Mouse 시각피질의 melanopsin-IR 신경세포가 관찰되었고, 이러한 신경세포는 round/oval, vertical fusiform 및 pyramidal 세포로 분류되며, 핵과 돌기는 염색되지 않고 세포체만 염색되었다. 또한 melanopsin이 신경세포 중 일부에서만 관찰되었고, 이러한 melanopsin-IR 신경세포는 CBP 및 NOS과 co-localization되었다. 본 연구는 신경세포의 존재를 성체 mouse의 시각피질에 있는 melanopsin에서 밝히는 최초의 연구이고, 시각피질의 일부 신경세포에 melanopsin-IR 신경세포가 존재한다는 것을 알 수 있으며, 비교를 위해 사용한CB-IR, PV-IR, NOS-IR 신경세포들에서 아집단이 발견되었다. 이 연구들을 통해 CB, PV, NOS 가 mouse 시각피질의 신경세포 중 일부에만 존재하는 것을 확인하였고, thionin 염색에 비하여 melanopsin-IR 신경세포가 적었으며 이 결과들을 통해 melanopsin-IR 신경세포가 시각피질의 일부에만 존재하는 것을 알 수 있다.
<h2>Melanopsin-IR 신경세포의 형태</h2> <p>Mouse 시각피질의 melanopsin-IR 신경세포의 크기와 모양은 다양하다. 가장 많이 관찰된 melanopsin-IR 신경세포는round/oval 세포 모양이었다. 이 세포들의 핵과 돌기는 염색되지 않았고, 세포체만 염색되었다. Vertical fusiform 세포는 연질막 표면 방향으로 길게 뻗는 돌기들을 가지는 세포이다. 그러나 melanopsin 염색에서 round/oval 세포와 마찬가지로 돌기들은 염색되지 않았으며 세포체만 염색되었다. Pyramidal 세포는 뇌의 연질막 쪽으로 뻗는 하나의 굵은 첨단수상돌기와 수평으로 뻗은 수상돌기를 가진다. Pyramidal 세포 역시 돌기는 염색되지 않았으며 세포체만 염색되었다.</p> <h2>Melanopsin과 co-localization된 CBP, NOS</h2> <p>Mouse 시각 피질에서 melanopsin이 신경세포 중 일부에서만 발현되는 것을 알아보기 위해 우리는 CY2와 CY3를 이용한immunocytochemistry 염색법으로 melanopsin이 CB, PV, NOS들과 각각 co-localization되는지를 알아보았다. Fig. 4A, D 는 CY2 염색된 melanopsin-IR 신경세포를 보여주며 Fig. 4B, E 는 CY3 염색된 PV-IR 신경세포를 보여준다. Fig. 4C는 Fig.4 의 A와 B의 사진을 겹쳐서 PV-IR 신경세포와 melanopsin-IR신경세포의 co-localization을 확인한 사진으로 관찰된 PV-IR 신경세포(화살표, 화살표머리) 4개 중에 3개의 PV-IR 신경세포가 melanopsin-IR 신경세포와 co-localization되고(화살표머리) 나머지 하나는 co-localization되지 않았다(화살표). Fig. 4F 는 Fig. 4 의 D와 E의 사진을 겹쳐서 PV-IR 신경세포와 melanopsin-IR 신경세포의 co-localization을 확인한 사진으로 관찰된 PV-IR 신경세포(화살표, 화살표머리) 3개 중에 2개의PV-IR 신경세포와 melanopsin-IR 신경세포가 co-localization되고(화살표머리) 나머지 하나는 co-localization되지 않았다(화살표). Fig. 4G, J는 CY2 염색된 melanopsin-IR 신경세포를 보여주며 Fig. 4H, K는 CY3 염색된 CB-IR 신경세포를 보여준다. Fig. 