마의 메탄올 추출물과 이의 분획물의 항산화 활성은 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) radical 소거능, superoxide dismutase 유사활성 및 환원력 측정을 통해 평가하였다. 시료를 99.5% 에탄올에 용해시킨 2x10^(-4)M DPPH 용액과 혼합하여 37\(^\circ \mathrm{C}\)에서 30분 동안 반응시킨 후 516nm에서 microplate reader를 이용하여 측정하였다.
<h2>항균 활성 측정</h2> <p>마의 메탄올 추출물 및 이의 분획물의 항산화 활성은 \( \mathrm { DPPH } \) (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) radical 소거능, superoxide dismutase 유사활성 및 환원력 측정,에 의해 평가하였다. 먼저 DPPH소거능의 경우, 다양한 농도로 희석한 시료 \( 20 \mu \mathrm { L } \)에 \( 99.5 \% \)에탄올에 용해시킨 \( 2 \times 10 ^ { -4 } \mathrm { M } \mathrm { DPPH } \) 용액 \( 380 \mu \mathrm { L } \)를 넣고 혼합하여 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 30 분 동안 반응시킨 후, \( 516 \mathrm { ~nm } \) 에서 microplate reader(Asys Hitech, Expert96, Asys Co., Austria)를 사용하여 흡광도를 측정하였다. 대조구로는 butyl hydroxytoluene, vitamin C 및 vitamin \( \mathrm { E } ( \) Sigma Co., USA)를 사용하였다. DPPH free radical 소거능은 시료첨가구와 비첨가구의 백분율로 표시하였으며, \( \mathrm { IC } _ { 50 } \) 는 \( 50 \% \)소거능을 나타내는 농도로 계산하였고 최종 결과는 3회 측정값의 평균과 편차로 나타내었다. Superoxide dismutase(SOD) 유사활성 평가superoxide와 반응하여 갈변물질을 만드는 pyrogallol 자동산화를 측정하는 Marklund와 Marklund의 방법을 변형하여 측정하였다. 즉 시료용액 \( 0.2 \mathrm { ~mL } \)에 Tris- \( \mathrm { HCl } \) buffer \( (50 \) \( \mathrm { mM } \) tris, \( 10 \mathrm { mM } \) EDTA, \( \mathrm { pH } \) 8.5) \( 3 \mathrm { ~mL } \)와 \( 7.2 \mathrm { mM } \) pyrogallol \( 0.2 \mathrm { ~mL } \)를 가하고, \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 10 분간 반응시킨 후, \( 1 \mathrm { ~N } \mathrm { HCl } \) \( 1 \mathrm { ~mL } \) 로 반응을 정지시킨 후, \( 420 \mathrm { ~nm } \)에서 흡광도를 측정하였다. SOD 유사활성은 시료 첨가군과 무첨가군과의 흡광도비로 나타내었다. 한편 환원력 평가는 Oyaizu 등의 방법을 변형하여 측정하였다. 에탄올에 용해한 시료 \( 2.5 \mathrm { ~mL } \) 에 \( 0.2 \mathrm { M } \) sodium phosphate buffer( \( \mathrm { pH } \) 6.6) \( 2.5 \mathrm { ~mL } \) 와 \( 10 \% \) potassium ferricyanide \( 2.5 \mathrm { ~mL } \)를 첨가하고 \( 50 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 20분간 반응시킨 후, \( 10 \% \)trichloroacetic acid \( 2.5 \mathrm { ~mL } \)를 첨가하여 반응을 종료하고 \( 4000 \mathrm { rpm } \) 에서 10 분간 원심분리하여 상등 액을 회수하였다. 회수한 상등액은 증류수로 2 배 희석한 후, 신선하게 조제된 \( 0.1 \% \) ferric chloride 용액과 \( 5: 1( \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 비율로 혼합하고 \( 700 \mathrm { ~nm } \)에서 흡광도를 측정하여 평가하였 으며, 대조구로는 butyl hydroxytoluene을 사용하였다. SOD 유사활성 평가 및 환원력 평가 결과는 3회 반복실험 후, 평균과 표준편차로 나타내었다.</p>