실험군은 정상식이군 , 고지방식이군, 고지방식이군+한약재 추출물 첨가군, 고지방식이군+한약재 추출물 첨가군으로 설정하였다. 시험군 쥐에서 전혈을 취하여 30분간 방치후 원심분리하여 혈장을 분리하였다. 간 조직내 조질함량은 Folch 등의 방법으로 추출하여 측정하고 중성지방은 Mendez 방법을 이용하여 iso-propanol 용액과 섞은 혼합액을 시료로 사용하였다. 실험군 간의 평균값 차이는 일원분산배치분석 후 Duncan's multiple range test를 통해 \( \alpha=0.05 \)에서 유의성을 검증한다.
<h2>실험동물 식이 조제 및 사육</h2> <p>실험동물은 생후 7주령 된 Sprague-Dawley 계 수컷 흰쥐를 표준사료로 1주일간 적응시킨 후 8주간 실험식이를 공급하였다. 실험 각군은 9마리를 한 군으로 하여 Table 2에 제시한 바와 같이 AIN-93 식이를 기준으로 조제하였으며, 실험군은 정상식이군(C), 고지방식이군(HF), 고지방식이군+한약재 추출물 I \( 5 \% \) 첨가군(HFE I), 고지방식이군+한약재 추출물 II \( 5 \% \) 첨가군(HFE II)으로 나누었다. 고지방식이는 \( 5 \% \) 의 대두유, \( 15 \% \) 의 소기름과 \( 1 \% \) 의 콜레스테롤식이로 구성하였으며, 식이는 일주일에 한번씩 제조하여 \( 4^{\circ} \mathrm{C} \) 에 보관하면서 매일 신선한 식이를 공급하였다. 실험동물은 동물실험실에서 개개의 스테인레스 케이지에서 사육하였고 사육조건은 온도 \( 20 \pm 2^{\circ} \mathrm{C} \), 습도 \( 40 \sim 50 \% \) 로 유지시키고, 명암은 12시간을 주기로 자동조절 되었으며, 물과 식이는 자유로이 섭취하도록 하였다. 성장상태는 매주 1회로 12시간 동안 식이공급을 중단시킨 다음 체중을 측정한 후 분석하였다.</p> <h2>혈장과 장기의 채취</h2> <p>12시간 공복시킨 쥐를 에틸에테르로 가볍게 마취시킨 후 대동맥에서 heparin이 처리된 주사기를 통하여 전혈을 취하여 냉장 온도에서 30분간 방치 후 \( 3,000 \mathrm{rpm} \) 에서 15분간 원심분리하여 혈장을 분리하였다. 혈액을 취한 후 개복하여 얻은 간은 \( 1.15 \% \mathrm{KCl} \) 완충액에 perfusion시켜 혈액을 제거한 후 여과지로 습기를 제거하고 분석 전까지 혈장과 간은 액체질소 처리하여 \( -80^{\circ} \mathrm{C} \) 에 보관하였다.</p> <h2>효소 및 지질함량 분석</h2> <p>GOT (glutamic oxaloacetate transaminase)와 GPT(glutamic pyruvate transaminase) 활성도는 Retiman-Frankel 법을 이용한 영동제약(주)의 GOT와 GPT 활성 측정용 kit를 이용하여 측정하였다. 간 조직내의 총 지질함량은 chloro-form: methanol \( (2: 1, \mathrm{v} / \mathrm{v}) \) 을 이용하여 Folch 등의 방법에 의하여 추출하여 측정하였고, 중성지방은 Mendez 등의 방법을 이용하여 총 지질 추출물 중 일부를 취해서 iso-propanol 용액 \( 2.0 \mathrm{ml} \) 과 잘 섞은 혼합액을 시료로 사용하였으며, 이때 표준용액으로는 triolein을 사용하였다. 총 콜레스테롤은 Zlatkis와 Zak 의 방법으로 측정하였으며, 간 조직내 인지질 함량은 총 지질 성분 중 일부 취해서 glacial acetic acid \( 3.0 \mathrm{ml} \) 와 잘 섞은 흔합액을 시료로 사용하여 Eng와 Noble의 방법으로 분석하였다. 이때 표준시약은 \( \mathrm{KH}_{2} \mathrm{PO}_{4} \) 를 사용하여 조제하였다.</p> <h2>통계처리</h2> <p>실험을 통하여 얻어진 자료는 SPSS/Windows 14.0을 이용하여 분석하였고, 그 결과는 평균 \( \pm \) 표준편차로 나타내었다. 한약재 추출물 농도에 따른 식혜 I과 페 대한 군간의 관능검사에 대한 평균값 차이는 student t-test에 의해 유의성을 검정하였다. 실험동물에 대한 성장상태나 효소 및 지질함량 분석에 대한 실험군 간의 평균값 차이는 일원분산배치분석(one-way analysis of variance)을 한 후 Duncan's multiple range test에 의해 \( \alpha=0.05 \) 의 수준에서 각 실험군 평균치 간에 유의성을 검정하였다.</p>