이 연구에서는 참갈파래 추출물의 항산화 활성을 측정하기 위해 ABTS 검사를 이용하였다. 수집된 데이터는 SPSS 통계 프로그램을 이용하여 각 하위 그룹의 기술통계치를 산출하였고, 일원분산분석을 통해 집단 간의 차이를 분석하였다. 또한, 참갈파래 추출물을 DMSO에 용해하여 500 µg/ml의 농도에서 세포의 생존율이 90% 이상임을 확인하였다. 이러한 결과로 인해 차후 실험에서는 500 µg/ml의 농도를 최고 농도로 설정하였다.
<h2>2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid ABTS radical 소거활성 측정</h2> <p>참갈파래 추출물의 항산화활성 측정을 위하여 ABTS assay를 시행하였다. 2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphonic acid (ABTS) radical 소거활성은 \( \operatorname { Re } \) 의 방법[26,37]을 응용하여 측정하였다. 시료 또는 에탄올 \( 50 \mu \mathrm { l } \)에 ABTS (Sigma, USA) 용액 \( 1 \mathrm { ml } \) 을 첨가하고 실온에서 차광한 상태로 60분간 반응시킨 후 원심분리 \( (12,000 \times \mathrm { g } , 10 \) \( \mathrm { min } ) \) 하여 상등액을 96 well plate에 분주하였다. 흡광도는 ELISA Reader (Multiskan Go, Thermo Scientific, Finland)를 이용하여 \( 734 \mathrm { ~nm } \) 에서 측정하였으며, 아래의 수식으로 ABTS radical 소거활성을 계산하였다. 양성대조군으로는 gallic acid (Sigma, USA)를 사용하였다. 분석 시 사용된 ABTS 용액은 \( 7.4 \mathrm { mM } \mathrm { ABTS } \) 용액과 \( 2.6 \mathrm { mM } \) potassium persulphate를 혼합하여 암실에서 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 차광한 상태로 12시간 이상 방치하여 ABTS 양이온을 형성시킨 후 사용하였다.</p> <p>ABTS radical scavenging activity \( ( \%) = \{ 1-( \mathrm { S } - \mathrm { C } ) \} \times 100 \) S: Sample (sample added with ABTS solution) C: Control (ethanol added with ABTS solution)</p> <h2>통계처리</h2> <p>연구결과로 얻어진 자료는 SPSS (SPSS Inc, Chicago,IL, USA) 통계프로그램을 사용하여 하위그룹 각각의 기 술통계치 \( ( \operatorname { mean } \pm \mathrm { SD } ) \) 를 산출하였다. 집단 간의 차이를 알아보기 위해 일원변량분석(one-way ANOVA)를 이용하여 분석하였고, 사후검증은 LSD를 적용하였다. 유의수준은 \( p<0.05 \) 수준으로 검증하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>MTT assay</h2> <p>참갈파래 추출물의 세포독성을 측정하기 위하여 MTT 분석을 시행하였고, 그 결과를 Fig. 1에 나타냈다. DMSO에 용해한 참갈파래 추출물을 \( 500 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)의 농도까지 측정한 결과, 모든 농도에서 \( 90 \% \) 이상의 생존율을 보였고 500 \( \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)의 농도에서도 세포에 대한 독성을 보이지 않았으므로 이후 세포배양 실험에서는 \( 500 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)의 농도를 가장 높은 농도로 정하여 실험을 진행하였다.</p>