동백꽃 추출물의 에탄올 추출물은 신생혈관의 형성을 억제하는 것으로 나타나, 항암, 암전이 억제제 등의 용도로 응용이 가능하며, 독성 또한 낮아 다양한 제제로 개발할 수 있다.
<h1>결과 및 고찰</h1><h2>신생혈관 형성 억제효과</h2><p>동백꽃의 에탄올 추출물의 분액으로 신생혈관생성억제 효과를 실험한 결과 butanol 추출물이 강한 제어력(\(70.2\%\))를 나타내었고, acetone 층이 \(54.2\%\), 그리고 ethylacetate 층이 \( 37.0 \% \), chloroform 층이 \( 21.2 \% \)의 유의성 있는 제어력을 나타냄이 밝혀져 동백꽃의 butanol층은 신생혈관생성억제제로서 좋은 효과를 보이고 있는 것으로 판단된다. Hexane 추출 과정중 hexane 층이 gel상태로 되어 분획하는 작업이 어려워서 acetone을 첨가하여 gel을 녹인 후 acetone 층을 sample로 사용하였다. 대조군은 신생혈관생성이 뚜렷하게 뻗어있고, 동백꽃 추출물이 첨가된 cell은 신생혈관생성이 저해된다는 것을 알 수 있다. 따라서 동백꽃 추출물의 에탄올 추출물은 신생혈관의 형성을 억제하는 것으로 나타나, 생체에 투여할 수 있는 간단한 추출물로서 항암, 암전이 억제, 류마치스성 관절염 및 항비만 제제 등의 용도로 그 응용가능성이 높을 것으로 판단된다.</p><h2>독성시험</h2><p>동백꽃 butanol 추출물이 신생혈관생성의 효과를 강하게 나타냄으로써 이들 추출물에 대한 독성 시험을 HUVECs를 사용하여 검토한 바 Fig. 3과 같이 나타났다. 그래프에서 보는 바와 같이 동백꽃의 추출물은 \( 200 \mu \mathrm{g} / well\) 에서도 control과 비교하여 독성이 전혀 없는 것으로 나타났다. 이것으로써 동백꽃의 다양한 성분이 독성이 낮은 것으로 판단되며, 다양한 제제로 개발할 수 있을 것으로 사료된다.</p><h2>ELISA법에 의한 세포부착 억제작용</h2><p>Cell adhesion 분자인 E-selectin, VCAM-1 및 ICAM-1들은 Camellia japonica flower(CJF)의 성분 증가에 따라 발현이 감소되는 것으로 보아 cell adhesion의 저해 효과가 높아짐을 알 수 있었다. Fig. 4(a)에서 보는 바와 같이 cell adhe-sion 분자인 ICAM-1이 동백꽃 추출물의 농도가 증가합에 따라 발현이 감소하여 cell adhesion의 저해 효과가 높아짐을 알 수 있었다. 농도가 \( 50 \mu \mathrm{g} \) 일 때 \( 5.9 \%, 100 \mu \mathrm{g} \) 인 때 \( 29.4 \% \), \( 200 \mu \mathrm{g} \) 일 때 \( 52.9 \% \) 저해되었으며, VCAM-1도 동백꽃 추출물 성분증가에 따라 감소하여 저헤 화과가 높아졌으며, 특히 농도가 \( 50 \mu \mathrm{g} \) 일 때 \( 12.5 \%, 100 \mu \mathrm{g} \) 일 때 \( 43.8 \%, 200 \mu \mathrm{g} \) 일 때 \( 62.5 \% \) 저해되었다. 또한, E-selectin 억시 감소하여 cell adhesion의 저헤 효과가 높아짐을 알 수 있었고, 농도가 \( 50 \mu \mathrm{g} \) 일 때 \( 7.1 \%, 100 \mu \mathrm{g} \) 일 때 \( 24.4 \%, 200 \mu \mathrm{g} \) 일 때 \( 35.7 \% \) 저해 되었다. 따라서 동백꽃에는 cell adhesion을 저해시키는 물질이 함유되어 있는 것으로 조사되어 항암 작용, 암전이 억제등에 CJF가 유용하게 사용할 수 있을 것으로 판단된다.</p><h2>Western bloting</h2><p>Fig. 5에서 보듯이 Camellia japonica flower(CJF) 추출물의 농도가 증가함에 따라 신호전단 분자인 VEGFR2, PI3-K 및 \( \beta \)-catenin의 밴드가 약허지는 것을 관찰한 수 있다. 이것은 각각의 신호전달 분자의 발현이 CJF에 의해서 저해되어 발현이 방해되어 신호의 전달이 차단되는 것을 의미하머, 신호가 차단됨에 따라 신호가 IkB에 미치지 못하여 이를 분해하지 못함으로써 핵내의 전사인자인 NF-kB를 활성화시키지 못하여 신생혈관의 형성이 저해되는 것으로 판단된다.</p>