시판 건조꽃차 각 \( 0.5 \mathrm{~g} \) 에 \( 10 \mathrm{ml} \) 의 멸균수를 가하면 실온에서 10 분간 교반한 후 상등액을 이용해 생물 시험법에 따라 호기성 일반세균, 대장균군, 살모넬라 세균, 황색포 도상구균 및 리스테리아 세균을 추출했다. 시판 건조꽃차의 잔류농약 모니터링을 하기 위해서 농약표준품은 AccuStandard Inc.(USA) 제품을 사용하였고, 추출용 시약 및 그 외 분석에 사용한 시약은 HPLC 급 용매와 특급 시약을 사용했고 결과는 SPSS \( 25.0 \) 버전으로 mean \( \pm \mathrm{SD} \)으로, 각 군간의 차이는 ANOVA로 찾았으며 통계적 유의수준은 \( p<0.05 \) 로 정했다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>실험재료</h2> <p>본 실험에 사용된 23 종의 꽃차는 2020 년 10 월 12월 국내 다양한 꽃차 유통회사의 밀폐 병제품으로 구입하였으며, 매화꽃, 아카시아꽃, 국화꽃, 복숭아꽃, 진달래꽃, 목련꽃, 갈화, 장미꽃, 동백꽃, 팬지꽃, 민들레꽃, 달맞이꽃, 금잔화꽃, 유채꽃, 살구꽃, 원추리꽃, 홍화꽃, 벛꽃, 구절초꽃, 메밀꽃의 20 종은 국내산을, 자스민꽃은 중국산, 캐모마일꽃과 히비스커스꽃은 독일산을 사용하였다(Table 1, Fig. 1). 꽃차에 대한 대조구로는 국내에서 가장 일반적으로 음용하는 다류인 현미녹차와 둥글레차를 이용하였으며, 사용된 23 종의 꽃차 중 금잔화와 유채꽃은 덖음 건조한 제품이었다. 사용 시료는 안동대학교 식품영양학과에서 보관하고 있다(voucher specimen 2020-FT1 25).</p> <h1>시판 꽃차의 미생물 오염도 평가</h1> <p>시판 건조꽃차 각 \( 0.5 \mathrm{~g} \) 에 \( 10 \mathrm{ml} \) 의 멸균수를 가한 후 실온에서 10 분간 교반한 후 상등액을 이용하여 대한민국 식품공전(KFDA. FOOD CODE)에 명시된 미생물 시험법에 따라 호기성 일반세균(미생물 시험법 4,5,1. 일반세균수-표준평판법), 대장균군(미생물 시험법 4.7-데옥시콜레이트유당한천배지법), 살모넬라 세균(미생물 시험법 4.11-XLD 한천배지 및 Salmonella-Shigella 한천배지법) 황색포 도상구균(미생물 시험법 4.12-Baird-Parker 한천배지 정량 시험법) 및 리스테리아 세균(미생물 시험 법 4.15-Oxford 한천배지법)을 검출하였다. 이때 검출한계는 10 colony \( / \mathrm{g} \) 이였으며, 검출 콜로니는 동일시료당 5 회 반복 도말하여 얻은 결과의 평균값으로 제시하였다.</p> <h2>시판 꽃차의 중금속 위해성 평가</h2> <p>시판 건조꽃차 각 \( 1 \mathrm{~g} \) 을 정확히 정량하여 건조기 \( (105 \) \( { }^{\circ} \mathrm{C} \) )에서 6 시간 건조하여 수분을 완전히 제거한 후 막자사발로 균질화하고, 이를 전기회화로 \( \left(600^{\circ} \mathrm{C}\right) \) 에서 14 시간 건식 회화한 후 진한 질산: perchloric acid \( (7: 1 \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 용액으로 습식 회화하였다. 회화 시료는 0.125M HCl 용액으로 희석하여 미량원소를 용출하였으며, 이를 ICP-AES (Inductively Coupled Plasma-Atomic Emission Spectrophotometer, Agi-lent-5110, Agilent Technologies Inc., Santa Clara, CA, USA) 를 이용하여 측정하였다. 이때 검출한계는 10 ppb 였으며, 각각의 분석 결과는 각각 3 회 반복한 실험의 평균과 편차로 표시하였다.</p> <h2>시판 꽃차의 잔류농약 평가</h2> <p>시판 건조꽃차의 잔류농약 모니터링을 위해 농약표준품은 AccuStandard Inc. (USA) 제품을 사용하였고, 추출용 시약 및 그 외 분석에 사용한 시약은 HPLC 급 용매와 특급 시약을 사용하였다. 농산물품질관리법 다종농약다성분 분석법[농산물 등의 유해물질 분석법[시행 2016. 12. 26.] [식품의약품안전처고시 제 2016-148호, 2016. 12. 26., 일부 개정]에 따라 실시하였으며, 상세하게는 각각의 건조꽃 시료 \( 0.5 \mathrm{~g} \) 에 \( 10 \mathrm{ml} \) 의 초순수 멸균수를 첨가한 후 1 시간 방치하고 이후 TPP (AccuStandard Inc. USA) \( 100 \mathrm{ppm} \) 을 포함하는 acetonitrile \( 10 \mathrm{ml} \) 와 추출염(KRIAT-한국분석기술연구소, 한국)을 첨가하고 1 분간 진탕한 후 \( 3,000 \mathrm{rpm} \) 에서 5 분간 원심분리하였다. 이후 상층액을 회수한 후 \( 0.2 \) \( \mu \mathrm{m} \) syringe filter로 여과한 후 정제염(KRIAT-한국분석기술연구소, 한국)을 첨가한 후 1 분간 다시 진탕하였다. 이후 기의 원심분리 및 여과 과정을 반복하여 시료를 준비하였다. 기기 분석은 CAPCELL CORE C18 (2.1 mm I.D. \( \times \) \( 150 \mu \mathrm{mm}, 2.7 \mu \mathrm{m} \) ) 컬럼이 장착된 LC-MS/MS (NANO-SPACE 5200 / AB SICEX QTrap 4500)와 Agilent HP-5MS UI \( 30 \mathrm{~m} \times 0.250 \mathrm{~mm} \times 0.25 \mu \mathrm{m} \) 컬럼이 장착된 GC-MS (Agilent 7010B)를 사용하였으며 각각의 분석조건은 Table 2 및 Table 3에 나타내었다. 상기 분석 조건에서 잔류농약의 검출한계는 \( 5 \mathrm{ppb} \) 로 확인되었으며, 분석결과는 3 회 반복 분석의 평균값으로 나타내었다.</p> <h2>통계분석</h2> <p>실험 결과는 SPSS \( 25.0 \) 버전을 사용하여 mean \( \pm \mathrm{SD} \) 로 나타내었으며, 각 군간의 차이는 ANOVA로 분석하였으며 통계적 유의수준은 \( p<0.05 \) 로 하였다.</p>