오미자,매실을 포함한 스포츠음료를 만들 때 전해질 용액을 사용여부를 정하기 위해 물, 소금물 또는 전해질 용액 각각에 오미자 및 매실 추출액을 첨가해 5종의 혼합음료를 만들었다. 실험동물은 동물사의 일정한 조건 하에서2주가량 충분하게 적응시켜 ICR계 웅성 생쥐를 사용하였으며, 지구력 수행능력 평가를 위해 강제수영시험과 Treadmill 시험을 행했다. 또한 혈액중의 중성지방, glucose, 젓산, 무기인산염 및 암모니아의 농도측정은 상업용 분석 kit를 사용해 분석하였다. 이후 모든 통계 처리에 SPSS program을 사용하여 통계처리를 진행하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>시료의 제조</h2> <p>오미자, 매실을 함유한 스포츠음료를 제조할 때 전해질 용액을 사용할 것인지 결정하기 위하여 물(대조군), \( 0.07 \% \) 소금물 또는 전해질 용액 각각에 오미자 및 매실 추출액을 첨가하여 5종의 혼합음료를 제조하여 사용하였다. 모든 실험에서 사용한 전해질 용액은 시판되는 이온음료와 비슷하게 제조하기 위하여 \( 6 \% \) 설탕을 첨가하였으며 염화나트륨 \( 0.1 \% \), 구연산나트륨 \( 0.045 \% \), 구연산칼륨 \( 0.046 \% \), 염화칼슘 \( 0.009 \% \) 및 염화마그네슘 \( 0.007 \% \)이 함유되도록 제조하였다. 또한 지구력시험과 혈액 내 피로물질들의 변화를 실험하기위하여 실험동물에게 4주간 섭취시킨 시료는 Table 1과 같았으며 \( 6 \% \) 당류를 함유한 이온음료(전해질 용액)에 오미자 농축액(고형분 \( 50 \% \), 매실농축액(고형분 \( 99.5 \% \))및 당밀(고형분 \( 78 \% \))을 각각 또는 같이 혼합한 10종의 혼합음료이었다.</p> <h2>실험동물</h2> <p>실험동물은 효창사이언스로부터 분양받아 동물사의 일정한 조건(온도: \( 20 \pm 2^{\circ} \mathrm{C} \), 습도: \( 40-60 \% \), 명암: 12 시간 light/dark cycle) 하에서 2주가량 충분하게 적응시켜 사육한 체중 \( 30 \pm 5 \mathrm{g} \) ICR계 웅성 생쥐를 사용하였다. 6마리의 생쥐를 각각 음료의 섭취군으로 하여 실험에 사용하였다. 여러 비율로 제조된 음료를 실험동물에게 4주 동안 자유로이 섭취시켰다. 식이섭취량은 매일 측정하였으며 체중은 체중계(Sartorius ED323S, Sartorius Co, Germany)를 이용하여 1주일에 1회 일정한 시간에 측정하였다.</p> <h2>지구력 시험</h2> <p>지구력 수행능력을 평가하기 위하여 강제수영시험(Forced-swimming test)과 Treadmill 시험을 행하였다. 강제수영시험의 경우 4주 동안 물을 섭취한 대조군 및 음료수를 섭취한 음료군의 실험동물들을 각각 일주일에 2회 수영적응 훈련을 실시하였다. 4주 동안 음료섭취 실험동물들을 강제수영시험을 하기 16시간 전부터 물만 공급하고 절식시킨 후 강제수영시험에 사용하였다. 아크릴 플라스틱 수조 \( (70 \times 70 \times 60 \mathrm{cm}) \)내에 섭씨 \( 24 \sim 26^{\circ} \mathrm{C} \) 되는 물을 약 \( 70 \% \) 정도 넣고, Leichtweis등의 방법에 따라 체중의 \( 5 \% \)에 해당하는 추를 생쥐의 미근부(꼬리)에 매달아 강제로 수영하게 하였다. 탈진의 판단은 실험동물이 물속에서 7초간 표면상으로 떠오르지 않는 상태로 판정하였다. Glycogen 함량을 측정하기 위하여 탈진으로 판단된 동물을 즉시 도살하여 복부 대동맥을 통하여 혈액을 채취하고 \( 2,000 \times \mathrm{g} \)에서 10분간 원심분리하여 혈청을 분리하였으며, 효소활성시험을 위하여 간 및 골격근(Hexokinase 및 LDH 측정을 위해서는 장지신근(Extensor digitorum lon-gus muscle), Citrate synthase 측정을 위해서는 가자미근 (Soleus muscle))은 채취하여 \( -70^{\circ} \mathrm{C} \)에서 보관하여 두고 사용하였다.</p> <p>Treadmill 시험의 경우 음료수를 4주 동안 섭취시킨 후 트레드밀(Rota-rod, Ugobasil, Italy) 상에서 탈진(all-out)할 때까지 주행시간을 측정하였다. \( 8 \mathrm{rpm} \)의 운동강도에서 운동을 시작하여 3분 후 매 3분마다 \( 4 \mathrm{rpm} \)의 속도로 운동강도를 증가시켜 가면서 최종 \( 40 \mathrm{rpm} \)의 속도에서 탈진 시까지의 운동지속시간을 측정하였다. 탈진상태는 생쥐가 주행 중에 트레드밀에서 떨어지는 시점으로 하였다.</p> <h2>실험동물의 혈청 및 조직의 생화학적 시험</h2> <p>혈액중의 중성지방(TG), glucose, 젓산(lactic acid), 무기인산염(inorganic phosphate)및 암모니아(ammonia)의 농도측정은 상업용 분석 kit를 이용하여 각각 분석하였다. 간조직 및 비복근(gastrocnemius muscle) 중의 glycogen 농도 측정을 위하여 동물조직에 \( 30 \% \) \(\mathrm{KOH}\) 용액을 가하고 \( 100^{\circ} \mathrm{C} \)에서 30분간 가열한 다음, \( 95 \% \) ethanol을 가한 후, \( 4,000 \times \mathrm{g} \)에서 15분간 원심분리하여 침전물을 얻었다. 이 침전물에 \( 0.5 \mathrm{ml} \)의 정제수와 \( 1.0 \mathrm{ml} \)의 anthrone을 가하여 열탕 water bath에 20분간 방치 후 \( 620 \mathrm{nM} \)에서 비색정량 하였다.</p> <p>골격근의 효소활성을 측정하기 위하여 Polytron homoge-nizer를 이용하여 일정량의 조직을 \( 100 \mathrm{mM} \) potassium phosphate 완충액 \( \mathrm{pH}~ 7.4 \)에 균질화한 후 hexokinase의 활성은 Joshi등의 방법, lactate dehydrogenase(LDH)의 활성은 Pesce등의 방법, citrate synthase의 활성은 완충액에서 균질화한 후 미토콘드리아막을 파괴하기 위하여 동결과 용해를 3회 반복한 후 Stere의 방법에 준하여 측정하였다. 각 효소의 활성은 \( \mu \mathrm{mol} / \mathrm{g} \) tissue로 나타내었다.</p> <h2>통계 처리</h2> <p>모든 통계 처리에 SPSS program을 사용하였으며 통계적 유의성은 Duncan's multiple range test로서 검정하였으며, \(p<0.05\)일 때 통계적으로 유의성이 있다고 판정하였다.</p>