화합물 1은 분자량이 778인 glycosyl diglyceride 화합물이며 화합물 2는 분자량 730이고 화합물 1 과 같은 구조에 지방산 두 개가 다른 구조이다.
<h1>결과 및 고찰</h1><p>화합물 1은 negative FAB-MS 에서 \( m / z \ 777 [\mathrm{M}-\mathrm{H}]^{-} \)의 분자이온 peak가 관측되어 분자량을 778로 결정하였다. \( \mathrm{IR} \) 스펙트럼으로부터 수산기 \( \left(3383 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \), 카보닐기 \( \left(1723 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \), 이중결합 \( \left(1612 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \) 이 있는 것으로 확인되었다. \( { }^{1} \mathrm{H}-\mathrm{NMR}(400 \mathrm{MHz} \),\( \mathrm{CD}_{3} \mathrm{OD}, \delta_{\mathrm{H}} \) ) 스펙트럼에서 \( \delta_{\mathrm{H}} \) 5.40-5.30 부근에서 여덟 개의 olefin methine proton 이 발견되었고, \( \delta_{\mathrm{H}} 5.30 \) 에서 oxygenated methine proton, \( \delta_{\mathrm{H}} 4.46 / 4.18,3.86 / 3.64 \) 에서 oxygenated methylene proton 두 개가 발견되었다. 두 개의 말단 methyl proton signal이 \( \delta_{\mathrm{H}} 0.97(6 \mathrm{H}) \) 에서, 여섯 개의 allyl methylene proton signal이 \( \delta_{\mathrm{H}} 2.80(4 \mathrm{H}), \delta_{\mathrm{H}} 2.06(8 \mathrm{H}) \) 에서, 14개의 methylene proton signal 이 \( \delta_{\mathrm{H}} 1.32-1.26(28 \mathrm{H}) \) 에서 관측되어 두 개의 \( n- \) aliphatic 지방산이 있음을 예상하였다. 하나의 oxygenated methine 이 \( \delta_{\mathrm{H}} 5.30(\mathrm{H}-2) \) 에서 관측되고, 두 개의 oxygenated methylene 이 각각 \( \delta_{\mathrm{H}} 3.86(\mathrm{H}-1 \mathrm{a}), \delta_{\mathrm{H}} 3.64(\mathrm{H}-1 \mathrm{~b}), \delta_{\mathrm{H}} 4.46 \)(H-3a), \( \delta_{\mathrm{H}} 4.18 \) (H-3b)에서 관측되어, glycerol이 존재함을 예상하였다. Oxygenated methylene \( \left(\delta_{\mathrm{H}} 4.46, \mathrm{H}-3 \mathrm{a} ; 4.18, \mathrm{H}-3 \mathrm{~b}\right) \)과 oxygenated methine \( \left(\delta_{\mathrm{H}} 5.30, \mathrm{H}-2\right) \) signal을 비교하여 화합물 1 이 두 개의 ester bond를 \( \mathrm{C}-2 \) 와 \( \mathrm{C}-3 \) 에 가진 구조임을 예상하였다. 당에서 유래한 1개의 hemiacetal proton signal \( \left(\delta_{\mathrm{H}}\right. \) \( 4.24,1 \mathrm{H}, \mathrm{d}, J=8.0 \mathrm{~Hz}) \), 4개의 oxygenated methine signal \( \left(\delta_{\mathrm{H}} 3.79 ; 3.75 ; 3.49\right), 1 \) 개의 oxygenated methylene signal \( \left(\delta_{\mathrm{H}} 3.71,2 \mathrm{H}\right. \), overlapped, \( \left.\mathrm{H}-6^{\prime}\right) \) 의 chemical shift 및 anomer proton signal의 결합정수 \( (J=8.0 \mathrm{~Hz}) \) 로부터 당의 구조가 \( \beta \) -galactopyranose임을 예상하였다. 이를 통해 이 화합물이 glycosyldiglyceride임을 예상하였다. \( { }^{13} \mathrm{C} N M R\left(100 \mathrm{MHz}, \mathrm{CD}_{3} \mathrm{OD}, \delta_{\mathrm{C}}\right) \) 스펙트럼에서 탄소수가 45개임을 확인하였으며, 이를 통해 탄소 수 18 개의 지방산 2 분자를 갖는 glycosyl diglyceride 화합물임을 확인하였다. 