다양한 pH 및 금속 이온 조건에서 Bacillus sp. BCNU 5005에 의한 lipase 활성 변화를 분석하였다. 이 세균은 pH 8에서 가장 높은 활성을 보였으며, 다양한 금속 이온이 추가될 때, 특히 CuCl2, FeCl3, MgSO4, KCl 및 NH4Cl이 추가될 때 lipase 활성이 1-1.2배 높아졌다. 반면에 CaCl2, HgCl2, ZnSO4 등이 추가되었을 때는 활성이 저해되었고, MnCl2가 추가되었을 때는 활성이 가장 많이 감소하였다. 이러한 발견은 유기용매 내성 세균과 그 효소가 높은 이용가치를 가진 생체촉매로서 활용될 수 있음을 시사한다.
<h2>Lipase 활성에 미치는 \( \mathrm { pH } \) 의 영향</h2> <p>\( \mathrm { pH } \) 변화에 따른 lipase 활성을 조사하기 위해 다양한 \( \mathrm { pH } \)범위의 완충액을 사용하여 측정한 결과 Bacillus \( \mathrm { sp } \). \( \mathrm { BCNU } \)5005 는 \( \mathrm { pH } \) 8에서 가장 높은 활성을 나타냈고, \( \mathrm { pH } \) 5-7에서 \( 80 \% \) 이상의 높은 효.소활성을 보였으며, \( \mathrm { pH } 4 \) 에서도 \( 70 \% \) 정도 의 호소 활성을 나타내었다(Fig. 4).</p> <h3>Lipase 활성에 미치는 금속이온의 영향</h3> <p>다양한 금속이온을 첨가하여 효.손 활성에 미치는 영향을 측정한 결과, \( \mathrm { CuCl } _ { 2 } , \mathrm { FeCl } _ { 3 } , \mathrm { MgSO } _ { 4 } , \mathrm { KCl } \) 그리고 \( \mathrm { NH } _ { 4 } \mathrm { Cl } \) 를 첨가 했을 때 1-1.2배 높은 활성을 보였으며, \( \mathrm { CaCl } _ { 2 } , \mathrm { HgCl } _ { 2 } , \mathrm { ZnSO } _ { 4 } \)등을 첨가했을 때는 호.소활성이 저해를 받는 것으로 나타났다. 특히 \( \mathrm { MnCl } _ { 2 } \) 에 의해 lipase의 활성이 가장 떨어지는 것으로 나타났다(Table 4).</p> <h1>고 찰</h1> <p>산업적으로 유기용매에 내성을 가지는 미생물과 그 호소에의한 생물전환 및 생물복구에 대한 기술개발이 꾸준히 요구됨 에 따라 고농도의 유기용매에서 생육할 수 있는 미생물의 탐색과 기능해석 및 산업적 웅용 개발을 위한 연구가 활발히 진행되고 있다. 현재 유기합성 공업에는 주로 미생물이나 동물기원의 효소가 이용되고 있으며, 이들 미생물들은 유기용매 내에서 생존이 어렵거나 사멸하므로 고정화시키는 것이 일반적이다. 그러나 유기용매 내성세균으로 대체하면 이러한 고정화 비용 및 호소 사용비용을 절감할 수 있고 균주의 회수와 재이용이 가능하므로 유기용매 내성 세균과 그 효소는 새로운 생체촉매로서 높은 이용가치를 갖는다.</p> <p>본 연구에서는 울산공단 일대의 폐수 및 토양에서 유기용매내성 세균을 새롭게 분리하였으며, Bacillus sp. BCNU 5005의 난분해성 물질의 분해능력과 생산하는 lipase의 여러 가지 호. 소학적 특성에 대해 조사하였다. 균주가 생산하는 lipase는 고 정화 리파아제인 novozyme 435 와 비교했을 때 유의하게 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \), \( \mathrm { pH } \mathrm { 8 } \) 에서 가장 높은 활성을 나타내었고, 온도 \( 30-50 ^ {\circ } \mathrm { C } , \mathrm { pH } \) \( 4-7,9 \) 범위에서도 최고활성의 \( 70 \% \) 이상의 활성이 있는 것으로 나타났다. Bacillus sp. RN2는 \( 45 ^ {\circ } \mathrm { C } , \mathrm { pH } \) 9가 최적조건이나 효소 활성은 약 \( 60 \% \) 로 나타났으며[14], Bacillus cereus C71과 Pseudomonas sp. M-37은 각각 \( 33 ^ {\circ } \mathrm { C } , \mathrm { pH } 9,55 ^ {\circ } \mathrm { C } , \mathrm { pH } \) 9에서 높은 활성을 나타냈으나, 그 외 조건에서 효소활성이 급격히 떨어지는 것으로 보고되었다[5,23]. 이에 비하여 Bacillus \( \mathrm { sp } \). \( \mathrm { BCNU } 5005 \) 가 생산하는 lipase는 비교적 넓은 온도와 \( \mathrm { pH } \) 범위에서도 효소 안정성이 있음이 확인되었다. BCNU 5005 균주는 hexane, propylbenzene, xylene 및 toluene을 포함한 다양한 유기용매에 대해 내성을 나타내었으며, 특히 독성이 강한 tol-uene에서는 빠른 생육속도를 보였다. 또한 anthracene, di-benzothiophene, naphthalene, 1-naphthalene sulfornic acid,4-nitrophenol 및 nitrobenzene 둥 다양한 난분해성 물질을 분해하는 것으로 확인되었다.</p>