4I 는 Fig. 4 의 G 와 H 의 사진을 겹친 것이고, Fig. 4L 은Fig. 4 의 J와 K의 사진을 겹친 것으로 Fig. 4 I는 CB-IR 신경세포가 melanopsin-IR 신경세포와 모두 co-localization되나(화살표머리) Fig. 4L은 모두 co-localization되지 않았다(화살표).Fig. 4M, P는 CY2 염색된 melanopsin-IR 신경세포들을 보여주며 Fig. 4N, Q는 CY3 염색된 NOS-IR 신경세포를 보여준다.Fig. 4O는 Fig. 4의 M과 N의 사진을 겹쳐서 NOS-IR 신경세포와 melanopsin-IR 신경세포의 co-localization을 확인한 사진으로 관찰된 NOS-IR 신경세포는 1 개이며 이 세포가 melanopsin-IR 신경세포와 co-localization되었다(화살표머리). Fig. 4R은 Fig. 4의 P와 Q 사진을 겹쳐서 NOS-IR 신경세포와 melanopsin-IR 신경세포의 co-localization을 확인한 사진으로 관찰된 NOS-IR 신경세포는 1 개이며 이 세포는 melanopsin-IR신경세포와 co-localization되지 않았다(화살표).</p> <h1>고 찰</h1> <p>본 연구는 성체 mouse의 시각피질에 있는 melanopsin을가지는 신경세포의 존재를 밝히는 최초의 연구이다. 본 연구에서 관찰된 melanopsin-IR 신경세포가 시각피질의 일부 신경세포에 존재한다는 것을 이번 실험과 본 연구실의 선행 연구를 통해서 알 수 있다. 첫째, melanopsin과 CB, PV, NOS들의 double labeling에서 melanopsin이 CB, PV, NOS 와 double labeling되는 신경세포, melanopsin 만 발견되는 세포, CB,PV, NOS 만 발견되는 신경세포의 존재를 확인하였고, 이번실험에서 melanopsin-IR 신경세포와 비교를 위해 사용한CB-IR, PV-IR, NOS-IR 신경세포들에 대한 본 연구실의 선행연구에서 mouse 시각피질의 특정한 신경세포 아집단에서 발견 된다는 것을 밝힌 바 있다. 선행된 연구내용에 따르면 먼저, 대부분의 CB-IR 신경세포들은 시각피질의 Ⅱ/Ⅲ, Ⅴ층에 위치하며, 대부분의 CB-IR 신경세포들은 다극성 수상돌기를 가진 stellate 그리고 round/oval 형태의 세포이다. 두 번째로, PV-IR 신경세포들은 시각피질의 I층을 제외한 모든 층에 위치하고 Ⅴ 층에서 가장 높은 밀도로 분포하며, 대부분의 PV-IR 신경세포들은 다극성 수상돌기를 가진 stellate 그리고round/oval 세포이다. 마지막으로 NOS-IR 신경세포들은 시각피질의 Ⅵ 층에서 밀집되어 위치하며 일부는 Ⅱ/Ⅲ층에서 발현되기도 한다. 대부분의 NOS-IR 신경세포들은 모든 방향으로 뻗는 많은 수상돌기를 가진 round/oval 세포이다. 이 연구들을 통하여 이번 연구에 사용한 CB, PV, NOS 가mouse 시각피질의 신경세포 중 일부에만 존재하는 것을 확인하였다. 이러한 이번의 실험과 선행된 실험을 통해 melanopsin 이 일부 신경세포 내에서만 발현되는 것을 확인할 수 있었다. 둘째, mouse 시각피질의 모든 신경세포를 염색하는 thionin 염색과 melanopsin-IR 신경세포를 비교하면 thionin 염색에 비하여 melanopsin-IR 신경세포가 확실히 적은 것을 확인할 수 있었다. 이 두 가지 결과를 통해 melanopsin-IR 신경세포가 mouse 시각피질의 일부 신경세포에만 존재하는 것을 알 수 있다.</p>