대두박 또는 비지 배지에서 선발된 길항세균 균주 W1과 P99를 대량배양하여 생물농약을 제조하였다. 이를 위해 배양액에 다양한 전착제 및 보호제, 영양원을 혼합하고 건조 후 분쇄하여 수화형 생물농약을 만들었다. 이후 하우스내 가지 잎에 분무 접종하고 병원균을 접종, 2일 간격으로 발병도를 조사하였다. 또한 병원균 접종 후 주기적으로 생물농약을 처리하고 가지열매의 수와 무게를 조사하였다.
<h2>생물농약의 제조</h2> <p>선발된 길항세균을 제제화하여 생물농약으로 제조하기위해 앞서의 실험에서 대량배양 배지로 선발된 대두박 또는 비지 배지 \( 4 \ell \) 에 \( \mathrm { W } 1 \) 균주 및 P99 균주를 접종하고 \( 7 \ell \)발효기에서 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } , 300 \mathrm { rpm } \) 으로 72 시간 배양하여 그 배양액에 여러 종류의 전착제 길항균의 보호제 및 영양원으로서의 기능을 갖는 여러 가지의 물질을 각가 다른 비율로 혼합하고 \( 50 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 원디오븐에서 48 시간 건조하여 브라인더로 분쇄하고 \( 200 \mathrm { mesh } \) 체를 쳐 통과하는 분말을 수집하여 수화형 생물농약으로 제조하였다. 전착제로서 콩가루, 옥수수전분, 쌀가루, 찹쌀가루, 밀가루 등을 공시하고 길항균의 보호제로서 콩기름, 을리브 오일, 옥수수 기름 등을 공시하였으며, 길항균의 영양원으로서 검은설탕, 횐설탕, 노란설탕 등을 공시하였고, 이것을 상온에서 유리병에 넣고 마개 에 구멍을 뚫어 탈지면으로 봉인한 후 공기가 통하게 하여 보관하면서 실험에 사용하였다.</p> <h2>생물농약의 하우스내 포트 검정</h2> <p>길항세균으로 제조한 여러 종류의 수화형의 생물농약을 \( \left (10 ^ { 9 } \right . \) cells/g) 100 배 희석하여 분무기를 이용하여 하우스내에 포트에 파종하여 재식한 \( 8 \sim 12 \) 엽기의 가지 잎의 앞, 뒷면에 골고루 분무 접종하고, 24 시간 후에 병원균을 접종하여 상대 습도 \( 90 \%, 25 \pm 5 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 의 하우스내에서 보관하면서 2일 간격으로 발병도를 조사하여 방제가로 환산하였다. 이상의 생물농약의 방제효과 검정에서 병원균은 분생포자 형성에 양호한 것으로 선발된 배지에서 배양한 E12 균주의 분생포자 \( 10 ^ { 6 } \) conidia/ml를 \( 30 \% \) 토마토 쥬스에 부유하여 접종원으로 하였으며, 발병정도는 농약의 동록시험 기준과 방법에 따라 다음과 같이 발병도를 조사하고 방제가로 환산하였다. 그리고, 병원균 접종 일주일 후부터 1주일 간격으로 생물농약을 3번 더 처리하고 마지막 처리 1주후에 처리별 가지열매의 수와 무게를 조사하였다.</p> <p>방제가 \( ( \%) = \frac {\text { 병원균 단독처리의 발병도-병원균과 생물농약등 조합처리의 발병도 } } {\text { 병원균 단독처리의 발병도 } } \times 100 \)</p>