TEM, EDS, FE-SEM으로 생체복합재료 내 물리적 특성을 분석하였다. 억제대법 및 균집락 형성 단위 실험을 통해 젤라틴/ \( \mathrm { Ag } \) 생체복합재료의 항균력을 분석하였으며, 황색포도상구균과 대장균 두 종의 세균에 대한 항균력을 시험하였다. 디스크 주변에 투명환이 형성되었고 이를 측정하여 생장 억제도를 판단할 수 있었으며, 항균효과를 정량적으로 분석하기 위해 CFU 측정실험도 실시하였다.
<h2>젤라틴/ \( \mathrm { AgNP } \) 생체복합재료의 물리적 특성 분석</h2> <p>제조된 생체복합재료의 물리적 특성을 TEM, EDS, FE-SEM을 사용하여 분석하였다. 생체복합재료 내에 형성된 \( \mathrm { AgNP } \)의 크기와 형태를 TEM (JEOL JEM-2010, 가속전압: \( 200 \mathrm { kV } \), JEOL사, 일본)을 사용하여 관찰하였다. 또한 EDS를 사용하여 \( \mathrm { AgNP } \)의 형성을 확인하였다. TEM과 EDS 분석을 위해 3차원 비계 형태의 생체복합재료를 에탄올에 넣은 후 초음파를 이용하여 조직을 분해시킨 후 격자(grid) 위에 올려 측정하였다. 그리고 3차원 비계 형태의 젤라틴 조직은 FE-SEM (JEOL JSM-6700F, 가속전압: \( 5 \mathrm { kV } \), JOEL사, 일본)으로 관찰하였다. FE-SEM 분석 시 3차원 비계 형태의 젤라틴 조직에 금(gold)을 증착(sputtering) 시킨 후 관찰하였다.</p> <h2>젤라틴/ \( \mathrm { Ag } \) 생체복합재료의 항균력 시험</h2> <p>제조된 젤라틴/ \( \mathrm { Ag } \) 생체복합재료의 항균력을 억제대법(Zone of inhibition test; ZIT) 및 균집락 형성 단위 실험(Colony Forming Unit test; CFU)을 통해 분석하였다. 본 연구에서는 인체에 다양한 질병을 일으킬 수 있는 황색포도상구균(S. aureus KCTC1916)과 가장 보편적 오염균인 대장균(E. coli MC1061) 등 두 개 종의 세균에 대하여 항균력을 시험하였다. 세균 배양은 \( 5 \mathrm { ml } \)의 Luria-Bertani (LB) 액체배지 [yeast extract \( 0.5 \%~( \mathrm { w } / \mathrm { w } ) \), \( \mathrm { NaCl } ~0.5 \%~( \mathrm { w } / \mathrm { w } ) \), tryptone \( 1 \%~( \mathrm { w } / \mathrm { w } )] \)에 접종하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 16시간 전배양한 다음 50 \( \mathrm { ml } \)의 새로운 LB 액체배지에 옮겨 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 8시간 본배양하여 억제대 측정에 사용하였다. 억제대 측정은 Kirby-Bauer가 제안한 한천배지 확산법에 따라 실시하였는데, MuellerHinton (beef extract \( 0.2 \% \), acid digest of casein \(1.75 \% \), starch \( 0.15 \% \), Agar \(1.7 \% \); Difco Co., 미국) 고체평판배지에 약 \( 10 ^ { 4 } \mathrm { CFU } \) 정도의 세균을 도말하고, 그 위에 젤라틴/ \( \mathrm { Ag } \) 스폰지 디스크를 올려놓아 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)의 항온기에서 24시간 배양 하였다. 그 결과 디스크 주변에 형성된 투명환의 지름을 측정하여 생장 억제도를 판단하였다. 항균효과를 정량적으로 분석하기 위하여 CFU 측정실험을 실시하였다. 우선 세균을 \( 10 \mathrm { ml } \) LB 액체배지에 접종하고, 다양한 농도의 젤라틴과 \( \mathrm { Ag } \)을 포함하는 생체복합재료들을 첨가하여(결과 참고) 1시간 처리한 다음 LB 고체평판배지에 도말하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 24시간 배양하여 생성된 균집락을 계수하고 희석배수의 역수를 곱하여 \( 1 \mathrm { ml } \) 당 CFU를 결정하였다.</p>