인동덩굴 추출물의 총 페놀성 화합물 및 총 플라보노이드 함량을 측정하기 위해 Alves 방법과 Zhishen 방법을 사용하여 Folin-Ciocalteu시약, Na2CO3, NaNO2, AlCl3, NaOH 를 첨가하고 760nm과 510nm에서 흡광도를 측정하여 Caffeic acid와 luteolin을 표준 물질로 사용하여 표준 곡선을 작성하여 총 페놀성 화합물 및 총 플라보노이드 함량을 측정하였다.
<h2>총 페놀성 화합물 및 총 플라보노이드 함량 측정</h2> <p>인동덩굴 추출물의 총 페놀성 화합물 함량 측정은 Alves 등의 방법을 이용하였다. 추출물 \( 80 \mu \mathrm { l } \) 에 Folin-Ciocalteu시약 \( (50 \% \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 을 \( 20 \mu \mathrm { l } \) 를 첨가한 다음, \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \( 5 \mathrm { ~min } \) 동안 반응시켰다. 그 후 포화 \( \mathrm { Na } _ { 2 } \mathrm { CO } _ { 3 } \) 용액( \( \left .2 \% \mathrm { w } / \mathrm { v } \right ) 200 \mu \mathrm { l } \) 를 첨가하여 혼합하고 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \( 30 \mathrm { ~min } \) 반응시킨 후 ELISA reader (Tecan, Austraia)를 이용하여 \( 760 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하였다. Caffeic acid를 표준 물질로 하여 농도별 표준 곡선을 작성한 후, 총 페놀성 화합물 함량을 측정하였다.</p> <p>인동덩굴 추출물의 총 플라보노이드 함량은 Zhishen 등의 방법을 이용하였다. 추출물 \( 30 \mu \mathrm { l } \) 에 증류수 \( 120 \mu \mathrm { l } \) 를 첨가한 다음, \( \mathrm { NaNO } _ { 2 } (25 \% \mathrm { w } / \mathrm { v } ) 9 \mu \) 를 넣고 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \( 5 \mathrm { ~min } \) 동안 반응시켰다. 이 용액에 \( \mathrm { AlCl } _ { 3 } (10 \% \mathrm { w } / \mathrm { v } ) 9 \mu \mathrm { l } \) 를 넣고, \( 1 \mathrm { ~min } \) 후 \( \mathrm { NaOH } (1 \mathrm { M } ) 60 \mu \mathrm { l } \) 와 증류수 \( 72 \mu \mathrm { l } \) 를 첨가한 뒤 \( 510 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하였다. 표준 물질로 luteolin을 이용하여 표준 곡선을 작성한 후, 총 플라보노이드 함량을 측정하였다.</p>