3T3-L1 지방전구세포에서 MTT assay 실험을 수행한 결과 \( 250 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 이하의 톳 추출물 세포독성은 거의 나타나지 않았다. 또한 톳 분획물 처리에 의하여 lipid droplet의 형성이 전체적으로 현저히 억제되며, TG 생성 억제효과가 있는 것을 확인하였다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>3T3−L1 지방전구세포의 증식에 미치는 톳 분획물의 영향</h2> <p>3T3-L1 지방전구세포에서 톳 추출물들의 세포독성을 조사하기 위해서 50 250 \( \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 의 농도에서 MTT assay 실험을 수행하였다. MTT assay는 탈수소 효소작용에 의해 노란색의 수용성 기질인 MTT tetrazolium을 청자색의 formazan으로 환원시키는 미토콘드리아의 능력을 이용하는 검사법으로서 세포의 증식과 성장을 알아보는 대표적인 실험방법 중 하나로 살아있는 세포 수에 비례해서 흡광도가 증가한다. 톳 분획물들의 농도에 따른 3T3-L1 세포의 증식에 미치는 영향을 MTT assay로 분석한 결과는 Fig. 2에 나타낸 바와 같다. 결과에서 알 수 있듯이 WFHF 및 EAFHF 분획물 처리군의 경우 전체적으로 생존율의 변화가 거의 나타나지 않은 반면에 BFHF, EEHF 및 CFHF 분획물 처리군의 경우에는 세포증식 변화율이 증가하는 경향을 보였다. 이상의 결과를 살펴볼 때 3T3-L1 지방전구세포에서 \( 250 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 이하의 톳 분획물들에 의한 세포독성은 거의 나타나지 않는 것으로 나타났다.</p> <h2>3T3-L1 지방전구세포의 lipid droplet 및 TG 생성에 미치는 톳 분획물의 영향</h2> <p>Phospholipid monolayer에 의하여 둘러싸여진 중성지방으로 구성된 비활성 소낭인 lipid droplet은 precursor fibroblast 에서부터 지방세포로의 분화과정에서 나타나며, 이렇게 생성 된 lipid droplet은 lipoprotein lipase (LPL)에 의한 TG 유입과 adipose triglyceride lipase (ATGL) 및 hormone sensitive lipase (HSL)에 의한 TG 유출에 의하여 조절되는 것으로 알려져 있다. 따라서 본 연구에서는 3T3-L1 지방전구세포가 지방세포로의 분화과정에 나타나는 lipid droplet 생성에 톳 분획물이 어떠한 영향을 미치는지를 확인하기 위하여 각각의 분획물을 적정 농도로 처리하여 분화를 유도한 후 Oil Red O 염색 전후로 구분하여 lipid droplet 생성정도를 관찰하였다. Fig. 3 및 4 에서 볼 수 있듯이 톳 분획물을 처리하지 않고 분화를 유도하였을 경우에 세포질 내 lipid droplet의 형성이 활발하게 유발되었으며, 톳 분획물 처리에 의하여 lipid droplet의 형성이 전체적으로 현저히 억제되는 것을 확인하였는데, 특히 WFHF 처리군에서 lipid droplet 억제 현상이 강하게 나타났다.</p> <p>중성지방으로 알려진 TG의 저장은 chylomicron 및 very low density lipoprotein (VLDL) 등과 같은 TG-rich lipoprotein에 의하여 유발되며, 에너지원으로 사용되고 남은 TG의 경우에는 지방세포에 흡수되고 저장되어 비만의 원인이 된다. 따라서 본 연구에서는 3T3-L1 지방전구세포에 각각의 톳 분획물을 처리하였을 경우 유발되는 TG의 생성억제 효과를 직접 확인한 결과, Fig. 5에 나타난 바와 같이 정상배지에서 분화된 지방세포에 비교해서 WFHF \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 및 200 \( \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 처리군에서 각각 \( 26.8 \% \) 와 \( 42.6 \% \) 의 TG 생성 억제효과가 나타났다. 또한 BFHF, EAFHF, EEHF 및 CFHF \( 200 \mathrm{\mu g} / \mathrm{ml} \) 처리군의 경우에는 각각 \( 13 \%, 18 \%, 17.4 \% \) 및 \( 23.7 \% \) 의 TG 생성 억제효과를 보였다. 이상의 결과를 살펴 볼 때 다섯 종류의 톳 분획물 모두 TG 생성 억제효과가 있는 것으로 나타났고, 특히 WFHF의 TG 생성 억제효과가 큰 것으로 나타났다.</p>