DPPH는 비교적 안정한 free radical이고, 항산화 활성을 측정하는데 있어서 많이 활용되는 방법이다. 지질 과산화 반응은 여러 독성 물질에 의해 간 세포에 치명적인 손상을 입힌다. 여러 솔잎 수용성 식물들이 항산화 효과와 동시에 지질 과산화 억제 활성을 가지고 있는 것을 확인할 수 있다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>총 폴리페놀 화합물의 함량</h2> <p>폴리페놀 화합물은 식물계에 널리 분포되어 있는 2차 대사산물로서 일반적으로 항산화 작용이 강한 것으로 알려겨 있다. 본 실험에서 사용한 솔잎 수용성 추출물의 총 폴리페놀 화합물 함량을 tannic acid를 표준곡선으로 하여 측정한 결과 Table 1과 같이 \( 1.61 \% \)가 함유되어 있었다. Kang 등은 솔잎 생체 \( 100 \mathrm{~g} \) 당 총 폴리페놀 함량이 \( 1.80 \% \) 라고 보고하였는데, 이는 본 실험 결과와 비슷하였으며, 식물 잎에서 추 출한 총 폴리페놀 함량이 각각 \( 1.32 \%, 1.34 \% \) 라고 보고한 \( \mathrm{Kim} \) 등의 연구결과와 비슷하였다.</p> <h2>DPPH법에 의한 전자 공여능</h2> <p>DPPH는 비교적 안정한 free radical로써, ascorbic acid, tocopherol, polyhydroxy 방향족 화합물, 방향족 아민류에의해 환원되어 짙은 자색이 탈색되는 원리를 이용하여 항산화 활성을 측정하는데, 이러한 DPPH법은 식물 추출물의 항산화 활성을 간단히 측정할 수 있는 동시에 실제 항산화 활성과도 연관성이 매우 높기 때문에 많이 이용되는 방법이다. 솔잎 수용성 추출물의 항산화 효과를 DPPH radical 제거정도를 측정하여 전자 공여능으로 나타낸 결과, \( 0.01 \%\), \(0.05 \% \), \( 0.1 \% \) 농도에서 각각 \( 18.2 \%\), \(64.3 \%\), \(70.0 \% \) 로 나타나 농도 증가에 따라 항산화 활성도 증가됨을 알 수 있었다(Fig. 1). 특히 \( 0.1 \% \) 농도에서 대조구인 \( 0.05 \% \) BHT와 비슷한 수준으로 높은 항산화 활성이 나타났다. 이는 Kim 등의 에탄올 로 추출한 솔잎이 \( 66.47 \% \), 솔잎과 자초복합물이 \( 48.89 \% \) 의 전자 공여능을 나타낸 결과보다 우수한 전자 공여능 효과를 보였다. 이는 Boo 등이 솔잎으로부터 free radical 제거 작용이 있는 4-hydroxy-5-methyl-3[2H]-furanone을 분리하였으며, 솔잎 추출물의 전자 공여능은 이 물질에 의한 것으로 사료된다.</p> <h2>간 microsome의 지질 과산화 억제활성</h2> <p>지질 과산화 반응은 여러 가지 독성 화학물이나 약물 또는 당뇨병 등 생체 이상에 의해 간세포에 중대한 손상을 입히는 것으로 알려져 있다. 이러한 기전은 조직 내 세포의 산화적 스트레스의 증가, 즉 free radical 생성의 증가 및 항산화적 방어력의 감소로 인해 일어나게 된다. 이러한 지질과산화 반응으로 형성된 지질 과산화물은 생체 내에서 퇴행성 과정을 유발하고, 암, 노화, 생체막의 변화 및 파괴 등 생체기능에 좋지 못한 효과를 나타내므로 생체 내에서 지질 과산화물의 제어는 매우 중요하다. 동물 체내에서 생체막 지질의 과산화물 생성 정도를 나타내는 TBARS 함량은 각 조직세포의 microsome에 \( \mathrm{Fe}^{++} \)/ascorbate을 첨가하여 비효소적으로 유도하는데, 솔잎의 수용성 추출물이 TBARS 함량에 미치는 영향은 \( 0.01 \%\), \(0.05 \%\), \(0.1 \% \) 농도에서 각각 \( 28.2 \% \),\( 63.1 \%\), \(67.7 \% \) 의 지질 과산화 억제효과가 있었다(Fig. 2). 이는 Jun 등의 참오동나무 열매의 수용성, methanol, eth-anol 추출물의 \( 0.6 \% \) 농도에서 각각 \( 61.0 \%\), \(69.0 \%\), \(62.0 \% \) 의 지질 과산화 억제효과가 있다고 보고된 것 보다 더 낮은 농도에서 비슷한 정도의 억제효과를 나타낸 것으로 보아 솔잎 수용성 추출물이 강한 항산화 효과를 가지고 있는 것으로 나타났다.</p> <h2>Linoleic acid 산화 실험계를 이용한 항산화 활성</h2> <p>솔잎의 수용성 추출물을 불포화 지방산인 linoleic acid를 이용한 thiocyanate 방법으로 항산화 활성을 측정한 결과는 Fig. 3 과 같다. 솔잎 수용성 추출물의 농도에 따른 항산화 활성의 차이는 나타나지 않았으나, \( 0.01 \%\), \(0.05 \%\), \(0.1 \% \) 의 농도에서 모두 반응 7일째까지 대조구에 비해 매우 강한 항산화활성이 유지되었으며, \( 0.05 \% \) BHT와도 비슷한 수준의 높은 항산화 활성을 나타내었다. 또한 TBA법을 이용하여 항산화 활성을 측정한 결과는 Fig. 4 와 같다. 반응 6일째까지는 \( 0.1 \% >0.05 \% >0.01 \% \) 의 순으로 농도 증가에 따라 항산화 활성도 높게 나타났으나, 반응 7일째에는 항산화 활성의 차이가 나 타나지 않았다. 이들에 비해 대조구로 사용된 \( 0.05 \%\) BHT는 매우 강한 항산화 작용을 보였다. Choi 등및 Chang 등은 식품으로 사용되어 그 안전성이 확인된 각종 식물 및 약 재를 ethanol과 물로 추출하여 항산화력을 검색한 결과, ethanol 추출물이 물 추출물 보다 항산화 효과가 강하고 추출 수율도 높았다고 하였다. 따라서 솔잎을 각종 유기용매로 추 출한 분획으로 항산화 실험을 한다면 보다 강력한 항산화 물 질을 분리 할 수 있을 것으로 생각된다.