본 동물실험에서는 특정병원체부재 Sprague-Dawley 랫드를 이용하였다. 실험 물질로서는 2-bromopropane (2-BP)를 사용하였으며, \(1\)일 \(1\)회씩 \(14\)일간 반복으로 \( \mathrm{kg} \) 당 3 \( \mathrm{ml} \)투여 하였다. 한편, 투여용량은 사망이 초래되지 않으면서도 고환독성이 나타날 것으로 예상되는 \( 1000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \)를 선택하였다. 다음으로 실험동물의 부검은 에테르 마취하에 실시되었으며, 장기 검사는 육안으로 실시하였다.
<h1>재료 및 방법</h1><h2>실험동물 및 사육환경</h2><p>실험동물은 화인실험동물연구센터(전남 나주)로부터 12주령의 특정병원체부재(specific-pathogen free) Sprague-Dawley 랫드를 구입하였고, 1 주일간의 순화 및 검역 후 건강한 동물만을 선발하여 시험에 사용하였다. 실험동물은 온도 \( 23 \pm 3^{\circ} \mathrm{C} \), 상대습도 \( 50 \pm 10 \% \), 인공조명 12시간(08:00 \(\sim\) 20:00)으로 유지된 실험실에 사육하였으며, 스테인레스제 망사육상자(\(220 \mathrm{W} \times 410 \mathrm{L} \times 200 \mathrm{H} \mathrm{mm} \) )에 순화기간 및 검역기간 중에는 사육상자 당 3마리 이하로, 투여기간 중에는 2마리 이하로 사육하였다. 사료(삼양사료, 원주)와 물(상수도수)은 자유 섭취시켰다.</p><h2>시험물질 및 부형제(vehicle) 대조물질</h2><p>시험물질 2-bromopropane (2-BP)은 Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, WI, USA)의 제품을 구입하여 사용하였다. 화학적 순도는 \( 99 \% \) 이상이었으며, 부형제인 옥수수기름(Sigma Chemical Co., MO, USA)에 용해하여 사용하였다. 시험물질은 매일 조제하여 사용하였으며, 부형제대조군은 옥수수기름만을 사용하였다.</p><h2>투여기간 및 투여방법</h2><p>수컷 랫드에게 1일 1회씩 14일간 반복투여 하였고, 투여 액량은 가장 최근에 측정한 체중을 기준으로 하여 \( \mathrm{kg} \) 당 3 \( \mathrm{ml} \)로 하였다. 본 시험의 투여경로는 피하로 설정하였다. 사람에 있어서 본 시험물질의 주요 노출 경로는 흡입 또는 피부이지만 흡입노출이나 피부적용은 많은 기술적 어려움이 있다. 따라서 본 시험에서는 흡수경로가 경피와 매우 유사하면서도 경피나 흡입경로에 비해 보다 많은 양의 시험물질을 개체마다 일정하게 투여할 수 있는 피하를 투여경로로 선택하였다.</p><h2>시험군의 구성 및 투여용량의 설정</h2><p>투여용량을 결정하기 위해 1000, 2000 및 3000 용량으로 각 군당 3마리씩 5일간 반복투여한 결과, \( 3000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 용량에서는 3마리 중 2마리가 사망하였고, \( 2000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 용량에서는 운동성감소와 허약, 적색유루 등의 전신적 독성증상이 관찰되었다. 반면, \( 1000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 용량에서는 운동성감소와 식욕 부진 등의 미약한 독성증상만 인정되었다. 2-BP의 4주간 반복경구투여시험에서도 \( 1000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 용량은 고환독성용량으로 확인되었다. 따라서 본 시험에서는 2주간의 반복피하투여에 의해 사망이 초래되지 않으면서도 고환독성이 나타날 것으로 예상되는 \( 1000 \mathrm{mg} / \mathrm{kg} \) 용량을 투여용량으로 선택하였다.</p><h2>부검 및 장기중량측정</h2><p>투여개시 후 3, 7 및 14일째에 각각 10마리의 투여군 동물을 부검하였고, 대조군 동물은 투여개시 후 14일째에 부검하였다. 에테르 마취 하에 부검한 다음 방혈치사 시켰으며, 주요 장기에 대하여 육안적 검사를 실시하였다. 14일째에 부검한 대조군 및 투여군 동물에 대해서는 고환과 부고환, 전립샘 및 정낭샘의 습중량을 측정하였고, 부검 시 체중에 대한 상대장기중량(organ-to-body weight ratio, \(\%\))을 계산하였다. 우측고환은 중량 측정 후 조직검사를 위해 Bouin 용액에 고정하였다.</p>