지모 뿌리 추출물의 주성분인 mangiferin과 nyasol의 특성은 항산화효능을 중심으로 알려져 있다. Mangiferin은 망고에서 발견되며, 항산화 효능 외에도 matrix metalloproteinase-1 (MMP-1)에 대한 저해활성 및 항당뇨, 항균 효과를 보유하고 있다. Nyasol은 항암 및 항진균 효능을 포함한 다양한 생물학적 활성을 가지고 있다. 이를 통해 지모 뿌리 추출물의 주성분인 mangiferin과 nyasol이 지모 추출물의 항균 및 항산화 활성 뿐만 아니라 세포 보호 효과에 중요한 역할을 한다는 것이 확인되었다.
<p>지모 뿌리 에틸아세테이트의 HPLC 성분분석: 지모 뿌리 에틸아세테이트 분획의 TLC 및 HPLC 크로마토그램은 Fig. 10 에 나타내었다. HPLC 크로마토그램의 peak를 동정하기 위 해 TLC 크로마토그램에서 분리하여 구한 시료를 HPLC 분석 시료로 사용하였다. HPLC 분석결과 크게 에틸아세테이트 분획물에서는 2 개의 peak로 나타났고, 아글리콘 분획물에서는 1 개의 피크가 크게 나타났다. \( \mathrm { AAB } 4 \left ( \mathrm { R } _ {\mathrm { f } } 0.26 \right ) \) 은 Fig. 10 의 HPLC peak 1 (mangiferin), AAB \( 1 \left ( \mathrm { R } _ {\mathrm { f } } 0.74 \right ) \) 은 peak 2 (nyasol)과 일치함을 확인하였다.</p> <p>성분 분석을 통해 확인된 mangiferin과 nyasol은 지모 뿌리 추출물의 주성분으로서 항산화효능은 여러 연구를 통해 알려져 있다. 페놀성 화합물인 mangiferin은 망고에서 주로 발견되며, 항산화 효능뿐만 아니라 matrix metalloproteinase-1 (MMP-1)에 대한 저해활성 및 항당뇨 및 항균 효 과를 가지고 있다고 보고되었다. Nyasol은 폴리페놀 화합물로 지모 뿌리에서 주로 발견된다. Nyasol은 다양한 생물학적 활성을 띄는 것으로 알려져 있는데, 항암 작용 및 항진균 작용에 효능이 있다고 알려져 있다. 따라서 본 TLC 및 HPLC 성분 분석을 통해 지모 뿌리 추출물의 주성분인 manigerin과 nyasol이 지모 추출물의 높은 항균 활성 및 항산화 활성을 더불어 세포 보호 효과에 기여한다고 사료된다.</p> <h1>요 약</h1> <ol type=1 start=1><li>Agar diffusion test를 통해 지모 뿌리 추출물의 항균활성 확인 결과 호기성 그람 양성 균주인 S. aureus에서 추출물 및 모든 분획물에서 저해환을 나타내었고, 에틸아세테이트 분획물이 대조군으로 사용된 메틸파라벤보다 더 높은 항 균활성을 나타내었다.</li> <li>최소저해농도(MIC)와 최소사멸농도(MBC/MFC)를 통해 더 정확한 지모 뿌리 추출물의 항균활성을 확인하고자 하였다. 그 결과 곰팡이균인 A. niger를 제외한 모든 균주에서 \( \mathrm { MIC } \) 농도를 확인하였고, 특히 호기성 그람 양성 균주인 \( S \). aureus와 호기성 그람 음성 균주인 P. aeruginosa 그리고 진균인 C. albicans에서 에틸아세테이트 분획과 아글리콘 분획물이 낮은 농도에서 각 균주를 저해하는 것을 확인하였다.</li> <li>\( \mathrm { DPPH } \) 법을 통해 지모 뿌리 추출물의 자유 라디칼 소거 활성 \( \left ( \mathrm { FSC } _ { 50 } \right ) \) 을 확인한 결과 가장 높은 활성을 나타낸 것은 에틸아세테이트 분획물 \( (23.19 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ) \) 이고 아글리콘 분획물 \( (71.06 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ), 50 \% \) 에탄올 추출물 \( (146.2 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ) \) 순서로 나타났다.</li> <li>지모 뿌리 추출물의 총 항산화능 \( \left ( \mathrm { OSC } _ { 50 } \right ) \) 을 확인하기 위해 luminol 발광법을 통해 확인하였다. 실험 결과 에틸아세테이트 분획물 \( (1.5 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ) \) 과 아글리콘 분획물 \( (1.4 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ) \) 이 대조군으로 사용된 L-ascorbic acid ( \( 1.3 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } ) \) 과 비슷한 활성을 나타내며 높은 총 항산화능을 나타내었다. 또한 에틸아세테이트 분획물이 \( 50 \% \) 에탄올 추출물보다 약 11 배 더 높은 활성을 띄는 것을 확인하였다.</li> <li>\( { } ^ { 1 } \mathrm { O } _ { 2 } \) 으로 유도된 세포 파괴에 대한 세포보호 효과 \( \left ( \tau_ { 50 } \right ) \) 를 확인한 결과 지모 뿌리 추출물과 분획물 모두 농도의존적으로 세포보호효과를 나타내었다. \( 50 \% \) 에탄올 추출물은 \( 8 \mu \mathrm { g } / \) \( \mathrm { ml } \) 의 농도 \( (34.5 \mathrm { ~min } ) \) 에서, 에틸아세테이트 분획물은 \( 4 \mu \mathrm { g } / \) \( \mathrm { ml } \) 의 농도 \( (64.4 \mathrm { ~min } ) \) 에서, 아글리콘 분획물은 \( 8 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 의 농도 \( (215.9 \mathrm { ~min } ) \) 에서 가장 높은 보호효과를 나타냄을 확인하였다.</li> <li>지모 뿌리 추출물의 \( \mathrm { HaCaT } \) 세포독성평가를 진행한 결과, 본 실험에서는 \( 0.02-2 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 로 농도를 설정하여 세포보호실험을 진행하였다.</li> <li>과산화수소로 유도된 세포 손상에 대한 세포 보호 효과를 확인한 결과, \( 50 \% \) 에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획물 및 아글리콘 분획물의 최대 생존율은 각각 \( 86.23,86.59 \) 및 \( 89.70 \% \) 를 나타냈으며 과산화수소를 처리한 양성 대조군에 비하여 세포 생존율을 각각 \( 8.07,8.42 \) 및 \( 11.53 \% \) 증가시켰다.</li> <li>HaCaT세포에 UVB를 조사하여 세포 내 ROS 소거활성 평가를 진행한 결과, 자외선으로 유도된 세포 손상에서 아글리콘 분획물은 \( 2 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 농도에서 \( \mathrm { UVB } \) 를 처리한 양성 대조군 대비 \( 41.77 \% \) 까지 세포내 ROS를 감소시켰다.</li> <li>실험을 통해 높은 생리활성을 나타낸 지모 뿌리 에틸아세테이트 분획물을 TLC 및 LS/ESI-MS를 통해 성분분석을 진행하였다. 그 결과 mangiferin, isomangiferin, timosaponinA-III, nyasol을 확인하였다.</li></ol> <p>본 연구의 결과를 통해 지모 뿌리 추출물의 항균 및 항산화 작용과 더불어 세포보호효과를 통해 천연 화장품 소재로서의 응용 가능성이 있음을 확인하였다.</p>