이 연구에서는 홍국발효홍삼을 이용하여 건강보조식품을 개발하기 위한 기초 자료를 얻기 위해 홍국발효홍삼의 일반 이화학적 특성, 생리활성작용을 검토하였다. 실험에 사용한 홍삼은 6년근 수삼으로 제조한 홍삼의 분말에 전배양 시킨 홍국균을 접종시킨 것을 사용했다. 시료는 건조 홍삼 및 홍국발효홍삼 분말 사료에 10배 양의 3차 증류수를 가한 후 \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 항온수조에서 3시간 교반하면서 3회 반복 추출하고, 추출액을 모아 여과지로 여과하여 여액을 감압 농축하고 동결건조하여 추출 수율을 구하였다. 총 당은 phenol-sulfuric acid법으로 측정하였고, 총 폴리페놀 화합물의 합량은 Folin Denis법을 약간 변형시켜 측정하였다.
<p>본 연구에서는 이러한 홍국균을 흥삼에 접종하여 발효시킴으로서 얻어지는 홍국발효홍삼을 이용하여 간 기능 개선 등 건강보조식품을 개발할 목적으로 그 기초 자료를 얻기 위하여 홍국발효홍삼의 일반 이화학적 특성조사와 함께 생리활성작 용에 대하여 검토하였다.</p>\( \mathrm { w/v } \)<h1>재료 및 방법</h1> <h2>실험 재료</h2> <p>실험 재료인 홍삼은 6년근 수삼으로부터 증숙과 건조 과정을 거쳐 제조한 홍삼을 분쇄(MICRO-JET MILL HKJM-300, Hankook Powder System, Seoul, Korea)한 후 얻어진 홍삼분말에 전배양 시킨 홍국균(Monascus purpureus KCCM 12002)을 \( 5 \% \)( \( \mathrm { w/v } \))접종시켜 \( 30 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 30일간 고체배양 한 후 건조시킨 분말(200 mesh)을 (주)일한인삼(금산, 충남)에서 제공 받아 사용하였다.</p> <h2>시료의 추출 및 수율 측정</h2> <p>수용성 추출물을 얻기 위하여 각각 건조된 횽삼 및 홍국발효홍삼 분말 시료 \( 100 \mathrm { ~g } \)에 10배 양의 3차 증류수를 가한 후 \( 40 ^ {\circ } \mathrm { C } \)항온수조에서 3시간씩 교반하면서 3회 반복 추출하였으며, \(70 \% \)에탄올 및 \(70 \% \)메탄올 용매를 수용성 추출물과 동일한 방법으로 추출한 후 추출액을 모아 여과지(Whatman No.2, Whatman International Ltd., England)로 여과시켜 여액을 ro-tatory vacuum evaporator (Rotavapor R215, BUCHI, Switzeland)로 감압 농축하여 각각의 용매를 제거시킨 후 freeze dryer (삼원냉열 SF-DSF 12, 부산, 한국)로 동결건조하여 추출 수율을 구하였다.</p> <h2>총 당 측정</h2> <p>총 당은 phenol-sulfuric acid법으로 측정하였다. 즉, 시험관에 홍삼 및 홍국발효홍삼 분말을 \( 1 \% \)( \( \mathrm { w/v } \))로 증류수에 녹인 시료용액을 각각 \( 0.5 \mathrm { ml } \)씩 취하고, 동시에 표준용액을 \( 0.5 \mathrm { ml } \)씩 각각 취하여 \( 5 \% \)정제페놀수를 \( 0.5 \mathrm { ml } \)가해 잘 혼합시켰다. 여기에 농황산 \( 2.5 \mathrm { ml } \)를 가하여 발색시켜 20분 경과 후 \( 490 \mathrm { ~nm } \)에서 흡광도를 측정하여 검량선으로부터 구해진 포도당의 비율로 총당 함량을 계산하였다.</p> <h2>총 폴리페놀 화합물의 함량 측정</h2> <p>총 폴리페놀 화합물의 함량은 페놀성 물질이 phosphomolybdic acid와 반응하여 청색을 나타내는 것을 이용한 FolinDenis법을 약간 변형시켜 측정하였다. 즉, 홍삼 및 홍국발효홍삼 분말을 \( 1 \% \)( \( \mathrm { w/v } \))로 증류수에 녹인 시료용액 \( 0.5 \mathrm { ml } \)에 Folin-Ciocalteu's phenol reagent \( 2.5 \mathrm { ml } \)를 첨가하여 잘 흔합하고 5분간 실온에서 방치하였다. 정확히 5분 반응시킨 후 \( 7.5 \% \mathrm { Na } _ { 2 } \mathrm { CO } _ { 3 } 2 \mathrm { ml } \)를 가하여 흔합하고 \( 50 ^ {\circ } \mathrm { C } \)에서 5분간 발색시킨 후 \( 760 \mathrm { ~nm } \)에서 홉광도를 측정하였다. 이때 총 폴리페놀 화합물은 tannic acid를 이용하여 작성한 표준곡선으로 부터 함량을 구하였다. Tannic acid를 이용한 표준곡선은 tannic acid \( 1 \mathrm { mg } \)을 \( 50 \% \)메탄올 용액 \( 1 \mathrm { ml } \)에 녹이고 최종 농도가 0,50,100,150,200,300 및 \( 500 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \)용액이 되도록 취하여 위와 같은 방법으로 \( 760 \mathrm { ~nm } \)에서 흡광도를 측정하여 작성하였다.</p>