프로바이오틱스균이 장내에서 효과를 돼지분변에서 분리한 B. thermophilum SF7가 가장 우수하게 부착됨으로써 위산과 담즙에 내성은 프로바이오틱스를 선별하는데 있어서 중요한 기준이 되는데 이들에 대한 내성은 미생물의 species에 따라 다르며 단백질 분해효소에 의해 파괴되지 않았기 때문에 두 균주가 생산하는 항균물질은 단백질성 항균물질이 아닌 것으로 판단되었다.
<p>프로바이오틱스균이 장내에서 효과를 발휘하려면 위장관을 통과하면서 생존할 수 있어야 한다. 따라서 위산과 담즙에 내성은 프로바이오틱스를 선별하는데 있어서 중요한 기준이 되는데, 이들에 대한 내성은 미생물의 species에 따라 다르며, 같은 species라도 strain에 따라 다르게 나타난다. 본 연구에서도 R5와 R6는 같은 species지만 위산과 담즙 내성의 차이를 보였다.</p> <h2>돼지 소장 상피세포 부착성</h2> <p>분리한 유산균 세포들의 돼지 소장 상피세포에 대한 부착성을 조사한 결과를 Fig. 2에 나타내었다. 여기에서 보면 돼지분변에서 분리한 B. thermophilum SF7가 가장 우수하게부착됨으로써 높은 돼지 장내 정착가능성을 나타내었다. 따라서 돼지의 분변에서 분리된 유산균이 사람, 닭, 젖소로부터 분리한 유산균들보다 돼지 소장 상피세포에 대하여 예상했던 바와 같이 우수한 정착 가능성을 가지는 것으로 나타났다. 한편 B. boum R5와 B. boum R9을 비교해 볼 때 부착성이 각각 7.0%와 12.6%로 크게 차이가 났는데, 이는 같은 종의 균주라도 부착성에 있어 차이가 있음을 보여주는 것이다.</p> <p>일반적으로 장부착성실험에는 오랫동안 Caco-2 cell line이 사용되어왔는데, 이는 사람의 대장 상피 선암세포로서 양돈용 유산균의 장부착실험에는 부적절하다. 따라서 본실험에서와 같이 양돈용 유산균의 장부착실험은 돼지의 장표피세포를 돼지의 창자에서 직접 분리한 창자상피세포로사용하는 것이 필요하다.</p> <p>프로바이오틱스 세포가 동물 장표피세포에 부착함으로써동물숙주와 프로바이오틱스 미생물과 밀접한 접촉이 이루어지기 때문에, 또한 병원균을 경쟁적으로 배제하기 때문에, 동물의 장상피세포 부착능력은 일반적으로 프로바이틱스 선정에 있어서 중요한 기준으로 여겨져 왔다.</p> <h2>유산균 항균물질의 특성조사</h2> <p>SF7과 R9균주가 생산하는 물질이 그람 양성균을 주로 저해하는 단백질성 항균물질인 bacteriocin인지의 가능성을 알아보기 균 배양액을 pH를 조절하지 않은 natural pH의 배양액과 pH를 6.5로 조절한 배양액의 S. aureus 와 L.monocytogenesis에 대한 항균력을 조사한 결과, 두 균주 모두 natural pH에서는 S. aureus 에 대한 저해환 지름이22.0 mm과 L. monocytogenesis에 대한 저해환 지름이 12.5-13.0 mm로 항균력을 나타냈으나, pH 6.5로 조정한 후에는저해환이 없어 항균력이 나타나지 않았다. 일반적으로 저해물질이 bacteriocin이라면 산에 의한 항균효과가 배제된 pH6.5에서도 항균력을 나타내야 하는데 pH 6.5에서 항균력이 나타내지 않았기 때문에 SF7과 R9이 생산하는 물질이그람양성균을 저해하는 단백질성 항균물질인 bacteriocin일가능성이 적어 보이고, 그 항균력은 배양액내의 생산된 lactic,acetic, phenyllactic acids 등의 유기산일 가능성이 높다.</p> <p>SF과 R9 균주들이 생산하는 항균물질의 단백질성 여부를알기 위하여 그 배양액을 100oC에서 1시간 동안 boiling한후와 단백질 분해효소인 pepsin과 trypsin을 처리한 후에 항균력을 비교하였지만 모두 항균력의 변화가 없었다(data notshown). 즉 배양액내의 항균물질은 열이나 단백질 분해효소에 의해 파괴되지 않았기 때문에 두 균주가 생산하는 항균물질은 단백질성 항균물질이 아닌 것으로 판단되었다.</p>