해양 유류 사고 및 유류 유출이 해양 생태계에 큰 피해를 주고 있다. 친환경적인 유류 제거 방법의 개발이 필요하며, 생물학적 방법을 통해 다양한 유류를 분해하는 미생물들을 이용하여 균주를 분리하여 실제로 오염현장에 적용하고 있다. 또한 원유 분해 세균의 생리학적 특성과 분자유전학적 특성을 밝히기 위한 미생물 자원을 탐색하고, 계측용 바이오센서 개발을 위한 생물소자를 해양 미생물 자원으로부터 얻는 일이 시도되고 있다.
<h1>서 론</h1> <p>유조선의 사고 등에 의한 유류 유출 및 각종 폐유 방출 등으로 해양오염이 늘어나면서 해양 생태계에 커다란 피해가 나타나고 있다. 우리나라의 유류 연안 물동량은 최근 꾸준히 증가하였고, 유류의 수출입 물동량 또한 계속하여 증가하였다. 최근, 유류수송 선박이 대형화, 자동화 및 고속화됨에 따라 해양사고시 수만톤에서 수십만톤에 이르는 초대형 유류 유출 사고도 발생하고 있는데, 전세계적으로 원유가 해양으로 유출되는 양은 엄청나다. 우리나라에서도 해양 유류 오염사고가 수시로 발생되어 해양오염에 의한 자연 생태계의 파괴와 연안 해역에서의 양식업에도 중대한 피해를 입히고 있다. 이러한 해양 유류 오염의 발생증가와 아울러 이들을 해결하려는 노력둘이 다방면에서 많은 연구자들에 의해 활발하게 진행되어 왔다. 최근에는 주유소 등의 증가로 인하여 농경지 주변 토양이 유류에 오염되는 경우가 증가되고 있는 실정이다. 따라서 친환경적이며 효율적인 유류제거 방법의 개발이 필요한 실정이다.</p> <p>해양에 유출된 유류는 점성이나 휘발성의 물리적 성질, 유류의 화학적 성질, 해양상태나 태양광선 등의 기상상태, 해수의 온도, 유속, 부유물질 및 존재하는 박테리아의 종류 에 따라 변한다. 유처리 방법중의 하나인 생물학적 방법으로는 해양의 유류 오염물질인 n-, iso-, cyclo-alkane 계열의 탄화수소원과 원유(crude oil) 및 경유, 중유 등 다양한 기질을 분해시키는 균주를 분리, 동정하여 실제로 오염현장에 적용시키는 방법이 있다. 이러한 유류 분해의 해양 미생물로서는 Aeromonas, Arthrobacter, Corollospora, Dendryphiella, Pseudomonas, Klebsiella sp. 등이 대부분을 차지하고 있으며, 또한 이들 균주가 생산하는 유화제 등이 분리 정제되어 실제로 이용되고 있다.</p> <p>해양 유류 사고시 유류오엽의 조기포착, 오염의 확산 방지 및 효율적인 방제를 위한 생물학적 처리 방법으로서 오염정도를 측정 판단할 수 있는 신속한 경보시스템의 개발이 대단히 중요한 의의를 지닌다고 할 수 있을 것이다. 따라서, 해양 유류 오염에 대한 계측용 바이오센서 개발을 위한 생물소자를 해양 미생물 자원으로 부터 얻는 일이 시도 되어야 한다. 본 연구에서는 원유 분해 세균의 생리학적 특성과 분자유전학적 특성을 밝히기 위한 미생물 자원을 탐색할 목적으로 원유 분해능이 우수한 균주를 해양으로 부터 분리, 동정하여 분류학상의 위치를 확인하고, 선별된 원유 분해 균주의 특성, 균체 생육도, 유화도 및 원유의 분해 특성에 대하여 검토하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>사용시약 및 플라스미드 DNA분리</h2> <p>각종 제한효소, Wizard miniprep DNA purification system은 Promega에서 구입하였고, ampicillin, 등의 함생제 및 기타 여러 시약들은 Sigma 사 혹은 시중에서 구입한 특급품을 사용하였다. 단백질 정량을 위하여는 Bio-rad 사의 protein assay kit를 사용하였다.</p>