당뇨쥐에 메토트렉세이트(MTX)를 투여할 때의 신독성과 관련된 본 연구는 MTX의 양에 따라 정상 쥐와 당뇨쥐에서 다른 반응을 보였다. MTX를 투여한 당뇨쥐에서 SOD와 GSH-Px 활성은 감소했지만, 이는 통계적으로 유의미하지 않았다. 그러나, GST 활성과 GSH 함량은 MTX \( 6 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)을 투여한 당뇨쥐에서 현저히 감소하였다. 이 결과는 MTX에 의한 지질과산화 증가가 glutathione 감소에 기인한 것으로 보여지며, 이는 신 조직에 나타나는 중요한 결과로 추정된다.
<h2>활성산소의 해독계에 미치는 영향</h2> <p>당뇨쥐에 MTX를 투여하면 신독성이 증가하는 과정에 활성산소의 해독계에 어떠한 영향을 주는가를 관찰한 성적이 Table 3이다. 정상군과 STZ를 투여하여 당뇨를 유발시킨 군에 MTX를 용량별로 \( 3,6 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)을 1주일간 복강 투여하고 SOD}, GSH-Px의 활성을 관찰해 본 결과 정상군에 MTX를 투여한 군에 비해 당뇨쥐에 MTX를 투여한 군에서 다소 감소하긴 했지만 통계적 유의성은 관찰 할 수 없었고, GST의 활성을 관찰해 본 바, 정상군에 MTX \( 3 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 을 투여한 군에서는 별 영향이 없고, \( 6 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 을 투여하였을 때는 다소 감소하던 것이 당뇨쥐에 MTX를 투여한 군에서는 활성이 현저히 감소하였다. Phase II 반응은 phase I 반응을 거친 약물이나 내인성 및 외인성 물질을 포합시키고 무독화 시키는 단계이다. 그 중 SOD는 xenobiotics로 인하여 생성된 supero-xide anion을 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 로 전환시키는 효소로 생체 내 해독 과정에 관여하는 효소 중 하나이다. 또 catalase는 체내에서 지방의 자동 산화 및 유기물의 산화로 생기는 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 를 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) 와 \( \mathrm{O}_{2} \)로 분해하여 무독화 시키는 radical scavenging enzyme로 물로 변환시켜 생성된 활성 산소를 체외로 배설시킨다. glutathione peroxidase 역시 catalase와 같은 기능을 수행하는 효소로 glutathione을 기질로 하여 유리기를 물로 변환시켜 생성된 활성 산소를 체외로 배설시킨다. 또 다른 해독계로서, 체내에서 일차적으로 산화대사된 후 제2단계인 conjugation 단계를 거쳐서 무독화 되는 최종 과정에서 필연적으로 glutathione이 요구되는데 이를 이용하여 체내 독성 물질을 전이 분해시키는 GST의 역할을 생각할 수 있다.</p> <h2>Glutathone 생성계 활성에 미치는 영향</h2> <p>GSH 농도와 glutathione 생성계인 GR, \( \gamma \)-GCS활성을 측정한 결과를 Table 4에 나타내었다. 정상군에 \( 3 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 의 MTX를 투여한 군에서 별다른 영향이 없고, \( 6 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 의 MTX를 투여한 군에서 다소 감소하던 것에 비해 당뇨쥐에 MTX를 투여한 군에서는 GSH의 함량이 현저히 감소하였다. 친전자성 물질들과 활성 산소 및 과산화물의 최종적 무독화 과정에서 필연적으로 glutathione이 요구되는데 이 물질의 함량에 따라 독성 발현의 유무를 판단할 수 있다. glutathione은 간과 신장에서 glutamic acid, cysteine 및 glycine을 기질로 \( \gamma \)-glutamyl cysteine synthetase와 glutathione synthetase에 의해 합성된다. MTX에 의한 glutathione의 함량 감소 기전을 알아볼 목적으로 glutathione 합성에 관여하는 \( \gamma \)-glutamylcystein syn-thetase \( (\gamma \)-GCS)의 활성과 산화형 glutathione을 환원형 glu-tathione으로 환원시키는 glutathione reductase의 활성을 관찰하였다. 그 결과 정상군에 \( 3 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 의 MTX를 투여한 군에서 별다른 영향이 없고, \( 6 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 의 MTX를 투여한 군에서 다소 감소하던 것에 비해 당뇨쥐에 MTX를 투여한 군에서는 glutathion reductase의 활성이 현저히 감소하였다. 합성에 관여하는 \( \gamma \)-glutamylcystein synthetase의 활성에서도 정상군에 MTX를 투여한 군에 비해 당뇨쥐에 MTX를 투여한 군에서는 \( \gamma \)-glutamylcystein synthetase의 활성이 현저히 감소하였다.</p> <p>이로 보아 당뇨쥐에서 MTX에 의하여 신 조직 중의 지질과산화의 함량이 증가하는 것은 glutathione의 함량 감소에 의하여 나타나는 결과로 사료된다.</p>