체내에서 생성되는 MMP-1의 활성을 억제하여 콜라겐의 분해를 감소시키면, 피부조직의 탄력을 유지하고 주름생성을 예방할 수 있는 것으로 알려져 있다. Procollagen type 생합성 측정 결과와 MMP-1 저해활성 측정 결과 모두에서 SE와 이의 분획물들은 control 대비 positive 활성을 나타내어 피부 주름 개선을 위한 소재로서 가능성을 보였으며 특히 SE-E는 가장 우수한 활성이 확인되었다. 또한, SE-E 처리군에서 MMP-1와 MMP-9의 protein 발현이 5,10,25\(\mu\mathrm{g}/\mathrm{ml}\) 의 농도에 의존적으로 모두 저해 됨을 확인할 수 있었다.
<h2>Procollagen type 생합성 kit 측정 결과 및 MMP-1 저해 활성 kit 측정 결과</h2> <p>Procollagen은 아미노 말단과 카르복시 말단에 propeptide라는 peptide 염기서열을 포함한다. Propeptide는 소포체내에서 procollagen 분자의 folding을 도와줌과 동시에 collagen 중합반응이 일어날 때 collagen 분자로부터 절단, 분리된다고 알려져 있다. 따라서 propeptide의 양을 측정함으로써, 세포 내에서의 collagen 생합성 정도를 파악할 수 있다. 섬유아세포에 대한 procollagen type C-peptide enzyme immunoassay에 의한 collagen 생합성량을 측정한 결과 Fig. 6과 같이 나타내었다. SW, SE의 경우 \( 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서 각각 \( 35.4,48.5 \% \) 의 procollagen 생합성량을 나타내었다. 부평초의 용매별 분획물의 경우 SE-E\( (57.8 \%) \)>SE-W\( (43.8 \%) \)>SE-B \( (41.5 \%) \)>SE-H \( (32.3 \%) \)순으로 procollagen 생합성 활성을 나타내었다. Koo 등의 보고에 의하면, 시상자 용매별 분획물의 경우에는 BuOH>EtOAC>water>hexane 분획 순으로 콜라겐 생합성의 증가가 확인되었다. 본 실험 결과에서는 SE-W가 SE-B보다 활성이 조금 높은 것으로 나타났지만 그 차이가 크지 않으로 전체적으로는 EtOAC와 BuOH 분획물의 procollagen 생합성 활성이 우수한 경향을 유지하였다.</p> <p>체내에서 생성되는 수종의 MMPs 가운데 MMP-1 은 콜라겐에 특이적으로 작용하는 protease로서 MMP-1의 활성을 억제하여 콜라겐의 분해를 감소시키면, 피부조직의 탄력을 유지하고 주름생성을 예방할 수 있는 것으로 알려져 있다. 부평초의 MMP-1 저해 활성 측정 결과는 Fig. 3에서 나타내었다. 그 결과, SE의 경우 \( 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서 \( 13.4 \% \) 를 나타내어 \( 2.3 \% \)의 저해 활성을 나타낸 SW보다 효과가 우수하였다. SE-E의 경우 대조군에 비해 \( 28.5 \% \) 의 저해율을 나타내어 분획물 중에서 MMP-1 저해활성이 가장 우수하였다. 이는 Koo 등이 연구 한 시상자 EtOAC 분획물의 대조군 대비 \(3-12\%\) 수군의 MMP-1 저해활성을 나타낸 결과와 비교해 보았을 때 SE-E의 MMP-1 저해활성이 뛰어남을 확인할 수 있었다. 결론적으로 Procollagen type 생합성 측정 결과와 \( \mathrm{MMP}^{-1} \) 저해활성 측정 결과 모두에서 SE와 이의 분획물들은 control 대비 positive 활성을 나타내어 피부 주름 개선을 위한 소재로서 가능성을 보였으며 특히 SE-E는 가장 우수한 활성이 확인되었다.</p> <h2>MMP-1, MMP-9의 단백질 발현 저해 활성 측정 결과</h2> <p>노화와 관련된 인자인 MAPK에 가장 많은 영향을 받은 인자는 c-fos이며 이는 p38의 영향을 받는다. 이러한 요인들이 활성화되면 MMPs의 발현을 강력히 조절한다. 본 연구에서는 MMP family 중 MMP-1, MMP-9의 단백질 발현을 측정하였다. SE-E 처리군에서 MMP-1와 MMP-9의 protein 발현이\( 5, 10, 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에 의존적으로 모두 저해 되었다. 특히 MMP-1의 protein 측정 시 \( 25 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서 \( 58.2 \% \) 의 발현 저해 활성을 나타내었다. 이와 같은 결과는 산거울 추출물의 EtOAC 분획물 결과와 비교했을 때 유사한 경향이 확인되며, 산거울의 EtOAC 분획물이 \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{mL} \) 의 농도에서 \( 60 \% \) 의 MMP-1 발현 저해 활성을 나타내었으므로 SE-E는 우수한 저해활성이 있음을 확인할 수 있었다.</p>