HAase는 염증발현과 관련이 있는 효소로 산성다당에서 N-acetyl-glucosamic 결합을 끊는 걸 촉진하는데 이 분해 물질은 생물학적 시스템을 조절하는데 매우 중요한 역할을 한다. 본 실험에서는 HA를 분해하는 HAase를 섬쑥부쟁이 분획물이 저해 할 수 있는지 알아보기위해 다양한 농도에서 효소 저해 효과를 측정했다. 그 결과 섬쑥부쟁이 분획물이 고분자hyaluronic acid의 염증반응 조절에 조금 낮은 역할을 했음이 보여졌다. 또한 본 실험에서는 linolenic acid를 기질로 해 soybean lipoxygenase에 의한 과산화 반응을 조사했다. 모든 용매추출물에서 흡광도 수치가 감소했고 에틸아세테이트 분획물은 저농도에서 비교적 높은 저해활성을 보였다.
<h2>Hyaluronidase 저해활성 확인</h2> <p>Hyaluronidase(HAase)는 mocopoly saccharide splitting enzyme의 하나로서 모세혈관 투과성에 관여하고, 간염, 치주염 등의 염증 부위에서 활성이 증가하고 급성 부종을 일으키며, chemical mediator의 유리에도 관여하는 등 염증발현과 관련이 있는 효소로 dermis(connective tissue)의 기본 물질인 HA와 같은 산성다당류(acidic mucopolysaccharides) 에서 N-acetyl-glucosamic 결합을 끊는 것을 촉진하며, 이들의 분해 물질은 생물학적 시스템을 조절하는데 매우 중요하다. 섬쑥부쟁이 분획물이 HA를 분해하는 HAase를 저해 할 수 있는지 알아보고자 다양한 농도에서 효소 저해 효과를 측정하여 Fig. 4 와 같이 나타내었다. 섬쑥부쟁이 헥산 분획물은 \( 10 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 에서 \( 17.91 \% \), 에틸아세테이트 분획물은 10 \( \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 에서 \( 24.37 \% \), 부탄올 분획물은 \( 10 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 에서 \( 15.74 \% \), 물 분획물은 \( 10 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 에서 \( 8.75 \% \) 의 저해 효과가 나타났고, 대조군인 ( + )-Catechin의 경우, \( 10 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 에서 \( 31.61 \% \) 의 저해능을 나타네어, 섬쑥부쟁이 분획물이 고분자 hyaluronic acid의 염증반응 조절에 다소 낮은 역할을 한 것으로 나타났다.</p> <h2>Lipoxygenase 저해활성 확인</h2> <p>Lipoxygenase(linoleate: oxygen oxidoreductase : EC1.13.11.12)는 일중항 산소(singlet oxygen) 존재 하에서 cis, cis-1,4 pentadiene \( \left (- \mathrm { CH } = \mathrm { CH } - \mathrm { CH } _ { 2 } - \mathrm { CH } = \mathrm { CH } - \right ) \) 구조를 가지고 있는 불포화지방산에만 작용-하는 기질 특이성을 갖는 산화 효소이다. Lipoxygenase의 작용으로 arachidonic acid는 6-hydroperoxyeicosatetra enoic acid를 거처 5-hydroperoxy-eicosatetraenoic acid와 여러 가지 형태의 leukotriene을 생성 한다. 특히, 5-hydroperoxyeicosa tetraenoic acid는 neutrophil chemotaxis를 작용하여 여러 가지 형태의 염증 반응이 일어나는 동안 조직에서 증가되고 있는 것으로 보아 이들 화합물은 leukocyte를 새로 생기게 하는 효소의 release를 증진시키거나 항원의 침입을 알리는 mediator를 증진시키는 작용을 하는 것으로 추측된다. 본 실험에서는 linolenic acid를 기질로 하여 soybean lipoxygenase에 의한 과산화 반응을 조사한 결과를 Fig. 5 에 나타내었다. 모든 용매추출물에서 농도 유의적으로 흡광도 수치가 감소함을 알 수 있었고, 에틸아세테이트 분획물의 경우에는 \( 5 \mu \mathrm { g } / \mathrm { mL } \) 의 농도에서 \( 29.5 \% \) 로 비교적 높은 저해활성을 보였다. 이는, 대조군인 ( + )-catechin의 \( 18.97 \% \) 보다 우수하였으며, 에틸아세테이트 분획물은 대체로 저농도에서 우수한 활성을 보였다.</p>