비장내 이식 전 간세포와 함께 배양한 배자줄기세포는 사립체로 관찰되었다. 사립체는 한쪽이 불규칙한 타원형으로 분명한 핵소체와 분절된 과립세포질세망과 같은 양상을 띄었다. 이식 80일째는 핵소체와 불규칙한 형태의 핵이 관찰되었다. 비장내 이식 후 TGF 면역반응 및 EGF 면역반응과 Apoptosis 면역반응에 대한 소견은 대체로 양성반응을 보이는 세포들이 다수 관찰되었다.
<h3>3) 비장내 이식 후 전자현미경적 소견</h3> <p>이식 전 간세포와 함께 6일간 합동배양한 배자줄기세포는 한쪽이 불규칙한 타원형으로 분명한 핵소체와 분절된 과립세포질세망, 소수의 사립체를 관찰할 수 있었다. 이식 전 간세포와 함께 8일간 합동배양한 줄기세포는 둥근 타원형의 핵을 가지며 분절된 과립세포질세망이나 사립체의 수가 증가되고 세포막면에는 소수이지만 작은 미세융모들이 발달하고 있어서 좀 더 분화된 것으로 나타났다.</p> <p>비장이식 후 줄기세포는 분화하여 이식 10일 후 전체적으로 이웃하는 세포들과 넓게 접촉하고 있었다. 세포핵은 진정한 염색질과 뚜렷한 핵소체를 가지고 있었다. 세포질내에는 불규칙한 모양의 공포들과 함께 이식 전보다 더 커진 소수의 사립체와 분절된 과립세포질세망과 수많은 리보좀들이 세포질내 산재하고 있어 초기 간세포의 양상을 나타내었다.</p> <p>이식 20일째에 이식한 줄기세포는 더욱 분화하여 세포소기관들이 잘 발달하고 있었으며 주위의 세포들과 다각형으로 접하고 있었다. 아주 큰 타원형의 핵을 가지고 있으며 매우 잘 발달된 과립세포질세망들과 많은 리보좀들과 원형의 사립체나 작은 분비과립이 발달하고 있는 것으로 관찰되어 간세포로의 기능적인 구조를 나타내기 시작하였다.</p> <p>이식 30일째 분화한 세포들은 작아진 핵내 분명한 핵소체를 볼 수 있으며, 세포질내 소기관은 더욱 발달하여 큰 타원형의 사립체들과 소수의 소포들과 풍부한 리보좀들이 세포질 전체에 고르게 분포하였으며 간세포에서 관찰되는 무과립세포질세망까지 나타났다.</p> <p>이식 40일째의 분화 간세포는 뚜렷한 핵소체와 작은 원형의 핵이 관찰되었다. 세포질내에는 잘 발달된 2-3줄의 선상을 이룬 과립세포질세망과 함께 발달된 크고 작은 둥근 사립체들이 현저하게 나타났으며 간세포와 같이 과산화소체들과 다른 세포와의 접촉부에 부위에는 많은 분비과립이나 소포들을 관찰할 수 있었다.</p> <p>이식 80일째에는 뚜렷한 핵소체와 불규칙한 형태의 핵이 관찰되었다. 세포질내에는 크고 작은 과산화소체들과 함께 매우 큰 multivesicular bodies, 소수의 둥근 사립체와 과립세포질세망 분비과립을 볼 수 있으며 세포막에는 융모상의 돌기들이 담세관(bile canaliculus)을 형성하고 있는 것이 관찰되어 거의 기능적인 간조직의 구조인 것을 관찰하였다.</p> <h2>면역조직화학적 소견</h2> <h3>1) TGF 면역반응 소견</h3> <p>비장내 이식 후 분화한 세포의 TGF 반응은 10일째에 혈관 근처에 산재하는 세포들의 세포질내 옅은 갈색의 미약한 양성반응 보이는 세포들이, 이식 후 20일째에는 뚜렷한 TGF 반응을 보이는 세포들이 소수 출현하였다. 30일째에는 세포질내 짙은 갈색의 TGF 반응을 보이는 세포들이 다수 출현하였으며, 이식 40일 후에는 전체 소엽에서 세포질내 TGF 반응을 보이는 세포들의 수가 현저하게 증가하였으며, 이식 80일째에는 40일과 비슷한 양상을 보이지만 세포질내 옅은 갈색 반응을 보이는 세포들이 증가하였다.</p> <h3>2) EGF 면역반응 소견</h3> <p>비장내 이식 후 분화한 세포의 EGF 반응은 10일째에는 세포질내 옅은 황색으로 보이는 약한 양성반응의 세포들이, 이식 20일 후 세포질내 좀 더 짙은 강한 양성반응 보이는 세포들이 다수 관찰되었으며, 30일째에도 20일째와 비슷한 소견을 나타내었다. 이식 40일 째에는 약한 양성반응을 나타내는 새포가 감소되어 나타났으며, 80일째에는 EGF 반응을 나타내는 두서너개의 세포만이 있었을 뿐 대부분의 세포에서는 반응이 나타나지 않았다.</p> <h3>3) Apoptosis 면역반응 소견</h3> <p>비장내서 세포자멸 반응 과립은 림프구의 핵내에는 짙게 나타났고 비장내 이식한 분화세포에서는 핵내 옅은 황색 또는 갈색으로 염색되어 나타났다. 이식 10일째 세포자멸 반응 과립은 림프구의 핵내에서는 아주 뚜렷하게 나타났으나 분화한 세포 핵내에는 소수의 옅은 반응을 나타낸 세포를 제외하면 전체적으로 거의 반응이 나타나지 않았다. 20일째에도 림프구에는 분명한 반응을 보였으나 분화 간세포에는 소수의 핵에서 반응 과립이 관찰되었다. 30일째에는 주위에 있는 림프구보다는 약한 반응이지만 간세포의 타 원형 핵내에 뚜렷한 양성반응을 나타낸 세포들이 출현하기 시작하여, 이식 40일 후에는 분화 간세포의 핵내 양성반응 과립을 나타낸 세포들의 수가 다소 증가하였으며 상대적으로 림프구의 반응은 감소되어 나타났다. 이식 80일째에는 40일군과 비슷한 양상을 보이지만 간세포의 증식과 분화로 인하여 주위의 림프구 반응이 드물게 관찰되었고 소엽내 세포의 핵내 반응이 뚜렷하였다.</p>