본 논문에서는 혈청의 요소 활성을 측정하기 위해 Fuji Dri-Chem Clinical Chemistry Analyzer를 사용했고, 간 조직의 단질의 정량을 위해서는 Lowry와 같은 방법을 사용했으며, 지질과산화 함량 측정을 위해 Thiobarbituruce acid 변법을 이용하였다.
<p>간에 간 무게 10배의 solution (10 mM Tris, 0.07 M Saccharose, 0.1 mM EDTA, 0.2 M Mannitol, in dissolved \( 0.1 \) \( \mathrm { N } \mathrm { HCl } \) )을 넣어 균질화한 후, \( 600 \times \mathrm { gg } , 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 10 \mathrm { ~min } \) 원심분리한 상등액을 다시 \( 8,000 \times \mathrm { g } , 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 \( 10 \mathrm { ~min } \) 원심분리하여 얻은 pellet에 \( 0.1 \mathrm { M } \) Phosphate buffer ( \( \mathrm { pH } ~7.0 \)) \( 5 \mathrm { ml } \) 넣어 mitochondrial fraction으로 사용하였다.</p> <h2>혈청의 효소 활성 측정</h2> <p>혈청 중의 aspartate aminotransferase (AST)와 alanine aminotransferase (ALT)의 활성은 Fuji Dri-Chem Clinical Chemistry Analyzer (Fuii Dri-Chem 3500, Fujifilm, Japan)로 측정하였다.</p> <h2>간 조직의 단백질 정량</h2> <p>단백질의 정량은 Lowry등의 방법에 의해서 \( 750 \mathrm { ~nm } \)에서 합광도를 측정하고 표준 단백 시료를 Bovine Serum Albumin(BSA)으로 정량하였다.</p> <h2>간 조직의 지질과산화 함량 측정</h2> <p>간 \( 1 \mathrm { ~g } \)을 취하여 간 무게의 5배 용량인 \( 5 \mathrm { ml } \)의 \( 1 / 20 \mathrm { M } \) phosphate buffer ( \( \mathrm { pH } ~ 7.4 \))에 homogenation 시킨 것과 mitochondrial fraction을 마개가 있는 시험관에 각각 \( 0.5 \mathrm { ml } \)씩 triple로 취하였다. Thiobarbituruce acid 변법으로 \( 7 \% \) sodium dodesyl sulfate (SDS)로 가용화시켜 여기에 \( 0.67 \% \)(동량의 acetic acid 혼합시약) \( 2 \mathrm { ml } \)를 가하여 \( 95 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 수욕상(water bath)에서 50분간 가온 후 즉시 급냉시켜 butanol \(5 \mathrm { ml } \)로 \( 800 \times \mathrm { g } \)에서 10분간 원심분리 한 후 상등액을 최한 후 \( 535 \mathrm { ~nm } \)에서 흡광도를 측정하였다.</p>