일당귀 에탄올 추출물의 항산화 지수를 알기 위해 Rancimat로 측정하였고 일당귀 에탄올 추출물의 전 분획에서 대조군보다 높은 항산화 활성을 나타냈다. 아질산염 소거능을 측정한 결과 위와 유사한 조건인 \(\mathrm{1.2pH}\) 에서 높은 소거 작용을 나타내었다. 지질과산화에 관한 억제 효과를 보기 위해 DPPH radical을 측정한 결과 억제능이 있음을 확인하였다. 마지막으로 Linoleic acid에 대한 항산화 효과를 본 결과 항산화물질의 양이 n-hexane과 ethylacetate로 추출 시 높았기 때문으로 생각되며 분획의 항산화력과 과산화물가 사이에는 역상관관계를 확인하였다.
<h2>항산화 지수</h2> <p>일당귀 에탄올 추출물 분획의 지질 산패도를 알아보기 위하여 Rancimat으로 측정한 항산화 지수 결과는 Table 2 와 같다. 항산화 지수는 n-hexane 분획 1.73, ethylacetate 분획 1.61, chloroform 분획 1.42, n-butanol 분획 1.03 및 water 분획 1.02 로 모두 시료를 미첨가한 대조군의 항산화 지수 1.00보다 높은 항산화 활성을 나타냈으며, 특히 n-hexane 분획의 활성이 가장 높았다. 이는 일당귀 성분 중 항산화 작용을 나타내는 물질이 n-hexane 분획으로 다량 이행되었기 때문으로 사료된다. 본 실험에서 일당귀 에탄올 추출물의 전 분획에서 대조군보다 높은 항산화 활성을 나타냈는데 이는 일당귀 에탄올 추출물에 항산화 활성을 나타내는 물질이 다량 함유되어 있는 것으로 사료된다. Lim 등은 116 종의 생약 에탄올 추출물의 항산화력을 Rancimat으로 측정한 결과, 대부분의 추출물들이 항산화력을 나타내었는데 건강, 백작약, 산수유, 소목의 경우는 ethylacetate 분획에서 항산화 지수가 가장 높게 나타났고, 석곡의 경우 chloroform 분획에서 항산화 지수가 가장 높았다고 보고하였으며, 참당귀 에탄올 추출물의 팜유와 돈지에 대한 항산화 지수는 각각 1.10 과 0.96 이며 같은 미나리과인 강활의 에탄올 추출물은 각각 1.14 와 0.98, 방풍 에탄을 추출물은 각각 1.11 과 0.98 로 모두 비슷한 항산화력을 보였다.</p> <h2>아질산염 소거 작용</h2> <p>\( \mathrm{pH} \) 변화에 따른 일당귀 에탄올 추출물 분획의 아질산염의 소거 작용은 Table 3 과 같다. 일당귀 에탄올 추출물 분획의 아질산염 소거 작용은 \( \mathrm{pH} 1.2 \)의 경우 n-hexane \( 92.13\% \), ethylacetate \( 84.23 \% \), chloroform \( 72.08 \%\), \(\mathrm{pH} 4.2\)의 경우 n-hexane \( 71.09 \% \), ethylacetate \( 65.22 \% \), chloroform \( 66.13 \%\), \(\mathrm{pH} 6.0 \) 의 경우 n-hexane \( 12.32 \% \), ethylacetate \( 10.18 \% \), chloroform \( 9.02\% \) 순으로 모든 \( \mathrm{pH} \) 에서 n-hexane 분획이 타 분획에 비하여 높은 소거 작용은 나타냈다. \( \mathrm{pH} \) 변화에 따른 각 분획의 아질산염 소거 작용은 \( \mathrm{pH} 1.2 \) 와 \( \mathrm{pH} 4.2\)에서 높았으나 \( \mathrm{pH} 6.0\)에서는 매우 낮게 나타났다. 아질산염의 소거 작용은 Lim 과 Kang 등이 보고한 결과와 같이 본 실험에서도 \( \mathrm{pH} \) 가 낮을수록 아질산염 소거능이 우수하였다. 이런 결과는 Lee와 Choi, Walker 등의 보고처럼 \(\mathrm{pH} 1.2\)에서 총 페놀화합물이 다량 용출되고 산성에서 페놀류인 catechol이 아민보다 더 경쟁적으로 아질산과 반응한 결과로 여겨지며, 또한 Lee 등은 아질산염 소거에 영향을 주는 물질로 catechin, chlorogenic acid, morin, luteolin-n-Q glucoside, luteolin, naringenin 등의 flavonoid류라고 보고하였다.