임상 검체에서 추출된 총 54개의 균주 중 64.8%는 중환자실 환자, 나머지 35.2%는 병동환자로부터 분리되었다. 이들 균주 중 Imipenem에 내성을 보이는 것은 Pseudomonas aeruginosa 2균주, Acinetobacter baumannii 21균주, Pseudomonas spp. 2균주 그리고 Enterobacter cloacae 2균주였다. MBL을 생성하는 균주는 22개로, A. baumannii 12균주, P. aeruginosa 7균주, P. putida 2균주 그리고 E. hormaechei 1균주로 확인되었다. 다양한 \( \beta \)-lactam항생제에 대한 내성을 보였으며, 특히 Ampicillin, cefmetazole에 대한 내성률이 100%였다. 6개 균주에서는 2종류 이상의 OXA 유전자형이, 13개의 균주에서는 class A나 class B유전자형과 OXA 유전자가 동시에 검출되었다.
<h1>결 과</h1> <h2>균주의 분리</h2> <p>Imipenem에 내성을 지닌 총 54균주는 중환자실 환자 35명 (\(64.8\)%)과 병동환자 19명 (\(35.2%\)%)의 임상검체로부터 분리되었다. 분리원 별로는 객담으로부터 35균주로 가장 높게 분리되었으며, 그 다음으로는 소변, 창상감염 및 농으로부터 각각 6균주, 4균주 그리고 3균주가 분리되었다. 담즙, 혈액 그리고 기관지 세척액으로부터는 각각 2균주가 분리되었다.</p> <h2>분리균의 특성 및 동정</h2> <p>전통적인 생화학적 검사 방법과 Vitek 32를 이용한 균주 동정결과는 Pseudomonas aeruginosa 2균주, Acinetobacter bau-mannii 21균주, Pseudomonas spp. 2균주 그리고 Enterobacter cloacae 2균주로 동정되었으며 생리적 특성은 Table 2에 나타나 있다. Pseudomonas spp. 2균주는 16S rRNA 유전자와 gyrB 유전자의 염기서열 분석을 이용한 계통분류학적 분석에 의해 P. putida으로 동정 되었다. 그러나 Enterobacter cloacae 2균주는 유전자 염기서열 분석 결과 E. hormaechei으로 동정되었다. 나머지 균주는 전통적인 생화학적 검사 및 Vitek 32 검사와 16S rRNA 및 gyrB 유전자 염기서열 분석과 동일하게 동정되었다.</p> <h2>MBL 생성 검증</h2> <p>Imipenem 내성 균주가 MBL을 생성하는지 여부를 알아보는 Hodge 변법 시험결과 29 균주(\(53.7\)%)가 양성반응을 보였고, imipenem-EDTA 상승효과시험에서는 22균주(\(40.7\)%)가 양성반응을 보였다. Imipenem-EDTA 상승효과시험에 양성인 균주는 모두 Hodge 변법 시험결과에서 양성 반응을 나타냈다. 따라서 MBL 를 생 성하는 균주는 22균주로 A. bau-mannii 12균주와, P. aeruginosa 7균주, P. putida 2균주 그리고 E. hormaechei 1균주가 속했다.</p> <h2>PCR을 통한 \( \beta \)-actamase 유형 분석</h2> <p>Class A \( \beta \)-lactamase 인 SHV-1 와 유도체 유전자는 P. aeru-ginosa 2균주에서 검출되었다. Class B \( \beta \)-lactamase MBL 중 IMP 유전자는 A. baumannii 11균주와 Enterobacter hormaechei 및 P. aeruginosa 각각 1균주씩에서 검출되었다. VIM 유전자는 P. aeruginosa 6균주와 P. putica 2균주 그리고 A baumanniii 1균주에서 검출되었다. Class D \( \beta \)-lactamase인 OXA-1, OXA-2, OXA-10과 OXA-23 유전자는 각각 25균주, 20균주, 5균주 그리고2균주에서 검출되었다. 6개 균주에서는 2종류 이상의 OXA 유전자형이 검출 되었으며, 13개의 균주에서는 class A나 class B유전자형과 OXA 유전자가 동시에 검출되었다.</p> <h2>항생제 감수성</h2> <p>Ampicillin, cefmetazole, ceftriaxone, cefotaxime, ceftazi-dime, cefepime, aztreonam 등 광범위한 \( \beta \)-lactam항생제에 대한 내성을 지닌 분리 균주의 비율이 각각 \( 100 \%, 100 \%, 92.6 \% \) , \( 92.6 \%, 66.7 \%, 74.0 \% \) 및 \(59.3\%\) 였다. \( \beta \)-Lactamase억제제가 혼합된 ticarcillin/clavulanic acid에 대한 내성 균주의 비율도 \(85.2\%\)로 높았다. Quinolone계열의 ciprofloxacin에 대해서도 \(85.2\%\)의 균주가 내성을 보였으며, amikacin, gentamicin 등 aminoglycoside 계통의 항생제에 대한 내성 균주 비율은 \(44.4\%\) 및 \(77.8\%\)로 나타났다. 그러나 colistin에 대해서는 모든 균주가 감수성을 나타냈다. A. baumannii균주들은 P. aeruginosa 균주들은에 비해 cefepime, ceftazidime, aztreonam과 gentamicin에 대한 내성 비율이 높았다. A. baumanniir균주들은 MBL 유전자 보유 여부가 amikacin에 대한 내성율에서만 차이가 나타났을 뿐 다른 항생제에 대해서는 큰 차이가 나타나지 않았다. 그러나 P. aeruginosa 의 경우 MBL 유전자보유 균주들이 다른 class 의 유전자 보유 균주들에 비해 cefta-undefined에 대한 내성율이 높았다. 특히 MBL 유전자를 보유한 P. puti-da 2균주는 amikacin과 colistin을 제외한 보든 시험 항생제에 대해 내성을 나타냈다.</p>