흰쥐의 난소절제 시술은 혈중 estrogen농도를 감소시키는 갱년기 장애유발시켜 갱년기 질환에 대한 실험을 하였다. 본 연구에서는 매생이를 투여하여 estrogen결핍에의헤 유도되는 골다공증의 biomaker인 pyridinoline 및 deoxypyridinoline 함량 변화에 미치는 영향을 연구했다. Sparaque-dawley 계 암컷 흰쥐 4군(OVX-control, Sham, OVX-CSF50, OVX-CSF200)으로 나누어 난소 절제 수술을 실시하고, 매일 \(1 \mathrm { ~mL }\) 씩 매생이 추출물을 경구 투여하였다.
<p>본 실험에 사용된 실험 model인 흰쥐의 난소절제 시술은 혈중 estrogen농도를 감소시키는 갱년기 장애유발의 대표적인 방법으로서 골다공증 및 여성의 심혈관계 질환의 연구에서 광범위하게 이용되고 있다. 본 연구는 새로운 해조 식물로 주목받고 있는 매생이를 난소를 절제하여 갱년기 장애를 유도한 흰쥐에 투여함으로써 난소절제에 의한 estrogen결핍에서 발생되는 골 중 주요 단백질인 collagen 함량 변화 및 골다공증의 biomaker인 pyridinoline 및 deoxypyridinoline 함량 변화에 미치는 영향을 집중적으로 검토하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>시료 제조방법</h2> <p>본 실험에서 사용 된 매생이(Capsosiphon fulvecense, CSF)는 2005년 엔존에서 구입하여 물로 6 7희 채로 씻어 내어 염분과 불순물을 제거하고 동결 건조, 분쇄하여 사용하였다. 건조 시료에 \( 80 \% \) ethanol \( 2 \mathrm { ~L } \) 를 가해 2회 열 추출하여 감압 농축기로 농축한 후 분말로 만들어 증류수에 녹여 동물실험에 사용하였다.</p> <h2>실험동물</h2> <p>실험동물은 체중이 평균 \( 160 \mathrm { ~g } \) (6주)되는 Sparaque-dawley 계 암컷 흰쥐를 코아텍으로부터 구입하여 본 실험실에서 고형사료(삼양유지)로 사육하였고, 실험 시작 1 주일 동안 대조군 식이로 적응시킨 후 동물의 체중에 따라 4 군으로 나누었다. 즉 실험동물은 난소절제 대조군(OVX-control), 비 난소절제군(Sham), 매생이 추출물 \( 50 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \) 투여군(OVX-CSF50)및 \( 200 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \) 투여군(OVX-CSF200)으로 나누어 실험하였다.</p> <p>체중은 실험 사육 기간 중에 격일로 일정 시간에 측정하고, 식이 섭취량은 매일 식이 잔량을 측정하여 산출하였다.동물 실험실의 사육조건은 온도 \( 24 \pm 2 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 습도 \( 55 \sim 60 \% \) 을 유지 시키며 물과 식이는 자유 공급하였고, 실험시료는 증류수로 용해하여 매일 \( 1 \mathrm { ~mL } \) 씩 경구 투여 하였고, 대조군은 동일용량의 증류수를 투여하였다.</p> <h2>난소절제시술</h2> <p>1 주일 동안 주위환경에 적응시켜 난괴법에 의해 군을 나누어 난소 절제 수술을 실시하였다. 수술은 ether 마취 후 심마취기에 이르면 늑골하부를 절개하여 난소를 제거하고 절개 부는 봉합하였다. 시술 후 3 일부터 매일 매생이 시료를 경구 투여 하였다.</p> <h2>혈액 채취 및 장기 적출</h2> <p>혈액은 실험동물을 해부 전 24 시간 절식 시킨 후 ether 마취 하에서 개복한 후 대동맥에서 채취하였고, 혈청 중의 효소활성 및 지질 농도는 실온에서 한 시간 방치 후 \( 3,000 \mathrm { rpm } \), \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 10 분간 원심분리 하여 분석하였다. 늑골과 연골은 경계면에서 분리하였으며 피부는 털과 표피위의 지방을 제거하여 실험 시 까지 \( -70 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 보관하였다.</p>