</p> <p>따라서 본 실험에서 사람 위 내의 \( \mathrm{pH} \) 와 유사한 조건인 \( \mathrm{pH} 1.2 \) 에서 높은 소거 작용을 나타낸 것은 일당귀 에탄올 분획이 생체 내에서도 효과적인 아질산염 소거 작용을 통해 nitrosamine 생성을 억제할 것으로 생각된다.</p> <p>Kim 등은 참당귀의 농도와 \( \mathrm{pH} \) 를 달리하여 수용성 분획과 methanol 가용성 분획의 아질산염 소거능을 비교 연구한 결과, 수용성 분획과 methanol 가용성 분획 모두 \( \mathrm{pH} 1.2 \) 에서 대부분 \( 90 \% \) 이상의 높은 소거율을 보였고, \( \mathrm{pH} 4.2\), \(\mathrm{pH} 6.0 \) 순으로 낮아져 본 실험결과와 유사했고, 수용성 분획보다 메탄올 가용성 분획에서 아질산염 소거능이 더욱 크게 나타났으며, 농도가 증가하면서 아질산염 소거능도 비례적으로 증가하지만 수용성 분획 \( \mathrm{pH} 1.2\)와 methanol 가용성 분획 \( \mathrm{pH} 1.2\), \(\mathrm{pH} 6.0 \)에서는 농도에 따른 유의적 차이가 없어 적은 양으로도 아질산염 소거능이 탁월하다고 보고하였다.</p> <h2>지질과산화에 대한 억제 효과</h2> <p>일당귀 에탄올 추출물 분획의 항산화 활성을 linoleic acid를 기질용액으로 지질과산화물가(TBA value)를 측정하여 비교한 결과는 Table 4 와 같다. 지질과산화물가를 통한 지질과 산화 억제 효과는 linoleic acid의 산화로 생성된 과산화지질의 분해 과정에서 생기는 peroxy radical의 소거를 통해 지질과산화의 이차분해산물인 malondialdehyde의 생성량을 측정하여 항산화능을 확인하는 방법이다.</p> <p>각 분획의 지질과산화 억제율은 n-hexane 분획 \( 87.7 \% \), ethylacetate 분획 \( 62.3 \% \), chloroform 분획 \( 40.3 \% \) 순으로 DPPH radical 소거 활성과 Rancimat으로 측정한 항산화 지수와 동일하게 n-hexane 분획에서 지질과산화 억제율이 가장 높게 나타났으나, 양성대조군으로 사용한 BHT의 지질과산화 억제율보다는 낮게 나타났다. 이 결과는 Parker 등이 보고한 것처럼 phenol의 OH기가 DPPH용액에 존재하는 유리 라디칼과 linoleic acid의 산화로 인해 생성되는 유리 라디칼에 작용하는 차이 때문으로 생각된다.</p> <h2>Linoleic acid에 대한 항산화 효과</h2> <p>Linoleic acid에 \( 50^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 일정 기간(3일, 5일, 7일) 항온 저장시킨 일당귀 에탄올 추출물 분획을 첨가하여 생성된 과산화물가(POV)를 측정한 견과는 Fig. 2와 같다.</p> <p>3일 저장한 일당귀 에탄올 추출물 분획의 과산화물가는 water 분획 \( 550 \mathrm{meq} / \mathrm{kg} \), n-butanol 분획 \( 520 \mathrm{meq} / \mathrm{kg} \), chloroform 분획 \( 380 \mathrm{meq} / \mathrm{kg} \) 순으로 높았고, 5일 저장에서는 water 분획 \( 970 \mathrm{meq} / \mathrm{kg}\), n-butanol 분획 \( 960 \mathrm{meq} / \mathrm{kg} \), chloroform 분획 \( 670 \mathrm{meq} / \mathrm{kg} \) 순으로, 7일간 저장에서는 water 분획 \( 1,150 \mathrm{meq} / \mathrm{kg}\), n-butanol 분획 \( 1,100 \mathrm{meq} / \mathrm{kg} \), ethylacetate 분획 \( 1,020 \mathrm{meq} / \mathrm{kg} \) 순으로 높았다. 이 결과는 용매 추출에 의한 항산화물질의 양이 n-hexane과 ethylacetate로 추출 시 높았기 때문으로 생각되며 분획의 항산화력과 과산화물가 사이에는 역상관관계가 있음을 알 수 있었다.</p>