Shizuoka 실험동물센터에서 분양 받은 4주령 ICR계 수컷 생쥐를 1주일간 적응한 후 \( 25 \sim 30 \mathrm { ~g } \) 사이의 체중의 생쥐들을 7마리씩 나누어 간 조직을 적출하였다. 차가운 생리식염수로 세척하여 sucrose/EDTA 용액을 넣고 마쇄기로 분쇄하여 \( 10 \% \) 균질액을 만들었다. 균질액을 원심분리하여 SOD, CAT 활성과 과산화수소 및 단백질 합량 측정 시료로 사용하고 간 조직을 차가운 완충용액에 넣고 원심분리하여 시료로 사용하여 지질 과산화물을 측정하는 실험을 진행하였다.
<h2>실험동물 및 식이</h2> <p>실험동물은 Shizuoka 실험동물센터(Shizuoka, Japan)에서 분양 받은 \(4 \) 주령의 ICR계 수컷 생쥐로서 실온이 \( 20 \pm 2 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 습도가 \( 50 \pm 5 \%, 12 \) 시간 명암주기의 사육실에서 상품화된 생쥐용 사료와 물을 자유롭게 먹게 하였으며, 이와 같은 조건에서 \(1 \)주일간 적응시킨 후 체중이 \( 25 \sim 30 \mathrm { ~g } \) 의 생쥐만을 선별하고 각 실험군으로 분류하여 사용하였다.</p> <h2>실함동물 처리</h2> <p>사염화탄소 유도 간독성에 대한 발효알로에의 보호효과를 연구하기 위해서 Table \(1 \)과 같이 Sprague-Dawley rat \( (180 \sim 200 \mathrm { ~g } ) \) \(7 \)마리씩을 \(1 \)군으로 하여 대조군과 \( \mathrm { CCl } _ { 4 } ( \mathrm { CT } ) \)군, 알로에 베라 투여군(AV + CT), 발효알로에 저용량 투여군 (FAVL + CT), 발효알로에 베라 고용량 투여군(FAVH + CT) 등의 시험군으로 구분하였다.</p> <h2>분석시료 제조</h2> <p>실험 시작 \(16 \)시간 전에 절식시킨 생쥐를 경추탈구 시킨 후, 간 조직을 적출하여 차가운 생리식염수로 세척한 다음 무게를 측정하였다. 간 조직은 얼음 결정상태의 생리식염수에 넣어 세절하고 \(3 \)회 수세하여 혈액을 제거하였으며, sucrose/EDTA \( (0.25 \mathrm { M } / 1 \mathrm { mM } ) \) 용액을 넣고 마쇄기(glass teflon homogenizer)로 분쇄하여 \( 10 \% \) 균질액을 만들었다. 이 균질액을 원심분리 \( (900 \times \mathrm { g } , 15 \) 분 \( ) \) 상등액을 취하고, 이 상등액을 \(2 \)차 원심분리 \( (24,000 \times \mathrm { g } , 10 \) 분 \( ) \) 하였다. 얻어진 상등액 (cytosolic fraction)을 \( \mathrm { SOD } , \mathrm { CAT } \) 활성과 과산화수소 및 단백질 합량 측정 시료로 사용하였다.</p> <p>한편 지질 과산화물을 측정하기 위해서 간조직을 차가운 완충용액 \( (0.15 \mathrm { M } \mathrm { KCl } , 25 \mathrm { mM } \) potassium phosphate buffer in \( 1 \mathrm { mM } \) deferoxamine mesylate, \( \mathrm { pH } 7.4 \) 에 마쇄하여 원심 분리한 후 시료로 사용하였다.</p>