마늘 추출물을 처리한 3T3-L1 지방전구세포의 생존율을 알아보기 위해 WERG, WEABG, WEABG-A를 적절한 농도로 72시간 동안 처리하였다. 생존 세포의 수는 그림 Fig.\( 1 \mathrm{~A} \)와 같이 계산되고 비교되었습니다. 얻어진 결과에 기초하여, 3T3-L1 지방전구세포의 생존율 및 증식은 마늘 추출물 시료 3종 모두 처리에 의해 유의한 영향을 받지 않았다. 실험 조건은 최대 \( 4 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 의 농도로 설정되었습니다. 따라서 3종의 시료 중 WEABG가 3T3-L1 지방전구세포의 지방세포로의 분화 억제 효과가 가장 높은 것으로 관찰되었다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>3T3-L1 지방전구세포의 생존율 및 증식에 미치는 마늘 추출물의 영향</h2> <p>마늘 추출물 처리에 따른 3T3-L1 지방전구세포의 생존율을 알아보기위하여 WERG, WEABG 및 WEABG-A를 적정농도로 72 시간 동안 처리한 후, 살아있는 세포의 수를 계수하여 비교한 결과는 Fig. \( 1 \mathrm{~A} \) 에 나타낸 바와 같다. 결과에서 알 수 있듯이 WERG 및 WEABG-A 처리군의 경우에는 전체적으로 생존율의 감소가 완만하게 이루어지는 반면 WEABG 처리군의 경우에는 \( 4 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 의 농도까지는 생존율의 감소가 크게 나타나지 않았지만 \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 의 농도에서부터는 급격한 생존율의 감소가 관찰되었다. 동일 조건에서 배양된 3T3-L1 지방전구세포의 증식에 미치는 WERG, WEABG 및 WEABG-A의 영향을 알아보기 위하여 MTT assay를 실시하였다. Fig. \( 1 \mathrm{~B} \) 에 나타낸 바와 같이 WEABG 처리군에서 \( 4 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 의 농도까지는 증식억제효과가 크게 나타나지 않았지만 \( 4 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 의 농도에서부터 증식억제효과가 나타나기 시작하여 \( 10 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 의 농도에서 WEABG에서는 약 \( 40 \% \) 정도의 증식억제효과가 나타났지만 WERG 및 WEABG-A 처리군의 경우에는 WEABG 처리군에 비하여 증식억제 효과가 약한 것으로 나타났다. 이상의 결과에 준하여 마늘 추출물 세 종류의 시료 모두에서 생존율 및 증식에 큰 영향을 미치지 않는 \( 4 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 의 농도까지를 실험 조건으로 설정하였다.</p> <h2>3T3-L1 지방전구세포의 lipid droplet 생성에 미치는 마늘 추출물의 영향</h2> <p>Lipid droplet은 phospholipid monolayer에 의하여 둘러싸여진 중성지방으로 구성된 비활성 소낭으로서 precursor fi-broblast에서부터 지방세포로의 분화과정에서 나타나며, PPAR \( \gamma \) 와 같은 중요한 adipogenic transcription factor들에 의해서 조절되는 것으로 알려져 있다. 성숙한 지방세포에서의 lipid droplet 유지는 LPL에 의한 triglyceride 유입과 adipose triglyceride lipase (ATGL) 및 hormone sensitive lipase (HSL)에 의한 triglyceride 유출에 의하여 조절된다. 따라서 3T3-L1 지방전구세포가 지방세포로의 분화과정에 나타나는 lipid droplet 생성에 마늘 추출물이 어떠한 영향을 미치는지를 확인하기 위하여 각각의 시료를 적정 농도로 처리하여 분화를 유도한 후 Oil Red O 염색 전후로 구분하여 lipid droplet 생성정도를 위상차 현미경으로 관찰하였다. Fig. 2 및 3 에서 볼 수 있듯이 마늘 추출물을 처리하지 않고 분화를 유도하였을 경우에 세포질 내 lipid droplet의 형성이 활발하게 유발되는 것으로 관찰되었으나, WEABG 처리에 의하여 lipid droplet의 형성이 처리 농도 의존적으로 억제되는 것을 확인하였다. 그러나 WERG 및 WEABG-A 처리군의 경우에는 lipid droplet의 크기는 조금 줄어드는 것으로 나타났지만 lipid droplet의 개수에는 큰 차이를 보이지 않는 것으로 나타났다. 따라서 세 종류의 시료 중 3T3-L1 지방전구세포에서 지방세포로의 분화 억제에 WEABG가 가장 효과가 늪았음을 알 수 있었다.</p>