본 논문에서는 암세포의 증식에 어떠한 영향을 미치는지 알아보기 위해서 48시간 동안 상동열매와 블루베리 메탄올 추출물과 용매 분획물을 처리한 후 MTT assay를 실시한 결과, \( \mathrm { AGS } \) 와 \( \mathrm { MDA } - \) MB-231 암세포에 대해 상동열매와 블루베리의 헥산 분획물과 클로로포름 분획물이 증식을 억제하는 활성을 나타냈다. 또한, \( \mathrm { GC } - \mathrm { MS } \)를 이용해서 상동열매와 블루베리 메탄올 추출물과 용매 분획물의 성분이 어떻게 구성되어 있는지 분석한 결과, 메탄올 추출물은 상동열매와 블루베리가 비슷한 성분조성을 가지는 것으로 확인되었고, 용매 분획물은 다른 분획물들보다 다양한 항산화 활성을 가지는 성분들을 가지는 것으로 확인되었다.
<h2>암세포 증식 억제 활성</h2> <p>암세포의 증식에 미치는 영향을 확인하기 위해 \( \mathrm { AGS } \) 와 \( \mathrm { MDA } - \) MB-231 세포에 상동열매와 블루베리 메탄올 추출물과 용매 분획물을 48시간동안 처리한 후 MTT assay를 실시하였다. Fig. 5 에서 나타낸 바와 같이, 상동열매와 블루베리의 헥산 분획물과 클로로포름 분획물에서 \( \mathrm { AGS } \) 와 MDA-MB-231 암세포에 대해 증식 억제 활성이 나타났다. 인체 위암세포주인 \( \mathrm { AGS } \) 의 경우, \( 200 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 상동열매 헥산 분획물이 \( 75.08 \pm 1.78 \% \), 클로로포름 분획물이 \( 78.77 \pm 6.15 \% \) 의 세포생존율을 나타났으며, 블루베리 헥산 분획물은 \( 89.12 \pm 3.98 \% \), 클로로포름 분획물은 \( 57.77 \pm 1.05 \% \)의 세포생존율을 나타냈다(Fig. 5A). 인체 유방암 세포주 MDA- \( \mathrm { MB } -231 \) 에서는 상동열매 혝산 분획물이 \( 70.35 \pm 3.51 \% \), 클로로포름 분획물이 \( 75.04 \pm 7.96 \% \) 의 세포생존율을 나타냈으며, 에틸아세테이트 분획물의 경우에노 \( 35.42 \pm 2.44 \% \) 의 세포생존율이 나타났다. 이에 비해 블루베리의 혝산 분획물은 \( 36.50 \pm 1.60 \% \), 클로로포름 분획물은 \( 8.54 \pm 1.25 \% \), 에틸아세테이트 분획물은 \( 48.34 \) \( \pm 4.91 \% \) 의 MDA-MB-231 세포생존율을 나타냈다(Fig. 5B). Adams 등 (2010)은 블루베리 메탄올 추출물이 MDA-MB-231 세포에서 PI3K/Akt pathway의 감소와 \( \mathrm { NF } - \mathrm { KB } \) 의 활성화를 퉁해 apoptosis를 유발한다고 보고하였으며, \( \operatorname { Pan } \) 등 \( (2007) \) 은 블루베리 활성 성분 중 pterostilbene이 \( \mathrm { AGS } \) 세포에서 \( \mathrm { p } 53 \) 발현의 증가를 통한 cell cycle arrest와 apoptosis 유도에 대해 보고한 바있다. 따라서, 상동열매에 의한 암세포의 apoptosis 유발 가능성에 대해서도 연구가 필요하며 이를 퉁해 위암과 유빙암을 타겟하는 항암식품 소재 개발에 기여할 수 있을 것으로 사료된다.</p> <h2>GC-MS를 이용한 성분 분석</h2> <p>상동열매와 블루베리 메탄올 추출물 및 용매 분획물의 성분조성을 \( \mathrm { GC } - \mathrm { MS } \) 를 이용하여 분석한 결과는 Table 5 에 나타내었다. 