MIF는 면역학적 연구로 세포 내외에서 일어나는 다양한 활성과 생물학적 활성을 가지고 있음을 확인했다. 본 논문은 GST 융합 시스템으로 획득한 GST 융합 MIF를 이용하여 \( \mathrm { N } \)-말단에 결합된 GST와 6개의 아미노산 잔기가 MIF의 tautomerase 활성에 미치는 영향을 조사했는데, 아미노산들이 MIF의 L-dopachrome tautomerase 활성을 완벽히 저해했지만 \( \mathrm { N } \)-말단에 존재하는 tag이 MIF의 oligomer 형성에 영향을 주지 않았다.
<p>인간 macrophage migration inhibitory factor (MIF)는 macrophage의 이동을 억제하는 cytokine으로 처음 알려젔 다[6]. 여러 가지 면역학적 연구로 MIF가 세포 내외에서 일 어나는 다양한 환성을 동해서 세포사멸을 지연시키고, 세포의 성장과 분열을 촉진하는 생물학적 활성을 가지고 있다는 것이 보고되었다. 또한 생화학적인 연구로 MIF가 2-carboxy-2,3-dihydroindole-5,6-quinone (dopamine)을 5,6dihydroxyindole-2-carboxylic acid (DHICA)로 전환시키는 tautomerization과 oxidoreduction 반응에 관여하는 효소적 활성을 지니고 있음이 확인되었다.</p> <p>MIF의 X-ray crystallography와 NMR 연구들을 통하여 tautomerase 활성을 갖고 있는 D-dopachrome tuatomerase 와 MIF가 서로 구조적으로 매우 유사한 homotrimer를 형 하며, 각 단백질의 monomer마다 \( \mathrm { N } \)-말단에 존재하는 proline \( \left ( \mathrm { P } ^ { 2 } \right ) \) 을 중심으로 기질과 결합하는 hydrophobic pocket을 가지고 있다는 것이 확인되었다. MIF의 다양한 돌연변이형을 이용한 생화학적 연구를 퉁하여 \( \mathrm { P } ^ { 2 } \) 가 tautomerase 활성에 결정적인 catalytic base로 작용한다는 것이 밝혀졌다. 이런 보고들은 MIF의 3차 구조와 \( \mathrm { N } \)-말단의 \( \mathrm { P } ^ { 2 } \) 가 MIF의 tautomerase 활성에 매우 중요하다는 것을 나타낸다. 이와 더불어 mouse MIF의 N-말단에 결합된 3개의 아미노산 잔기가 tautomerase 활성을 저해한다는 연구결과도 발표되었다.</p> <p>이처럼 \( \mathrm { MIF } \) 의 tautomerase 활성은 3차 구조와 hydrophobic pocket을 형성하는 \( \mathrm { P } ^ { 2 } \) 주변의 아미노산 구성의 변화에 매우 민감한 것으로 보인다. 이에 따라 본 연구에서는 간 MIF의 정제를 위하여 도입한 GST (glutathione S-transferase) 융합 시스템으로 얻어진 GST 융합 MIF (GST-MIF)를 이용하여 \( \mathrm { N } \)-말단에 결합된 GST와 6개의 아미노산 잔기가 MIF의 tautomerase 활성에 어떤 영향을 주는지 조사하였다. 또한 MIF의 tautomerase 활성이 oligomer 형성과 어떤 관련 이 있는지 확인하기 위하여 \( \mathrm { MIF } \) 와 6개의 아미노산 잔기를 갖는 MIF간의 단백질 cross-linking 연구를 수행하였다. 이를 통하여 GST 와 6개의 아미노산들이 MIF의 L-dopachrome tautomerase 활성을 완전히 저해하였지만, 이들 \( \mathrm { N } \)-말단에 존재하는 tag이 MIF의 oligomer 형성에 영향을 미치지 않는다는 것을 확인하였다. 본 연구에서 확인한 결과들은 실제 세포내에서 MIF와 다른 단백질간의 상호적인 결합과 \( \mathrm { MIF } \) 의 효소적 활성간의 연관성에 관한 연구에 많은 도움을 줄 수 있을 것이다.</p>