방선균을 분리하기 위한 배지로는 humic acid vitamin 평판배지를 사용하였고 토양시료를 식염수에 현탁,도말한 후 \( 28 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 7일간 배양했다. Xylanase의 생산성 조사를 위해서는 Bennett 배지를 기본배지로 하여 그 성분을 변화시킨 배지를 사용했으며, 최종적으로 효소 생산을 위해 사용한 배지는 soluble starch 대신 oat spelt xylan\((1 \%) \)을 첨가한 배지이다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>미생물의 배양과 사용배지</h2> <p>방선균의 분리하기 위한 배지로는 humic acid vitamin 평판배지(humic acid \( 1.0 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } , \mathrm { MgSO } _ { 4 } \cdot 7 \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } 0.05 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } , \mathrm { Na } _ { 2 } \mathrm { HPO } _ { 4 } \) \( 0.5 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } , \mathrm { FeSO } _ { 4 } \cdot 7 \mathrm { H } _ { 2 } \mathrm { O } 0.01 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } , \mathrm { CaCO } _ { 3 } 0.02 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } , \mathrm { KCl } 1.7 \) \( \mathrm { g } / \mathrm { L } \), thiamine- \( \mathrm { HCl } 0.5 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \), riboflavin \( 0.5 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \), niacin \( 0.5 \) \( \mathrm { mg } / \mathrm { L } \), inositol \( 0.5 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \), pyridoxin- \( \mathrm { HCl } 0.5 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \), Ca-pantothenate \( 0.5 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \), biotin \( 0.25 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \), aminobenzoic acid \( 0.5 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \), cycloheximide \( 50 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \), nalidixic acid \(50 \mathrm { mg } / \mathrm { L } \), agar \( 18 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } ( \mathrm { pH } 7.2) \)를 사용하였으며, 토양시료를 생리식염수에 현탁하여 도말한 후 \( 28 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 7 일간 배양하였다. Xylanase 생산성을 조사하기 위해서는 Bennett 배지 (Glucose \( 10 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \), beef extract \( 1 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \), yeast extract \( 1 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \), peptone \( 2 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } ( \mathrm { pH } 7.2) \)와 G.S.S 배지(soluble starch \( 10 \mathrm { ~g } / \) \( \mathrm { L } , \mathrm { K } _ { 2 } \mathrm { HPO } _ { 4 } 0.25 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \), soybean meal \( 25 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \), beef extract \( 1 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \), yeast extract \( 4 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } , \mathrm { NaCl } _ { 2 } \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \), glucose \( 20 \mathrm { ~g } / \mathrm { L } \), \( \mathrm { CaCO } _ { 3 } 2 \mathrm { ~g } / ( \mathrm { pH } 7.2) \)를 기본배지로 사용하여 그 성분을 변화시킨 배지를 사용하였다. 최종적으로 효소 생산을 위해서 사용한 배지인 GSS-X1은 G.S.S 배지성분 중 soluble starch 대신 oat spelt xylan \((1 \%) \)을 첨가한 배지이다.</p>