\( \beta \) 소단위체의 리간드로 알려져 있는 일가 양이온의 영향을 볼 때, \(Na ^ { + } \)이나 \( K ^ { + } \)을 처리하면 야생종과 D56E은 변화가 없고 D56G와 D56N는 특정 파장에서 매우 증가하거나 매우 감소한다. \( NH_ { 4 } ^ { + } \)는 없을 때와 비슷한 흡광도 양상을 보였다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>\( \beta \) 반응에 미치는 리간드의 영향</h2> <p>Salmonella typhimurium의 트립토판 합성효소를 대상으로 한 결정구조학과 생화학적 연구로 일가 양이온과 \( a \)소단위체의 56 번 잔기인 아스팔산과 \( \beta \) 소단위체의 167 번 리신간의 염다리(salt bridge)가 이소조절성에 중요한 기능을 한다고 밝혀졌다. 여기서는 대장균의 동종효소를 대상으로 그 효과를 살펴보았다. 단백질 자체는 야생종이나 잔기 치환체인 D56E/G/N 모두 유사한 홉광도 양상을 보여 준다. \( 412 \mathrm { ~nm } \)에서 최대 홉광도 파장을 나타내는 데 이것은 단백질의 87번 리신과 조효소 PLP와의 결합체인 internal aldimine의 존재를 나타낸다. 세린이 첨가되면 aminoacrylate가 주로 형성되어 \( 350 \mathrm { ~nm } \) 에서 최대 홉광도를 나타내게 된다. 야생종과 활성이 유사한 D56E의 경우 야생형의 단백질과 비슷하나, 활성도가 낮은 D56G의 경우는 여전히 \( 424 \mathrm { ~nm } \) 에서 높은 홉광도를 보여주고 있고, D56N의 경우도 어느 정도는 \( 412 \mathrm { ~nm } \) 에서의 흡광도가 남아있다. 이는 internal aldimine과aminoacrylate 사이에 형성되는 external aldimine일 가능성이 높다. 이 결과는 잔기 치환체가 야생형 단백 질과는 달리 다른 중간구조체가 보다 더 안정화되어 있음을 나타낸다.</p> <p>다음으로 \( \beta \) 소단위체의 리간드로 알려져 있는 일가 양이온의 영향을 살펴보았다. \(Na ^ { + } \)를 처리하면, 야생종과 D56E은 거의 변화가 없는 반해, D56G와 D56N는 \( 424 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도가 매우 크게 증가하며, \( 350 \mathrm { ~nm } \) 의 흡광도는 매우 감소한다. \( K ^ { + } \)가 첨가된 경우, \(Na ^ { + } \)가 첨가된 경우와 유사하다. \( NH_ { 4 } ^ { + } \)가 첨가된 경우, 일가 양이온이 없을 때와 흡사한 흡광도 양상을 보여준다.</p> <p>이번에는 \(a \)소단위체의 이소조절성 리간드인 glycerophos-phate를 처리하였다. 야생종과 D56E의 흡광도는 서로 비슷하였다. D56G와 D56N는 \( 424 \mathrm { ~nm } \) 에서는 리간드가 없을 때와 비슷한 형태였지만, \( 350 \mathrm { ~nm } \) 에서는 차이를 보여주고 있다.</p> <p>야생종의 경우 56번 잔기의 아스팔산은 음전하를 띄고 있으며 비슷한 활성도를 갖는 D56E의 경우는 글루탐산으로 치환된 것인데 이 역시 음전하를 가지고 있다. 이에 반해 글리신으로 치환된 D56G와 아스파라긴으로 치환된 D56N의 경우는 전하가 변화된 상태이다.</p>