미경험 T세포의 활성화에는 수지상세포의 MHC class Ⅱ 분자와 결합한 항원펩티드를 인지하는 것이 필수적이다. 그러나, T세포 활성화는 수지상세포의 항원 제시만으로 충분하지 않으며, 공동자극신호의 동시 전달이 필요하다. 따라서, 천궁과 당귀의 최적 농도인 $10 \mu g/ml$에서, 수지상세포가 T세포 구역으로 이동하는데 필요한 CD11c와 T세포의 증식을 유도할 수 있는 MHC class Ⅱ, CD40, CD86의 발현 정도를 확인하였다.
<p>이상의 결과, 실험에 사용한 약재인 천궁과 당귀는 \( \mathrm { T } \) 세포의 항원 인지 능력이 아닌, 수지상세포의 항원 제시 능력에 효과적으로 작용함을 알 수 있다.</p> <h3>천궁, 당귀가 수지상세포의 세포표면 단백질 발현에 미치는 영향</h3> <p>미경험 T세포가 활성화되기 위해서는 수지상세포의 \( \mathrm { MHC } \) class Ⅱ 분자와 결합한 항원펩티드를 인지하여야만 한다. 그러나 T세포를 활성화시키기 위해서는 수지상세포의 항원 제시만으로 충분하지 않으며, 공동자극신호(co-stimulatory signal)가 동시에 전달되어야 한다. 이러한 공동자극 신호에 관여하는 수지상세포의 공동자극분자 단백질로는 \( \mathrm { T } \) 세포의 \( \mathrm { CD } 40 \) 리간드(ligand)에 결합하는 CD40이 있으며, 이 \( \mathrm { CD } 40 \)과 \( \mathrm { CD } 40 \) 리간드의 상호작용에 의해 \( \mathrm { T } \) 세포에 활성화 신호가 전달되고 수지상세포는 자신의 세포표면에 CD86(B7)분자를 발현하도록 활성화된다. 또한 수지상세포의 CD86과 \( \mathrm { T } \) 세포의 \( \mathrm { CD } 86 \) 리간드가 결합하게 되면 \( \mathrm { T } \) 세포의 증식을 자극하는 신호를 전달하게 된다. 따라서, 앞 실험에서 효과가 있다고 생각되는 천궁과 당귀의 최적 농도인 \( 10 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 에서 수지상세포가 T세포 구역으로 이동하기 위해 필요한 부착 분자인 \( \mathrm { CD } 11 \mathrm { c } \) 와 \( \mathrm { T } \) 세포의 증식을 유도할 수 있는 공동자극 분자인 MHC class Ⅱ 와 CD40, CD86의 발현 정도를 알아보았다.</p> <p>먼저, 6 일간 배양한 수지상세포에 천궁과 당귀 열수 추출물 \( 10 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 으로 처리하여 24 시간 배양한 후 회수하였다. 세포 표면 단백질의 발현 정도를 알아보기 위해 회수한 모든 수지상세포 \( \left (5 \times 10 ^ { 5 } \right . \) 개)는 anti-CD16/CD32 (FcyIII/ [ Receptor; \( 2.4 \mathrm { G } 2) \) 로 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30분간 blocking하고 washing 용액(1 \% \( \mathrm { FCS } \) 와 \( \left .0.1 \% \mathrm { NaN } _ { 3 } / \mathrm { PBS } \right ) \) 으로 세척한 다음, \( \mathrm { CD } 40 \) 은 PE-conjugated anti-CD40 mAb로 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 분간 염색하였고, MHC class II와 CD86은 anti-MHC class II, anti-CD86 \( \mathrm { mAb } \) 로 먼저 처리한 다음, 다시 anti-rat IgG-PE로 \( 4 { } ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 분 염색한 후 washing 용액으로 세척하였다. 일차 항체로 처리한 모든 세포는 마지막으로 FITC-conjugated anti- \( \mathrm { CD } 11 \mathrm { c } \mathrm { mAb } \) 로 \( 4 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 분간 염색한 후 세척한 다음에 유 세포분석기로 분석하였다.</p>