Probiotics는 'for life'의 그리스어 원어를 뜻하며, 주로 장내 미생물 군집의 균형을 돕는 미생물과 그들의 대사산물을 포함한다. 가축용 및 인간용 생균제에는 주로 Lactobacillus, Bifidobacterium, Enterococcus 등의 유산균과 Bacillus sp.가 사용되며, 보조사료 생균제의 경우 균수가 최소 \(10^6 \mathrm{CFU/g}\) 이상일 때 허가를 받을 수 있다. 더 나아가 더 빠르고 정확한 생균제 제품의 검증을 위해 Real time PCR 기법을 활용한 검출법의 중요성이 증대되고 있다. 이에 따라 본 연구에서는 가축용 생균제의 유산균 정량 및 정성 분석을 위해 배지법 및 Real-time PCR을 사용하였다.
<h1>서 론</h1> <p>Probiotics는 그리스 어원의 'for life'의 뜻을 가진 생균을 의미하며 장내의 미생물 군집의 균형에 도움을 주는 미생물과 그 미생물이 생산한 대사산물을 포함한다. 국내에서 생균제로 가장 많이 사용되고 있는 미생물은 Lactobacillus, Bifidobacterium, Enterococcus와 같은 유산균이며, 효모, 곰팡이, Bacillus sp. 등이 주로 가축용으로 사용되고 있다. 현재 국내에 유통되고 있는 생균제는 수의과학검역원에서 허가를 취득한 동물약품 생균제와 각 시 ◦ 도에 등록한 보조사료 생균제 제품 군으로 분류할 수 있다. 동물용 의약품 생균제의 경우 미생물의 성분, 함량 및 균수측정, 임상시험과 독성, 안정성 시험 등을 거쳐 허가를 취득하며, 보조사료 생균제는 각 시 ◦ 도에서 관리하며 신청 시 업체가 지정한 사설연구기관에서 측정한 균수가 최소 \( 10 ^ { 6 } \mathrm { CFU } / \mathrm { g } \)이상이면 허가를 취득한다. 이를 검증하기 위한 방법으로 식품공전 및 사료공정서에 등재된 표준 시험법에 따라 증균 배양과 선택배지를 이용한 방법을 사용하고 있다. 그러나 표준 시험법인 배지법은 여러 배양단계와 생화학적 확인검사를 거쳐야 하므로 결과를 얻기까지 많은 시간과 노동력이 소요되며 위양성(false positive re-action)이나 위음성(false negative reaction)의 결과를 얻을 수 있는 단점이 있다. 따라서 이러한 표준 시험법을 개선하고 보완하기 위한 추가적인 검출법이 요구되는 실정이며, 신속하고 정확한 검출을 위하여 면역 기법이나 유전자 기법을 활용한 검출법의 활용이 증가하고 있다. 여러 기법 중 특히 Real time PCR 기법은 가장 빠르고 신뢰성 있는 방법으로 알려져 있다. 이 방법은 기존의 PCR과는 달리 전기영동의 과정이 필요 없이 유전자의 증폭 시 증가되는 형광을 모니터상에서 실시간으로 관찰 할 수 있다는 장점이 있다. 따라서 전기영동에 의한 오염을 줄이고 검출 시간을 줄일 수 있으며 정량적인 분석까지 가능하다. 또한 검출한계가 이론상 1 \( \mathrm { CFU } / 25 \mathrm { ~g } \)인 매우 민감한 방법으로 검출 가능하다. 이러한 신속 검출법이 표준방법의 대체 방법으로 사용되기 위해서는 검사방법의 공인 평가 및 검증 과정을 거쳐 국제적 신뢰도와 공정성이 확보 되어야 하며, 신속키트법과 표준법을 비교 검증하는 연구가 활발히 진행되고 있는 상황이다. 본 연구는 가축용 생균제 제품을 신속하고 정확하게 검증하기 위하여 일반적인 배지법 및 Real-time PCR을 이용하여 가축용 생균제의 유산균 정량 ◦ 정성 분석 및 비교 분석하였다.</p>