YB-1401가 생산하는 mannanase의 pH 3.5-10, 11.0에서 1시간 동안 방치하였을 때 99%의 잔존활성을 보였으며, Bacillus속 균주 유래 mannanases들과 비교해 다수의 Bacillus속 균주 유래 mannanases에 비해서 열에 대한 안정성이 낮았으며, B. subtilis BS \( 5 \)나 Sphingomonas속 균주 유래의 mannanases 보다는 열에 안정하였다. 산성 뿐 아니라 알칼리성의 pH 범위에서도 안정성이 우수함이 확인되었다. 한편으로 B. subtilis WY 3434의 mannanase는 mannotriose는 분해 못하고 mannotetraose이상의 중합도를 갖는 MOS를 분해한다고 알려졌다.
<p>\( \mathrm { pH } \) \( 3-12 \)의 범위에서 mannanase의 안정성을 조사한 결과 \( \mathrm { pH } 3.5-10 \) 에서 \( 1 \)시간 동안 방치하였을 때 실활되지 않았으며, \( \mathrm { pH~ } 11.0 \)에서도 \( 99 \% \)의 잔존활성을 보였다(Fig. \( 3 \)). 이로 보아 내산성 균주로 분리된 YB- \( 1401 \)가 생산하는 mannanase는 최적 반응 \( \mathrm { pH } \)는 Bacillus속 균주 유래 mannanases들과 유사하였지만, \( \mathrm { pH~ } 4-9 \)의 범위내에서 안정한 것으로 알려진 B. subtilis B \( 23 \)과 B. subtilis G \( 1 \)의 mannanases 보다 산성 뿐 아니라 알칼리성의 \( \mathrm { pH } \) 범위에서도 그 안정성 이 우수한 것으로 확인되었다. 그러나 YB-1401의 mannanase는 \( \mathrm { pH~ } 3.0 \)에서는 \( 1 \)시간 방치하였을 때 잔존활성이 \( 46 \% \) 수준을 유지하여 \( \mathrm { pH~ } \mathrm { 3-10 } \)의 범위에서 안정한 것으로 보고된 Thielavia arenaria XZ \( 7 \) 유래의 곰팡이 효소보다는 산성 조건에서 안정성이 낮은 것으로 나타났다. Mannanase의 열안정성을 조사한 결과 \( 45 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 이하에서 \( 1 \)시간 동안 방치하였을 때 실활되지 않았으나, \( 50 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 이상에서는 실활되기 시작하여 \( 50 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서는 \( 52 \%, 55 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서는 \( 15 \% \) 정도의 잔존활성을 보였다. 이로 보아 YB- \( 1401 \)의 mannanase는 B. subtilis BCC \( 41051 \), B. subtilis G \( 1 \)과 B. subtilis WL- \( 3 \)을 포함한 다수의 Bacillus속 균주 유래 mannanases에 비해서 열에 대한 안정성이 낮았으며, B. subtilis BS \( 5 \)나 Sphingomonas속 균주 유래의 mannanases 보다는 열에 안정하였다.</p> <h1>반응산물</h1> <p>Mannanase에 의한 가수분해 산물을 조사하기 위해 중합도가 \( 2-6 \)인 MOS, LBG 와 guar gum을 기질로 하여 효소 반응을 실시한 후 가수분해 산물을 TLC로 분석한 결과 Fig. \( 5 \)에 나타낸 바와 같이 mannobiose는 가수분해 되지 않았으 며 이보다 중합도가 큰 MOS는 가수분해 되어 최종 산물로 mannotriose와 mannobiose가 다량 생성되었고 동시에 mannose도 소량 생성되었다. 그러나 mannotriose는 이보다 중합도가 큰 MOS에 비해 가수분해 정도가 미약한 것으로 확인되었으며 이러한 결과는 B. subtilis WL- \( 3 \)과 Bifidobacterium adolescentis의 효소와 유사하였다. 한 편 B. subtilis WY \( 34 \)의 mannanase는 mannotriose는 분해하지 못하고 mannotetraose 이상의 중합도를 갖는 MOS를 분해한다고 알려졌다.</p>