생후 4 주령된 Sprague Dawley계 숫쥐를 경북대학교 부속 사육장에서 구입, 기초사료로써 1주일간 예비사육 후 난괴법에 의해 6마리씩 7군으로 나눈 후 사육상자에 넣어 3주일간 실험 사육하였다. 각 지질의 분획을 iodine vapor로 발색시켜 동정한 후 인지질 분획을 긁어내어 지방을 추출, 혈청은 chloroform-methanol 용액으로 추출한 gas-liquid chromatography기기에 주입하였으며, 간 및 뇌 조직의 총지질 지방산 분석은 Folch 등의 방법에 의하여 chloroform-methanol 용액으로 총지질을 추출하였고 분석결과의 통계처리는 실험군 당 평균치와 표준오차를 계산하였다.
<h1>재료 및 방법</h1><h2>실험동물</h2><p>체중 \(60 \sim 65 \mathrm{g}\)의 생후 4 주령된 Sprague Dawley계 숫쥐를 경북대학교 부속 동물사육장에서 구입하여 \( 20 \% \) casein을 함유하는 기초사료로써 1주일간 예비사육 후 체중에 따라 난괴법(Randomized Complete Block Design)에 의해 6마리씩 7군으로 나눈 다음 apartment식 사육상자에 한 마리씩 넣어 3주일간 실험 사육하였다. 예비사육 및 실험 사육 기간 중 사료와 물은 자유로이 섭취시켰으며, 사육실의 온도는 \( 20 \pm 2^{\circ} \mathrm{C} \), 습도는 \( 50 \% \) 전후로 조절하였고 명암은 12시간(07:00~19:00) 주기로 조명하였다.</p><h2>식이</h2><p>실험식이 조성은 Table 1과 같으며, 실험식이는 대조군 식이로서 콜레스테롤 \( 1 \% \)와 sodium cholate \( 0.25 \% \)를 첨가 조제하였다. 실험식이에 사용된 마와 천마는 강원도 춘천에서 재배한 것을 구입하여 음건 건조한 후 60 mesh 분말로 만들어 사용하였으며, 유지로는 돈지(삼립유지제)와 옥수수 기름(동방유량(주)제)을 절반씩 해서 \( 10 \% \) 수준에서 첨가하였다.</p><h2>실험동물의 처리</h2><p>실험 기간 중 익일로 체중을 측정하고 식이 섭취량은 매일 식이 잔량을 측정하여 산출하였다. 3주 후 실험 최종일에는 7시간 절식시킨 후 에테르 마취하에 개복하여 심장 체혈법으로 채혈하였고, 혈액은 약 1시간 정도 얼음에 방치한 후 \( 3,000 \mathrm{rpm} \)에서 15분간 원심분리하여 혈청을 분리하였다. 간장은 식염수로 문맥 탈혈 후 여과지로 물기를 제거한 후 중량을 측정하고, 뇌 또한 적출하여 그 무게를 측정하였다.</p><h2>분석방법</h2><p>혈청은 chloroform-methanol 용액 \( (2: 1 \), \(\mathrm{v} / \mathrm{v} ) \)으로 추출한 후 \( 14 \% \mathrm{BF}_{3}-\mathrm{MeOH} \)로 methylation하여 gas-liquid chromatography(GLC, Hewlett Packard 5890A, USA) 기기에 주입하였으며, 간 및 뇌 조직의 총지질 지방산 분석은 Folch 등의 방법에 의하여 chloroform-methanol 용액 \( (2: 1\), \(\mathrm{v} / \mathrm{v} ) \)으로 총지질을 추출하였다. 인지질 분획 분리는 thin layer chromatography(TLC)를 이용하여 일정량의 추출액을 활성화시킨 silica gel plate \( (20 \times 20 \mathrm{~cm}) \)에 점적시키고, 전개 용매로는 petroleum ether\(:\) diethylether \(:\) acetic acid \((82:18: 1\), \(\mathrm{v} / \mathrm{v} / \mathrm{v}) \)를 사용하였다. 분리된 각 지질의 분획을 iodine vapor로 발색시켜 동정한 후 인지질 분획을 긁어내어 지방을 추출하였다. 총지질과 인지질 분획에 포함된 지방산 조성을 분석하기 위해 methylation시킨 후 일정량을 gas-liquid chromatography(GLC, Hewlett Packard 5890A, USA) 기기에 주입시켰다. 기기의 조건으로는 Ultra 2 capillary column \( (0.32 \mathrm{~mm} \times 25 \mathrm{~m}) \) 과 flame ionization detector가 부착되고, oven온도는 \( 150^{\circ} \mathrm{C} \)에서 \( 250^{\circ} \mathrm{C} \)로 점차 올렸으며 injection port 온도는 \( 270^{\circ} \mathrm{C} \), detection port 온도는 \( 280^{\circ} \mathrm{C} \)로 하여 carrier gas인 질소를 유속 \( 0.8 \mathrm{ml} / \mathrm{min} \)으로 조정하였다.</p><h2>통계처리</h2><p>분석결과의 통계처리는 실험군 당 평균치와 표준오차를 계산하였고, 유의성 검정은 \( p<0.05 \) 수준에서 Duncan's multiple range test를 하였다.</p>