4주령의 수컷 생쥐의 행동학적 알코올 의존화를 위하여 우한 접근법을 이용하여 실험했다. 알코올, 물과 사료의 섭취량과 체중을 측정하고, 10일간의 약물 투여기간에 대해서 각 2일간의 알코올 섭취량의 평균을 일일 2시간 알코올 섭취량으로 하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>실험 재료</h2> <p>실험재료 4주령의 C57BL/6형 수컷 생쥐(효창 science, 대구)를 사용하였다. 도착일로부터 5 일 동안 한 우리당 5 마리씩 사육하면서 실험환경에 적응시켰다. 이때 물과 생쥐용 배합사료(삼양유지사료, 서울)는 24 시간 동안 자유로이 섭취하도록 하였다.</p> <p>이후 대상 생쥐의 행동학적 알코올 의존화를 위하여 변형된 우한 접근법(limited access procedure)을 이용하였다. 즉 대상생쥐를 한 우리 당 한 마리씩 사육하면서 일주일 동안(실험 12일까지) 물 대신에 \( 10 \%(\mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 알코을(Sigma, St, Louis, MO, USA)만을 사료와 함께 24시간 제공함으로서 알코올 섭취를 강요하고, 이후 실험 33일까지 21일간 매일 오후 2 시부터 4 시 사이의 2 시간 동안 \( 10 \%(\mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 알코올만 제공함으로서 이때에 알코올을 섭취할 수 있다는 것을 학습시켰다. 나머지 22 시간은 물만 제공하였고, 사료는 모두 24 시간 제공하였다. 명암은 오전 6 시부터 오후 6시까지 12 시간으로 조절하였다.</p> <h2>알코올, 물 및 사료의 섭취량과 체중의 측정</h2> <p>생쥐의 알코올, 물 및 사료 섭취량 측정은 각각 제공하기 직전의 무게와 제공한 뒤의 무게를 측정하여 그 차이를 섭취량( \( (0.001 \mathrm{~g} \) 까지 측정 \( ) \) 으로 하였다. 단, 물과 사료의 섭취량은 오후 2 시를 기준으로 하여 각각 22 시간 물 섭취량과 24 시간 사료 섭취량으로 하였다. 이렇게 측정된 섭취량은 다시 생쥐의 체중 \( 1 \mathrm{~kg} \) 당으로 환산하였다. 생쥐의 체중은 실험 33,35 , \( 37,39,41 \) 일 및 43 일에 측정하였다.</p> <h2>실험 방법 및 약물 투여</h2> <p>약물 투여는 실험 34 일부터 43 일까지 10 일간 시행하였으며, 이를 위해 약물 투여 첫날인 실험 34일 오전에 40 마리의 생쥐를 무작위로 vehicle(매개체)군, OND \( (0.01 \mathrm{mg} / \mathrm{kg}) \) 단독 투여군과 NTX \( (1.0 \mathrm{mg} / \mathrm{kg}) \) 단독 투여군 및 OND \( (0.01 \) \( \mathrm{mg} / \mathrm{kg}) \) 와 NTX \( (1.0 \mathrm{mg} / \mathrm{kg}) \) 병합 투여군으로 구분하여 각 처리당 10마리씩 약물을 투여하였다. 일회투여량은 처리군에 관계없이 모두 \( 0.2 \mathrm{ml} \) 로 복강 내로 투여하였으며, 약물 투여는 알코올 제공 시작 시간 30 분전인 오후 1 시 30 분에 투여하였다. 그리고 오후 2 시 부터 4 시 사이의 2 시간 동안 물 제공 없이 알코올만을 제공하였고, 알코올 섭취량의 일간 변화가 연구 결과에 미치는 영향을 최소화하기 위하여 약물 투여 전 2 일간(실험 32일과 33 일)의 알코올 섭취량의 일일평균을 약물 투여전(base)의 일일 2시간 알코올 섭취량으로 하였다. 10 일간의 약물 투여기간(실힘 34일부터 43 일까지)에 대해서는 각 2 일간의 알코올 섭취량의 평균을 일일 2 시간 알코올 섭취량으로 하였다.</p> <p>물 및 사료의 섭취량의 변화도 알코을 섭취량의 변화와 마찬가지로 약물 투여 전 2일간의 물(22시간)과 사료(24시간) 섭취량의 일일 평균을 약물 투여전(base)의 물과 사료의 섭취량으로 하였으며, 10 일간의 약물 투여기간에 대해서는 각 2 일간의 물 및 사료의 섭취량의 평균을 일일 물 및 사료의 섭취량으로 하였다.</p> <h2>통계 처리</h2> <p>OND 단독 투여군, NTX 단독 투여군과 OND와 NTX 병합 투여군의 3 군 각각의 처리군과 vehicle 투여군간의 일일 알코올, 물 및 사료 섭취량의 변화 및 체중의 일일 변화에 대해서는 repeated measure ANOVA를 각각 이용하였으며, 사후 검정으로 vehicle와 약물투여간의 평균의 비교 분석은 in-dependent t-test를 이용하여 검정하였다. 그리고 각 약물투여군내 일별 비교시에는 paired t-test를 이용하였다. 통계처리는 윈도우용 사회과학 통계 프로그램인 SPSS (ver. 12)를 이용하였으며, 유의수준은 \( 0.05 \) 미만으로 양측 검정하였다.</p>