함초 추출물의 경구투여가 비장 세포 증식능에 미치는 영향을 실험한 결과, 실험 기간 동안 실험 동물의 체중 증가량과 비장 중량은 함초 추출물을 공급한 실험군과 대조군 간에 유의적 차이는 없었으나 비장 세포 증식능 측정에서는 유의적인 결과를 보여주었다. 그리고 함초 추출물이 마우스 비장 세포 및 T세포 증식능에 영향을 미치는 것을 바탕으로 함초 추출물을 마우스에 경구 투여하여 비장 세포 증식능을 관찰한 결과, mitogen을 함께 처리시 세포증식능이 상승하여 세포성 및 체액성 면역활성을 증강시키는 실질적 효과가 있음이 확인되었다.
<h2>시료의 경구투여가 비장 세포 증식능에 미치는 영향</h2> <p>체중 및 장기 무게의 변화: 실험 기간 동안 실험 동물의 체중 증가량을 관찰한 결과는 Fig. 5와 같다. 체중 증가량은 함초 추출물을 공급하지 않은 대조군과 함초 추출물을 공급한 실험군 간에 유의적 차이는 없었으나 실험 기간 동안 실험군의 체중이 계속적으로 증가하는 경향을 보였다. Jo 등의 연구에 의하면 함초 추출액 투여 시 투여량이 증가할 수록 체중 증가율이 감소되어 함초가 체중 증가 억제에 영향을 미친다고 보고한 것과 달리 본 실험 결과에서 체중 증가 경향을 보인 것은 실험군의 식이 조성이 양호하고 실험 마우스의 성장 발육이 활발한 시기 때문으로 사료된다. 이는 함초 첨가 식이군이 정상식이군에 비해 체중 증가량을 보인 Cho 등의 보고와 유사하다. 그리고 각 실험군의 장기 중량을 관찰할 결과는 Table 1과 같다. 즉, 간장 중량, 신장 중량 및 흉선 중량은 각 군간에 다소 차이는 있으나 유의성있는 변화는 관찰되지 않았으며, 비장 중량은 대조군\( (0.077 \pm 0.006)\), CSP군\( (0.097\pm 0.021) \), SP I군\( (0.095\pm 0.021) \), SP Ⅱ군\( (0.080\pm 0.014) \)으로 나타나 정상 대조군에 비해 함초 추출물 투여군이 다소 증가 경향은 보였으나 유의적 차이는 없었다.</p> <p>비장 무게: 비장 지수(spleen weight index)는 비장의 무게를 표준으로 환산하여 측정지표로 삼는 것으로 비장의 무게에 대한 체중의 비로 나타낸다. 세포 매개성 면역반응인 GVH반응(graft-versus-host reaction)에서는 비장의 비정상적인 증대가 양성 반응의 지표로 활용되므로 spleen index가 1.3 이상일 때 양성 반응으로 결정하기도 하고, 각 실험군마다 spleen weight index를 구하여 대조군의 값과 비교하여 이상 유무를 판단하기도 한다. 본 연구에서 측정한 대조군과 실험군의 spleen weight index 및 spleen index는 Table 2와 같다.</p> <p>비장 세포 증식능 측정: 식이 섭취가 생체 내에 미치는 영향을 알아보기 위한 방법으로 장기 또는 혈액을 채취하여 시 험관 내 실험을 하는 연구가 다양하게 진행되고 있다. 이 중 비장 세포는 혈액에서 유래된 항원에 대한 면역 반응이 개시되고 발전되는 부위로서 말초 림프 기관에 속하며, 그 크기나 세포의 수가 직접적인 지표로 이용될 수 있으므로 대표적인 면역 지표로 사용된다. 시험관 내 실험 결과 함초 추출물이 마우스 비장 세포 및 T세포 증식능에 영향을 미치는 것으로 나타났으므로, 이 결과를 바탕으로 함초 추출물을 마우스에 경구 투여하여 비장 세포 증식능을 관찰하였다. 먼저, 함초 추출물을 투여한 군과 투여하지 않은 대조군으로 나누어 비장 세포 증식능을 측정하였고, 세포 배양 시 mitogen(림프구 비특이 활성제)인 Con A\( (5 \mathrm{ug} / \mathrm{mL}) \)와 LPS \((15 \mathrm{ug} / \mathrm{mL}) \)를 각 well에 첨가하였고 이에 대한 대조군으로 mitogen 대신 3차 증류수를 동량 첨가하여 비장 세포증식 계수를 구하여 비교하였다. 마우스에서 분리한 비장 세포를 \( 5 \times 10^{5} \) cells/well로 넣고 mitogen을 첨가하여 24, 48 및 72시간 배양하여 중식 정도를 비교한 결과는 Fig. 6과 같다. B세포의 증식을 특이적으로 유도하는 LPS와 T 세포의 증식을 특이적으로 유도하는 Con A에 의해서 비장 세포는 72시간 배양 후 유의적으로 최대 증식 반응을 나타내었다. 그리고, 함초 추출물을 투여하고 mitogen을 처리하지 않은 경우에는 세포 증식능이 저하되었으나, Con A나 LPS로 처리 시에는 72시간 배양 시 SPI 군에서 각각 최대의 증식능 \( (65.38 \pm 2.55,54.55 \pm 2.86) \)을 보였다. 특히 SP Ⅰ과 SP Ⅱ군이 CSP군보다 세포 증식능이 효과적이었다. 이는 함초 추출물의 투여로 인해 세포성 면역이 증가하고, 체액성 면역도 영향을 받는 것으로 사료된다. 한편, mitogen과 관련하여 Cho 등은 다시마 분말 투여에 의한 당뇨쥐의 비장 세포 기능에 관한 연구에서 4주간의 투여에 의해 비당뇨군의 비장 세포 증식능이 촉진되었고, 특히 LPS와 Con A 첨가에 의해 비장 세포 증식능이 3배까지 상승하였음을 보고하였으며, Kwon 등은 동충하초를 4주간 투여한 마우스의 비장세포를 미토젠과 같이 배양 시 비장세포 증식능이 상승하였음을 보고하였다.</p> <p>이상의 결과로부터 함초에서 추출된 다당체 SP Ⅰ과 SP Ⅱ는 면역활성을 증강시키는 실질적 효과가 있음이 확인되었으며, 이로써 앞으로 이 다당체가 면역 증강 소재로 활용될 수 있을 것으로 기대된다.</p>