본 연구에서는 CK214 균주에 의한 agar 분해 활성을 분석하였다. CK214 배양액으로부터 상등액을 분리하여 효소액을 준비한 뒤, PBS로 희석하여 DNS 용액과 혼합하여 \(80^{\circ}\mathrm{C}\)에서 15분간 반응시켰다. 흡광도는 파장 \(575 \mathrm{nm}\)에서 측정되었고, 흡광도를 galactose 용액으로 측정한 표준곡선과 비교하여 환원당의 양을 산출하였다. 효소액의 환원당 생성은 \(0.31 \mathrm{mmol/mg \cdot min}\)로 측정되었으며, 이를 통해 CK214 균주가 agar 분해 효소를 세포외로 분비하고 분해산물을 생장에 활용함을 확인하였다.
<p>CK214 균주의 agar 분해 활성을 측정하기 위해 CK214 균주배양액을 원심 분리하여 상등액을 분리한 후, 농축, 여과하여 효소액을 준비하였다. 준비된 효소액을 PBS에 희석하여 DNS 용액과 섞어 \( 80 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 15 분간 반응시킨 후, 반응한 시료는 파장 \( 575 \mathrm { ~nm } \) 에서 흡광도를 측정하였다(Fig. 1B). 측정한 흡광도를 galactose 용액을 이용해 측정한 표준곡선과 비교해 생성된 환원당의 양을 측정하였다. CK214 배양액으로부터 추출한 효소액의 환원당 생성 정도는 \( 0.31 \mathrm { mmol } / \mathrm { mg } \cdot \mathrm { min } \) 으로 나타났으며, 이 결과를 통해 CK214 균주가 agar 분해 효소를 세포외부로 분비하여 그 분해산물을 생장에 이용한다는 것을 알 수 있었다.</p> <h2>CK214 균주의 swarming 운동</h2> <p>CK214 균주는 \( 1.5 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) agar 배지 표면에 특유의 swarming 형태를 나타내며 뛰어난 운동 능력을 보였다. 다양한 농도의 agar 표면에서 CK214 균주의 swarming 운동 능력의 변화를 관찰하기 위하여 \( 0.5,1.0,1.5,2.0 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \mathrm { LB } \) agar 평판배지에서 운동성을 조사하였다. CK214 균주 전배양액 5 \( \mu 1 \) 를 각 농도의 LB agar 평판배지에 떨어뜨린 후 \( 37 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 에서 20 시간 동안 배양하였다. CK214 균주는 \( 0.5,1.0,1.5 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) \( \mathrm { agar } \) 농도에서 활발한 운동 능력을 보였으며 \( 2.0 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) 이상의 agar 농도에서 운동 능력이 급격히 감소하였다(Fig. 2). \( 1.0 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) agar 농도에서 가장 높은 운동성을 보였는데 대표적인 swarming 운동성 박테리아인 S. typhimurium \( \) 과 비교하였을 때 약 5 배 더 높은 운동성을 보였다. Escherichia, Salmonella, Bacillus, Pseudomonsa 와 같은 대부분의 박테리아 에게 \( 1.0 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) agar 표면 환경은 습기가 부족하여 swarm-ing 운동을 하기엔 효과적이지 못한 환경이지만 \( \) \( \mathrm { CK } 214 \) 균주는 이런 조건에서 다른 일반적인 swarming 운동 박테리아에 비해 높은 운동성을 보여주었다. 특이하게도 \( 0.5 \% \) agar 조건에서 CK214는 스스로 집락을 형성하는 특유의 swarming 형태가 나타나지 않고 S. typhimurium과 P. aerugi-nosa가 swimming 운동을 할 때와 비슷한 형태를 나타내었다. 이는 \( 0.5 \% \) agar 평판배지의 습기가 많은 조건이 \( \mathrm { CK } 214 \) 균주의 운동성 패턴 변화와 관련이 있음을 보여준다.</p>