본 실험에 사용한 양앵두는 2009년 경주지역에서 재배한 나폴레옹 종이며, 수입산과 국내산 모두 다양한 종류가 판매되고 있었다. 양앵두는 수세한 후 건조하여 물기를 제거하고 열수 추출물 조제에 사용하였으며, 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올을 이용하여 분획하고 물 잔류물을 회수하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>실험재료 및 시료의 조제</h2> <p>본 실험에 사용한 양앵두는 2009년도 경주지역에서 재배한 양앵두(나폴레옹 종) 이다. 시판 양앵두의 경우 수입산이 대부분이며, 국내산 판매품의 경우에도 다양한 종류가 혼재하여 판매되므로 동일 품종의 양앵두 시료 확보를 위해 양앵두 농가에서 직접 수확, 구입하였다. 양앵두는 수세한 후 건조하여 물기를 제거하고 열수 추출물 조제에 사용하였으며, 양앵두 \( 5 \mathrm{Kg} \)을 흐르는 물에 수세 후 정제수 1.2리터를 첨가하여 2시간 동안 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \)에서 추출하여 최종적으로 열수추출액 1 리터를 조제하였다. 이후 열수 추출물은 헥산(n-hexane), 에틸아세테이트 (ethylacetate), 부탄올(butanol)을 이용하여 순차적으로 분획하고 물 잔류물을 회수하였으며, filter paper(Whatsman No. 2)로 거른 후 감압 건조하여 분말화 하였다. 열수 추출물과 물 분획물은 증류수에 녹였으며, 기타분획물들은 DMSO(dimethylsulfoxide)에 녹인 후 적당한 농도로 희석하여 항균 활성 및 항산화 활성 평가에 이용하였다.</p> <h2>항균 활성 측정</h2> <p>열수 추출물 및 각각의 분획물의 항균 활성을 평가하기위해 사용한 세균 및 캔디다 진균들은 한국미생물보존센터(KCTC), 일본 Institute for Fermentation, Osaka(IFO) 및 한국농용미생물보존센터(KACC)에서 분양 받아 사용하였다. 한편 Candida albicans CCARM 14020 및 14021 균주는 한국 항생제 내성균주은행(CCARM)에서 분양받아 사용하였으며, 특히 14020 균주는 amphotericin B \( (\leq 0.5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \), flucytosine \( (\leq 0.5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \), fluconazole \( (\leq 1 \mu \mathrm{g} / \) \( \mathrm{mL}) \) 및 itraconazole \( (\leq 0.125 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL}) \) 에 대한 다제내성 균주로 알려져 있다. 항세균 및 항진균 활성 평가는 기존의 보고한 방법과 동일하게 이용하였으며, 각각 Nutrient agar (Difco Co., USA) 및 Sabouraud dextrose(Difco Co. USA) 배지상에서 다양한 시료 \( 5 \mu \mathrm{L} \) 를 멸균 disc-paper(지름 6.5\( \mathrm{mm} \))에 가한 후 세균의 경우 24시간, 진균의 경우 48시간 배양 후, 생육저지환의 크기를 측정하여 평가하였다. 대조구로는 항세균제인 ampicillin과 항진균제인 miconazole 및 amphotericin B(Sigma Co., USA)를 각각 \( 1 \mu \mathrm{g} / \mathrm{disc} \) 농도로 사용하였으며, 육안으로 생육저지환의 지름을 \( \mathrm{mm} \) 단위로 측정하였고, 3회 이상 평가 후 대표 결과로 나타내었다. 항균 활성이 인정되는 경우, 시료의 최소생육억제농도 (MIC: minimal inhibitory concentration)를 측정하였으며, 0.0 .25,0.5 .1 .0 , 및 \( 1.5 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) 농도의 시료들을 처리하여 24~48시간 배양한 후 생육억제를 육안 판정하여 측정하였다.</p>