본 연구에서 사용한 Bacillus 균주 CBW3, CBW4, CBW9, CBW14, EBW10 모두 약산성에서 약알칼리성에서 생장할 수 있다는 것을 확인하고 이들의 고분자물질 분해 효소 활성능을 검토하였다. 본 연구에서 사용한 균주 모두 DNase 활성이 있었지만 Cellulose 분해능은 EBW10만 가지고 있었으며, 모든 균주가 Starch, casein 분해에 필요한 효소 활성이 있었고, CBW14만 Tween 분해능이 없다는 사실을 확인하였다.
<p>본 연구에서 사용한 Bacillus 균주 CBW3, CBW4, CBW9, CBW14 그리고 EBW10 모두 pH 5-pH 9까지 생장하는 것으로 보아 약산성부터 약알칼리성에서 생장하였다. B. barbaricus의 생장범위 pH 6.0-pH 9.5, B. algicola의 생장범위 pH 7.0-pH 10, B. arsenicus의 생장범위 pH 5.5-pH 8.0, B. hwajinponensis의 생장범위 pH 5.0-pH 9.5를 고려해본다면, 본 연구에서 분리 사용한 Bacillus 균주들은 생장 가능한 pH 범위에서 기존 알려진 Bacillus 균주들의 특성과 상당히 일치하였다.</p> <h2>Bacillus spp.의 고분자물질 분해 효소 활성능</h2> <p>Table 5는 DNA, cellulose, starch, casein 그리고 4 가지 Tween 등의 고분자 물질 을 사용하여 각 물질 분해에 관련된 효소 활성을 측정한 결과이다. DNA 물질이 포함된 배지에 1M HCl을 떨어뜨렸을 때 DNase 활성을 갖고 있는 균주는 DNA를 분해하여 균체 주변이 투명하게 변하는데 CBW3, CBW4, CBW9, CBW14 그리고 EBW10 모두 균체 주변에 뚜렷한 투명대를 형성하여 DNase 활성이 있었으며, 특히 CBW9와 CBW14는 크기가 매우 큰 투명대를 형성하여 DNase 활성이 매우 높음을 알 수 있었다. Cellulose 분해 여부를 관찰하고자 cellulose가 함유된 배지에 균을 48시간 배양한 뒤 congo-red \( (0.1 \%) \)로 염색, 30 분 후 1M NaCl로 세척을 해 색을 관찰한 결과 오직 EBW10만이 균 주위에 희미한 노란색이 나타났다. 이는 CBW3, CBW4, CBW9, CBW14 균주는 cellulase 활성을 갖고 있지 않으며 EBW10균만이 Cellulose 분해에 필요한 cellulase 활성을 가지고 있음을 제시해준다. Starch 또는 casein을 함유한 배지를 이용하여 그 분해능을 시험한 결과 본 연구에서 사용한 모든 균주들이 다당류인 Starch 분해에 필요한 amylase와 단백질인 casein 분해에 필요한 효소 활성이 있음을 알 수 있었다. Tween이 포함된 배지에서 균을 배양한 후 균체 주변이 뿌옇게 변하는 것을 확인한 결과 CBW14만 Tween 분해능이 없었으며 다른 균주들은 Tween 20, Tween40, Tween 60, Tween 80 등 분자량이 다른 고분자 물질을 모두 분해할 수 있는 것으로 나타났다.</p> <p>해양생물의 장내에서 발견되는 Bacillus균들은 다양한 유기물을 분해할 수 있는 protease, amylase, cellulase 등의 효소들을 생산할 수 있는 능력이 있는 것으로 보고된 바 있다. 매우 흥미롭게도 CBW3 및 CBW14와 계통학적 관계가 가까운 것으로 여겨지는 B. barbaricus는 예상과는 달리 Tween20과 Tween 80 등을 이용할 수 있는 능력이 없는 것으로 알려져 있다. 동해에서 분리된 것으로 균주 CBW9와 계통학적 관계가 가까운 것으로 여겨지는 B. hwajinponensis은 caesin, starch, Tween 20, Tween 40, Tween 60, Tween 80 등을 분해할 수 있는 것으로 알려져 두 균주 간 특성이 매우 유사하였다. 특히 균주 EBW10은 시험한 모든 고분자 물질을 분해하 여, protease, amylase, cellulase. lipase 등의 효소 활성을 가지 고 있을 것으로 추정되었다.</p>