녹차와 후발효차의 총 플라보노이드 함량을 분석했더니 1년 저장한 녹차의 열수추출물이 가장낮은 함량을 보였다. 총 페놀 함량은 녹차 에 비하여 후발효차가 더 낮았다. 후발효차와 녹차 추출물에서는 EGC, GC, catechin, catechol 및 EGCG기 검출되었고 녹차 추출물과 비교하면 GC와 catechin 양이 더 많았고 EGC, catechol 및 EGCG의 양은 더 적었다. SOD 유사활성능을 측정한 결과 녹차 추출물의 농도를 높일수록 활성이 계속 증가했고, 녹차 추출물의 농도를 높일수록 활성이 계속 증가하여, 추출물의 농도가 \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 일 때는 L-ascorbic acid와 녹차 추출물의 효과가 유사했고 \( 200 \mu \mathrm{g}/\mathrm{ml} \) 까지 높인 결과는 L-ascorbic acid와 상당한 차이를 보였다. 녹차와 후발효차 추출물의 hydroxyl radical에 대한 소거 효과를 실험한 결과 후발효차 추출물은 hydroxyl radical 소거 작용에서 녹차 추출물과 비슷한 경향을 보였다. \( \beta \)-carotene-linoleate system을 이용하여 농도의 변화에 따른 항산화 효과를 측정한 결과 후발효차 추출물의 항산화 효과보다 \(5\%\) 정도 높았다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>총 플라보노이드 함량과 총 페놀 함량</h2> <p>플라보노이드의 생리활성 작용으로 가장 주목받는 것 중의 하나는 항산화 작용이다. 플라보노이드는 유리기에 수소원자를 공여하여 생체내에서 산화 스트레스에 의해서 과잉으로 생성된 활성 산소 등의 자유 라디칼의 생성을 억제시킴으로써 항산화 작용을 발휘하게 된다. 그러나 플라보노이드가 고농도로 존재할 경우 \(\mathrm{pH}\)가 알칼리성이고, 또 철분이 존재할 때는 역으로 활성산소의 공여체로서 작용하기 때문에 일정농도 이상의 과잉섭취는 오히려 인체에 해를 초래하게 된다.</p> <p>녹차와 후발효차의 총 플라보노이드 함량을 분석한 결과는 Table 1과 같다. 1년 저장한 녹차의 열수추출물은 \( 345.1 \mu \mathrm{g} / \mathrm{g} \)으로 가장 낮은 함량을 보였다. Kim 등과 정의 보고에 의하면 녹차 열수추출물은 \( 35.5 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \), ethanol 추출물은 \( 31.3 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \)으로 추출용매에 따라 추출되는 플라보노이드의 비율이 차이가 나타남을 알 수 있다.</p> <p>페놀성 물질은 식물계에 널리 분포되어 있는 2차 대사산물의 하나로서 다양한 구조를 갖는데, 특히 이 중 phenolic hydroxyl기가 단백질 및 기타 거대 분자들과 결합하는 성질이 강하여 항산화 등과 같은 생리활성 기능을 나타내게 된다. 총 페놀 함량은 녹차 \( 35.7 \sim 46.8 \mathrm{~g} / 100 \mathrm{~g} \)에 비하여 발효차의 열수추출물은 \( 23.5 \sim 23.9 \mathrm{~g} / 100 \mathrm{~g} \)으로 낮았다. 또한 Chung은 Camellia sinensis에서 \(10.3\%\) 검출되었고, Yeo 등은 녹차의 수용성 획분은 \( 1.7 \mathrm{mg} / 100 \mathrm{~g} \), 메탄올 가용성 획분은 \( 2.3 \mathrm{mg} / 100 \mathrm{~g} \), 홍차의 수용성 획분은 \( 0.9 \mathrm{mg} / 100 \mathrm{~g} \), 메탄올 가용성 획분은 \( 0.7 \mathrm{mg} / 100 \mathrm{~g} \)이라는 보고가 있다. 또한 1년 저장한 녹차와 발효차의 페놀과 플라보노이드의 함량이 감소되는 결과는 저장기간 동안 동정되지 않은 다른 물질로 변환되었을 것이라 판단된다.</p> <h2>Catechin 함량</h2> <p>Catechin은 epicatechin과 함께 마호가니 나무로부터 최초로 확인된 물질로써, 몇 가지 주요한 catechin으로는 (-)-epigallo-catechin 3-O-gallate (EGCG), (-)-epigallocatechin (EGC), (-)-epicatechin 3-O-gallate (ECG), (-)-epicatechin (EC), (+)-gallocatechin (GC), (+)-catechin (C) 등이 있다. 녹차와 후발효차 추출물의 catechin 함량은 Table 2와 같다. 녹차 추출물에서는 EGC, GC, catechin, catechol 및 EGCG로 총 5종이 검출 정량되었다. EGC는 열수추출물 \( (29.4 \mathrm{mg} / \mathrm{g})\)>1 년간 저장한 열수추출물 \( (22.0 \mathrm{mg} / \mathrm{g}) \)의 순으로 그 함량이 높았다. 생리활성이 가장 많은 EGCG는 열수추출물 \( (40.4 \mathrm{mg} / \mathrm{g})\)>1년간 저장한 열수추출물 \( (36.7 \mathrm{mg} / \mathrm{g}) \) 의 순이었다. 총 함량을 보면, 열수추출물 \( (16.3 \mathrm{mg} / \mathrm{g})\)>1 년간 저장한 열수추출물 \( (14.2 \mathrm{mg} / \mathrm{g}) \) 순으로 많았고, 녹차추출물에서는 catechin 양이 감소함을 알 수 있었다.</p> <p>후발효차 추출물은 녹차추출물과 같이 EGC, GC, catechin, catechol 및 EGCG가 검출 동정되었다. 녹차 추출물과 비교하면 GC와 catechin 양은 증가하였으나 EGC, catechol 및 EGCG의 양이 감소함을 알 수 있었다. 특히 EGCG는 열수추출물에서는 검출되지 않았으며, 총 함량은 열수추출물 \( (140.6 \mathrm{mg} / \mathrm{g})\)>1년간 저장한 열수추출물 \( (127.0 \mathrm{mg} / \mathrm{g}) \) 순으로 검출되었다.