Likens와 Nickerson형 연속 증류 동시 용매추출장치를 사용해 자생 나리 휘발성 향기를 추출하였다. 이렇게 얻어진 휘발성 향기 성분은 무수 황산나트륨으로 탈수 후 용매 에테르를 제거하여 약 \( 0. 5 \mathrm{ml}\)까지 농축하였고 \( 0.6 \mu \mathrm{ll} \)를 GC와 GC-MS 분석에 사용하였다. GC에 의해 분리된 Peak 성분의 표준물질 머무름 시간을 GC-MS 분석 결과로 나온 mass spectral library data와 비교하였고, 성분의 정량치는 내부표준물질의 면적에 대한 Peak 면적의 상대 비로 계산하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>재료</h2> <p>휘발성 향기성분 분석용 자생나리인 중나리(L. leichtliniivar. tigrinum Nichols.), 하늘나리(L. concolor var. parthneion Bak.), 하늘말나리(L. tsingtauense Gilg.), 섬말나리(L. hansonii Leichtl.) 및 털중나리(L. amabile Palibin.)는 2004년에 채취한 신선한 나리재료를 보존 \( \left(-20^{\circ} \mathrm{C}\right) \) 한 것을, 전처리 없이 사용하였다. 각 시료는 자른 후 분쇄기(Heung sang trading Co., LTD)로 분쇄하여 사용하였다. 각 휘발성 향기성분의 동정에 이용된 탄화수소, 알코을류, 알데히드류, 케톤류 및 산류의 표준시약으로는, 각각 limonene 1-penten-3-ol, hexanal, \( (E) \) -2-octenal, (E,Z)-2,6-nonadienal (Aldrich, Milwaukee, WI, USA), 1-pentanol, 2-pentanol, nonanal, (E)-2-decenal, \( (E, E) \) -2,4-nonadienal, phenylacetaldehyde, \( (E, E) \)-2,4-nonadienal, (E, E)-2,4-decadienal, hexanoic acid, heptanoic acid, octanoic acid, dodecanoic acid (Wako, Osaka, Japan), 2-phenethy-lalcohol, 3-methylbutanol (Sigma, St. Louis, MO, USA), 그 외 시약은 Tokyo kasei, Fluka등의 특급 시약을 사용하였다.</p> <h2>휘발성 성분 농축물의 제조</h2> <p>자생나리 휘발성 향기성분 추출에는 Likens와 Nickerson 형 연속 증류 동시 용매추출장치를 사용하였다. 즉, 31 의 증류용 둥근플라스크에 분쇄한 자생나리 시료 각 \( 200 \mathrm{~g} \), 증류수 \( 1000 \mathrm{ml} \) 및 내부표준물질(I.S.)로서 tetradecane (tetra-decane을 dichloromethane중에 \( 80 \mathrm{ppm} \) 농도로 조제) 용액 \( 1 \mathrm{ml} \) 를 넣고 중류하였다. 용매플라스크에는 \( 50 \mathrm{ml} \) 의 정제한 diethyl ether와 비등석을 넣고 \( 38 \sim 40^{\circ} \mathrm{C} \) 의 수욕 온도에서 에테르증기를 환류하여 휘발성 향기성분을 추출하였다. 추출시간은 1 시간으로 설정하였다. 얻어진 휘발성 향기성분은 무수 황산나트륨을 가해 하룻밤 탈수 후, 상압에서 용매에테르를 제거하여 질소가스를 흘리며 약 \( 0.5 \mathrm{ml} \) 까지 농축하였다. 얻어진 휘발성 향기성분 농축물 중 각 \( 0.6 \mu \mathrm{ll} \) 를 GC 및 GC-MS 분석에 사용하였다.</p> <h2>휘발성 성분의 분석 및 동정</h2> <p>연속 증류 동시 용매추출에 의해 얻어진 휘발성 향기성분 농축물은 Shimadzu model GC-17A (Kyoto, Japan)형의 gas chromatograph (GC)에 의해 분리하였다. 휘발성 향기성분의 검출에는 FID (불 꽃이온화검출기), 칼럼은 HP-5MS capillary column \( (30 \mathrm{~m} \times 0.25 \mathrm{~mm} \) i.d. \( \times 0.25 \mu \mathrm{m} \) film thickness : J & W Scientific, USA)을 사용하였으며, 오븐 온도는 \( 60^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 5분간 유지시킨 후 \( 220^{\circ} \mathrm{C} \) 까지 \( 22^{\circ} \mathrm{C} / \mathrm{min} \) 의 속도로 승온하였다. GC 주입부 및 검출기의 온도는 \( 200^{\circ} \mathrm{C} \) 를 유지하였다. Carrier gas는 질소가스를 이용하였으며, 유속은 \( 1.0 \mathrm{ml} / \mathrm{min} \) 으로 하였다. 분석시 split mode로 split ratio는 \( 1: 38 \) 을 유지하였다. GC-MS 분석장치는 HP 6890와 HP 5973 Mass Selective Detector (Palo Alto, CA, USA)가 연결된 것을 사용하였다. GC-MS 분석시 GC 주입부, 검출기 및 interface 온도는 \( 200^{\circ} \mathrm{C} \) 로 하였으며, 질량수측정범위는 \( 25 ~ 450 \mathrm{~m} / \mathrm{z} \), carrier gas는 helium, 선속도는 \( 40 \mathrm{~cm} / \mathrm{sec} \), electron multiplier voltage는 \( 1500 \mathrm{~V} \), MS의 이온화 전압은 \( 70 \mathrm{eV} \) 로 하였다. 그 외 column 및 분석 조건은 GC의 조건과 동일하게 하였다. GC에 의해 분리된 각 peak성분의 동정은 표준물질의 머무름 시간( \( \left(t_{\mathrm{R}}\right) \) 및 GC-MS분석 결과로 얻은 mass spectral library data와 비교하여 확인하였다. 각 성분의 정량치는 내부표준물질의 면적에 대한 각 peak 면적의 상대비로 계산하였다.</p>