본문의 실험 결과 LP9M80-H은 복부지방을 감소시키지만 체중에는 영향을 주지 않고, 인슐린의 분비를 촉진시켜서 혈당을 감소시키는 효과를 보여주고 있고, adiponectin의 분비를 지방세포에서 정상 수준으로 회복시켜주는 것은 물론 혈청 내에 있는 지방을 효과적으로 감소시켜주고 있다. 또한 IRS-1 발현과 인슐린 수용체 \( \beta \)의 증가를 유도하고, Gluts의 발현을 조절할 수 있는 것을 제시하고 있다. OLETF 랫드에서 LP9M80-H는 혈청 내 지방을 감소시키는 효과를 타나내었다. 인슐린 농도는 OLETF 랫드보다 증가하였고 LP9M80-H OLETF 랫드에서 급격하게 증가했다.
<h1>결 과</h1> <h2>LP9M80-H가 OLETF 랫드의 체중과 복부 지방량에 미치는 영향</h2> <p>LP9M80-H가 비만과 당뇨가 유발된 실험동물인 OLETF 랫드의 체중과 복부 지방량에 어떠한 영향을 미치는지 관찰하기 위하여 경구투여 전과 부검 전에 체중을 측정하였고, 부검시 복부지방을 적출하여 무게를 측정하였다. 그 결과, LETO 랫드에 비해서 OLETF 랫드의 체중은 유의적으로 증가하였다. 그러나 LP9M80-H를 투여한 OLETF 랫드는 vehicle군에 비하여 체중이 약간 감소하는 경향을 나타내었으나 두 집단 사이에서 유의적인 차이는 없었다. 또한, 복부지방의 무게도 OLETF 랫드가 LETO 랫드보다 유의적으로 증가하였다. 그러나 LP9M80-H를 처리한 랫드는 vehicle군에 비하여 유의적으로 복부지방이 약 \( 18 \% \) 정도 감소하였다. 이러한 결과로부터 OLETF 랫드가 비만이 유발된 실험동물임을 확인 할 수 있었고, LP9M80-H 처리는 체중에 유의적인 영향을 미치지않지만 복부지방을 감소시키는 효과가 있음을 나타내고 있다.</p> <h2>LP9M80-H가 OLETF 랫드의 혈당 조절에 미치는 영향</h2> <p>LP9M80-H가 혈당량에 미치는 영향을 평가하기 위해 OLETF 랫드에 마지막으로 추출물을 투여하고 8시간 동안 절식시킨 뒤, 랫드의 혈액을 채취하여 혈당량을 측정하였다. 그 결과, LETO 랫드는 약 \( 110 \mathrm{~mg} / \mathrm{dl} \)이고 OLETF 랫드가 약 \(100 \mathrm{~mg} / \mathrm{dl} \)으로 약간은 감소하였으나 유의적인 차이는 없었다. 그러나 LP9M80-H를 투여한 OLETF 랫드는 vehicle 처리한 랫드에 비해 유의적으로 혈당이 감소하였다. 이러한 결과는 LP9M80-H는 OLETF 랫드의 혈당을 감소시키는 효과를 나타낼 수 있음을 제시하고 있다.</p> <h2>LP9M80-H가 인슐린의 분비에 미치는 영향</h2> <p>인슐린은 체내의 혈당변화를 조절하는 중요한 역할을 하는 인자이다. 따라서, LP9M80-H 처리에 의한 혈당의 변화가 인슐린에 의해 유도되는지 확인하기 위해 혈청내 인슐린의 변화를 ELISA kit를 이용하여 분석하였다. 그 결과, OLETF 렛드는 LETO 렛드와 혈청내 인슐린의 농도에 유의적인 차이가 없었으나, LP9M80-H를 처리한 렛드는 인슐린의 분비량이 급속히 증가하였다. 또한, 이러한 혈청내 인슐린 농도의 변화가 인슐린 분비기관인 췌장조직의 베타-세포에서도 변화를 나타내는지 확인하기 위해 면역염색을 실시하였다. 그 결과, 혈청 내 인슐린 농도의 변화와 유사한 양상이 인슐린 면역염색에서도 관찰되었다. 췌장세포에서 확인된 인슐린 농도는 OLETF 랫드가 LETO 랫드보다 약간 증가하였으며, LP9M80-H를 처리한 OLETF 랫드에서는 급격히 증가하였다. 따라서 이러한 결과는 LP9M80-H는 OLETF 랫드에서 인슐린분비를 촉진시키는 역할을 함을 제시하고 있다.