\( \mathrm{CCl}_{4} \) 나 ethanol로 유발한 SD rat의 간 독성에 대한 LED의 보호효과를 관측하기 위하여, in vitro 실헙에서 DPPH와 mouse live mitochondria system을 사용하여 LED의 항산화 효과를 조사하였다. 따라서 LEM이 mouse mitochondria의 membrane 산화를 강하게 억제하였다는 Terada 등의 보고와 유사한 결과이다. Normal rat (증류수를 1일 1회씩 14일간 경구 투여), Control rat (증류수를 1일 1회씩 14일간 경구 투여 한 다음 \( \mathrm{CCl}_{4} \) 처리), Silymarin rat \( (200 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)일 1회씩 14일간 경구 투여 한 다음 \( \mathrm{CCl}_{4} \) 처리)와 비교할 때, LED처리에 의해 체중, 사료섭취량 및 간 무게에는 영향을 주지 않았다. Control rat 혈장의 GOT, GPT 및 LDH의 활성이 Normal rat에 비해 유의적 \( (p<0.05) \)으로 높게 나타나 \( \mathrm{CCl}_{4} \)에 의한 간 손상을 관찰할 수 있다. TBARS 함량은 LED를 처리한 rat (\( 2.6 \mathrm{nmol} \mathrm{MDA} / \mathrm{mg} \) protein)에서 Control rat (\( 3.8 \mathrm{nmol} \mathrm{MDA} / \mathrm{mg} \) protein)에 비해 \( (p<0.05) \)으로 낮아졌고, 이는 Silymarin을 처리한 rat에서의 TBARS 함량 (\( 2.3 \mathrm{nmol} \mathrm{MDA} / \mathrm{mg} \) protein)과 비슷하고, TBARS 함량을 측정한 결과에서 간독성 유의미한 효과를 확인 할 수 있었다. 결론적으로 상기 혈장과 간 조직에서의 생화학지표를 관찰한 결과, LED처리는 \( \mathrm{CCl}_{4} \)에 의해 야기된 SD rat의 간독성에 완화에 효과가 있음을 예상할수있다.
<h1>결 과</h1> <h2>in vitro 실험에서 LED의 항산화 효과</h2> <p>\( \mathrm{CCl}_{4} \) 나 ethanol로 유발한 SD rat의 간 독성에 대한 LED의 보호효과를 연구하기 위하여, in vitro 실헙에서 DPPH와 mouse live mitochondria system을 이용하여 LED의 항산화 효과를 측정하였다. LED의 처리농도(0, 0.4, 0.8, 1.6 \( \mathrm{mg} / 5 \mathrm{ml}) \) 와 반응시간 (10, 40, 160)분에 비례하여 \( 517 \mathrm{~nm} \) 에서의 흡광도가 감소되었는데, LED \( 1.6 \mathrm{mg} \) 을 160분 반응한 경우의 흡광도가 zero였고, LED \( 0.4 \mathrm{mg} \) 을 160분 반응하였을 때의 흡광도는 BHT \( 5 \mu \mathrm{M} \) 처리 시료의 흡광도와 유사하였다. 이는 LED가 DPPH system에서 생성된 free radical을 강하게 소거하였음을 나타낸다.</p> <p>Mouse liver mitochondria system에서도 \( \mathrm{NADPH} / \mathrm{Fe}^{2+} \) 및 \( \mathrm{CuOOH} \) 로 유도한 mitochondria의 지방산화가 LED처리에 의해 농도 의존적으로 억제되었다. \( \mathrm{NADPH} / \mathrm{Fe}^{2+} \) 로 산화를 유도한 system과 \( \mathrm{CuOOH} \) 로 산화를 유도한 system에서 LED의 항산화 효과는 유사하게 나타났다. \( \mathrm{NADPH} / \mathrm{Fe}^{2+} \) sys-tem에서 control의 MDA 함량은 \( 10.5 \mathrm{mM} \) 이었는데, LED \( 0.4, 0.8, 1.6 \mathrm{mg} \) 처리의 MDA함량은 Control에 비해 각각 \( 33, 62 ,73 \% \)가 감소되었다. 또한 \( \mathrm{CuOOH} \) system에서는 Control의 MDA 함량은 \( 76.4 \mathrm{mM} \) 이었지만, LED \( 0.4,0.8,1.6 \mathrm{mg} \) 처리의 MDA함량은 Control에 비해 각각 \( 19, 71, 90 \% \)가 감소되었다.