EPEE의 췌장 lipase 효소 활성 억제능 보유 유무 및 그 정도를 알아보기 위해 농도별 처리에 따른 lipase의 활성 변화를 분석하였다.EPEE가 3T3-L1 preadipocyte의 세포 생존율에 미치는 영향을 WST assay를 이용하여 분석하였더니 세포 증식억제를 보였는데 세포독성은 유발하지 않았다. EPEE가 MDI로 유도한 3T3-L1 preadipocyte의 adipogenesis에 미치는 시료의 영향을 분석하였더니 처리 농도의 증가에 따라 지방 세포 분화가 억제되는 것으로 나타났고 특히 50\(\mu\mathrm{g}/\mathrm{ml}\) 이상의 처리 농도에서 강한 억제 활성을 보여 염색된 지방의 양이 급격히 감소되었다.
<h1>결과 및 고찰</h1><h2>EPEE의 췌장 lipase 효소 활성 억제능 분석</h2><p>지방 분해 효소인 lipase는 주로 췌장에서 분비되어 TG를 지방산과 글리세롤로 가수분해하는 효소이다. 최근 비만의 치료를 위한 다양한 해법 중 천연에서 찾은 췌장 lipase inhibitor의 중요성에 관심이 높아지고 있으며 췌장 lipase의 활성 저해능은 시료가 보유한 항비만 활성을 예측하기에 매우 유용한 시험법이다. 이에 본 연구에서는 EPEE의 췌장 lipase 효소 활성 억제능 보유 유무 및 그 정도를 알아보기 위해 농도별 처리에 따른 lipase의 활성 변화를 분석하였다. 그 결과 0.05, 0.1, 0.15, 0.2, 0.25, 0.5, 1 \(\mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)의 시료 처리에 의해 시료 비처리 대조군 \( (100 \%) \) 대비 각각 63.5, 46.3, 38.9, 33.9, 32.0, 26.4, 12.8 \(\% \)의 lipase 효소 활성을 보였으며 효소 활성을 \( 50 \% \) 저해하는 농도(inhibitory concentration, \( \mathrm{IC}_{50} \) )는 \( 0.089 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \)로 나타났다. 이를 통해 EPEE가 췌장 lipase의 활성을 농도의존적으로 유의적으로 억제시키는 것을 확인하였으며 이러한 결과는 EPEE가 lipase inhibitor로 작용하여 항비만 활성을 보유할 가능성을 시사하였다.</p><h2>EPEE가 3T3-L1 preadipocyte의 세포 생존율에 미치는 영향</h2><p>세포 실험계에서 지방 생성 억제능의 평가를 위해 먼저 EPEE가 3T3-L1 preadipocyte의 세포 생존율에 미치는 영향을 WST assay를 이용하여 분석하였다. 그 결과 \(1-100 \mu \mathrm{g} / \) \( \mathrm{ml} \)의 시료처리에서 농도 증가에 따른 약한 세포 증식 억제를 보였으나 세포 독성은 유발하지 않음을 확인하였다.</p><h2>EPEE가 MDI로 유도한 3T3-L1 preadipocyte의 adipogenesis에 미치는 영향</h2><p>EPEE의 항비만 활성 보유 유무를 알아보기 위해 MDI로 분화를 유도한 3T3-L1 preadipocyte의 adipogenesis에 미치는 시료의 영향을 분석하였다. 그 결과 Fig. 2B와 2C에서 제시된 바와 같이 처리 농도의 증가에 따라 지방 세포 분화가 억제되는 것으로 나타났고 특히 \( 50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 이상의 처리 농도에서 강한 억제 활성을 보여 Oil Red O staining 결과 염색된 지방의 양이 급격히 감소되었다. 지방 생성의 억제 정도를 정량적으로 평가하기 위해 염색된 지방을 추출하여 TG 생성량을 측정한 결과 시료 처리 범위에서 농도의존적으로 감소됨을 보여 \( 50 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 처리에 의한 억제능이 \( 80.3 \% \)로 나타났다.</p>