부산 인근에서 채취한 샘플을 통해, 사이퍼메트린이 포함된 배지에서 배양 후 강한 활성을 나타내는 콜로니를 선정하여 AP \(01 \)로 명명하였다. AP \(01 \) 균주의 \( 16 \)S rDNA를 PCR 증폭하였으며, Bacillus amyloliquefaciens 와의 상동성을 나타냈다. 이를 통해 분리된 균주 AP \(01 \)이 Bacillus amyloliquefaciens에 속함을 확인하고 Bacillus amyloliquefaciens AP \( 01 \)이라 명명하였다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>사이퍼메트린(cypermethrin)의 생물학적 분해를 위한 미생물의 분리.</h2> <p>부산 인근의 경작지 토양 및 연안 퇴적물로부터 샘플을 채취하였다. 샘플을 사이퍼메트린(cypermethrin)이 함유된 MSM 배지에서 순차적으로 배양한 후, 고체 배지에서 콜로니를 도출하였다. 도출된 콜로니들 중 재차 사이퍼메트린(cypermethrin)이 \( 50 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \) 로 포함된 MSM배지에서 \(5 \) 일간 배양 후 배양액 속에 잔류 사이퍼메트린(cypermethrin)의 농도를 측정하여 초기 첨가한 농도에 비하여 감소된 경향을 나타내는 콜로니들 중에서 강한 활성을 나타내는 콜로니를 선정하여 AP \(01 \)이라고 명명하였다.</p> <h2>16S rDNA 염기서열을 활용한 분리 균주 동정.</h2> <p>분리 균주 AP \(01 \) 의 \( 16 \)S rDNA 를 알려진 대장균의 \( 16 \)S rDNA 염기서열을 바탕으로 제작한 프라이머를 활용하여 PCR을 통하여 증폭하였다. 얻어진 \( 16 \)S rDNA 염기서열을 GenBank의 기존에 보고된 \( 16 \)S rDNA 들과 비교하고, 유전학적 유연관계를 ClustalX program을 활용하여 phylogenetic tree로 나타내었다. AP \( 01 \) 균주의 \( 16 \)S rDNA 서열은 Bacillus amyloliquefaciens (AF \( 489591 \))와 \( 99 \% \) ( \(1514/1526 \))의 상동성, B. vallismortis \( ( \mathrm { AB } 021198) \)와 \( 99 \%(1525 / 1530) \) 의 상동성, B. subtilis (X \( 60646 \))와 \( 99 \% \) ( \(1413 / 1430) \), (AB \(042061) \)와 \( 99 \% \) \((1535 / 1544) \) 그리고 (AB \(110598) \)와 \( 99 \% \) ( \( 1534/1542 \))의 상동성, B . mojavensis (AB \(021191 \))와 \( 99 \% \) ( \( 1515 / 1526) \), B. atrophaeus (AB \( 021181 \))와 \( 99 \% \) \((1504 / 1515) \)의 상동성, B. licheniformis (X \( 68416 \))와 \( 98 \% \) \((1517 / 1545) \) 의 상동성과 B. pumilus (X \( 60637 \))와 \( 94 \% \) \((1352 / 1432) \)의 상동성을 각각 나타내는 것을 확인 할 수 있었다. 이러한 분석들로 미루어 보아 분리균주 AP \( 01 \)은 Bacillus amyloliquefaciens에 속하는 것을 확인 할 수 있었으며, 분리 균주를 Bacillus amyloliquefaciens AP \( 01 \)이라고 명명하였다.</p>