발효기간에 따른 F-TMR의 미생물 성장률(OD값)은 차별화되지 않고 7일에서 최고점을 찍은 후 점진적으로 감소하였다. 또한, 다양한 혐기성 미생물로 구성된 synbiotics가 혼입된 F-TMR의 in situ 건물 소실률은 Table 8에 기록되어 있다. pH와 lactic acid 함량, 두 요소는 발효의 척도로 사용되며, synbiotics가 첨가된 시료는 이 두 척도에서 대조구보다 더 나은 결과를 보여주었다. 더불어, in situ 실험에서 synbiotics 혼합 배양물(T1)이 추가된 시료는 발효 초기에 건물과 섬유소의 소실률이 높게 나타났으나, 유효 분해도 측면에서는 차이가 없었으며 이로 인해 synbiotics의 전반적인 처리 효과는 미흡하다고 평가되었다. 이러한 결과는 추가적인 in vivo 시험을 통해 확인해야 함을 시사하고 있다.
<h2>미생물 성장량 측정</h2> <p>발효기간별 F-TMR의 미생물 성장률(OD값)은 Table 7에서 보는 바와 같이 각 발효시간대별로 처리간에 차이가 없었으며, 발효기간 7일째에 정점을 나타낸 이후로 점차 감소하는 경향이었다.</p> <p>곰팡이 발효 추출물을 첨가한 bromegrass를 급여하면 반추위내 박테리아의 수가 증가하였는데, 특히 ruminococcus albus와 fibrobacter succinogenes의 성장량이 증가한다고 하였다. 그리고 효모 배양물의 첨가는 반추위에서 cellulose를 분해할 수 있는 박테리아의 성장을 촉진시키지만, 반추위에서 섬유소물질의 소실률에는 영향을 미치지 않았다고 하였다.</p> <h2>In situ DM, ADF, NDF 소실률 측정</h2> <p>여러 가지 혐기성 미생물로 제조한 synbiotics 혼합배양물을 첨가한 F-TMR의 in situ 건물 소실률을 측정한 결과는 Table 8과 같다. 발효기간별 F-TMR을 반추위 누관이 장착된 Holstein 젓소를 이용한 in situ 시험에서 건물 소실율은 반추위내 48시간 발효 시 건물 소실율이 평균 \( 71.4 \% \) 로서 거의 정점에 이르렀다. 발효초기인 1~3시간대에 곰팡이와 박테리아 synbiotics 첨가구인 T1구가 대조구에 비해 건물소실율이 높았던 것과 발효 48시간대에는 오히려 대조구에서 건물소실율이 가장 높았던 것을 제외하고, 다른 발효시간대에서는 처리간 차이가 없었다. 발효초기에 건물소실율이 T1처리구에서 높게 나타난 것은 synbiotics제제로 사용된 곰팡이와 박테리아의 상승작용에 의해 건물소화가 상대적으로 빠르게 일어난 것으로 사료된다.</p> <p>Williams 등도 곰팡이 배양물을 첨가한 반추위에서 목건초를 12시간 배양하였을 때, 건물 소실률이 \( 6.8 \sim 16.3 \% \)정도 증가하였지만, 그 후의 배양시간대에서는 오히려 감소되었다고 하였는데, 반추위 곰팡이는 사료 급여 후 빠른 시간 내에 population peak를 형성한다는 점을 고려할 때, 곰팡이는 초기 소실율과 밀접한 관련이 있다고 하였다. Williams 등도 여러 가지 조·농비율을 가지고 수행한 실험에서 반추위 발효 24시간대까지는 영양소 소실율이 증가하지만 48시간 이후에는 차이가 없었다고 하였다. 가축의 사료첨가제로 사용되는 효모는 대부분 생효모 배양물(live yeast culture) 형태로서 가축의 생산성 향상에 기여하고 있다. 여러 연구에서, 효모의 첨가가 건물 소화율에 거의 영향을 주지 않았거나 섬유소 분해에 약간 기여한다고 하였다. Filya 등은 박테리아 또는, 혼합 박테리아를 밀, 수수와 옥수수 silage에 첨가하여 in situ 건물 소실률을 측정하였을 때, 대조구와 차이가 없었다고 하여 본 시험의 결과와 유사하였다.