9월 중순부터 2월까지 '매향' 원종의 형태적 변이체를 기준으로 화방 출뢰성, 비정상 과일 출현, 초세 등을 검사하고, simple sequence repeat (SSR) 마커를 이용하여 유전적 차이를 확인하였다. 이를 위해 어린 잎에서 genomic DNA를 추출하고 5-FAM로 형광 표지한 프라이머를 제작하여 PCR증폭 조건에 따라 실행한 결과 coconut water의 농도가 높을 수록 매향의 증식률과 생육의 활성이 향상되었다.
<p>Coconut water 처리묘는 9월 중순에 정식하여 이듬해 2 월까지 전 재배기간동안 화방 출뢰성(불연속 출뢰 또는 불출뢰), 비정상 과일 출현, 초세 등을 기준으로 형태적 변이검정을 실시하였고, 선발된 변이체를 simple sequence repeat (SSR)(<caption>Table 1)</caption>)마커를 이용하여 '매향' 원종과 유전적 차이가 있는지 확인하였다.<p>SSR 검정은 Kim et al 의 방법과 같은 방법으로 실시하였다. '매향' 품종의 형태적 변이체의 genomic DNA는 어린 잎에서 추출하였으며, 4개의 마커 정보를 수집하여 정방향에 5-FAM로 형광 표지한 프라이머를 제작하여 사용하였다. PCR증폭 조건은 \( 95 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 15 분 동안 변성시킨 후, \( 95 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 초, \( 65 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 초(반복 당 \( 1 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 씩 감소), \( 72 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 초간 25 회 반복한 후, \( 95 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 초, \( 55 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 초, \( 72 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 30 초간 30 회 반복한 후 \( 72 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 5 분간 처리하였다. \( \mathrm { PCR } \) 이 완료된 후 \( 5 \mu \mathrm { L } \) 의 증폭산물을 \( 1.5 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) agarose gel에서 전기영동하여 증폭 여부를 확인한 후 변성시킨 PCR 산물은 자동염기서열분석기를 활용하여 전기영동한 다음 Gene Mapper 프로그램을 사용하여 마커 별로 분석하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <p>Coconut water 농도 별 처리에 따른 '매향'의 신초 증식을 비교한 걸 과는<caption>Table 2</caption>와 같다. '매향'은 coconut water 무첨가에서 \( 3.0 \pm 0.3 \) 개의 신초가 발생하였고, \( 20 \mathrm { ml } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } \) 첨가 시 \( 6.2 \pm 1.0 \)개, \( 40 \mathrm { ml } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } \) 첨가 시 \( 6.0 \pm 0.4 \) 개, \( 60 \mathrm { ml } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } \) 첨가 시 \( 9.6 \pm 1.2 \) 개, \( 80 \mathrm { ml } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } \) 첨가 시 \( 8.7 \pm 0.7 \) 개 및 \( 100 \mathrm { ml } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } \) 첨가 시 \( 12.3 \pm 1.1 \) 개의 신초가 발생하였다. Kim et al. 은 딸기 조직배양 시 BA \(0.5 \mathrm { mg } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } \) 과 IBA \( 0.1 \mathrm { mg } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } \) 을 혼합하여 처리하면 '고하'는 주당 약 47개, '설향'은 주당 약 40 개의 신초가 발생한다고 보고한 바 있으며, BA \( 0.5 \mathrm { mg } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } \) 과 IBA \( 0.1 \mathrm { mg } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } \) 을 혼합하여 처리 시 증식률이 양호하며 변이 발생이 없다고 보고하였다. 그러나 '매향'은 같은 농도의 BA와 IBA를처리해도 증식률이 저조하여(데이터 미제시), 식물생장조절물질이 아닌 천연물질을 첨가하여 증식률을 향상시키고자 하였다. 그 결과 '매향'은 coconut water의 농도가 높아짐에 따라 증식률이 향상되 었으며, 특히 \( 100 \mathrm { ml } \cdot \mathrm { L } ^ { -1 } \) 처리 시 무처리의 약 4 배로 가장 높은 증식률을 보였다. Coconut water를 농도 별로 처리한 ‘매향’의 생육을 비교해 보면, coconut water 무처리에 비해 처리구의 생육이 왕성하며 농도가 높을 수록 생육이 보다 왕성하였다.</p>