PCR 반응과 Southern 분석한 결과 GalUR 유전자가 상추 nuclear genome 내로 안정적으로 삽입됨을 확인하였고, 형질전환 상추에서 HPLC 분석을 통해 비타민 C 함량이 대조구에 비해 3~4배 높은 것을 선발할 수 있었다. 따라서 식물에서 유래된 유전자를 형질전환하여 비타민 C 함량을 높일 수 있음을 알 수 있었다.
<p>PCR 반응에서 GalUR 유전자가 확인된 식물체로부터 GalUR 유전자의 도입여부를 보다 더 정확하게 확인하고자 형질전환 개체들 중 8점을 선정하여 Southern 분석을 실시하였다. HindⅢ로 처리한 결과 대조구에서는 band를 확인할 수 없었으며, 형질전환체의 경우 \( 12 \mathrm { kb } \)~ \( 5 \mathrm { kb } \) 사이에서 강한 band가 one copy에서 복수 copy까지 다양하게 확인 되었다. 따라서 외래 유전자 GalUR이 상주 nuclear genome 내로 안정적으로 삽입되었음을 확인하였다 (Fig. 5).</p> <h2>상추 형질전환체 비타민 C 함량 분석</h2> <p>형질전환 상추에서 GalUR 유전자가 확인된 개체들을 가수분해 하여 얻어진 \( T_ { 1 } \) 종자를 파종하였다. 대조구 화홍적축면 상추와 GalUR 형질전환체 \( \mathrm { T } _ { 1 } \) 의 형질을 관찰해본 결과 원예적으로 대조구와 별다른 차이가 없었다 (Fig. 6).</p> <p>비타민 C 함량 (L-Ascorbic acid)을 측정 하고자 한국식품연구소에 대조구와 형진전환체 시료를 의뢰하여 HPLC 분석 방법으로 조사하였다. 대조구의 경우 \( 0.25-0.37 \mathrm { mg } / 100 \mathrm { ~g } \)정도를 나타냈고, 형질전환체의 겅우 최저 \( 0.6 \mathrm { mg } / 100 \mathrm { ~g } \) 에서 최고 \( 1.33 \mathrm { mg } / 100 \mathrm { ~g } \) 정도 나타났다. 그 결과 형질전환체 모두 대조구 보다 높은 비타민 C 함량을 보였으며, 특히 대조구에 비해서 비타민 C 함량이 \( 3 \sim 4 \) 배 높은 \( T_ { 1 } \) line을 선발할 수 있었다 (Fig. 7). 쥐에서 유래된 비타민 C 생합성에 관여하는 GLOase 유전자 형질전환 담배와 상추에서도 비타민 C가 대조구에 비해 7배 증가하였다는 보고가 있다 (Jain and Nessler 2000). 또한 Kim 등 (2004)의 보고에서도 역시 GLOase 유전자가 도입된 상추 형질전환체에서 대조구에 비해 비타민 C 함량이 높은 몇몇 개체가 확인되었다. 본 실험 결과에서 주목 할점은 Agius 등 (2003)의 실험에서 언급 하였듯이 딸기에서 유래된 GalUR 유전자를 형질전환 할 경우 비타민C 생합성이 대조구에 비해 형질전환체의 경우 더 높게 합성됨을 알 수 있었고, 특히 주로 생식으로 섭취하는 상추의 경우 식물에서 유래된 유전자라는 사실 때문에 소비자들의 거부감이 한층 줄어들 것으로 기대된다.</p>