무기질 분석은 A.O.A.C. 방법에 따라 투명해질 때까지 가열한 후 \( 50 \mathrm{ml} \)로 정용하였다. \( 80 \% \) 야콘 에탄올 추출물을 separating funnel에 의한 용매별 분획으로 n-hexane, chloroform, ethylacetate, n-butanol, water로 연속 추출 후 각 분획물을 rotary vacuum evaporator로 감압-농축한 다음 동결 건조시켜 항산화 활성 측정용 시료로 사용하였다. 항산화지수(antioxidant index,AI)는 Rancimat을 이용하여 측정하였는데, 분획에 포함된 용매를 완전히 제거 후 각 분획의 함량이 \( 1,000 \mathrm{ppm} \)이 되도록 soybean oil에 첨가하고, 초음파를 이용하여 각각의 유기 용매 분획 시료와 유지가 잘 혼합되도록 하였다. 아질산염 소거능(nitrite scavenging ability, NSA)측정은 \( 1 \mathrm{mM} \mathrm{~NaNO}_{2} \) 용액 \( 1 \mathrm{ml} \)에 추출물 시료를 가하고 각각 \( \mathrm{pH} \)를 보정한 다음 반응액의 부피를 \( 10 \mathrm{ml} \)로 정용하였다. 3회 이상 반복 실시한 독립적 실험으로 얻은 본 실험 결과로 실험군당 평균으로 나타내었고, SPSS 통계 package를 이용하여 일원배치 분산분석을 한 후 \( \mathrm{p}<0.05 \) 수준에서 Tukey's test에 의하여 각 실험군의 평균치간의 유의성 검정을 실시하였다.
<h2>무기질 분석</h2> <p>무기질 분석은 A.O.A.C. 방법에 따라 \( 0.5 \mathrm{~g}, 20 \% \mathrm{HNO}_{3} \) \( 10 \mathrm{ml} \) 및 \( 60 \% \mathrm{HClO}_{4} 3 \mathrm{ml} \) 를 취하여 투명해질 때까지 가열한 후 \( 0.5 \mathrm{M} \mathrm{HNO}_{3} \) 으로 \( 50 \mathrm{ml} \) 로 정용하였다. 분석항목별 표준용액을 혼합 후 다른 vial에 \( 8 \mathrm{ml} \) 씩 취하여 표준용액으로 하였고 \( 0.5 \mathrm{M} \mathrm{HNO} \) 을 대조구로 하여 원자흡수분광광도계(AA-6501GS, Shimadzu, Kyoto, Japan)로 분석하였으며 분석조건은 다음과 같다. Acetylene flow rate는 \( 2.01 / \mathrm{min} \), air flow rate는 \( 13.51 / \mathrm{min} \) 의 조건으로 \( \mathrm{Ca}(422.7 \mathrm{~nm}), \mathrm{K}(766.5 \mathrm{~nm}) \), \( \mathrm{Zn}(213.9 \mathrm{~nm}), \mathrm{Mg}(285.2 \mathrm{~nm}) \), \( \mathrm{Mn}(285.2 \mathrm{~nm}), \mathrm{Na}(589.0 \mathrm{~nm}) \) \( \mathrm{Fe}(248.3 \mathrm{~nm}), \mathrm{Cu}(324.8 \mathrm{~nm}) \) 를 분석 정량하였다.</p> <h2>추출물의 조제</h2> <p>동결 건조한 야콘 분말 \( 100 \mathrm{~g} \) 당 \( 80 \% \) 에탄올 \( 500 \mathrm{ml} \) 에 넣어 \( 65^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 환류냉각관을 부착한 \( 65^{\circ} \mathrm{C} \) 의 heating mantle에서 3시간 동안 3회 추출한 다음 Whatman filter paper (No.2)로 여과하였다. 여액을 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 수욕조상에서 rotary vacuum evap-orator로 용매를 제거하고 감압·농축한 후 동결 건조시켜 고형물 함량을 산출한 다음, 시료의 산화방지를 위하여 \( -70^{\circ} \mathrm{C} \)에 냉동 보관하면서 사용하였다. \( 80 \% \) 야콘 에탄올 추출물을 Fig. 1과 같이 separating funnel에 의한 용매별 분획으로 n-hexane, chloroform, ethylacetate, n-butanol, water로 연속 추출한 후 각 분획물을 rotary vacuum evaporator로 감압- 농축한 다음 동결 건조시켜 항산화 활성 측정용 시료로 사용하였다.