본 논문에서는 Gomisin A의 항종양 활성이 신혈관형성 억제활성에 의한 것인지 확인하는 실험을 진행했다. 그 결과 Gomisin A가 신혈 관형성을 억제해 종양조직의 성장을 억제하고 인체 내 정상조직에 대한 독성을 유발하지 않는 것을 확인했으며, Gomisin A의 종양세포와 세포외기질간의 부착 저해 활성은 향후 암전이 억제제로서 유용하게 사용될 수 있음을 시사했다.
<h2>종양 조직에 의해 유도되는 신혈관형성 저해 효과</h2> <p>암조직과 같이 세포증식이 왕성한 경우, 공간적으로 세포의 수가 증가되어 혈관에 의해 산소가 확산될 수 있는 거리는 \( 150 \mu \mathrm{m} \)에 불과한것으로 알려져 있으며, 암 조직 내부의 세포에 산소와 영양분이 전달되기 위해서는 반드시 신혈관형성이 유도되어야 한다. 특히 암세포는 새롭게 형성되는 혈관을 통해 급속한 성장과 다른 조직으로의 전이를 하게 된다. Gomisin A는 in vivo에서 강력한 항종양 활성을 나타내었으나 정상세포 및 종양세포주에 대한 직접적인 독성효과는나타내지 않았다. 따라서 Gomisin A의 항종양 활성이 신혈관형성 억제활성에 의한 것인지 규명하고자 하였다. Gomisin A의 신혈관형성 억제 효과는 B16BL6 melanoma cellline을 C57/BL6 마우스의 피하에 주입하여 종양조직을 형성하고, Gomisin A를 미정맥으로 투여하여 종양조직 주변으로형성되는 신생혈관의 수를 비교하여 확인하였다. B16BL6melanoma cell line을 주입한 양성 대조군에서 종양세포를 주입하지 않은 대조군(vehicle)에 비해 종양조직 주변으로 형성되는 신생혈관의 수를 비교하여 확인하였다. B16BL6 melanoma cell line을 주입한 양성 대조군에서 종양세포를 주입하지 않은 대조군(vehicle)에 비해 종양조직 주변으로. \( 300 \pm 12.8 \% \) 새로운 혈관의 형성이 관찰되었다. Gomisin A \( (10,100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}) \) 를 처리한 실험군에서는 양성 대조군에 비해 종양조직 주변의 신생혈관의 수가 각각 \( 151 \pm 16.9 \% \), \( 98.5 \pm 29.5 \% \)의 유의한 감소율을 나타내었다. 이러한 결과는 Gomisin A가 종양세포에 의해 유도되는 신혈 관형성을 억제함으로서 항종양 활성을 나타내고 있다. 또한, 신혈관형성의 억제를 통한 종양조직의 성장억제는 인체 내 정상조직에 대한 독성을 유발하지 않음으로서 종양조직에 대한 특이적 억제활성이 있음을 시사하여 주고 있다.</p> <h2>종양 세포의 폐 전이 및 세포외기질과의 부착 억제 활성 효과</h2> <p>암세포가 정상세포와 구분되는 또 다른 특징은 발생한 원래 위치에서 벗어나 다른 장기에서 증식하는 현상이다. 암세포의 전이는 암 치료 실패의 가장 큰 원인을 제공하며, 환자를 사망에 이르게 하는데 결정적인 역할을 한다. 따라서 Gomisin A의 종양 전이억제활성은 C57/BL6 마우스에 B16BL6 melanomacell line을 미정맥 주사(intravenous injection)를 통해 주입하고 Gomisin A를 농도별로 처리한 후 폐를 적출하여 cancercolony의 수를 측정하여 확인하였다. B16BL6 melano-ma cell line을 단독 주입한 양성 대조군은 암 세포주를 주입하지 않은 대조군(vehicle)에 비해 유의한 cancer colony가 확인되었다. B16BL6 melanoma cell line의 전이를 유도하고 Gomisin A를 \( 10 \mu \mathrm{g} / \mathrm{head} \)로 처리한 그룹에서 \( 13.5 \pm 8.56 \% \), \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{head} \)에서 \( 58.3 \pm 9.12 \% \)의 통계적으로. 유의한 종양세포 전이억제활성을 나타내었다.</p> <p>종양 세포의 전이과정에서 원발 부위의 조직에서 세포 접착능이 감소해 조직으로부터 떨어져 나온 후, 전이 부위의 기저막 세포외기질(extracellular matrix)에 부착하여 이동하는 단계는 필수적인 단계이다. Gomisin A에 의한 종양전이 억제활성의 기전을 확인하기 위해, 종양세포주와 기저막 세포외기질의 부착에 미치는 영향을 확인하였다. 종양세포와 세포외기질과의 부착에 미치는 영향은 BSA (control protein), Gelatin,Collagen, Matrigel이 coating 된 plate에 B16BL6 melanomacell line이 부착하는 수를 비교하여 확인하였다. B16BL6 mela-noma cell line의 부착은 BSA가 coating된 control과 Gelatin,Collagen, Matrigel의 세포외기질이 coating된 시험군에서 Gomisin A의 농도 \( 0.01 \sim 10 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 범위 까지는 유의한 부착 억제활성이 관찰되지 않았다. Gomisin A \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 에서 B16BL6 melanoma cell line의 부착능은 BSA \( (55.35 \pm 2.27 \%) \), Gelatin \( (28.91 \pm 2.84 \%) \), Collagen\( (42.96 \pm 2.67 \%) \), Matrigel \( (28.91 \pm 2.84 \%) \) 까지 각각 억제됨을 확인할 수 있었다. 지금까지의 결과는 Gomisin A가 나타내는 종양세포의 전이 억제활성은 세포외기질 분자에 대한 종양세포의 결합과정을 억제함으로서 나타날 수 있는 현상임을 시사하여 주고 있다. 또한 세포외기질 성분 중 collagen분자에 대한 부착 억제활성이 매우 높게 관찰되었고, 대부분의 세포외기질 성분이 포함된 Matrigel에 대한 부착 역시 유의하게 억제되었다. 따라서 Gomisin A의 종양세포와 세포외기질간의 부착 저해 활성은 향후 암전이 억제제로서 유용하게 사용될 수 있음을 나타내는 주요한 자료로 판단된다.</p>