1997년 1월부터 1998년 5월 중순까지 부산시 강서구의 플라스틱 하우스에서 재배된 돌깨에서 발생한 균핵병을 연구하였다. 분리된 16개의 균주에 대해 병원성을 검증하기 위해 PDA 평판배지에 배양하였고, 이후 들깨 잎과 줄기에 접종하였다. 이러한 과정은 상대습도 \(90\%\) 이상, \(20 \pm 2 ^ {\circ} \mathrm {C}\)에서 진행하였으며, 접종 1일 후 균사절편을 제거하고 2일째부터 발병율을 조사하였다. 이러한 방법으로 병든 들깨로부터 병원균을 분리하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>병징 밎 발병율 조사</h2> <p>1997년 1월부터 1998년 5월 중순까지 부산시 강서구 강동동 지역의 돌깨 재배 플라스틱하우스 내에서 들깨에 나타나는 균핵병의 병징을 수시로 관찰하였다. 발병율은 들깨잎 수확말기인 1998년 5월에 강동동 지역내의 2개 하우스 재배지에서 1하우스당 6 개 구역, 구당 \( 120 \times 100 \mathrm { ~cm } \) 를 임의 선정하고 구역내의 총 들깨 조사 주수(약 230 주 \( \times 12 \) 구역)에 대한 이병주율을 조사하였다.</p> <h2>병원균의 분리</h2> <p>들깨 재배 하우스내에서 잎무름 증상 및 줄기썩음 증상을 띄고 있는 병든 들깨를 채집하고 각 발병부위로부터 병원균을 분리하였다. 병든 조직 절편을 \( 5.25 \% \) sodium hypo-chloride에 약 1 분간 표면살균 후 멸균수로 3 회 세척하여 PDA (Potato Dextrose Agar, Difco, USA) 평판배지 위에 놓아 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \), 암조건하에서 2 일간 배양하였다. 신장한 균사절편을 PDA 평퐌배지에 이식하고 3회 반복하여 순수분리하였다. 잎무름 증상 및 줄기썩음 증상을 띄는 병반으로부터 병원균 \( \mathrm { S } 1 \) 등 16 균주를 분리하여 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 저온 배양기에 보존하면서 실험에 사용하였다.</p> <h2>병원성 검정 및 동정</h2> <p>분리된 16 균주의 들깨에 대한 병원성을 검정하기 위해, PDA 평판배지에 1 주일간 배양 후 직경 \( 8 \mathrm { ~mm } \) 의 균사절편을 포트내 재식한 들깨 잎과 줄기에 접종하여 상대습도 \( 90 \% \) 이상, \( 20 \pm 2 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 생육상에 보관하면서 접종 1 일 후에 균사절편을 때어내고 2 일째부터 발병율을 조사하였다. 이때, 5 포트씩 5반복으로 3 회 실시하였다. 병원성 검정 견과, 병원성이 가장 강한 균주의 형태적, 배양적 특성 등을 조사하여 이를 동정하고 이하의 모든 실헙에 공시 균주로 이용하였다.</p> <h2>길항균 선발</h2> <p>부산시 강동동 지역의 들깨 플라스틱 하우스내 들깨잎과 근권토양에서 분리하여 이미 들깨 잿빛곰팡이병균 및 잎마름병균에 대해 균사생장 억제효과가 우수한 것으로 보고[20,24]된 N1 균주 등 6균주를 공시하여 PDA 평판배지 상에</p> <p>서 균핵병원균과 대치배양 후 병원균의 균사생육 저지대를 조사하여 가장 효과적인 공시 두 균주를 일차로 선발하였다.</p>