Y대학교 보건소에서 건강검진을 받은 성인 남자 중에서 조건을 충족하는 37명을 1차 연구대상자로 선정하였다. 이 중 34명이 케일녹즙 중재실험에 참여하였고, 연구대상자의 일반사항과 영양소 섭취 상태를 조사하기 위해 설문지와 혈액 채취를 이용하였다. 12주간의 녹즙 중재실험 이후에도 영양소 섭취 상태를 재조사하여 녹즙 섭취 전과 후의 차이를 비교 평가하였다. 혈액 채취는 중재실험 0주와 12주 때에 이루어졌으며, 혈청 지질수준과 지방산 조성 분석을 위해 보관하였다. 자료 분석은 SPSS 통계 프로그램을 사용하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>연구 대상자</h2> <p>Y대학교 보건소에서 건강검진을 받은 성인 남자 중에서 다음의 조건을 충족한 37 명을 1 차 연구대상자로 선정하였다; 1) 혈중 콜레스테롤 농도가 \( 200 \mathrm{mg} / \mathrm{dl} \) 이상이며 중성지방 농도가 정상인 경우, 2) 심혈관계질환, 간질환, 소화기질환 및 신장질환 병력이 없는 경우, 3) 알콜중독 병력이 없는 경우, 4) 최근 6 개월간 지질 저하제 및 건강기능식품을 복용 하지 않은 경우 등 37 명의 1차 대상자 가운데 케일녹즙 중재실험에 참여하기로 동의한 34 명을 대상으로 케일녹즙 중재실험을 시작 하였다.</p> <h2>연구 프로토콜</h2> <p>34 명의 대상자들은 보건소를 방문하여 훈련된 연구원에 의해서 식이조사 및 인체계측을 하였다. 중재실험 시작 전 2주간의 적응기간 동안 대상자들은 평상시 식사패턴 및 생활패턴을 유지하도록 교육받았다. 적응기간 후 두 번째로 보건소를 방문하여 혈액채취와 식이 및 인체계측을 하였다(week 0). 케일 녹즙 ((주)풀무원 제조)(이하 녹즙)을 하루 1병씩 \( (150 \mathrm{ml} \), 케일 \( 167 \mathrm{~g}) \) 냉장온도를 유지 할 수 있도록 제작된 용기에 넣어 대상자에게 배달하였고 하루 중 원하는 시간에 섭취하도록 권장하였다. 실험기간 12 주 동안 모든 대상자는 평상시 식사 및 생활 패턴을 유지하도록 교육 받았다.</p> <p>섭취 2주째에 녹즙섭취를 시작한 초기 대상자 34명 가운데 2명이 간헐적인 설사 증상을 호소하여 섭취를 중단하여 최종 32 명의 대상자가 12주 동안 녹즙 중재실험에 참여하였다. 이들 32명을 대상으로 연구종료 후 두 번째 혈액채취와 식이 및 인체계측을 실시하여(12 wk) 녹즙 중재로 인한 차이를 비교하였다. 모든 피험자로부터 서면 동의를 취득하였으며 임상 연구계획서는 연세대학교 윤리위원회의 사전 승인을 득하였다. 녹즙에 대한 순응도를 조사하기 위해 2주에 한 번씩 대상자에게 전화로 참여 지속 여부를 체크하였다.</p> <h2>케일녹즙의 영양성분</h2> <p>녹즙 1 병 \( (150 \mathrm{ml}) \) 에 함유되어 있는 영양소 함량을 Table 1에 나타내었다.</p> <h2>인체계측 및 식사섭취 조사</h2> <p>연구대상자의 성별, 연령, 신장, 체중, 운동, 흡연, 음주 등의 일반사항은 설문지를 통한 직접면접법에 의해서 조사하였다. 혈압은 아침 공복상태에서 수은혈압계를 이용하여 측정하였으며 세 번 반복 측정값의 평균치를 사용하였다. 영양소 섭취상태를 24시간 회상법으로 조사하였으며, 이 때 일상적인 섭취와 차이가 큰 경우에는 평상시의 섭취를 조사 자료에 반영하였다. 또한 12주간의 녹즙 중재실험 후의 영양소 섭취상태를 다시 조사하여 녹즙 섭취 전과 후의 영양소 섭취에 변화가 있었는지를 비교 평가하였다.</p> <h2>혈액 성분의 분석</h2> <p>중재실험 0주와 12주째에 각 각 대상자의 공복 시 혈액을 채취하여 혈청을 분리한 후, 혈청 지질수준과 지방산 조성 분석을 위하여 \( -70^{\circ} \mathrm{C} \) 에 보관하였다.</p> <h3>혈청 지질농도</h3> <p>혈청의 총 콜레스테롤, HDL-콜레스테롤 및 중성지방의 농도는 효소 비색법을 이용한 분석 kit (Eiken Chemical Co., Japan)를 사용하여 측정하였다. LDL cholesterol 농도는 Friedewald 등의 공식에 의해서 산출하였고, atherogenic index 역시 다음과 같은 공식(total cholesterol-HDL cholester-ol)/HDL-cholesterol)에 의해 산출하였다.</p> <h3>혈청 인지질의 지방산 조성</h3> <p>Folch법[11]으로 혈장의 chloroform-methanol 용액(2:1,\( \mathrm{v} / \mathrm{v}) \)으로 지질을 추출하였으며, 인지질 성분을 분리하기 위하여 thin layer chromatography (TLC)를 이용하였다. 혈청의 인지질분획에 포함된 지방산조성 분석을 위해 지방산을 메틸화한 후 일정량을 fused-sillica boned capillary column(Omega wax320, Supelco, USA; \( 30 \mathrm{~cm} \times 0.32 \mathrm{~mm} \) )과 flame ionization detector가 부착된 gas-liquid chromatography (GLC, Hewlett Packard 5890A, USA) 기기에 주입시켰으며, internal standard로는 heptadecaenoic acid (HA, 17:0, Nu Check Prep. Inc., USA)를 사용하였다. GLC의 oven 온도는 \( 200^{\circ} \mathrm{C} \) 로, injection port 및 detection port의 온도는 \( 260^{\circ} \mathrm{C} \) 로 각각 조정하였으며, carrier gas로 사용된 헬륨의 유속은 1 \( \mathrm{ml} / \mathrm{min} \) 로, 그리고 split ratio는 10:1로 조절하였다. 동일한 조건하에서 분석된 표준지방산 용액(GLC 87A, Nu Check Prep. Inc., USA)의 retention time을 이용하여 각 지방산 peak를 확인하였고, 각 지방산의 함량은 internal standard 로 사용된 HA 를 이용하여 총 지방산량을 계산한 뒤 백분율 로 표시하였다.</p> <h2>통계분석</h2> <p>본 연구의 자료는 SPSS 통계 프로그램(SPSS Inc., Chicago, IL, USA, version 11.0)을 이용하여 분석하였다. 모든 자료는 평균 \( \pm \) 표준오차로 나타내었으며, 중재실험 전후 차이는 명목 변수는 \( x^{2} \)-test로, 연속변수는 paired t-test를 실시하여 검정하였다. 통계적 유의성은 \( p<0.05 \) 수준에서 검정하였다.</p>