유전자 분석 및 유전자 다형성 검사를 위해서 Applied Biosystems 7300 Real Time PCR을 사용하였고, SPSS version 15.0 프로그램을 이용하여 대립형질(allele)과 유전자형(genotype) 빈도의 차이를 통계학적으로 분석하였다. 본 연구에 참여한 제2형 당뇨병이 없는 대조군과 제2형 당뇨병 환자군의 임상적 특징분석 결과는 평균 연령이 \( 63.2\)세, \(64.3 \)세로 대조군에서 유의하게 높게 나타났고, 남녀 비율은 제2형 당뇨병 환자군에서는 남성이, 대조군에서 여성이 유의하게 많았다. 그리고 고밀도 콜레스테롤은 대조군에서 의미 있게 높았으나, \( \mathrm { BMI } \) 및 중성지방은 제2형 당뇨병 환자군에서 높았으며, 저밀도 콜레스테롤은 대조군과 제2형 당뇨병 환자군 사이에 의미 있는 차이는 없었다.
<h3>유전자 분석 및 유전자 다형성 검사</h3> <p>유전자 분석을 위해서 Applied Biosystems 7300 Real Time PCR (Applied Biosystems, California, USA)을 사용하였다. PCR 반응 조건은 \( \mathrm { A } (-267) \mathrm { G } \)에서 pre-denaturation 반응을 \( 95 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 10분, denaturation 반응을 \( 95 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 30초, annneal-ing 반응을 \( 56 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30초, extension 반응을 \( 72 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 30초로 설정하여 35 cycle 반복해 DNA를 증폭시킨 후 마지막으로 extension 반응을 \( 72 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 10분간 유지하였다. A658G와 \( \mathrm { T } 813 \mathrm { C } \)의 경우에는 annealing 반응을 각각 \( 55 ^ {\circ } \mathrm { C } , 58 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 실시한 것을 제외하고 나머지 반응은 모두 같았다.</p> <h3>통계학적 분석</h3> <p>제2형 당뇨병 환자군과 대조군 사이의 대립형질(allele)의 빈도와 유전자형(genotype) 빈도의 차이에 대한 통계분석은 SPSS version \( 15.0 \) 프로그램을 사용하였다. 변수는 평균 \( \pm \) 표준편차로 나타내었고 각각의 단일 염기 다형성이 Hardy-Weinberg 평형을 따르는지 알아보았다. 로지스틱 회귀분석을 이용하여 Odds Ratio (OR)과 신뢰구간(95 \% Confidence Interval: CI)을 구하였고, 연령, 성별, 허리둘레 등의 교란변수들을 보정하였다. 통계적 유의수준은 \( p<0.005 \) 로 하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>대상자의 일반적 특성 및 건강행태</h2> <p>본 연구에 참여한 제2형 당뇨병이 없는 대조군 100명과 제2형 당뇨병 환자군 200명의 임상적 특징은 Table 1에 나타내었다. 제2형 당뇨병 환자군과 대조군 대상자의 평균 연령은 각각 \( 63.2,64.3 \)세로 대조군에서 유의하게 높게 나타났으며 남녀 비율은 제2형 당뇨병 환자군에서는 남성이, 대조군에서 여성이 유의하게 많았다. 고밀도 콜레스테롤은 대조군에서 의미 있게 높았으나, \( \mathrm { BMI } \), 중성지방은 대조군에 비해 제2형 당뇨병 환자군에서 의미 있게 높았다. 저밀도 콜레스테롤의 경우에는 대조군과 제2형 당뇨병 환자군 사이에 의미 있는 차이는 없었다.</p> <h2>\( \mathrm { MMP3 } \) 유전자 다형성과 Type 2 Diabetes의 연관성</h2> <p>전체 대상군에서 유전자형의 분포는 Hardy-Weinberg equilibrium을 따르는 것으로 확인되었다. \( \mathrm { MMP3 } \)에서 \( A(-267) G \)의 유전자형(genotype)은 대조군 100명에서 \( \mathrm { AA } \) 동형접합체 \( 94 \%, \mathrm { AG } \) 이형접합체 \( 6 \%, \mathrm { GG } \) 동형접합체는 나타나지 않았다. 제2형 당뇨병 환자군 200명에서 \( \mathrm { AA } \) 동형접합체 \( 89 \%, \mathrm { AG } \) 이형접합체 \( 11 \%, \mathrm { GG } \) 동형접합체는 역시 나타나지 않았다. 