팽이버섯 수확 후 배지로부터 UJ03 균주를 분리하기 위해 50\(^\circ \mathrm{C}\)에서 생육하는 균주만을 선발하여 순수분리하였고, TSA 배지에서 콜로니의 형태, 냄새, 내생포자 형성 여부 등을 조사하여 1차 선발한 7균주 중 Asp flavus와 Asp. ochraceous에 대한 항균활성을 시험했다. 버섯 수확 후 배지 발효사료의 안전성 및 보존성을 위해 분리균같은 생균제 균주 개발이 요구된다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>팽이버섯 수확 후 배지로부터 UJ03 균주의 분리</h2> <p>버섯배지에 우점하는 고온성 균주를 분리하기 위하여 퇴적되어 있는 버섯 수확 후 배지로부터 시료를 수집한 다음 희석한 후 50°C에서 생육하는 균주만을 선발하여 순수분리하였다. 순수분리된 균주 중 TSA 배지에서 콜로니의 형태, 냄새, 내생포자 형성 여부 등을 조사하여 Bacillus 속으로 생각되는 7균주를 1차 선발하였다. Bacillus 속은 Gram 양성, 간균, 통성혐기성이며 다양한 효소와 항생물질을 다량 분비한다고 보고된 세균으로 가축사료 첨가용 생균제 균주로 많이 이용되고 있으며 특히 포자를 형성하여 다양한 환경에서도 생존할 수있기 때문에 버섯 수확 후 배지 발효사료 제조에 적합한 생균제 균주로 판단된다.</p> <h2>분리균 UJ03의 특성</h2> <p>1차 선발된 균주의 Asp. flavus와 Asp. ochraceous에 대한 항균활성은 PDA 배지에서 paper diffusion 법에 따라 확인하였으며 항균활성이 강한 UJ03, UJ06, UJ07 균주를 2차 선발하였다. 버섯 수확 후 배지는 곡물함량과 수분함량이 높기 때문에 가축에게 치명적인 aflatoxin이나 ochratoxin을 생성하는 곰팡이에 오염될 가능성이 높다. 따라서 버섯 수확 후 배지 발효사료의 안전성과 보존성을 향상시키 위해서는 분리균과 같이 aflatoxin과 ochratoxin의 생성을 억제할 수 있는 생균제 균주의 개발이 필요하다. 또한 버섯 수확 후 배지에는섬유소가 많이 함유되어 있으므로 섬유소 구성성분인 hemi-cellulose, xylan, cellulose 등을 가수분해하는 효소를 생성하는 균주를 선발하기 위하여 agar diffusion 법에 따라 2차 선발된 균주의 xylanase와 cellulase 활성을 조사하였다. 그 결과 xylanase와 cellulase를 동시에 분비하는 1종의 균주(UJ03)를 최종 선발하였으며 최종 선발된 균주 UJ03을 본 실험에 사용하였다. 분리균 UJ03은 내생포자를 형성하는 Bacillus 속 균주로 고온에서도 생육할 수 있으며 Asp. flavus와 Asp. ochraceous에 대한 항균활성이 높고 xylanase와 cellulase를 동시에 분비하기 때문에 수분함량과 곡물함량이 높은 버섯 수확 후 배지 발효사료에 적합한 생균제 균주로 사용될 수 있을 것이다</p> <h2>분리균 UJO3의 분류, 동정</h2> <p>분리균 UJ03의 형태적 특성을 조사하기 위하여 \( 1 \% \) phos-photungstic acid로 negative stain한 후 투과전자현미경으로 관찰한 결과 분리균 UJ03은 크기가 \( 1.3 \sim 1.8 \times 0.9 \mu \mathrm { m } \)인 간균이 었으며 Gram 염색 결과는 양성이었다. 분리균 UJ03의 생화학적 특성은 Bacillus ID kit와 VITEK 2 system를 이용하여 분석하였으며 Bacillus ID kit로 분석한</p>