BeWo 세포는 혈청이 없는 MEM 배양액에서 24시간 동안 유지된 후 \( 1 \mu \mathrm{Ci} \) 의 \( \left[{ }^{3} \mathrm{H}\right] \) thymidine을 첨가하고 추가 24시간 동안 배양하여 VEGF에 의한 영향 뿐만 아니라 \( \mathrm{NO} \) 자체도 세포의 증식을 촉진하거나 억제할 수 있다는 연구에서는 chorio-carcinoma 세포주에서 \( \mathrm{NO} \)가 세포의 증식을 촉진하는 결과를 보였습니다. 생성에 PLC가 중요한 역할을 하는 것을 보고한 이전 연구와 비교하여, 본 연구는 BeWo 세포에서 NO에 의한 세포의 증식에는 ERK뿐만 아니라 PLC의 활성화도 필수적임을 나타내고 있습니다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>BeWo 세포의 증식에 대한 \( \mathrm{NO} \) 및 신호 전달 인자 억제 제들의 영향</h2> <p>BeWo 세포는 MEM 배양액에서 키우면서 24 시간 동안 혈청이 들어 있지 않은 상태로 유지한 후 \( 1 \mu \mathrm{Ci} \) 의 \( \left[{ }^{3} \mathrm{H}\right] \) thymidine을 넣고 24시간 더 배양하였다. Fig. 1에서 나타낸 바와 같이 \( 10 \mu \mathrm{M} \) 에서 \( 500 \mu \mathrm{M} \) 의 SNP 를 처리하였을 때 \( 250 \mu \mathrm{M} \) 까지 세포 내 \( \left[{ }^{3} \mathrm{H}\right] \) thymidine가 축적되는 양은 지속적으로 증가하였으며 \( 500 \mu \mathrm{M} \) 이상의 높은 농도에서는 더 이상의 증가는 보이지 않았다. 이러한 결과는 세포 내 증가한 \( \mathrm{NO} \) 에 의하여 BeWo 세포의 증식이 증가한다는 것을 제시한다. 이러한 결과와는 다르게 본 연구자들의 이전 연구에서 VEGF 에 의한 BeWo 세포의 증식에 대하여 \( \mathrm{NO} \) 는 억제 현상을 보였다. 다른 연구자들에서도 \( \mathrm{NO} \) 는 태반에서 분리한 영양모세포의 증식을 억제시킨다고 보고하였는데 이 경우에도 \( \mathrm{NO} \) 단독의 영향보다는 VEGF에 의한 증식을 억제하는 것이었다. 본 연구의 결과와 유사하게 VEGF 에 의한 세포의 증식 효과가 \( \mathrm{NO} \) 를 통하여 일어난다 고도 하였는데 이러한 보고들 사이에서 결과의 차이가 나타나는 것은 세포의 종류나 세포 내 \( \mathrm{NO} \) 의 농도 등에 따라서 \( \mathrm{NO} \) 는 세포의 증식을 촉진하거나 억제하는 현상을 보이는 것으로 추측된다. 특히, VEGF에 의한 영향에서 뿐만 아니라 \( \mathrm{NO} \) 자체가 세포의 증식을 촉진하거나 억제한다는 상반된 보고가 있는데, 본 연구의 결과는 chorio-carcinoma 세포주에서 \( \mathrm{NO} \) 는 세포의 증식을 촉진하는 것으로 나타났다.</p> <p>ERK는 세포의 증식을 조절하는 중요한 신호전달 인자라는 것이 잘 알려져 있다. \( \mathrm{NO} \) 에 의한 세포의 증식은 ERK의 활성화를 거쳐서 일어나며, VEGF 의 작용은 PLC 를 거친다는 것이 밝혀져 있으므로 \( \mathrm{NO} \) 에 의한 세포의 증식 과정에 ERK 및 PLC가 관여하는가를 알기 위하여 이들의 억제제를 사용하여 세포 증식의 변화를 조사하였다. PLC의 억제제인 U73122(1-\{6-((17b-3-methoxyestra-1,3,5(10)-trien-17-yl)amino)hexyl-1H-pyrrole-2,5-dione)(Calbiochem, USA )는 \( 10 \mu \mathrm{M} \) 농도에서 SNP 에 의한 세포 증식을 현저히 감소시켰으며 ERK kinase 억제제인 PD98059 (2'-Amino-3'-methoxyflavone)(Calbiochem, USA) 나 tyrosine kinase의 억제제인 genistein(4'5,7-Trihydroxyisoflavone) (Calbiochem, USA)도 \( 1 \mu \mathrm{M} \) 농도에서 SNP의 영향을 감소시켰다(Fig. 2). Fig. 3에 나타낸 바와 같이 U73122의 효능을 농도에 따라 측정하였을 때 \( 1 \mu \mathrm{M} \) 의 낮은 농도에서 SNP에 의한 세포의 증식을 억제하였다. VEGF에 의한 \( \mathrm{NO} \) 의 생성에 PLC가 중요한 역할을 한다는 보고와 비교하여, 본 연구의 결과는 BeWo 세포에서 \( \mathrm{NO} \) 에 의한 세포의 증식에는 ERK뿐만 아니라 PLC의 활성화가 필요하다는 것을 제시하고 있다.</p>