국화는 관상용이나 방항제, 한약재로 쓰이는데, 이러한 국화의 유통에는 다량의 부산물이 발생한다. 이중 많은 비율을 차지하는 것이 줄기인데, 이러한 줄기는 항산화, 혈전 생성 억제, 관상동맥의 혈행 개선, 관상동맥성 심질환 치료의 활성을 가지나 관련 연구는 미흡한 실정이다. 따라서 본 연구는 국화의 한 품종인 백마의 특징인 중심부가 녹색인 점을 이용해 동정을 실시하였다.
<h1>서 론</h1><p>국화는 국화과(Asteraceae)에 속하는 여러해살이풀로 주로 아시아 등지에서 서식한다. 국화는 약 \( 1 \mathrm{~m} \) 크기로 자라며, 품종에 따라 여름부터 늦가을까지 개화한다. 국화는 관상용으로 가장 많이 쓰이며, 방향제나 차, 한약재등으로 사용된다. 국내 관상화훼농업에서 국화의 시장가치는 두번째로 높은 수준을 차지하며, 다양한 품종이 육종 개발되고있다. 현재 국화는 700 종 이상의 품종이 개량되었고, 크게 대국인 스탠다드형과 소국인 스프레이형으로 나뉜다. 이중 국내 생산비는 스탠다드형이 80% 이상으로 압도적인 점유율을 갖는다. 이에 힘입어 2004년 한국 농촌진흥청 원예연구소에서는 국내 최초로 ‘백마(白馬)'라는 스탠다드형 국화를 육종하였다. 백마는 현재 국내뿐만 아니라 세계 각국으로 수출되고 있으며, 주로 관상용으로 활용된다. 관상용 국화는 주로 절화로 유통되며, 유통 과정 중 다량의 부산물이 발생한다. 부산물 중 가장 높은 비율을 차지하는 부위는 국화의 줄기로 폐기 과정 중 농가에 추가비용을 발생시킨다. 국화 줄기는 항산화, 혈전 생성 억제, 관상동맥의 혈행 개선, 관상동맥성 심질환 치료의 활성을 가지고 있으나 다른 부위에 비해 많은 연구가 이루어져 있지 않다. 따라서 농가의 비용 감소와 소득증대를 위해 부산물에 대한 활용방안이 촉구되며, 부산물의 활용 가능성 평가를 위해 국화 줄기에 대한 연구를 시작하였다.</p><h1>재료 및 방법</h1><h2>실험재료</h2><p>본 실험에서 사용한 국화 '백마'(C. morifolium) 의 줄기는 스탠다드형 국화의 줄기로 2017년 4월에 양재꽃시장(서울, 대한민국)에서 구입하였으며, 충청남도 농업기술원 화훼연구소(충청남도 예산군 오가면 역탑리) 박하승 박사가 동정하였다. 백마는 국내에서 최초로 육종한 흰색의 볼륨감 있는 스탠다드형 절화용 하추국으로 꽃의 중심부가 노란 빛을 띄는 다른 국화 품종과는 달리 중심부가 녹색을 띄고있어 동정이 가능하다. 표본시료(KHU-NPCL-20170430)는 경희대학교 천연물화학실 (용인, 경기도)에 보관되어 있다.</p><h2>시약 및 기기</h2><p>시약 및 기기는 이전 실험과 동일하게 사용하였다</p><h2>추출 및 분리</h2><p>국화 '백마'의 건조한 줄기 \( 3.3 \mathrm{~kg} \) 을 \( 80 \% \mathrm{MeOH} \) 수용액(\(30\) L) 으로 실온에서 \(24\) 시간씩 \(3\)회 반복 추출하였다. 얻어진 여액을 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 감압농축하여 \( \mathrm{MeOH} \) 추출물(\(177\) g)을 얻었다. 얻어진 \( \mathrm{MeOH} \) 추출물은 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) (\(3.0\) L)와 ethyl acetate \((\mathrm{EtOAc}\), \( 3.0 L \times 3 \) )로 분배추출하였고, 다시 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) 층을 \( n \)-butyl alcohol (n-\( \mathrm{BuOH}, 2.4 \mathrm{~L} \times 3) \) 로 분배추출하였다. 각층을 \( 40^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 감압농축 하여 \( \mathrm{EtOAc} \) 분획(CBAE, \( 19.3 \mathrm{~g}), n \)-BuOH 분획(CBAB, \( 18.9 \mathrm{~g}) \) 및 \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O} \) 분획(CBAW, \( \left.138.8 \mathrm{~g}\right) \) 을 얻었다. \( \mathrm{EtOAc} \) 분획(CBAE, \( 19.3 \mathrm{~g}) \) 에 대하여 silica gel \( \left(\mathrm{SiO}_{2}\right) \) column chromatography (c.c.) \( \left(\phi 10.0 \times 15.0 \mathrm{~cm}, \quad \mathrm{CHCl}_{3}-\mathrm{EtOH}=10: 1 \rightarrow \mathrm{CHCl}_{3}-\mathrm{MeOH}=10: 1 \rightarrow \mathrm{CHCl}_{3}-\right. \) \( \mathrm{MeOH}=5: 1 \), 각 \( 3.0 \mathrm{~L}) \) 를 실시하여, 총 \(13\) 개의 분획 \( (\mathrm{CBAE}- \) 1 CBAE-13)을 얻었다. 그 중에서 CBAE-10 분획[\(490.9 mg\), elution volume/total volume (Ve/ \( \mathrm{Vt}) \quad 0.098-0.119] \) 에 대하여 octadecyl silica gel (ODS) c.c. \( (\phi 3.5 \times 6 \mathrm{~cm} \), acetone-MeOH-\( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}=3: 1: 1 \), 각 \( 2.5 \mathrm{~L} \) )를 실시하여 화합물 \( 1 \) (CBAE-10-16, \( 64.5 \mathrm{mg} \), \( \mathrm{Ve} / \mathrm{Vt}=0.355-0.419 \), ODS TLC \( \mathrm{R}_{\mathrm{f}} 0.17 \) acetone-MeOH- \( \mathrm{H}_{2} \mathrm{O}= 5:1:1\))과 화합물 \(2\) (CBAE-10-21, \( 17.4 \mathrm{mg}, \mathrm{Ve} / \mathrm{Vt}=0.548-0.608 \), ODS TLC \( \mathrm{R}_{\mathrm{f}} 0.31 \) acetone-MeOH- \( \left.\mathrm{H}_{2} \mathrm{O}=5: 1: 1\right) \) 을 분리하였다.</p>