메탄올 추출물의 경우 상동열매와 블루베리가 유사한 성분조성을 가지는 것으로 확인되었으며, 항산화 활성이 보고된 바 있는 3,5-dihydroxy-6-methyl-2,3-dihydro-4H-pyran-4-one (상동열매 \( 32.75 \% \) 및 블루베리 27.44 \%)와 catechol (상동열매 \( 2.73 \% \) 및 블루베리 \( 2.17 \% \) )이 상당량 검출되었다(Yang 등, 2007; Čechovská 등, 2011; Yu 등, 2013). 용매 분획물들 중에서는 폴리페놀 함량과 자유라디칼 소거 활성이 우수했던 에털아세테이트 분획물과 부탄올 분획물에서 다른 분획물들에 비해 다양한 종류의 항산화 활성을 가지는 성분들이 검줄되었다. 상동열매 에덜아세테이트 분획물에서는 항산화 활성이 보고된 3,5-dihydroxy-6-methyl-2,3-dihydro-4H-pyran-4-one ( \(4.51 \% \)), benzoic acid ( \(1.07 \% \)), catechol ( \(7.31 \% \)), salicylic acid ( \(1.61 \% \)), syringol ( \(2.48 \% \)) 및 pyrogallol (8.05 \%)가, 부탄올 분획물에서는 3,5-dihydroxy-6-methyl-2,3-dihydro-4H-pyran-4-one (37.71 \%)와 catechol (2.57 \%)이 확인되었다(Loo 등, 2008; Velika와 Kron, 2012; Wang 등, 2015; Ozturk Sarikaya 2015). 블루베리 에틸아세테이트 분획물에서 검출된 화합물들 중에서는 benzoic acid ( \(4.75 \% \)), catechol ( \(9.11 \% \)), syringol ( \(11.90 \% \)), linalool ( \(1.66 \% \)), vanillic acid ( \(6.72 \% \)), methyl syringate ( \(2.31 \% \)) 및 syringic acid ( \(7.88 \% \))가, 부탄올 분획물에서는 3,5-dihydroxy-6-methyl-2,3-dihydro-4H-pyran-4-one ( \(56.26 \% \)), catechol ( \(6.19 \% \)) 및 syringol ( \( 2.63 \% \))가 항산화 활성을 나타내는 것으로 보고된 바 있다(Kumar 등, 2011; Jubri 등, 2013; Cikman 등, 2015; \( \mathrm { Seol } \) 등, 2016). 한편. 폴리페놀과 안토시아닌의 함량과 자유 라디칼 소거 활성이 상대적으로 높지 않았지만 세포 보호 효과가 높았던 메탄올 추출물에서는 4a,4b-dimethylhexahydropyrimido \( \left [5 ^ {\prime } , 4 ^ {\prime } : 3,4 \right ] \) cyclobuta[1,2-d]pyrimidine-2,4,5,7(3H,6H)-tetrone가 상동열매와 블루베리에 각각 \( 24.08 \) 및 \( 19.99 \% \) 로 상대적으로 함량이 높게 나타났다. 이 화합물은 다른 용매 분획물에서는 검출 되지 않는 것으로 확인된 바 메탄을 추출물의 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 로 유도된 산화적 스트레스에 대한 세포 보호 효과에 기여할 수 있을 것으로 판단되며, 자유라디칼 소거 활성과 세포 보호 효과에 대한 추가적인 연구가 필요하다고 사료된다. 위암과 유방암 세포의 증식 억제 활성이 있었던 혝산 분획물과 클로로포름 분획물의 경우 다양한 암세포에 대한 항암활성을 가지는 것으로 알려진 \( \beta \)-sitosterol이 상동열매 혝산 분획물과 클로로포름 분획물에서 각각 \( 16.49 \) 와 \( 35.83 \% \), 블루베리 혝산 분획물과 클로로포름 분획물에서는 각각 \( 12.66 \) 와 \( 19.50 \% \) 로 확인되었으며(Bin Sayeed와 Ameen 2015), 다른 분획물에서는 검줄되지 않았다. 이러한 결과들을 토대로 상동열매는 천연 항산화 및 항암 소재 로서의 활용가치가 증대될 것으로 사료된다.</p>