곰보버섯 시료를 수분, 회분, 탄수화물, 조지방, 조단백질은 식품공전의 일반성분 시험법에 따라 측정하였고 시료당 3번씩 반복수행 하였다. 또한 , 무기성분, 총아미노산, 유리아미노산, 비타민을 분석하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>일반 성분 분석</h2> <p>본 실험에 사용한 곰보버섯 자실체는 Sichuan Mianyang Edible Fungi Research Institute (Sichuan Province, China)와 무등산 주변에서 구입한 것을 시료로 사용하였다. 수분, 회분, 탄수화물, 조지방, 조단백질은 식품공전의 일반성분 시험법에 따라 측정하였고 시료당 3번씩 반복수행 하였다.</p> <h2>무기성분의 분석</h2> <p>시료 \( 7.5 \mathrm{~g} \)을 증류수 \( 500 \mathrm{ml} \)을 가하여 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \)에서 24시간 가열 교반하여 여과 한 후 용액화된 시료의 주원소 및 미량 원소의 농도를 측정할 수 있는 flame and furnace, 4-lamp turret, Quadline background correction, GFTV로 된 원자 흡광 분광분석기 (UNICAM 989)를 이용하여 분석을 하였고 시료당 3번씩 반복수행하였다.</p> <h2>총 아미노산의 분석</h2> <p>곰보버섯의 총 아미노산 분석을 위한 시료의 전처리는 다음과 같은 방법으로 하였다. 시료 \( 1 \mathrm{~g} \)을 아미노산 분석기 Loading Buffer (Lithium Citrate \( \mathrm{pH} 2.2\)) \( 5 \mathrm{ml} \)에 넣고 초음파 추출을 30분간 시행한 후 \( 0.45 \mu \mathrm{m} \) filter로 filtering 후 \( 10 \% \) SSA (5-sulphosalicylic acid) \( 1 \mathrm{ml} \)과 위 시료 \( 1 \mathrm{ml} \)을 혼합한 후 \( 4^{\circ} \mathrm{C} \)에서 1시간 방치하여 침전된 단백질을 제거한 후 filtration하였다.</p> <p>이 중 \( 10 \mathrm{mg} \)을 취하여 PICO-tag 방법을 이용하여 PITC labeling한 후 얻은 시료 \( 400 \mu \mathrm{l} \) 중에서 \( 50 \mu \mathrm{l} \)을 취하여 HPLC (Waters 510)를 이용하여 Table 1과 같은 조건으로 총 아미노산 분석을 하였다.</p> <h2>유리아미노산의 분석</h2> <p>시료 \( 200 \mathrm{mg} \)을 absolute ethanol \( 1 \mathrm{ml} \)에 첨가하여 혼합한 후 상온에서 24시간 동안 shaking 하여 유리아미노산을 추출한다. 혼합액을 원심분리하여 상등액 \( 0.5 \mathrm{ml} \)을 취하여 Dowex 50 -X8 resin (\(200 \sim 400 \mathrm{mesh}\)) column (made in a Pasteur pipette)을 통과 시킨다음 \(10 \times\) column volumn의 증류수로 column washing하고, \(10 \times\) column volumn의 absolute ethanol로 protein, phenolic compound, carbohydrates, lipid를 제거하고, \(10 \times\) column volumn의 \( 2 \mathrm{~N} \) ammonium hydroxide로 유리아미노산을 용출한다. Column 용출액은 rotary evaporator를 이용하여 evaporation 시키고, 건조된 시료는 \( \mathrm{pH} \) \( 2.2 \) lithium citrate loading buffer를 이용하여 녹인 후 \( 0.2 \mu \mathrm{m} \) filter로 filtration 하였다.</p> <p>이 중 \( 20 \mu \mathrm{l}\) 을 취하여 HPLC (Waters 510)를 이용하여 Table 2와 같은 조건으로 유리 아미노산 분석을 하였다.</p> <h2>비타민 분석</h2> <p>시료 \( 1 \mathrm{~g} \)을 식품공전의 미량 영양성분 시험법에 따라 처리하여 이 중 \( 20 \mu \mathrm{l}\)을 취하여 HPLC (Waters 510)를 이용하여 Table 3과 같은 조건으로 비타민을 분석을 하였다.</p>