Ethylacetate 분획은 4.4배 연장된 PT결과와 같이 트롬빈보다 프로트롬빈에 대한 저해활성이 강력하였으며, 특히 15배 이상 연장된 aPTT결과와 같이 혈액응고인자 저해활성이 매우 강력함을 확인하였다. 따라서 흑마늘 열수 추출물의 ethylacetate분획은 향후 활성물질의 정제와 함께 항혈전제로 개발 가능하리라 판단된다. 먼저 아스피린은 농도 의존적으로 인간 혈소판 응집을 저해하였으며, \( 0.25 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)농도에서 혈소판 응집도는 무첨가구에 비해 \( 46.6 \% \)를 나타내었다. 상기의 결과는, 비록 흑마늘 추출물은 항혈전 활성이 미약하나, 흑마늘 추출물의 ethylacetate 분획은 프로트롬빈, 혈액응고인자 및 혈소판 응집을 저해하여 우수한 항혈전제로 이용 가능함을 제시하고 있다. 이상의 결과는,흑마늘의 가열숙성공정 중 다양한 폴리폐놀성분 및 환원당의 급격한 증가와 더불어 항산화 활성 및 항혈전 활성물질의 증가가 나타나는 것을 제시하고, 특히 흑마늘물 추출물의 ethylacetate분획물은 강력한 항산화 및 항혈전 활성을 나타내 향후 기능성 식의약품 소재로 개발 가능함을 제시하고 있다.
<h2>흑마늘 추출물 및 분획물의 항혈전 활성</h2> <p>생마늘 및 흑마늘 추출물의 항혈전 활성은 혈액응고 저해 활성과 혈소판 응집저해 활성을 측정하여 평가하였다. 혈액응고 저해활성 측정결과는 Table 4 에 나타내었으며, 용매 대조구인 DMSO의 TT, PT, aPTT 응고시간은 각각 24.0 \(\pm \) 0.18초, 18.6 \(\pm \)0.17 초 및 40.5 \(\pm \)0.86초로 나타났다. 먼저 임상에서 항혈전제로 사용되고 있는 아스피린(양성 대조구)은 \( 1.5 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도에서 TT, PT, aPTT를 무첨가구에 비해 각각 1.9배, 1.7배 및 1.9배 연장시켜 우수한 항혈전 활성을 나타냄을 확인하였다. 생마늘 추출물 역시 \( 5.0 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도에서 TT, PT, aPTT를 무첨가구에 비해 각각 1.5배, 1.1배 및 1.3배 연장시켜 우수한 트롬빈 저해(TT 시간 연장) 및 혈액응고인자 저해(aPTT 시간 연장)를 통한 항혈전 활성을 확인하였다. 그러나 흑마늘 추출물에서는 \( 5.0 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도에서 무첨가구에 비해 거의 혈전생성 시간의 변화가 나타나지 않아 항혈전 활성이 인정되지 않았으며, 흑마늘 추출물의 분획물에서도 ethylacetate 분획을 제외하고 나머지 분획물에서는 항혈전 활성은 인정되지 않았다. Ethylacetate 분획은 4.4배 연장된 PT 결과와 같이 트롬빈보다 프로트롬빈에 대한 저해활성이 강력하였으며, 특히 15배 이상 연장된 aPTT결과와 같이 혈액응고인자 저해활성이 매우 강력함을 확인하였다. 이와 같은 흑마늘 ethylacetate 분획의 강력한 혈액응고 저해는 일반적인 한약재, 해조류, 체리 보다 우수한 활성으로, 한방에서 혈행개선 약재로 사용되고 있는 사인, 계혈등, 오배자 등과 유사한 항혈전 활성이다. 따라서 흑마늘 열수 추출물의 ethylacetate 분획은 향후 활성물질의 정제와 함께 항혈전제로 개발 가능하리라 판단된다.</p> <p>한편 흑마늘의 혈소판 응집 저해를 평가하였으며, 그 결과는 Table 5 에 나타내었다. 먼저 아스피린은 농도 의존적으로 인간 혈소판 응집을 저해하였으며, \( 0.25 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도에서 혈소판 응집도는 무첨가구에 비해 \( 46.6 \% \)를 나타내었다. 생마늘 추출물 역시 농도 의존적으로 강력한 응집저해를 나타내었으며, 특히 \( 0.08 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도에서도 무첨가구의 \( 16.4 \% \), \( 0.16 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도에서 무첨가구의 \( 10.8 \% \)의 혈소판 응집도를 나타내었다. 그러나 흑마늘 추출물 \( (0.25 \mathrm{mg} / \mathrm{ml}) \)은 혈소판 응집저해 활성이 나타나지 않았으며, 분획물 중에서는 ethylacetate 분획 \( (0.25 \mathrm{mg} / \mathrm{ml}) \)에서 \( 39.1 \% \)의 혈소판 응집, butanol 분획 \( (0.25 \mathrm{mg} / \mathrm{ml}) \)에서 \( 66.7 \% \)의 응집이 나타나, ethylacetate 분획이 강력한 혈소판 응집저해활성을 가짐을 알 수 있었다. 상기의 결과는, 비록 흑마늘 추출물은 항혈전 활성이 미약하나, 흑마늘 추출물의 ethylacetate 분획은 프로트롬빈, 혈액응고인자 및 혈소판 응집을 저해하여 우수한 항혈전제로 이용 가능함을 제시하고 있다.</p> <h2>흑마늘 추출물 및 분획물의 인간 적혈구 용혈활성</h2> <p>흑마늘 추출물 및 분획물의 실제적 이용가능성을 검토하기 위해 인간 적혈구에 대한 용혈활성을 평가하였다. 먼저 triton X-100 (1 mg/ml)은 \( 99.9 \% \) 이상의 용혈활성을 나타내었으며, 용매 대조구로 사용된 DMSO (\(2\%\))는 용혈활성을 나타내지 않았다. 생마늘 및 흑마늘의 추출물과 이의 분획물들은 \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도까지 용혈활성이 나타나지 않았다. 이상의 결과는, 흑마늘의 가열숙성공정 중에 다양한 폴리폐놀 성분 및 환원당의 급격한 증가와 함께, 항산화 활성 및 항혈전 활성물질의 증가가 나타남을 제시하며, 특히 흑마늘 물 추출물의 ethylacetate 분획물은 강력한 항산화 및 항혈전 활성을 나타내어 향후 기능성 식의약품 소재로 개발 가능함을 제시하고 있다.</p>