복분자 methanol 추출물과 각각의 분획물을 comet assay를 이용하여 분석한 결과 위암 세포주에 대해 DNA 손상을 유도하는 것으로 나타났다. 또 항산화 효과를 측정해 보기 위하여 총 폴리페놀 함량과 플라보노이드 함량을 측정한 결과, 복분자 methanol 추출물과 각각의 분획물은 항산화 효과 및 위암 세포주에 대한 성장 저해 활성 및 높은 DNA 손상 유도 효과를 갖고 있음을 알 수 있었다.
<h2>Comet assay에 의한 복분자의 위암세포 DNA손상 유발</h2> <p>복분자 methanol 추출물과 각각의 분획물에 대하여 \( \mathrm { IC } _ { 50 } \)값을 결정하여 세포에 처리한 후 시간별로 comet assay를 실시한 결과 image는 Fig. 3과 같으며, 분석 결과는 Fig. 4와 Fig. 5와 같다. 두 종류 위암 세포주에 대해 methanol 추출물과 각각의 분획물 모두 control에 비해 DNA 손상을 유도하는 것으로 나타났으며, 또한 시간에 비례하여 우수한 DNA 손상효과를 보였다. AGS에서는 butanol fr.이 시료 처리 1시간 이내에 \( 50 \% \) 이상의 DNA 손상을 유발시키며 가장 좋은 효과를 나타내었고, water fr.층을 제외한 ethylacetate fr.과 methanol 추출물은 시료 처리 8시간 이내에 \( 64 \% \) 이상의 DNA 손상을 유발시켰다(Fig. 4). KatoⅢ에서 역시 AGS와 유사한 경향을 나타내었다. 시료 처리 4시간 이내에서는 water fr.을 제외하고 \(56 \sim 65 \% \)의 DNA 손상을 나타내었으며, butanol fr., ethylacetate fr., methanol ext. 순으로 손상효과를 보였다(Fig. 5). 두 종류 위암세포주의 DNA 손상을 비교해 보았을때, 동일한 처리시간에도 불구하고 특히 AGS 세포주에서 더 좋은 효과를 보였는데 이는 MTT에 의한 세포 성장저해효과의 결과와 유사하였다. 이상의 결과에서 복분자 methanol 추출물 및 분획물은 위압세포의 유전적 손상 유도 효과를 가지는 것으로 확인되었다.</p> <h1>요 약</h1> <p>본 연구에서는 다양한 기능성을 가지는 복분자를 \( 80 \% \) methanol로 추출한 후 분획물들을 제조하여 항산화 효과 및 인간 유래 위암세포인 AGS와 KatoⅢ을 이용하여 성장 저해 효과와 DNA손상을 측정하였다. 항산화 효과를 측정해 보기 위하여 총 폴리페놀 함량과 플라보노이드 함량, DPPH free radical의 소거활성을 측정하였는데, 먼저 폴리페놀의 경우 butanol fr., ethylacetate fr., water fr.순으로 나타났고 특히 butanol fr.의 경우 \( 546.25 \mathrm { ~ } \mu \mathrm { g } / \mathrm { mg } \)의 매우 높은 폴리페놀 함량을 확인 할 수 있었다. 플라보노이드의 함량 결과 ethylacetate fr., butanol fr., water fr., 순으로 나타났으며 ethylacetate fr.의 경우 \( 141.78 \mathrm { ~ } \mu \mathrm { g } / \mathrm { mg } \)의 높은 플라보노이드 함량을 확인할 수 있었다. DPPH free radical의 소거활성에서는 폴리페놀 함량의 순서와 같은 효과를 보였으며, 합성 항산화제인 BHA의 \( \mathrm { RC } _ { 50 } \)값 \( 3 \mathrm { ~ } \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)보다 water fr.을 제외하고 더 좋은 소거능을 확인 할 수 있었다. 인간 유래 위암세포주의 성장 저해 효과를 살펴본 결과 AGS와 KatoⅢ 세포주 모두 butanol fr.에서 가장 좋은 저해능을 나타내었고, butanol fr., ethylacetate fr., water fr. 순서로 저해효과를 나타내었다. DNA손상을 측정한 결과 역시 이와 같은 순으로 나타났으며, butanol fr.에서 1 시간 이내에 약 \( 50 \% \)정도의 손상유도 효과를 보였다. 이상의 결과에서 복분자 methanol 추출물과 각각의 분획물은 항산화 효과 및 위암 세포주에 대한 성장 저해 활성 및 높은 DNA 손상 유도 효과를 갖고 있음을 알 수 있었다.</p>