부산 남항 인근의 유류 오염 지역에서 탄소원이 결핍된 C-배지에 crude oil과 해수를 첨가하여 37\(^\circ \mathrm{C}\), 200rpm으로 진탕배양하니 crude oil 분해능을 가진 분해균이 생육하는 것을 확인하였다. 또한 4A3 균주를 동정하여 Providencia rettgeri로 명명하였고, 이는 우량 균주의 개발, 유류 분해능 촉진 인자 탐색 등을 위한 많은 연구가 기대되는 종으로 보여졌다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>균주의 분리</h2> <p>부산시 남항 인근의 유류오염 지역으로부터 해수를 채취하여 탄소원이 결핍된 C-배지 \( 200 \mathrm { ~m } \ell \)에 crude oil \( 1 \% \) 및 해수 \( 1 \% \) 를 첨가하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } , 200 \mathrm { rpm } \) 으로 진탕배양한 후, crude oil 분해능을 가진 분해균이 생육하는 것을 확인하였다. 배양액의 일부를 crude oil \( 1 \% \) 를 함유한 새로운 C-배지에 첨가하는 실험을 3 회 반복하였다. 이렇게 하여 얻어진 균주를 LB 고체배지상에 도말하여 단일 콜로니를 얻었다. 이 단일 콜로니들을 LB 액체배지에 접종하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 전배양시킨 후, crude oil \( 1 \% \) 를 함유한 C-배지에 전배양 한 균주를 \( 1 \% \) 첨가하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 7 일간 진탕배양시켰다. 이때 대조구로 C-배지에 crude oil \( 1 \% \) 만을 첨가 시킨 것과 C-배지에 \( 1 \% \) 균주만을 첨가시킨 것을 사용하였다. 대조구와 함께 7 일간 배양시킨 후, crude oil 분해능을 가진 수십여 종의 균주를 분리하였으며, 이중에는 형태학적 및 생리학적 특성으로 보아 기즌에 알려져 있는 Klebsiella sp., Aeromonas sp. 및 Pseudomonas sp. 속으로 추정되는 균주도 있었으나 그 중에서 분해능이 우수하면서 새로운 균주로 보여지는 4A3 균주에 대하여 계속하여 실험하였다.</p> <h2>균주의 동정</h2> <p>선별된 4A3의 동정을 위하여 그램 엽색법, 형태학적 관찰 및 생화학적 실험을 수행한 결과를 Table 1 에 나타내었다. 그램 염색법에 의해서는 그램 음성균으로 확인되었으며, 활발한 운동성을 가진 균주로 확인되었다. 생화학적 실험은 미생물 동정 kit인 API 20 NE Kit를 이용하여 실시한 후, Bergey's manual of systematic bacteriology에 준하여 검토한 결과, Providencia rettgeri로 동정되어 Providencia rettgeri 4A3로 명명하였다. 우리나라 및 외국의 유류 오염 지역에서 주로 분리되고 있는 균주로는 Pseudomonas sp., Aeromonas sp., Acinetobacter sp. 및 Arthrobacter sp. 등이 보고 되고 있다. 그러나, 본 실험에서 분리된 Providencia rettgeri 4A3 균주는 이들과는 다른 종으로서, 앞으로의 생물유화제 생산, 유전공학적 방법에 의한 우량 균주의 개발 및 유류 분해능의 촉진 인자 탐색 등을 위한 많은 연구가 기대된다.</p>