세균은 주로 편모의 회전에 의해 움직이는데 그람 음성 세균인 Salmonella typhimurium의 fliC 유전자 서열을 기반으로 E. tarda의 편모 유전자를 조사한 결과 PFAP와 FDP유전자가 유사한 상동률을 보임을 확인하였다. 환경조건에 따라 편모가 발현하여도 외부에서 조립되지 않아 기능을 가지는 편모를 형성하지 못할 수 있는데 E.tarda는 두개의 편모유전자를 가지고 있으며 이들간의 아미노산 상동률이 \( 93 \% \) 로 높은 편이므로, 임의로 선정된 PFAP를 과발현하고 정제하였다.
<h2>염농도에 따른 E. tarda CK41의 편모형성</h2> <p>세균은 다양한 방법으로 운동성을 가지는데, 주로 편모의 회전에 의한 유영(swiming)과 비유영성의 활주(gliding) 등에 방법으로 자신의 힘으로 움직일 수 있다. E. tarda CK41는 염색체에 편모의 구성요소들을 가지고 있으나, 염농도에 따른 운동성은 편모에 의한 것인지는 알려지지 않았다. 따라서 다양한 염농도에서 편모의 형성 유무를 재료 및 방법에서 기술한 방법에 의해 투과 전자 현미경을 이용하여 그 형태학적 차이를 육안으로 관찰하였다. 담수와 해수조건의 염농도에서 12 시간 배양한 \( E . \operatorname { tarda } \mathrm { CK } 41 \) 의 표면구조를 관찰<p>한 결과, \( 1 \% \mathrm { NaCl } \) 에서 자란 \( E . \operatorname { tarda } \mathrm { CK } 41 \) 의 경우 다수의 편모를 형성하는 것을 확인한 반면, \( 3.5 \% \mathrm { NaCl } \) 의 경우 다수의 편모가 형성되지 않는 것을 확인하였다. 투과 전자 현미경 결과 편모가 염농도에 따른 운동성에 관여하는 인자인 것을 확인할 수 있었으며, E. tarda 유전체 내에서 편모 생성 유전자를 찾아보았다. 그람 음성 세균인 Salmonella typhimurium의 fliC 유전자 서열을 기반으로 ClustralW2 EBI alignment를 이용해 E. tarda의 편모 유전자를 조사해본 결과 \( 72 \% \) 의 상동률을 가지는 Putative E. tarda Flagellin Associated Protein (PFAP) 유전자와 \( 74 \% \) 의 상동률을 가지 는 Flagellin Domain Protein (FDP) 유전자를 확인할 수 있다.</p> <h2>염농도에 따른 편모 발현의 확인</h2> <p>환경조건에 따라 편모단백질의 구조가 변화하여 편모가 발현은 하지만 외부에서 조립되지 않아 기능을 가지는 편모를 형성하지 못한다는 보고가 있다. 주요한 환경조건인 염농도 에 따른 운동성의 차이가 편모의 형성에 의한 것임을 투과 전자 현미경으로 확인하였지만(Fig. 3), \( 3.5 \% \mathrm { NaCl } \) 조건에서의 편모의 부재가 편모 유전자의 발현이 되지 않기 때문인지, 편모 유전자는 발현이 되지만 편모가 정상적으로 즈립되지 않아서 유지를 못하는 것인지를 알아보기 위하여 편모 유전자 특이적인 다클론성 항체를 제작하였다. E. tarda는 두개의 편모유전자(PFAP, FDP) 를 가지고 있으며 이들간의 아미노산 상동률이 \( 93 \% \) 로 높은 편이기 때문에, 두 개의 편모 유전자중 임으로 선정된 PFAP에 대한 항체를 재료 및 방법에서 기술한 방법으로 제조한 재조합 플라스미드 pBP793을 대장균 발현시스템을 이용하여 과발현하고 정제하였다.</p>