GenBank database에서 추출한 Gluconacetobacter oboediens의 16S rRNA 유전자의 염기서열과 99%의 유사성을 가진 JH232의 16S rRNA 유전자는 계통발생학적 연구에 활용되었다. 또한, BSH 배지로 분리한 JH232의 BC 생성을 향상시키기 위해 CSL 배지를 수정하여 사용하였다. 초기 pH가 다양한 배지에서 7일 동안 배양한 결과, 배지의 초기 pH에 따라 BC의 생성량이 변화함을 확인하였다.
<h1>결과 및 고찰</h1> <h2>\( 16 \mathrm{~S} \) rRNA 유전자의 비교분석</h2> <p>PCR로 증폭된 JH232의 \( 16 S \) rRNA 유전자는 GenBank da-tabase에 있느 세균들과의 계통발생학적 관계롤 조사하니 위해 사용되었다. JH232의 \( 16 \mathrm{~S} \) rRNA 유전사는 부분적으로 염기서열을 결정하여 결국 499 염기들(E. coli numbering에 따른 위치 926에서 1406 에 해당)의 서열은 결정하였다. 이 서열은 GenBank database에서 Gluconacetobacter oboediens의 16S rRNA 유전자의 염가서열(accession no. AJ001631)과 가장 비슷한(99\%) 것으로 나타났다. G. oboediens는 a-Proteobacteria에 해당하며, 적포도주 식초발효 과정에서 원래 분리된 바 있다[. \( 16 \mathrm{~S} \) rRNA 유전자 분석결과를 근거로 \( \mathrm{JH} 232 \) 는 Gluconacetobacter sp. JH232로 명명하였다.</p> <h2>배지조성에 따른 \( \mathrm{BC} \) 생성</h2> <p>\( \mathrm{BSH} \) 배지로 \( \mathrm{JH} 232 \) 를 분리하였으나 \( \mathrm{BC} \) 생성을 증가하기 위해 배지 성분을 수정한 CSL 배지를 본 연구의 최적 배지로 사용하였다. Flask 실험결과 JH232는 CSL배지에서 \( \mathrm{BC} \) 를1.7 - 2.1 배 더 생성하였다(Fig. 1). 갉은 배지를 사용하더라도 정치 배양한 경우 진탕 배양에서 보다 1.1-1.4배 더 \( \mathrm{BC} \) 생성량이 높은 것으로 나타났지만, 전반적으로 두 배양 방법 상에서 많은 차이를 유발하지는 않는 것으로 나타났다.</p> <h2>배양온도와 초기 \( \mathrm{pH} \) 에 따른 \( \mathrm{BC} \) 생성</h2> <p>\( \mathrm{JH} 232 \) 의 배양온도에 따른 BC 생성량을 조사하기 위해 10 \( 55^{\circ} \mathrm{C} \) 법위에서 각 온도 별로 7 일간 배양 후 생성된 \( \mathrm{BC} \) 를</p> <p>정량 하였다. \( \mathrm{JH} 232 \) 는 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 \( 4.2 \mathrm{~g} / 1 \) 의 \( \mathrm{BC} \) 를 생성하여 조사한 온도범위에서 가장 많이 \( \mathrm{BC} \) 를 생성하였으므로 \( 30^{\circ} \mathrm{C} \) 가 \( \mathrm{BC} \) 생성에 최적임올 알 수 있었다(Fig. 2). 균체 성장이 \( 15^{\circ} \mathrm{C} \)에서는 극히 느려 biomass량은 적었으나 어느 정도 \( (2.7 \mathrm{~g} / 1) \)의 \( \mathrm{BC} \) 롤 생성하였다. 그러나 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 이상과 \( 10^{\circ} \mathrm{C} \) 이하에서는 균체가 증가하지 않아 \( \mathrm{BC} \) 도 생성되지 않았다. 한편 배지의 초기 \( \mathrm{pH} \) 에 따른 \( \mathrm{BC} \) 생성량을 조사하기 위해 \( \mathrm{pH} \) 롤 3.0-9.0 로 조절하여 7 일간 배양 후 생성된 \( \mathrm{BC} \) 를 정량 하였다. 약산성인 \( \mathrm{pH} \) 범위(4.0 - 6.0)에서 \( \mathrm{BC} \) 생성이 양호하였으며, 득히 \( \mathrm{pH} 5.5 \) 에서 최대 생성을 나타내었다.</p>