한국산 범부채 종자를 멸균 전 외종피를 벗겨낸 후 멸균하여 \(1/3\) MS 배지에 치상하면 상처나 무제거에 비하여 발아가 촉진되었다. 발아된 유식물체를 뿌리줄기, 뿌리, 자엽으로 구분하여 \(5\times5\mathrm{mm}\) 크기의 절편으로 잘라 MS 기본배지에 2,4-D를 단독처리한 배지와 2,4-D 및 BA를 혼합처리 한 배지에 각각 치상한 결과, 혼합처리 배지에서 캘러스의 유도율 및 캘러스의 증식률이 높았으며, 조직간에 캘러스 유도양상은 부위별로 큰 차이를 보였다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>캘러스 형성에 미치는 생장조절물질의 영향</h2> <p>한국산 범부채의 종자 발아 시 오염률을 줄이기 위하여, 종자 멸균 전에 외종피를 벗겨낸 후 멸균하여 \( 1 / 3 \)MS(Murashige and Skoog 1962) 배지에 치상하였다. 배양 10일 후부터 서서히 발아가 시작되었으며, \( 77 \% \) 의 높은 발아율을 보였다. 박 등 (1995)은 한국 자생 범부채 종자의 종피를 제거하였을 때 상처나 무제거에 비하여 발아가 촉진되었다고 보고하였으며 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 가장 높은 발아율을 보였다고 보고하였다.</p> <p>발아된 유식물체를 자엽, 뿌리줄기, 뿌리로 구분하여 \(5 \times ~5 \mathrm { ~mm } \) 크기의 절편으로 잘라 MS 기본배지에 \( 1.0,3.0 \), \( 5.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 2,4-D 단독처리와 \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 2,4-D에 \( 0.1,1.0,3.0 \) \( \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) BA를 혼합처리 한 배지에 각각 치상하여 캘러스를 유도하였다. 치상된 모든 절편체는 배양 1 주 후부터 캘러스가 서서히 형성되기 시작하였으며, 식물생장조절제가 첨가되지 않은 배지에서는 캘러스가 유도되지 않았다(Table 1). 유식물체의 부위별 캘러스 유도양상은 자엽, 뿌리줄기, 뿌리의 조직간에 큰 차이를 보였으며, 유도된 캘러스는 부드럽고 촉촉한 노란색을 띠었다 (Fig. 1). 자엽에서는 캘러스 유도률이 \( 30 \% \) 이하로 매우 저조하였으며, 뿌리에서는 비교적 양호하였다 (Table 1). 특히 뿌리 절편체를 \( 3.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L }\) 2,4-D의 단독처리와 \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 2,4-D와 \( 3.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L }\) BA를 혼합처리 한 배지에 접종하였을 때 캘러스가 가장 효과적으로 유도되었다. \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 2,4-D의 단독 처리구에서 모든 절편체로부터 비교적 높은 캘러스의 유도가 관찰되었으며 유도된 캘러스의 증식률이 대체로 왕성하였다. 2,4-D와 BA의 혼합처리는 2,4-D의 단독처리에 비해 캘러스의 유도율 및 캘러스의 증식률을 보다 더 증가시켰다. 특히 뿌리줄기로부터는 \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L }\) 2,4-D와 \( 1.0 \) \( \mathrm { mg } / \mathrm { L }\) BA의 혼합처리에서 약 \( 81 \% \) (Fig. 1B), 뿌리로부터는 \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 2,4-D와 \( 3.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L }\) BA의 혼합처리에서 약 \( 91 \% \)(Fig. 1C)의 높은 캘러스 유도율을 보였다. 또한 자엽으로부터 유도된 캘러스의 경우 2,4-D의 단독처리에 비하여 \( 1.0 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 2,4-D에 BA를 혼합처리 하였을 때, \(BA의 농도에 상관없이 캘러스의 증식률이 크게 증가하였다 (Fig. 1A). 이와 유사한 연구 결과들은 몇몇 붓꽃과 식물체에서 관찰되었다. Koh \( (2005) \) 는 자생붓꽃 (I. sanguinea)의 생장점조직으로부터 \( 3 \mathrm { mg } / \mathrm { L }\) 2,4- D와 \( 5 \mathrm { mg } / \mathrm { L }\) BA의 혼합처리에서 \( 90 \% \) 이상의 높은 캘러스 형성율 보였다고 보고하였다. 또한 Raja 등 (2007)은 샤프란 (C. sativus)의 잎절편체로부터 \( 1 \mathrm { mg } / \mathrm { L }\) 2,4-D 와 \( 1 \mathrm { mg } / \mathrm { L }\) BA를 혼합처리 한 MS 배지에서 캘거스와 체세포배 형성에 가장 효과적이었다고 하였으며, Kang 등 (1998)은 글라디올러스 (Gladiolus 'Topaz') 목자조직으로부터 캘러스 유도는 2,4-D 첨가배지에서 가장 높았다고 보고하였다. 물론 동일 속에 속하는 종이라고 하더라도 품종이나 배양조건, 조직 절편의 종류 등에 따라 식물체 재분화 양상이 크게 다르지만, 붓꽃과 식물체의 캘러스 형성에 2,4-D가 중요한 작용을 하며, 오옥신과 사이토카이닌의 농도 비율보다 오옥신의 농도가 더 효과적으로 작용하는 것으로 사료된다.</p>