암은 전세계적으로 사망률이 높은 질병 중 하나로, 최근 연구에서 세포자멸사와 세포 사멸과정에 관한 분자 기전연구가 진행되고 있다. Resveratrol은 폴리페놀류의 한 종류로, 다양한 상피암종의 세포증식 억제 효과를 가진다. 본 연구에서는 resveratrol이 A549 폐암세포와 SKOV3 자궁암세포의 생존과 사멸에 어떤 영향을 미치는지, 그리고 이러한 과정에서 p53이 관여하는지를 연구하였다.
<h1>서 론</h1> <p>암은 전세계적으로 인류의 건강과 생명을 위협하는 사망률이 높은 질병 중 하나이며, 암 관련 사망자의 수는 향후 50년간 2배 증가할 것으로 예상된다. 따라서 암 치료를 위한 연구가 지속적으로 이루어지고 있고, 최근 프로그램된 세포 죽음을 표현하는 용어인 세포자멸사(apoptosis)에 대한 분자 기전연구가 활발히 진행되고 있다. Apoptosis는 세포 스스로 조절이 가능한 능동적 과정이지만, 암세포의 경우 apoptosis에 대한 저항성을 갖기 위해 세포 내 다양한 분자기전 교란을 일으킴으로써 항암제에 대한 저항성을 가질 수 있다. Anoikis는 apoptosis의 아류형이며 부적절한 세포 부착 혹은 부착의 손실에 의해 일어난다. 일반세포는 부착되지 않은 상태에서 생존하지 못하고 Anoikis라는 세포 사멸과정을 거치게 되는데 이에 반해, 암세포의 경우 부착되지 않은 상태에서도 spheroid 형태를 형성하여 성장할 수 있으며, 생체 내에서 혈류를 통해 다른 기관으로 이동할 수 있으므로, 암세포의 Anoikis 저항성은 세포의 전이능력과 연관성이 있다.</p> <p>Resveratrol은 자연계에 널리 존재하는 폴리페놀류의 한 종류이며 와인, 땅콩, 오디 등의 식품에 함유되어 있다. 또한 백혈병과 전립선암, 유방암과 같은 다양한 상피암종의 세포증식 억제 효과를 가진다고 보고되었다. 이러한 효과는 세포주기의 억제와 apoptosis 유도를 통해 나타나며, 이 과정에서 p53 유전자가 관여한다고 보고된 바 있다. 종양억제유전자로 널리 알려진 p53의 돌연변이는 인간암세포에서 흔히 관찰되고 정상적인 p53은 FAS, Bax,Bcl-2 등 다양한 apoptosis 관련 유전자들의 발현을 조절함으로써 apoptosis를 유발한다. 최근 항암효과를 가지는 다양한 천연소재에서 apoptosis를 조절하는 중요한 메커니즘을 규명하는 연구가 꾸준히 이루어지고 있으며, 이전의 연구는 resveratrol이 A549 세포의 성장을 억제하고 apoptosis를 유도하는 등의 항암효과를 가진다는 것을 보고한 바 있다. 그러나, resveratrol이 정상적인 p53 유전자를 가지는 A549 세포의 anoikis 저항성에 어떠한 영향을 미치는지에 대한 연구와 p53 유전자가 결실된 SKOV3 세포와의 차이점에 대해서는 보고된 바 없다.</p> <p>그러므로 본 연구에서는 resveratrol이 A549 폐암세포와 SKOV3 자궁암세포의 생존 및 사멸에 어떠한 영향을 미치는지 알아보고 또한 이러한 과정에서 p53이 관여하는 조사하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>시약 및 재료</h2> <p>본 실험에서 사용한 resveratrol은 Sigma Aldrich (Sigma Aldrich, MO, USA)에서 구입하였고 dimethyl sulfoxide (DMSO, \( 5 \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \) ) 에 용해한 뒤 \( -20 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에 보관하였다. p53 small interfering RNA (siRNA), 대조군 siRNA, beta-actin antibody는 Santa cruz biotechnology사(CA, USA)에서 구입하였다. Pro-caspase3, p53 antibodies는 Cell signaling technology사(MA, USA)에서 구입하였다.</p>