Crude oil 분해 균주의 생물유화제 생성 및 생육에 \( \mathrm { pH } \)가 주는 영향을 조사하기 위해 C-배지의 초기 \( \mathrm { pH } \)를 5~9로 각각 조절한 후 1, 3, 5일간 \( 32 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 배양하여 균체 생육을 확인한 결과를 Firg.3 에 나타냈으며, 최적의 생육조건의 범위를 보인 \( \mathrm { pH } \) 7,8의 조건에서 배양시간에 다른 유화력의 차이를 보기위해 균배양액을 원심 분리해 상층액을 구해 사용했다.
<h2>초기 \( \mathrm { pH } \) 의 영향과 유화력 측정</h2> <p>Crude oil 분해 균주의 생육 및 생물유화제 생성에 미치는 \( \mathrm { pH } \) 의 영향을 조사하기 위하여 C-배지의 초기 \( \mathrm { pH } \) 를 5, 6, 7, 8, 9로 각각 조절한 후 1, 3, 5일간 \( 32 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 배양한 후 균체 생육을 측정한 결과를 Firg. 3 에 나다냈다. KCL-2균주는 \( \mathrm { pH } \) 6과 8 사이에서 높은 균체 생육을 보였으며, \( \mathrm { pH } \) 5 이하와 \( \mathrm { pH } \) 9에서는 균주의 생육이 급격히 감소하였다. 이상의 결과로부터 Klebsiella sp. KCL-2 균주의 생육 최적 \( \mathrm { pH } \)는 중성 조건인 7.0 정도의 좁은 범위를 나타내고, 산성 및 알카리성 조건에서는 균주의 생육이 억제되는 제한요인으로 작용함을 알 수 있었다. 이와 같은 결과는 해양 유류 분해 미생물의 생육에서 보여주는 \( \mathrm { pH } 7.0 \) 과 7.5 등과 유사하였다.</p> <p>최적 생육조건의 범위를 보인 \( \mathrm { pH } \) 7과 8의 조건에서 배양시간에 따른 유화력의 변화를 보기위해 균배양액을 원심분리하여 상층액을 얻어 사용하였다. 그 결과, 배양 3일째에 유화력이 가장 높게 나타났으며, \( \mathrm { pH } \) 7의 조건에서 \( \mathrm { pH } \)8 의 처리구보다 다소 높게 나타났으며 이는 \( \mathrm { pH } \) 조건에 따른 균주의 성장상태와 비교적 일치하였다(Fig. 4). 이러한 결과는 해양 유류 분해 세균인 Psetdomonas sp. 으로부터의 계면활성제의 생산이 배양 2일 후인 정지기 초기에 가 장 많이 생산되는 결과와 유사하였다.</p> <h2>기질에 따른 유류의 분해능 특성</h2> <p>분리균주의 탄소원의 종류에 따른 유류분해 특성을 조사하고자 탄소수의 차이가 있는 기질을 사용하였다. Benzene, toluene, xylene 및 n-alkane \( \left ( \mathrm { C } _ { 10-28 } \right . \) 짝수탄소)계열의 각기 다른 탄화수소를 \( 10 \mathrm { m \ell } \) C-배지에 \( 0.1 \%( \mathrm { v } / \mathrm { v } ) \) 첨가하여 5일간 진탕배양한 후 KCL-2 균주의 생육정도를 나타낸 결과는 Fig. 5와 같다. KCL-2 균주는 n-alkane계열 \( \mathrm { C } _ { 18 } \) 과 \( \mathrm { C } _ { 28 } \) 사이에서 왕성하게 생육하였고, bezene, toluene과 탄소수가 비교적 적은 n-alkane \( C_ { 10-16 } \) 에서는 생육이 거의 없었으며, xylene에서는 생육이 전혀 없었다. 또한, Klebsiella pneumonia L25도 hexadecane \( \left ( \mathrm { C } _ { 16 } \right ) \) 및 octane \( \left \langle \mathrm { C } _ { 8 } \right ) \) 은 기질로서 이용하지 못하였다. Klebsiella sp. KCL-2 균주는 비교적 장쇄의 탄화수소 \( C_ { 18 } \) 이상을 탄소원으로 이용하는 것을 알 수 있었다. Lee 등이 보고한 유류분해 행얀세균인 Acinetobacter sp. 균주도 \( \mathrm { C } _ { 17 } \) 및 \( \mathrm { C } _ { 18 } \) 를 잘 이용하는 것으로보고된 바 있다.</p>