경남 일원의 닭 가공공장과 양계장 주변에서 채집된 각 시료로부터 닭 깃털 분해가 가능한 38균주를 분리했으며 우모 분해 정도가 큰 18균주를 선정해 skim milk agar plate에 접종, 배양 후 프로테아제 활성과 우모 분해능이 우수한 F7-1을 실험균주로 선정했다. Biolog 사의 MicroLog \( ^{\mathrm{TM}} \) system (USA)으로 실험균주를 동정할 경우 각각 4시간, 24시간 배양 시 균주의 SIM이 0.75 및 0.5 이상이어야 정확히 동정됨을 알 수 있었다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>우모 분해세균의 분리</h2> <p>경남 일원에 위치하는 닭 가공공장과 양계장 주변의 토양, 양계분뇨 및 퇴비 등 각 시료로부터 chicken feather를 분해 할 수 있는 38균주를 분리하였다. 육안 관찰로 우모의 분해 정도가 큰 18 균주를 선정하여 skim milk agar plate에 접종 및 배양하였다. 3일 동안 배양 후, 직경 \( 1 \mathrm{~cm} \) 이상의 투명환을 생성하는 12 균주를 선별하였다. 선정된 균주를 chicken feather가 첨가된 무기염 배지에 접종하여 5일 동안 배양한 결과, 퇴비로부터 분리된 C1-1 및 C1-2, 닭 가공공장 주변 토양으로부터 분리된 F3-1 및 F3-4, 붕괴된 우모로부터 분리된 F7-1 균주의 protease 활성이 우수하였다. 이 중 protease 활성과 우모 분해능이 가장 우수한 F7-1 균주를 실험균주로 선정하였다.</p> <h2>분리균주의 일차 동정</h2> <p>실험균주의 형태학적, 배양적 및 생화학적 특성을 밝힌 결과는 Table 2와 같다. 변 균주는 Gram staining시 양성을 나타내었으며, 포자를 형성하는 막대형 또는 타원형의 호기성 세균이었고, \( 3 \% \) KOH string test에서 음성을 나타내어 Gram staining의 결과를 재확인할 수 있었다. 세포는 운동성이 있었으나 배양시간 경과에 따라 운동성이 소실된 variant가 나타났으며, 이러한 현상은 Bacillus 속에서 일반적으로 관찰되는 사실로 보고되어 있다. Nutrient agar plate에서 원형의 볼록한 콜로니를 형성하였으며, \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 및 \( 10 \% \) NaCI 에서 생육하지 못하는 특성이 관찰되었다. Catalase를 가지고 있었으나 arginine dihydrolase 및 lysine decarboxylase는 가지고 있지 않았으며, casein, starch 및 gelatin을 가수분해할 수 있었다. 이상의 결과를 Cowan and Steel's Manual for the identification of medical bacteria 및 Bergey's manual of determinative bacteriology에 준하여 검토한 결과, 실험균주는 Bacillus 속에 포함됨을 알 수 있었으나 정확하게 일치하는 종(species)은 없었다.</p> <p>따라서 보다 정확한 균주 동정을 위하여 Biolog사의 MicroLog \( ^{\mathrm{TM}} \) system (USA)을 이용하여 실험균주를 24시간 동안 배양한 후, 발색반응을 측정하였다. 그 결과, 본 실험균 주는 Bacillus 속에 포함됨이 확실하였고, 그중 Bacillus meg-aterium과 가장 유사한 것으로 나타났다. 그러나 B. megater-ium 과의 similarity index value (SIM)가 0.49로 나타남에 따라 정확한 종의 동정을 위하여 다른 방법이 필요함을 알 수 있었다. Biolog user guide에 의하면 MicroLog \( { }^{\mathrm{TM}} \) system을 이용하여 세균을 동정할 경우, 각각 4시간 및 24시간 배양시, 균주의 SIM이 0.75 및 0.5 이상이 되어야만 정확하게 동정되었음을 나타낸다.</p>