Fig. 2에 따르면, 자연 상태의 담배 식물체에서는 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 Oshsp26 전사체는 발견되지 않았으나, 변이 식물체에서는 동일한 조건에서도 다량의 전사체가 모든 변이 식물체에 축적되었다. 변이 식물체 1, 2, 3은 각각 높은, 중간, 낮은 발현 수준을 나타냈다. 이는 \( 42 ^ {\circ } \)에서 30분간 처리한 벼의 잎에서 나타나는 수준과 비슷했다. 단백질로 번역된 Oshsp26 전사체의 기능성을 확인하기 위해 Immunoblot 분석을 수행하였고, 결과적으로 \( 42 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 5시간 동안 고온 처리를 한 벼에서는 약 \( 21 \mathrm { kDa } \)의 Oshsp26 단백질 밴드가 관찰되었다. 이는 다른 식물에서 발견된 엽록체 small HSP의 크기와 일치했다. 반면, 변이 식물체에서는 상온에서도 동일한 분자량의 \( 21 \mathrm { kDa } \) 밴드가 관찰되었으며, Oshsp26 cDNA에 코드된 239개의 아미노산에서 예측되는 \( 26 \mathrm { kDa } \)의 밴드는 관찰되지 않았다.
<p>도입된 유전자, Oshsp26의 상온 \( \left (25 ^ {\circ } \mathrm { C } \right ) \)에서의 발현을 먼저 Northern blot 분석으로 확인하였다. Fig. 2에서 나타낸 바와 같이, wild-type 담배 식물체의 경우 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \)의 온도에서는 Oshsp26 transcript가 전혀 관찰되지 않았으나, 형질전환 식물체의 경우 고온처리를 하지 않은 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서도 상당한 양의 transcript가 모든 형질전환 식물체에서 축적되었다. 즉, 형질전화 식물체 1의 경우는 가장 높은 발현정도를, 형질전환 식물체 2의 경우, 중간정도의 발현정도를, 형질전환 식물체 3의 경우는 낮은 발현정도를 나타내어 \( 42 ^ {\circ } \), 30분간 처리한 벼의 잎에서의 발현량과 같은 수준의 transcripts가 축적되었다. 한편 형질전환 식물체에서 상온에서 발현된 Oshsp26 transcript가 실제로 단백질로 번역되어 기능하는지 여부를 조사하기 위하여 이들로부터 추출한 total protein을 이용하여 immunoblot 분석으로 조사하였다. 대조구로는 \( 42 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 5시간 처리한 벼의 잎에서 추출한 단백질을 사용하였다. 벼의 경우 \( 42 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 5시간의 고온처리에 의해 분자량 약 \( 21 \mathrm { kDa } \)의 Oshsp26 단백질 band가 관찰되었다. 이는 다른 식물로부터 보고된 엽록체 small HSP의 크기와 일치하였다. 또한 지금까지 보고된 in vitro translation 및 엽록체로의 transport 실험 결과 precursor인 \(24 \sim26 \mathrm { kDa } \) 단백질이 엽록체로 transport 된 후에도 \( 20 \sim 22 \mathrm { kDa } \) 크기의 mature protein으로 processing 된다는 보고와 일치한다. 반면에 \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 생장시킨 wild-type 담배에서는 특이적인 band가 관찰되지 않았다. 한편 형질전환 식물체의 경우 상온에서도 이와 동일한 분자량의 \( 21 \mathrm { kDa } \) band가 관찰되었으며 Oshsp26 cDNA에 code 된 239개의 아미노산으로부터 추정되는 \( 26 \mathrm { kDa } \)의 band는 관찰되지 않았다. 이러한 결과는 상온에서 발현된 Oshsp26 transcript가 단백질로 정상적으로 번역되었을 뿐만 아니라, 엽록체로 transport되어 mature protein으로 processing 되었음을 나타낸다. 또한 Oshsp26 단백질의 축적량은 transcript의 발현량과 거의 일치하였다.</p>