지방전구세포가 지방세포로 분화되는 과정은 초기, 중기, 후기의 단계로 분화 조절인자가 관여한다. 이를 통해 EPEE가 보유한 지방세포분화 억제능이 단백질 발현 저해를 통해 나타난다. 따라서 E. pleiosperma 추출물은 지속적인 연구를 하여 활성 물질의 규명이 필요하다.
<h2>EPEE가 adipogenesis 관련 유전자 및 단백질 발현에 미치는 영향</h2><p>지방전구세포가 지방세포로 분화되는 adipogenesis의 과정에는 초기, 중기, 후기의 각 단계별로 중요한 분화 조절인 자가 관여한다. MDI 처리 초기에는 가장 먼저 c-fos, c-jun, c-myc 등의 유전자 발현이 증가하며 이와 함께 C/EBP\( \beta \)와 \( \delta \)의 발현 또한 유도된다. C/EBP\(\beta \)와 \( \delta \)는 지방전구세포가 MDI등의 분화 인자에 노출되었을 때 분화 초기에 가장 먼저 작용하는 전사 인자로서 MDI의 경우 C/EBP\(\beta \)는 DEX에, C/EBP\( \delta \)는 IBMX에 의해 활성이 유도되는 것으로 알려져 있다. 이러한C/EBP\(\beta \)와 \( \delta \)의 활성은 분화 중기 및 후기에서 작용하는 PPAR \( \gamma \)와 C/EBP\( \alpha \)의 발현 매개인자로서, 활성화된 PPAR\( \gamma \)와 C/EBP\( \alpha \)는 단독 혹은 상호작용을 통해 지방세포 특이적 유전자의 발현(adipocyte specific gene expression)을 유도하여 지방 세포 분화 및 지방 형성을 완성한다. 따라서 이와 같은 지방 세포 분화에 관여하는 주요 인자들의 발현 조절 유무는 소재가 보유한 지방 생성 억제능 및 그 작용 기전을 판단하는 주요 지표 중 하나이다.</p><p>본 연구에서는 EPEE가 보유한 지방 생성 억제능의 작용 기전을 알아보기 위하여 EPEE가 adipogenesis에 관여하는 주요 핵심 조절자인 C/EBP\(\alpha\), C/EBP\(\beta \), 그리고 PPAR \( \gamma \)의 유전자 및 단백질 발현에 미치는 영향을 분석하였다. 그 결과 Fig. 3의 결과에서와 같이 MDI 처리에 의해 지방세포 분화가 일어난 대조군에서는 세 인자의 유전자 및 단백질 발현이 유의적으로 증가되었으며 시료의 처리에 의해 농도의존적인 감소를 보여 \( 50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 처리에서는 모든 인자의 유전자 및 단백질 발현이 미분화 대조군과 유사한 정도의 낮은 발현을 보였다. 이러한 결과를 통해 EPEE가 보유한 지방세포분화 억제능이 adipogenesis에 관여하는 핵심 인자의 유전자 및 단백질 발현 저해를 통해 나타나는 것으로 판단된다.</p><h2>EPEE의 중성지방 제거능(lipolysis activity)</h2><p>EPEE가 지방세포분화를 억제할 뿐만 아니라 생성된 지방의 제거에도 효과적인지를 판단하기 위해 지방세포 내 중성지방 제거능을 lipolysis activity assay를 통해 분석하였다. MDI로 분화시킨 지방세포에 EPEE를 후 처리한 결과 세포 내 축적되어 있던 중성지방의 분해를 통해 배지로 방출된 글리세롤의 양이 농도의존적으로 증가되는 것으로 나타났다. 배지를 제거한 후 Oil Red O staining을 수행하고 현미경 관찰 및 세포 내에 남아있는 TG의 양을 정량 분석한 결과 배지에 방출된 글리세롤 양의 증가와 비례적으로 세포 내에 남아있는 TG의 양이 감소되는 것으로 나타나 EPEE가 지방세포 내에 축적되어 있는 중성지방을 농도의존적으로 제거하는 것을 확인하였다.</p><p>이상의 결과를 통해 EPEE가 췌장 lipase 효소활성 억제능, 지방세포 분화 억제능, 지방세포 내 중성지방 제거능을 통한 항비만 활성을 보유함을 확인하였다. 이러한 결과는 E. pleiosperma 추출물의 항비만 활성을 처음으로 밝혀낸 것이며 추후 계속적인 연구를 통해 활성 물질의 규명이 필요할 것으로 판단된다.</p>