본 실험에서는 연천군 농업기술센터와 (재) 경기도경제과학 진흥원 천연물연구팀에서 제공받은 율무 뿌리 등 각종 부위의 시료를 사용하였으며, P-2000 digital polarimeter, Bruker Ascend Ⅲ 700 spectrometer, Finnigan TSQ Quantum mass spectrometer를 이용하여 비선광도, NMR, ESI-MS를 측정하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>실험 재료</h2> <p>본 실험에서 사용한 율무 (C. lachrymal-jobi var. ma-yuen) 뿌리를 비롯한 각종 부위의 시료는 연천군 농업기술센터로부터 제공받아 실험에 사용하였으며, 표본(G54)은 (재) 경기도경제과학 진흥원 천연물연구팀에 보관하고 있다.</p> <h2>시약 및 기기</h2> <p>비선광도는 P-2000 digital polarimeter (JASCO, Tokyo, Japan)를 사용하여 측정하였다. NMR은 Bruker Ascend Ⅲ 700 (700 \( \mathrm { MHz } \) Cryo Probe) spectrometer (Bruker Biospin, Rheinstetten, Germany)를 이용하여 측정하였으며, ESI-MS는 Finnigan TSQ Quantum mass spectrometer (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA)를 사용하였고, HRESI-MS는 AB SCIX TripleTOF 5600 + mass spectrometer (AB SCIEX, Framingham, MA, USA)를 이용하여 분석하였다. MPLC와 preparative HPLC는 Combi Flash Rf (Teledyne ISCO, Lincoln, NE, USA)과 Shimadzu system (LC-8A pump, SPD-20A UV/VIS detector, Kyoto, Japan)을 각각 사용하였다. 분석용 HPLC는 Waters (Waters Co., Milford, MA, USA)의 alliance 시스템(Waters 2998 PDA, Waters e2695 separation modules)을 사용하였다. TLC plate 는 Merck의 Kiesel gel \( 60 \mathrm { ~F } _ { 254 } \) \((0.25 \mathrm { ~mm } \), Darmstadt, Germany) 또는 RP- \( 18_ { 254 \mathrm { s } } \) \( (0.25 \mathrm { ~mm } ) \) 를 사용하였다. 발색시약으로는 \( 10 \% \) vanillin/ \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { SO } _ { 4 } \) (in \( \mathrm { EtOH } \)) 시약을 사용하였으며, UV의 검색은 254 와 \( 365 \mathrm { ~nm } \) 에서 확인하였다. 추출, 분획 및 MPLC에 사용한 모든 용매는 1급 시약을 사용하였고, preparative HPLC에 사용된 acetonitrile (Honeywell B&J, Muskegon, MI, USA)은 HPLC급 용매(99.9 \( \% \))로 사용하였다. 물은 초순수제조장치 (Cascada \( { } ^ {\mathrm { TM } } \) RO water, Pall Corporation, Washington, NY, USA)를 이용하여 3차 증류수를 사용하였다. 또한, Tyrosinase inhibitions assay는 L-tyrosine, mushroom tyrosinase와 arbutin (Sigma, St. Louis, MO, USA)을 사용하였 고, potassium phosphate buffer 제조를 위해 monobasic potassium phosphate \( \left ( \mathrm { K } _ { 2 } \mathrm { HPO } _ { 4 } \right ) \) 와 dibasic potassium phosphate \( \left ( \mathrm { KH } _ { 2 } \mathrm { PO } _ { 4 } \right ) \) (Sigma)를 사용하였으며, ELISA reader (Molecular Devices, Sunnyvale, CA, USA)로 \( 490 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하였다.</p>