때 효소활성이 비교적 우수하였으나, 기타 다른 질소원을 첨가하였을 때 효소활성이 나타나지 않았다. 이는 Mikiashvili 등이 T. versicolor로부터 리그닌 분해효소 생산을 위한 질스원으로 peptone이 가장 우수하다고 보고한 결과와 일치하였다. 그러나 \( F \). fraxinea로부터 laccase를 생산하기 위한 질소원 중 \( \left(\mathrm{NH}_{4}\right)_{2} \mathrm{HPO}_{4} \) 가 가장 우수하다고 보고한 결과와는 상이함을 알 수 있었다.</p> <h2>인산원 및 무기질원의 영향</h2> <p>각 종류별 인산원 및 무기질원이 F. pinicola의 laccase 생산에 미치는 영향을 조사하기 위해 \( \mathrm{MCM} \) 의 인산원 및 무기질원을 각 각 제거한 후 각 종류별 인산원과 무기질원을 \( 0.05 \% \) 농도로 조정한 배지에 균사체를 배양하여 효소활성을 측정한 결과를 Table 4에 나타내었다. 인산원 중 \( \mathrm{NaH}_{2} \mathrm{PO}_{4} \). \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) 가 첨가되었을 때 효소활성이 가장 우수함을 확인하였으며, 이 결과는 F. fraxinea의 laccase가 \( \mathrm{Na}_{2} \mathrm{HPO}_{4} \cdot 7 \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \)에 의하여 생산량이 증가한다는 결과와 상이하였다. 무기질원의 경우 \( \mathrm{CaCl}_{2} \) 가 첨가되었을 때 효소활성이 가장 우수함을 알 수 있었다.</p>