대조군과 제2형 당뇨병 환자군 사이에서 유전자형의 분포는 유의한 차이를 보였다 \( (p<0.008) \). 성별을 보정한 상태에서 \( \mathrm { MMP3 } \) \( A(-267) G \)의 유전자형(genotype)은 남자의 경우, 대조군 36명에서 \( \mathrm { AA } \) 동형접합체 35명, \( \mathrm { AG } \) 이형접합체 1명이었으며, 제2형 당뇨병 환자군 108명에서 \( \mathrm { AA } \) 동형접합체 95명, \( \mathrm { AG } \) 이형접합체 13명이었다. 여자의 경우는 대조군 64명에서 \( \mathrm { AA } \) 동형접합체 59 명, \( \mathrm { AG } \) 이형접합체 5명이었으며, 제2형 당뇨병 환자군 92명에서 \( \mathrm { AA } \) 동형접합체 83명, \( \mathrm { AG } \) 이형접합체 9명이었다. \( \mathrm { GG } \) 동형접합체는 모든 그룹에서 나타나지 않았다. \( \mathrm { MMP3 } \) \( \mathrm { A } 658 \mathrm { G } \) 의 유전자형(genotype)은 대조군 100명에서 \( \mathrm { AA } \) 동형접합체 \( 78 \%, \mathrm { AG } \) 이형접합체 \( 19 \%, \mathrm { GG } \) 동형접합체 \( 3 \% \) 였으며, 제2형 당뇨병 환자군 200명에서 \( \mathrm { AA } \) 동형접합체 \( 54 \%, \mathrm { AG } \) 이형접합체 \( 36 \%, \mathrm { GG } \) 동형접합체 \( 10 \% \)였다. 제2형 당뇨병 환자군 사이에서 유전자형의 분포는 유의한 차이를 보였다 \( (p<0.000) \). 성별을 보정한 상태에서 \( \mathrm { MMP3 } \) \( \mathrm { T } 813 \mathrm { C } \) 의 유전자형(genotype)은 남자의 경우, 대조군 36명에서 \( \mathrm { AA } \) 동형접합체 22명, \( \mathrm { AG } \) 이형접합체 13명, \( \mathrm { GG } \) 이형접합체는 1명이었으며, 제2형 당뇨병 환자군 108명에서 \( \mathrm { AA } \) 동형접합체 63명, \( \mathrm { AG } \) 이형접합체 37명, \( \mathrm { GG } \) 동형접합체 8명이었다. 여자의 경우는 대조군 64명에서 \( \mathrm { AA } \) 동형접합체 56명, \( \mathrm { AG } \) 이형접합체 6 명이었으며, \( \mathrm { GG } \)동형접합체는 2명이었다. 제2형 당뇨병 환자군 92명에서 \( \mathrm { AA } \) 동형접합체 45명, \( \mathrm { AG } \) 이형접합체 35명, \( \mathrm { GG } \) 동형접합체는 12명이었다. \( \mathrm { MMP3 } \) \( \mathrm { T } 813 \mathrm { C } \)의 유전자형(genotype)은 대조군 100명에서 \( \mathrm { TT } \) 동형접합체 \( 23 \% \), \( \mathrm { TC } \) 이형접합체 \( 52 \%, \mathrm { CC } \) 동형접합체 \( 25 \% \) 였으며, 제2형 당뇨병 환자군 200명에서 \( \mathrm { TT } \) 동형접합체 \( 27 \%, \mathrm { TC } \) 이형접합체 \( 48 \%, \mathrm { CC } \) 동형접합체 \( 25 \% \)였다. 대조군과 제2형 당뇨병 환자군 사이에서 유전자형의 분포는 의미 있는 차이는 보이지 않았다. 성별을 보정한 상태에서 \( \mathrm { MMP3 } \) \( \mathrm { T } 813 \mathrm { C } \)의 유전자형(genotype)은 남자의 경우, 대조군 36명에서 \( \mathrm { TT } \) 동형접합체 8명, \( \mathrm { TC } \) 이형접합체 17명, \( \mathrm { CC } \) 동형접합체는 11명이었으며, 제2형 당뇨병 환자군 108명에서 \( \mathrm { TT } \) 동형접합체 31명, \( \mathrm { TC } \) 이형접합체 45명, \( \mathrm { CC } \) 동형접합체 32명이었다. 여자의 경우는 대조군 64명에서 \( \mathrm { TT } \) 동형접합체 15명, \( \mathrm { TC } \) 이형접합체 35명이었다. \( \mathrm { CC } \) 동형접합체는 14명이었으며, 제2형 당뇨병 환자군 92명에서 \( \mathrm { TT } \) 동형접합체 23명, \( \mathrm { TC } \) 이형접합체 51명, \( \mathrm { CC } \) 동형접합체는 18명이었다.</p>