활성산소의 공격 목표는 과산화지질(lipid peroxide : LPO)의 생성, 산화 단백질(oxidized protein : OP)의 생성 및 핵산의 공격에 돌연변이의 생성 등을 들 수 있는데 이러한 현상의 산화적 스트레스 평가는 LPO는 말론디알데히드의 함량, OP는 카르보닐그룹의 함량 및 헥산의 산화에 의한 변이 등은 8-OHdG의 생성량을 측정하여 평가하였다. 본 실험을 통해 얻은 결과로 실크 피브로인의 투여가 뽕잎 추출물 및 누에 분말 투여보다 과산화지질의 생성 억제 효과가 높았으며, 단백질 산화 억제 효과 또한 더욱 뛰어난 것으로 나타났다.
<h2>산화적 스트레스의 평가</h2> <p>활성산소의 공격목표는 조직세포중의 지질 성분의 공격에 의한 과산화지질(lipid peroxide : LPO)의 생성, 단백질 성분의 공격에 의한 산화단백질(oxidized protein : OP)의 생성 및 핵산의 공격에 돌연변이의 생성 등을 들 수 있다. 따라서 이들 산화적 스트레스의 평가는 LPO는 말론디알데히드(malondialdehyde : MDA)의 함량이나 OP는 카르보닐그룹(\(\mathrm{>C=O }\) group)의 함량 및 핵산의 산화에 의한 변이 등은 8-OHdG의 생성량을 측정하여 평가한다.</p> <h3>과산화지질의 생성 억제효과</h3> <p>세포막의 지질이 활성산소의 공격을 받아 산화될 때 생성되는 LPO는 강력한 세포독성 때문에 성인병과 노화의 지표물질로 알려져 있다. 실크 피브로인의 투여에 의한 간장 조직중의 LPO의 생성에 미치는 영향을 비교하여 보면 Table 2와 같다. 간장조직의 mitochondria 획분에서는 SFP-2.5 및 SFP-5.0 투여그룹은 \( 13.91 \pm 1.25 \) 및 \( 12.44 \pm 1.18 ~\mathrm{nmol} / \mathrm{mg} \) protein으로서 대조그룹 \( (15.17 \pm 1.24 ~\mathrm{nmol} / \)\( \mathrm{mg} \) protein : \( 100 \% \) ) 대비 각각 \( 91.7 \% \) 및 \( 82.0 \% \) 로서 용량 의존적으로 \( 8.3 \% \) 및 \( 18.0 \% \) 의 유의적인 LPO의 생성이 억제 효과가 인정되었다.</p> <p>간장조직의 microsome 획분에서도 SFP-2.5 및 SFP-5.0 투여그룹에서 \( 11.50 \pm 0.95 \) 및 \( 10.83 \pm 0.66 ~\mathrm{nmol} / \mathrm{mg} \) protein으로서 대조그룹(\(13.28 \pm 1.15\) \( \mathrm{nmol} / \mathrm{mg} \) protein : \( 100 \%) \) 대비 각각 \( 86.6 \% \) 및 \( 81.6 \% \) 로서 용량의존적으로 \( 13.4 \% \) 및 \( 18.4 \% \)의 유의적인 LPO의 생성이 억제효과가 인정되었다. 실크 피브로인의 과산화지질의 생성 억제효과는 뽕잎 추출물 및 누에분말의 투여효과보다 더욱 효과적이란 사실은 매우 의미가 있을 것으로 기대된다.</p> <h3>산화단백질의 생성 억제효과</h3> <p>한편 간장조직의 단백질 성분이 활성산소의 공격을 받아 생성되는 카르보닐 그룹의 생성에 미치는 실크 피브로인(SFP)의 산화단백질(oxidized protein : OP) 생성 억제효과를 평가하기 위하여 카르보닐 그룹의 생성을 분석·비교하여 본 결과는 Table 3 과 같다.</p> <p>Mitochondria 획분에서 SFP-2.5 및 SFP-5.0그룹의 OP의 생성은 \( 8.97 \pm 0.40 \) 및 \( 8.38 \pm 1.04 ~ \mathrm{ng} / \mathrm{mg} \) protein으로서 대조그륩의 OP의 생성량( \( 9.48 \pm 1.12 ~ \mathrm{ng} / \mathrm{mg} \) protein : \( 100 \%) \) 대비 \( 94.6 \% \) 및 \( 88.4 \% \) 로서, 각각 \( 5.4 \% \) 및 \( 11.6 \% \) 의 OP의 생성 억제효과가 나타났지만, SFP-5.0 투여그룹에서만 유의성이 인정되었다. 그렇지만, microsome 획분은 mitochondria 획분과는 달리 SFP-2.5 및 SFP-5.0 그룹의 OP의 생성량은 \( 6.37 \pm 0.48 \) 및 \( 5.94 \pm 0.45 ~ \mathrm{ng} / \mathrm{mg} \) protein으로서 대조그룹의 OP의 생성량 \( (7.86 \pm 0.55 ~ \mathrm{ng} / \mathrm{mg} \) protein : \( 100 \%) \) 대비 \( 81.0 \% \) 및 \( 75.6 \% \) 로서, 각각 \( 19.0 \% \) 및 \( 24.4 \% \) 나 매우 효과적인 OP의 생성 억제효과가 인정되었다. 따라서 이러한 사실은 뽕잎 추출물이나 누에분말 투여그룹보다 실크 피브로인의 투여가 더욱 효과적으로 단백질산화(OP)를 억제할 수 있을 것으로 기대된다.</p> <h2>제거효소의 활성 평가</h2> <p>간장획분 중에서 활성산소의 제거효소로서 가장 중요한 수퍼옥시드 디스무타아제(SOD) 및 글루타치온 퍼옥시다아제(GSHPx)의 활성에 미치는 실크 피브로인(SFP) 투여의 영향을 분석하여 보면 Table 4와 같다. 간장의 mitochondria획분 중에서 SFP-2.5 밎 SFP-5.0 투여그룹의 \(\mathrm{Mn}\)-SOD의 활성은 \( 23.60 \pm 1.29 \) 및 \( 25.86 \pm 2.33 ~\mathrm{unit} / \mathrm{mg} \) protein으로서 대조그룹 \( (20.07 \pm 3.66 ~ \mathrm{unit} / \mathrm{mg} \) protein : \( 100 \%) \) 대비 \( 117.6 \% \) 및 \( 128.8 \% \) 로서, 각각 \( 17.6 \% \) 및 \( 28.8 \% \) 의 매우 효과적인 Mn-SOD활성의 증가효과가 인정되었다. 간장 cytosol 획분 중에서 SFP-2.5 및 SFP-5.0 투여그룹의 \(\mathrm{Cu/Zn}\)-SOD의 활성은 \( 53.76 \pm 4.81 \) 및 \( 58.04 \pm 3.22 \) \( \mathrm{unit} / \mathrm{mg} \) protein으로서 대조그룹(\(50.74 \pm 4.51 ~\mathrm{unit}/\mathrm{mg} \) protein : \( 100 \% \) ) 대비 \( 106.0 \% \) 및 \( 114.4 \% \) 로서, 각각 \( 6.0 \% \) 및 \( 14.4 \% \) 의 \(\mathrm{Cu/Zn}\)-SOD의 활성 증가효과가 나타났지만, SFP-5.0 투여그룹에서만 유의성이 인정되었다. 그렇지만, 간장의 cytosol 획분에서 SFP-2.5 및 SFP-5.0 투여에 의한 GSHPx의 활성의 증가효과는 전혀 인정할 수 없었다.</p>