당의 chemical shift \( \delta_{\mathrm{C}} 105.2\left(\mathrm{C}-1^{\prime}\right), 74.7 \) \( \left(\mathrm{C}-3^{\prime}\right), 74.4\left(\mathrm{C}-5^{\prime}\right), 72.3\left(\mathrm{C}-2^{\prime}\right), 70.2\left(\mathrm{C}-4^{\prime}\right), 62.2\left(\mathrm{C}-6^{\prime}\right) \) 를 통해 이 당이 \( \beta \)-galactopyranose임을 확인하였다. 두 개의 ester\( \left(\delta_{\mathrm{C}} 175.5,175.3\right) \), 여덟 개의 olefin methine \( \left(\delta_{\mathrm{C}} 131.1,131.0\right. \),\( 129.2 \times 4,128.8 \times 2) \), 여섯 개의 allyl methylene \( \left(\delta_{\mathrm{C}}\right. \) 28.1-26.4), 18개의 methylene \( \left(\delta_{\mathrm{C}} 35.1-26.0\right) \), 그리고 두 개의 terminal methyl \( \left(\delta_{\mathrm{C}} 14.7 \times 2\right) \) carbon signal 들을 관측하였고 두 개의 지방산이 있음을 확인하였다. \( { }^{13} \mathrm{C}-\mathrm{NMR} \) 의 chemical shift값을 통해 linoleic acid에 이중결합이 Z형태를 갖는 것을 알 수 있었다. Glycosyl glyceride와 같은 화합물의 경우 \( \mathrm{NMR} \) 의 \( 1 \mathrm{D} \) data에서 glycerol에 결합한 지방산의 이중결합의 개수를 알 수 있고, \( { }^{13} \mathrm{C} \) data의 signal 개수와 chemical shift를 통해 구조를 대략적으로 예상할 수 있으나, 지방산으로부터 유래된 다수의 signal이 겹쳐져 관측되어 정확한 구조동정이 불가능하다. 따라서 \( \mathrm{GC} / \mathrm{MS} \) data를 통해 각 물질에 결합한 지방산을 확실히 동정한 후, glycerol에 결합한 위치를 \( \mathrm{NMR} \) 의 \( 2 \mathrm{D} \) data를 통해 확인하면, glycosyl glyceride의 정확한 구조동정이 가능하다. 알칼리 가수분해와 용매 분획을 통해 얻어진 지방산은 \( \mathrm{GC}-\mathrm{MS} \) 스펙트럼으로부터 \( 12.96 \mathrm{~min} \) 에서 peak를 관측하였고, mass 스펙트럼을 문헌(Wiley 9 Library)과 비교하여 linoleic acid로 동정하였다. 또한 화합물 1 의 광학회전 값 \( \left([\alpha]_{\mathrm{D}}^{25}+26.0^{\circ}, c=0.10, \mathrm{MeOH}\right) \) 이 문헌값과 유사함을 확인하였고, 식물의 glycosylglyceride의 생물발생학적 관점으로 보았을 때, C-2의 절대 배열이 \( S \) 임을 알 수 있다. 위의 data를 문헌값 [6]과 비교하여 화합물 1을 (2S)-1-\( O-\beta \)-D-galactopyranosyl-2,3-dilinoleoylglycerol로 구조동정 하였다.</p><p>화합물 2는 positive FAB-MS 에서 \( m / z \quad 731[\mathrm{M}+\mathrm{H}]^{+} \)의 분자이온 peak가 관측되어 분자량을 730 으로 결정하였다. IR 스펙트럼으로부터 수산기 \( \left(3383 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \), 카보닐기 \( \left(1723 \mathrm{~cm}^{-1}\right) \) 가 있는 것으로 확인되었다. \( { }^{1} \mathrm{H} \mathrm{NMR}\left(400 \mathrm{MHz}, \mathrm{CD}_{3} \mathrm{OD}, \delta_{\mathrm{H}}\right) \) 과 \( { }^{13} \mathrm{C} \) \( \mathrm{NMR}\left(100 \mathrm{MHz}, \mathrm{CD}_{3} \mathrm{OD}, \delta_{\mathrm{C}}\right) \) 스펙트럼을 통하여 화합물 1 과 같은 구조에 지방산 두 개가 다른 구조임을 확인하였다. 알칼리 가수분해와 용매 분획을 통해 얻어진 지방산은 GC-MS 스펙트럼으로부터 \( 11.06 \) min에서 peak를 관측하였고, mass 스펙트럼을 문헌(Wiley 9 Library)과 비교하여 palmitic acid로 동정하였다. 또한 화합물 2 의 광학회전 값 \( \left([\alpha]_{\mathrm{D}}^{25}+26.4^{\circ}, c=0.10\right. \), \( \mathrm{MeOH}) \) 이 문헌값 [7]과 유사함을 확인하였고, 식물의 glycosyl-glyceride의 생물발생학적 관점으로 보았을 때, \( \mathrm{C}-2 \) 의 절대 배열이 \( S \) 임을 알 수 있다. 위의 data를 문헌값과 비교하여 화합물 2를 (2S)-1-O- \( \beta \)-D-galactopyranosyl-2,3-dipalmitoylglycerol로 구조동정 하였다.</p>