각 지역에서 얻은 넙치의 ND-4 유전자 변이 여부를 검색하기 위해 5구역으로 나누어 DGES를 실시해 degenerating DNA 밴드의 변화를 관찰하고 Cytochrome b 영역(NC_002386, 14408-15548)에서는 5개의 영역으로 나눠 DGES를 실시하였는데 모든 영역에서 동일한 밴드 분포를 관찰하였다. 넙치 ND-4 유전자의 DNA 다양성 확인을 위하여 각 지역별로 대표되는 넙치의 mito-chondria DNA를 염기서열 분석 결과 ND-4-1 영역과 ND-4-5 영역 GenBank의 ND-4 염기서열이 일부 일치하였고 ND-4-2 영역, ND-4-3 영역에서는 DNA 변이를 확인하였다.
<h1>결 과</h1><h2>넙치 ND-4 유전자 DGES 분석</h2><p>각각의 지역에서 얻은 넙치의 ND-4 유전자 변이가 있는지를 검색하기 위하여 ND-4 유전자를 5구역으로 나누어 DGES를 실시해서 degenerating DNA 밴드의 변화를 관찰하였다. ND-4의 첫째 구역(AB028664, 38-279)에서는 degenerating DNA의 다양성이 관찰되지 않았으며, ND-4의 둘째 구역은 주문진 근해 동해산 넙치에서는 degenerating DNA의 다양성이 드물게 보이고, 통영 양식산 넙치와 북한 해역 동해산 넙치에서 degenerating DNA에서 다수의 다양성이 관찰되었다.</p><h2>넙치 cytochrome b 유전자 DGES 분석</h2><p>Cytochrome b 영역(NC_002386, 14408-15548)에서는 5개의 영역으로 나눠 PCR을 실시하였으며, 이를 바탕으로 DGES를 실시하였는데 5개의 영역에서 모두 동일한 밴드 분포를 관찰하였다.</p><h2>넙치의 ND-4 유전자의 DNA 염기서열 분석</h2><p>넙치 ND-4 유전자의 DGES관찰에서 보이는 DNA 다양성을 확인하기 위하여 각 지역별로 대표되는 넙치의 mito-chondria DNA를 사용하여 얻은 각각의 PCR 산물 DNA를 염기서열 분석하였다. 그 결과 ND-4-1 영역은 주문진 부근의 동해산 넙치, 통영 및 거제의 양식 넙치, 그리고 북한 해역 동해산 넙치의 ND-4-1 염기서열이 GenBank의 ND-4 (AB028664)의 일부 영역에서 일치하는 염기서열을 보였다.</p><p>ND-4-2 영역에서는 GenBank의 넙치 ND-4 염기서열과 비교한 결과 거제의 양식산 넙치는 Genbank 기록과 일치하였으나 주문진 근해의 동해산 넙치와 통영 양식산 넙치들은 G390A와 C402T의 DNA 변이가 관찰되고 북한 해역의 동해산 넙치는 G390A, C402T 그리고 A411G의 DNA 변이가 확인되었다. 따라서 ND-4-2 영역에서는 ND-4 염기서열의 380-420 사이에만 DNA 변이가 나타났다.</p><p>ND-4-3 영역에서는 GenBank 의 넙치 ND-4 염기서열과 비교한 결과 주문진 근해의 동해산 넙치, 통영 및 거제의 양식산 넙치, 그리고 북한 해역의 동해산 넙치 모두 특징적인 DNA 변이가 발견되었다. 주문진 근해의 동해산 넙치는 C515G, C538T, G714A, C736T, G756A, A759T, 그리고 T817C의 DNA 변이가 있었으며, 통영의 양식산 넙치는 C515G, A567G, G756A, T817C, 그리고 T829G의 DNA 변이가 있었고, 거제의 양식산 넙치는 C515del, 5337T, C538T, 그리고 T829G의 DNA 변이가 있었다. 한편, 북한 해역의 동해산 넙치에서는 C515G, C338T, G756A, 그리고 T817C의 DNA 변이가 있었다. 따라서 넙치의 ND-4-3 영역에서는 ND-4 염기서열 510-550 그리고 740-840 사이에 DNA 변이가 집중되어 나타났다.</p><p>ND-4-4 영역에서는 주문진 근해의 동해산 넙치, 통영 및 거제의 양식 넙치, 그리고 북한 해역 동해산 넙치의 ND-4-4 염기서열이 GenBank의 ND-4 (AB028664)와 일치하는 염기서열을 보였다. 그리고 ND-4-5 영역에서는 주문진 근해의 동해산 넙치, 통영 및 거제의 양식 넙치, 그리고 북한 해역 동해산 넙치의 ND-4-5 염기서열이 GenBank의 ND-4 (AB028664)와 일치하는 염기서열을 보였다.</p><h2>넙치 cytochrome b (cyt b) 유전자의 DNA 염기서열 분석</h2><p>주문진 근해의 동해산 넙치, 통영 및 거제의 양식 넙치, 그리고 북한 해역 동해산 넙치의 Cyt b-1, 2, 3, 4, 5 영역의 PCR 생산 DNA를 염기서열 분석한 결과 GenBank에 기록된 cytochrome b (AF370628) 유전자의 염기서열과 동일한 염기서열을 보였다.</p>