</p> <p>Table 9는 반추위내 발효시간별 건물 소실율을 기초로 하여 반추위내 건물 분해상수와 시간당 분해속도에 대한 비선형 회귀방정식과 반추위내 통과속도를 고려한 건물의 유효분해도를 나타내고 있다. 분해상수 'a'는 반추위내에서 빠르게 분해되는 0시간대에 소실되는 부분이고, 'b'는 주어진 시간동안 반추위미생물에 의해 서서히 분해되는 부분이며, 'c'는 시간당분해 상수, 그리고 ERD는 내용물이 반추위를 통과하는 비율이 시간당 \( 4 \% \)라고 가정했을 때, 건물의 반추위내 유효분해도를 나타낸다. T1구에서 빠르게 분해되는 건물부분이 가장 많았으며, 대조구에서 낮게 나타났는데, 이는 Table 8의 건물소실율에서 발효초기의 결과를 그대로 반영하고 있다. 'a'부분의 결과와 반대로 서서히 분해되는 건물부분은 대조구에서 많았으며, 시간당분해 속도인 ' 'c' 값에서도 T1에서 \( 2.92 \% \), 대조구에서 \( 5.42 \% \)로서 잠재적으로 분해될 수 있는 건물부분이 많았던 대조구에서 분해속도가 빨랐다. 건물의 분해상수 "c"값이 클수록 반추위내에서 정체하는 시간(retention time)은 감소하므로 영양소 소실률이 감소될 수 있어, TMR에 혐기성 미생물로 발효시킬 때 이 점을 고려하여야 할 것으로 사료된다.</p> <p>사료의 반추위 통과속도를 시간당 \( 4 \% \)로 가정하였을 때, 건물의 유효분해도는 \( 50.79 \sim 52.97 \% \)로 대체로 비슷한 수준이었다.</p> <p>섬유소인 NDF와 ADF의 반추위내 발효시간별 소실율은 Table 10에서 보는 바와 같이 발효초기인 9시간대 까지는 소실율의 결과가 발효시간의 증가에 따라 일정하게 증가하는 결과를 나타내지 못하고 있는데, 이러한 결과는 in situ 시험의 한계로서 nylon bag의 상태나 세척과정 등에서 의해 일어날 수도있다. NDF 소실율은 발효 3시간대와 발효 48시간대에서 곰팡이와 효모를 조합한 synbiotic 첨가구에서 가장 낮았으며(p<0.05), 다른 발효시간대에서는 처리간 차이가 없었다. 이러한 결과는 곰팡이와 효모를 조합하는 것은 상호 보완적 관계이기보다 상호경쟁적인 관계로서 작용할 수 있다는 것을 의미하고 있다. 발효 48시간대에 NDF 소실율이 정점에 도달하였으며, 다른 발효시간대에서는 처리구간에 차이가 없었다.</p> <p>ADF 소실율에서는 발효 3시간까지 T1구에서 가장 높았으며, T2구에서 가장 낮았으며, 다른 발효시간대에서는 처리간 차이가 나타나지 않았다.</p> <p>Filya 등은 박테리아 또는, 흔합 박테리아를 접종하여 밀과 수수 silage 제조 후, in situ 실험을 하였을 때, 48시간 배양 후의 사료 중 NDF 소실률에는 영향을 끼치지 않았다고 하였다. 이러한 결과는 이전에 Filya 등의 밀과 수수 및 옥수수 silage로 실험한 결과와 동일하였다. 효모 배양물을 첨가하였을 때, 대조구에 비해 NDF 및 ADF 소실률은 차이를 보이지 않았고, 효모를 첨가한 in vivo 실험에서도 ADF 소화율에 영향을 미치지 않았다고 하였다.</p> <p>이상의 결과를 종합해 볼 때, 발효의 척도가 되는 pH와 lac-tic acid 함량은 synbiotics 첨가구가 대조구에 비해 좋은 결과를 나타내었으며, in situ 시험에서 발효초기에 건물과 섬유소 소실율이 곰팡이와 박테리아를 조합한 synbiotics구(T1)에서 높게 나타났으나 영양소의 유효 분해도에서는 처리간 차이가 나타나지 않아 전체적으로 synbiotics의 처리효과는 미흡한 것으로 조사되었다. 그러나 향후 추가적인 in vivo 시험을 통하여 이거한 synbiotics제제의 첨가효과가 규명되어야 할 것으로 사료된다.</p>