현저한 증가를 보이지만 SMYEE 처리 군에서는 LPS 처리 군과 비교하여 상당한 감소한 경향을 보였다. iNOS, COX-2 단백질 발현이 감소하며 NF-κB p65 단백질의 발현도 상당한 억제효과를 보였다. SMYEE를 이용한 해조류 유래 추출물의 본 연구에서는 NF- \( \kappa \)B의 활성억제를 통해 대상들이 감소되었다. 활성화된 염증성 인자 관련하여 MAPKs 신호전달 경로를 억제하여 항염증 작용이 보인것으로 사료된다.
<h2>에탄올 추출물의 iNOS, COX-2, NF- \( \kappa \)B 발현 억제 효과</h2> <p>SMYEE의 처리가 iNOS와 COX-2 의 발현조절과 관련이 있는지를 조사하기 위하여 western blot 분석을 수행하였다. 그 결과, LPS 처리구에서는 iNOS와 COX-2 단백질 발현이 현저히 증가하였으나 SMYEE를 농도별 \( (0.1,1, 10,50,100 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ) \) 로 처리한 그룹에서는 농도의존적으로 감소한 경향이 보였다. 특히 iNOS의 발현량이 억제되는 현상은 SMYEE 처리가 \( \mathrm { NO } \) 생성에 대한 억제효과를 보이는 것과 일치하였다. 전사인자인 NF- \( \kappa \)B는 LPS에 의해 유도되는 염증성 매개물질인 iNOS와 COX-2 의 발현을 촉진시킨다. 핵분획의 NF- \( \kappa \)B p65 단백질의 발현은 LPS 처리 군에서는 대조구에 비해 유의성 있게 증가하였으나 SMYEE 처리구에서는 농도의존적인 감소 경향을 나타내었다. 만성적인 염증성 질환은 NF- \( \kappa \)B 의 비정상적인 활성과 관련이 있다. 따라서 대부분의 천연물 또는 기존의 항염증제는 핵 전사인자인 NF- \( \kappa \)B 활성을 억제하여 항염증 효과를 나타낸다고 알려져 있으며, NF- \( \kappa \)B 활성을 억제시킴으로 염증성 질병과 암의 예방 및 치료에 이용하고자 하는 연구가 활발히 진행중이다. 최근 연구에 따르면, Kim 등과 Bae 등은 각각 갈조류인 잘피 에탄올 추출물, 참도박 에탄올 추출물을 LPS로 유도된 대식세포에 처리하였을 때, NF- \( \kappa \)B의 활성억제를 통해 iNOS 및 COX-2의 발현량이 감소함을 밝혔으며, 해조류 유래 추출물인 SMYEE를 이용한 본 연구결과와 유사함을 보였다.</p> <h2>에탄올 추출물의 MAPKs 발현 억제 효과</h2> <p>대식세포의 활성화에는 여러 가지 세포 내 신호전달계가 관여하며 이들 신호를 제어함으로써 대식세포가 활성화 되어 발생되는 염증성 물질을 조절하는 연구가 여러 선행 연구에서 보여지고 있다. 이들 중 MAPKs (ERK, JNK, p-38)의 활성은 인산화에 의해서 나타나며 대식세포의 활성에 관여하고 특히 NF- \( \kappa \)B 를 활성화시켜 iNOS, COX-2 및 전염증성 매개물질의 발현에 중요한 역할을 한다고 알려져 있다. 따라서 SMYEE 처리에 따른 대식세포 내 인산화된 MAPKs 발현량에 미치는 영향을 western blot으로 분석한 결과, LPS로 유도된 RAW 264.7 세포에서 MAPKs에 속한 단백질이 모두 활성화 되었음을 알 수 있었다. 반면, SMYEE 를 처리한 결과, 인산화된 ERK, JNK, p-38의 발현이 LPS 처리군에 비해 농도의존적인 감소를 보였으며, 특히 인산화된 p-38 및 JNK 의 발현량이 50 및 \( 100 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 에서 LPS 를 처리하지 않은 대조군과 비슷한 수준까지 발현량이 감소함을 보였다. 본 연구 결과는 잘피 에탄올 추출물의 항염증 활성 효과 및 꽃지누아리 에탄올 추출물의 항염증 활성 효과에서 추출물 농도 의존적으로 MAPKs의 인산화 농도가 감소함을 보인 것과 유사하다. 이상의 결과를 종합해볼 때 SMYEE를 처리함으로써 LPS로 유도된 염증성 사이토카인, iNOS 및 COX-2와 같은 염증성 인자들의 활성화에 관련하여 MAPKs 신호전달 경로를 효과적으로 억제함에 따라 항염증 작용을 보인 것으로 사료된다.</p>