BChE에서 HexTCh의 proton inventory는 작은 농도와 큰 농도에서 각각의 몰분율에 대한 반응속도를 측정하였다. 결과적으로 반응속도의 변화율은 작은 농도에서는 \(1.18\)이고, 큰 농도에서는 \(1.76\)이었다. \(1.76\)의 값은 BChE에서 HexTCh의 가수분해 반응이 동위원소 효과에 비교적 둔감하며, 속도제한적인 단계가 ATCh와 유사하게 기질의 효소로의 확산 단계에서 일어난다는 것을 나타냈다. 이 결과를 직선형의 그래프로 표현하였다.
<p>BuTCh 은 반응성에 있어서 ATCh과 BzTCh 사이에 놓여 있고 BuTCh 의 촉매화된 EE-AChE 가수분해에 대한 \( p \mathrm { H } - \) \( \mathrm { V } / \mathrm { K } \) profile은 위에서 논의된 ATCh 과 BzTCh의 \( p \mathrm { H } \)-rate 거동의 특성을 가진다. Nonlinear least-squares fitting으로 부터 \( p \mathrm { ~K } _ {\mathrm { a } 1 } =4.71 \pm 0.03, p \mathrm { ~K } _ {\mathrm { a } 2 } =6.3 \pm 0.1 \) 이 계산되었다. \( p \mathrm { ~K } _ {\mathrm { a } 1 } \) 은 \( \mathrm { BzCh } \) 가수분해에 대한 \( p \mathrm { H } \)-rate profile로부터 결정된 \( p \mathrm { ~K } _ { a } \) 값과 동일하고, \( \mathrm { pK } _ {\mathrm { a } 2 } \) 는 ATCh 과 \( \operatorname { PrTCh } \) 의 촉매화된 EE-AChE 가수분해에 대한 \( p \mathrm { H } - \mathrm { V } / \mathrm { K } \) profile로부터 결정된 \( p \mathrm { ~K } _ {\mathrm { a } } \) 값과 동일하다.</p> <p>본 연구에서는 HexTCh의 촉매화된 BChE 가수분해에 대한 \( p \mathrm { H } - \mathrm { V } / \mathrm { K } \) profile에서 \( p \mathrm { ~K } _ {\mathrm { a } } \) 값 \( 4.974 \pm 0.028 \) 을 얻었다.</p> <p>\( p \mathrm { H } \)-rate profile은 \( p \mathrm { ~K } _ {\mathrm { a } } =6.2 \sim 6.4 \) 를 갖는 잔류물의 기본형에 활성이 의존하는 것으로부터 하나의 잔류물 또는 \( p \mathrm { ~K } _ {\mathrm { a } } = \) 4.7 5.0을 갖는 잔류물들에 의한 촉매작용의 계통적인 자리밀림을 보여준다. ATCh과 PrTCh과 같은 빠른 기질에 대해 작용하는 더 높은 \( p \mathrm { ~K } _ {\mathrm { a } } \) 는 활성자리 S200-H440-E327 삼작용기조의 \( \mathrm { H } 440 \) 과 비슷하지만 더 낮은 \( p \mathrm { ~K } _ {\mathrm { a } } \) 는 carboxylate 잔류물의 수반을 제안한다.</p> <h2>HexTCh에 의해 촉매화된 BChE의 용매동위원소 효과</h2> <p>BChE에서 HexTCh의 proton inventory는 \( \mathrm { V } / \mathrm { K } (0.01 \mathrm { mM } ) \) 조건과 \( \mathrm { V } _ {\max } (1.2 \mathrm { mM } ) \) 조건을 각각의 몰분율에 대해 반응속도를 측정(Table 8, 9)하여 농도가 아주 작을 때 몰분율에 대해 반응속도의 변화율 \( { } ^ { D } \mathrm { ~V } / \mathrm { K } =1.18 \) 와 농도가 아주 클 때 몰분율에 따른 반응속도의 변화율 \( { } ^ {\mathrm { D } } \mathrm { V } =1.76 \) 을 계산하였다. 이를 그래프로 나타내 양성자 목록을 작도하여 보면 직선형을 나타낸다. \( { } ^ {\mathrm { D } } \mathrm { V } =1.76 \) 의 값은 BChE에서 HexTCh의 가수분해 반응은 동위원소 효과에 비교적 둔감한, 기질이 효소로의 확산 단계에서 속도제한적인 ATCh와 유사한 속도결정단계에서 전이상태가 안정화되는 것을 나타낸다.</p>