본 논문에서는 용액의 세포를 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 배양한 후 광학분광계를 이용해 세포성장에 대한 산화적 스트레스의 영향력, 열 충격에 대한 대장균의 생육에 있어서 DPS 단백질의 유무가 주는 영향력, 세포성장 속도의 변화를 분석해 산화스트레스를 유발하는 중금속의 존재가 세포성장에 주는 정도와 세포성장 속도의 변화로 인한 배지 내의 수 \( \mathrm{pH} \)와 세포 성장의 연관성을 분석해 DPS단백질의 영향력을 측정했다.
<h2>산화적 스트레스에 의한 변화 측정</h2> <p>LB 배지 \( (\mathrm{NaCl} ~ 0.35 \mathrm{~g} / \mathrm{l} \), Tryptone \( 0.35 \mathrm{~g} / \mathrm{l} \), Yeast extract \( 0.175 \mathrm{~g} /) 35 \mathrm{ml} \)에 야생형 대장균과 \( \boldsymbol{\Delta} \)dps E.coli 세포를 각각 \( 500 \mu \mathrm{l} \)씩 접종하고 산화적 스트레스를 유발하는 물질인 과산화수소의 농도를 \( 0.5 \mathrm{~mM}, 1 \mathrm{~mM} \)로 첨가하여 세포의 생장 환경에 따른 세포의 성장속도를 관찰하였다. 용액의 세포는 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 배양하며 광학분광계를 이용하여 흡광도 \( 600 \mathrm{~nm} \)에서 한 시간마다 측정하여 48시간 동안 세포생장을 관찰하며 세포성장에 대한 산화적 스트레스의 영향을 관찰하였다</p> <h2>열 충격(heat shock) 스트레스에 의한 세포성장 변화 측정</h2> <p>LB 배지 \( 35 \mathrm{ml} \)에 야생형 대장균과 \( \boldsymbol{\Delta} \) dps E.coli 세포를 각각 \( 500 ~ \mu \mathrm{l} \)씩 접종하고 \( 45^{\circ} \mathrm{C} \)로 예열된 수조에서 배양하며 광학분광계를 사용하여 \( 600 \mathrm{~nm} \) 에서의 세포 흡광도를 측정하였다. 본 실험을 통하여 열 충격에 대한 대장균의 생육에 있어서 DPS 단백질의 유무가 나타내는 영향을 관찰할 수 있었다.</p> <h2>산화스트레스를 유발하는 중금속 \( \left(\mathrm{Fe}^{2+}\right) \)의 영향 측정</h2> <p>LB 배지 \( 35 \mathrm{ml} \)에 야생형 대장균과 \( \boldsymbol{\Delta} \) dps E.coli 세포를 각각 \( 500 ~ \mu \mathrm{l} \)씩 접종하고 Fenton 반응을 유도하는 물질인 \( \mathrm{FeCl}_{2} \)을 농도를 달리한 배양조건에서 대장균 세포의 생장속도를 측정하였다. 세포는 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 배양하면서 세포성장을 광학분광계를 이용하여 흡광도 \( 600 \mathrm{~nm} \)에서 세포성장을 한 시간마다 측정하여 7시간 동안 세포생장을 관찰하였다. 세포성장 속도의 변화를 관찰함으로써 산화스트레스를 유발하는 중금속의 존재가 세포성장에 주는 정도를 관찰하고 특히 DPS단백질의 영향을 측정할 수 있었다.</p> <h2>\( \mathrm{pH} \) 에 의한 변화 측정</h2> <p>배지의 \( \mathrm{pH} ~ 5.0 \)를 달리한 조건으로 만든 LB 배지 \( 35 \mathrm{ml} \)에 야생형 대장균과 \( \boldsymbol{\Delta} \)dps E.coli 세포를 각각 \( 500 ~ \mu \mathrm{l} \)씩 접종하였다. 세포는 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 배양하면서 용액의 세포는 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 배양하며 광학분광계를 이용하여 흡광도 \( 600 \mathrm{~nm} \)에서 세포성장을 한 시간마다 측정하여7시간 동안 세포생장을 관찰하였다. 세포성장 속도의 변화로 배지내의 수 \( \mathrm{pH} \)가 세포의 성장에 미치는 영향을 관찰할 수 있으며, 특히 DPS단백질의 영향을 측정할 수 있었다.</p>