D대학교 동물실험실의 해부실에서 지구성 운동수행력을 측정한 후, 마취제 에틸 에테르를 이용하여 마취한 뒤 MCT 그룹, LCT 그룹, 및 비 투여 그룹 순으로 수영 풀에 넣어 160 분간의 강제 수영을 시킨다. 그 후 복부대동맥에서 \( 10 \mathrm{ml} \) 의 동맥혈을 채혈하여 Pyruvate, Free Fatty Acid (FFA), Triglyceride, Lactate 등을 분석하였다.
<h2>실험동물의 채혈</h2><p>본 실험의 채헐은 D대학교 동물실험실의 해부실에서 시행되었고, 모든 실험동물은 채혈 12 시간 전 금식시킨 뒤 우선 각 그룹별로 지구성 운동수행력을 측정하였다. 이 후 안정 시기와 운동 스트레스시기를 나누어 분석하였다. 안정 시기는 훈련과 투여의 효과를 보기위한 것으로 실험실에서 충분한 안정을 취한 뒤 마취제 에틸 에테르를 이용하여 마취시켰으며, 운동 스트레스 시기는 역시 안정을 취한 뒤 MCT 그룹, LCT 그룹, 및 비 투여 그룹 순으로 수영 풀에 넣어 랫이 높은 운동 스트레스를 가지는 160 분간의 강제 수영을 시킨후 순서대로 마취시켰다.</p><p>마취된 실험동물은 해부판에 사지를 고정시키고 알코을 분무기로 복부를 분무한 뒤 3 방향으로 절개한 다음 \( 10 \mathrm{ml} \) 주사기를 이용하여 복부대동맥에서 약 \( 10 \mathrm{ml} \) 의 동맥혈을 채혈하였다. 채혈된 혈액은 원심분리기로 혈청을 분리하여 에펜돌프 튜브에 넣은 뒤 분석 전까지 Revoco사(미)의 Deepfreezer (\( 70^{\circ} \mathrm{C} \) 냉동고)에 보관하였다.</p><h2>혈액분석</h2><h3>Pyruvate 분석</h3><p>채취한 혈액과 \( 8 \% \)의 과염소산을 동량 혼합한 후 교반하여 \( 3000 \mathrm{rpm} \)의 속도로 5분간 원심분리 뒤 단백질이 제거된 상층액 \( 3.0 \mathrm{cc} \)을 추출하였고, 시약 sigma diagnostic pyruvate를 넣고 calibration curve를 이용하여 miltonroy spectronic 610(미)을 이용하여 측정하였다.</p><h3>Free Fatty Acid (FFA) 분석</h3><p>채취한 혈액을 상온에서 30분간 섬유소원을 침전시킨 뒤 \( 3000 \mathrm{rpm} \) 속도로 15분간 원심 분리하여 상층액을 추출한 뒤, 추출된 혈청에 증류수와 STD 용액은 각각 \( 50 \mathrm{uL} \) 넣고 sicdia nefazyme을 혼합하여 5 분간 찬물에 방치한 후 생화학 분석기 HITACHI 7150(일)을 이용하여 측정하였다.</p><h3>Triglyceride 분석</h3><p>채취한 혈액을 이용하여 \( 2500 \mathrm{rpm} \)속도로 15분간 원심 분리하여 상층액을 추출한 뒤, 생화학 분석기 HITACHI 7150(일)을 이용하여 측정하였다.</p><h3>Lactate 분석</h3><p>제단백 \( 2 \mathrm{cc} \)와 혈액을 동량 혼합한 후 \( 3000 \mathrm{rpm} \)으로 15분간 원심분리 하여 상충액을 추출한 뒤, 생화학분석기 HITACHI 7150(일)을 이용하여 측정하였다.</p><h3>자료처리방법</h3><p>본 연구에서 얻은 자료의 분석은 통계 패키지 SAS for Window (ver. 6.12)를 이용하였다. 자료의 기술 통계량(descriptive statistics)으로 평균(mean)과 표준편차(standard deviation)를 구하였고, 세 가지 서로 다른 실험그룹 (Control, MCT, \(\&\) LCT)에 지구성 운동수행력, 에너지 기질 활용도 (pyruvate, free fatty acid, triglyceride)와 피로요소(lactate) 및 인슐린 호르몬과 Lipase 효소의 유의한 차이를 알아보기 위해 1-요인 분산분석법(One-way ANOVA)을 이용하였다. 그리고 DUNCAN의 사후검증을 통해 유의수준을 산출하였다 \( (\mathrm{p}<.05) \).</p>