그람양성 세균, 그람음성세균 그리고 인체병원성 진균 각 1종에 일차적으로 향균 테스트를 진행해 항균 및 항진균 활성 능력이 뛰어난 BCNU 2003 균주를 선발했다. 검토 결과 BCNU 2003 균주는 포자를 형성하는 호기성 세균으로 밝혀졌다. 이후 조사 대상을 넓혀 그람양성 세균 3종, 그람음성 세균 3종 그리고 인체병원성 진균 6종에 대해 BCNU 2003의 항균, 항진균 활성을 검사한 결과 그람양성 세균에 대해서는 넓은 억제환이 나타났고 그람음성 세균에 대해서는 활성이 나타나지 않았다. 인체병원성 진균 활성테스트에서는 가장 높은 저해율을 보여 BCNU 2003이 넓은 항균스펙트럼을 소유하고 있다고 확인되었다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>균주의 분리 및 동정</h2> <p>태 백산 일대의 토양시료를 채취하여 LB agar 배지에 단계 희석법으로 도말하여 \( 26^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 2 일간 배양한 후, 각종 세균을 순수 분리하였다. 그람양성 세균, 그람음성 세균 및 인체병원성 진균 각 1 종에 대해 일차적으로 항균테스트를 실시하여 항균 및 항진균 활성이 우수하며, 항균스펙트럼이 넓은 BCNU 2003 균주를 선발하였다. 생리학적 및 생화학적 특성을 검토한 결과, BCNU 2003은 포자를 형성하는 호기성 세균으로 최적 배양온도는 \( 35^{\circ} \mathrm{C} \) 로, \( 20^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 \( 60^{\circ} \mathrm{C} \) 까지 생육이 가능하며, \( \mathrm{pH} \) 범위는 5.6에서 9.2로 비교적 넓은 \( \mathrm{pH} \) 영역에서 안정적으로 생육하였으며, \( 12 \% \) 의 높은 염분 농도에서도 생육이 가능하였다. BCNU 2003은 다양한 탄소원을 이용하는 것으로 나타났으며, 특히 glucose, mannitol 및 starch를 첨가했을 때 생육이 좋은 것으로 나타났다. 또한 amylase, protease, gelatinase, catalase 및 urease를 생성하여 다양한 효소를 분비하는 것으로 나타넜으며, Voges-Proskauer test는 음성, nitrate reduc-tase는 양성으로 조사되었다. 16S rRNA 염기서열 분석을 실시하여 Blast search를 통해 비교 분석한 결과, Bacillus amyloliquefaciens, 및 B. subtilis와 \( 99 \% \) 상동성을 갖는 것으로 나타났으며, 계통적으로는 B. amyloliquefaciens와 Bacillus val-lismortis의 subcluster에 속하는 균주로 확인되었다.</p> <h2>그람양성 세균, 그람음성 세균 및 인체병원성 진균에 대한 항균활성 측정</h2> <p>그람양성 세균 3종, 그람음성 세균 3종 및 인체병원성 진균 6종을 대상으로 BCNU 2003의 항균 및 항진균 활성을 조사한 결과, 그람양성 세균인 M. luteus에 대해서 \( 14.7 \mathrm{~mm} \) 의 넓은 억제환을 나타냈으며, 그람음성 세균에 대해서는 활성이 나타나지 않았다. 그리고 병원성 효모인 C. albicans와 Sa. cerevisiae 에 대해서 각각 \( 16.2 \mathrm{~mm} \) 와 \( 15.7 \mathrm{~mm} \) 의 넓은 억제환을 관찰할 수 있었다. 또한 Whipps의 방법에 준한 인체병원성 진균에 대한 활성테스트 결과 A. niger에 대해 \( 63.49 \% \) 로 가장 높은 저해율을 보였으며, T. mentagrophytes와 T. rubrum 에 대해서도 각각 \( 62.20 \%, 62.05 \% \) 의 높은 저해효과를 나타내었다. 또한 Ep. floccosum에 대해서도 다소 약하지만 \( 16.33 \% \) 의 활성을 나타내어 BCNU 2003이 인체병원성 진균에 대해 넓은 항균스펙트럼을 가진 것으로 확인되었다.</p>