In vitro 반추위 미생물 발효에 의한 가스 생성량을 살펴보고, 반추위액이 첨가된 in vitro 실험에서 생리활성물질 6종을 농도별로 처리하여 12시간 배양 후, 측정한 암모니아태 질소 농도와 반추위 미생물의 CMCase 활성을 살펴보고자 한다.
<h2>반추위 미생물 발효에 의한 가스 생성량</h2> <p>In vitro 반추위 미생물 발효 (12시간)에 의한 가스 생성량은 Fig. 3에서와 같다. 가스 생성량 조사에서 생강, stevia 및 CLA는 \( 0.01 \% \) 및 \( 0.10 \% \)까지 첨가하였을 때는 반추위 미생물에 의한 가스 생성량에 영향을 미치지 않았으나, \( 1.00 \% \)로 높여서 첨가함으로써 가스 생성량이 유의적 \( (\mathrm{P}<0.05) \) 으로 감소하였고, scoria 첨가구는 0.10과 \( 1.00 \% \) 첨가에서 영향을 받지 않았으나 \( 0.01 \% \) 첨가로 인하여 가스발생량이 유의적</p> <p>\( (\mathrm{P}<0.05) \)으로 감소하여 첨가수준에 따른 효과가 다르게 나타났다. Germanium구와 charcoal구에서는 첨가수준에 따른 가스발생량에 차이가 없었다. 가스발생량과 반추위 미생물 성장이 밀접한 관계가 있음을 볼 때, 가스발생량이 급격히 떨어지는 첨가수준에서는 반추위 미생물 성장을 저해할 것으로 보아 생강, stevia 및 CLA를 반추위 미생물에 적용할 경우, \( 0.1 \% \) 정도에서 첨가수준이 결정되는 것이 바람직할 것으로 생각되었다.</p> <h2>반추위액 암모니아 농도</h2> <p>반추위액이 첨가된 in vitro 실험에서 생리활성물질 6종을 농도별로 처리하여 12시간 배양 후, 측정한 암모니아태 질소 농도는 Fig. 4에서와 같다.</p> <p>배양액의 암모니아 농도는 생강 첨가구에서 \( 1.00 \% \) 첨가 시에만 높고, 타 처리구에서는 거의 비슷한 농도를 나타내었다. 암모니아는 대부분의 반추위 미생물 성장에 있어 필수적인 질소원이고, 단백질이 분해되어야 생성되는데, 생강 첨가구에서는 배양액 중 암모니아의 농도가 높은 것으로 볼 때, 미생물에 의한 단백질 분해(proteolysis)를 증가시킨 것으로 사료되는데 그 정확한 기전은 알 수 없었다.</p> <h2>반추위 미생물의 carboxymethylcellulase (CMCase) 활성</h2> <p>반추위액이 첨가된 in vitro 실험에서 생리활성물질 6종을 농도별로 처리하여 12시간 배양 후, 측정한 반추위 미생물의 CMCase 활성은 Fig. 5에서와 같다.</p> <p>대조구와 비교하였을 때, scoria 첨가구의 경우 CMCase활력이 높게 나타나 scoria의 특성이 반추위 미생물의 CMCase의 활성을 촉진시키는 기작이 있는 것으로 사료된다. Stevia는 \( 1.00 \% \) 첨가구에서 CMCase의 역가가 경이적으로 높게 나타났는데, 이러한 이유는 stevia의 첨가로 인해 CMCase 효소 활력이 높아진 것이 아니라 stevia는 \( 80 \% \) 이상이 sucrose로 구성된 물질로서 높은 수준으로 첨가하면 배양액 속으로 stevia의 당들이 유리되므로 본 시험에서 유리 환원당의 수준으로 CMCase의 역가를 측정하는 방법의 사용으로 인하여 급격한 증가를 나타낸 것으로 생각된다. 한편, germanium 첨가구에서는 첨가수준에 따른 차이가 없었으나, charcoal, 생강 및 CLA 첨가구에서는 \( 0.01 \% \) 까지는 CMCase의 활력에 차이가 없었으나 \( 1 \% \) 첨가시, 대조구에 비해 유의적 \( (\mathrm{P}<0.05) \)으로 떨어졌다.</p>