HUVEC에 SCKH1PAIBPB를 \( 25 \mathrm {\mu g } / \mathrm { ml } \)의 농도로 처리한 후 LPS \( (200 \mathrm { ng } / \mathrm { ml } ) \)를 처리하고 단핵구와 반응시킨 후, 4시간이 지나 혈관내피세포에 부착된 단핵구의 수를 Student's t-tests를 사용하여, \( p<0.05 \) 수준 이하에서 유의성을 결정하였다. 그리고 오미자 추출물로부터 항염증 물질을 분리하기 위해 hexane을 사용하였다.
<h2>혈관내피세포와 단핵구 사이의 부착능 측정</h2> <p>HUVEC에 SCKH1PAIBPB를 \( 25 \mathrm {\mu g } / \mathrm { ml } \) 의 농도로 처리한 후 6시간이 경과되었을 때 LPS \( (200 \mathrm { ng } / \mathrm { ml } ) \) 를 처리하고 단핵구와 반응시켰다. 그로부터 4 시간 후 혈관내피세포에 부착된 단핵구의 수를 산정하였다.</p> <h2>통계처리</h2> <p>실험결과의 통계학적 처리는 Student's t-tests를 사용하였 으며, \( p<0.05 \) 수준 이하에서 유의성을 결정하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>오미자 추출물로부터 항염증 물질의 분리</h2> <p>건조된 오미자(Schisandra chinensis) 열매 \( 2.5 \mathrm { ~kg } \) 을 hexane, chloroform \( \left ( \mathrm { CHCl } _ { 3 } \right ) \), methanol \( ( \mathrm { MeOH } ) \) 을 이용하여 상온에서 연속적으로 추출하여 hexane 추출물 \( 309 \mathrm { ~g } , \mathrm { CHCl } _ { 3 } \) 추출물 14 \( \mathrm { g } , \mathrm { MeOH } \) 추출물 \( 1,368 \mathrm { ~g } \) 을 얻었다. 면역학적 활성을 고려하여 이 중 활성이 높은 hexane 추출물을 대상으로 1 차 silica gel ( \( 4 \mu \mathrm { m } \), Baker, NJ, USA) column chromatography를 하였다. \( 100 \% \) hexane, ethylacetate (EtOAc)/hexane \( (1: 4, \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \), \( \mathrm { MeOH } / \mathrm { CHCl } 3(1: 19, \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 을 전개용매로 사용하여 순차적으로 용출하여 SCKH1 SCKH38의 총 38개의 분획을 얻었다. 각각의 분획물 중 항염증 활성이 관찰된 분획물 SCKH1 \( (3,689 \) \( \mathrm { mg } \) )을 대상으로 2 차 silica gel column chromatography를 실시 하였다. \( 100 \% \mathrm { CHCl } _ { 3 } \), dichlormethane \( \left ( \mathrm { CH } _ { 2 } \mathrm { Cl } _ { 2 } \right ) / \) acetone \( (17: 3 \), \( \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 을 전개용매로 순차적으로 용출하여 SCKH1PAIA SCKH1PAIM의 총 13 개의 분획을 얻어 항염증 활성을 관찰 하였다. 활성이 검정된 SCKH1PAIB (999.1 mg)을 대상으로 동일 한 전개용매를 사용하여 3 차 silica gel column chromatog-raphy를 실시하고 총 8개의 SCKH1PAIBIA SCKH1PAIBII의 분획물을 얻었다(Fig. 1). 항염증 활성이 검정된 순수물질 SCKH1PAIBPB \( (316.3 \mathrm { mg } ) \) 는 본 연구진의 다른 연구에서 a -iso-cubebene 으로 동정되었다.</p>