Hac1p와 비교하여 ATFC는 연역 아미노산 상동성이 매우 낮았고, bZIP 도메인의 위치가 다른 차이점을 나타냈다. ATFC에는 leucine zipper 모티프와 UPRE 결합 가능한 염기성 아미노산이 존재하였다. ATFC 유전자는 효모의 Hac1p와 유사하게 분자 샤페론 및 folding enzyme의 전사를 조절하는 역할을 할 것으로 추정되며, 사용된 스트레스 유도제로는 tunicamycin, DTT, A23187, antimycin A, monencin, H2O2가 사용되었다. 따라서 ATFC는 단백질의 정확한 접힘과 조립을 조절하여 정상 구조를 회복하는 기능을 수행할 것으로 추정된다.
<h2>ATFC 유전자의 연역 아미노산 구조분석</h2> <p>ATFC의 연역 아미노산 서열 중에서 분자 샤페론이나 folding enzyme의 프로모터 상류에 존재하는 cisacting element인 UPRE (Unfolded Protein Response Element)와 결합할 것으로 추정되는 bZIP (basicleucine zipper) 도메인 영역을 기존에 밝혀진 효모 Hac1p의 bZIP 도메인 영역에 대하여 CLUSTAL W program을 통하여 상동성 및 1차 아미노산 구조 분석을 실시하였다. 그 결과, Hac1p와의 연역 아미노산 상동성이 \( 19 \% \) 로 매우 낮았으며, 또한 Hac1p의 bZIP 도메인이 아미노 말단(Nterminal) 쪽에 존재하는데 반하여 ATFC의 bZIP 도메인은 카르복실 말단(C-terminal)에 존재하는 차이점을 나타내었다. 그러나 ATFC는 효모의 Hac1p와 구조적으로 매우 유사하게 \( \alpha \)-helix 상의 7개 아미노산 잔기마다 leucine이 7 회 반복하여 출현하는 leucine zipper 모티프가 존재하고 있었으며, leucine zipper 바로 앞쪽에는 분자 샤페론이나 folding enzyme의 프로모터 부위에 존재하는 UPRE 에 결합할 것으로 추정되는 염기성 아미노산이 풍부한 basic region이 존재하고 있었다. 따라서 ATFC 유전자는 효모의 Hac1p와 유사하게 분자 샤페론 및 folding enzyme의 프로모터 부위에 존재하는 특정 염기서열(UPRE)에 결합하여 분자 샤페론 및 folding enzyme의 전사를 촉진시키는 전사제어인자(transcription factor, transacting factor)의 기능을 할 것으로 추정할 수 있었다.</p> <h2>ATFC 유전자의 발현특성 분석</h2> <p>기존에 밝혀진 효모의 Hac1p와 유사한 기능을 수행 할 것으로 추정되는 ATFC 유전자에 대하여 분자샤페론 및 folding enzyme의 전사 촉진 기능을 해석하기 위하여, 누에 배양세포주 \( (\mathrm{Bm} 5) \)에 각종 스트레스 유도제를 처리하여 세포내 비정상 구조를 가지는 단백질을 유도하였다. 사용된 스트레스 유도제로는 단백질의 N-glycosylation 형성 저해제인 tunicamycin, 단백질의 disulfide bond 형성 저해 제인 DTT (dithiothreitol), 칼슘이온의 항상성 저해제인 \( \mathrm{Ca}^{2+} \) ionophore A23187, ATP 저해제인 antimycin A, 소포체에서 골지체로의 단백질 이동 저해제인 monencin 및 산화 스트레스제인 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 를 사용하였다. Tunicamycin, DTT, \( \mathrm{Ca}^{2+} \) ionophore A23187, antimycin A, monencin 및 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}_{2} \) 는 각각 \( 5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{m \ell}, 3 \mathrm{mM}, 10 \mu \mathrm{M}, 8 \mu \mathrm{M}, 100 \mu \mathrm{M} \) 및 \( 100 \mu \mathrm{M} \) 의 농도로 누에 배양세포주 \( (\mathrm{Bm} 5) \) 에 처리하여 5시간 배양 후, 이로부터 total RNA를 분리하여 Northern blot 분석에 의해서 ATFC 유전자의 발현양상을 전사 수준에서 분석하였다. 그 결과, 정상 세포주에서는 발현이 되지않았으나 스트레스 유도제가 처리된 세포주에서는 전사체가 강하게 발현됨을 확인 할 수 있었다. 따라서 ATFC 유전자는 소포체 내의 정확하게 접혀지지 않았거나 조립되지 못한 단백질을 정확하게 접혀지게 하고 조립되게 하여 정상구조를 가지는 단백질로 재생하는 분자샤페론이나 folding enzyme의 전사를 촉진시키는 효모 Hac1p와 매우 유사한 기능을 수행할 것으로 추정할 수 있었다. 그러나 ATFC 유전자가 과연 Hac1p와 동일하게 분자샤페론 및 folding enzyme의 cis-acting element인 UPRE에 직접 결합하여 전사를 촉진시키는지 또는 Ire1p에 의해서 직접적으로 조절되는지에 관한 연구가 보완되어야 할 것으로 사료된다.</p>