상수원수(표층수)와 정수처리 공정별 시료를 TOX2P/TOX2M primer로 Real-Time PCR법을 이용하여 마이크로시스틴의 검출여부를 확인하였다. mcyB 유전자는 adenylation, thiolation 및 condensation domain을 각각 1개씩 포함하는 2개의 module로 구성되어 있으며, TOX2P/TOX2M primer쌍은 그 중 adenylation domain을 특이적으로 증폭시키기 위해 개발되었다. 이를 이용한 Real-Time PCR법은 마이크로시스틴 생성 균주를 빠르고 효과적으로 검출할 수 있었다.
<p>마이크로시스틴의 합성에 관여하는 유전자 중에서 mcyB 유전자는 adenylation, thiolation 및 condensation domain을 각각 1개씩 포함하는 2개의 module로 구성되어 있다. 이번 연구에 사용된 TOX2P/TOX2M primer쌍은 mcyB 유전자의adenylation domain을 특이적으로 증폭시키기 위해 개발되었으며, Pan 등은 TOX2P/TOX2M에 의한 PCR법은 마이크로시스틴 생성 균주를 매우 신속하고 효과적으로 검출할 수 있는 유용한 방법임을 이미 증명한 바 있다. 따라서 TOX2P/TOX2M primer는 이번 연구에 검출하고자 하는 남조류 독성 마이크로시스틴에 대한 감도가 뛰어난 것으로 조사되었기에 농축시킨 상수원수(표층수)시료와 정수처리 공정별 시료도 같은 방법으로 Real-Time PCR법을 실시하여 검출여부를 확인하였다.</p> <h2>상수원수(표층수) 마이크로시스틴 시험</h2> <p>2009년 6~9월 사이에 남조류 수화현상이 발생한 물금, 매리 지점 표층수를 대상으로 Real-Time PCR법과 LC/MS법을 이용하여 독성 시험을 실시하였다. 먼저 채수한 시료들을 농축하여 도립현미경에서 동정한 결과 발생한 남조류는 모두 Microcystis spp.. 속으로 확인되었다. 시료를 전처리 한 후 먼저 TOX2P/TOX2M primer쌍을 이용한 Real-Time PCR법을 실시하였는데 그 결과 총 7회 11개 시료 모두에서 독성이 검출되어 낙동강에서 발생한 남조류 시료들은 마이크로시스틴 독성을 함유하는 것으로 나타났다. 따라서 이번 연구에서 조사된 표준균주 및 현장시료들은 mcy 유전자를 지닌 Microcystis spp.. 개체들은 거의 예외 없이 마이크로시스틴을 실제로 생성한다고 보고한 선행 연구결과들과 일치하는 것으 로 나타났다. LC/MS법에 의한 실험결과도 Real-Time PCR 법과 마찬가지로 모든 시료에서 독성이 검출되었는데 농도는 \( 5.98 ~ 219.0 \mu \mathrm { g } / 1 \) 범위로 조사되었다. 지점별로는 물금 지점이 매리 지점보다, 시기별로는 9월이 6월보다 농도 가 높게 검출되었다.</p> <h2>정수처리 공정별 마이크로시스틴 시험</h2> <p>정수처리 공정별 시험은 2009년 6월17일에서 6월19일까지 3회 실시하였다. 먼저 LC/MS법에 의한 시험결과는 Fig. 2와 같다. 화명정수장의 경우 표층수에서 \( 5.98 \sim 219.0 \mathrm {\mu g } / \mathrm { l } \) 농도를 보인 마이크로시틴은 정수장에 유입되면 전염소에서 평균 \( 0.45 \mu \mathrm { g } / \mathrm { l } \), 전오존에서 평균 \( 0.35 \mu \mathrm { g } / \mathrm { l } \), 사여과에서 평균 \( 0.30 \) \( \mu \mathrm { g } / \mathrm { l } \) 농도로 검출되었으며 BAC 여과 이후부터는 검출되지 않았다. 그러나 6월 19 일 채수한 시료에서는 사여과 부터 마이 크로시스틴이 검출되지 않은 것으로 조사되었다. 표층수의 농도가 \( 6.19 \sim 2.40 \mathrm { gg } / \mathrm { l } \) 분포를 보인 덕산 정수장의 경우 화명 정수장과 거의 비슷한 경향을 보여 BAC 여과 이후부터 마이 크로시스틴은 검출되지 않은 것으로 나타났다. 3회 실험한 결 과 정수장에 유입된 마이크로시스틴은 전염소와 전오존 단계 에서 평균 \( 96 \% \) 그리고 후오존 처리를 거친 BAC 여과 이후 부터는 완전히 제거되는 것으로 나타나 부산시 수돗물의 안전 성을 확인할 수 있었다.</p>