반추동물 영양생리학 연구의 근간이 되는 사료 첨가제로 메탄 생성 억제제, 항생제, 펩타이드 분해 억제제, 프로토조아 제거제, 외인성 효소제, 지방산, 보호지방, 보호단백질, 완충제, 인공타액, probiotics, 생효모노산 등이 개발되고 있다는 사실을 알 수 있다. 본 연구에서는 볏짚, filter paper와 두과의 알팔파 건초와 화본과의 촐페스큐 건촐르 기질로 배양 시 비이온성 계면활성제 Tween 80의 첨가가 미생물 성장율에 어떤 영향을 미치는지 구명하기 위해 수행하였다. 볏짚, 알팔파, 톨페스큐, filter paper를 \( 75 ^ {\circ } \mathrm { C } \)의 강제 송풍 건조기에서 건조시킨후 Wiley mill에서 분쇄해 공시재료로 사용해 in vitro 배양시 농도를 계산해 배양액중에 첨가하였다.
<h1>서 론</h1> <p>반추동물의 반추위 환경을 인위적으로 조절함으로써 사료의 이용효율을 증진시키고 반추동물의 생산성을 극대화시키기 위한 연구들이 반추동물 영양생리학 연구의 근간을 이루어 왔다. 반추위 발효를 조절하기 위하여 많은 종류의 사료 첨가제들이 개발되었거나 개발되고 있다. 지난 수 십 년간 수행된 연구의 방향은 주로 메탄 생성 억제제(methane pro-ducing inhibitors), 항생제 및 항생제 대체물질, 단백질이나 펩타이드 분해 억제제(proteolysis inhibitors) 또는 탈아미노 반응 억제제(deamination inhibitors), inophores계 항생제로 대표되는 프로토조아 제거제(defaunation agent), 외인성 효소제(exogenous enzymes), 지방산과 보호지방, 보호단백질, 완충제(buffering agents), 인공타액(artificial saliva), pro-biotics, 생효모 배양물(live yeast cultures)이나 곰팡이 발효 추출물(mold fermentation extracts)과 같은 비 세균성 미생물제제(non-bacterial direct-fed microbials, DFM) 등에 대한 것들로 요약할 수 있다. 보다 최근에는 Lee와 Ha 및 Lee 등은 일련의 연구결과를 바탕으로 비이온성 계면활성제 Tween 80은 반추위 미생물의 성장률을 촉진시키고 혐기성 미생물이 분비하는 섬유소 효소의 분비를 촉진시키고 섬유소 소화율을 증가시키므로서 동물의 생산성을 향상시키기 때문에 사료 첨가제로서의 개발 가능성을 시사하였다. 실제로 Tween 80은 국내에서 2005년도에 사료첨가제로 개발되어 많은 양이 판매되고 있다. Lee와 Ha 및 Lee 등이 수행한 일련의 연구 중, in vitro 실험에서는 기질물질로 filter paper와 볏짚을 그리고 in vivo 실험에서는 사료원으로 주로 볏짚만을 이용하였다. 따라서 본 연구에서는 볏짚과 filter paper는 물론 조사료 자원으로 많이 이용되고 있는 두과의 알팔파 건초와 화본과의 톨페스큐 건초를 기질로 in vitro 배양하였을 때, 비이온성 계면활성제 Tween 80의 첨가가 반추위 발효성상, gas 발생량, 섬유소 분해효소의 활성, 각종 기질의 건물 소화율 그리고 미생물 성장률에 어떠한 영향을 미치는지를 구명하기 위하여 수행하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>공시재료</h2> <p>볏짚(국내산 동진벼), 알팔파(카나다산 수입품), 톨페스큐(미국산 수입품) 그리고 filter paper (Whatman 1, Sigma-Aldrich)를 \( 75 ^ {\circ } \mathrm { C } \)의 강제 송풍 건조기에서 약 18시간 건조시킨 다음, \( 2 \mathrm { ~mm } \) screen이 부착된 Wiley mill에서 분쇄하여 공시 재료로 사용하였다. 전량이 cellulose로 구성된 filter pater를 제외하고 AOAC 법으로 분석한 공시재료의 화학적 조성은 Table 1에서와 같다. 한편 비이온성 계면활성제(Non-ionic surfactant; NIS) Tween 80 (Description: Polyoxyethylene Sorbitan Monooleate \( {\times } \)Tween 80KR, Polysorbate, Catalog number: P0343)은 Sigma-Aldrich Korea로부터 구매하여 사용하였다. 구입한 Tween 80은 황색에 가까운 짙은 노란색으로 점성이 다소 높은 액체였지만 낮은 농도에서는 물과 쉽게 혼합되는 특징이 있었다. 따라서 in vitro 배양시에는 특별한 처리없이 농도를 계산하여 배양액중에 첨가하였다.</p>