본 논문에서 방사선을 쬐지 않은 대조군과 조사한 금붕어 뇌조직의 두 크로마토그램을 비교해 보면, Fig.1B에서 화살표로 표시된 피크의 흡광도 수치가 늘어남을 알 수 있다.
<p>대조군인 금붕어 뇌조직 추출물 \( 100 \, \mu \mathrm { l } \)를 218TP54 protein & peptide \( \mathrm { C } _ { 18 } \) 컬럼 \( (4.6 \times 250 \, \mathrm { mm } , 5 \, \mu \mathrm { m } \), Grace Vydac, USA)을 사용하여 A용매로는 \( 0.1 \% \) TFA를 포함하는 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } \, ( \mathrm { pH } \) 2.2)와 B 용매로는 \( 0.1 \% \) TFA를 포함하는 \( 100 \% \) acetonitrilie \( \left ( \mathrm { CH } _ { 3 } \mathrm { CN } \right ) \) \( ( \mathrm { pH } \) 2.2)을 이용하여 B용매 gradient로 다음의 분리조건으로 행하였다: gradient, \( 0 \rightarrow 100 \% \) \( \mathrm { CH } _ { 3 } \mathrm { CN } \) (60 min); 유속, \( 1.0 \, \mathrm { ml } / \mathrm { min } \), 온도, \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \). 또한, 방사선을 조사한 금붕어 뇌조직 추출물 \( 100 \, \mathrm { ul } \)를 위의 방법과 동일하게 분리하였다.</p> <p>방사선을 조사하지 않은 대조군과 조사한 금붕어 뇌조직에 대한 두 크로마토그램을 비교한 결과, Fig. 1B에서 화살표로 표시된 피크의 흡광도 값이 변화, 증가하였다. 이 물질을 두 번째 정제과정으로 Superdex Peptide HR 10/30 column ( \(10 \times 300 \, \mathrm { mm } \), Pharmacia, Sweden)을 이용하여 \( 0.1 \% \) TFA를 포함하는 \( 30 \% \, \mathrm { CH } _ { 3 } \mathrm { CN } \)으로 용출, 분리하였으며, 마지막 정제단계로 분석용 Capcellpak \( \mathrm { C } _ { 18 } \) column \( (4.6 \times 250 \, \mathrm { mm } \), \( 5 \, \mathrm {\mu m } \), Shiseido, Japan)을 사용하여 A용매로는 \( 0.1 \% \) TFA를 포함하는 \( \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } \,( \mathrm { pH } 2.2) \)와 B용매로는 \( 0.1 \% \) TFA를 포함하는 \( 100 \% \, \mathrm { CH } _ { 3 } \mathrm { CN } \, ( \mathrm { pH } 2.2) \)을 이용하였으며, 분리조건은 다음과 같다: gradient, \( 5 \rightarrow 35 \% \, \mathrm { CH } _ { 3 } \mathrm { CN } \) (30min); 유속, \( 1.0 \, \mathrm { ml } / \mathrm { min } \).</p>