GenBank 데이터를 활용하여 16S rDNA 염기서열 비교 결과, 일부 분리된 균주들은 Leuconostoc mesenteroides 그룹과 Lactobacillus sakei 그룹에 속함을 확인하였다. 특히, 6개의 L. mesenteroides 균주의 whole cell protein의 SDS-PAGE 패턴이 표준균주 L. mesenteroides subsp. dextranicum (KCTC 3530)과 일치하였다. 이를 통해 단백질 band를 비교하여 균주들이 \( CO_ { 2 } \) 발생 실험에서 구분된 그룹과 일치함을 알 수 있었다.
<h2>두유 curd 형성 균주의 형태학적 분류</h2> <p>선별된 균주들을 동정하여 L. mesenteroides로 나타난 균주를 대표하는 strain No. 2-15-2, 2-19-2와 분자생물학적, 생화학적 동정 결과 L. sakei를 대표하는 균주 strain No. 3-8-1, 3-17-1 를 gram staining하여 현미경으로 관찰한 결과, 모두 gram positive로 보라색으로 염색되는 것을 불 수 있었으며 L mes-enteroides는 구균, L. sakei는 간균으로 확인할 수 있었다(data not shown). 또한 전자현미경으로 관찰한 결과, L. mesenter-oides는 구균으로 크기가 \( 1 \sim 2 \times 1 \mu \mathrm { m } , \) L.sake는 간균의 형태로 크기가 \( 0.6 \sim 0.8 \times 2 \sim 3 \mu \mathrm { m } \) 로 관찰되었다.</p> <h2>두유 curd 형성균주의 whole cell protein pattern 다양성</h2> <p>16 rDNA 동정에서 L. mesenteroides로 확인되었던 6 개의 균주(strain No. 3-4-1, 4-39-5, 3-4-2, 2-15-2, 2-18-1, 2-19-2)의 whole cell protein의 SDS-PAGE에서의 단백질 band 양상이 표준균주 L. mesenteroides subsp. dextranicum (KCTC 3530)와 동일한 형태로 나타났다.</p> <p>반면, 165rDNA를 이용한 동정에서 L . sakei로 확인된 균주 strain No. 3-8-1, 3-17-1, 2-2-2, 3-8-3의 경우 SDS-PAGE에서의 band 양상이 표준균주 L. sakei subsp. sakei (KCTC 3598)와 약 \( 17 \mathrm { kDa } , 34 \sim 43 \mathrm { kDa } , 60 \mathrm { kDa } \) 부근에서 단백질 band의 차이가 확인되어 생화학적 분류에서 사용한 탄수화물의 발효 양상과 같이 다양한 결과를 확인하였다(Fig. 5). 단백질 band를 비교해 본 결과, \( CO_ { 2 } \) 발생 실험에서 나누어진 group과 동일하게 strain No. 2-2-2, 3-8-3과 strain No. 3-8-1, 3-17-1로 나눌 수 있었다.</p> <h1>초록 : 두유 커드를 생산하는 김치 유래 젖산균의 동정</h1> <p>본 연구의 목적은 두유 curd를 형성하는 미생물을 분리하는 것이다. 두유 curd를 형성하는 미생물은 채소를 젖산균으로 발효시킨 전통적인 한국의 음식, 김치로부터 분리하였다. 분리 균주 196개 중 10개의 균주(strain No. 2-2-2,2-15-2,2-18-1,2-19-2,3-4-1,3-4-2,3-8-1,3-8-3,3-17-1,4-39-5)가 단단한 두유 curd를 형성하였고 분자생물학적 - 생화학적 분석법에 의해 동정되었다. 분리균주로부터 추출한 genomic DNA는 16 rDNA 지역의 PCR 증폭을 위한 주형으로 사용하였다. GenBank 데이터로 16S rDNA 염기서열을 비교한 결과, 분리 균주들은 Leuconostoc mesenteroides group과 Lactobacillus sakei group으로 동정 되었다. 두유 curd를 형성하는 균주들의 계통 발생학적 위치와 분류군은 neighbor-joining 방법을 이용하여 확인하였다. 또한, L. mesenteroides group은 생화학적 특성에 의해 Lu mesenteroides subsp. dextranicum으로 동정되었다. 하지만 L. sakei group은 생화학적 특성 비교 시 다양성을 보여 Lactobacillus sp.로 명명하였다.</p>