본 연구에서는 새싹인삼의 성분을 분석하는 실험이었다. 묘삼을 토양에 파종하는 것부터 시작하여 파종 후 날짜별 10일 간격으로 총 50개체를 임의로 선정하여 새싹인삼 내의 phenolics와 flavonoids 측정하고, 지방산 분석은 샘플의 건조분말 시료 1g을 정확히 측정하여 지방산과 글리세롤 가수분해 과정을 진행한 후에 지방산을 분리하는 과정을 거쳤다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>재료 및 시약</h2> <p>본 연구에서 사용한 새싹인삼은 경남 사천시 (주드림팜에서 토경 재배로 생산된 새싹인삼을 이용하여 실험을 진행하였다. 총 phenolics 측정에 사용한 Folin-Cicalteu phenol과 총 flavonoids 측정에 사용된 diethyleneglycol은 Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)사에서 구입하였다. Phenolic acids 표준품(gallic acid, chlorogenic acid, protocatechuic acid, vanillic acid, ferulic acid 및 ventaric acid)과 flavonols 표준품(epigallocatechin, catechin, vanilin, rutin, catechin gallate, quercetin 및 formonoetin) Sigma-Aldrich에서 구입하였다. Ginsenosides 표준품(Compound K, F1, F2, F3, F5, Rb1, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Rd2, Re, Rf, Rg1, Rg2, Rg3, Rh1, Rh2, Ro, protopanaxdiol 및 protopanaxtriol)는 KOC biotech (Daejeon, Korea) 구입하여 사용하였다. 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), 2-2'-azino-bis(3-ethylbenzo-thiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt (ABTS), Ferric reducing/antioxidant power (FRAP), thiobarbituric acid (TBA), trichloroacetic acid (TCA) 및 2,4,5-tri(2-pyridyl)-1,3,5-triazine (TPTZ)은 Sigma-Aldrich사에서 구입하였다. 분석 용매는 high performance liquid chromatography (HPLC)-grade \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \), acetonitrile 및 methanolo Fisher Scientific (Fairlawn, NJ, USA)에서 구입하였고, 이 외 분석에 필요한 모든 시약은 특급 혹은 1 급으로 구입하여 사용하였다.</p> <h2>생육 시기에 따른 길이 및 무게 측정</h2> <p>새싹인삼은 묘삼을 토양에 파종하여 온도 \( 19 \pm 2^{\circ} \mathrm{C} \), 습도 \( 55 \pm 5 \% \) 및 식물성장 LED 광원(적색, 청색과 백색 혼합 광원; T5-1200L-HC, Dongyoung, Korea) \( 400 \pm 200 \mathrm{~lx} \) 조건으로 자동 제어된 식물공장에서 재배하였으며, 파종 후 25 일부터 65 일까지 10 일 간격으로 총 5회(25일, 35일, 45 일, 55일 및 65 일) 생육 시기별로 수확하였다. 이 중 50 개체를 임의로 선택하여 뿌리부터 잎까지의 전초 길이와 무게를 측정하였다. 각 생육시기별 새싹인삼 전초는 \( 55^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 2 일간 건조(SI-70S2, Sinil, Daegu, Korea) 및 분쇄(HGB2WTS3, Waring, Torrington, USA)한 후 \( -20{ }^{\circ} \mathrm{C} \) 에 보관하여 실험 재료로 사용하였다.</p> <h2>지방산 분석</h2> <p>지방산 분석은 Cho 등의 방법을 약간 변형하여 측정하였다. 건조 분말 시료 \( 1 \mathrm{~g} \) 을 시험관에 정확히 칭량하고 \( 0.5 \mathrm{~N} \) 메탄올성 \( \mathrm{NaOH} \) 를 \( 3 \mathrm{~mL} \) 분주한 후 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 10 분간 열처리하여 지방산과 글리세롤 가수분해 과정을 진행하였다. 그 후 삼불화붕소\( \left(\mathrm{BF}_{3}\right) 2 \mathrm{~mL} \) 를 첨가하고 교반한 후 다시 30 분간 열처리하여 지방산의 메틸 에스테르화를 진행하였다. 반응이 끝난 후 이소옥탄 \( 1 \mathrm{~mL} \) 를 첨가하고 혼합 및 방치시켜 이소옥탄층을 회수하여 무수황산나트륨과 함께 탈수한 뒤 \( 0.45 \mu \mathrm{m} \) membrane filter (Dismic-25CS, Toyoroshikaisha Ltd, Tokyo, Japan)로 여과하여 gas chromatography (GC, Agilent 7890A system, Agilent Technologies Inc., Wilmington, DE, USA)로 분석하였다. 이동 상은 질소 가스를 사용하였으며 속도는 \( 1 \mathrm{~mL} / \mathrm{min} \) 으로 유지하였다. 오븐의 온도는 \( 140^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 5 분간 유지한 후 1 분당 \( 20^{\circ} \mathrm{C} \) 만큼 상승시켜 \( 180^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 2 분간 유지하였고, \( 5{ }^{\circ} \mathrm{C} \) 만큼 상승시켜 \( 230^{\circ} \mathrm{C} \) 까지 온도를 올려 35 분간 유지하였다. Column은 SP-2560 capillary column \( (100 \mathrm{~m} \times 0.25 \mathrm{~mm} \) i.d., \( 0.25-\mu \mathrm{m} \) film thickness, Sigma-Aldrich)를 사용하였으며 injector 온도는 \( 220{ }^{\circ} \mathrm{C} \) 로 하였고, flame ion detector의 온도는 \( 240^{\circ} \mathrm{C} \) 로 하였다.</p>