본 연구에서는 alcalase, protamex, neutrase, flavourzyme, pepsin을 사용하여 굴을 처리한 후 각 효소의 가수분해율을 조사하였다. 이 과정에서 endoprotease가 주로 함유된 alcalase와 protamex가 기질특이성이 높은 pepsin과 같은 소화효소에 비해 우수한 경향을 보였다. 이 가수분해물의 ACE 저해 활성을 측정한 결과는 효소 가수분해물(PEH)를 활용한 건강기능성 식품 개발에 도움이 될 것으로 예상된다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>효소 반응 시간별 가수분해율</h2> <p>효소의 종류 및 가수분해 시간에 따른 굴 효소 가수분해물의 변화는 Fig. 2에 나타내었다. 시간별 가수분해율은 효소처리하지 않은 대조구의 경우 \( 8.8 \% \) 이었다. 5종의 상업적 효소를 이용하여 가수분해한 결과, protamex를 처리한 가수분해물은 1~2시간까지는 가수분해 시간이 경과함에 따라 급격히 증가 하여 \( 12 \% ~ 20.7 \% \) 의 범위였고, 그 이상의 가수분해 시간에서는 6 시간까지 \( 25.42 \%, 12 \) 시간까지 \( 30.66 \% \) 로 완만한 증가를 하였으며, 그 외의 효소 가수분해물의 경우 약간의 증가 또는 감소하는 경향을 나타내었다. Flavourzyme, Neutrase, Pepsin의 경우 1 12시간까지 가수분해율은 각각 \( 24 \% \sim 27.38 \%, 19.4 \% \sim \) \( 24.1 \%, 14.04 \% \) \( 19.58 \% \)로 증가하였다. Alcalase의 경우 1 12시 간 까지 가수분해율은 \( 20.7 \sim 38.62 \% \) 로 약 \( 18 \% \) 증가하였다. 본 연구의 각 효소의 가수분해율은 Chung 등에서 보고한 바와 같이 endoprotease가 주로 함유된 alcalase 및 protamex가 endo- 및 exoprotease의 혼합형태인 neutrase와 flavourzyme보 다 우수하였고, neutrase와 flavourzyme은 기질특이성이 높은 pepsin과 같은 소화효소에 비해 우수한 경향이 나타났다.</p> <h1>초록 : 굴 효소 가수분해물의 angiotensin converting enzyme 저해작용</h1> <p>굴 효소 가수분해물은 굴을 alcalase, protamex, neutrase, flavourzyme, pepsin으로 각각 처리하였고, 이들의 \( \mathrm { ACE } \) 저헤활성을 측정하였다. \( \mathrm { ACE } \) 저해활성은 가수분해 시간에 따라 증가 또는 감소하였으며, 그 중 10 시간 이상 가수분해 처리한 \( \mathrm { PEH } \) 에서 가장 높은 \( \mathrm { ACE } \) 저해활성을 나타내었다. \( \mathrm { PEH } \) 가수분해물을 한외여과(30, \( 10 \mathrm { kDa } ) \) \( 69.18 \pm 0.75 \), \( 83.71 \pm 1.12 \) 의 활성을 나타내었다. 이 결과 \( 10 \mathrm { kDa } \) 이하의 시료로부터 HPLC column (watchers \( 120 \mathrm { ODS } - \mathrm { AP } 250 \) X \( 4.6(5 \mu \mathrm { m } )) \) 을 이용하여 각각의 활성 분획을 분취하여 얻은 6분획의 \( \mathrm { ACE } \) 저해 활성은 \( 29.56285 .85 \% \) 로 나타났다. 그 중 거해활성이 가장 높게 나타나는 B fraction의 아미노산 서열을 확인한 결과 Leu-Gln-Pro 임을 확인하였고, peptide합성하여 얻은 저해활성 농도 \( \left ( \mathrm { IC } _ { 50 } \right ) \) 가 \( 1.18 \mathrm { uM } \) 임을 확인하였다. 이려한 결과는 \( \mathrm { PEH } \) 를 이용하여 건강기능성 식품의 개발에 도움이 될 수 있을 것으로 생각된다.</p>