마디풀 추출물의 TLC 및 HPLC 분석 결과 \(R_{\mathrm{f}} \) value가 \( 0.84 \) 인 PA1은 kaempferol로, \( \R_{\mathrm{f}} \) value가 0.77인 PA2는 quercetin으로 추정되었으며 PLC (reverse phase) peak 9, PA2는 peak 8, PA3은 peak 7, PA3-1은 peak 5, PA4는 peak 6, PA5는 peak 2, PA6은 peak 3, PA7은 peak 4, PA8은 peak 1 과 일치되고 표준물질을 사용하여 peak \( 3(11.49 \%) \) 은 quercetin 3-o- \( \beta \) L-rhamnoside, peak \( 8(9.40 \%) \) 는 quercetin, peak \( 9(5.79 \%) \) 는 kaempferolol이었다.마디풀 추출물의 아글리콘 분획의 TLC chromatogram을 나타내었으며 아글리콘 분획은 3 개의 띠(PA-a, PA-b, PA-c)로 분리되었고, 표준물질을 이용하여 HPLC로 확인한 결과 PA-a는 myricetin으로, PA-b는 quercetin, 그리고 PA-c는 kaempferol이었다.
<h2>마디풀 추출물의 성분분석</h2> <h3>마디풀 추출물의 TLC 및 HPLC 분석:</h3> <p>마디풀 추출물의 TLC 및 HPLC 분석: \( P \). aviculare 추출물의 TLC chromatogram을 Fig. 1, 3에 나타내었고 HPLC chromatogram은 Fig. 2, 4에 나타내었다. 마디풀 추출물 에틸 아세테이트 분획의 TLC 크로마토그램은 9 의 띠(PA1, PA2, PA3, PA3-1, PA4, PA5, PA6, PA7, PA8)로 분리되었다. \(R_{\mathrm{f}} \) value가 \( 0.84 \) 인 PA1은 kaempferol로, \( \R_{\mathrm{f}} \) value가 0.77인 PA2는 quercetin으로 추정되었다. PA6은 quercetin 3-O- \( \beta \)-L-rhamuoside (quercitrin)로 추정되었다. 분리된 띠를 긁어 HPLC로 분석한 결과, Fig. 1의 TLC(normal phase) 크로마토그램에서 PA1 \( \left(\mathrm{R}_{\mathrm{f}} 0.84\right) \) 은 Fig. 2 의 HPLC (reverse phase) peak 9, PA2는 peak 8, PA3은 peak 7, PA3-1은 peak 5, PA4는 peak 6, PA5는 peak 2, PA6은 peak 3, PA7은 peak 4, PA8은 peak 1 과 일치함을 확인하였다. 또한 표준물질을 사용하여 peak \( 3(11.49 \%) \) 은 quercetin 3-o- \( \beta \) L-rhamnoside, peak \( 8(9.40 \%) \) 는 quercetin, peak \( 9(5.79 \%) \) 는 kaempferolol임을 확인하였다. 그리고 PA7 과 일치하는 peak 4, PA8과 일치하는 peak 1 는 myricetin 배당체, PA3-1과 일치하는 peak 5 는 kaempferol 배당체, peak 2,6 은 각각 PA5, PA4와 일치하므로 quercetin 배당체로 추정되었다. 이어 상대적으로 함량이 많은 PA8 (24.52\%), PA5 (18.16\%), 그리고 PA6 (11.49\%)은 LC/ESI-MS/MS와 NMR 스펙트럼을 분석하여 정확한 구조를 확인하였다. Fig. 3은 마디풀 추출물의 아글리콘 분획의 TLC chromatogram을 나타내었으며 아글리콘 분획은 3 개의 띠(PA-a, PA-b, PA-c)로 분리되었고, 표준물질을 이용하여 HPLC로 확인한 결과 PA-a는 myricetin으로, PA-b는 quercetin, 그리고 PA-c는 kaempferol로 확인되었다.</p> <h2>마디풀 추출물의 HPLC 및 LC/ESI-MS 분석</h2> <h3>PA8 (HPLC peak 1 of ethyl acetate fraction):</h3> <p>TLC 와 HPLC를 통해 PA8 (HPLC peak 1)은 quercetin 또는 myricetin 배당체로 추정, LC/MS/MS와 \( { }^{1} \mathrm{H} \mathrm{NMR} \) 을 이용하여 확인하였다. LC/ESI-MS/MS를 이용하여 분석한 결과, negative ion 모드에서 분자 이온 \( [\mathrm{M}-\mathrm{H}]^{-} \)가 \( \mathrm{m} / \mathrm{z} 463 \) 에서 나타났으며, glucoside 단위의 소실로 인한 이온 피이크 \( (\mathrm{m} / \mathrm{z} 463 \rightarrow \mathrm{m} / \mathrm{z} 316) \)를 나타내었다. 또한 보다 정확한 구조 분석을 위하여 \( { }^{1} \mathrm{H} \mathrm{NMR} \) 분석을 실시한 결과(Fig. 5), (400 MHz, CD \( \left.\mathrm{CD}_{3} \mathrm{OD}\right) \delta \mathrm{ppm} 6.95 \) \( \left(2 \mathrm{H}, \mathrm{s}, \mathrm{H}-2^{2}, 6^{2}\right), 6.37(1 \mathrm{H}, \mathrm{d}, J=2.10 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-8), 6.20(1 \mathrm{H}, \mathrm{d} \), \( J=2.08 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-6 \) ), \( 5.32\left(1 \mathrm{H}, \mathrm{d}, J=1.54 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-1^{\prime \prime}\right), 4.25-4.21 \) (1H, m, H-2"), \( 3.78 \) (1H, s, H-3"), 3.64-3.49 (2H, m, H-4", 5"), \( 0.96\left(1 \mathrm{H}, \mathrm{d}, J=6.18 \mathrm{~Hz}, \mathrm{H}-6^{\prime \prime}\right) \) 로 나타났다. 따라서 PA8은 myricetin 3-O-rhamnoside (myricitrin)로 확인되었다.</p>