본 실험에서는 미국 영양학회의 성분표를 참고로 균형사료를 직접 조제하여 GMO 현미 섭취군과 일품현미 섭취군, 생쥐용 사료를 각각 구분해 실험하였다. 1개월동안 3일단위로 1회씩 측정하여 생쥐의 변화를 알아보고 성장 촉진효과 및 면역기능 증식시험을 실시하였다. 성장촉진효과는 GMO 현미를 섭취한 생쥐의 체중 변화를 time schedule 별로 측정하고, 면역장기의 무게를 측량하여 장기중량과 체중의 비를 산출하여 시험하였다.
<h2>사료 제조 및 실험 동물군</h2> <p>본 실험에 사용된 식이는 미국 영양학회의 성분표 (AIN-76)를 참고로 직접 조제한 균형사료를 공급하고, GMO 현미( \( \mathrm { T } _ { 3 } \) 종자의 현미) 섭취군과 대조군으로 일품벼의 현미(일품현미) 섭취군과 일반 생쥐용 사료를 각각 구분하며 실시하였다. GMO 현미(평균 칼슘 함량 \( 699.90 \mathrm { ppm } / 100 \mathrm { ~g } \) )과 일품현미(평균 칼슘 함량 \( 96.41 \mathrm { ppm } / 100 \mathrm { ~g } \) )을 사료에 첨가하여 섭취시켰다. 각각의 사료는 자유롭게 섭취하도록 하였다. 집단 구분과 사료 구성은 Table 1과 2와 같다. 생쥐의 변화는 3일에 1회 측정하여 1개월 동안 그 변화를 알아보고 기록하였고, 또한 이때 얻어지는 생쥐의 sample들을 활용하여 성장 촉진효과 시험과 면역기능 증식시험을 실시하였다.</p> <h2>성장 촉진 효과 시험</h2> <p>체중 측정과 백혈구 수의 변화 측정은 GMO 현미를 섭취한 생쥐의 체중 변화를 time schedule 별로 측정하였고, 면역장기인 비장과 흉선의 무게를 정확히 측량하여 장기중량과 체중의 비를 산출하였다. 백혈구 수의 측정은 생쥐의 정맥으로부터 \( 10 \mu \)의 혈액을 취하여 \( 2 \mathrm { ml } \) glacial acetic acid, \( 1 \mathrm { ml } \) \( 1 \% \) crystal violet 용액, \( 100 \mathrm { ml } \) 증류수를 포함한 용액을 만들어 혈액을 20배 희석하여 hemocytometer를 이용하여 현미경 하에서 측정하였다. 생쥐의 혈중 성장호르몬(plasma IGF-1)은 ELISA 방식을 이용한 kit (Amersham Pharmacia Biotech, UK)를 사용하여 측정하였다. 생쥐의 혈중 전체 단백질 양, triglyceride, calcium은 자동혈액 생화학분석기(Spectrum, Abbott)를 사용하여 분석하였다. B 세포의 분화능력에 대한 GMO 현미의 영향을 측정하기 위해 SRBC(sheep red blood cell)에 대한 항체생성능력을 Bullock과 Moller에 의해 변형된 Jerne plaque assay를 이용하여 측정하였다. 30일 동안 GMO 현미를 생쥐에 투여하고 투여 종료 4일 전에 SRBC \( \left (5 \times 10 ^ { 8 } \right . \) cells \( \left ./ \mathrm { ml } \right ) \)를 복강 내 투여하여 면역시키고 15일째에 비장을 적출하여 비장세포현탁액을 만든 다. DEAE-dextran을 함유한 \( 0.5 \% \) agar 용액 \( 400 \mu 1 \)를 시험관 에 넣고 \( 47 ^ {\circ } \mathrm { C } \)의 수조에 유지시킨 후, 3회 세척한 \( 25 \mu \mathrm { SRBC } \), \( 50 \mu \mathrm { l } \) 비장세포현탁액 및 3배 희석한 \( 25 \mu \mathrm { l } \) guina pig complement를 넣은 후 즉시 혼합한다. 혼합액 \( 200 \mu 1 \)를 petri-dish로 옮긴 후 cover glass \( (24 \times 40 \mathrm { ~mm } ) \)로 덮고 3시간 동안 배양한 후 형성된 용혈반형성 세포수를 측정하고 비장현 탁액의 희석배수를 계산하여 PFCs \( / 10 ^ { 6 } \) cells로 나타내었다.</p>