왕겨초 증류액을 이용하여 실험용 마우스를 대상으로 한 알러지 반응 억제 효과를 측정하기 위해서, 접촉성 피부염 및 아토피 실험을 진행하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>왕겨초 증류액(CVL) 제조</h2> <p>본 실험에 사용한 왕겨초 증류액(chaff vinegar liquor;CVL)은 다음과 같이 제조하였다. 먼저, 선산 미곡종합처리장으로부터 제공받은 왕겨 \( 400 \mathrm{~kg} \)을 탄화기(DCH-600, 대원GSI)를 사용하여 직화식 탄화법에 의하여 왕겨초 증류액을 포집하고, 왕겨를 \( 500^{\circ} \mathrm{C} \)에서, 60분 동안 탄화 처리한 뒤, 상기 탄화처리 중에 배출되는 연기를 응축시켜 조왕겨초 증류액 \( (80 \mathrm{~kg} \), \( 20 \% \))을 얻었으며, 이 조왕겨초 증류액을 감압하여 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \)의 온도에서 왕겨초 증류액(CVL) \( 50 \mathrm{~kg} \)을 수득하였다. 왕겨초 증류액(CVL)은 식염수를 사용하여 \( 1 / 10 \) 농도로 희석하여 사용하였으며, 산쑥과 자소엽은 \( 2 \% \) 농도로 첨가하였는데 이는 왕겨초액 특유의 이취를 제거할 목적으로 첨가하였다. 대조군은 식염수를 사용하였다.</p> <h2>실험동물 준비 및 관리</h2> <p>6주령 된 C57B/L 마우스를 샘타코(주)에서 공급받아 마우스용 케이지 \( (220 \times 200 \times 145\mathrm{~mm}) \)에 넣어 약 1주간 순화과정을 거친 후 사용하였다. 동물실험실의 환경은 온도 \( 22^{\circ} \mathrm{C}\left(2^{\circ} \mathrm{C}\right. \) 오차), 상대습도 \( 55 \% \) (\(5\%\) 오차), 환기횟수 12회/시간, 조명주기 12시간, 조도 \(200 \mathrm{lux}\)로 조절되었다. 실험동물용 pellet형 고형사료인 Purina Rat Chow를 Nestle Purina PetCare Korea Ltd.(Seoul, Korea)로부터 공급받아 급여하였으며, 음수는 별균정제수를 자유롭게 섭취하도록 하였다.</p> <h2>접촉성 피부염(아토피) 실험</h2> <p>Allergy 반응 억제효과를 측정하기 위해서, 다음과 같은 실험동물의 care하에서 수행하였다. 사육한 마우스는 제모제를 충분히 사용하여 등 부위를 넓게 제모하고 24시간 후 올리브 오일과 아세톤을 \( 3: 1 \)로 배합한 용액에 \( 0.5 \% \)의 농도로 조제한 DNFB \( 100 \mathrm{ul} \)를 취하여 처음 3일은 sensitization을 위하여 매일 동일한 시간에 도포하여 피부염을 유발하였다. 이후 DNFB는 \( 0.2 \% \)로 농도를 조정하여 \( 100 \mathrm{ul} \)씩 취하여, 왕겨초증류액(CVL) 혹은 식염수(대조군)와 동시에 2주 동안 격일로 동일한 시간에 도포하였다. 2주 후, 실험 24시간 전부터 절식시키고 가벼운 에테르 마취상태에서 복개 후 심장에서 혈액을 채취하고, 간과 피부조직을 적출하여 중량을 측정한 후 냉동보관하였다. 귀의 피부조직은 절개하여 포르말린에 고정시키고 H\(\&\)E 염색을 수행하였다.</p> <h2>통계학적 분석</h2> <p>실험결과에 대하여 one-way analysis of variance, ANOVA를 실시하여 유의차가 \( 5 \% \) 미만 \( (\mathrm{p}<0.05) \)일 때 통계적 유의성이 있는 것으로 판정하였다.</p>