밀배아유의 항염증 효능을 확인하기 위해 MTT 방법을 이용해 RAW \(264.7\) 세포에 대한 독성을 검사하였다. 그 결과 \(0.1-100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml}\) 농도에서 PBS 처리구와 유의적인 차이가 없어, 해당 농도에서의 밀배아유는 세포 생존율에 영향을 미치지 않았다. 따라서, 밀배아유의 항염증 효능은 세포 독성이 아닌, 염증 조절 매개 물질의 활성을 억제하는 물질에 의해 발현되는 것으로 추정된다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>세포독성 측정</h2> <p>밀배아유의 항염증 효능을 탐색하기 앞서 밀배아유가 RAW \( 264.7 \) 세포에 독성을 나타내는지 관찰하기 위하여, \( 100 \mu \mathrm{g} / \) \( \mathrm{ml} \) 의 농도를 최고농도로 하여 MTT 방법으로 세포독성을 확인하였다. MTT 결과 \( 0.1-100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 농도에서 PBS 처리구와 유의적인 차이가 나타나지 않아 세포에 \( 0.1-100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 에서는 세포생존율에 영향을 주지 않았다(Fig. 1). 이는 밀배아유의 항염증 효과가 세포 독성에 의한 것이 아니며, 밀배아유의 염증 조절 매개 물질의 활성을 억제시키는 물질에 기인한 것으로 사료된다.</p> <h2>Nitric oxide 생성 억제효과</h2> <p>LPS 자극에 의한 RAW \( 264.7 \) 세포에서 증가된 \( \mathrm{NO} \) 분비량에 대한 밀배아유의 영향을 알아보기 위하여, 배양액 중에 생성된 nitrite의 양을 조사하였다. NO는 NOS에 의하여 L-arginine으로부터 생성되는 무기유리체로 면역반응, 세포독성 신경전달계 및 혈관이완 등의 여러 생물학적 과정에 관여하며 병리적인 조건하에서 \( \mathrm{iNOS} \) 에 의한 \( \mathrm{NO} \) 의 현저한 증가는 다른 염증성 매개체들과 함께 과도한 염증을 유발하는 염증성 손상의 주요 매개체이다. LPS로 염증이 유도된 RAW \( 264.7 \) 세포는 \( \mathrm{NO} \) 의 생성이 \( 55.8 \mu \mathrm{M} \) 로 현저히 증가되었으나, 밀배아유를 \( 10-100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 로 처리하였을 때 농도 의존적으로 \( \mathrm{NO} \) 의 분비량이 감소되는 것으로 나타났다. 특히 50 및 \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 농도에서 \( \mathrm{NO} \) 의 생성량이 \( 36.6 \) 및 \( 34.7 \mu \mathrm{M} \) 로 나타나 \( 36 \% \) 및 \( 40 \% \) 의 감소효과를 나타내었다(Fig. 2). 이는 sandalwood essential oil이 \( 250 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 농도에서 약 \( 30 \% \) 의 \( \mathrm{NO} \) 분비량 억제 효과를 나타내었다고 보고하였으며, Camellia japonica oil은 \( 100 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 농도에서 LPS로 증가된 \( \mathrm{NO} \) 의 분비량이 약간 감소하여, 밀배아유에 의한 \( \mathrm{NO} \) 분비량 감소 효과가 좋은 것으로 사료된다. 밀배아유에는 불포화지방산인 oleic acid와 linoleic acid 함량이 높으며, 불포화 지방산이 염증 반응에 관여하는 \( \mathrm{NO} \) 의 분비량 감소에 효과가 있는 것으로 보고되고 있다. 따라서, 밀배아유에서 불포화지방산이 염증 매개 물질인 \( \mathrm{NO} \) 의 분비량 감소에 영향을 미치는 것으로 사료된다.</p>