효모의 단수체 유도를 위해 20종의 amino acid를 추가하여 제조하였고, 원형질체 재생 배지는 YPD 배지에 sorbitol, \(3\%\) agar를 첨가하여 사용하였다. 전분분해능과 알코올 발효능 측정을 위해 각각 Acetate buffer, soluble starch, 배양상등액, ethanol kit(Roche)를 사용하였다.
<p>효모의 단수체 유도에 사용한 presporulation 배지는 \( 10 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) dextrose, \( 0.3 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) peptone, \( 0.8 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) yeast extract로 제조하였고, sporulation 배지는 \( 1 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) potas-sium acetate, \( 0.5 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) dextrose, \( 0.1 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) yeast extract로 제조하였다.</p> <p>영양요구성 변이주 형성 확인을 위해 사용한 \( \mathrm { SD } \) 배지는 \( 0.67 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) yeast nitrogen base w/o amino acid, \( 2 \% \) (w/v) dextrose로 이루어진 최소배지에 20 종의 amino acid를 각각 첨가하여 제조하였다.</p> <p>원형질체 재생 배지는 YPD 배지에 삼투안정제로 \( 1.2 \mathrm { M } \) sorbitol, \(3 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) agar를 첨가하여 사용하였다. 균주배양은 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \) incubator(Vision scientific co. Ltd., Korea)에서 48시간동안 배양한 후, 실험에 사용하였다.</p> <h2>전분분해능 측정</h2> <p>전분분해능 측정을 위한 반응 혼합물은 \( 0.05 \mathrm { M } \) acetate buffer(pH 5.0) \( 50 \mathrm { ~mL } \)에 \( 150 \mathrm { ~mL } \)의 \( 0.5 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) soluble starch, 배양상등액 \( 50 \mathrm { ~mL } \)를 조효소액으로 사용하였다. 이혼합액을 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 30분간 반응시킨 후 Somogyi and Nelson 방법을 통해 환원당을 측정하였다.</p> <h2>알코올 발효능 측정</h2> <p>알코올 발효능 측정은 YPD24 배지에서 2일간 배양한 배양상등액 \( 100 \mathrm { ~mL } \)를 이용하여 ethanol kit (Roche, German)를 이용하여 측정하였다.</p>