배양기간 14일간의 장기간 배양으로 인하여 약 \( 30 \% \)의 배양액이 유실되었으나 배양이 종료된 후 원심분리 된 균사체의 동결건조를 통하여 균체 수율을 계산한 결과, \( 12.5 \mathrm{~kg} / 120 \mathrm{~L} \)의 C.aurantiaca KCTC11143BP 균사체를 확보할 수 있으며 담자균류는 세균이나 방선균 등에 비해 배양 기간이 길고, 그에 비하여 균체량은 소량으로 담자균류 배양균사체를 활용하기에 많은 문제점을 가지고 있다.
<h2>C.aurantiaca KCTC 11143BP의 \( 300 \mathrm{~L} \) 유가식 배양</h2> <p>C. aurantiaca KCTC11143BP 균주 발효를 통한 clitocybin A의 대량생산을 위하여 \( 300 \mathrm{~L} \) 발효기를 이용하여 유가식 배양한 결과를 Fig. 3에 나타냈다. \( 300 \mathrm{~L} \) 발효기 유가식 배양 시에는 상기의 결과에서 PD 액체배지보다 YM 액체배지가 양호함을 확인하였기 때문에 YM 액체배지를 사용하여 배양하였다. 즉, 본 배양인 \( 300 \mathrm{~L} \) 발효조의 경우, \( 28^{\circ} \mathrm{C} \)에서 14시간 배양된 \( 4 \mathrm{~L} \)의 종균 배양액을 \( 120 \mathrm{~L} \)의 YM 액체배지를 포함한 \( 300 \mathrm{~L} \) 발효조에 접종하였다. 교반은 용존산소 농도가 \( 20 \% \) 이상 유지되도록 \( 150-200 \mathrm{rpm} \) 범위 내에서 교반 속도를 조절하며 배양하였다. YM 액체배지를 이용한 \( 5 \mathrm{~L} \) 회분식 배양에서의 초기 포도당 농도를 \( 10 \mathrm{~g} / \mathrm{l} \) 농도로 하였을 때 배지 중의 포도당이 급속도로 감소함을 확인하였기 때문에 \( 300 \mathrm{~L} \) 발효기 유가식 배양에서는 초기 포도당 농도를 \( 80 \mathrm{~g} / \mathrm{l} \)로 상향 첨가하고 배양 90시간 후에 다시 \( 50 \mathrm{~g} / 1 \)의 포도당을 첨가함으로써 활발한 세포성장을 유도하였다. 그 결과 Fig. 4와 같이 PMV는 최대 \( 15.1 \) (\(\% \), PMV)을 나타내 \( 5 \mathrm{~L} \) 발효기를 이용하였을 때에 비하여 매우 양호한 세포성장이 이루어짐을 확인할 수 있었다. 또한, 배양 후 30시간이 경과하였을 때 균체의 증식과 포도당 소비속도를 증가시키기 위하여 \( 5 \mathrm{~N} \) \( \mathrm{KOH} \)를 이용하여 \( \mathrm{pH} \)를 \( 3.5 \)에서 \( 4.0 \)으로 소폭 상승시켰지만 효과는 미비하게 나타났다. 배양기간 14일간의 장기간 배양으로 인하여 약 \( 30 \% \)의 배양액이 유실되었으나 배양이 종료된 후 원심분리 된 균사체의 동결건조를 통하여 균체 수율을 계산한 결과, \( 12.5 \mathrm{~kg} / 120 \mathrm{~L} \)의 C. aurantiaca KCTC11143BP 균사체를 확보할 수 있었다.</p> <p>담자균류는 일반적으로 세균이나 방선균 등에 비해 배양 기간이 길고, 그에 비하여 균체량은 소량으로 담자균류 배양균사체를 활용하기에 많은 문제점을 가지고 있다. 본 연구결과, C.aurantiaca KCTC11143BP 균주는 \( 5 \mathrm{~L} \) 발효조를 이용하여 회분식으로 배양하였을 경우, PD 액체배지보다 YM 액체배지에서 양호하게 잘 자라는 것을 확인하였다. 또한 YM 액체배지를 사용하여 유가식으로 배양할 경우, 매우 높은 PMV의 증가량을 보였으며 균체 생산량도 \( 12.5 \mathrm{~kg} / 120 \mathrm{~L} \)의 높은 수율을 얻었다. 이는 \( 104 \mathrm{~g} / 1 \)의 수율에 해당하는 균체량이다. Kim 등은 담자균류의 일종인 Agaricus bisporus 균주 배양시 최대 \( 15.0 \mathrm{~g} / 1 \)의 균사체를 생산하였다고 보고하였으며, Xu 등도 medicinal mushroom의 일종인 Trametes trogii 균주를 stirred-tank 및 airlift reactors를 이용하여 배양하였을 경우 최대 \( 10.81 \mathrm{~g} / \mathrm{l} \)를 얻었다고 보고하였다. 또한 Silva 등도 Pleurotus ostreatus 균주 배양액으로부터 항암 활성을 나타내는 다당류를 생산하기 위한 배양에서 최대 \( 9.35 \mathrm{~g} / 1 \)의 수율을 얻었다고 보고하였다. 이들의 결과에 비하여 본 연구결과는 매우 우수한 균체 생산량을 얻은 결과라 할 수 있다. 이는 본 배양 시 YM 변형배지를 사용하여 yeast extract \( 30 \mathrm{~g} / \mathrm{l} \), glucose \( 80 \mathrm{~g} / \mathrm{l} \) 등 탄소원과 질소원을 충분히 넣어준 결과라고 하겠다.</p>