본 연구는 자체 개발한 표고버섯균사체인 HKSMM을 마우스에 투여하여 면역활성을 담당하는 비장세포의 변화를 확인하였으며, 혈액을 채취하여 염증 조절 인자의 발현 유도 및 억제 조절 기능을 확인하였으며, 본 연구 결과로부터 HKSMM의 면역 증진 효과와 염증 억제 효과를 확인하고 천연 생리활성 소재로서의 이용 가능성을 고찰하였다. 연구에 사용한 HKSMM은 고체 배양 분말과 액체배양 분말을 \( 2: 1( \mathrm { w } / \mathrm { w } ) \) 로 혼합하여 만들었다.
<h1>서 론</h1> <p>염증 반응은 인체가 외부인자들의 침입에 대항하기 위한 면역세포들의 상호작용으로 진행되는 방어기전 중 하나인 면역시스템이지만[12], 장기간 유지되어 만성염증으로 진행되면 다양한 질병이 되기도 한다. 염증반응을 조절하는 대표적인 인자인 inducible nitric oxide synthase(iNOS)는 산화질소( \( \mathrm { NO } ) \) 의 생성을 촉진시키고, cyclooxy-genase-2 (COX-2)는 arachidonic acid로부터 prostagrandin E2의 합성을 촉진하는 것으로 알려져 있다. 또, 염증 반응은 다양한 신호전달 경로를 통해 발현하게 되는데 MAPKs 및 NF-אB 등이 있다. 염증 및 면역반응을 조절하기 위해 임상에서는 합성약물 및 면역강하제를 사용하고 있으나, 이와 같은 화학적인 치료제는 복통, 탈모, 구토 및 소화 장애와 같은 다양한 부작용을 유발할 수 있다. 이 때문에 생체친화적이고 부작용이 적은 천연물을 소재로 활용하여 질병을 예방하고 치료하기 위한 연구가 꾸준히 진행되고 있으며, 이미 치료에 이용되고 있는 약물의 약 \( 50 \% \) 는 천연소재를 활용한 것으로 경제적 가치 또한 높게 평가되고 있다.</p> <p>곰팡이의 일종인 버섯은 무기질, 비타민을 비롯하여 단백질, 탄수화물 및 지방을 고루 함유하고 있어 오랜 시간 동안 식용소재로 이용되고 있다. 버섯은 균사(mycelium)와 자실체(fruiting body)로 크게 나뉘는데 자실체 외에 균사체에도 다양한 생리활성 물질이 존재하고 있다. 또한, 자실체의 생산에 비해 균사체는 소비되는 인력, 시간, 비용 등이 적고 액체배양을 통한 안정적인 생산이 가능하다. 또한 균사체의 조성과 배양조건에 따라 다양한 대사 산물을 얻을 수 있어 연구적인 가치 또한 높은 것으로 보고되었다. 표고버섯 균사체가 보유한 다양한 생리 활성은 표고버섯균사체에 함유되어 있는 \( \beta \)-glucan, gluco-protein 및 polysaccharide로 인한 것으로 알려져 있다. 그 중 \( \beta \)-glucan은 표고버섯균사체의 가장 대표적인 지표 물질로써 면역증진 기능, 항산화 및 항염증 등과 같은 다양한 생리활성을 가진 것으로 보고되었다.</p> <p>본 연구에서는 자체 개발한 표고버섯균사체인 \( \mathrm { HK } \) shiitake mycelium (HKSMM)을 Balb/c 마우스에 4주 및 6주간 급이하여, 면역활성을 담당하는 비장세포의 변화를 확인하고, 혈액을 채취하여 염증 조절 인자의 발현 유도 및 억제 조절 기능을 확인하였다. 상기 연구결과는 HKSMM의 면역 증진효과 및 염증 억제효과에 대한 기초자료를 제공함으로써 천연 생리활성 소재로서의 이용 가능성을 알아보고자 하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>\( \mathrm { HK } \) 표고버섯 균사체(HKSMM)의 제조</h2> <p>\( \mathrm { HK } \) 표고버섯 균사체(HKSMM)은 고체 배양 분말과 액체배양 분말을 \( 2: 1( \mathrm { w } / \mathrm { w } ) \) 로 혼합하여 제조하였다. 고체배양 분말은 보리를 수세하여 이물질을 제거하고 24시간 수돗물에 침지한 후 거름망에서 4시간 방치하였다. 그 후 \( 121 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 2 시간 멸균한 후 미리 배양한 표고버섯 종균을 접종하였다. \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 의 배양기에서 10 일간 배양한 후 \( 50 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 열풍건조를 시켜 100 mesh로 분말화 하였다. 액체배양 분말은 탈지 대두분 \( (2.5 \mathrm { ~g } / 1) \), 황백당, \( \mathrm { K } _ { 2 } \mathrm { HPO } _ { 4 } (0.025 \mathrm { ~g } / 1) \), \( \mathrm { MgSO } _ { 4 } (0.025 \mathrm { ~g } / \mathrm { l } ) \) 을 물과 혼합한 후 거품제거제를 통해 거품을 제거하였다. 그 후 \( 121 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 2 시간 멸균한 뒤 표고버섯균사체 종균을 접종하였다. \( 25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 배양기에서 10일간 배양 후 베타-글루칸을 추출하기 위해 \( 121 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 1시간 추출한 후 탈지대두분을 추출물에 대해 \( 10 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) 혼합한 다음 열풍 건조하였다. 건조된 액체배양물은 100 mesh로 분말화 하였다.</p>