온도 안정성은 정제효소를 기질용액과 섞어 반응시킨 후 환원당을 측정하여 잔존활성을 확인했고, oligosaccharides의 DPPH 라디칼소거 활성은 Blois 방법으로 측정했으며, 선별된 균주의 형태학적 및 생리학적 특성에 따라 동정을 진행하였다.
<p>온도 안정성은 정제효소 \( 1 \mathrm { ~ml } \) 를 \( 20 \sim 70 ^ {\circ } \mathrm { C } \)의 온도에서 30분간 반응시킨 후 \( 0.1 \% \) 기질용액 \( 1 \mathrm { ~ml } \)를 혼합하여 \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 30분간 반응시킨 후 환원당을 측정하여 잔존활성을 확인하였다.</p> <h2>DPPH 라디칼을 이용한 전자 공여능 측정</h2> <p>Agar 분해산물인 oligosaccharides의 DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl)라디칼소거 활성은 Blois 방법에 따라 다음과 같이 측정하였다. 균주를 \( 0.1 \% \) agar를 함유한 marine broth에 배양한 후 DPPH 용액 \( 1 \mathrm { ~ml } \)에 배양액 \( 200 \mu 1 \)를 혼합하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 30분간 반응시킨 후 반응물을 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } , 12,000 \) \( \mathrm { rpm } \)에서 3분간 원심분리 한 후 \( 525 \mathrm { ~nm } \)에서 흡광도를 측정하였다. 항산화 활성은 전자동여능(electron donating ability: EDA)으로 표기하였으며, 시료 첨가구와 무첨가구의 흡광도 차를 백분율 ( \( \% \))로 표시하였다.</p></p>EDA \( ( \%) = [1-( \mathrm { Abs } / \mathrm { Abc } )] \times 100 \)</p></p>Abc: Absorbance of control treatment at \( 525 \mathrm { ~nm } \)</p></p>Abs: Absorbance of samplc treatment at \( 525 \mathrm { ~nm } \)</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>균주 동정 및 배양조건</h2> <p>선별된 균주의 형태학적◦생리학적 특성에 따라 동정을 하였다. AS-1은 VITEK 2 compact version 분석결과 S. pau-cimobilis로 \( \ 90 \% \)의 유사성을 보였다(data not shown). 배양온도, \( \mathrm { pH } \) 및 salt 농도에 따른 최적 배양조건을 구하기 위해 UV-Vis spectrophotometer를 사용하여 \( 550 \mathrm { ~nm } \)에서 흡광도를 측정하였다(Fig. 1). 온도 \( 15 \sim37 \) \( ^ {\circ } \mathrm { C } \)의 범위에서 배양한 결과 S. paucimobilis AS-1은 \( 23 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 cell growth가 가장 높았으며, \( \mathrm { pH } ~4 \sim10 \)의 범위에서 배양한 결과 \( \mathrm { pH } ~5 \sim6 \) 범위 내에서 균주생육이 가장 높았다. 그리기 salt 농도 \( 0.5 \sim 5 \% \)의 범위에서 배양한 결과 \( 1 \sim 3 \% \) 농도에서 최대 cell growth를 나타내었다.</p>