이 연구는 포유류의 간과 근육 미토콘드리아가 외인성 젖산을 산화시킬 수 있음을 보여주며, 이는 내부 LDH 풀의 존재 때문이라고 가정한다. 젖산의 새로운 기능에 대한 이해를 돕기 위해, 미토콘드리아 내의 LDH 동위효소의 특성을 조사하였다. 이를 위해, 횐쥐를 강도별로 운동시킨 후, 심장조직을 적출하고 세포질을 추출하였다. 미토콘드리아를 순수 분리하여 세부 부분으로 분리한 후, 겔 전기영동 및 효소활성을 측정하여 LDH 동위효소의 분포와 운동강도에 따른 활성변화를 확인하였다.
<p>Brooks 등에 의하면 곌전기영동과 전자현미경으로 조직특이성을 나타내는 \( \mathrm { LDH } \) 동위효소의 분포형태를 관찰한 결과, 심근조직의 경우 미토콘드리아 내에는 \( \mathrm { LDH } \mathrm { B } 4 \) 의 활성이 우세하였고 세포질 및 세포소기관 주위에는 \( \mathrm { LDH } \mathrm { A } _ { 4 } \) 가 우세하였으며, 간조직의 경우 \( \mathrm { LDH } \mathrm { A } _ { 4 } \) 의 활성이 우세했지만 특히 미토콘드리아에서 \( \mathrm { A } _ { 4 } \) 의 활성이 매우 우세했다고 보고 하였다. 또한 포유류의 간과 근육의 미토콘드리아는 외인성젖산을 산화할 수 있는데, 이는 젓산의 산화를 촉진하는 내부의 LDH pool 때문이라고 하였다.</p> <p>이와 같이 젓산의 새로운 기능에 대한 이론이 제기되고 새로운 대사적인 측면에서 젓산의 기능을 이해하고자하는 노력이 이루어지고 있는 시점에서 젓산의 기능을 보다 확실하게 이해하기 위해서는 미토콘드리아내 LDH 동위효소들의 특성을 이해하는 것이 필요하다고 생각한다.</p> <p>따라서 본 연구는 횐쥐를 8 주간 강도별로 운동시킨 후 심장조직을 적출하여 세포기질을 추출하고, 미토콘드리아를 순수 분리하여 이들을 외막, 막간물질(외막과 내막사이), 내막 및 매트릭스로 분리한 후 겔 전기영동 및 효소활성을 측정하여 세포기질과 미토콘드리아내의 LDH 동위효소 분포와 운동강도에 따른 활성변화를 측정하였다.</p> <h2>재료 및 방법</h2> <h3>실험동물 및 훈련방법</h3> <p>본 실험에 사용된 동물은 국가공인동물취급업체로부터 공급받은 체중 250-300 g되는 Sprague-Dawley 계열 횐쥐를 사용하였으며, 3일간의 환경(온도는 22-24 \( \mathrm { C } \), 습도는 \( 60 \% \), 명암주기 12 시간) 적응 기간율 거치게 한 후에 적응 여부를 판단하여 무작위 표본 추출에 의해서 저강도집단 12 마리, 중강도집단 12마리, 고강도집단 12 마리, 통제집단 12마리, 총 48마리를 선정하여 Bedford 등[1]의 방법에 따라 지구성 트레드밀 운동을 시켰다(Table 1).</p> <h3>조직시료의 준비</h3> <p>모든 동물은 훈련을 실시한 후 일시적 운동의 효과를 배제하기 위하여 48 시간 셩과 후에 마취제 cther롤 이용하여 마취시킨 후 사지롤 고정시키고 심장을 적출하여 증류수로 세척하여 혈액을 완전히 제거한 다음 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } 0.25 \mathrm { M } \) sucrose를 포함하는 \( 5 \mathrm { mM } \) potassium phosphate buffer (pH 6.5) 용액을 각 시료조직의 3 배 \( (w / v) \) 가한 후 Autohomogenizer (Rika-kikai GTR-1000)로 파쇄 하였다.</p>