올리브 잎은 퐁부한 폴리 페놀을 함유하고 있고, 이는 항산화, 항균, 항 바이러스, 항암 활성을 연과시키고 혈소판 활성화를 억제하는 것으로 보고되고 있다. 올리브 잎은 건강기능성식품 및 기능성 화장폼의 원료로 상업적으로 사용되고, 이런 건강상 이점은 올리브 잎의 주요 생리활성 물질인 oleuropein와 관련이 있다. 본 연구에서는 UPLC-QTof/MS, PDA, CAD로 개발된 방법을 이용하여 10개의 상업용 올리브 잎 추줄물의 성분 및 oleuropein 함량을 분석했다. Iridoids (1,3,4, 14, and 16-18), coumarin (2), phenylethanoids \( (5,9 \), and 11), flavonoids \( (6-8,10,12 \), and 13), Ignan (15)을 포함한 종 18 종의 화합물이 올리브 잎에서 예상되었다. 총 10종의 올리브잎 추출물 분석으로 3종의 제품 A,G, H에서 oleuropein 함량보다 높게, 5 종의 제품 \( (\mathrm{B}, \mathrm{E}, \mathrm{H}, \mathrm{I}, \mathrm{J} \) )에서 5-10\%의 오차범위로 나타났고 \( \mathrm{C}, \mathrm{D} \) 에서는 함량 미달이었다.
<h3>올리브 잎의 oleuropein 정량분석</h3> <p>올리브 잎의 지표성분인 oleuropein은 올리브의 열매, 오일 등에서도 분리 보고된 secoiridoids 계열의 생리활성을 가진 화합물로 oleuropein 함량이 표시된 올리브 잎 추출물이 건강기능식품으로서 시판되고 있다. 본 연구에서는 oleuropein 함량이 표시된 10 종의 올리브 잎 추출물 분말에서의 oleuropein의 정량분석 및 표시된 함량과의 비교를 위해 UV와 \( \mathrm{CAD} \) 검출기가 장착된 UPLC를 사용하여 분석하였다. 분석조건에서 최직의 분리기능을 확인하기 위해 이동상을 acetonitrile으로 선정하여 gradient elution 조건을 사용하였으며, 지표성분 oleuropein의 UV spectrum 최대 흡수퐈장 \( \left(\lambda_{\max }\right) 230,280 \mathrm{~nm} \) 로 UV조건을 확인하였고 검출기 감도와 비교 조건을 위해 \( \mathrm{CAD} \) 를 추가하여 검출기 비교를 통한 올리브 잎 추출물 분말 10 종의 함랑을 확인하였다. UV \( 230 \mathrm{~nm}, \mathrm{CAD} \) 의 2가지 검출기 크로마토그램에서 표준물질 oleuropein과 10 종의 올리브 일 추출물 분말 비교하였다. 그 결과 올리브 잎 추출물에서 oleuropein은 retention time 14.06분에서 추출물의 주요성분으로 확인되었고 oleuropein 피크의 대칭성과 테일링 현상이 없는 것을 확인하여 동일한 retention time에서 피크 간섭이 없는 최적의 용매 기울기 조건을 확립하였다(Fig. 2). 검량선은 \( 230 \mathrm{~nm} \) 에서 결정 계수 \( r^{2} \) \( 0.9949 \) 를 \( \mathrm{CAD} \) 에서 \( r^{2} 0.9901 \) 으로 판정기준 \( 0.99 \) 이상인 검량선이 계산되었다. 검출한계 \( (\mathrm{LOD}) \) 와 정량한계 \( (\mathrm{LOQ}) \) 는 13.24, \( 40.12 \mathrm{mg} / \mathrm{mL}(230 \mathrm{~nm}), 24.84,75.26 \mathrm{mg} / \mathrm{mL} \) (CAD)로 계산되어 분석에서 검출기 조건은 적절한 것으로 판단하였다(Table2). 2가지 검출기의 검량선을 이용하여 분석된 oleuropein의 함량과 제품에 표시된 함량 오차(\%)를 확인하였다(Table 3). CAD검출기에서 추출물 \( \mathrm{B}, \mathrm{E}, \mathrm{I} \) 는 \( 98.60,98.84,95.30 \% \) 로 \( 5 \% \) 이내의 오차가 보였으며, 추출물 \( \mathrm{J} \) 는 \( 93.29 \% \) 으로 \( 10 \% \) 이내의 오차가 나타났다. 또한 \( \mathrm{UV} 230 \mathrm{~nm} \) 에서 추출물 \( \mathrm{B}, \mathrm{E}, \mathrm{H}, \mathrm{I} \) 는 \( 101.50,98.28,98.30,98.60 \% \) 로 \( 5 \% \) 이내의 오차를 보였으며, 추출물 \( \mathrm{J} \) 는 \( 91.91 \% \) 로 \( 10 \% \) 이내의 오차가 나타났다. 2가지 검출기를 이용한 분석법에 대한 평균 오차는 추출물 \( \mathrm{B} \) 가 \( 100.05 \% \) 으로 가장 적은 오차를 나타내었고 추출물 \( \mathrm{E} \) 와 \( \mathrm{I} \) 는 그 다음으로 98.56와 \( 96.95 \% \) 로 \( 5 \% \) 이내의 적은 오차를 보였다. 