본 연구에서는 배양온도 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 완충용액으로 조정한 배지의 \( \mathrm{pH} \) 가 균주의 성장에 미치는 영향을 평가하였다. 특히, \( \mathrm{pH} \mathrm{3,4} \) 및 5에서는 성장하지 못하는 것으로 나타났다. 추가적으로, \( \mathrm{NaCl} \) 농도에 따른 두 균주의 내염성도 비교하였다. 마지막으로, 김치에서 분리한 B. subtilis 균주의 단백질 분해 효소활성 및 성장특성에 대해 살펴보았다.
<h2>균주의 생육특성</h2> <p>배지 \( \mathrm{pH} \) 7.3에서 배양온도를 달리하여 대조구 및 \( \mathrm{KCCM} 43059 \) 균주의 비성장속도를 측정한 결과, KCCM43059 균주의 비성장속도는 \( 2.00 \pm 0.02(1 / \mathrm{h}) \) 로 대조구인 KCTC 13112 균주(1.74 \( \pm 0.04(1 / \mathrm{h})) \) 보다 높은 비성장속도를 나타내었다 (Fig. 3A). 배양온도 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 부터 KCCM43059 균주의 비성장 속도가 감소하였으며 \( 55^{\circ} \mathrm{C} \) 에서의 비성장속도는 \( 1.42 \pm 0.10 \) \( (1 / \mathrm{h}) \) 로 대조구인 KCTC13112 균주 \( (1.63 \pm 0.03(1 / \mathrm{h})) \) 보다 낮은 비성장속도를 나타내었다.</p> <p>배양온도 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 완충용액으로 배지의 \( \mathrm{pH} \) 를 조정하여 균주의 비성장속도를 측정한 결과 \( \mathrm{pH} \mathrm{3,4} \) 및 5 조건에서 두 균주 모두 성장하지 못하였다(Fig. 3B). KCCM43059 균주는 \( \mathrm{pH} 8 \) 에서 \( 1.76 \pm 0.06(1 / \mathrm{h}) \) 로 대조구 균주에 비하여 높은 비성장속도를 나타내었다. 결과적으로 KCCM43059 균주는 배양온도 \( 37^{\circ} \mathrm{C}, \mathrm{pH} \) 8에서 가장 높은 비성장속도를 나타내었다.</p> <p>\( \mathrm{NaCl} \) 농도에 따른 대조구와 KCCM43059 균주의 균체성장을 비교하여 내염성을 평가하였다(Fig. 4). KCCM43059 균주는 \( 1 \% \) 의 \( \mathrm{NaCl} \) 이 함유된 \( \mathrm{TSA} \) 평판배지에서 가장 우수한 성장을 나타내었으며, \( 2 \% \) 의 \( \mathrm{NaCl} \) 이 함유된 \( \mathrm{TSA} \) 평판배지에서도 성장이 확인되었다. 그러나 대조구 균주는 \( \mathrm{NaCl} \) 의 첨가에 의하여 성장이 현저히 감소하였으며, \( 3 \% \) 의 \( \mathrm{NaCl} \) 이 함유된 배지에서는 두 균주 모두 성장이 어려운 것으로 나타났다. 결과적으로 KCCM43059 균주가 대조구 균주에 비하여 상대적으로 내염성이 우수한 것으로 판단하였다.</p> <p>메주에서 분리된 B. licheniformis \( \mathrm{NH} 20 \) 균주는 \( \mathrm{NaCl} \) 농도 0-5\%에서 생육이 가능하였으며, 최적 농도는 \( 2-3 \% \) 이었다. 본 연구에서 분리한 KCCM43059 균주의 성장을 위한 최적 \( \mathrm{NaCl} \) 농도가 \( 1-2 \% \) 인 것을 고려하면 유사한 결과라고 판단되었다. 장류, 젓갈 등 고염도의 발효식품에서 분리된 고초균은 \( 10 \% \) 의 \( \mathrm{NaCl} \) 농도에서도 성장하는 특성을 나타 내었는데 [19, 40], 이는 분리원의 특성이 균주의 내염성에 영향을 미치는 것으로 추정되었다.</p> <p>본 연구에서는 김치 유래의 B. subtilis 균주의 단백질 분해 효소활성 및 균주의 성장특성을 구명하였다. 최근에도 고초균의 생육특성 및 단백질 분해 효소활성 특성에 관한 연구가 지속적으로 보고되고 있으며[1,41, 42], 추가연구를 통하여 산업적으로 활용이 가능한 균주로서 개발이 기대된다.</p>