sodium nitroprusside를 처리한 호중구에서 NO는 PLD활성이 증가하는 결과가 보인다. 따라서 PLD활성은 PLD를 자극하는 물질에 따라서 변화한다.
<h1>결과 및 고찰</h1><h2>PLD 활성에 대한 \(\mathrm{NO}\)의 영향</h2><p>cGMP의 증가에 의한 PKG 활성 경로를 통하는 것 중에서 가장 대표적인 병태생리적인 자극제 중의 하나는 \(\mathrm{NO}\)이다. 따라서 본 연구에서는 \(\mathrm{NO}\)가 호중구의 PLD 활성에 어떠한 영향을 미치는 가를 조사하였다. 세포 내 \(\mathrm{NO}\)의 생성을 증가시키는 물질인 sodium nitroprusside(SNP)를 처리한 호중구에서 \( 0.5 \mathrm{mM} \) 농도일 때 PLD의 활성이 SNP 를 처리하지 않은 세포와 비교하여 2배 정도 증가하였다\((P<0.05)\). \( 1 \mathrm{mM} \) 이상의 SNP를 처리하였을 때는 더 이상의 PLD 활성 증가는 없었으며 오히려 약간 감소하는 경향을 보였다. Fig. 3의 결과에서와 같이 fMLP에 의하여 증가된 PLD의 활성은 \(\mathrm{NO}\)에 의하여 크게 영향을 받지 않았다. 따라서, 이러한 결과는 세포 내 증가된 \(\mathrm{NO}\)는 그 자체가 PLD의 활성을 증가시킨다는 것을 제시하고 있다. 본 연구 결과와 비교하여 \( \mathrm{Ca}^{2+} \) 이나 polyamine에 의하여 활성화되는 미토콘드리아의 PLD는 \(\mathrm{NO}\)에 의하여 억제된다고 보고하였다. 또한, 다른 연구자의 실험 결과에 의하면 IL-\( 1 \beta \)에 의한 PLD1\(\alpha\)의 발현의 감소는 \(\mathrm{NO}\)가 매개하여 이루어진다고 보고됨으로써 \(\mathrm{NO}\)가 PLD의 활성에 어떠한 작용을 한다는 것을 알 수 있다. 한편으로, 대식세포에서 lipopolysaccharide(LPS)에 의한 iNOS의 발현 증가와 \(\mathrm{NO}\)의 생성에는 PLD가 중요한 역할을 한다고 보고되었다.</p><h2>PLD 활성에 대한 cGMP 의 영향</h2><p>호중구 내 CGMP의 농도가 증가하면 이들의 화학주성은 억제될 뿐 아니라 cGMP의 농도가 증가하면 myeloper-oxidase나 lactoferrin과 같은 호중구의 과립 내 효소의 분비가 증가된다. 호중구에서 LPS에 의한 IL- 8의 생성이 \(\mathrm{NO}\)의 생성을 유도하는 SNP를 처리한 경우 증가되고 이러한 작용은 CGMP를 통하여 이루어진다고 하였다. 본 연구에서는 세포 내 증가한 CGMP가 직접적으로 PLD의 활성에 영향을 주는가를 보기 위하여 세포 내로 쉽게 통과하는 약물인 8-bromo-cGMP롤 처리한 후 PLD의 활성을 측정하였다. cGMP를 단독 처리한 경우에는 SNP와는 다르게 PLD의 활성은 증가되지 않았다. cAMP를 증가시키는 물질인 dibutyryl-cAMP를 처리한 호중구에서 fMLP에 의한 PLD의 활성은 억제된다고 보고되었다. Fig. 2에 나타낸 바와 같이 fMLP에 의한 PLD의 활성 증가는 cAMP에 의하여 억제되었으나 cGMP는 오히려 활성을 약간 증가시켰으나 유의성은 없었다. 따라서, PLD 활성에 대한 \(\mathrm{NO}\)의 영향은 cGMP를 통하여 일어나지는 않는 것으로 보이며 cGMP는 CAMP와는 다른 경로를 통하여 PLD에 작용할 것이라는 것을 알 수 있다. \(\mathrm{NO}\)가 cGMP 비의존형으로 세포에 영향을 주는 것은 단백질을 직접 nitrosylation시키거나 혹은 nitration시킴으로써 단백질의 구조를 변화시키거나 peroxynitrate를 형성하여 어떠한 인자를 산화시킴으로써 일어난다고 제안되고 있다. Guanylyl cyclase를 활성화하여 cGMP의 농도를 증가시키는 약물인 3-(5'-hydroxymethyl-2'-furyl)-1-benzyl indazole(YC-1)을 호중구에 처리하였을 때 fMLP에 의한 \( \mathrm{O}_{2} \)의 생성이 억제되고 이러한 억제는 다시 CGMP의 농도를 감소시키는 약물에 의하여 회복됨으로써 호중구의 활성화에 cGMP가 억제작용을 한다고 하였으며 phorbol myristate acetate(PMA)나 arachinonate에 의한 \( \mathrm{O}_{2} \)의 생성은 YC-1에 의하여 억제되지 않는다고 하였다. 또한, ionomycin에 의하여 증가된 호중구 내의 \( \mathrm{Ca}^{2+} \) 농도는 cGMP에 크게 영향을 받지 않는다고 하였다. 따라서, 호중구에서 PLD 활성에 대한 CGMP의 영향은 PLD를 자극하는 물질에 따라서 다양하게 나타나는 것으로 추정할 수 있다.</p>