폴리페놀 함량은 DPPH radical 소거능과 같은 항산화 활성에 중요한 인자로 작용하므로, 본 연구는 황칠나무 잎과 줄기 물 추출물로부터 폴리페놀 함량을 tannic acid를 표준 물질로 하여 측정한 결과, \( 49.56 \mathrm { mg } \mathrm { TAE } / \mathrm { g } \)임을 확인하였다. 한편, 측정을 위해 추출물은 ELISA reader를 이용하여 \( 460 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하였으며, 실험 결과는 통계 SAS package를 사용하여 시료의 평균과 표준편차를 계산하고 분산분석을 통해 시료 간의 유의차를 검정하였다.
<p>간세포 보호 효과 즉정을 위해 96-well cell culture plate 에 HepG2 세포를 배지 \( 100 \mu 1 \) 에 \( 1 \times 10 ^ { 4 } \) cells/well의 농도로 각 well에 분주한 다음 tacrine (Santa Cruz Biotechnology Inc., Dallas, TX, USA) 및 다양한 농도의 황칠나무 잎과 줄기 물 추출물을 동시에 처리하여 24 시간 동안 배양하였다. 이후 EZ-Cytox cell viability assay solution WST-1 \( { } ^ {\circledR } \) 을 각 well에 넣고 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } , 5 \% \mathrm { CO } _ { 2 } \) incubator에서 3 시간 동안 반응시킨 다음 ELISA reader를 이용하여 \( 460 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하였다.</p> <h2>통계처리</h2> <p>실험결과는 통계 SAS package (Statistical Analysis Sys-tem, Version 9.1, SAS Institute Inc., Cary, NC, USA)를 사용하여 각 시료의 평균과 표준편차를 계산하였고, 분산분석 (ANOVA)과 Duncan's multiple range test를 실시하여 \( p< \) \( 0.05 \) level에서 시료 간의 유의차를 검정하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>총 폴리페놀 함량</h2> <p>폴리페놀 화합물은 대다수의 고등식물에 많이 함유되어 있는 항산화 물질로 산화적 스트레스나 독성이 강한 물질의 독성을 저해하여 radical 소거 활성 및 항산화 활성을 가지는 것으로 알려져 있기에 생리활성을 측정하는 지표로 많이 사용된다. 또한 페놀산과 안토시 아닌 및 플라보노이드 등과 같은 페놀성 화합물의 총량인 폴리페놀 함량은 DPPH radical 소거능과 같은 항산화 활성에도 중요한 인자로 작용한다. 따라서 본 연구에서는 황칠나무 잎과 줄기 물 추출물의 총 폴리페놀 함량을 tan-nic acid를 표준물질로 사용하여 측정한 결과(Table 1), \( 49.56 \mathrm { mg } \mathrm { TAE } / \mathrm { g } \) 으로 나타났다. An 등은 전라남도 완도군 신지면 일대에서 수확한 황칠나무 잎과 줄기 물 추출물의 총 폴리페놀 함량은 각각 \( 19,080.51 \mu \mathrm { g } \) gallic acid equivalent (GAE)/g과 12,207.18 \( \mu \mathrm { g } \mathrm { GAE } / \mathrm { g } \) 으로 보고하였고, Kim 등은 황칠나무 잎 추출물의 에탄올 농도별 총 폴리페놀 함량은 \( 0,40,80 \) 및 \( 95 \% \) 농도의 에탄올 추출물에서 각각 \( 56.67 \mathrm { mg } \mathrm { GAE } / \mathrm { g } \) 과 \( 59.25 \mathrm { mg } \mathrm { GAE } / \mathrm { g } , 73.98 \) \( \mathrm { mg } \mathrm { GAE } / \mathrm { g } \) 및 \( 72.58 \mathrm { mg } \mathrm { GAE } / \mathrm { g } \) 으로 \( 80 \% \) 에탄올 추출물에 서 가장 높은 것으로 보고하였으며, \( \mathrm { Mo } \) 와 \( \mathrm { Oh } \) [20]는 황칠나무 잎 메탄올 추출물 및 ethyl acetate 분획물의 총 fla-vonoid 함량은 각각 \( 98.53 \mathrm { mg } \) rutin equivalent \( ( \mathrm { RE } ) / \mathrm { g } \) 과 \( 184.09 \mathrm { mg } \mathrm { RE } / \mathrm { g } \) 으로 보고하였다. Hwang 등은 동일한 천연물이라도 시료의 전처리 상태와 추출 시간 및 추출 용매 등에 따라 다른 결과가 도출되는 것으로 보고하였고, Lee 등은 재배 환경과 가수분해 유무 및 추출 방법에 따라 황칠나무의 quercetin 함량에 차이가 있는 것으로 보고하였다.</p>