본 논문은 피조개 양식 환경에 있는 해저 퇴적물과 피조개 내의 미생물 분석 등을 토해 피조개의 대량폐사 원인을 찾고자 하였으며, 폐사율이 높은 지역과 그렇지 않은 지역을 각각 조사함으로써 비교 및 분석하였다. 피조개 내의 헤모글로빈의 변화로 인한 혈색소의 변화를 폐사의 징후에 대한 판단지표로 사용하고 있는바, 대량폐사에 대한 다양한 원인 중 병원균에 의한 헤모글로빈의 용혈현상을 피조개의 대량폐사 주 원인으로 판단하고 용혈 활성을 보이는 균주를 분리, 선별하여 16S rDNA 서열 정보를 통해 모든 균주를 동정하였다. 이로부터 차후 대량폐사 원인 균주를 찾아내고자 하였다.
<h1>서 론</h1> <p>피조개는 돌조개과 패류로, 우리나라 남해 내해 또는 내만의 펄바닥에서 서식하며, 꼬막류 중에서 가장 크고 육질이 연하며 강정식으로도 알려져 전량이 일본으로 수출되는 등 수산양식업적으로 매우 중요한 품종이다. 이러한 피조개는 1970년대부터 대량 양식을 시작하여 1986년에 약 60,000 여 톤에 달하는 최고의 수확량을 기록하였으나, 1980년대 말부터 급격한 생산량 감소를 보여 2007년의 경우 약 3,000 여 톤으로 줄어들었으며, 생존율의 경우 3-5%를 기록할 정도로 낮다. 이러한 생산량의 감소는 다양한 원인이 있으나, 주로 대량폐사의 형태가 가장 큰 원인이다. 그러나 아직까지 대량 폐사의 정확한 원인은 밝혀져 있지 않으며, 많은 연구자들이 대량폐사에 대한 원인을 찾고자 수온, 염도 및 빈산소 수괴 등의 연안해역의 수해양적 환경요인과 이로 인한 피조개의 생리적 변화 또는 영향 등에 대하여 연구하였지만 피조개에 공생 또는 공존하는 미생물과의 상관관계에 대한 연구는 전무한 실정이다. 따라서 피조개 양식환경인 해저 퇴적물과 피조개 체내에 존재하는 미생물의 분석 및 다양성 조사를 통하여 피조개 대량폐사의 원인 규명에 접근하고자 하였다.</p> <p>환경에 존재하는 미생물 평가방법은 다양하나 그 중 py-ro-sequencing 방법을 이용한 메타게놈 분석법은 난배양성 미 생물(viable but non-culturable, VBNC)의 존재도 밝혀 낼 수 있기 때문에 최근 매우 유용한 방법으로 알려져 있다. 그러나 이러한 연구방법은 원인 미생물의 미생물학적, 생화학적인 특징을 밝혀내기가 힘들다는 단점 때문에 특정 후보원인균을 탐색하고 검증이 필요한 실험에서는 적합하지 않다. 따라서 배양 가능한 모든 균주의 분리와 분석을 동시에 수행함으로써 남해안 피조개 양식장의 미생물 군집 특성을 분석하였고 이러한 미생물 자원을 수집하여 정확한 폐사원인을 규명하고자 하였다.</p> <p>본 연구에서는 남해안의 피조개 양식장 중 폐사율이 높으며 대량폐사가 자주 보고되는 지역(강진만)과 폐사의 발생빈도가 낮은 지역(진해만)을 선정하여 해저퇴적물과 피조개 내의 미생물을 비교·분석하였다. 또한, 두 지역의 표층해수 온도는 4 월부터 상승하여 8 월에 가장 높았으나, 피조개가 서식하는 저층수온은 4 월에서 6 월까지 상승, 일정한 온도를 유지하다가 10 월부터 감소하는 특징을 보였으며, 따라서 저층의 수온이 가장 먼저 고온에 도달하는 6 월의 해저 퇴적물 및 피조개내의 미생물 균총을 분석 하였다.</p> <p>대부분의 해양 갑각류나 연체동물은 혈액 내 산소운반 작용을 하는 혈장성분으로써 헤모시아닌(hemocyanin)을 가지며 이러한 성분은 공기중의 산소와 반응시 구리성분에 의한 청색을 나타내게 된다. 그러나 피조개의 경우 다른 갑각류나 이매패류와는 다르게 혈액내의 산소운반 역할을 혜모글로빈(hemoglobin)이 수행하기 때문에 붉은색의 혈장 성분을 가지고 있으며, 이러한 특징 때문에 생리적 변화 또는 환경에 대한 영향을 평가 할 때 체내 혜모글로빈의 변화를 판단지표로 사용한다. 혜모글로빈의 변화는 피조개의 혈색소 변화와도 관련이 있으며, 혈색소에 따라서 폐사의 징후나 환경에 대한 저항력 판단지표로써 삼으며, 이는 곧 피조개의 상품성으로도 연관된다. 따라서 대량폐사에 대한 다양한 원인 중 병원성 미생물에 의한 혜모글로빈의 용혈현상이 피조개의 생리활성 및 대량폐사의 주요원인이라고 판단하여 샘플에서 분리한 다양한 균주 중에서 헤모글로빈의 용혈현상에 영향을 미칠 수 있는 알파(alpha) 또는 베타(beta) 용혈 활성을 보이는 균주만을 분리, 선별하여 16S rDNA서열 정보로써 각각의 모든 균주를 동정하였다. 그리고 이러한 결과를 바탕으로 남해안 피조개 양식장 환경의 미생물 다양성을 분석하였으며, 이를 통하 여 차후에 대량폐사 원인 균주를 규명하고자 하였다.</p>