Protease 생산 균주들의 \( 16 \mathrm { S } ~ \mathrm { rDNA } \) 유전자 정보의 염기서열을 확인한 후, NCBI blast를 통하여 동정해본 결과를 확인하였다. 또한 각 미생물들의 최적생장 온도를 확인하기 위하여 다양한 온도에서 4일간 생장을 비교하였더니 대부분 \( 20 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 가장 잘 성장하였다. 극지의 극한 환경, 특히 저온의 환경에서 적응, 진화해온 극지 미생물들의 고유한 특징인 내냉성이 있기 때문인 것을 알 수 있었다.
<p>Protease의 unit은 extinction coefficient \( = 8,800 \)으로 하여 다음 식에 의하여 계산하였다.</p> <p>unit \( ( \mu \mathrm { mole } / \mathrm { min } ) / \mathrm { L } = \) \[ \frac {\left ( \text { net } \mathrm { OD } _ { 410 } \right ) \times( \text { 반응액 부피, } \mathrm { L } ) \times 10 ^ { 6 } } {\varepsilon \times( \text { 반응시간, } \mathrm { min } ) \times( \text { 반응에 사용된 배양액, } \mathrm { L } ) } \]</p> <p>배양 및 활성 실험은 3차례 반복하여 평균값으로 표시하였다.</p> <h1>미생물 동정 결과</h1> <p>Protease 생산 균주들의 \( 16 \mathrm { S } ~ \mathrm { rDNA } \) 유전자 정보의 염기서열을 확인한 후, NCBI blast를 통하여 동정해본 결과 PAMC 25641은 Janthinobacterium sp. HC1-2 (GenBank: JF312914.1) 등과 \( 97 \% \) 유사성을 보였다. PAMC 25614은 Pseudomonas sp. B-AS-24 (GenBank: JF901704.1) 등과 \( 99 \% \)의 유사성을 보였다. 또한, PAMC 25719는 Janthinobacterium sp. RHLS19 (GenBank: JX949460.1)와 PAMC 25617은 Rahnella sp. Pv5 (GenBank: JQ522978.1)와 각각 \( 98 \% \)의 유사성을 보였다. 정확히 어떤 특정 종과의 연관성은 명확하지 않았다(Table 1).</p> <h1>성장률 확인</h1> <p>본 연구에서는 각 미생물들의 최적생장 온도를 확인하기 위하여 다양한 온도 \( \left (5 ^ {\circ } \mathrm { C } , 10 ^ {\circ } \mathrm { C } , 15 ^ {\circ } \mathrm { C } , 20 ^ {\circ } \mathrm { C } \right ) \)에서 4일간 생장을 비교하였다. 다른 균주들과 다르게 PAMC 25617은 다른 온도 조건에서는 평이한 성장을 보였으나, \( 20 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 급격한 성장률 증가 및 maximum growth도 크게 높아진 것을 확인 할 수 있었다(Fig. 1).</p> <p>위의 미생물들은 모두 \( 5-20 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 성장이 가능하였으며, 대부분 \( 20 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 가장 잘 성장하였다. 이러한 결과를 볼 때 본 연구에서 사용된 미생물들은 모두 내냉성(psychrotolerant)의 특성을 지니고 있는 것을 알 수 있다. 이것은 대부분의 극지 미생물들이 지닌 특성으로 극지의 극한 환경, 특히 저온의 환경에서 적응, 진화해온 극지 미생물들의 고유한 특징이다. 이전에 발표된 논문들에서도 극지 미생물들에 대한 growth temperature에 대하여 연구가 많이 보고되었다.</p>