액-액 분배로 극성 및 비극성 간섭물질들을 제거 후 흡착크로마토그래피에 의한 정제법으로 추가 정제하여 조제된 azoxystrobin 표준용액을 GC/ECD에 주입하여 크로마토그램 상의 peak 면적을 이용하여 표준검량선을 작성하고, 변이를 비교 평가하여 재현성을 검증하였다. 분석정량한계( \( \mathrm{mg} / \mathrm{kg}) \)를 \( [\text { 기기 정량한계 }(\mathrm{ng}) / \text { 주입량 }(\mu \mathrm{L})] \times[\text { 시료용액 }(\mathrm{mL}) / \text { 시료량 }(\mathrm{g})] \)식으로 산출하였고, 확립된 azoxystrobin 분석법의 정확성 및 재현성은 실제 농산물 시료를 대상으로 회수율 검증 실험을 하였다.
<h2>검량선 작성 및 재현성 검증</h2> <p>Azoxystrobin standard (순도 \(99.8\%\)) \( 0.05 \mathrm{g} \)을 \( 50 \mathrm{mL} \)의 acetone에 용해하여 \( 1,000 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \)의 stock solution을 제조하였으며, 이를 acetone에 희석하여 working solution을 조제하여 \( 1 \mu \mathrm{L} \)을 GC-ECD 에 주입하였다. 가지의 검량선은 \( 0.01,0.2,0.4,0.6,0.8 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \)의 working solution을 조제하였으며, 상추의 검량선은 \( 0.01,4,8,12,16 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \)의 working solution을 조제하였다. 조제된 standard solution을 GC-ECD에 주입하여 나타난 chromatogram 상의 peak 면적을 이용하여 표준검량선을 작성하였다. 또한, 분석기기의 재현성(reproducibility)을 검증하기 위해 \( 0.5 \mathrm{mg} / \mathrm{L} \)의 azoxystrobin 표준용액을 GC/ECD에 \( 10 \)회 연속주입하여 크로마토그램 상의 retention time (Rt.) 및 peak area 등의 변이를 비교 평가하였다.</p> <h2>정량한계</h2> <p>정량한계(limit of quantitation, LOQ)는 분석결과를 수치화할 수 있는 최저한계를 의미한다. 분석 정량한계는 대조 농산물 시료에서 간섭물질이 존재하지 않음을 확인하고, 분석기기의 정량한계, 시료 주입량, 시료 사용량 및 최종 회수된 시료 용액의 양을 계산하여 아래의 계산식에 의해 산출하였으며, 동일 수준으로 azoxystrobin을 처리한 주요 농산물의 회수율을 확인하였다.</p> <p>정량한계( \( \mathrm{mg} / \mathrm{kg}) \) \( =[\text { 기기 정량한계 }(\mathrm{ng}) / \text { 주입량 }(\mu \mathrm{L})] \times[\text { 시료용액 }(\mathrm{mL}) / \text { 시료량 }(\mathrm{g})] \)</p> <h2>액-액 분배 조건 확립</h2> <p>농산물 시료로부터 azoxystrobin을 추출하기 위한 용매로는 acetone을 사용하였으며, acetone 추출 시 azoxystrobin과 함께 추출되는 매트릭스 성분을 제거하기 위해 액-액 분배법을 사용하였다. 분배 용매로는 dichloromethane을 사용하였다. Azoxystrobin 의 분배효율을 조사하기 위해 농산물 시료 없이 표준품 용액만을 acetone에 첨가한 후 dichloromethane 액-액 분배 시 분배 횟수를 달리하여 최적 조건을 확립하였다.</p> <h2>흡착크로마토그래피 정제 조건 확립</h2> <p>Azoxystrobin 분석 시 액-액 분배를 통하여 대부분의 극성 불순물 및 비극성 간섭물질들이 일부 제거되지만, 농산물에 따라 시료 매트릭스로부터 유래하는 다양한 불순물이 존재하기 때문에 추가적인 정제과정이 필요할 것으로 퐌단되어 흡착크로마토그래피에 의한 정제법을 사용하였다. 흡착크로마토그래피 정제의 효율을 조사하기 위해 florisil을 흡착제로 선정하였다. Florisil에 흡착된 농약을 추출하는 최적 용매량을 결정하기 위하여 시료 없이 표준품만을 florisil에 흡착시킨 후 acetone과 hexane (\(7:3\)) 용매를 \( 10,20,30 \)과 \( 40 \mathrm{mL} \)로 그 양을 달리하여 최적 정제 조건을 확립하였다.</p> <h2>회수율 검증</h2> <p>본 연구에서 확립된 azoxystrobin 분석법의 정확성 및 재현성을 검증하기 위해 실제 농산물 시료를 대상으로 회수율 검증 실험을 수행하였다. 회수율 실험은 농약 잔류성 시험기준 및 방법에 따라, 분쇄한 각 무농약 농산물 시료 \( 30 \mathrm{g} \)에 azoxystrobin 표준용액을 정량한계의 \(10\)배 및 \(50\)배에 해당하도록 표준용액을 \(3\) 반복으로 인위 첨가한 후 앞의 분석과정을 행하여 회수율과 분석오차를 검증하였다.</p>