실험 결과 Bifidobacterium으로부터 항균물질을 많이 얻기 위해서는 3일 이상 배양해야 할 것으로 생각되며 빠른 시일 내에 가장 높은 항균력을 나타낸 것은 SF7, 최대치의 항균력을 나타낸 것은 R5였다. 분리된 유산균들의 균주 동정을 위해 16S rDNA 서열을 분석하였더니 R5, R6 등은 Bifidobacterium boum으로 동정되었다. Bifidobacterium 종 중에서 HCl 내성이 가장 높은 것은 SF7이었으며, 담즙 내성의 경우에는 B. boum R9이 62.1%로 우수하게 나타났다.
<p>유산균이 생산하는 항균효과를 나타내는 요소로는 낮은pH, 유기산들, bacteriocin, 이산화탄소, 에탄올, diacetyl, 저분자 항균물질, 낮은 환원전위, 영양소고갈, 우점 등에 의하여 항균력을 나타낸다.</p> <p>프로바이오틱스 균주의 항균력 시험은 액체배양이나 agarplate를 사용한 in vitro에서 많이 이루어져왔다. 이외에 쥐나 다른 동물모델을 사용하여 in vivo에서 프로바이오틱스의 항균작용을 연구하는 것도 바람직하다. 왜냐면 대부분의항균작용은 숙주의 면역조절과 프로바이오틱스의 항균 및감염억제력의 혼합작용이기 때문이다.</p> <p>돼지에서 발견되는 ETEC, Salmonella spp., S. aureus,L. monocytogenesis 등은 돼지뿐만 아니라 사람에게도 병을일으키는 인수공통전염병의 원인체인데, 최근에는 항생제methicillin 내성 S. aureus가 돼지로부터 돼지사육자들에게옮긴다는 논문이 발표되어 큰 문제가 되고 있다. 따라서 인수공통병원균을 억제하는 유산균을 프로바이오틱스로 하여 가축에 투여한다면 가축의 질병 예방 뿐 아니라 사람으로의 전염원을 차단한다는 점에서 그 의의가 크다.</p> <h2>유산균 배양시간이 항균능에 미치는 영향</h2> <p>분리된 유산균 중 인수공통전염병균에 대한 항균력이 공통적으로 우수한 4주의 Bifidobacterium 균을 선발하여 이들 유산균들의 배양시간에 따른 Salmonella에 대한 저해능의 변화를 알아보기 위하여 1, 2, 3일 동안 각각 배양된 시료를 비교한 결과 R9 균주는 배양 2일째에 최대 항균력을 나타내었고, 나머지 4균주는 2일째보다 3일째가 증가된 항균력을 나타내었다. 따라서 일반적으로 Bifidobacterium으로부터 최대한 많은 항균물질을 얻기 위해서는 3일 이상 배양하여야 할 것으로 생각된다. 한편 가장 빠른 시일 내에 가장 높은 항균력을 나타낸 것은 SF7으로서 1일 배양 후17 mm의 저해환의 지름을 나타내었고, 최대치의 항균력을나타낸 균주는 R5로서 3일 배양 후 24 mm의 가장 큰 저해환의 지름을 나타내었다.</p> <h2>균주동정</h2> <p>분리된 우수 유산균들의 균주동정을 위하여 이들 유산균들의 16S rDNA 서열을 분석한 결과, 젖소 제1위에서 분리한 유산균인 R5, R6, R9는 모두 Bifidobacterium boum으로 동정되었다. 돼지분변에서 분리한 SF7 유산균은 B.thermophilum으로 동정되었다. R5, R6, R9은 같은 소 위에서 분리되었고, 같은 학명으로 동정이 되었으나, 항균력에 있어서는 차이를 보였다.</p> <h2>내산성과 내담즙성</h2> <p>분리균주의 내산성 내담즙성을 조사한 결과를 Fig. 1에 나타내었다. HCl 내성에서는 L. pentosus K34가 생존율34.6%로 가장 우수하였는데, Bifidobacterium spp. 중에서는 B. thermophilum SF7이 생존율 28.8%로 가장 우수하였다. 담즙내성의 경우, L. pentosus K34와 B. boum R9이 생존율 각각 67.6%와 62.1%로 가장 우수하였다. 전체적으로보면 내산성과 내담즙성은 직접 관련되지 않은 것으로 보인다. 예를 들면 R5의 경우 18.5%로 내산성이 가장 낮았으나, 내담즙성은 58.4%로 높은 편이었고, SF7 경우 내산성은28.8%로 높았으나, 내담즙성은 38.6%로 낮은 편이었다. 한편 내산성 측정에 사용한 균주들은 모두 항균활성이 높은 균주들이었는데 내산성과 내담즙성에는 균주간에 차이가 있는것으로 보아, 항균활성과 내산성 그리고 내담즙성에는 직접적인 관련이 없어 보인다. Lahteinen 등은 항균활성과내산성에는 오히려 negative 관계가 있어 보인다고 보고하였다.</p>