</p> <h2>항산화지수</h2> <p>항산화지수(antioxidant index,AI) 는 Joo 등의 방법에 의하여 Rancimat (Metrohm model 679, Herisan, Switzerland)을 이용하여 측정하였는데, 분획에 포함된 용매를 완전히 제거한 후 각 분획의 함량이 \( 1,000 \mathrm{ppm} \) 이 되도록 soybean oil (Sigma Co., St. Louis, USA)에 첨가하고, 초음파(Ultrasonic processor, UCX-750, USA)를 이용하여 각각의 유기 용매 분획 시료와 유지가 잘 혼합되도록 하였다. Rancimat의 측정 조건은 시료 \( 3.0 \mathrm{~g} \) 을 반응용기에 취하고 증류수 \( 70 \mathrm{ml} \) 를 측정용기에 넣은 후 \( 110^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 air flow rate \( 20 \mathrm{l} / \mathrm{hr} \) 로 하여 산화안정성을 비교하였다. 항산화지수는 분획물을 첨가한 실험군의 유도시간을 분획물을 첨가하지 않은 대조군의 유도시간으로 나눈 값을 구하였고, 모든 측정치는 3회 반복 실험하여 얻은 값의 평균치로 표시하였다. 기존의 상업용 항산화제인 BHT를 유지에 대해 첨가하여 양성대조군으로 비교 실험하였다.</p> <h2>아질산염 소거능</h2> <p>아질산염 소거능(nitrite scavenging ability, NSA) 측정은 Kato 등의 방법에 준하여 \( 1 \mathrm{mM} \mathrm{NaNO}_{2} \) 용액 \( 1 \mathrm{ml} \) 에 추출물 시료 \( 0.02 \mathrm{ml} \) 를 가하고 \( 0.1 \mathrm{~N} \mathrm{HCl}(\mathrm{pH} 1.2), 0.2 \mathrm{M} \) citrate phosphate buffer \( (\mathrm{pH} 4.2, \mathrm{pH} \) 6.0)로 각각 \( \mathrm{pH} \) 를 보정한 다음 반응액의 부피를 \( 10 \mathrm{ml} \) 로 정용하였다. 용액을 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 1 시간 반응시킨 후 \( 1 \mathrm{ml} \) 씩 취하고 \( 2 \% \) 초산 \( 5 \mathrm{ml} \) 와 \( 30 \% \) 초산에 용해한 Griess 시약(1\% sulfanylic acid : \( 1 \% \) naphthylamine \( =1: 1) 0.4 \mathrm{ml} \) 를 가하여 15 분간 방치한 다음 \( 520 \mathrm{~nm} \) 에서 흡광도를 측정하였다. 대조군은 증류수를 가하여 상기와 동일한 방법으로 측정하였으며, 아질산염 소거능은 추출물의 시료를 첨가하기 전과 후의 아질산염 백분율( \( \% \))로 표시하였다.</p> <p>아질산염 소거율(\%) \( =1-\frac{(A-C)}{B} \times 100 \)\( \mathrm{A}: 1 \mathrm{mM} \mathrm{NaNO} 2 \) 용액에 분획을 첨가하여 1시간 방치시킨 후의 흡광도\( \mathrm{B}: \mathrm{NaNO}_{2} \) 용액의 흡광도\( \mathrm{C} \) : 분획 자체의 흡광도</p> <h2>통계처리</h2> <p>본 실험은 독립적으로 3회 이상 반복 실시하여 얻은 결과로 결과는 실험군당 평균으로 나타내었고, SPSS 통계 package를 이용하여 일원배치 분산분석(one-way analysis of variance)을 한 후 \( \mathrm{p}<0.05 \) 수준에서 Tukey's test에 의하여 각 실험군의 평균치간의 유의성을 검정하였다.</p>