2층배양 시 하층고체배지의 양이 배의 생산에 미치는 영향을 알기위해 하층고체배지의 양을 3, 5 및 7ml로 다르게 한 후 소포자 현탁액을 치상하여 배양 4주 후 배의 발생과 발달을 조사하였다. 따라서 2층배지 사용 시 하층고체배지의 양은 배의 유기에는 3ml이 효과적지만 배의 발달에는 7ml가 효과적이다. 고체배지의 양이 많은 경우 배의 발달은 좋지만 배의 발생이 적으므로 배의 발생이 많은 배지를 포함해 배양방법을 개발할 수 있는 연구가 계속되어야 한다.
<h2>2층배양 시 하층고체배지의 양이 배의 생산에 미치는 영향</h2><p>2층배양 시 하층고체배지의 양이 배의 생산에 미치는 영향을 조사하기 위해 하층고체배지의 양을 3, 5 및 \( 7 \mathrm{ml} \)로 달리한 후 그 위에 소포자 현탁액을 치상하여 배양 4주 후 배의 발생 및 발달을 조사하였다. 배양접시 1 개에서 발생한 배의 전체 수는 하층고체배지의 양이 \( 3 \mathrm{ml} \)인 경우에는 40.9개이었으나 \( 5 \mathrm{ml} \) 과 \( 7 \mathrm{ml} \)인 경우에는 각각 31.8개와 31.7개로 \( 3 \mathrm{ml} \) 인 경우에 비해 크게 감소하였으며 \( 5 \mathrm{ml} \)과 \( 7 \mathrm{ml} \) 사이에는 차이가 없었다.</p><p>자엽배의 발생은 하층고체배지의 양이 3, 5 및 \( 7 \mathrm{ml} \)인 경우 각각 11.6, 14.4 및 17.1개로 고체배지의 양이 많아질수록 증가하였으며, 발생한 배들의 길이는 고체배지가 \( 5 \mathrm{ml} \)과 \( 7 \mathrm{ml} \)인 경우 \( 3 \mathrm{ml} \)인 경우 비해 짧았다. 뿐만 아니라 하층고체배지의 양이 \( 3 \mathrm{ml} \)인 경우 발생한 배들은 배축의 길이는 길었으나 자엽이 배축 말단에서 겨우 발달하기 시작하였거나 자엽의 발달이 진행된 것들도 2개의 자엽이 서로 붙어있었으며 자엽이 전개된 것은 매우 드물었다. 이에 비해 하층고체배지의 양이 \( 5 \mathrm{ml} \)과 \( 7 \mathrm{ml} \)인 경우 발생한 배들의 배축은 짧았으나 자엽이 정상으로 발달하였고 2개의 자엽이 전개된 것들이 많았다. 따라서 2층배지 사용 시 하층고체배지의 양은 배의 유기에는 \( 3 \mathrm{ml} \)이 효과적이나 발생한 배의 발달에는 \( 7 \mathrm{ml} \)이 효과적인 것으로 나타났다.</p><p>밀의 약배양 시 callus의 발생은 액체배지와 고체배지 중 액체배지에서 많으나 녹색식물체 발생 비율은 소포자가 배지 밑으로 가라않는 것을 방지하기 위해 ficoll을 첨가한 액체배지에서 많으며, rye(Secale cereale L.)의 약배양 시에서도 고체배지, 액체배지, \( 10 \% \) ficoll을 첨가한 액체배지, 또는 2층 (doble layer) 배지를 사용하는 경우 고체배지에서 발생한 캘러스에서 재분화 비율이 높다. 한편 보리의 소포자 배양 시에는 액체 배지에서 계속 6주간 배양하거나 또는 액체배지에서 3주간 배양하고 이를 다시 고체배지에 옮겨 3주간 배양한 후 배의 발생과 발달을 조사하면 3주간 액체배양 후 다시 3주간 고체배양 한 경우 배의 발생은 증가하지 않으나 배의 질이 좋아지며 녹색식물체의 발생이 크게 증가 한다. 이와 같이 배지의 물리적 상태에 따라 배의 발생과 발달이 달라지므로 2층배양 시에도 하층고체배지의 양에 따라 배의 발생과 발달이 달라질 것으로 생각되어 하층 고체배지의 양을 3, 5 및 \( 7 \mathrm{ml} \)로 달리하여 배양한 결과 하층 고체배지가 \( 7 \mathrm{ml} \)인 경우 배의 발생은 감소하나 배의 질이 향상되었으며 자엽배의 발생 비율이 증가하였다. 따라서 2층배지를 사용한 고추의 소포자 배양 시 배의 발생과 발달은 하층 고체배지의 양에 의해 영향을 받으며, 하층 고체배지의 양이 적절할 때 배의 발달이 좋아진다는 사실을 밝힐 수 있었다. 그러나 고체배지의 양이 많은 경우 배의 발달은 좋으나 배의 발생이 적었으므로 다수의 정상 자엽배를 생산할 수 있으려면 배의 발달이 좋을 뿐만 아니라 배의 발생도 많은 배지와 배양방법을 개발할 수 있는 연구가 계속되어야 할 것으로 생각된다.</p>