</p> <p>Na 등의 보고에 의하면, 녹차 잎의 catechin 함량은 (+)EGC가 \( 26.0 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \), (+)catechin이 \( 1.6 \mathrm{mg} / \mathrm{g}\), (-)EC가 \( 7.6 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \), (-)ECG가 \( 22.3 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) 그리고 EGCG가 \( 78.7 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \)으로 총 함량이 \( 136.2 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \)이고, 발효된 black tea bag의 catechin 함량은 (+)EGC가 \( 6.9 \mathrm{mg} / \mathrm{g}\), (+)catechin이 \( 0.16 \mathrm{mg} / \mathrm{g}\), (-)EC가 \( 0.9 \mathrm{mg} / \mathrm{g}\), (-)ECG가 \( 35.7 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) 그리고 EGCG가 \( 7.3 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \)으로 총 함량이 \( 51.1 \mathrm{mg} / \mathrm{g} \)였다.</p> <h2>SOD 유사 활성</h2> <p>자연에 존재하는 항산화 효소 중의 하나인 superoxide dismutase (SOD)는 세포에 유해한 환원 산소종을 과산화수소로 전환시키는 반응 \( \left(2 \mathrm{O}^{2-}+2 \mathrm{H}^{+} \rightarrow \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2}+\mathrm{O}_{2}\right) \)을 촉매하는 효소이며, SOD에 의해 생성된 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \)는 peroxidase나 catalase에 의하여 무해한 물분자와 산소분자로 전환된다. 이러한 SOD는 아니지만 superoxide anion의 활성을 억제시킬 수 있는 물질의 SOD 유사활성능을 측정한 결과는 Fig. 1 과 같다.</p> <p>녹차 추출물의 농도를 높일수록 활성이 계속 증가하여, 추출물의 농도가 \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 일 때는 대조구인 L-ascorbic acid와 녹차 추출물의 효과가 비슷하였다. 그러나 농도를 \( 200 \mu \mathrm{g}/\mathrm{ml} \) 까지 높인 결과 L-ascorbic acid는 \( 60 \% \), 녹차 추출물은 \( 10 \sim 26 \% \)의 효과를 보여 대조구로 사용한 L-ascorbic acid와 는 상당한 차이를 보였다.</p> <p>Pyrogallol의 자동산화 반응을 이용하여 후발효차 추출물의 SOD 유사활성을 측정한 결과, 추출물의 농도가 \( 100 \mu \mathrm{g}/\mathrm{ml}, 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)일 때는 녹차 추출물보다 낮은 활성을 보였다. Kim 등의 보고에 의하면 녹차의 열수추출물과 ethanol 추출물은 각각 \( 85.3 \%\), \(63.5 \% \) 로 높은 활성을 보인다는 보고와는 달리 본 실험에서는 추출물의 농도와 결과에 다소간 상이한 결과를 나타내었다.</p> <h2>Hydroxyl radical의 소거 효과</h2> <p>녹차와 후발효차 추출물의 hydroxyl radical에 대한 소거 효과를 실험한 결과는 Fig. 2와 같다. 추출물을 500, 1000, 2000 및 3000 \(\mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)의 농도로 첨가하여, 합성 항산화제 BHA를 대조구로 사용하여 다른 용매 추출물들과 비교한 결과, 후발효차 추출물은 hydroxyl radical 소거 작용에서 녹차 추출물과 비슷한 경향을 나타내었으며, 추출물의 농도가 \( 3000 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 일 때 녹차 추출물은 \( 60 \% \), 후발효차 추출물은 \( 54 \%\), 1년 저장한 녹차 추출물은 \( 58 \% \) 및 1년 저장한 후발효차 추출물은 \( 62 \% \) 의 소거효과를 나타내었다. 또한 대조구인 BHA는 \( 2000 \mu \mathrm{g} / \mathrm{m} \ell \)일 때 \( 95.5 \% \)의 소거효과를 보였다.</p> <h2>\( \beta \)-Carotene-linoleate system을 이용한 항산화 효과</h2> <p>녹차와 후발효차를 열수로 추출하여 \( \beta \)-carotene-linoleate system을 이용하여 농도의 변화에 따른 항산화 효과를 측정한 결과는 Fig. 3에 나타내었다. 추출물의 농도가 \( 1000 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)일 때 대조구인 L-ascorbic acid는 \(37\%\), 녹차 추출물은 \( 27 \% \), 1년 저장한 녹차 추출물은 \( 34 \% \), 발효차 추출물은 \( 30 \% \), 1년 저장한 발효차 추출물은 \( 24 \% \)의 항산화 효과를 보였으며, 추출물의 농도가 \( 3000 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)일 때는 녹차 추출물과 1년 저장한 녹차 추출물에서 \( 70 \% \)와 \( 75 \% \)의 항산화 효과를 나타내어 후발효차 추출물의 항산화 효과보다 \(5\%\) 정도 높게 나타났다.</p>