특히 티로시나아제는 멜라닌 합성의 핵심 효소로, 멜라닌 합성 억제 연구가 활발히 이루어지고 있다. 이에 따라, 세포에 영향을 미치지 않는 천연 미백제에 대한 연구도 진행 중이다. 본 연구에서는 감꼭지 추출물을 이용하여 티로시나아제 억제효과와 멜라닌 생성 억제효과를 측정하였고, 이를 통해 미백효과를 관찰하였다. 멜라닌은 피부를 자외선과 자유 라디칼로부터 보호하는 역할을 하는 생체 고분자 물질이다.
<h1>서론</h1> <p>피부가 자외선 자극을 받으면 각질형성세포(keratinocyte)에서 endothelin-1 (ET-1), 부실피질 자극 호르몬, 일산화 질소 (\( \mathrm{NO} \)) 등이 분비되어 피부색소가 증가하게 된다. 피부색소는 기저층에 존재하는 멜라닌 세포가 만들어내는 멜라닌의 함량에 의해 결정되며, 이러한 멜라닌은 자연계에 널리 존재하는 생체 고분자 물질로 자외선이나 자유 라디칼로부터 피부가 손상되는 것을 방지하는 역할을 담당하고 있다. 오늘날 사람들은 사회활동의 증가, 환경오염에 따른 오존층 파괴로 인하여 유해 자외선에 장기 노출로 인한 멜라닌 침착 과다 현상으로 피부 흑화, 색소침착, 피부암등 피부 건강뿐만 아니라 미적 측면에서도 크게 영향을 받고 있다. 특히 색소 침착과 같은 피부 흑화는 피부에 존재하는 멜라닌 합성이 원인이 되는 것으로 알려져 있다. 멜라닌은 멜라닌형성세포 내에 위치하는 멜라노좀에 의해 만들어지며 형성된 멜라닌은 각질형성세포로 이동하여 피부 상피층에 축적되어 색소침착 현상이 나타난다. 멜라닌 합성은 아미노산의 하나인 티로신을 기질로 티로시나아제에 의해 3,4-dihydroxyphenylalanine (DOPA)를 거쳐 DOPA quinone 전환되고 자동산화반응과 효소반응으로 DOPA chrome을 거쳐 흑갈색의 공동합체인 멜라닌이 생성하게 된다. 특히 효소인 티로시나아제는 멜라노사이트에서 멜라닌 색소의 합성에서 주요 핵심 효소로, 절대적으로 필요한 것으로 알려져 있고, 최근에는 이와 같은 효소를 억제하여 멜라닌 합성 저해를 위한 연구가 활발히 이루어지고 있다. 현재 알려진 합성미백원료들은 사용 중 분해나 착색, 이취 등으로 인해 불안정하여 안정성 문제 등이 대두 되고 있다. 따라서 최근에는 세포에 영향을 미치지 않으며 멜라닌 합성을 감소시키는 천연 미백제에 대한 연구가 활발히 진행 중이다. 천연물을 원료로 한 미백 기능성 소재로는 신선초, 마황, 백출, 찔레, 복분자 추출물 등이 있으며 이외에도 많은 연구가 진행되고 있다.</p> <p>감꼭지(Diospyros kaki calyx)는 한약명을 시체라고 말하며 민간요법에서는 기침과 천식, 만성기관지염 치료, 딸국질 멈춤, 야뇨증, 혈압강화작용에 효과적이라고 알려져 있다. 현재까지 감꼭지에 관한 연구로는 김 등이 보고한 감꼭지 추출물의 항산화 및 항염증에 관한 활성이 알려져 있으며, 사 등이 보고한 사람의 plasma에서 thrombin time (TT)를 사용한 혈액응고 저해 물질 연구와 백 등이 보고한 in vitro와 in vivo 항혈전 효능 연구가 알려져 있으나 감꼭지의 미백효과에 관한 연구는 아직 보고된 바가 없다. 따라서 본 연구에서는 감꼭지 추출물과 용매별 분획물을 이용하여 티로시나아제 억제효과 측정과 B1610 멜라노마 세포를 배양한 후 멜라닌 생성 억제효과와 티로시나아제 활성을 측정하고, 효과가 뛰어난 분획물을 western blotting을 이용하여 티로시나아제, TRP-1, TRP-2의 단백질 발현을 측정하여 미백효과를 관찰하였다.</p>