초기 배양 실험을 위해 동양 잡종 'Marco Polo', 'Casa Blanca', 아시아 잡종 'Jolanda'를 선발하였다. 구근은 개화 후 수확하였으며, 1월 중순경에 저장한 전년도 구근을 실험재료로 사용하였다. 실험에서는 구근의 바깥쪽 비늘을 제거하고 토양과 직접 접촉하지 않는 비늘의 가운데 부분을 실험재료로 사용하여 채취한 구근의 겉비늘잎을 떼어내고 흐르는 물(수돗물)로 충분히 씻은 후 중성세제로 2~3회 더 씻었다. 재배용 식물재료인 각 나리 품종의 비늘은 큰 비늘을 위해 여러 조각으로 나누고 작은 비늘로 잘랐다. 더 큰 비늘은 반으로 자르고 이빨로 더 나누었습니다. 조각의 크기는 약 \( 0.5 \mathrm{~cm} \)였습니다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>식물재료</h2> <p>초기배양의 실험재료로는 나리인 Oriental hybrid 'Marco 'olo', 'Casa Blanca'와 Asiatic hybrid 'Jolanda'를 개화 후 수확하여 보관 중인 구근을 다음 해 1월 중순경에 실험재료로 이용하였다. 실험에 이용된 구근은 인편 외부엽을 제거하여 토양과 직접 접촉하지 않은 인편의 중간부위룰 실험재료로 사용하였다.</p> <p>자구의 대량증식을 위한 배양에서는 초기배양에서 얻은 자구를 이용하였으며, 자구의 크기를 균일하게 하기 위해 외부 인편의 일부를 제거하였다.</p> <p>순화에 관한 실험은 자구 증식 실험에서 얻은 세 품종 공히 자구의 구폭 \( 3.5 \sim 4.0 \mathrm{~mm} \), 구고 \( 5.0 \sim 5.5 \mathrm{~mm} \)인 것을 이용하여 128공 공정육묘용 tray에 자구 순화용 상토(peatmoss perlite : vermiculite \( =1: 1: 1(\mathrm{v} / \mathrm{v})) \)를 채운 후 식재하여, 온도 \( 20^{\circ} \mathrm{C} \), 광도 \(2,500 \mathrm{lux}\), 광주기 명 16시간, 암 8시간, 습도 \( 70 \% \)인 생장상에서 순화시켰다. 관수는 분무기를 이용하여 2일에 1회 상토가 충분히 젖을 수 있도록 하였다.</p> <h2>재료의 살균</h2> <p>채취한 구근의 외부 인편엽을 제거한 다음 흐르는 물(수돗물)에 충분히 세척하고, 중성세제를 이용하여 다시 2-3회 세척하였다. 박테리아류의 살균을 위해서 배양에 사용할 인편을 하나하나 떼어낸 후 증류수로 수회 헹구고 농용마이신 500배액에 30분간 교반하면서 침적하였고, 곰팡이류의 살균을 위해서는 \( 1 \% \) 벤레이트 용액에 30분간 침지시켜 1차 살균을 완료하였으며, 2차 살균은 \( 2 \% \mathrm{NaOCl} \) 용액으로 감압-교반하면서 20분간 실시한 후 살균수로 3회 세척하였다. 살균이 완료된 후에는 인편표면의 물기를 완전히 제거하기 위해 무균상에서 살균된 petri dish에 인편을 담아 약 1시간 가량 건조하였다.</p> <h2>인편 및 자구배양</h2> <p>재료의 살균 후 초기 배양조건을 동일하게 하고 균 발생에 의한 실험의 지장을 방지하기 위해 4주간 생장조절물질이 첨가되지 않은 MS배지에서 배양하였으며 이때 배양 용기는 \( 10 \times 1.5 \mathrm{~cm} \)의 시험관을 이용하였다. 초기 배양단계에서는 살균단계에서 인편의 가장자리가 손상을 입은 것이있었기 때문에 손상된 부분은 메스로 완전히 제거한 후 치상하였다. 배양 개시 4주 후 오염이 되지 않은 인편을 선발하여 자구증식용 배지에 이식하였다. 자구증식용 배지는MS 배지의 다량원소 농도를 \( 1 / 2 \), 미량원소는 전량, NAA \( 0.3 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \) 및 sucrose \( 30 \mathrm{~g} / \mathrm{L} \)를 첨가하였다. 고체배지는 한천 \( 8 \mathrm{~g} / \mathrm{L} \)를 첨가하였고, 액체배지는 첨가하지 않았다.</p> <p>배양할 식물재료인 나리 각 품종의 인편은 큰 것은 여러조각으로 나누어 치상하였고 크기가 작은 것은 \( 1 / 2 \) 로 절단하여 치상하였는데 절편의 크기는 가로 · 세로를 각각 약 \( 0.5 \mathrm{~cm} \)로 하였다. 이때 메스로 인편 표면에 가벼운 상처를 준 뒤 배지에 9절편씩 치상하였다.</p> <p>자구증식을 유도하기 위한 실험은 인편 배양에서 획득한 자구를 이용하였으며, 이 때 자구의 크기는 구폭 \( 4.5 \mathrm{~mm} \), 구고 \( 6.8 \mathrm{~mm} \), 생체중 \( 15 \mathrm{mg} \)인 것을 이용하였다. 배양조건은 온도 \( 25 \pm 1^{\circ} \mathrm{C} \), 광도 \(2,000 \mathrm{lux}\), 광주기 \( 16 / 8 \) 시간 (명/암)으로 하였으며, 배양용기는 고체배지의 경우 \( 750 \mathrm{ml} \) 사각 배양병에 배지 \( 100 \mathrm{~m} \ell \)을 분주하여 사용하였으며, 액체배지는 위와 같은 배양조전에 \( 250 \mathrm{m \ell} \) 삼각플라스크에 액체배지 \( 50 \mathrm{~m} \ell \)씩 분주하여 \( 100 \mathrm{rpm} \)으로 진탕배양하였다. 고체배지와 액체배지 각각 5반복으로 실험을 실시하였다. 4주에 1회씩 계대배양하여 12주간 배양 후 생육조사를 실시하였다.</p>