흰쥐 \( \mathrm{E}_{18} \) 대뇌 신경세포를 뉴로베이절 배지에 배양하고 DIV 10에 추출물을 첨가한 후 DIV 14에서 세포의 생존율을 LDH 측정 방법으로 조사하여, 추출물이 시험관에 배양된 신경세포를 보호하는 효능을 평가하였으며 대조군과 비교하여 추출물을 첨가한 배지에서 자란 세포들은 생존율이 통계적으로 유의하게 증가하였습니다. 또한 추출물을 투여한 시험군은 학습과 기억 능력이 증가하여 학습 2일 내에 거의 학습과제를 완성하는 반면, 대조군은 4일이 걸려야 학습이 완료됨을 나타내는 결과입니다.
<h3>정상산소 배양조건에서 HK, HC, HS, HSC 의 신경세포 보호 효능</h3> <p>추출물들이 시험관에 배양한 신경세포를 보호하는 효능을 조사하기 위하여 흰쥐 \( \mathrm{E}_{18} \) 대뇌신경세포를 뉴로베이잘 배지에 배양하고 DIV 10에 추출물을 첨가한 후 DIV 14 에 세포의 생존율을 LDH 측정 방법으로 조사하였다. 대조군에 비하여 추출물을 첨가한 배지에서 자란 세포들은 생존율이 증가하였는데 통계(24-well plate, \( \mathrm{n}=8,4 \) 회 반복 실험)적으로 조사하였다(Fig. 7). HK, HC, HS,HSC 를 배지에 첨가하였을 경우 대조군 에 비하여 생존율이 각각 \( 116 \pm 8,115 \pm 12,118 \pm 15,121 \pm 13 \% \) 로 증가하였으며, 모든 실험군에서 매우 유의한 \( (\mathrm{p}<0.01) \) 증가를 보였다. 이는 이 추출물들이 정산산소환경에서 배양한 신경세포의 보호 효능이 있음을 의미한다.</p> <p>날수를 나타내며,Y축은 발판에 도달하기까지 걸린 시간을 초 단위로 나타낸 것으로, 이때 시간은 하루에 4 번 실시하여 평균값을 취한 것이다. 학습 1 일째 HK 는 \( 75.3 \pm 12 \) 초,HC는\( 76.2 \pm 6.7 \) 초, \( \mathrm{HS} \) 는 \( 70.5 \pm 11.4 \) 초, \( \mathrm{HSC} \) 는 \( 67.1 \pm 7.5 \) 초로, 대조군 \( 86.1 \pm 6.1 \) 초에 비하여 유의한 \( (\mathrm{p}<0.05) \) 차이를 보였으며 특히 HSC 는 매우 유의한 \( (\mathrm{p}<0.01) \) 차이를 보였다. 이는 학습 첫날부터 추출물을 투여한 시험군은 학습효율이 대조군에 비하여 유의하게 높으며, 특히 HSC 투여군은 HK 투여군에 비하여도 매우 유의하게 높음을 의미한다. 학습2일째도 추출물을 복용한 시험군은 대조군에 비하여 모두 유의한 차이를 나타내었다. 그러나 학습3일과 4 일에는 유의한 차이가 없었다. 또한 HSC 투여군은 HK 에 비하여도 유의한(p<0.05) 감소를 보였다. 이러한 결과는 추출물을 투여한 시험군은 학습과 기억 능력이 증가하여 학습2일에 거의 학습과제를 완성하는 반면<p>대조군은 4 일이 되어야 학습이 끝남을 의미한다. 학습 4 일이 끝나고 5 일째 발판을 없애고 수영하게 하여(2회 반복) 발판이 있었던 4 분원에 머무는 평균시간에는 유의한 차이는 나타나지 않았으나 \( (\mathrm{p}>0.8) \), 추출물 투여군들에서 학습 증진효과 경향성을 보였다. 추출물 투여기간 동안 생쥐의 몸무게 증가는 대조군과 시험군 간에 차이가 없었다(Fig. 9F). 발판을 수면위로 올려놓고 밝게 불을 밝혀 잘 보이게 한 가시발판시험에서도 대조군과 시험군 간에 차이가 없었다. 이는 추출물 투여가 생쥐의 건강에 특별한 이상을 일으키지 않았을 뿐 아니라 단순한 체력적 차이 때문에 발판을 빨리 찾은 것이 아님을 의미한다.</p>