수입 옥수수를 원산지별로 분류하여 무처리 알곡과 steam flake처리한 것으로 나누어 공시하였고 공시축은 농후사료와 볏짚의 급여비율을 40:60으로 체중의 \( 3 \% \) 수준으로 1 일 2 회 급여하여 관리했다.회수한 nylonbag은 맑은 물이 나올 때까지 세척한 후, \( 60^{\circ} \mathrm{C} \) drying oven 에서 48 시간동안 건조하여 건물소화율 \( (\%)=\frac{\text { 발효전건물무게 }-\text { 발효후건물무게 }}{\text { 발효전건물무게 }} \times 100 \)에 따라 계산했다. 이 결과를 SAS에서 General Linear Model (GLM) procedure에 따라 처리하였으며 \( 5 \% \) 수준에서 유의성을 검정했다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>공시 재료</h2> <p>수입 옥수수를 원산지별(미국산, 인도산)로 분류하여 무처리 알곡과 steam flake처리한 것으로 나누어 공시하였다. 공시재료는 \( 2 \mathrm{~mm} \) screen이 부착된 Wiley mill에서 분쇄한 다음, 미세한 전분입자를 제거한 후, 입자가 \( 600 \mu \mathrm{m} \) (입자도 표현지수 MF=2.5) \) 이하가 되도록 처리하여 사용하였다. 옥수수의 flake처리는 steam controller 내의 온도가 \( 70 \sim 80^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 50 분간 증기처리한 후, \( 5 \mathrm{~kg} / \mathrm{cm}^{2} \) 의 압력으로 박편하여 압편두께가 \( 3 \mathrm{~mm} \) 정도 되게 하였다. 공시 옥수수의 화학적 조성은 Table 1과 같다.</p> <h2>공시축</h2> <p>In situ nylon bag 실험을 위한 공시축은 평균체중이 550 \( \mathrm{kg} \) 되는 반추위 누관이 장착된 Holstein (평균체중 \( 550 \mathrm{~kg} \) ) 수소 2 두를 공시하였다. 공시축의 사양관리는 농후사료와 볏짚의 급여비율을 40:60으로 하여 체중의 \( 3 \% \) 수준으로 1 일 2 회(07:00, 19:00) 분할 급여 하였다. Mineral-vitamin block을 자유롭게 섭취토록 하였으며 물은 자유롭게 음용하도록 하였다. 급여된 사료의 조성과 화학성분은 Table 2에서와 같다.</p> <h2>시험 설계</h2> <p>옥수수 원산지 2곳(미국산, 인도산)과 steam flake 처리여부에 따라 총 4처리를 두었으며, in situ시험은 반추위내 발효시간 \( (3,6,9,12,18 \) 및 24 시간)별 4 반복으로 총 96 개의 ny-lon bag을 이용하여 수행하였고, 오염도 측정시험은 보관기간별 \( (0,2,3,4,5,6,7,8 \) 주) 4 반복으로 mycotoxin 함량을 측정하였다.</p> <h2>시험 방법 및 성분 분석</h2> <p>In situ 시험은 약 \( 3 \mathrm{~g} \) 의 시료를 칭량하여 nylon bag (Swiss screen P/L Co. Ltd, Nytal 25T, pore size; \( 45 \mu \mathrm{m} \) )에 넣은 후, 고무줄을 이용하여 nylon bag 윗부분에서 \( 3 \mathrm{~cm} \) 지점을 묶은 후, Linnen 망(15×25 cm 크기)에 넣어 온수에 약 10 분 동안 침지한 다음, 반추위 내 ventral sac 부분에 현수, 발효시켰다. 발효 시간별로 회수한 nylon bag은 즉시, 얼음 물에 침지시켜 미생물의 성장을 억제시켰다. 회수한 nylonbag은 맑은 물이 나올 때까지 세척한 후, \( 60^{\circ} \mathrm{C} \) drying oven 에서 48 시간동안 건조한 후 무게를 측정하여 다음과 같이 건물소실율을 계산하였다.</p> <p>건물소화율 \( (\%)=\frac{\text { 발효전건물무게 }-\text { 발효후건물무게 }}{\text { 발효전건물무게 }} \times 100 \)</p> <p>반추위 내 건물 분해율은 Nylon bag 실험을 통하여 얻어진 발효시간대별 건물 소실율을 바탕으로 다음의 Ørskov와 McDonald 공식으로 건물 분해율을 산출하였다.