뿌리 표면의 색이 황백색, 붉은색, 청색을 지닌 더덕 뿌리를 선발한 후 각각의 뿌리에서 자란 줄기 절편을 기내로 옮겨 배양한 다음 액아로부터 식물체를 유도하여 1 년 동안 4주마다 동일한 배양환경에서 계대하여 기내에서 식물체를 증식시켰으며 이 재료를 사용하여 각 더덕 간 외부 형태, 생장 및 엽록소와 안토시아닌 함량을 비교하였다.
<p>줄기의 해부학적 특징을 관찰하기 위하여 각 더덕의 뿌리 위쪽으로 \( 3 \mathrm { cm } \)에 위치한 줄기부위를 가로 방향으로 \( 3 \mathrm { cm } \)정도 자른 후, 면도칼 (Dorco, Korea)을 이용하여 \( 0.2 \sim 0.3 \mathrm { mm } \) 정도의 두께로 cross-section으로 잘라 관찰하였다. 뿌리는 cross-section으로 자른 후, \( 0.1 \% \) toluidine blue O로 염색하여 광학현미경 (Olympus CX 31, Japan)으로 줄기와 뿌리 조직과 안토시아닌 축적을 관찰하였다.</p> <h2>RAPD 분석 및 유연관계 분석</h2> <p>백더덕, 홍더덕, 청더덕 계통의 줄기와 뿌리절편 \(0.3-0.5 \mathrm { g } \)을 재료로 사용하였다. Genomic DNA는 Mag Extractor plant genome kit (Toyobo, Japan)를 이용하여 추출하였다. RAPD primer는 University of British Colombia (UBC)의 RAPD primer 중 6개의 primer를 이용하였다. DNA 단편 증폭 시 예비변성은 \( 94 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 7분간 수행 후, 변성은 \( 94 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 1분, 결합은 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 1분, 합성은 \( 72 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 2분으로 하여 총 45 cycle을 반복 후, 마지막 연장은 \( 72 { } ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 10분간 수행하였다. RAPD-PCR 반응은 ABI Gene Amp PCR system 9700 (ABI applied biosystems, Singapore)을 사용하였다. 증폭된 산물은 \( 1.2 \% \) agarose gel 상에서 전기영동한 후 EtBr로 염색하여 밴드를 관찰하였다.</p> <p>Agarose gel 상의 DNA 밴드 유형은 밴드가 있는 경우 1, 없는 경우 0의 값으로 하였다. 유연관계 분석은 NTSYSpc (Numerical Taxonomy system and Multivariate Analysis system for personal computer) 소프트웨어, version 2.1 (Rohlf 2000)을 사용하였고, dendrogram은 UPGMA 방법을 이용하여 나타냈다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>백, 홍, 및 청더덕 줄기의 생리, 형태적 특징 비교</h2> <p>뿌리 표면의 색이 황백색, 붉은색, 청색을 지닌 더덕 뿌리를 선발한 후 각각의 뿌리에서 자란 줄기 절편을 기내로 옮겨 배양한 다음 액아로부터 식물체를 유도하여 1 년 동안 4주마다 동일한 배양환경에서 계대하여 기내에서 식물체를 증식 시켰다. 이 재료를 사용하여 각 더덕 간 외부 형태, 생장 및 엽록소와 안토시아닌 함량을 비교하였다.</p>