3T3-L1 세포를 성숙 지방세포로 유도한 후 미역 에탄올 추출물을 \( 0 \sim 50 \mathrm {\mu g } / \mathrm { ml } \) 농도로 첨가하여 지방세포의 분화와 triglyceride 축적에 미치는 영향을 연구하였다. 미역 에탄올 추출물이 첨가된 배지에서는 triglyceride 함량이 감소하는 것을 확인하였다(Fig. 2). 또한, 미역 에탄올 추출물이 PPAR \( \gamma \), leptin, HSL의 발현에 미치는 영향을 western blot과 RT-PCR로 mRNA와 단백질 수준에서 분석하였다. 결과적으로, PPAR \( \gamma \)의 발현이 저해되어 지방세포 분화와 지방 축적, leptin의 발현이 저해되는 것으로 나타났다.
<h2>미역 에탄올 추출물이 지방세포에서 triglyceride 축적에 미치는 영향</h2> <p>미역 에탄올 추출물이 지방세포의 분화 및 triglyceride 축적에 미치는 영향을 확인하기 위하여 3T3-L1 세포를 성숙지방세포로 유도하여 \( 0 \sim 50 \mathrm {\mu g } / \mathrm { ml } \) 의 농도로 미역의 에탄올 추출물을 첨가하였다. 분화 유도 8일째, 분화가 완료된 성숙지방세포에 Oil red O 염색을 하였으며, 염색된 lipid droplet을 iso-propanol로 추출한 후 ELISA reader를 이용하여 triglyceride 함량을 분석하였다. Fig. 2에 나타난 바와 같이 정상배지에서 분화된 지방세포와 비교해 볼 때, 미역 에탄올 추출물을 첨가한 배지에서 지방세포 내 축적된 triglyceride 함량이 감소하였다. \( 50 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 의 미역 에탄올 추출물 농도에서 지방 축적이 약 \( 40 \% \) 로 감소되었으며, 미역 에탄올 추출물에 의한 trigly-ceride 축적 억제효과를 확인할 수 있다.<h2>미역의 에탄올 추출물이 지방세포 분화 조절인자들의 발현에 미치는 영향</h2> <p>지방전구세포로부터 지방세포로의 분화는 많은 종류의 adipogenic transcription factor들의 조절에 의하여 유발되는 것으로 알려져 있다. PPAR \( \gamma \) 는 지방전구세포에서 지방세포로의 분화를 촉진시키며, PPAR \( \gamma \) 의 발현량 증가는 지방세포의 증가를 의미한다. Leptin과 HSL은 지방세포에서 특이적으로 분비되는 호르몬과 효소로 지방세포 증가에 관한 지표로 사용된다. 이렇게 분화된 세포는 lipid droplet 생성 및 세포의 크기 증가 등 형태학적인 특징과 더불어 특이적인 유전자의 발현을 유발함으로서 지방 세포의 특징을 지니게된다. 따라서 미역의 에탄올 추출물이 PPAR \( \gamma \), leptin과 HSL의 발현에 어떠한 영향을 미치는지 western blot과 RT-PCR을 이용하여 mRNA 및 단백질 단계에서 확인하였다. Fig. 3(A)와 (B)에 나타난 바와 같이, 분화유도 과정에서 미역 에탄올 추출물을 처리한 경우 HSL의 발현은 mRNA와 단백질 수준에서 유의적인 차이가 없었다. 그러나 PPAR \( \gamma \) 와 leptin의 발현은 미역 에탄올 추출물의 농도가 증가함에 따라 감소하였다. 이와 같은 결과는 미역 에탄올 추출물 처리에 의해 PPAR \( \gamma \) 의 발현이 저해되며 이로 인해 지방세포분화, 지방축적 및 leptin의 발현이 저해되는 것으로 판단된다.</p> <p>본 연구에서는 미역 에탄올 추출물의 항 비만 효과를 유전자적 단계에서 PPAR \( \gamma \), leptin과 HSL을 통해 3T3-L1의 분화유도능 억제에 관한 mRNA 전사 및 단백질 발현에 관한 연구를 수행하였으며, 그 결과 미역 에탄올 추출물이 지방세포의 감소와 지방축적에 영향을 미쳐 결과적으로 지방세포의 수와 세포 내 triglyceride의 함량이 감소되는 것으로 사료된다.</p>