간은 물질 대사의 중심으로 생체 외물질 및 독성 물즐들을 배설하는 장기인데 이러한 간장에 중성지방이 축적되는 것을 지방간이며 지방산 노출의 직접적인 원인은 산화성 스트레스 증가 및 간세포의 사멸로 추측된다. 간세포의 손상 및 사멸 과정에는 다양한 신호전달계가 관여하는데 이러한 보고들은 p43 MAPK 및 JNK 등의 활성이 포화 지방산에 의한 간세포의 작용기전에 관여할 수 있음을 말해주며 따라서 본 실험에서는 나아가 포화 지방산이 간세포의 세포사멸에 미치는 효과와 이와 관련된 신호전달계의 관련성 및 산화성 스트레스와의 관련성에 대해 알아보았다.
<h1>서 론</h1> <p>간은 당, 단백질, 지방등의 물질 대사의 중심으로 체내에 들어온 생체 외물질 및 독성 물질들을 산화, 환원, 가수 분해 및 포합 반응을 통해 배설하는 장기이다. 이러한 간장에 중성지방이 축적이 되는 것을 지방간이라고 한다. 지방간 질환 중 비알콜성 지방간 질환은 알코올 섭취력은 거의 없지만 알코올성 지방간과 유사한 간에서 지방대사의 장애로 인해 중성지방이 간에 축적되는 상태로, 최근 여러 연구를 통하여 비만, 당뇨병, 고혈압, 지질대사이상 등을 포함하는 대사증후군과 관련이 있음이 입증되었고, 그 중에서도 비만이 중요한 원인 인자로 알려져 있다. 비만의 여러 가지 원인 중에서 간의 지방산 노출이 직간접적인 원인으로 보고되고 있으며 간의 지방산의 축적이 많이 되는 경우 간의 섬유소화를 야기하고 나아가 비가역적인 간경화로 진행이 될 수도 있는 것으로 알려지고 있으며 이에 대한 주요한 원인은 지방산에 의한 산화성 스트레스 증가 및 간세포 사멸로 추측되고 있는 실정이다. 지방산은 크게 포화 지방산과 불포화 지방산으로 분류되며, 특히 포화 지방산이 지방간 발병에 중요한 역할을 담당하는 것으로 보고되고 있다.</p> <p>간세포의 손상 및 사멸과정에는 다양한 신호전달계가 관여한다. Mitogen activated protein kinases (MAPKs)는 일반적으로 p44/42 MAPK, p38 MAPK 및 Jun N-terminal kinase(JNK) 등으로 나누어지며 이들 중 간세포의 세포사멸에는 p38 MAPK 및 JNK 등이 주요한 역할을 하는 것으로 보고되고 있다. 이러한 보고들은 p38 MAPK 및 JNK 등의 활성이 포화 지방산에 의한 간세포의 작용기전에 관여 할 수 있음을 말해 주고 있다. 한편 인체 내의 다양한 경로에 의해 유발되는 산화적 스트레스는 생체 안에 존재하는 항산화계에 의해 제거되지만 산화적 스트레스가 항산화계의 수준을 초과하여 제거되지 못하면 DNA 변형과 기능상실에 의하여 퇴행성 질환이 유도되는데 간세포에서도 지방간의 발병에 관여할 수 있음을 시사해 주고 있다. 그러나 지금까지 palmitic acid에 대한 MAPK 활성 및 산화성 스트레스에 대한 상관관계 연구는 극히 미약한 실정에 있다. 따라서 본 실험에서는 쥐 간세포를 초대배양하여 포화 지방산인 palmitic acid가 간세포의 세포사멸에 미치는 효과와 이와 관련된 신호전달계 중 p38 MAPK 및 JNK와의 관련성 및 나아가 산화성 스트레스와의 관련성에 대해 알아보았다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>재료</h2> <p>Dulbecco's Modified Eagle's Medium (D-MEM)/Ham's nutrient mixture F-12 (D-MEM/F-12)와 Class IV collagenase은 Life Technologies (Grand Island, NY, USA)로부터 구입하였다. Palmitic acid, penicillin, streptomycin 및 acrylamide는 Sigma Chemical Company (St. Louis, MO, USA)로부터 구입하였다. PD98059, SB203580 및 SP600125는 Calbiochem (La Jolla, CA, USA)에서 구입하였다. JNK, p38 MAPK, Bcl-2, Bax 및 beta actin 항체는 Cell Signaling technology (Herts, UK)에서 구입하였다. 그 외 실험에 이용된 모든 시야들은 고품질의 시약을 사용하였다.</p>