EBV BHRF1-1, 1-2, 1-3는 UTR 부분에 있어 RT-PCR로 구분할 수 없었으나, 긴 전사체를 증폭할 수 있는 primer를 사용하여 polycistronic하계 전사됨을 확인했다. 하지만 laic cycle 발현인지 Cp, Wp 프로모터를 통한 발현인지는 알 수 없기 때문에 면밀한 후속 연구가 필요하다는 것을 제시한다. 두 miRNA들은 monocistronic하게 전사될 가능성을 지지하는데 polycistronic하게 조절되면 BART1은 다량 검출되는 반면 BART2는 매우 소량만이 검출되며 BART2 pri-와 pre-miRNA도 적게 검출되는 현상을 보이기 때문이다.
<p>EBV BHRF1-1, 1-2, 1-3는 BHRF1 유전자의 UTR 부분에 위치하므로 BHRF1 mRNA가 전사되는 B95-8에서는 BHRF1-1, 1-2, 1-3의 pri-miRNA와 BHRF1 mRNA를 RT-PCR로 구분해 낼 수 없다. BHRF1은 Bcl2 homolog로 EBV에 잠재감염된 B 세포에서 EBV의 Cp나 Wp 프로모터로 부터 발현되고 lytic cycle이 유도되면 BHRF1-1 보다 down stream에 존재하는 H 프로모터가 활성화되어 발현되는 것으로 알려져 있다. BHRF1-1, BHRF1-2, BHRF1-3 miRNA들의 경우 이 3가지 miRNA를 모두 포함하는 긴 전사체를 증폭할 수 있는 primer를 이용하여 RT-PCR을 실시한 결과 예상된 긴 전사체가 확인되어 이들이 B95-8에서 polycistronic하계 전사됨을 알 수 있다. 그러나 본 연구의 결과만으로는 BHRF1-1, BHRF1-2, BHRF1-3가 latency 상태에서 활성을 나타내는 BHRF1 프로모터와 동일한 프로모터에 의해 발현이 조절되는 지는 분명하지 않다. 또한 BHRF1-1의 예측되는 pre- 및 pri-miRNA가 BHRF1-2나 BHRF1-3보다 다소 적게 증폭되는 경향을 보이는 RT-PCR 결과도 위에서 설명된 프로모터와의 위치를 고려할 때 앞으로 면밀한 후속 연구가 필요하다는 것을 제시한다. BARTs 는 CST (complementary strand transcript) 또는 BARF0 RNAs로 불린다. B95-8 서열 150,641 위치에 전사 시작점 (transcription start site)이 존재하며 splicing을 통해 적어도 16 개의 서로 다른 전사체로 형성된다. B95-8에서는 wild type EBV와 비교할 때 Fig. 4에 표시된 바처럼 BARTs의 exon IB, II, III, IIIA, IIIB, IV에 해당하는 \(12 \mathrm { ~kb } \) 정도가 삭제 되어 있다. BART1의 경우 exon I과 exon IA 사이의 intron 부위에 존재하며, BART2의 경우 exon V 앞의 in-tron 부위에 존재하므로 B95-8에서 삭제된 부위는 BART1 과 BART2 서열에는 영향을 미치지 않는다. \(12 \mathrm { ~kb } \)가 삭제된 B95-8에서는 BART1 과 BART2 사이가 \(1,643 \mathrm { ~bp } \) 정도로 짮으며, B95-8의 DNA를 사용한 PCR 결과 기대되는 그기의 증폭 산물이 얻어졌다. 그러나 BART1과 BART2 miRNA들에 대한 각각의 pri-miRNA와 pre-miRNA가 모두 확인되는 것과는 달리 BART1과 BART2를 둘 다 포함하는 전사체는 RT-PCR로 증폭이 안 되었다. 이것은 BART1과 BART2가 polycistronic한 전사체로 만들어지지만 빠른 splicing 과정에 의해서 두 miRNA을 모두 포함하는 전사체가 검출될 만큼 충분량 존재하지 않기 때문일 수 있다. 또는 이 두 miRNA들은 BHRF1-1 \( \sim \)1-2 \( \sim \)1-3 miRNA들과는 다르게 polycistronic이 아닌 monocistronic하게 전사되기 때문일 수도 있다. 만일 이 두 miRNA들이 polycistronic하게 조절된다면 그 발현양이 서로 크게 다르지 않을 것으로 기대되기 때문에 반복된 여러 차례의 실험을 통하여 EBV miRNA들 중 BART1은 다량 검출되는 반면 BART2는 매우 소량만이 검출될 뿐만 아니라 예측되는 BART2 pri-와 pre-miRNA도 적게 검출되는 현상은 이 두 miRNA들이 monocistronic하게 전사될 가능성을 지지하는 듯이 보인다. BART2는 다른 EBV miRNA들과는 달리 EBV의 latency보다 lytic cycle에서 더 많이 발현되거나, 특수한 자극을 받아야만 발현이 유도될 가능성도 있을 것이다.</p>