본 실험은 비브리오식중독 피해를 저감하는 기능성 식품소재를 개발하기 위해 향균활성이 우수하다고 알려진 탱자와 매실, 그리고 V. parahaemolyticus균의 최적 추출조건을 제시하고 있다. 탱자는 열수로 \( 80 \sim 100^{\circ} \mathrm{C} \)에서 30분 추출했을 때 저지환이 \( 14.8 \) 로 최대의 향균활성을 보였다. 매실은 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \)에서 30분 가열 추출 했을 때 저지환이 \( 16.6 \mathrm{~mm} \) 로, 최대의 항균활성을 보였다. 탱자의 경우는 \( \mathrm{NaOH}\)를 첨가하여 가열해도 열수추출과 별다른 차이를 보이지 않았다. 한편 탱자와 매실의 주정추출물을 \( \mathrm{NaOH} \)와 반응시켰으나 두 시료 모두 주정추출물의 향균활성이 물추출 보다 낮게 나타나, 주정으로 친유성 활성물질을 충분히 추출할 수 없고, 친수성으로 전환 여부도 확인 할 수 없었다.
<h2>주정추출과 알칼리효과</h2> <p>탱자와 매실의 항균활성물질 중 지용성 물질도 존재할 가능성을 배제할 수 없어 수용성과 지용성 물질을 어느 정도 용해시킬 수 있고 인체 유해성이 낮은 주정을 이용하여 추출하고 주정을 제거하여 주정추출물을 얻었다. 각 시료의 주정 추출물을 \( \mathrm{NaOH} \)로 반응시킬 경우 친유성 물질의 친수성 전환 및 항균활성의 증가여부를 조사하고자, 각 추출고형물(탱자 및 매실원료 각 \( 200 \mathrm{~g} \) 해당량)에 물 \( 400 \mathrm{ml} \), 그리고 \( \mathrm{NaOH}\) \(0.0\), \(0.6\), \(1.0\), \(1.4 \) 및 \( 1.8 \mathrm{~g} \)씩을 첨가한 후 30분간 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \)로 가열하고 여과한 후 항균활성을 paper disk법으로 측정하였다. 이의 \( \mathrm{pH} \) 및 항균활성을 측정한 결과를 Table 2에서 보면, 두 시료 모두 주정추출물의 항균활성이 전반적으로 물추출의 결과보다 낮게 나타나서 주정으로써 친유성 활성물질을 충분하게 추출할 수 없고 친수성으로의 전환여부도 확인 할 수 없는 것으로 사료되었다. Wollenweber와 Dietz는 친유성의 flavonoid류가 세포막을 용이하게 침투하기 때문에 특별하게 항균활성이 높고, Mendoza 등은 식물체에서 추출한 항균활성물질인 kaurene diterpenoid에 친수성의 hydoxyl기를 도입하면 이 화합물의 항균활성이 급격하게 감소하며, 또한 대부분 식물체들의 항간활성이 정유성분에서 나타난다는 보고가 있었다. 따라서 본 실험에서 사용한 물과 주정의 극성용매로써 탱자와 매실의 항균활성물질 추출에는 한계가 있어, 인체 무해하면서 추출효율이 우수한 용매를 찾는 것이 차후의 검토대상이라고 생각된다. 한편, 주정추출물의 항균활성은 \( \mathrm{NaOH} \)를 첨가하지 않은 대조구에 비해 첨가량이 많을수록 항균활성은 점차 감소되어 알칼리처리가 주정추출물의 활성을 감소시켰다. 탱자의 경우, 이러한 결과는 물추출에서 \( \mathrm{NaOH} \)를 처리한 결과와 유사하여 물과 주정 추출물의 조성이 동일할 것으로 추정되었으나, 매실의 경우 상반된 결과를 보여 추출용매의 극성도의 차이에 따라 추출물의 조성이 다소 상이한 것으로 판단된다.</p> <h1>요 약</h1> <p>비브리오식중독의 피해를 저감시키는 기능성 식품소재를 개발하기 위하여, 예비실험에서 V. parahaemolyticus균에 항균활성이 우수한 것으로 밝혀진 탱자와 매실의 최적 추출조건을 조사하였다. 먼저, 열수로 추출한 실험에서 탱자의 최적조건은 \( 80 \sim 100^{\circ} \mathrm{C} \)에서 30분간, 매실의 경우 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \)에서 30분간 가열 추출한 시험액의 저지환이 각각 \( 14.8 \) 및 \( 16.6 \mathrm{~mm} \) 로써, 최대의 항균활성을 나타내었다. 또한 \( \mathrm{NaOH}\), \(\mathrm{K}_{2} \mathrm{CO}_{3} \) 및 \( \mathrm{NaHCO}_{3} \)의 알칼리 식품첨가물을 첨가하여 추출한 실험에서, \( \mathrm{NaOH} \)를 첨가한 경우 탱자의 항균활성은 증진되지 않았으나 매실의 항균활성은 다소 증진되었으며, \( \mathrm{NaOH} \) 이외 알칼리들은 공시 식물체들의 항균활성을 감소시켰다. \( \mathrm{NaOH} \)의 첨가농도를 단계적으로 달리하고 80, 100 및 \( 120^{\circ} \mathrm{C} \)에서 추출한 결과, 탱자의 경우 앞서의 열수추출 결과와 별다른 차이가 없었으나, 매실은 \( \mathrm{NaOH} \)를 \( 0.05 \mathrm{~N} \) 농도로 첨가하고 \( 120^{\circ} \mathrm{C} \)에서 추출한 조건에서 저지환 직경 \( 19.9 \mathrm{~mm} \)의 최대 항균활성을 나타내었다. 탱자와 매실을 주정으로 진탕추출하고 주정을 제거하여 주정추출물을 언었다. 이 추출물에 \( \mathrm{NaOH} \)를 단계적으로 첨가하고 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \)에서 30분간 물로 재추출한 결과, 주정추출물의 항균활성은 전반적으로 물추출한 결과보다 낮고 \( \mathrm{NaOH} \)의 첨가량이 많을수록 활성의 감소를 나타내었다. 따라서 본 실험에서, 탱자의 최적추출조건은 \( 80 \sim 100^{\circ} \mathrm{C} \)의 열수로 30분간, 매실은 \( \mathrm{NaOH} \)를 \( 0.05 \mathrm{~N} \) 농도로 첨가한 \( 120^{\circ} \mathrm{C} \)의 열수로 30분간 추출하는 것이 가장 효율적이라는 결론을 얻었다.</p>