본 연구에서 클로로필 함량 측정은, 동결건조 시료에 메탄올을 혼합하여 진행하였다. 환원당 분석에는 DNS method를, 표준물질로는 glucose를 사용하였다. 실험을 위해, 전처리 후의 바이오매스 가수분해물을 미세조류배지로 사용하였고, 이를 위하여 활성탄 처리후 가수분해물의 환원당을 분석하였다. 그리하여 다양한 가수분해물을 제작하여 미세조류 배양한 결과를 glucose 탄소원 첨가 배지와 비교하여 분석하였다.
<p> <b>클로로필 추출 및 함량 측정.</b>클로로필 함량을 측정하기 위해 methanol \( 10 \mathrm { ml } \) 에 동결 건조한 시료 \( 10 \mathrm { mg } \) 을 첨가한 다음 균일하게 혼합하였다. \( 60 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 \( 30 \mathrm { ~min } \) 간 용출시킨 후 \( 666 \mathrm { ~nm } \) 와 \( 653 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하여 다음과 같은 식을 사용하여 색소의 양을 계산하였다.</p> <p>Chlorophyll \( ( \mathrm { mg } / \mathrm { l } )=25.5 \times \mathrm { A } _ { 653 } + 4 \times \mathrm { A } _ { 666 } \)</p> <p>이때, \( \mathrm { A } \) 는 absorbance로 흡광도이며, 653 과 666 은 각각의 파장을 의미한다.</p> <p> <b>환원당 분석.</b>환원당의 분석은 DNS method를 사용하였으며, glucose를 표준물질로 사용하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>바이오매스 가수분해물 제조</h2> <p>전처리와 효소 가수분해가 끝난 7 가지 바이오매스 가수분해물을 미세조류배지로 사용하기 위해 미세조류의 성장을 저해하는 물질을 제거하기 위하여 활성탄으로 처리 후 얻은 바이오매스 가수분해물의 환원당을 분석하여 그 결과를 Table \( 1 \)에 나타내었다. 목질계 바이오매스에서는 볏짚에서 \( 84.7 \mathrm { ~g } / \mathrm { l } \), 그리고 꼬시래기에서 \( 35.7 \mathrm { ~g } / \mathrm { l } \) 의 환원당이 측정되었다. 목질계 바이오매스로부터는 종에 따라 \( 49.3-84.6 \mathrm { ~g } / \mathrm { l } \) 의 환원당을 얻을 수 있었으며, 해조류에서는 \( 17.8-35.7 \mathrm { ~g } / \mathrm { l } \) 의 환원당을 얻을 수 있었다. 특히 홍조류인 \( G. verrucosa \)에서 상대적으로 높은 환원당을 얻을 수 있었다.</p> <h2>바이오매스 가수분해물을 이용한 C. saccharophila의 성장 및 클로로필 생성</h2> <p> <b>목질계 유래당을 이용한 C. saccharophila 성장 및 클로로필 생성.</b>유채대, 보릿대, 그리고 볏짚을 이용하여 가수분해물을 제작하여 미세조류를 12 일간 배양한 결과를 glucose를 탄소원으로 첨가한 배지와 비교하였다. 동일 조건의 환원당 농도에서 실험을 실시하기 위하여 바이오매스 가수분해물과 glucose의 농도를 \( 10 \mathrm { ~g } / \) 가 되도록 희석하여 C. saccharophila를 배양하였다. Fig. \( 1 \)은 glucose와 activated carbon으로 처리하지 않은 3 종의 바이오매스 가수분해물을 대상으로 \( C. saccharophila \)를 배양한 결과를 나타낸 것이다. 주로 목질계 바이오매스의 산 가수분해 과정에서는 가수분해물에 5-HMF, levulinic acid, formic acid, acetic acid, furfural, 그리고 페놀성 성분들이 생성되고, 이러한 물질들은 미생물의 성장에 저해를 일으키는 것으로 알려져 있다. 또한 해조류는 다양한 색소성분과 페놀성 성분을 포함하고 있어 미세조류의 성장에 저해를 일으킬 것으로 판단된다. Activated carbon으로 처리하지 않은 바이오매스 가수분해물은 \( C. saccharophila \)의 성장에 저해를 나타내어 향후 실험에서는 바이오매스 가수분해물을 activated carbon 처리 후 시행하였다.</p>