본문에서 확인한 바와 같이 도토리 화분 활성 분획물을 이용한 천연 항산화제 개발 가능성이 높다. 도토리 화분 추출물 및 헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물은 혈전 생성에는 영향을 미치지 않을 것으로 판단된다. 특히 헥산 분획물의 경우 적혈구 용혈 활성을 보여 급성독성 가능성이 확인되었다. 도토리 화분의 에틸아세테이트 분획물을 대상으로 flavonoid 및 phenolic acids 성분이 있음을 확인할 수 있었다. 결과적으로 도토리 화분에서 폴리페놀이 다량 함유된 에틸아세테이트 분획물은 항산화, 항혈전 기능성 소재로 개발가능함을 알 수 있다.
<h2>도토리 화분 추출물 및 분획물의 항산화 활성</h2><p>도토리 화분 분획물의 항산화 활성을 평가한 결과는 Table 3에 나타내었다. 극성별 유기용매 분획물 중 에틸아세테이트 분흭물 \( (0.5 \mathrm{mg} / \mathrm{ml}) \)은 각각 \( 82.4 \%\) DPPH 음이온 소거능, \( 87.3 \% \) ABTS 양이온 소거능 및 0.754의 환원력을 나타내었으며, \( 0.2 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도에서 \( 77.2 \% \)의 nitrite 소거능을 나타내어, 에탄올 추출물 및 여타의 분획물에 비해 월등히 강력한 항산화능을 보였다. 한편, 각 분획물의 라디컬 소거능을 다양한 농도에서 평가하여 활성 라디컬의 \( 50 \% \) 를 소거할 수 있는 \( \mathrm{RC}_{50} \) 농도를 계산하였으며, 그 결과 도토리 화분의 에틸아세테이트 분획은 DPPH, ABTS 및 nitrite에 대한 \( \mathrm{RC}_{50} \) 값이 각각 72.2, 27.7및 \( 62.6 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)를 나타내었으며, 상업용으로 사용되고 있는 항산화제인 vitamin C의 DPPH, ABTS 및 nitrite에 대한 \( \mathrm{RC}_{50} \)값은 각각 8.6, 6.2 및 \( 15.7 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \) 로 계산되었다. 항산화 할성이 강력하다고 보고된 블랙커런트 추출물의 에틸아세테이트 분획물이 DPPH, ABTS 및 nitrite에 대한 \( \mathrm{RC}_{50} \)값이 각각 \( 136.3\), \(66.2 \) 및 \( 115.5 \mu \mathrm{g} / \mathrm{ml} \)임을 고려하면 도토리 화분 활성 분획물이 정제되지 않은 상태임을 감안하면 상기 활성 분획물을 이용한 천연 항산화제 개발 가능성이 높음을 알 수 있었다. 통상 식물체의 항산화 활성은 폴리페놀 함량과 높은 상관관계를 보이는 것을 고려할 때, 상기의 에틸아세테이트 분흭물의 우수한 항산화 활성은 높은 폴리페놀 함량과 연관된 것으로 판단된다.</p><h2>도토리 화분 추출물 및 분획물의 혈액응고 저해활성</h2><p>도토리 화분 추출물 및 분획물을 대상으로 각각 TT, PT, aPTT를 측정하여 항응고 활성을 평가하였다. 먼저 임상에서 항혈전제로 사용되고 있는 aspirin은 \( 1.5 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도에서 용매 대조구에 비해 TT는 1.45배, PT는 1.4배, aPTT는 1.64배 연장시켜 우수한 혈액 응고저해 활성을 나타내었다. 한편 도토리 화분 추출물의 다양한 분획물의 경우 \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도에서 트롬빈에 대한 유의적인 저해 활성은 인정되지 않았으나, 헥산 분획물 및 에털아세테이트 분획물에서 프로트롬빈 저해활성이 나타났으며, 헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물에서 혈액 응고인자 저해활성이 확인되었다. 그러나 이는 흑생강 및 복분자 추출물에 비해 미약한 활성을 보였으며, 임상에서 항혈전제로 사용되고 있는 아스피린에 비해서도 미약하여 실제적인 항응고 효과를 기대할 수는 없었다. 반면 물 잔류물의 경우 \( 5 \mathrm{mg} / \mathrm{ml} \) 농도에서 0.67배의 aPTT감소를 나타내어 도토리 화분의 수용성 성분에 의한 혈액응고 촉진현상이 나타날 수 있음을 확인하였다. 상기 결과는 도토리 화분 추출물 및 헥산 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물은 혈전 생성에는 영향을 미치지 않을 것으로 판단되며, 물 잔류물의 경우 내인성 혈액 응고반응을 활성화하여 혈전생성을 촉진할 수 있음을 제시하고 있다. 그러나 혈전 생성에 산화적 스트레스와 니트로화 반응이 관여되어 있으므로 항산화활성 및 nitrite 소거능이 우수한 에틸아세테이트 분획물의 경우 활성성분의 단리 이후의 추가적인 항응고 활성 연구가 필요하다고 판단된다.</p><h2>도토리 화분 추출물 및 분획물의 인간 적혈구 용혈활성</h2><p>도토리 화분 분획물의 안전성 평가의 일환으로 인간적혈구 용혈활성을 평가하였으며, 결과는 Table 7에 나타내었다. 적혈구 용혈은 빈혈, 조직 사멸 및 혈전성 장해를 유발하며, 대표적으로 봉독의 melitin이 잘 알려져 있다. 먼저, 대조구로 사용된 DMSO는 용혈 활성이 없었으며, Triton X-100은 \(1 \mathrm{mg/ml}\) 농도에서 적혈구를 \(100\%\) 용혈시킴을 확인하였다. 도토리 화분 추출물 및 헥산 분획물을 제외한 다른 분획물은 시료 \(1 \mathrm{mg/ml}\) 농도까지 용혈 활성이 전혀 나타나지 않았으나 헥산 분획물에서는 \(89.8\%\)의 강력한 용혈 활성이 확인되었다. 특히 헥산 분획물의 경우 \(0.5 \mathrm{mg/ml}\) 농도에서 \(53.5\%\)의 적혈구 용혈 활성을 보여 급성독성 가능성을 확인하였다.</p><h2>도토리 화분 에틸아세테이트 분획물의 flavonoid 및 phenolic acids 분석</h2><p>항산화 활성 및 혈소판 응집저해 활성이 우수한 도토리 화분의 에틸아세테이트 분획물을 대상으로 flavonoid 및 phenolic acids 성분을 분석하였다. 그 결과 상기 에틸아세테이트 분획물에서 rutin, isoquercitrin, astragalin, luteolin, hyperoside의 flavonoid와 4-hydroxybenzoic acid, p-coumaric acid, vanillic acid, caffeic acid, ferulic acid 및 syringicacid의 phenolic acids가 확인되었다. 가장 높은 함량을 나타낸 성분은 rutin (\(1192.7 \mathrm{\mu g/g}\))이었으며, isoquercitrin (\(73.652\mathrm{\mu g/g}\)), astragalin (\(15.914\mathrm{\mu g/g}\))도 상당량 확인되었다. 상기 3종 rutin, isoquercitrin, astragalin의 경우 이미 항산화, 항염증, 암세포 생육억제 및 항혈전 활성이 보고된 바 있다. 이상의 결과는 도토리 화분의 폴리페놀 고함유 에틸아세테이트 분획물은 항산화, 항혈전 기능성 소재로 개발가능함을 제시하고 있으며, 현재 도토리 화분으로부터 신규의 항산화, 항혈전 활성물질 분석이 진행중에 있다.</p>