hrm { NF } - \kappa B \) 조절 HCW0811이 LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에 미치는 영향으로, 12.5, 25, 50\(\mu\mathrm{g}/\mathrm{ml}\) 농도로 처리한 HCW0811은 TNF-\(\alpha\), IL-6, IL-1\(\beta\)의 생성을 각각 9.4%, 37.9%, 25.8%, 64.3%, 26.2%, 41.1% 억제하였다.
<h2>전염증성 사이토카인 생성 억제</h2> <p>HCW0811이 LPS으로 유도된 RAW 264.7 세포에서 전염증성 사이토카인의 생성에 미치는 영향을 조사하기 한 결과 \( 12.5,25,50 \mu \mathrm { g } / \) \( \mathrm { mL } \) 농도로 처리 된 HCW0811는 LPS 처리군과 비교하였을 때 \( \mathrm { TNF } - \alpha \)의 생성을 각각 \( 9.4, 25.8, 64.1 \% \) 억제하였고 IL-6의 생성은 \( 25,50 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 농도에서 각각 \( 37.9,64.3 \% \) 억제하였으며 \( \mathrm { IL } -1 \beta \)의 생성을 \( 25,50 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 농도에서 \( 26.2,41.1 \% \) 억제하였다.</p> <h2>MAPKs 및 \( \mathrm { NF } - \kappa B \) 기전 억제</h2> <p>LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에 HCW0811을 처리하여 p38, JNK, ERK1/2의 인산화를 확인한 결과 p38, JNK, ERK1/2의 인산화가 농도 의존적으로 감소하는 양상을 확인하였ek. 또한 \( \mathrm { NF } - \mathrm {\kappa B } \) 의 활성화 지표인 \( \mathrm { I \kappa B } - \alpha \)의 degradation 확인 결과, LPS 단독 처리군에서 가장 degradation 되었으며 HCW0811을 처리한 RAW 264.7세포에서 농도 의존적으로 \( \mathrm { I \kappa B } - \alpha \) 의 degradation이 감소하는 것을 확인하였다.</p> <h1>고 찰</h1> <p>본 연구는 LPS로 유도된 대식세포의 엄증반응에서 HCW0811이 미치는 영항을 조사하여 염증성 질환의 치료 및 항염증 기능성 화장품 개발을 위한 가능성을 검증하고자 시행되었다. 이에 RAW 264.7 세포에 LPS를 처리하여 염증을 유도한 후 HCW0811을 \( 12.5,25,50 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 농도로 처리하여 \( \mathrm { NO } , \mathrm { PGE } _ { 2 } \)의 생성 억제를 조사한 결과 \( \mathrm { NO } , \mathrm { PGE } _ { 2 } \)의 생성이 효과적으로 억제 되었음을 확인하였다. 이후 western blot assay를 통해 iNOS와 COX-2의 발현을 조사한 결과 HCW0811는 \( \mathrm { NO } \), \( \mathrm { PGE } _ { 2 } \)와 마찬가지로 iNOS와 COX-2의 발현을 유의하게 억제하는 것으로 확인되었다. 이러한 결과는 HCW0811의 항염증 활성이 iNOS와 COX-2 발현 억제에 의한 \( \mathrm { NO } , \mathrm { PGE } _ { 2 } \)의 생성 감소로부터 유도된 것임을 입증하며 HCW0811은 COX-2 발현 억제를 통한 \( \mathrm { PGE } _ { 2 } \)의 감소에 더 효과적임을 확인하였다. 또한 염증 발생 시 대식세포에서는 세포를 보호하기 위하여 \( \mathrm { NO } \) 와 \( \mathrm { PGE } _ { 2 } \) 와 같은 염증 매개물 이외에 전 염증성 사이토카인(TNF- \( \alpha \) 및 \( \mathrm { IL } -1 \beta \), IL-6)을 분비하는데 과도한 염증성 사이토카인의 분비는 염증을 심화하고 패혈증과 같은 염증성 질환을 유발한다. HCW0811는 \( \mathrm { TNF } - \alpha \) 및 \( \mathrm { IL } -1 \beta \), IL-6)의 생성을 억제하였으며 IL-6에서 가장 유효한 활성을 갖는 것을 확인하였다. 이러한 염증 매개 물질의 발현을 조절하는 주요 경로에는 MAP kinase와 \( \mathrm { NF } - \kappa B \) 신호 전달 경로가 있으며 HCW0811이 두 신호 전달 경로에 미치는 영향을 알아보기 위해 p38, JNK, ERK 1/2 인산화 및 \( \mathrm { I \kappa B } - \alpha \)의 발현을 확인하였다. 그 결과 LPS 단독 처리군 대비 p38, JNK, ERK 1/2의 인산화가 농도 의존적으로 감소하는 것을 확인 하였으며 \( \mathrm { NF } - \mathrm {\kappa B } \)의 인산화 및 \( \mathrm { I \kappa B } - \alpha \) 의 degradation 또한 감소하는 것을 확인하였다. 이상의 결과들을 종합하여 볼 때 HCW0811는 p38, ERK1/2, JNK의 인산화 및 \( \mathrm { NF } - \mathrm {\kappa B } \)의 활성 조절함으로써 \( \mathrm { NO } \) 와 전염증성 cytokine의 생산을 억제하여 항염증 효과를 나타내는 것으로 판단된다. 이러한 결과는 HCW0811가 다양한 신호전달경로를 억제하여 염증 인자를 표적으로 하는 피부 면역 질환의 개선 및 치료와 여러 염증성 질환을 예방하기위한 항염증 기능성 화장품 및 식품소재로의 개발가능성을 시사하며 추후 HCW0811가 더욱 효과적인 항염증 소재로 적용되기 위해서는 유효 화합물의 분리와 동정에 대한 연구가 진행되어야 할 것으로 사료된다.</p>