본 연구는 간안세포주에 발효 및 비발효 차가버섯 추출물을 처리하는 실험을 진행하였으며, 세포생육 저해 효과를 확인하였고, 발효 차가버섯 추출물이 비발효의 그것보다 더 높은 세포생육 저해 효과를 지님을 확인하였다. 발효 차가버섯 추출물이 더 좋은 효과를 지니는 것은 올리고당 생성으로 인한 영향으 사료되어 진다. 한편 apoptosis의 genomic DNA를 분리하여 agarose gel electrophoresis 방법을 이용해 암세포 증식억제가 어떤 기전으로 일어나는지 분석하였다. 분석 결과 종양세포의 DNA laddering이 세포증식 억제 효과가 있음을 확인했고, 발효 차가버섯 추출물에서의 효과가 비발효의 그것보다 더 크게 나타남을 확인했다.
<h2>간암세포주의 생육 및 형태변화</h2><p>발효 및 비발효 차가버섯 추출물을 \( 0.5 \) 및 \( 1 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도로 처리한 간암세포주 Hep3B의 형태변화를 Fig. 9에 나타내었다. 발효 차가버섯 추출물의 \( 0.5 \) 및 \( 1 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도 처리구에서는 세포 생육 저해가 각각 \( 47 \% \) 및 \( 68 \% \)로 나타났는데, 비 발효 차가버섯 추출물의 동일 농도에서는 각각 \( 18 \% \) 및 \( 20 \% \) 세포생육 저해 효과가 나타나 발효 차가버섯에서 더 좋은 효능을 보였다. 발효 차가버섯 추출물에 의한 인체 종양 세포의 생육저해 효과는 대장암과 유사하게 높게 나타났으나, 비발효 차가버섯 추출물 처리구와는 다른 양상을 나타내어 향후 이들에 대한 좀더 구체적인 실험이 있어야 할 것으로 사료되어 진다.</p><p>이전의 실험에서 제1형 및 제2형 당뇨 동물모델 실험에서 항당뇨 효과를 보였던 발효 차가버섯 추출물은 다당체가 \( 39.1 \% \) 차지하였고, 비발효 차가버섯은 이보다 약간 높은 \( 42.9 \% \)를 함유하였다. 또한 Bacillus sp. WRD-2로 발효시킨 발효 차가버섯이 다당체를 \( 39.1 \% \) 함유하고 있고, 박층크로마토그래피법으로 확인한 G2와 G6 사이의 저분자 올리고당을 \( 3.8 \% \)를 함유한 것으로 나타나 차가버섯이 발효되는 과정에서 생성된 올리고당과 함께 항당뇨 활성뿐만 아니라 인체유래 종양세포주의 생육 저해 활성도 비발효 차가버섯보다 강한 것으로 생각되어 진다. Kim 등은 차가버섯 균사체로부터 면역활성 증가물질로 crude-polysaccharide를 추출한 결과, Inonotus obliquus DSMZ 8695 및 BELYU 1102에서 각각 \( 35.6 \% \) 및 \( 26.9 \% \) 함유되어 있었다고 하였다. 일반적으로 버섯유래의 항암효과를 갖는 다당체는 \( \beta-(1,3) \) 결합에 \( \beta-(1,6) \)결합 곁가지를 가지는 glucan으로 수용성 추출물중에 존재하는 것으로 밝혀졌다.</p><h2>DNA fragmentation</h2><p>발효 및 비발효 차가버섯 추출물에 의한 암세포 증식억제가 어떤 기전에 의한 것인지를 검토하기 위해 apoptosis가 일어날 때 나타나는 DNA fragmentation을 세포로부터 genomic DNA를 분리하여 agarose gel electrophoresis 방법으로 조사하였다. 정상세포인 NIH3T3 세포는 DNA fragmentation이 거의 일어나지 않아 세포 생존율 결과와 같은 경향을 보였다. 특히 대장암 세포주인 HCT-15 세포는 MTT assay에 의한 결과와 마찬가지로 발효 차가버섯 추출물뿐만 아니라 비발효 차가버섯 추출물에서도 DNA laddering이 많이 일어나는 것이 관찰되어 \( 1 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도에서 \( 59 \% \)의 생육 저해율을 뒷받침 해 주었다. 또한 비발효 차가버섯 추출물보다는 발효 차가버섯 추출물에서 각 종양세포의 DNA laddering이 많이 일어나 세포증식 억제 효과가 높다는 결과를 뒷받침 해주고 있다.</p><p>이상의 실험 결과로부터 발효 차가버섯 유래의 수용성 추출물은 정상세포의 세포 생육에는 크게 영향을 미치지 않으면서도 특히 대장암, 위암, 간암 세포의 생육을 크게 저해시킴으로써 이 분야의 새로운 항암 식 · 의약품 소재 개발 가능성이 있는 것으로 사료되어 진다.</p>