누에의 생리활성 작용을 높이기 위해서는 발효를 해야하고, 발효를 하는 미생물에 따라 항산화 활성이나 환원력 등이 가장 높을 때가 다르기 때문에 균종별로 발효 시간을 다르게 해야한다.
<p>항산화 활성은 비발효 누에분말 물추출물 \( (1 \mathrm{mg} / \mathrm{ml}) \) 에서 \( 42.12 \% \) 를 나타내었고, 대조구로 사용한 시판 항산화제 BHT \( 1 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도에서는 \( 95.96 \% \) 의 높은 활성을 보였다(Fig. 4).B. subtilis 발효 누에분말 물추출물 \( (1 \mathrm{mg} / \mathrm{ml}) \) 의 항산화 활성은 발효 기간이 길어지면서 비례적으로 증가하는 것으로 나타났다. 발효 전 \( 42.12 \% \) 에서 발효 9일째 \( 75.90 \% \) 이상의 활성을 보인 이 후 완만하게 증가하는 경향이었다. A. kawachii 발효 누에 분말 물추출물의 항산화 활성은 발효 9 일째까지 큰 변화를 보이지 않다가 발효 12일째 \( 73.99 \% \) 의 높은 활성을 보였다(Fig.4). 우리나라 고유의 전통식품인 된장, 일본 Okara koii, 인도네시아 tempeh에서 발효과정 중에 단백질 분해가 일어나 이 때 생성되는 대사산물인 펩타이드나 아미노산 등의 화합물에 의해 항산화 활성이 증가하였다는 보고가 있다[20,21,27].Marcuse는 cysteine을 제외한 대부분의 아미노산에서 항산화 활성이 있었다고 보고하였다[19]. 발효 전 누에분말 물추출물에 비해 발효 누에분말의 물추출물에서 항산화 활성이 증가한것은 발효 과정 중에 생성되는 대사산물에 의한 효과로 사료 된다. 한편, 국내 자생곤충 76 종의 304 종 추출물 중DPPH 소거능으로 항산화 활성을 측정한 결과 방아깨비, 가시길쭉바구미, 알락수엽노린재, 송장벌레과 유충 4 종에서만 항산화 활성이 있었다고 하였다[25]. 이처럼 극히 일부 곤충에서만 항산화 활성이 있는 것에 비해 누에 자체에 항산화 활성이 있으면서 미생물 발효에 의해 더욱더 활성이 증가함으로써 누에의 생리활성 작용을 이용한 건강기능식품 개발의 기초자료로 활용될 가치가 있어 보인다.</p> <h3>발효 누에분말의 환원력 효과</h3> <p>\( \mathrm{Fe} \) 환원력(reducing power) 활성 정도는 수소 원자를 제공 하는 유리 라디칼의 연쇄 반응으로 금속 이온을 환원시키는 정도를 흡광도 값으로 나타내는 것으로, 환원력의 효과는 반응 물질의 흡광도 수치가 높을수록 항산화 활성이 높다는 것이다[10]. Fe-환원력은 대조구로 사용한 시판 항산제인 BHT및 ascorbic acid \( 0.1 \% \) 의 농도에서 \( 1.29 \) 및 \( 1.21 \) 의 흡광도를 나타내었다(Fig. 5). 비발효 누에 물추출물 \( (1 \mathrm{mg} / \mathrm{ml}) \) 의 환원력은 0.41로 대조구로 사용한 시판 항산화제 BHT 또는 ascorbic acid 흡광도 보다 3 배 정도 낮은 값을 보였다(Fig. 5). 그러나 B. subtilis 발효 누에분말 물추출물 \( (1 \mathrm{mg} / \mathrm{ml}) \) 에서는 발효 6일째 \( 0.56 \) 으로 증가하다가 차츰 낮아지는 경향을 보였으며, \( A \).kawachii 발효 누에분말 물추출물 \( (1 \mathrm{mg} / \mathrm{ml}) \) 에서는 발효 9일째까지 큰 변화를 보이지 않다가 발효 12 일째 \( 0.47 \) 로 가장 높은 활성을 보였다. 더덕의 경우 열수 추출물 \( (1 \mathrm{mg} / \mathrm{ml}) \) 에서 환원력으로 측정한 흡광도는 \( 0.34 \) 인데 비해 발효 더덕의 경우 \( 0.65 \)으로 발효에 의해 활성이 증가된 것으로 나타나 본 실험 결과와는 일치하는 것으로 나타났다[24].</p> <p>이상의 실험에서 B. subtilis 발효 누에분말에서 환원력과 혈전 분해 활성은 발효 6 일째에 항산화 활성과 단백질 농도는 발효 12일째에 가장 높았고, SDS-PAGE상의 전기영동 분석에서는 발효 초기인 3일째 66-97 kDa 크기의 단백질이 대부분 분해가 일어났었다. A. kawachii 발효 누에분말의 환원력, 항산화 활성 및 단백질 농도는 발효 12일째에 가장 높았고,SDS-PAGE상의 전기영동 분석에서 66-97 kDa 크기의 단백질은 발효 3일째부터 차츰 분해되기 시작하여 12일째 분해가 대부분 이루어졌다. 따라서 미생물을 이용한 발효 누에에서특정의 생리활성 작용을 기대하기 위해서는 사용하는 균종에 따라 발효 시간이 달라져야 한다는 것을 시사하였다.</p>