본 연구에서는 돼지에게 선형가속기를 이용하여 방사선을 조사하고 이에 대한 영향을 분석하였다. 방사선 조사 전, 조사 후 EDTA-항응고제가 첨가된 vacutainer에 혈액을 채취하여 혈구 분석기를 이용해 백혈구, 적혈구, 혈소판의 상태를 분석하였다. 또한, Fluorescence activated cell sorter 분석을 진행하였으며, Ficoll-Paque PLUS를 이용하여 림프구를 전혈에서 분리하고 CD 계열 항체를 이용해 Helper-T-cell과 Cytotoxic-T-cell의 비율을 측정하였다.
<h1>재료 및 방법</h1><p>실험동물은 3주령 돼지 5두를 사용하였으며, 몸무게는 \( 4.60 \pm 0.28 \mathrm{~kg} \) (평균 \( \pm \) 표준편차) 이었다. 일주일의 적응기간을 거쳤으며, 적응기간과 실험 전 기간 동안의 사육환경은 온도 \( 23 \pm 3^{\circ} \mathrm{C} \), 습도 \( 50 \pm 10 \% \)로 유지하였고, 충분한 양의 먹이와 물이 공급된 독립된 사육장에서 사육하였다. 동물 사육과 실험은 "Guide for the Care and Use of Laboratory Animals (ILAR, 1996, USA.)"의 지침에 따라 수행되었다.</p><p>방사선 조사는 선형가속기(CLINAC 2100C/D. Varian, Palo Alto, (A, USA)를 사용하여 \( 4 \mathrm{~Gy}\), \(6 \mathrm{~Gy}\), \(8 \mathrm{~Gy} \)를 각각 단일 조사하였다. 방사선 조사하는 동안 마취는 medetomidine \( (10 \mu \mathrm{g} / \mathrm{kg} \), IM \( ) \), midazolam \( (0,2 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \), IM \( ) \), buprenorphine \( (5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{kg}\), IM) 를 사용하였으며, 방사선 조사 동안 복배 자세로 고정된 거치 대에서, 단일 전신 조사하였다.</p><p>각 돼지에서 방사선 조사 전, 조사 후 3일, 9일, 12일 15일에 EDTA-항응고제가 첨가된 vacutainer (BD bioscience)에 동물의 혈액을 목 정맥에서 채취하여 동물 전용 혈구 분석기 (Hemavet 850+, CDC Technologies Inc. USA)를 사용, 백혈구, 적혈구 및 혈소판의 상태를 검사항목 별로 분석하였다. 백혈구는 총 백혈구, 호중구, 호산구, 호염기구, 단핵구, 림프구를 감별 측정하고, 종수 및 백분율을 평가하였다. 적혈구는 총 적혈구, hemoglobin, hematocrit, RBC mean corpuscular volume (MCV). RBC mean corpuscular hemoglobin (MCH)등을 산출하였다. 혈소판은 총혈소판, mean platelet volume 등을 측정하였다.</p><p>Fluorescence activated cell sorter (FACS, Vantage SE, Becton Dickinson, USA) 분석은 목 정맥에서 혈액을 채취하여, EDTA -항응고제가 첨가된 Vacutainer에 옮긴 다음 방사선 조사 전, 방사선 조사 후 7일과 14일에 실시하였다. Ficoll-Paque PLUS(Amersham BioSciences, Sweden)를 사용하여, 채취한 전혈에서 림프구를 분리하였으며, 분리된 림프구는 CD3 (T cell marker), CD4 (Helper T cell, monocytes, Macrophages marker), CD8 (cytotoxic T cell, NK cell marker) 항체를 사용하여, Helper-T-cell과 Cytotoxic-T-cell의 비율을 측정 하였다.</p>