울릉도 자생식물의 항염증 효과에 대한 실험을 통해, \( 1 \mathrm { lg } / \mathrm { ml } \) 농도에서는 큰 차이가 없었지만, \( 100 \mathrm {\mu g } / \mathrm { ml } \) 농도에서는 NO 생성량을 \( 60 \% \) 이상 저하시킴을 확인함. 이 결과는 세포의 사멸에 의한 매개물질 생성억제가 아니라, 울릉도 자생식물의 고유한 효과로 보임. 이러한 효과는 염증반응, 세포의 돌연변이 및 종양 발생 등에 연관된 NO와 iNOS 발현과 관련있음을 보여줌.
<h2>통계처리</h2> <p>모든 실험은 3회 반복하여 측정하였고, 그 결과는 평균값 \( \pm \) 표준편차로 나타냈으며 통계적 분석은 SPSS 10.0 프로그램을 이용하여 각 처리구 간의 유의성 \( (p<0.05,0.01) \) 검증을 위해 분산분석(analysis of variance, ANOVA) 후 tukey test로 다중비교를 실시하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>Raw 264.7 cell에 대한 독성</h2> <p>마우스 대식세포인 Raw 264.7 cell에 대한 울릉도 자생식물의 세포독성을 알아보기 위하여 MTT assay를 수행하였다. 울 릉도 자생식물 추출물을 농도별 \( (0, 1, 10, 100, 1000 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ) \)로 24시간 동안 처리한 결과 \( 100 \mathrm {\mu g } / \mathrm { ml } \)의 농도까지는 독성이 나타나지 않았지만, \( 1000 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)의 농도에서는 세포의 생존율을 \( 20 \% \) 감소 시켰다. 울릉도 자생식물 추출물은 \( 100 \mathrm { lg } / \) \( \mathrm { ml } \)이하의 농도에서는 세포독성이 낮아 세포의 생존율에 영향을 주지 않는다는 사실을 알 수 있었다. 즉, 울릉도 자생식물 추출물의 항염증 효과가 단순한 세포의 사멸에 의한 세포 염증성 매개물질의 생성억제가 아니라 울릉도 자생식물 추출물의 고유한 효과라는 점을 의미한다.</p> <h2>Nitric oxide (NO) 생성억제 효과</h2> <p>NO는 NO합성효소에 의해 l-arginine으로부터 생성되는 무기 유리체로 면역반응, 세포독성, 신경전달계 및 혈관이완 등 여러 가지 생물학적인 과정에 관여하는 것으로 알려져 있으며 농도에 따라 세포 기능유지에 중요한 작용을 하기도 하고 세포독성을 일으키기도 한다. LPS 자극에 의해 발현된 iNOS는 많은 양의 NO를 생성하게 되며 이에 의한 세포독성은 염증반응, 세포의 돌연변이 및 종양발생 등에도 관여하는 것으로 알려져 있다. 염증반응과 관련된 조직 손상에서 NO와 iNOS의 발현이 증가되어 있음이 보고되어 있다. 활성 산소 중 하나이며, 최근 염증 유발에 중요한 역할을 하는 것으로 알려진 NO생성에 대한 울릉도 자생식물 추출물 효과를 알아보았다. 생성된 NO 양을 griess 시약을 이용하여 세포 배양액 중에 존재하는 \( \mathrm { NO } _ { 2 } { } ^ { - } \)의 형태로 측정하였다. 그 결과 Raw 264.7 cell에 LPS를 처리한 후 울릉도 자생식물 추출물을 처리한 NO 생성량의 변화는 Fig. 2에 나타내었다. LPS 처리후NO 생성량은 정상세포에 비하여 약 4배 이상 증가되었다. 울릉도 자생 식물 추출물을 \( 1 \mathrm { lg } / \mathrm { ml } \)의 농도로 처리한 군에서는 LPS로 증가된 NO 생성량이 LPS 처리군에 비하여 큰 차이가 없었으나 \( 10 \mathrm {\mu g } / \mathrm { ml } \)의 \( 20 \% \) 이상의 감소율을 나타내었으며, \( 100 \mathrm {\mu g } / \mathrm { ml } \)의 농도에서는 \( 60 \% \) 이상의 NO 생성 저해를 일으키는 것을 확인 할 수 있었다.</p>