추출물 \( \mathrm{H} \) 와 \( \mathrm{J} \) 는 \( 105.2 \) 과 \( 92.60 \% \) 로 \( 10 \% \) 이내의 오차를 보였고 나머지 추출물 5 종 \( (\mathrm{A}, \mathrm{C}, \mathrm{D}, \mathrm{F}, \mathrm{G}) \) 에 대해선 \( 10 \% \) 를 초과하는 오차가 나타남을 확인하였다. 종합적으로 각각의 검출기에 대한<p>함량의 평균에서 추출물 5 종(B, E, H, I, J)은 \( 10 \% \) 미만의 오차가 나타났으므로 품질이 규격화된 것을 최종 확인할 수 있었다(Table 3). 전반직으로 분석된 올리브 잎 추출물 분말 시료들은 검출기에 따라 함량의 차이가 있었지만 oleuropein의 함량을 분석하기 위한 최직 조건은 \( \mathrm{CAD} \) 와 \( \mathrm{PDA} \) 파장을 복합적으로 이용하는 것이 가장 직절한 것으로 판단하였다. 부가직으로 올리브 잎 주정 추출물은 혈압을 낮추는 건강기능성식품으로 등록 되어 있으며, 식약처에서 일일섭취량을 \( 500-1,000 \mathrm{mg} \) (oleuropein 90-180 mg)으로 권장하고 있다. 따라서 섭취 시 일일섭취량의 미달이거나 초과되는 부작용 방지를 위해서는 본 연구의 oleuropein 분석조건 및 함량분석이 폼질관리의 중요한 연구결과로 활용성이 높을 것으로 사료된다.</p> <p>결론적으로 상업용 올리브 잎 추출물에서 iridoids \( (1,3,4 \), 14, and 16-18), coumarin (2), phenylethanoids \( (5,9 \), and 11), flavonoids (6-8, 10, 12, and 13), lignan (15)을 포함한 총 18 종의 화합물을 예상할 수 있었고 지표물질인 oleuropein 이외의 항산화, 항염증, 항당뇨, 항균, 항미맥, 항비만 효과 등 의 다양현 셍리활성이 보고된 다양한 대사체 들이 포함됨을 확인하였다. 또한 상업직으로 이용 가능한 올리브 잎 추줄물 분말에서 oleuropein의 함량분석을 위한 표준분석법을 확립하였고 CAD와 PDA \( 230 \mathrm{~nm} \) 파장을 이용한 비교분석하는 것이 가장 직절한 함량 표시에 도움을 줄 수 있다고 관단하였다. 본 연구에서 총 10 종의 올리브 잎 추출물을 2가지 분석법으로 수행한 결과로서 제폼에 제시한 oleuropein 함량보다 높게 검출된 제폼은 3종 \( (\mathrm{A}, \mathrm{G}, \mathrm{H}) \) 이었으며, 5종 \( (\mathrm{B}, \mathrm{E}, \mathrm{H}, \mathrm{I}, \mathrm{J}) \) 은 92.60-\( 105.25 \% \) 로 오차범위 \( 5-10 \% \) 내외로 검출되었으나, 제폼 \( \mathrm{C}^{2} \) 는 \( 67.87 \% \) 로 \( \mathrm{D} \div 75.25 \% \) 수준으로 현격한 함량 미달로 나타났다. 따라서 제폼에 제시한 oleuropein 함량은 확립된 분석법을 통해 반드시 확인할 필욕ㄱ 있으며, 본 연구의 결과로서 oleuopein 상업적 활용 가능성이 높은 올리브 잎 추출물의 정확한 oleuropein 분석법 확립으로 건강기능성식폼 원료인 올리브 잎의 특성과 분석을 위한 기초자료로 이용될 수 있을 것으로 판단하였다.</p> <h2>초 록</h2> <p>올리브 (Olea europaea L.) 읶은 퐁부한 폴리 페놀을 함유하고 있으며, 이는 항산화, 항균, 항 바이러스, 항암 활성을 연과시키고 혈소반 활성화를 억제하는 것으로 보기 되어있다. 올리브 잎은 건강기능성식품 및 기능성 화장폼의 원료로 상업적으로 사용되고 있으며, 이러한 건강상의 이점은 올리브 잎의 주요 생리활성 물질인 oleuropein와 관련이 있다. Oleuropein은 항산화, 항소화, 항염증, 항암, 항미셍물, 항바이러스, 항줏상동맥혈증, 지질 저하 효과, 혈당 저하 효과, 피누 보호 호과가 보고되어 있다. oleuropein이 올리브 잎의 증요한 화합몰 임에도 불구하고 상업용 제품에서 oleuropein 함량을 밦히는 정량적 접근 방법은 아직 없다. 본 연구에서는 UPLC-QTof/MS, PDA, CAD로 개발된 방법을 이용하여 10 개의 상업용 올리브 잎 추줄물의 성분 및 oleuropein 함량을 분석 하였다. Iridoids (1,3,4, 14, and 16-18), coumarin (2), phenylethanoids \( (5,9 \), and 11), flavonoids \( (6-8,10,12 \), and 13), ignan (15)을 포함한 종 18 종의 화합물이 올리브 잎에서 예상되었다. 총 10 종의 올리브 잎 추출물 분석은 3 종의 제폼 \( (\mathrm{A}, \mathrm{G}, \mathrm{H}) \) 에서 제폼에서 제시한 oleuropein 함량보다 높게, 5 종의 제품 \( (\mathrm{B}, \mathrm{E}, \mathrm{H}, \mathrm{I}, \mathrm{J} \) )에서 5-10\%의 오차범위로 나타났고 \( \mathrm{C}, \mathrm{D} \) 에서 함량 미달로 검출되었다. 본 연구에서 oleuropein의 함량분석이 올리브 잎의 품질 관리에 도움이 될 수 있음을 판단하였다.</p>