본 연구에서는 동충하초 균사체 배양액의 멜라닌생성 억제 효과와 독성 여부를 조사한다. 배양액 \( 20 \% \)를 첨가하면 멜라닌생성 관련 효소 활성이 \( 50 \% \) 억제되고, 최종적으로는 \( 50 \% \) 농도에서 tyrosinase 활성을 \( 100 \% \) 억제하는 것을 확인하였다. 동시에 세포독성이 관찰되지 않아 화장품 소재로 사용할 경우 피부에 자극적인 부작용이 없을 것으로 예상한다. 뽕잎 추출액의 멜라닌 합성 억제 활성은 약하지만, 동충하초 배양액과 결합 시 \( 10 \% \) 이상 처리하면 멜라닌 합성 억제가 관찰되었다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>Tyrosinase 활성억제</h2> <p>봉잎 추출물을 이용한 동충하초 균사체 배양액의 ty-rosinase 활성 억제를 조사한 결과 시료의 처리 농도가 높아질수록 멜라닌 생성 억제율이 증가하는 것을 관찰하였다. Fig. 1, 2에서 보는 바와 같이 배양액을 \( 20 \% \) 첨가 시 \( 50 \% \) 의 멜라닌생성관련 효소의 활성 억제효과를 보였으며, 최종 \( 50 \% \) 농도에서는 tyrosinase 활성을 \( 100 \% \) 억제시키는 것을 관찰할 수 있었다. 하지만 뼝잎 추출물만으로는 \( 20 \% \) 첨가 시 거의 억제율을 보이지 않았으며, 최종 \( 50 \% \) 농도에서도 \( 20 \% \) 의 억제율을 관찰하였다. 이러한 결과는 뽕잎 자체에서도 어느 정도의 멜라닌 합성 억제를 보이지만 동충하초 균사체를 배양함으로써, 합성 억제율이 크게 증가함을 관찰할 수 있었다.</p> <h2>세포독성 측정</h2> <p>뽕잎 추출물과 뽕잎추출물을 이용한 동충하초 균사체 배양액이 멜라닌 생성세포에 대한 세포독성을 조사한 결과를 Fig. 3과 4 에서와 같이 나타내었다. 그 결과 뽕잎 추출물 \( 7 \% \) 처리 시 \( 50 \% \) 의 세포가 사멸하는 것을 보였으며, \( 20 \% \) 이상 처리시에는 세포가 모두 사멸됨을 확인하였다. 그러나 뽕잎 추출물을 이용한 동충하초 균사체 배양액은 \( 50 \% \) 처리 시까지 세포독성이 전혀 나타나지 않는 것을 관찰하였다(Fig. 4). 이 결과에서 볼 때 뽕잎 추출물 자체의 세포독성을 동충하초 균사체가 배양됨에 따라 점진적으로 제거되어 배양 최종일에는 완전히 제거 되었을 것으로 판단된다. 그리고 세포에 대한 독성이 없는 것으로 보아 차후 화장품소재로 이용하였을 때, 피부에 자극적인 부작용이 없을 것으로 사료되며, 동충하초 균사체 배양액의 피부자극실험은 이 등[16]이 앞서 보고 한 바 있어 화장품 소재로서의 부작용은 없을 것으로 판단된다.</p> <h2>멜라닌 생성 억제</h2> <p>뽕잎 추출액과 뽕잎추출물을 이용한 동충하초 균사체 배양액의 멜라닌 생합성 억제율을 B16BL6 mouse melanoma cell을 이용한 결과 Fig. \( 5 \mathrm{~A} \) 에서와 같이 뽕잎 추출물은 \( 10 \% \) 이상 처리 시에 멜라닌 생합성의 억제가 관찰되었다. 또한 뽕잎 추출물을 이용한 동충하초 균사체 배양액의 경우 Fig. \( 5 \mathrm{~B} \) 와 같이 \( 3 \% \) 처리부터 육안으로 세포의 멜라닌 생합성이 억제됨을 관찰하였고, 더욱더 정확한 억제율을 확인하기 위하여 홉광도를 측정을 한 결과 \( 10 \% \) 처리에서 \( 60 \%, 20 \% \) 에는 \( 80 \% \) 의 멜라닌 생합성이 억제됨을 확인 할 수 있었다. 이 결과에서 볼 때 뽕잎 추출물 자체의 멜라닌 합성 억제 활성은 아주 약하며, 이러한 효과 역시 앞의 자료 (Fig. 3)에서 보여주었듯이 세포독성으로 세포가 생육하지 못한 결과로 측정된다. 따라서 동충하초 균사체가 뽕잎 추출물을 기질로 하여 대사 하는 과정에서 미백활성은 점진적으로 증가 시키는 반면 독성은 감소시킨 것으로 판단된다.</p>