본 연구에서는 TMP21의 세포 성장 및 분화에 관련된 NGF 수용체 신호전달 및 정에 미치는 영향을 분석하였다. 이를 위해 인간의 TMP21 cDNA를 합성하고, 이를 클로닝하여 CMV/hTMP21 벡터를 제조하였다. 이 벡터를 B35 neuroblastoma에 과발현시킨 후, gamma-secretase 구성단백질과 NGF 수용체 연관 단백질의 변화를 관찰하였다. 결과적으로, TMP21이 neuroblastoma에서 NGF 수용체 신호전달과정을 조절하는 중요한 단백질로 작용함을 확인하였으며, 이는 Alzheimer's Disease(AD)의 작용기전 연구에 중요한 기초 자료를 제공한다.
<p>이상의 결과들은, 본 실험에서는 neuroblastoma에서TMP21이 NGF 수용체 신호전달과정에 미치는 영향을 분석하고자 하였으며, 그 결과 TMP21의 과발현이 \( \gamma \)-secretase 활성억제를 통한 \( \mathrm { p } ^ {\mathrm { NTR } } \) 의 양을 증가시키고, \( \mathrm { RhoA } \) 의 증가를 유도하였다. 또한 TMP21의 과발현은 APP와 상호작용하는 TrkA의 인산화를 억제하였고, 이러한 억제는 ERK를 통해 세포 내로 전달됨을 확인할 수 있었다. 이러한 결과는 향후 \( \mathrm { NGF } \) 를이용한 \( \mathrm { AD } \) 치료제의 개발과 \( \mathrm { AD } \) 발병기전의 연구에 중요한 자료로 활용될 수 있을 것으로 사료된다.</p> <h1>초록: \( \gamma \)-Secretase 활성억제단백질인 TMP21의 과발현이 신경세포주에서 NGF 수용체 신호전달과정에 미치는 영향</h1> <p>TMP21은 \( \mathrm { AD } \) 의 원인으로 작용하는 \( \mathrm { A } \beta \)-42 펩타이드 생성에 중요한 \( \gamma \)-secretase 활성을 억제하는 p24 family 에 속하는 type I 막 단백질이다. 본 연구에서는 TMP21이 세포의 성장과 분화에 중요한 \( \mathrm { NGF } \) 수용체 신호전달과 정에 미치는 영향을 분석하고자 인간의 TMP21 cDNA를 합성하고, CMV promoter 조절 하에 hTMP21를 클로닝 하여, \( \mathrm { CMV } / \mathrm { hTMP } 21 \) 벡터를 제조하였다. 그리고 이들 벡터를 B35 neuroblastoma에서 과발현시킨 후 \( \gamma \) -secretase 구성단백질과 \( \mathrm { NGF } \) 수용체 연관 단백질의 변화를 관찰하였다. 그 결과, 4 종류의 \( \gamma \)-secretase 구성단백 질의 발현은 vehicle transfectants보다 CMV/hTMP21 transfectants에서 유의적으로 감소하였다. 또한 NGF low affinity 수용체인 \( \mathrm { p } ^ {\text { NT5R } } \) 과 downstream 단백질인 RhoA의 양은 NGF를 처리하지 않은 TMP21 transfectants에서 유의적으로 증가하였으나 NGF 처리에 의해 감소되었다. High affinity NGF 수용체인 TrkA의 인산화도 NGF 처리가 없는 경우 유의적으로 감소하였으나 NGF 처리에 의해 증가되었다. 또한 downstream 신호전달 과정 중 에서 ERK의 인산화는 TrkA와 유사한 발현변화를 나타내었으나 Akt 인산화는 \( \mathrm { NGF } \) 의 처리에 의해 더욱 증가하 였다. 이러한 결과는 TMP21이 neuroblastoma에서 NGF 수용체 신호전달과정를 조절하는 중요 한 단백질로서 작용함을 제시하며, \( \mathrm { AD } \) 의 작용기전 연구에 중요한 기초자료를 제공할 것으로 사료된다.</p>