pyrogallol의 자동산화 반응을 통해 상황버섯발아현미 추출물의 SOD 유사활성을 측정하였다. LPS에 의해 \( \mathrm{NO} \)가 유도된 대식세포에 상황버섯발아현미 추출물을 처리하여 면역학적 방어 등의 역할을 수행하는 \( \mathrm{NO} \)의 활성을 조사하여 면역기능과 관계가 있음을 밝혔다.
<h2>Superoxide dismutase -likeactivity (SODA) 측정</h2> <p>상황버섯발아현미 추출물의 SOD 유사활성 측정 결과를 Fig. 3에 나타냈으며, SODA 측정 결과 추출물 농도가 증가할수록 항산화효과가 증가하였고, \( 10 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도에서 약 \( 70 \% \) 의 SOD 유사활성울 나타내었다. DPPH법에 의한 항산화 활성과 유사하게 SOD-like 활성도 발아현미가 상황버섯 균사체 배양액에 침지한 발아현미 추출물보다 높게 나타났다. 이러한 결과는 비교적 항산화력이 높은 과일로 알려진 키위 착즙액의 SOD유사활성 \( (27.6 \%) \) 보다 2.5배 높은 SOD 유사활성을 나타내었다. Superoxide dismutase (SOD)는 항산화 효소로서 세포에 유해한 oxygen radical를 과산화수소 전환시키고 다시 catalase에 의하여 무해한 물 분자와 산소분자로 전환시켜 활성산소로부터 생체를 보호하는 것으로 알려져 있다. SOD 는 분자량이 비교적 큰 단백질로서 열이나 알칼리에 약하여 이러한 단점을 보완할 수 있는 저분자물질로 체내에서 역할이 유사한 SOD 유사활성 물질에 대한 연구가 진행되어 있다. Nice 등은 SOD 정제시 열안정성이 높고 SOD 와 유사한 활성을 나타내는 물질을 함께 정제하였는데 이것은 SOD 와 결합된 phenol 계 물질인 것으로 보고하였다. 따라서 항산화 및 항노화와 밀접한 관계가 있는 것으로 알려진 SOD 유사활성 측정을 pyrogallol의 자동산화 반응을 이용하여 분석하였다.</p> <h2>Nitric oxide assay 및 cell viability</h2> <p>대장균 Bacterial lipopolysaccharise (LPS)를 대식세포에 처리하여 \( \mathrm{NO} \) 를 유도시킨 다음 상황버섯발아현미 추출물을 대식세포에 처리하여 \( \mathrm{NO} \) 활성에 미치는 영향을 조사하였 다. Fig. 4에 나타난바와 같이 LPS에 의하여 유도된 \( \mathrm{NO} \) 활성은 상황버섯발아현미 추출물을 첨가함으로서 \( \mathrm{NO} \) 합성이 \( 400 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 농도에서 \( 80 \% \) 까지 현저히 감소하였다. 이러한 결 과는 상황버섯발아현미 추출물이 면역기능과 밀접한 관계가 있음을 보여주는 것이다. 일반적으로 암에 걸린 세포는 \( \mathrm{NO} \) 활성이 증가하는데 항암제 등을 투여하면 \( \mathrm{NO} \) 활성이 감소 하는 것으로 알려져 있다.</p> <p>세포활성은 Fig. 5에 나타난바와 같이 MTT 분석을 통해서 측정하였다. LPS로 처리된 대식세포와 거의 같은 수준으로 상황버섯발아현미 추출물을 \( 500 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 까지 처리했을 때 세포독성이 없는 것으로 관찰되었다.</p> <p>\( \mathrm{NO} \) 는 면역학적 방어에서 중요한 역할을 수행하고, 분비조직과 세포의 기능에 영향을 미치며, 세포성 면역계의 주된 역할의 하나로 \( \mathrm{NO} \) 는 세포 독성이나 성장 억제 활성을 나타낸다. NO는 L-arginine의 guanidino nitrogen으로부터 nitricoxide synthase(NOS)에 의하여 생성된다.</p> <p>\( \mathrm{NO} \) 는 대부분의 포유류 동물의 세포내에서 생성되고 신경계에서는 화학적 신호 전달 물질로서, 혈관계에서는 혈압 조절과 혈소판의 응집 및 호중성구의 집합 작용을, 골격근에서는 대사와 근 수축 조절 등 생리학적으로 중요한 역할을 한다. 최근 \( \mathrm{NO} \) 가 신경계의 생리학직 전달자로서 뿐만 아니라,염증 반응, 면역계 및 세포 독성 외에도 세포의 분화나 세포내 신호 전달 등의 중요한 조절 물질로 알려지고 있다. 또한 면역 세포에서 iNOS에 의해 생성된 \( \mathrm{NO} \) 는 다량으로 외부의 자극에 의해 유전자 수준에서 발현되고 주로 침입한 미생물이나 종양 세포에 대해 독성을 갖는 방어 물질로서 작용하는 것으로 보고되고 있다. 특히 \( \mathrm{NO} \) 가 세포 활성화 물질 및 reactive oxygen intermediates(ROI)에 의해 유발된 세포독성을 최소화시키는 역할이 밝혀짐으로 이 분야에 대해서 활발히 연구되고 있다.</p> <p>\( \mathrm{NO} \) 가 발현하는 기능의 다양성은 농도 및 표적세포의 활성화여부에 따라 달라진다고 알려져 있다. 대식세포가 pathogen에 의하여 활성화되면 \( \mathrm{NO} \) 뿐만 아니라 superoxide anion을 호흡과정에 의하여 대량생산되는데, \( \mathrm{NO} \) 자신은 매우 약한 산화성을 가진 라디칼로서 vitamin E와 비슷하게 세포의 지질과산화물을 막는 항산화 기능도 수행한다는 보고도 있다. 최근 염증반응을 완화시키는데 있어서도 종래에 사용되어온 \( \mathrm{NO} \) 를 소거하는 방식보다는 superoxide anion의 생성을 저해하거나 NADPH oxidase의 활성을 감소시키는 방법이 더욱 비중 있게 다루어지고 있다.</p>