깻잎의 유리아미노산 분석을 위해 0.2M lithium citrate loading buffer로 균질화한 용액을 멤브레인 필터로 여과하고, 아미노산 자동분석기로 시험액의 유리아미노산 함량을 구하였다. 휘발성 향기성분 분석을 위해 파쇄한 깻잎을 SDE 연속추출장치에 넣고 diethyl ether로 환류하여 휘발성 향기성분을 포집했고, 추출한 휘발성 향을 GC-MS로 분석하였으며, 각 화합물의 정량은 내부표준물질인 1-octanol의 피크 면적과 비교하여 산출하였다.
<p>한편, 깻잎중의 유리아미노산을 분석하기 위하여, 시료 10배량의 \( 0.2 \mathrm { M } \) lithium citrate loading buffer (pH 2.2)와 함께 블렌더에서 \( 300 \mathrm { rpm } \)으로 10분간 균질화한 용액 일정량을 \( 0.22 \) \( \mu \mathrm { m } \) 멤브레인 필터로 여과하여 유리아미노산 분석용 시험용액으로 하였으며, lithium type의 ion exchange column을 장착한 아미노산자동분석기(단백질 구성아미노산과 동일 model)로 각 시험액의 유리아미노산 함량을 구하였다.</p> <h4>휘발성 향기성분의 분석</h4> <p>휘발성 향기성분을 분석하기 위하여 파쇄한 깻잎 약 \( 80 \mathrm { ~g } \)을 취하여 증류수 \( 100 \mathrm { ml } \)과 함께 SDE (Simultaneous Steam Ditillation-Extraction)연속추출장치(동일과학, 한국)에 넣고 내부표준물질로 \( 1,000 \mathrm { ppm } \)의 1-octanol \( 500 \mu \mathrm { l } \) 을 첨가한 후 3시간동안 diethyl ether로 환류하여 휘발성 향기성분을 포집하고, 무수항산나트륨으로서 탈수시킨 후 질소기류로 농축하였다.</p> <p>SDE추출장치로 추출한 휘발성 향을 GC-MS (HP 6890 series GC system + HP 5973 MSD, Hewlett Packard Co. USA)에서 HP-5MS \(5 \%\) phenyl methyl siloxane column ( \( 30 \mathrm { ~m } \times 250 \) \( \mu \mathrm { m } \), film thickness \( 0.25 \mu \mathrm { m } ) \), carrier gas로 \( \mathrm { He } (20 \mathrm { ml } / \mathrm { min } \).), 온도조건으로, initial temp. (time) \( 70 ^ {\circ } \mathrm { C } \) (5 min.), rate는 \( 5 ^ {\circ } \mathrm { C } \) \( / \mathrm { min } \)., final temp. (time)를 \( 250 ^ {\circ } \mathrm { C } \) (5 min.), 주입구 온도 \( 250 ^ {\circ } \mathrm { C } \), interface 온도 \( 240 ^ {\circ } \mathrm { C } , 70 \mathrm { eV } \)의 ionization voltage의 조건으로 분석하였다. 각 화합물의 정량은 각 피크의 면적을 내부표준 물질인 1-octanol의 피크면적과 비교하여 아래의 계산식으로 산출하였으며, 이때의 response factor는 1로 가정하였다.</p>