조사지점은 탁수수계로 반변천 상류 수계의 영양군 화매천 일대 3개 지점과 비탁수수계로 청송군 신흥천 일대 3개 지점을 선정했으며, 시료 채취는 강우 집중 시기인 2007년 6월 8월 3회에 걸쳐 진행하였고, 족대와 투망 어항을 사용해 어류를 채집했다. 수질 분석은 현장에서 다항목측정기를 이용하여 측정하였으며, 원소와 토양 성분의 분석은 각각 에너지 분산형 X-선 측정기, X-선 회절기를 이용했다. 어류의 조직관찰은 완전히 건조된 시료 표면에 금을 코팅한 후 주사전자현미경을 통해 아가미 표면의 미세구조를 확인했다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>시료 채취</h2> <p>조사지점은 탁수수계로 반변천 상류 수계의 영양군 화매천 일대 3개 지점과 비탁수수계로 청송군 신흥천 일대 3개 지점을 선정하였으며 각 행정구역의 명칭은 다음과 같다.</p> <p>시료채취는 강우가 집중되는 6월 8월(2007년) 3회에 걸쳐 채집하였으며, 어류 채집은 족대 \( (5 \times 5 \mathrm{~mm}) \)와 투망, 어항 등을 사용하였다. 채집된 어류는 현장에서 Kim과 Park을 참고하여 동정하였으며, 외부 형태적 손상이 나타나지 않은 참갈겨니(Zacco koreanus)와 피라미(Zacco platypus)를 어종 당 10마리씩 사용하였다.</p> <h2>수질과 토양의 분석</h2> <p>수질 분석을 위해 수온, pH, 용존산소(Dissolved oxygen, DO), 탁도(Turbidity)의 분석은 현장에서 다항목측정기(YSI 660 , YSI)를 이용하여 측정하였다. 또한 BOD, 부유물질 (Suspended solid, SS)의 측정은 11 무균 채수병을 이용하여 하천수를 채수 한 후 분석까지의 운반과 저장은 아이스박스와 차량용 냉장고를 이용하여 저온상태를 유지한 후 공정시험법에 따라 측정하였다.</p> <p>토양의 성분 분석을 위해 채취한 토양의 전처리는 이물질을 제거한 후 각각 유리접시 위에 균일한 두께로 하여 건조기 \( 110 \pm 5^{\circ} \mathrm{C} \) 에서 8시간 건조하여 수분을 완전히 제거하였다. 건조된 시료는 막자사발로 실험에 필요한 일정한 양을 1차 분쇄하여 \( 2 \mathrm{~mm} \) 표준망체(No. 8)에 통과시킨 후 통과된 시료를 다시막자사발과 막자를 이용하여 2차 분쇄하였다. 분쇄한 시료는 눈금간격 \( 0.16 \mathrm{~mm} \) 표준망체(No. 100)를 통과시켜 균일하고 부드럽게 만들어 시료로 사용하였다. 전처리된 시료는 에너지 분산형 X-선 측정기(JSM-6300, Jeol)를 이용하여 시료에 함유되어 있는 원소를 분석하였고, 토양의 성분은 X-선 회절기 (D/Max-2000, Rigaku)를 이용하여 분석하였다.</p> <h2>조직 관찰</h2> <p>광학 현미경 관찰은 어류의 아가미와 신장을 절취하여 FAA로 24시간 고정 후 수세, 탈수 과정을 거쳐 일반적인 조직 제작 방법에 따라 조직을 파라핀 포매하였다. 이 후 파라핀 블록을 두께 \( 4 \sim 6 \mu \mathrm{m} \) 로 제작하여 hematoxylin과 eosin에 이중염색한 후, 광학현미경 하에서 관찰하였으며 사진 촬영은 Olympus DP-71을 사용하였다.</p> <p>주사 전자현미경 관찰은 어류의 아가미를 절취하여 glutaraldehyde \( (2.5 \%) \)에서 2시간 전고정 후 \( 0.1 \mathrm{M} \) phosphate buffer \( \mathrm{pH~} 7.0 \)로 15분씩 3회 세척하였다. 후고정은 \( 1 \% \) osmium tetraoxide \( \left(\mathrm{O}_{5} \mathrm{O}_{4}\right) \)에 1 2시간 고정 시켜 탈수 과정을 거친 후 냉동건조기에서 건조시켰다. 완전히 건조된 시료의 표면에 금 코팅을 실시한 후 주사전자현미경(S-2500C, Hitachi) 하에서 아가미 표면의 미세구조를 관찰하였다.</p>