CP \( 1 \) \( 250 \mathrm { mg } \)을 Sepbox chromatography를 이용하여 \(20 \)시간 이내에 \(288 \)개의 소분획으로 분리하였는데 1-3개의 화합물을 포함한 소분획으로 분리할 수 있었다. 이후 각 소분획물의 \( \alpha \)-glucosidase inhibitory activity를 측정을 위해 농축하고 DMSO에 용해시켰다. AGI 활성 결과 총 8 개의 소분획물이 AGI activity를 가지는 것으로 나타났고, 상기 소분획의 활성물질을 조사하기 위해 LC-MS 분석을 수행하였다.
<h1>결 과</h1> <h2>Sepbox chromatography 소분획 분석 및 \( \alpha \)-glucosidase inhibition activity</h2> <p>CP \( 1 \) \( 250 \mathrm { mg } \)을 Sepbox chromatography를 이용하여 \(20 \)시간 이내에 \(288 \)개의 소분획으로 분리하였으며, 일부 소분획물의 HPLC 크로마토그램은 Fig. \(1 \)에 나타내었다. Fig. \(1 \)에서 보이는 대로, Sepbox system을 통해 CP \( 1 \)을 \(1 \)- \(3 \)개의 화합물을 포함한 소분획으로 분리할 수 있었으며, 분리에 소모된 시간은 \(20 \)시간 이내였다. 소분획 중 단일물질 수준으로 분리가 된 것으로 예상되는 시료를 LC-MS을 통해 분석한 결과, UV흡수스펙트럼과 분자량 정보를 바탕으로 \(4 \)T- \(10 \)은 luteolin \(7 \)- \(O \)-( \(2 \)"- \(O \)-apiosyl) glucoside (L \(7 \)AG), \(4 \)T- \(11 \)은 luteolin \(7 \)- \(O \)-glucoside (L \(7 \)G), \(4 \)T- \(13 \)은 apigenin \(7 \)- \(O \)-( \(2 \)"- \(O \)-apiosyl)glucoside (A \(7 \)AG), \(4 \)T- \(07 \)은 luteolin \(7 \)- \(O \)-( \(2 \)"- \(O \)-apiosyl- \(O \)- \(6 \)"-malonyl)glucoside (L \(7 \)AMG), \(5 \)T- \(09 \)는 apigenin \(7 \)- \(O \)-glucoside (A \(7 \)G), \(3 \)T- \(11 \)은 apigenin \(7 \)- \( O \)-( \(2 \)"- \(O \)-apiosyl- \(O \)- \(6 \)"-malonyl)glucoside (A \(7 \)AMG)으로 추정되었다(Table \(3 \)).</p> <p>이후 각 소분획물의 \( \alpha \)-glucosidase inhibitory (AGI) activity를 측정하기 위해 농축 후, 각각을 \( \mathrm { DMSO } \)에 용해시켰다. AGI 활성 결과, \( 3 \mathrm { ~T } -13(23.13 \pm 7.61 \%) \), \(4 \mathrm { ~T } -11(44.20 \pm 5.55 \%) \), \(4 \mathrm { ~T } -18 (25.26 \pm 5.76 \%) \), \(4 \mathrm { ~T } -19 \quad(24.17 \pm 7.01 \%) \), \(5 \mathrm { ~T } -13 \quad(37.94 \pm 9.16 \%) \), \( 5 \mathrm { ~T } -14(61.25 \pm 2.16 \%) \), \(8 \mathrm { ~T } -2(67.03 \pm 5.90 \%) \), \(9 \mathrm { ~T } -2(31.99 \pm 10.26 \%) \)로 총 \(8 \)개의 소분획물이 AGI activity를 가지는 것으로 나타났다(Fig. \(2 \)). 상기 소분획의 활성물질을 조사하기 위해 LC-MS 분석을 수행하였다.</p>