</p> <h2>LP9M80-H가 지방대사에 미치는 영향</h2> <p>Adiponectin은 Adipo 유전자에 의해 발현되는 지방세포에서 분비되는 단백질 호르몬으로 식욕조절 및 체내 지방축적을 조절하고, 인슐린 민감도와 세포생존을 촉진시키며, 염증을 감소시킨다. LP9M80-H가 혈청 내 adiponectin의 농도에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 ELISA kit를 이용하여 LETO 랫드와 OLETF 랫드에서 분리된 혈청에서 adiponectin 농도를 측정하였다. 그 결과, adiponectin의 농도는 OLETF 랫드가 LETO 랫드보다 유의적으로 약 \( 45 \% \) 정도 증가하였으며, LP9M80-H를 처리한 랫드에서는 LETO 랫드의 수준으로 감소하였다. 이러한 결과는 LP9M80-H는 OLETF 랫드의 지방세포에서 adiponectin의 분비를 정상수준으로 회복시켜 주는 기능을 나타냄을 제시하고 있다.</p> <p>또한, LP9M80-H가 혈청 내 지방의 농도에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 실험군의 랫드에서 분리된 혈청을 이용하여 Triglyceride (TG), Cholesterol (Chol), Low Density Lipoprotein (LDL)의 농도변화를 관찰하였다. 그 결과, TG의 농도는 OLETF 랫드가 LETO 랫드보다 급격히 증가하였으며, LP9M80-H을 처리한 랫드에서는 유의적으로 약간 감소하였다. 그러나 Chol과 LDL의 농도는 vehicle을 처리한 OLETF 랫드에서 증가하였으나, LP9M80-H을 처리한 OLETF 랫드에서는 LETO 랫드의 수준으로 감소하였다. 이러한 결과는 LP9M80-H는 OLETF 랫드에서 혈청 내 지방을 효과적으로 감소시키는 효과를 나타냄을 제시하고 있다.</p> <h2>LP9M80-H가 인슐린 수용체 신호전달과정과 Gluts의 발현에 미치는 영향</h2> <p>체내에 분비된 인슐린은 표적장기의 세포표면에 발현되는 인슐린 수용체와 결합하여 IRS-1을 통한 신호를 전달하며, 이러한 신호는 Gluts의 발현을 비롯한 다양한 세포내 신호전달 과정을 조절한다. 따라서 LP9M80-H에 의해서 혈청 내 증가된 인슐린이 표적세포의 인슐린 수용체 신호전달과정과 Gluts에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 간세포를 이용하여 단백질발현의 변화를 관찰하였다. 그 결과, OLETF 랫드의 간세포에서 인슐린 수용체 \( \beta \)의 발현은 LEIO 랫드보다 감소하였으며, LP9M80-H를 처리한 랫드의 간세포에서는 유의적으로 증가하였다. 또한, 인슐린 수용체의 downstream에서 신호를 전달하는 IRS-1의 발현은 인슐린 수용체와 비슷한 발현양상을 나타내었다. Vehicle처리한 OLETF 랫드에서 IRS-1의 발현은 LETO 랫드보다 감소하였으며, LP9M80-H를 처리한 OLETF 랫드에서는 증가되어 LETO 랫드 수준으로 회복되었다. 이러한 결과는 LP9M80-H는 OLETF 랫드에서 발현이 감소된 인슐린 수용체 \( \beta \)와 IRS-1의 발현의 증가를 유도하는 효과가 있음을 제시하고 있다.</p> <p>또한, 간 조직에서 3종류의 Gluts 발현을 분석한 결과, OLETF 랫드에서 Glut-2와 Glut-4의 발현은 LETO 랫드보다 유의적으로 증가하였고, LP9M80-H를 처리한 OLETF 랫드에서는 발현량이 더욱 증가하였다. 그러나 Glut-3발현은 OLETF 랫드와 LETO 랫드에서 유의적인 차이가 없었으나 LP9M80-H를 처리한 랫드에서는 발현이 감소하였다. 이러한 결과는 LP9M80-H는 Gluts발현을 조절할 수 있음을 제시하고 있다.</p>