자외선의 과다노출에 의해 사람의 피부는 피부 건강과 미적 측면에 영향을 주는데 특히 피부 흑화는 melanin 합성이 원인이다. 멜라닌은 tyrosine을 기질로 자동산화반응과 효소반응을 통해 합성되므로 최근 이 효소들을 억제하여 멜라닌 합성 저해를 위한 연구가 이루어지고 있다. arbutin, kojic acid, ascorbic acid 등 현재까지 알려진 미백원료들은 불안정하고 불분명한 효과와 안전성 문제 등에 의해 사용이 제안되기 떄문에 천연 미백제에 대한 연구가 활발하다. 이 중 동의보감에 기록된 도인승기탕은 미백에 효과가 있다고 알려져 있으나, 현재까지 미백에 대한 연구 결과는 보고된 바 없다. 따라서 본 연구에서는 도인승기탕 추출물을 처리한 melanoma 세포 배양을 통해 미백효과에 대한 영향을 확인하였다.
<h1>서 론</h1><p>사람의 피부색은 인종, 성별, 연령에 따라 다르지만 오늘날 사람들은 사회활동의 증가, 환경오염에 따른 오존층 파괴로 인하여 유해 자외선에 장기적으로 노출되고 있다. 피부가 자외선에 과다 노출됨에 따라 피부 홍반과 흑화, 색소침착, 광노화, 피부암등 피부 건강뿐만 아니라 미적 측면에서도 크게 영향을 받고 있다. 특히 색소 침착과 같은 피부 흑화는 피부에 존재하는 melanin 합성이 원인이 되는 것으로 알려져 있다.</p><p>멜라닌(melanin)은 자연계에 널리 존재하는 생체 고분자 물질로 인간의 피부 색깔을 결정짓는 색소로 알려져 있으며 자외선이나 free radical 로부터 피부가 손상되는 것을 방지하는 역할을 담당하고 있다. 이 색소는 멜라닌형성세포 내에 위치하는 멜라노좀(melanosome)에 의해 만들어지며 형성된 멜라닌은 각질형성세포로 이동하여 피부 상피층에 축적되어 색소침착 현상이 나타난다. 멜라닌 합성은 아미노산의 하나인 tyrosine을 기질로 tyrosinase, tyrosinase related protein-1 (TRP-1), tyrosinase related protein-2 (TRP-2)에 의해 3,4-di-hydroxyphenylalanine (DOPA)를 거쳐 DOPA quinone으로 전환되고 자동산화반응과 효소반응으로 DOPA chrome을 거쳐 흑갈색의 공동합체인 멜라닌이 생성하게 된다. 특히 tyrosinase 효소는 melanocyte에서 멜라닌 색소의 합성에서 주요 핵심 효소로써 eumelanin과 pheomelanin의 합성에 절대적으로 필요한 것으로 알려져 있고, 최근에는 이와같은 효소를 억제하여 멜라닌 합성 저해를 위한 연구가 활발히 이루어지고 있다.</p><p>현재 알려진 미백원료로는 arbutin, kojic acid, ascorbic acid 등의 물질들이 대표적으로 사용되어 왔으나 이러한 물질들은 불안정하여 분해나 착색, 이취, 효과의 불분명 및 안전성 문제 등으로 사용이 제한되고 있는 실정이다. 이에 따라 세포에 영향을 미치지 않으며 melanin 합성을 감소시키는 천연 미백제에 대한 연구가 활발히 진행 중이다. 천연소재를 활용한 미백 관련 연구로는 참나물, 라벤더, 복분자 추출물의 멜라닌 생합성 억제 효과등 연구가 있으며, 독활기생탕, 서시옥용산 등의 복합제제를 이용한 미백효과를 연구한 결과가 있다. 이러한 연구들은 melanoma 세포의 tyrosinase 활성과 tyrosinase protein 발현을 억제하여 melanin 형성을 억제시킨다고 보고하였다.</p><p>도인승기탕은 동의보감에서 기미, 미백, 여드름에 효능이 있다고 기록되어 있으며 어혈을 풀게 하여 피부가 거칠어진 사람에게 사용하는 천연약재의 복합처방으로 도인, 감초, 대황, 계지, 망초 등 5 가지 한약재로 구성되어 있다. 특히 도인승기탕을 구성하는 주요 약재 중에서 도인은 복숭아씨로서 천연항산화제, 노화억제, 항암억제제로 오래 전 부터 여성의 질환과 퇴행성 질환 등에 사용되었으며 anti tumor promoter, 항 어혈 작용 등이 보고되어 있다. 그리고 감초는 tyrosinase 억제제로 작용하여 멜라닌 합성을 억제하는 효과가 있어 kojic acid 보다 효능이 우수한 것으로 알려져 있으므로, 도인승기탕의 미백효과에 영향을 미칠 것으로 생각된다. 현재까지 도인승기탕이 어혈을 풀게 해주는 효능에 대한 연구결과는 나와있지만 미백에 관한 연구는 보고되지 않았다.</p><p>따라서 본 연구에서는 B16F10 melanoma 세포를 배양한 후 도인승기탕 추출물을 처리하여 melanin 함량, tyrosinase 활성, western blot을 이용하여 MITF, tyrosinase, TRP-1, TRP-2 등의 단백질 발현을 통해 미백효과에 미치는 영향을 관찰하였다.</p>