동결 건조한 브로콜리 싹을 실험재료로 각 시험 항목에 대한 시료의 분석은 3회 반복 실시하였다. 일반 성분은 Association of Official Analytical Chemists (A.O.A.C.) 방법에 준하여 실시하였고, 구성당 분석은 Gancedo 방법[6]을 준하였으며 아미노산과 지방산은 건조 시료를 사용하여 분석하였다.
<h1>재료 및 방법</h1><h2>실험 재료</h2><p>브로콜리 싹(Brassica oleracea var. italica Plenck)은 2006년 12월 까치마을 영농조합법인으로부터 브로콜리 종자를 7일간 발아시킨 것으로 길이가 약 \( 30 \mathrm{~mm} \) 내외 정도인 것을 구입하여 가피가 제거되지 않은 것은 가피를 제거시킨 후, 흐르는 물에 3회 수세한 다음 동결 건조한 것을 분쇄하여 실험재료로 사용하였으며, 각 시험 항목에 대한 시료의 분석은 3회 반복 실시하였다.</p><h2>일반 성분</h2><p>일반 성분은 Association of Official Analytical Chemists (A.O.A.C.)방법에 준하여 실시하였는데, 수분은 \( 105^{\circ} \mathrm{C} \) 상압가열건조법, 조단백질은 micro-kjeldahl법, 조지방은 soxhlet 추출법 및 조회분은 회화법으로 분석하였고, 탄수화물은 100에서 수분, 조단백질, 조지방 및 조회분량을 제외한 값으로 나타내었다.</p><h2>구성당 분석</h2><p>구성당 분석은 Gancedo 방법[6]에 준하여 실시하였다. 시료 \( 1 \mathrm{~g} \) 에 \( 80 \% \) ethanol \( 50 \mathrm{ml} \) 를 가하여 heating mentle에서 \( 75^{\circ} \mathrm{C} \) 로 5시간 가열한 다음 Whatman filter paper (No.2)로 여과하여 여액을 rotary vacuum evaporator에서 감압, 농축 후\( 10 \mathrm{ml} \) 로 정용하여 Ion Chromatography (DX-600, Dionex, USA ) 로 분석하였으며, 분석조건은 Carbo \( \mathrm{Pac}^{\mathrm{TM}}-\mathrm{PA} 10 \) ana-lytical \( (4 \times 250 \mathrm{~mm}) \) 과 용출용매 Ca-EDTA \( (500 \mathrm{mg} / \mathrm{l}) \) 를 조합하였다. 전처리된 시료 \( 1 \mathrm{ml} \) 를 취하여 \( 0.45 \mu \mathrm{m} \) membrane filter로 여과한 후 column에 \( 20 \mu \) 씩 주입하였다. 이때의 column 온도는 \( 90^{\circ} \mathrm{C} \) 를 유지하였다. 용출 용매는 \( 0.5 \mathrm{ml} / \mathrm{min} \) 로 흘려보냈으며, 검출은 reactive index detector를 이용하였다.</p><h2>아미노산 분석</h2><p>브로콜리 싹의 구성아미노산의 분석은 분해관에 건조된 시료 \( 0.5 \mathrm{~g} \) 과 \( 6 \mathrm{~N}\) \( \mathrm{HCl}\) \( 3 \mathrm{ml} \) 를 취하여 탈기하고 \( 121^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 24시간 가수분해한 다음 여액을 rotary vacuum evaporator 로 감압 농축하여 sodium phosphate buffer (\(\mathrm{pH}\ 7.0\)) \( 10 \mathrm{ml} \) 로 정용하였다. 용액 \( 1 \mathrm{ml} \) 를 취하고 membrane filter \( (0.2 \) \( \mu \mathrm{M}) \) 로 여과한 다음 아미노산자동분석기(Biochrom 20, Pharmacia, England)로 분석하였으며, column은 Ultrapace Ⅱ cation exchange resin column (11£2 \( \mu \mathrm{m}, 220 \mathrm{~mm}) \) 을 사용하였고, \( 0.2 \mathrm{~N} \mathrm{Na} \)-citrate buffer 용액( \( \mathrm {pH} \3.20\), \( 4.25 \) 및 \(10.00\))의 flow rate는 \( 40 \mathrm{ml} / \mathrm{hr} \), ninhydrin 용액의 flow rate는 \(25 \mathrm{ml} / \mathrm{hr} \), column 온도는 \( 46^{\circ} \mathrm{C} \), 반응 온도는 \( 88^{\circ} \mathrm{C} \) 로 하였고, 분석시간은 \( 44 \mathrm{~min} \) 으로 하였다.</p><h2>지방산 분석</h2><p>지방산 분석은 A.O.A.C. 방법에 따라 건조 시료 \( 5 \mathrm{~g} \) 을 warming blender에 넣고 chloroform \( 10 \mathrm{ml} \) 와 methanol \(20 \mathrm{ml} \) 를 가하고 2분간 균질화한 다음 chloroform \( 10 \mathrm{ml} \) 를 더 가한 후 30초간 균질화 하였다. 여과 후 30분간 방치한 후 상층을 제거하고 무수 \( \mathrm{Na}_{2} \mathrm{SO}_{4} \) 를 가하여 탈수한 다음 rotary vacuum evaporator로 감압, 농축하였다. 지방 \( 100 \mathrm{mg} \) 을 toluene \( 5 \mathrm{ml} \) 에 용해하고 Wungaarden의 방법에 따라 \( \mathrm{BF}_{3} \)-methanol로 메칠화하여 Gas Chromatography (GC-10A, Shimadzu, Japan)로 분석하였으며, 기기 분석조건은 column은 \( \mathrm{SP}^{\mathrm{TM}}-2560 \) capillary column \( (100 \mathrm{~mm} \) length \( \times 0.25 \mathrm{~mm} \) i.d. \( \times 0.25 \mu \mathrm{m} \) film thickness)을 사용하였고, column 온도는 \( 170^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 5분간 유지한 후 \( 250^{\circ} \mathrm{C} \) 까지 \( 4^{\circ} \mathrm{C} / \mathrm{min} \) 로 승온하였다. Injection 및 detector 온도는 \( 270^{\circ} \mathrm{C} \) 로 하였고, \( \mathrm{N}_{2} \) flow rate는 \( 0.6 \mathrm{ml} / \mathrm{min} \) \((split ratio=80:1)\)으로 하여 분석하였다.</p>