본 실험에서 활용한 백련은 전북 정읍시에서 공수하였으며, 시료의 추출은 꽃, 잎, 뿌리 줄기를 건조무게의 10배에 해당하는 70% 에탄올을 가하여 실온에서 하루 동안 침지하여 상등액과 침전물을 분리하고, 동일한 방법으로 3회 반복 추출하였다. 백련의 부위별 추출물을 원심분리하고, 여과하고, 농축하고, 동결건조 후 냉장 보관하면서 본 실험의 시료로 활용하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h3>시료재료</h3> <p>본 실험에 사용한 백련은 전북 정읍시 정읍백련(주)에서 생산된 것을 구입하여 사용하였으며, 시료의 추출은 백련의 각 부위 꽃, 잎, 뿌리줄기를 건조무게의 10 배에 해당하는 \( 70 \% \) 에탄올을 가하여 실온에서 24 시간 침지하여 상등액과 침전물을 분리하였으며, 동일한 방법으로 3회 반복 추출하여 본 실험에 사용하였다. 백련의 각 부위별 추출물을 원심분리, 여과 및 농축하여 동결건조 후 냉장실에 보관하면서 본 실험의 시료로 사용하였다.</p> <h3>백련 부위별 추출물을 첨가한 W/OM multiple emul-sion 제조처방 및 방법</h3> <p>백련 부위별 추출물을 첨가한 W/O/W multiple emulsion은 Table 1의 처방에 따라 Fig. 1과 같이 제조하였다. 먼저 유상에 emulsifier를 첨가한 후 수상을 넣어 3,000 rpm에서 10 분간 homo mixer(T.K. Homo Mixer Mark II, Tokushu kika kogyo Co. Ltd. Japan)를 이용하여 1 차 유화 후, 점증제를 넣고 2차 유화하였다. 다음 백련 부위별(꽃, 잎, 뿌리줄기) 추출물을 넣고 3,000 rpm에서 3 분간 3 차 유화 후 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) 까지 냉각시켜 \( \mathrm{W} / \mathrm{O} / \mathrm{W} \) multiple emulsion을 제조하여 본 실험에 사용하였다.</p> <h3>총 폴리페놀 함량 측정</h3> <p>폴리페놀 정량은 AOAC분석방법[2]에 준하여 정량하였다.즉, 100 배 희석한 시료용액 \( 3 \mathrm{ml} \) 에 Folin-Ciocalteu phenol re-agent 시약 \( 1 \mathrm{ml} \) 를 가하고, \( 1 \mathrm{~N} \mathrm{HCl} 0.2 \mathrm{ml} \) 을 넣은 후, 포화용액 \( \mathrm{Na}_{2} \mathrm{CO}_{3} 1 \mathrm{ml} \) 를 가하여 혼합한 후 1 시간 실온에서 방치하고, \( 640 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정한 후, 표준물질인 tannic acid로 미리 작성한 표준곡선의 흡광도 값과 비교하여 폴리페놀 함량을 산출하였다.</p> <h3>총 플라보노이드 함량 측정</h3> <p>총 플라보노이드 함량은 Jia 등의 방법[11]을 응용하여 측정하였다. 각 시료 \( 0.5 \mathrm{ml} \) 를 sodium nitrite solution \( 75 \mu \) 과 혼합하여 5분간 반응시키고 aluminum chloride solution \( 150 \mu \) 를 첨가하여 다시 5 분간 반응시킨 후 \( 1 \mathrm{M} \mathrm{NaOH} 0.5 \mathrm{ml} \) 와 섞어\( 510 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하였다. 이때 총 플라보노이드 함량은 catechin을 이용하여 작성한 표준곡선의 흡광도 값과 비교하여 플라보노이드 함량을 산출하였다.</p>