누에 단백질을 SDS-PAGE 상의 영동패턴으로 비교 분석한 결과, 단백질 분해능이 우수한 B. subtilis 발효에 의해 분자량이 작은 단백질 패턴이 관찰되어 누에 단백질의 분해가 이루어졌음을 알 수 있었다. 동결건조 및 열풍건조 발효누에 분말 양쪽 모두에 함유된 단백질의 함량 차이에 의해 B. subtilis 균주 혈전용해 활성이 높았고, 혈전 용해력도 높아서 혈관계 건강기능식품으로 활용될 수 있음을 확인했다.
<h2>SDS-PAGE에 의한 단백질 영동 패턴 비교</h2> <p>누에 단백질을 SDS-PAGE 상의 영동패턴을 비교분석 한 결과 열풍 및 동결건조 발효누에의 단백질 패턴상에 큰 차이를 보여 발효되는 과정에서 단백질이 분해되는 것으로 사료되어진다. 또한 L. hilgardii 발효와 B. subtilis 발효에 의해서도 단백질 패턴상의 차이를 보이고 있는데, 특히 단백질 분해능이 우수한 B. subtilis 발효에 의해 분자량이 작은 단백질 패턴이 관찰되어 누에 단백질의 분해가 이루어졌음을 알 수 있었다. 한편, 열풍 및 동결건조 발효누에분말의 단백질 패턴 상의 차이는 유산균인 L. hilgardii 발효에 의해서는 큰 차이를 찾아보기 힘들었지만 B. subtilis 발효에 의해서는 단백질 패턴과 양적인 차이는 뚜렷하게 보였다.</p> <h2>혈전용해 활성</h2> <p>열풍건조, 동결건조 누에분말 및 발효누에 분말의 물 추출 및 \( 70 \% \) 메탄올 추출물의 혈전용해 활성을 나타낸 결과를 보면, 동결건조 누에분말 및 열풍건조 누에분말 추출물의 경우 모두 혈 전용해 활성은 없는 것으로 나타났다. 그러나 냉동건조 누에분말의 \( 70 \% \) 메탄올 추출물에서만 12시간 반응 후 점적한 용해면적이 다소 증가한 것으로 나타났으나, 열풍건조 누에분말의 \( 70 \% \) 메탄올 추출물에서는 전혀 활성이 없는 것으로 나타나 건조방법에 따라 혈전용해 활성에 영향을 미치는 것으로 보여 진다.</p> <p>Oh 등은 팥의 원액 추출에서는 혈전용해 활성이 없었으나, 추출액의 \( \mathrm{pH} \)를 6.4로 조절한 후 18시간 동안 냉장 처리한 결과 비교적 큰 활성을 보였으며, \( \mathrm{pH~} 3.0 \)으로 조절시 활성이 더욱 증가하였고 \( 36^{\circ} \mathrm{C} \)에서 14시간 반응시에는 활성을 보이지 않다가 15시간이 지나면서 활성이 크게 나타나는 특이성을 보였다고 하였다.</p> <p>Ryu 등은 국내 자생곤충 76종으로부터 304종의 추출물을 만들어 항혈전 활성을 조사한 결과 방아깨비, 왕잠자리, 비단노린재 등 10종에서 우수한 항트롬빈 활성이 있다고 할 정도로 극히 일부의 곤충에서만 활성이 관찰되는 것으로 보고하였다.</p> <p>동결건조 발효누에 및 열풍건조 발효누에분말 모두 B. sub-tilis 균주 \( 5 \% \) 접종에서 혈전용해 활성이 가장 높았으며, 동결건조 발효누에가 열풍건조 발효누에 보다 혈전용해 활성이 더 높게 나타났다. 이러한 이유는 동결건조 발효누에분말과 열풍건조 발효누에 분말에 함유된 단백질 함량 차이에 의한 것과 메탄올 추출물에서 보여주는 결과와 같이 건조 방법에 따라 활성인자가 존재하는 양상이 다른 것에서도 기인할 수 있다고 생각되어 진다.</p> <p>자연계에 존재하는 Bacillus subtilis, Fusarium pallid-oroserum, Katsuwonus pelamis, Streptococcus aureus 미생물 유래나 청국장, 된장, 멸치젓갈, natto (nattokinase) 및 절임식품인 shiokara (katauwokinase)와 같은 발효식품 유래의 혈전용해제 개발이 많이 이루어져 왔다. 또한, 일부 천연물 유래의 단삼 메탄올 추출물 및 팥과 녹두 등 일부 소재에서도 항혈전 효능이 밝혀져 있다. 이처럼 발효식품의 주요 미생물인 Bacillus 속 균주들은 단백질 분해능뿐만 아니라 혈전용해 효소 활성도 높아 혈관계 질환 관련 건강기능식품 소재로 많이 활용되고 있는 가운데 본 실험에 사용된 B. subtilis 균주도 단백질 분해력과 혈전 용해력이 높아 누에분말을 발효시킨 시료에서 활성이 높게 나온 것으로 사료된다.</p>