ATX를 이용하여 염증인자 \( \mathrm { NO } \)의 immunoblot analysis로 단백질발현을 조사한 결과, LPS에 반응한 iNOS 단백질은 현저하게 증가하였으며 생성의 감소가 iNOS 단백질발현의 조절에 의한 것이고 LPS로 유도된 iNOS 단백질 발현과 IL-6, TNF-\(\alpha\) 생성을 억제하는 효과가 있음을 immunoblot analysis 및 enzyme immunoassay 방법을 통해 확인하였다.
<h2>ATX가 LPS로 유도된 iNOS 단백질 발현억제에 미치는 효과</h2> <p>ATX를 이용하여 염증인자 \( \mathrm { NO } \)의 생성억제와 iNOS 단백질 발현억제와의 상관관계를 알아보기 위하여 immunoblot analysis로 단백질발현을 조사한 결과, LPS에 반응한 iNOS 단백질은 현저하게 증가하였으며, ATX는 50 및 \( 100 \mu \mathrm { M } \) 의 농도에서 iNOS 단백질발현을 억제하였다. 이는 ATX에 의한 생성의 감소가 iNOS 단백질발현의 조절에 의한 것임을 나타낸다.</p> <h2>ATX가 LPS로 유도된 IL-6 및 TNF- \( \alpha \) 의 생성에 미치는 효과</h2> <p>LPS로 유도된 IL-6 및 TNF- \( \alpha \)의 생성에 대한 ATX의 억제효과는 enzyme immunoassay 방법을 이용하여 확인하였으며 LPS 처리군 \( (10 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } , 20 \mathrm { hr } ) \) 은 대조군과 비교해 약 11배의 IL-6 \( (p<0.05) \) 및 약 23 배의 TNF- \( \alpha \) \((p<0.01) \)를 생성함으로 유의성 있는 증가를 보였다. 또한 LPS로 유도된 IL-6 및 TNF- \( \alpha \) 생성에 대한 ATX의 억제효과가 \( 100 \mu \mathrm { M } \) 의 ATX 농도에서 모두 유의성 있게 \( (p<0.05) \) 나타났다. 특히, 이 농도에서 ATX는 LPS로 유도된 IL-6의 생성을 \( 65.2 \% \) 억제시켰고, TNF- \( \alpha \)의 생성을 \( 21.2 \% \) 억제시킴으로 IL-6에 있어 약 3배 더 높은 억제효과를 보였다.</p> <h2>ATX가 LPS로 유도된 NF- \( \kappa \)B transcriptional activity에 미치는 효과</h2> <p>ATX가 LPS로 유도된 NF- \( \kappa \)B transcriptional activity에 미치는 영향을 조사하였다. NF- \( \kappa \)B reporter construct로 trans-fection된 RAW264.7 cell인 NGL cell을 ATX의 유무 하에 10 \( \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 의 LPS로 처리하여 실험을 진행하였다. ATX 처리군 \( (25-100 \mu \mathrm { M } ) \)은 용량 의존적으로 LPS로 유도된 NF- \( \kappa \)B tran-scriptional activity를 억제하였다. 특히, \( 100 \mu \mathrm { M } \) 의 ATX 처리는 NF- \( \kappa \)B transcriptional activity (NF- \( \kappa \)B dependent lucifer-ase activity)를 유의성 있게 감소시켰다. 이는 \( 100 \mu \mathrm { M } \) 농도의 ATX 가 NF- \( \kappa \)B 활성을 억제하는 것이 NF- \( \kappa \)B transcriptional activity의 억제와 연계됨을 의미한다.</p>