</p> <p>이와 같은 결과는 LEM이 mouse mitochondria의 membrane 산화를 강하게 억제하였다는 Terada 등의 보고와 유사한 결과이다.</p> <h2>\( \mathrm{CCl}_{4} \) 로 간독성이 유도된 SD rat 에서 LED의 간기능 보호 효과</h2> <p>\( \mathrm{CCl}_{4} \) 로 유발한 SD rat의 간 기능보호효과를 연구하기 위하여 LED시료 \( (200 \mathrm{mg} / \mathrm{kg}) \) 를 1일 1회 14일 동안 SD rat에 경구 투여 한 후 \( \mathrm{CCl}_{4}\left(\mathrm{CCl}_{4}\right. \) : corn oil, \( \left.1: 1 \mathrm{v} / \mathrm{v} ; 0.5 \mathrm{ml} / \mathrm{kg} \mathrm{BW}\right) \) 로 간독성을 유발하고, 혈장의 간독성 관련 효소(GOT,GPT 및 LDH) 활성 및 간 조직의 SOD, catalase, GSH perox-idase 활성과 TBARS 함량을 측정하였다.</p> <p>Normal rat (증류수를 1일 1회씩 14일간 경구 투여), Control rat (증류수를 1일 1회씩 14일간 경구 투여 한 다음 \( \mathrm{CCl}_{4} \) 처리), Silymarin rat \( (200 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 일 1회씩 14일간 경구 투여 한 다음 \( \mathrm{CCl}_{4} \) 처리)와 비교하였을 때, LED처리에 의해 체중, 사료섭취량 및 간 무게에는 유의적인 영향을 미치지 않았다(data not shown here). Fig. 2에서 보는 바와 같이 Control rat 혈장의 GOT, GPT 및 LDH의 활성이 Normal rat에 비해 유의적 \( (p<0.05) \)으로 높게 나타나 \( \mathrm{CCl}_{4} \) 에 의한 간 손상이 일어났음을 알 수 있었다. LED를 처리한 rat의 혈장 GOT, GPT 및 LDH 활성은 Control rat에 비해 유의적 \( (p<0.05) \)으로 감소하였고, 그 감소효과는 기존의 간독성 완화효과가 있는 것으로 알려진 Silymarin과 유사하여 LED의 섭취는 \( \mathrm{CCl}_{4} \) 에 의한간 손상을 완화시킬 수 있음을 알 수 있었다.</p> <p>Table 3은 rat 간 조직의 SOD, catalase, GSH peroxidase 활성 및 TBARS의 함량을 조사한 결과이다. Control rat은 \( \mathrm{CCl}_{4} \)를 투여하지 않은 Normal rat에 비하여 SOD, catalase, GSH peroxidase의 활성이 유의적 \( (p<0.05) \)으로 낮아, Control rat에서 \( \mathrm{CCl}_{4} \) 에 의한 간 손상이 유도되었음을 알 수 있었다. LED를 처리함으로써 이들 효소의 활성이 Control rat에 비해 유의적으로 상승되었다 \( (p<0.05) \). 효소활성의 상승정도는 Normal rat 수준은 아니지만 Silymarin처리 rat의 수준으로 상승되어 LED처리에 의해 \( \mathrm{CCl}_{4} \) 로 유발되는 rat의 간 손상을 완화시킬 수 있음을 알 수 있다. TBARS 함량은 LED를 처리한 rat (\( 2.6 \mathrm{nmol} \mathrm{MDA} / \mathrm{mg} \) protein)에서 Control rat (\( 3.8 \mathrm{nmol} \mathrm{MDA} / \mathrm{mg} \) protein)에 비해 유의적 \( (p<0.05) \)으로 낮아졌으며, 이는 Silymarin을 처리한 rat에서의 TBARS 함량 (\( 2.3 \mathrm{nmol} \mathrm{MDA} / \mathrm{mg} \) protein)과 유사하여, TBARS 함량을 측정한 결과에서도 간독성 완화효과를 확인 할 수 있었다. 따라서 상기 혈장과 간 조직에서의 생화학지표를 측정한 결과를 볼 때 LED처리는 \( \mathrm{CCl}_{4} \) 에 의해 유발된 SD rat의 간독성을 완화함을 알 수 있었다.</p>