24시간 물에 침지시킨 보리를 \( 121^{\circ} \mathrm{C} \)에서 2시간 동안 고압살균한 후 미리 배양한 표고버섯 균사체 종균을 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \)에서 냉각된 보리배지에 접종하였다. 표고버섯 균사체 배양물을 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \)에서 8일간 배양한 후 열풍건조기를 이용하여 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \)에서 건조시켰고 또한 분쇄기를 사용하여 건조된 표고버섯 군락 배양물을 100 메쉬 분말로 분쇄하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>재료</h2> <p>늘보리는 진양농업협동조합(Jinju, Republic of Korea), 탈지대두분은 (주)개미산업(Eumseong, Republic of Korea), 황백당은 (주)삼양사(Ulsan, Republic of Korea), \( \mathrm{KH}_{2} \mathrm{PO}_{4} \) 는 (주) 영진화학(Bucheon, Republic of Korea), \( \mathrm{MgSO}_{4} \) 는 K+S KALI \( \mathrm{GmbH} \) (Kassel, Germany)로부터 구입하여 사용하였다. 표고버섯균(Lentimus edodes)은 종자관리소(Whaseong, Republic of Korea)로부터 품종생산/판매신고를 필한 (주) HK 바이오텍 (Jinju, Republic of Korea)의 균주를 사용하였다. 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), NADPH/ \( \mathrm{Fe}^{2+} \) 와 cumine hydro-peroxide \( (\mathrm{CuOOH}) \), thiobarbituric acid, 1,1,3,3,-tetramethoxy-propane (TMP), \( \mathrm{CCl}_{4} \), Silymarin 등은 Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA), ethanol은 SK chemicals (Ulsan, Republic of Korea)로부터 구입하여 사용하였다. 그 외 사용된 시약은 first grade 이상이었다.</p> <h2>표고버섯 균사체 배양</h2> <h3>고체배양</h3> <p>24시간 물에 침지시킨 보리를 \( 121^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 2시간 고압 살균한 다음 미리 배양시킨 표고버섯균사체종균을 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) 로 식힌 보리배지에 접종하였다. \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) 배양기에서 8일간 배양하고 열풍건조기를 이용하여 표고버섯균사체 배양물을 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 건조시켰다. 건조된 표고버섯균사체 배양물을 미분쇄기를 이용하여 100 mesh로 분말화 하였다.</p> <h3>액체배양</h3> <p>탈지대두분 \( (2.5 \mathrm{~g} / 1) \), 황백당 \( (25 \mathrm{~g} / 1), \mathrm{KH}_{2} \mathrm{PO}_{4}(0.025 \mathrm{~g} / 1) \), \( \mathrm{MgSO}_{4}(0.025 \mathrm{~g} / \mathrm{l}) \) 를 물과 흔합한 배지를 \( 121^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 2시간 고압살균하고 미리 배양한 표고버섯균사체종균을 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) 로 식힌 액체배지에 접종하였다. 이를 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \) 배양기에서 8일간 배양하고 \( 121^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 고압 추출하였다. 추출물에 탈지대두분 \( 10 \%(\mathrm{w} / \mathrm{w}) \) 혼합한 다음, 열풍건조기를 이용하여 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 건조하였다. 건조된 표고버섯군사체 배양물을 미분쇄기를 이용하여 100 mesh로 분말화 하였다.</p> <h3>표고버섯균사체 혼합물 LED 제조</h3> <p>상기 고체배양으로 제조한 표고버섯균사체 분말과 액체배양으로 제조한 표고버섯균사체 분말을 \( 2: 1(\mathrm{w} / \mathrm{w}) \) 로 혼합한 것을 시험에 사용하였다.</p> <h3>\( \beta \)-Glucan 함량 측정</h3> <p>시료 LED의 \( \beta \)-glucan 함량은 건강기능식품공전 건강기능식품 시험법 III.3.4.3 베타글루칸 측정 방법에 준하여 측정하였다. 그결과 LED에 함유된 \( \beta \)-glucan의 함량은 (\( 14.1 \% \)) 이었다.</p> <h2>In vitro 실험</h2> <h3>시료</h3> <p>증류수 \( 10 \mathrm{ml} \) 에 \( 32 \mathrm{mg} \) LED를 혼탁 시키고 여과 \( (0.21 \mu \mathrm{m} \) membrane 필터)한 다음 여액을 증류수로 희석하여 사용하였다.</p>