본 연구자들은 1998년부터 2001년에 걸쳐 부산광역시 가덕도, 남해군 삼동면 및 산청군 지리산에서 포획한 등줄쥐들이 높은 농도의 페놀화합물(4-t-octylphenol, non-ylphenol 및 BPA)과 유기주석화합물(monobutyltin, MBT; di-butyltin, DBT; tributyltin, TBT)을 체내에 가지고 있다는 사실을 알게 되었다. 그래서 이 연구진들은 2002년 11월 2003년 2월에 걸쳐 번식 이상이 발생하지 않은 등줄쥐를 포획하여, TBTCl 및 BPA를 등줄쥐에 단기간 투여하여 단기 노출이 등줄쥐의 생식기관에 미치는 영향과 다음 세대의 출생과 번식에 미치는 영향을 알아보고자 하였다.
<h1>서 론</h1> <p>내분비계장애물질로 알려져 있는 비스페늘 A (BPA)는 플라스틱인 폴리카보네이트와 에폭시 수지의 합성원료로서 캔용기의 코팅제와 치아의 보충제 등으로 사용되며, 고압과 열을 가하는 산업 공정 등에 의해 유출되어 식품 등을 오염시킨다고 알려져 있다. 또 다른 내분비계장애물질인 유기주석 화합물은 주로 선박이나 어망, 어구 등의 방오제 등에 사용되는데, 주로 해수 중에서 검출되며, 오염된 어패류 등을 통해 상위소비자에게까지 영향을 미치게 된다. 본 연구자들은 부산광역시 가덕도 대항동, 남해군 삼동면 및 산청군 지리산에서 1998년부터 2001년에 걸쳐 포획한 일부 등줄쥐에서 높은 농도의 페놀화합물(4-t-octylphenol, non-ylphenol 및 BPA)과 유기주석화합물(monobutyltin, MBT; di-butyltin, DBT; tributyltin, TBT)을 검출하였으며, 이들 등줄쥐의 대부분에서 생식소중량지수(GSI) 및 정소나 부정소 조직에 이상이 관찰된 점으로부터, 등줄쥐의 번식 이상이 페놀화합물이나 유기주석 화합물의 영향에 의한 것이라고 추론한 바 있다. 본 연구에서는 위 연구에서 검출된 화합물 중 TBTCl 및 BPA를 등줄쥐에 단기간 투여하여, 이들 화합물에 의한 단기 노출이 등줄쥐의 생식기관에 미치는 영향 및 다음 세대의 출생과 번식에 미치는 영향에 대해서 알아보고자 하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>등줄쥐 채집</h2> <p>번식 이상이 발생하지 않은 등줄쥐를 포획하기 위해서 주위에 생활 및 공업형 오염원이 없는 경기도 이천시 설성면의 농경지 부근을 포획장소로 선정하여, 등줄쥐 수컷 약 40개체를 등줄쥐의 번식기 동안 Sherman live trap으로 포획하여 이들의 생식소(정소 및 부정소)의 크기를 관찰한 결과 모두 정상적인 크기의 생식소(GSI \( 3.0 \) 이상)를 가지고 있었다. 따라서 위 장소에서 등줄쥐를 비번식기인 2002년 11월 2003년 2월에 걸쳐서 포획하여, 이 중 체중 \( 20 \mathrm { ~g } \) 이상의 성체 암·수 각각 31개체씩을 투여실험에 이용하였다. 등줄쥐는 포획 직후, 실험실로 옮겨와서 일주일간 순화시키고, 교미율을 높이기 위해 수컷 한 개체 당 각 수컷의 체중보다 약 \( 1 ^ {\sim } 2 \mathrm { ~g } \) 정도 가벼운 체중의 암컷을 선별하여, 투여 실험 직전까지 약 \( 1 ^ {\sim } 3 \)개월 동안 암·수 한 쌍씩 사육용 케이지에 넣어 실외에서 사육하였다. 사육용 사료와 물은 충분히 공급하였으며, 신선한 야채와 과일 등을 수시로 공급하여 스트레스를 최소화하였다. 야생 등줄쥐의 사육은 Oh와 Mori의 방법을 참고로 하였다.</p> <h2>TBTCl과 Bisphenol A의 투여</h2> <p>본 연구에 사용된 TBTCl (tri-n-butyltin chloride)은 동경화성공업주식회사로부터 구입한 순도 \( 95 \% \)의 화합물이며, BPA는 Aldrich사에서 구입한 순도 \( 99 \% \)의 화합물로서, 이들을 corn oil (Sigma사)에 녹여 사용하였다. 시료 준비를 위해 사용한 모든 초자기구는 증류한 아세톤과 헥산으로 3회씩 세척한 후 완전히 건조시켜 사용하였다. 암·수 15쌍의 비번식기 등줄쥐를 5쌍씩 세 그룹 즉, TBTCl 300, 600 및 3,000 \(μg/kg/day \) 투여군으로 나누어 실험군별로 번식기 직전인 2003년 2월 말부터 7일간 해당 농도의 TBTCl을 대퇴부에 근육주사 하였다. 또 다른 암·수 12쌍의 등줄쥐를 암·수 4쌍씩 3 그룹, 즉 BPA 250, 500 및 5,000 \(μg/kg/day \) 투여군으로 나누어 2월 말부터 7일간 위와 같은 방법으로 주사하였다. 대조군 4쌍에게는 corn oil \( 10 \mathrm { ml } / \mathrm { kg } / \mathrm { day } \) 씩을 동일한 방법으로 주사하였다. 각 화합물의 투여 농도는 각 화합물의 대사율(TBTCl, [17,20]; BPA, [1]), 야생 등줄쥐에서의 검출된 양 및 여러 연구에서 실험용 흰쥐에 투여한 양을 근거로 설정하였다. 화합물의 투여가 끝난 2003년 3월부터 이들에게 사육용 사료와 물을 층분히 공급하면서 번식 활성기인 6월말까지 개월간 사육한 후, 수컷 등줄쥐(부모세대)의 생식소중량지수(GSI, gonadosomatic index, 체중에 대한 오른쪽 정소 및 부정소의 무게 비), 정소 및 부정소의 광학 및 전자현미경상, 각 화합물의 체내 잔류농도, 이들로부터 태어난 F1 세대들의 개체 수, 수컷 새끼들이 성체에 이르렀을 때의 생식소중량지수, 정소 및 부정소 조직의 광학 및 전자현미경상을 조사하였다. 모든 실험군와 대조군과의 유의차는 t-test를 사용하여 검정하였다.</p>