CAT 할성도와 MDA 함량 측정을 위해 Aebi와 Emerit 등의 방법을 사용하였다. CAT 활성도는 2.0 mL 시료에 30 mM H2O2 용액을 넣고 20\(^\circ \mathrm{C}\)에서 변화를 측정하여 1 unit으로 표시했다. MDA 함량은 10% 균질액을 혼합하여 60\(^\circ \mathrm{C}\)에 80분간 가열하고 0.4 mM 1-methyl-2-phenylindole 0.65 mL, 37% HCl 0.15 mL을 넣어 45\(^\circ \mathrm{C}\)에 40분간 반응시킨 뒤 9000×g, 10분 원심분리하여 586 nm에서 흡광도를 측정하여 MDA 함량을 측정하였다.
<h2>Catalase (CAT) 할성도 측정</h2> <p>CAT 활성도 측정은 Aebi 방법에 따라 축정하였다. \(50 \mathrm { mM } \) 인산 완충액 \( ( \mathrm { pH } 7.0) \) 으로 희석시킨 측정 시료 \( 2.0 \mathrm { ~mL } \) 에 \( 30 \mathrm { mM } \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 용액 \( 1.0 \mathrm { ~mL } \) 를 넣은 후 \( 20 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 파장 \( 240 \mathrm { nm } \)에서의 흡광도 변화를 측정하였다. 효소의 활성도는 \(1 \)분 동안에 \( 1 \mu \) mole의 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 를 분해시키는 효소의 양을 \( 1 \mathrm { unit } \) 로 표시하였다.</p> <h2>Malondialdehyde(MDA)의 함량 측정</h2> <p>지질의 과산화물인 \( \mathrm { MDA } \) 를 Emerit 등의 방법을 이용하여 실험하였다. 간조직액의 \( 10 \% \) 균질액 \( 0.2 \mathrm { ~mL } \) 와 \( 0.2 \mathrm { ~N } \) \( \mathrm { HCl } 0.1 \mathrm { ~mL } \) 를 혼합하여 \( 60 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \(80 \)분간 가열하여 시료를 가수분해 시킨 다음, 가수분해한 시료에 \( 0.4 \mathrm { mM } \) 1-methyl-2-phenylindole \( 0.65 \mathrm { ~mL } \) 와 \( 37 \%~ \mathrm { HCl } 0.15 \mathrm { ~mL } \) 를 넣어 혼합 시키고 \( 45 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \(40 \)분 동안 반웅시킨 다음 원심분리 \( (9000 \times \mathrm { g } , 10 \) 분)하여 얻은 상등액의 흡광도를 \( 586 \mathrm { ~nm } \) 에서 측정하였다. 표준 검량선을 얻기 위하여 1,1,3,3-tetramethoxy-propane(TMP)을 표준품으로 사용하였다.</p> <h2>단백질 정량</h2> <p>단백질 함량은 Bradford 둥의 방법을 이용하여 비교 검토하였다. 95 \% 에탄올 용액 \( 50 \mathrm { ~mL } \) 에 Coomasie Brilliant Blue G- \( 250100 \mathrm { mg } \) 을 녹이고 \( 85 \% \) 인산 \( 100 \mathrm { ~mL } \) 와 물을 첨가하여 최종 부피가 \( 1000 \mathrm { ~mL } \) 가 되도록 한 용액 \( 5 \mathrm { ~mL } \) 을 가하고 \(15 \)분간 방차한 다음, \( 595 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하여 정량하였다.</p>