본 연구는 국내 토양에서 분리된 저영양 세균 자원을 이용해 탈질 세균을 선발하고 이들의 종 다양성 및 생태적 특성을 분석하여, 질소 과다 축적된 생태환경을 선 순환시키는 데 기여할 수 있는 새로운 미생물 및 유전자원 개발의 기반이 될 자료를 제공하고자 하였다. 북부지방, 도서지방, 특수 생태지역 등의 생태가 잘 보존된 토양을 사용하였고, 세균의 증식에는 액체 영양 배지인 NB배지와 DNB배지를 사용하였다.
<p>따라서 본 연구에서는 국내 토양 가운데 생태환경이 잘 보존된 지역에서 분리된 저영양 세균 자원으로부터 탈질 세균을 선발하여 이들의 종 다양성과 생태적 특성을 분석함으로써 질소가 과다 축적된 생태환경을 선 순환시키기 위한 새로운 미생물 및 유전자원 개발의 기초자료를 제공하고자 한다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>시료 채취와 미생물 배양 배지</h2> <p>시료는 한국의 북부지방, 도서지방, 특수 생태지역의 생태가 잘 보존된 토양을 사용하였다. 각 시료의 채취 GPS; 용 늪 \( \left ( \mathrm { E } : 128 ^ {\circ } 07 ^ {\prime } 30 ^ {\prime \prime } \mathrm { N } : 38 ^ {\circ } 12 ^ {\prime } 53 ^ {\prime \prime } \right ) \), 백령도 \( \left ( \mathrm { E } : 124 ^ {\circ } 53 ^ {\prime } \mathrm { N } : 37 ^ {\circ } 52 ^ {\prime } \right ) \), 대청도 \( \left ( \mathrm { E } : 124 ^ {\circ } 53 ^ {\prime } \mathrm { N } : 37 ^ {\circ } 53 ^ {\prime } \right ) \), 소청도 \( \left ( \mathrm { E } : 124 ^ {\circ } 55 ^ {\prime } \mathrm { N } : 37 ^ {\circ } 52 ^ {\prime } \right ) \), 홍도 \( \left ( \mathrm { E } : 125 ^ {\circ } 12 ^ {\prime } \mathrm { N } : 34 ^ {\circ } 41 ^ {\prime } \right ) \), 흑산도 \( \left ( \mathrm { E } : 125 ^ {\circ } 26 ^ {\prime } \mathrm { N } : 34 ^ {\circ } 41 ^ {\prime } \right ) \), 연평도 \( \left ( \mathrm { E } : 125 ^ {\circ } 43 ^ {\prime } \mathrm { N } : 37 ^ {\circ } 40 ^ {\prime } \right ) \), 제주도 \( \left ( \mathrm { E } : 126 ^ {\circ } 58 ^ {\prime } \mathrm { N } : 33 ^ {\circ } 12 ^ {\prime } \right ) \), 거문도 \( \left ( \mathrm { E } : 127 ^ {\circ } 11 ^ {\prime } \mathrm { N } : 34 ^ {\circ } 00 ^ {\prime } \right ) \), 우도 \( \left ( \mathrm { E } : 128 ^ {\circ } 25 ^ {\prime } \mathrm { N } : 35 ^ {\circ } 33 ^ {\prime } \right ) \), 독도 \( \left ( \mathrm { E } : 131 ^ {\circ } 52 ^ {\prime } \mathrm { N } : 37 ^ {\circ } 14 ^ {\prime } \right ) \). 세균의 증식은 액체 영양(nutrient broth, NB) 배지와 NB배지를 희석한(diluted nutrient broth, DNB) 배지를 사용하였다. 표준 NB 배지의 조성은 beef extract, \( 10 \mathrm { ~g } \); peptone, \( 10 \mathrm { ~g } \); NaCl, \(5 \mathrm { ~g } \); distilled water, \( 1000 \mathrm { ~mL } \)이며 \( \mathrm { pH } \) \(7.0 \sim7.2 \)로 조정하였다. 그리고 NB 배지를 \( 10 ^ { -1 } \) 배, \( 10 ^ { -2 } \) 배, \( 10 ^ { -3 } , 10 ^ { -4 } \) 배로 증류수에 희석한 4종류의 희석 DNB 배지를 사용하였다.</p>