동물실험에서 분말로 만든 곰피 추출물을 투여량에 따라 증류수에 희석한다. 실험군은 비 난소절제군, 난소절제 대조군 , 난소 절제 후 곰피 추출물 \( 50 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \) 투여군 (OVX-ES50) 및 \( 200 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \) 투여군으로 나눠진다. 난괴법으로 실험군을 나누어 난소 절제 수술을 한 후 3일 후부터 매일 곰피 추출 시료를 경구 투여했다.
<h2>재료 및 방법</h2> <h3>추출물의 제조</h3> <p>본 실험에 사용한 곰피(Ecklonia stolonifera, ES)는 2009년에 전라도에서 채취된 것을 구입하여 물로 8 9회 씻어 내서 염분과 불순물을 제거하고 동결 건조 후 분쇄하여 사용하였다. \( 100 \mathrm { ~g } \) 의 건조 시료에 \( 80 \% \) ethanol 21 를 가해 \( 80 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 3회 추출하여 감압 농축기로 농축한 후 분말로 조제하여, 실제로동물실험에서는 투여량 \( 1 \mathrm { ml } \) 중 체중 \( \mathrm { kg } \) 당 \( 50 \mathrm { mg } \) 및 200 \( \mathrm { mg } \) 되도록 증류수에 용해하여 사용하였다.</p> <h2>실험동물</h2> <p>실험동물은 \( 200 \mathrm { ~g } \) 되는 9주령의 Sprague-Dawley계 암컷 흰쥐를 (주)오리엔트로부터 구입하여 1주일간 적응시킨 뒤 실험에 사용하였다. 적응 후 난괴법에 의해 4 군으로 나누어 \( 24 \pm 2 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 습도 \( 55 \sim 60 \%, 12 \) 시간 조명주기의 조건 하에서 6 주간 사육하였다. 실험군은 비 난소절제군(SHAM), 난소절제 대조군 \( ( \mathrm { OVX } - \mathrm { CON } ) \), 난소 절제 후 곰피 추출물 \( 50 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \) 투여군 (OVX-ES50) 및 \( 200 \mathrm { mg } / \mathrm { kg } \) 투여군(OVX-ES200)으로 나누어 실험하였다(Table 1). 실험시료는 증류수로 용해하여 경구 투여기구를 이용하여 \( 1 \mathrm { ml } \) 씩 경구 투여 하였으며, 대조군은 동일 용량의 증류수를 투여하였다. 체중은 실험 사육 기간 중에 격일로 일정 시간에 측정하고, 식이 섭취량은 매일 식이 잔량을 측정하여 산출하였다. 수술 후 사육환경은 수술 전과 동일하게 조성하였다.</p> <h2>난소절제시술</h2> <p>1 주일 동안 주위환경에 적응시켜 난괴법에 의해 군을 나누어 난소 절제 수술을 실시하였다. 수술은 ether 마취 후 심마취기에 이르면 늑골하부를 절개하여 난소를 제거하고 절개 부는 봉합하였다. 시술 후 3일부터 매일 곰피 시료를 경구 투여 하였다.</p> <h2>혈액 및 장기 채취</h2> <p>혈액은 실험동물을 해부 전 24시간 절식 시킨 후 ether 마취하에서 개복하여 대동맥에서 채취하였고, 심장, 신장, 부신,자궁, 폐 및 간 조직은 적출하여 주위의 지방과 물기를 제거하여 무게를 측정한 후 실험 시까지 \( -70 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 보관하였다.</p>