TUNEL 양성세포의 시간에 따른 변화를 보면 방사선 조사 후 8 시간(1.202 \( \pm 0.076) \)에 급격하게 증가하여 12 시간(2.445 \( \pm 0.217) \)에 최고치를 나타내었고 18 시간(1.094 \( \pm 0.081) \) 에 빠르게 감소하였으며(Fig.1) 기존 보고와 유사하였으며 방사선 조사용량의 증가에 따른 변화를 관찰하기 위하여 \( 0-8 \mathrm { ~Gy } \)의 방사선을 조사하고 8 시간 뒤에 변화를 관찰한 결과 방사선 조사군의 TUNEL 양성세포 수는 방사선 조사용량에 비례하여 증가하였다(Fig.2).
<h2>검경</h2> <p>각 실험동물 당 100 개의 정세관 단면에서 apoptosis 양성세포의 수를 검경하여 방사선 조사 후 시간경과 및 방사선 조사용량에 따른 변화를 우선 계측하였다. 각각의 정세관을 Oakberg 의 기준에 따라 12 단계로 분류하였고 Ⅱ-III, V, VIII, XI 단계를 나타내는 정세관을 각 개체 당 2개씩 선별하여 정세관내의 발생단계별 생식세포수를 계수하였으며 \(0,0.5 , 2.0, 8.0 \) \( \mathrm { ~Gy } \) 조사군에서 I-XII 단계 별 apoptosis 발생을 관찰하였다. 각 단계의 정세관은 I단계와 VIII단계는 마우스 마리 당 10 개씩을, 이외 단계는 마리 당 5 개씩을 측정하여 평균을 산출하고 각 마우스의 성적으로 적용하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>조직학적 변화</h2> <p>H-E 염색상에서 apoptosis 발생세포의 핵은 진하게 염색되었으며 세포질은 산성호성을 나타냈으나 핵의 응축 정도는 세포마다 차이가 있었으며, TUNEL 염색에서는 강한 양성반응을 나타내는 세포로 관찰되었다. 방사선 비조사 대조군에서도 정조세포 및 일부 분열중인 정모세포에서 apoptosis 양성세포가 관찰되었으며 정자세포와 지지세포에서는 특이적인 이상이 없었다. TUNEL-PAS 이중염색의 결과, 첨단체(acrosome)에 선택적으로 적색의 양성반응을 나타냈으며 첨단체의 확장 각도를 명확하게 관찰할 수 있어 각 상피단계의 구별이 용이하였다(Fig. 1).</p> <h2>방사선 조사 후 시간경과 및 조사용량 따른 TUNEL 양성세포변화</h2> <p>TUNEL 양성세포의 시간에 따른 변화를 보면 방사선 조사 후 8 시간(1.202 \( \pm 0.076) \)에 급격하게 증가하여 12 시간(2.445 \( \pm 0.217) \)에 최고치를 나타내었고 18 시간(1.094 \( \pm 0.081) \) 에 빠르게 감소하였으며(Fig. 1) 기존 보고와 유사하였다. 방사선 조사용량의 증가에 따른 변화를 관찰하기 위하여 \( 0-8 \mathrm { ~Gy } \)의 방사선을 조사하고 8 시간 뒤에 변화를 관찰한 결과 방사선 조사군의 TUNEL 양성세포 수는 방사선 조사용량에 비례하여 증가하였다(Fig. 2). TUNEL 양성세포는 정조세포와 정모세포에서 주로 관찰되었으며 특히 정조세포에서 그 수가 많았다. 비조사대조군에서 \( 0.315 \pm 0.065 \) 개의 양성세포가 관찰되었으며, \( 0.5 \) \( \mathrm { Gy } \) 조사군에서 \( 0.684 \pm 0.137,1 \mathrm { ~Gy } \) 조사군에서 \( 0.881 \pm 0.092,2 \) \( \mathrm { Gy } \) 조사군에서 \( 1.007 \pm 0.231,4 \mathrm { ~Gy } \) 조사군에서 \( 1.162 \pm 0.067 \) 그리고 \( 8 \mathrm { ~Gy } \) 조사군에서 \( 1.959 \pm 0.338 \) 개의 양성세포가 관찰되었 다. 각 조사선량에 따라 측정된 TUNEL 양성세포의 평균값이 linear-quadratic model \( \left ( \mathrm { Y } = \mathrm { aD } ^ { 2 } + \mathrm { bD } + \mathrm { c } \right ) \) 에 잘 맞고 이에 적용하면 용량-반응의 관계식은 \( Y=(-0.014 \pm 0.009) D ^ { 2 } + (0.31 \pm 0.697) \) \( \mathrm { D } + 0.3575 \left (r ^ { 2 } =0.9, \mathrm { Y } = \right . \) 고환정세관 한 개당 TUNEL 양성세포의 수, \( \mathrm { D } = \) 방사선량 \( \mathrm { Gy } \) )이었다. 용량별 변화 관찰 시점은 apopto- \( \mathrm { sis } \) 가 확연히 증가하면서 시간경과에 따른 정세관 발달주기변화에 영향이 가장 적은 방사선 조사 후 8 시간이 적절하였다. 방사선 비조사 대조군에서도 비교적 많은 양성세포가 관찰된 것은 고환의 경우 정조세포의 증식과 분화과정 중의 생리적 apoptosis의 결과라는 보고와 일치하였다.</p>