</p>\( \mathrm{P}=\mathrm{a}+\mathrm{b}\left(1-\mathrm{e}^{-\mathrm{ct}}\right) \)</p> <p>P: 시간 "t" 경과 시의 반추위내 건물 분해율(%)</p> <p>a: "0"시간대의 건물 분해율(%), 즉 빠르게 분해되는 건물부분</p> <p>b: 주어진 시간에 분해될 수 있는 잠재적 건물 분해율(%)</p> <p>c: "b"의 시간당 분해상수</p> <p>t: 반추위 내 발효시간</p> <p>반추위 내 유효분해도는 건물의 반추위내 유효분해도 (effective ruminal degradability, ED) 는 사료의 반추위 내 통과속도를 시간당 \( 6 \% \quad(\mathrm{r}=0.06) \) 로 가정하여, 다음과 같은 공식으로 추정하였다.</p>\( \mathrm{ED}=\mathrm{a}+\mathrm{b} \times\{\mathrm{c} /(\mathrm{c}+\mathrm{r})\} \)<p>ED: 건물의 유효분해도</p> <p>\( \mathrm{a}, \mathrm{b} \), c: 건물 분해율 상수</p> <p>r: 사료의 반추위 내 통과속도(passage rate)로서 시간당 \( 6 \% \) 로 가정</p> <p>Mycotoxin함량 측정은 공장의 표준환경(standard tem-perature and pressure, STP ; \( 25^{\circ} \mathrm{C} / 1 \) 기압) 하에서 저장기간별 곰팡이 독소함량의 변화를 조사하기 위하여 incubator에 보관하면서 1 주일 간격으로 8 주간 3 반복으로 aflatoxin과 ochratoxin의 함량을 측정하였다.</p> <p>Aflatoxin 함량은 Vicam사 Series-4 fluorometer에 aflatox-in calibration standard를 이용하여 standard를 잡은 후, 공정라인별로 채취한 시료 \( 50 \mathrm{~g} \) 과 \( \mathrm{NaCl} 5 \mathrm{~g} \) 을 합한 후 meth-anol \( 80 \mathrm{ml} \) 와 distilled water \( 20 \mathrm{ml} \) 을 1 분간 교반시켜 Vicam fluted filter paper \( (24 \mathrm{~cm}) \) 로 1차 여과시킨 후 증류수 \( 40 \mathrm{ml} \)를 혼합한 후 2차 여과시켜 glass syringe \( (10 \mathrm{ml}) \) 에 \( 10 \mathrm{ml} \) 를 취한다. Aflatest wash buffer \( 10 \mathrm{ml} \) 을 통과시킨 후, distilled water \( 10 \mathrm{ml} \) 를 2회 통과시키고, cuvette에 methanol \( 1 \mathrm{ml} \) 를 aflatest에 통과시켜 모은 후 aflatest developer \( 1.5 \mathrm{ml} \) 를 합하여 series-4 Fluorometer에서 분석을 수행하였다.</p> <p>Ochratoxin 함량은 aflatoxin측정과 같은 방법으로 실시하며, 전처리된 시료에 ochratest wash buffer \( 10 \mathrm{ml} \) 을 통과시킨 후, distilled water \( 10 \mathrm{ml} \) 를 두 번 통과시키고, cuvette에 ochratoxin developer \( 1.5 \mathrm{ml} \) 를 ochratest에 통과시켜 추출한 후, series-4 Fluorometer에 넣어 분석을 수행하였다.</p> <p>공시 재료의 일반성분 분석은 시료를 \( 65^{\circ} \mathrm{C} \) 의 건조기에서 3 일간 건조시킨 후, \( 1.00 \mathrm{~mm} \) screen이 부착된 분쇄기(Wiley mill)를 이용하여 분쇄한 후 사용하였다. 일반성분분석은 AOAC 방법에 준하였으며, 칼슘과 인의 함량dms Schwarzenbach 등의 방법과 UV-vis spectrophotometer(UVmini-1240, Japan)로 분석하였다.</p> <h2>통계 처리</h2> <p>시험 결과는 SAS (statistical analysis system) package program의 General Linear Model (GLM) procedure에 따라 처리되었으며, 각 처리구간에 유의성 검증을 위해 분산 분석을 실시한 후, Duncan's multiple range test로 \( 5 \% \) 수준에서 유의성을 검정하였다.</p>