Chi-56A 효소의 분자량은 약 \( 53 \mathrm { kDa } , \mathrm { pI } \)는 4.3이고 최대활성 온도가 \( 65 ^ {\circ } \mathrm { C } \)로 확인되는 등 열에 상당히 안정한 효소이다. \( \mathrm { pH } 6.0 \에서 최대 활성을 나타내었고 알칼리범위에서 안정하며 또한 Chito 올리고당에 대한 분해 산물을 HPLC로 확인한 결과 비환원성 말단에서 이당체인 diacetyl chitobiose를 생산하는 exo형 chitinase로 추정되었다.
<h1>요 약</h1> <p>토양으로부터 chitinase를 생성하는 균주를 분리하여 동정한 결과 Bacillus subtilis로 판명되었으며, 분리한 균주를 Bacillus subtilis JK-56 이라 명명하였다. B. subtilis JK-56의 chitinase 생산 최적 조건을 검토한 결과 \( 1 \% \) chitin, \( 0.5 \% \) polypeptone, \( 0.1 \% \mathrm { KCl } , 0.05 \% \mathrm { MnSO } _ { 4 } \cdot 4 \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } \) 이며 초발 \( \mathrm { pH } 7.0 \), 배양온도 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 가장 많은 효소를 생산하였다. 본 균주가 생산하는 chitinase를 정제하기 위해서 native- PAGE를 이용해 효소활성 band를 확인한 결과, 1개의 강한 활성 band와 2개의 약한 활성 band를 가지는 isozyme으로 확인되었다. 확인된 isozyme을 정제한 결과, isozyme 중 1개의 강한 활성 band를 정제하였고 정제된 효소를 Chi-56A라고 명명하였다. Chi-56A의 효소 특성에 관해서 실험한 결과 분자량은 약 \( 53 \mathrm { kDa } , \mathrm { pI } \)는 4.3으로 확인되었다. 본 효소는 \( 65 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 까지 상당히 안정하였으며 효소의 최대활성 온도도 \( 65 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 로 확인되는 등 열에 대해 상당히 안정한 효소로 확인되었다. Collidal chitin에 대한 정제효소 Chi-56A의 \( K_ {\mathrm { m } } \) 값은 \( 17.33 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \) 였다. 그리고 \( \mathrm { pH } 6.0 \)에서 최대의 활성을 나타내었고, 산성범위보다 알칼리범위에서 안정한 것으로 나타났다. 또한 \( \mathrm { Mn } ^ { 2 + } \) 존재하에서 높은 활성을 나타내었고 \( \mathrm { Co } ^ { 2 + } \) 와 \( \mathrm { Mg } ^ { 2 + } \) 존재하에서도 활성이 약간 증가한 반면에 \( \mathrm { Hg } ^ { 2 + } \) 존재 하에서는 상당한 저해를 받았다. Chito 올리고당에 대한 분해 산물을 HPLC로 확인해 본 결과 짝수개의 올리고당의 분해산물은 \( \left (( \mathrm { GlcNAc } )_ { 2 } \right ) \) 만을 생산하였고 홀수개의 올리고당에 대해서는 GlcNAc와 \( \left (( \mathrm { GlcNAc } )_ { 2 } \right ) \)를 생산하는 것으로 비환원성 말단으로부터 이당체인 diacetyl chitobiose \( \left (( \mathrm { GlcNAc } )_ { 2 } \right ) \) 를 생산하는 exo형 chitinase로 추정된다.</p>