본 실험은 센트리퓨즈 튜브에 시료액, 트리클로로아세트산, 그리고 수용성 TBA를 넣어 가열하고, 냉각한 뒤 트리클로로아세트산을 추가하였다. 이런 과정 후에 원심분리를 통해 상징액의 흡광도를 측정하였다. 또한, 천연물에서 생리활성물질을 추출하는 과정에서는 사용량, 추출용매의 종류, 추출 온도와 시간 등이 중요하다는 것이 확인되었다. 특히 홍삼과 홍국 발효 홍삼의 수용성 추출물과 에탄올 추출물, 메탄 추출물의 수율을 비교하였을 때, 수용성 추출이 가장 효율적이었다.
<h2>TBA (2-thiobarbituric acid)에 의한 항산화 활성 측정</h2> <p>시료용액 \( 1.0 \mathrm { ml } \), linoleic acid ( \( 25 \mathrm { mg } / \mathrm { ml } \), EtOH 용해) \( 1.0 \) \( \mathrm { ml } \)을 시험관에 넣고 혼합한 후 \( 0.2 \mathrm { M } \) phosphate buffer \( ( \mathrm { pH } \) 7.0) \( 2 \mathrm { ml } \)와 증류수 \( 1.0 \mathrm { ml } \)를 가하여 \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 반응시키면서 일정간격으로 측정하였다. 즉 시료액 \( 0.5 \mathrm { ml } \)를 centrifuge tube에 넣고 35 \% trichloroacetic acid \( 0.25 \mathrm { ml } \)와 \( 0.75 \% \)aqueous TBA \( 0.5 \mathrm { ml } \)를 가하여 혼합한 후, 열탕수조에서 가끔 진탕하면서 15분간 처리하여 흐르는 물에 냉각시킨 후, \( 70 \% \)trichloroacetic acid \( 0.5 \mathrm { ml } \)를 가한 다음 20분 후, \( 3,000 \mathrm { rpm } \)에서 15분간 원심분리하고, 그 상징액을 \( 532 \mathrm { ~nm } \)에서 흡광도를 측정 하였다.</p> <h2>통계처리</h2> <p>실험으로부터 얻어진 결과치는 one-way ANOVA 검정에 의한 평균치와 표준오차(mean \( \pm \mathrm { SE } ) \)로 표시하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>홍삼 및 흥국발효홍삼 분말의 추출 수율 및 가용성 고형분</h2> <p>천연물로부터 생리활성물질과 같은 유효성분을 가장 효율적으로 추출하기 위하여 사용량, 추출 용매의 종류, 추출 온도와 시간 등이 검토되고 있다. 천연물 중에는 catechins, pectin, caffein, flavonoids 등의 식물성 polyphenolic 화합물들은 수용성 또는 지용성으로 구분되어 있어 추출되는 용매에 따라 그 성분들이 달라지기 때문에 추출 수율에 있어서도 많은 차이를 보이고 있다.</p> <p>본 실험에서 홍삼 및 홍국발효훙삼의 수용성 추출물의 수율은 각각 \( 5.83 \% \)및 \( 6.58 \% \)였으며, \( 70 \% \)에탄올 추출물 수율은 각각 \( 0.98 \% \)및 \( 0.62 \% \)였고, \( 70 \% \)메탄을 추출 수율은 각각 \( 3.04 \% \)및 \( 1.27 \% \)로 용매 중에서는 수용성 추출에서 수율이 가장 높았다. Lee 등도 인삼의 추출 용매에 따른 추출수율은 물 추출물이 가장 많고 에탄올은 농도가 높을수록 수율은 낮아지는 경향을 나타내는데, 이는 에탄올의 농도가 높을수록 성분의 추출량이 적어지며 주로 다당류의 추출량이 적어지므로 수율이 감소한다고 하였다. 홍삼 및 홍국발효홍삼의 가용성 고형분은 각각 \( 0.6 \)및 \( 0.5 \)Brix로 홍삼에서 약간 높았다.</p>