본 연구에서는 MTT assay로 silibinin에 의한 세포 독성을 PC-3전립선 암세포에서 측정하고, 연구한 결과 silibinin은 인간 전립선암 세포주인 PC-3 세포의 성장을 막고 세포 형태의 변화를 통해 세포 사멸을 하며, cyclin/CDK complex의 활성과 불활성의 의해 silibinin은 세포주기 중 \( \mathrm { G } _ { 1 } \) 기를 억제함으로써 세포의 증식에 영향을 미치는 것을 알 수 있었다.
<h2>통계처리</h2> <p>모든 실험의 표시된 결과는 3번 수행하였으며, 통계분석은 \( \operatorname { mean } \pm \) S.D로 표시하였고, \( \mathrm { ANOVA } \) 에 의해 분석하였다. 통계적 유의성은 \( p \leq 0.05 \) 로 판정하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>Silibinin의 세포 독성 및 세포형태 변화 측정</h2> <p>Silibinin은 다양한 암세포에 세포증식과 세포독성에 영향을 미치는 것으로 보고 되었다[1,6,33-34]. 본 연구에서는 PC-3전립선 암세포에서 silibinin에 의한 세포 독성을 측정하기 위해 MTT assay를 수행하였다. 그 결과, 농도 및 시간 의존적으로 silibinin에 의해 유의적으로 생존률이 감소되는 것을 관찰하였다(Fig. 1A). 특히 48 시간 처리군 중 \( 150 \mu \mathrm { M } \) 농도에서 비처리군에 비하여 \( 50 \% \) 이상 세포 독성을 나타내었고, 이는 최근 선행연구 결과와 유사한 경향을 나타냄을 확인할 수 있었다[20]. 또한 세포형태 변화에 미치는 영향을 확인하기 위하여silibinin을 다양한 농도로 처리하여 48 시간 배양하여 광학현미경으로 관찰한 결과, 농도 의존적으로 세포밀도 감소와 형태변화를 관찰 할 수 있었다(Fig. 1B). 이들 결과들을 종합해 볼 때, silibinin은 인간 전립선암 세포주인 PC-3 세포의 성장을 억제하고 특히 세포 형태의 변화를 통해 세포 사멸이 나타냄을 알 수 있었다.</p> <h2>Silibinin의 세포주기 조절 분석</h2> <p>세포주기는 cyclin/CDK complex의 활성과 불활성의 의해 조절되는데, 먼저 silibinin이 PC-3 전립선 암세포의 세포분열 주기상에 미치는 영향을 flow cytometry로 조사하였다. Fig. \( 2 \mathrm { ~A } \) 에서와 같이 정상세포의 경우 \( \mathrm { G } _ { 1 } , \mathrm { ~S } , \mathrm { G } _ { 2 } / \mathrm { M } \) 기에 해당하는 세포는 각각 \( 43.77 \%, 28.07 \%, 28.15 \% \) 정도의 분포를 보였다. 반면에 silibinin이 \( 150 \mathrm {\mu } \mathrm { M } \) 의 농도로 처리된 세포의 분포는 \( \mathrm { G } _ { 1 } \) 기가 \( 56.66 \% \) 로 증가하였고, \( \mathrm { G } _ { 2 } \) 기는 \( 18.54 \% \) 로 감소하는 것을 관찰하였다. 이상의 결과로 보아 \( \mathrm { G } _ { 1 } \) 기의 세포분포는 증가하고 \( \mathrm { G } _ { 2 } \) 기의 세포가 상대적으로 줄어드는 것을 확인함으로써 silibinin은 세포주기 중 \( \mathrm { G } _ { 1 } \) 기를 억제함으로써 세포의 증식에 영향을 미치는 것을 알 수 있었다.</p>