잔틴산화 효소와 알파 글루코시다아제 그리고 티로시나아제의 저해활성을 각각의 특정 조건과 방법으로 측정하였다. 그 결과 잔틴산화 효소와 티로시나아제의 저해활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도의 감소율로 나타났다.
<h2>Xanthine oxidase 저해활성 측정</h2> <p>Xanthine oxidase 저해활성 측정은 Stirpe와 Corte의 방법에 따라 측정하였다. 각 시료 용액 \( 0.1 \mathrm {~ml} \) 와 \( 0.1 \mathrm {~M} \) potassium phosphate buffer \( (\mathrm {pH} 7.5)\) \( 0.6 \mathrm {~ml} \) 에 xanthine \( (2 \) \( \mathrm {~mM} \) )을 녹인 기질액 \( 0.2 \mathrm {~ml} \)를 첨가하고 xanthine oxidase \( (0.2 \mathrm {U} / \mathrm {ml}) 0.1 \mathrm {~ml} \) 를 가하여 \( 37^{\circ} \mathrm {C} \) 에서 5분간 반응시킨 후 \(1 \mathrm {N} \mathrm {~HCl} \mathrm {~1ml} \)를 가하여 반응을 종료시킨 다음 반응액 중에 생성된 uric acid를 흡광도 \( 292 \mathrm {~nm} \) 에서 측정하였다. Xanthine oxidase 저해활성은 시료용액의 첨가구와 무 첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다.</p> <h2>\( \alpha \)-Glucosidase 저해활성 측정</h2> <p>각 시료용액 \( 0.1 \mathrm {~ml} \) 에 \( 0.3 \mathrm {~U} / \mathrm {ml} \)의 \( \alpha \)-glucosidase 효소액 \( 0.1 \mathrm {~ml}, 0.1 \mathrm {~M} \) PBS buffer \( (\mathrm {pH} 7.0)\) \( 0.5 \mathrm {~ml} \) 에 넣고 혼합하여 \( 37^{\circ} \mathrm {C} \)에서 15분간 반응시킨 후 \( 3 \mathrm {~mM} \) pNPG (Sigma, MO, USA) \( 0.2 \mathrm{~ml} \)를 가하여 \( 37^{\circ} \mathrm {C} \) 에서 10분간 반응시켰다. \( 0.1 \mathrm{~M} \) \( \mathrm{Na}_{2} \mathrm{~CO}_{3} ~0.5 \mathrm{~ml} \)를 가하여 반응을 정지시킨 후 \( 405 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하여 저해율을 계산하였다.</p> <h2>Tyrosinase 저해활성 측정</h2> <p>Tyrosinase 저해활성 측정은 Yagi 등의 방법에 따라 측정하였다. 반응구는 \( 1 / 15 \mathrm {~M} \) sodium phosphate buffer \( (\mathrm {pH} \) 6.8) \( 0.5 \mathrm {~ml} \) 에 \( 10 \mathrm {~mM}\) L-DOPA을 녹인 기질액 \( 0.2 \mathrm {ml} \) 및 시료용액 \( 0.1 \mathrm{ml} \) 의 혼합액에 mushroom tyrosinase \( (110 \mathrm{~U} / \mathrm {ml}) 0.2 \) \( \mathrm {ml} \) 첨가하여 \( 25^{\circ} \mathrm {C} \)에서 2분간 반응시켜 반응액 중에 생성된 DOPA chrome을 \( 475 \mathrm {~nm} \)에서 측정하였다. Tyrosinase 저해활성은 시료용액의 첨가구와 무첨가구의 흡광도 감소율로 나타내었다.</p>