본 균주(B. subtilis CH-10)의 배양 시간에 따른 PGA 생산량을 검토한 결과, 12시간 부터 PGA를 생산하기 시작하여 96시간 배양 했을 때 18mg/ml의 최대 생산량을 나타냈다. 배양에 따른 pH의 변화는 커다란 변화가 없었으나 SDS−PAGE를 이왕하여 배양시간에 따라 생성된 PGA 의 분자량을 확인해 본 결과, 배양시간이 경과함에 따라 PGA 분해효소가 세포외로 분비되어 생산된 PGA를 분해하는 것을 알 수 있었다.
<h3>\(B. subtilis \) \( \mathrm { CH } -10 \)의 배양시간에 따른 \( \mathrm { PGA } \) 생산변화</h3> <p>본 균주의 배양시간에 따른 \( \mathrm { PGA } \) 생산량과 분자량을 검토해 보았다. 본 균주는 배양 \( 12 \\)시간부터 \( \mathrm { PGA } \)를 생산하기 시작하여 시간이 경과합에 따라 \( \mathrm { PGA } \) 생산량이 증가하였고 \( 96 \\)시간 배양 했을 때 \( \mathrm { PGA } \)의 최대 생산량 \( (18 \mathrm { mg } / \mathrm { ml } ) \) 을 나타내었다. \( \mathrm { PGA } \) 생산량은 \(B. licheniformis ATCC9945 \) (17- \( 23 \mathrm { ~g } / \mathrm { I } ) \), \(B. subtilis IFO3335 (10-20 g/l), B. subtilis TAM-4 (20 g/I) \)과는 비슷한 생산수준을 보였고 \(B. lichen-iformis A35 (8-12 g/l) \)의 \( \mathrm { PGA } \) 생산량보다는 더 많았다. 배양에 따른 \( \mathrm { pH } \)의 변화는 배양 \( 36 \\)시간까지 접차 산성 쪽으로 변화하다가 그 이후 다시 중성으로 바뀌었지만 커다란 \( \mathrm { pH } \)변화는 없었다. \(SDS-PAGE \)를 이왕하여 배양시간에 따라 생성된 \( \mathrm { PGA } \) 의 분자량을 확인해 븐 견과, 배양한 후 \( 84 \\)시간 이후부터는 \( 200 \mathrm { kDa } \) 이하의 저분자량의 \( \mathrm { PGA } \) 가 증가하였고, \( 120 \\)시간 배양한 후에는 생산된 \( \mathrm { PGA } \)의 양이 감소하였다. 이런 결과는 배양시간이 경과함에 따라 \( \mathrm { PGA } \) 분해효소( \( \mathrm { PGA } \) depolymerase)가 세포외로 분비되어 생산된 \( \mathrm { PGA } \)를 분해하기 때문인 것으로 사료된다. FDNB법에의 해 \( 120 \\) 시간 배양 후에 \( \mathrm { PGA } \) 의 평균분자량을 조사한 결과, \( 1,100 \mathrm { kDa } \)의 평균분자량을 나타내었다. \(Bacillus subtilis (chungkookjang) \)과 \(Natrialba acgyptiaca \)는 분자량 \( 10 ^ { 6 } \mathrm { Da } \) 이상의 \( \mathrm { PGA } \)를 생산하는 것으로 보고되었고 본 균주는 \(B. subtilis (natto), B. li-cheniformis, B. subtilis IFO 3335 \)와 비슷한 \( 10 ^ { 5 } \sim 10 ^ { 6 } \mathrm { Da } \)의 분자량을 나타내었다.</p>