Electron spin resonance (ESR)을 이용하여 DPPH 라디칼과 Alkyl 라디칼 소거 활성을 측정하였다. \( 60 \mu \mathrm { M } \mathrm { DPPH } \)와 시료를 혼합하고 10초간 교반하여 2분동안 실온에서 반응시킨 후, capillary tube로 옮기고 ESR spectrometer (JEOL)에서 측정하였다. 시료를 첨가하여 30분간 반응시킨 후, capillary tube로 ESR spectrometer (JES-FA200, JEOL)에서 측정하여 양성대조군으로 catechin을 사용하였다. 기체크로마토그래페 분석의 \( \mathrm { GC } - \mathrm { MS } \) 의 분석조건은 분당 온도를 승온하여 유지해 분석하였고 운반가스는 헬륨을 사용, 검출된 피크의 화합물 동정은 Willey 9 library database를 이용해 동정 된 화합물의 성분조성비는 피크가 차지하는 비율 기반으로 산출했다.
<h2>Electron spin resonance (ESR)을 이용한 DPPH 라디칼 소거 활성 측정</h2> <p>각 시료에 의한 DPPH 라디칼에 대한 환원력을 이용하여 DPPH 라디칼 소거 활성을 측정하였다(Nanjo 등, 1996). \( 30 \mu \mathrm { L } \)의 \( 60 \mu \mathrm { M } \mathrm { DPPH } \) 와 농도별로 준비한 시료를 혼합한 다음 10 초간 강하게 교반하여 2 분동안 실온에서 반응시킨 후, capillary tube로 옮겨 JES-FA200 ESR spectrometer (JEOL, Tokyo, Japan)에서 측정하였다. 측정조건은 magnetic field \( 336.000 \mathrm { mT } \), power \( 5 \mathrm { ~mW } \), sweep time 30 초, sweep width \( 10 \mathrm { mT } \), frequency \( 9.43 \mathrm { GHz } \), modulation width \( 0.8 \mathrm { mT } \), amplitude 500 , time constant \( 0.03 \) 초 였다. 양성대조군으로 catechin을 사용하였다.</p> <h2>ESR을 이용한 Alkyl 라디칼 소거 활성 측정.</h2> <p>Alkyl 라디칼 소거 활성은 Hiramoto 등(1993)의 방법에 따라 ESR을 이용하여 측정하였다. Distilled water, \( 40 \mathrm { mM } \mathrm { AAPH } \), \( 40 \mathrm { mM } \) 4-POBN과 시료를 \( 20 \mu \mathrm { L } \) 씩 차례로 첨가하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 항온수조에서 30분간 반ㅇㅇㅇ시킨 후, capillary tube로 옮겨 ESR spectrometer (JES-FA200, JEOL)에서 측정하였다. 측정조건은 magnetic field \( 336.000 \mathrm { mT } \), power \( 7 \mathrm { ~mW } \), sweep time 30 초, sweep width \( 10 \mathrm { mT } \), frequency \( 9.43 \mathrm { GHz } \), modulation width \( 0.2 \mathrm { mT } \), amplitude 500 , time constant \( 0.03 \) 초 였다. 양성대조군으로 catechin을 사용하였다.</p> <h2>Gas chromatography-Mass spectrometer (GC-MS) 분석</h2> <p>기체크로마토그래페 분석은 Shimadzu GC-MS (QP-2010, Shimadzu Co.)을 시용하여 수행하였으며, GC column은 Rtx-5MS (30 m length, \( 0.25 \mu \mathrm { m } \) diameter, \( 0.25 \mu \mathrm { m } \) thickness)를 사용하 였다. \( \mathrm { GC } - \mathrm { MS } \) 의 분석조건은 오븐 온도는 \( 100 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 1 분간 유지하고 분당 \( 10 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 씩 승온하여 \( 140 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 3 분간 유지하였고, 다시 분당 \( 4 { } ^ {\circ } \mathrm { C } \) 씩 승온하여 \( 320 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 10 분간 유지하며 분석 하였다. 운반 가스는 혤륨을 사용하여 total flow를 \( 1 \mathrm { ~mL } / \mathrm { min } \) 으로 분석을 진행하였고, 시료 주입 온도는 \( 250 ^ {\circ } \mathrm { C } \), transfer 온도는 \( 280 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 로 설정하였으며, SCAN modeᄅ로 45-800 m/z 범위에서 분석하였다. 검출된 피크의 화합물 동정은 Willey 9 library database를 이용하여 library와 유사도가 \( 80 \% \) 이상인 화합물만 동정하였으며, 동정 된 화합물의 성분조성비는 피크의 intensity를 기준으로 전체 피크에서 각 피크가 차지하는 비율을 기반으로 산출하였다.</p>