CLPP는 Biolog GN plate가 세균군집의 잠재적 가능성을 평가하여 군집을 비교하는 것으로 이용되는 방식으로, 본 연구에서 아연도강관과 탄소강관의 생물막 세균농도 변화 파악과 미생물군집의 양상의 관종 z류와 시기별 변화 여부 분석에 이용되었다. 실험은 쿠폰의 멸균 또는 미생물이 제거된 상태를 기본으로 하여 진행되었다.
<p>생물막은 수계(水界)에 노출된 환경에서 발견되는 미생물의 서식지중 하나이다. 생물막은 수계의 부유환경과는 다른특이한 세균을 가지고 있고 생활사도 다르며, 영양분의농도가 낮은 빈영양조건에서 세균의 생장에 주효.한 것으로 알려져 있다.</p> <p>배급수관의 수돗물은 빈영양(oligotrophic) 조건과 소독제가 있지만 생물막의 존재가 발견되었으며, 생물막은 위생적 문제뿐 아니라 관말에서의 급격한 세균수 증가를 초래하는 것으로 파악되었다[15]. 수돗물 배급수관망의 생물막에 존재하는 미생물군집을 분석할 때 배양에 기초한 방법과 배양을 통하지 않은 방법[10]이 있지만, 모두 많은 시간과 경비가 소요된다.</p> <p>Biolog GN plate는 95개의 서로 다른 탄소원의 이용능에 의한 발색양상의 차이를 근거로 세균 동정용으로 이용되어 왔다. 그리고 이것은 세균군집의 잠재적 기능성을 평가하여 군집을 비교하는 것으로도 이용되고 있으며 그러한 방법은 CLPP (Community Level Physiology Profile)로 알려졌다. CLPP는 간편하고 분석속도가 빠른 장점이 있다.</p> <p>배급수관망은 아연도강관, 탄소강관, PVC 등 다양한 재질의 파이프로 구성되어 있다. 아연도강관과 탄소강관은 공공과 빌딩의 배급수관에 널리 이용되는 재질이며, 배급수관망에 새로이 설치되는 관 역시 미생물 성장의 서식처로 이용될 가능성이 높다.</p> <p>본 연구에서는 배급수관에 자주 사용되는 아연도강관과 탄소강관이, 관말의 수돗물에 노출된 이후에 나타나는 생물 막의 세균농도 변화를 파악함과 동시에, 미생물군집의 양상 이 관 종 \( \mathrm { z } \) 류와 시기별로 변화하는 지를 Biolog GN plate를 이용한 CLPP로 분석하고자 하였다.</p> <h1>재료 및 방법</h1> <h2>모델시스템</h2> <p>탄소강관(carbon steel pipe)과 아연도강관(galvanized iron pipe)의 쿠폰을 \( 15 \times 75 \times 1 \mathrm { ~mm } \) (총표면적 \( 24.3 \mathrm { ~cm } ^ { 2 } \) )로 제작하였다. 멸균된 Milli-Q 증류수와 초음파세척기로(Branson3210 washing sonicator, USA) 세척된 쿠폰들을, 스테인레스 재질의 생물막실험 용기 \( (36 \times 105 \times 225 \mathrm { ~mm } ) \) 에 삽입한 후 70 \( \mathrm { ml } / \mathrm { min } \) 의 유량으로(희석률 \( 0.08 / \mathrm { min } \) ) 관말의 수돗물을 흘렸다.</p> <h2>시료채취 및 생물막 미생물 분리</h2> <p>쿠폰들을 무균적으로 채취한 후 \( 30 \mathrm { ml } \) 의 탈착용액을 이용하여 가역적으로 합착한 미생물을 제거하였다. 탈착용액 \( 100 \mathrm { ml } \) 에 쿠폰을 넣고 \( 45 \mathrm { kHz } \) 에서 초음파세척(Branson 3210washing sonicator, USA), 냉장, 교반, 냉장을 각 1 분씩 총 3회 실시하여 생물막의 세균을 탈착시켰다. 원심분리 \( (10000 \times \mathrm { g } \), \( 20 \mathrm { ~min } \) )와 멸균된 \( 0.7 \% \mathrm { NaCl } \) 용액을 이용한 세척을 3 회 실시하여 생물막의 미생물을 분리하였다. 최종적인 세포덩어리는 \( 20 \mathrm { ml } \) 의 멸균된 \( 0.7 \% \mathrm { NaCl } \) 로 희석하였다.</p>