Vibrio sp. YE-101, 복어 장내에서 분리된 TTX 생산능력이 있는 해양 미생물에 대한 배양 조건 최적화를 진행한 결과를 제시한다. 이 연구는 반응표면분석법을 이용해 최적화된 배양 조건을 도출, 이를 통해 균체의 최종 O.D. 값을 약 80% 향상시켰다. 또한, TTX의 생성은 균체의 대수 성장기에 시작되며, 균체 농도가 증가함에 따라 생성된 TTX의 양도 87% 향상되었다.
<h2>Vibrio sp. YE-101 회분식 배양 및 TTX 생산</h2> <p>반옹표면분석을 통해 언은 최적 배양조건에서 Vibrio sp. YE-101를 회분 배양하고 TTX 생성을 측정하였다. Fig. 3에서와 같이 Vibrio sp. YE-101의 균체 생장과 TTX 생성과의 관계는 전형적인 이차대사산물의 생성 헝태라기보다는 혼합 산물 생산 형태를 보이고 있어, TTX의 생성능이 있는 다량의 균체 확보를 위한 배양 조건 최적화가 중요함을 확인할 수 있었다. 기존 조건에서의 균체 배양시 생장 지연기가 약 12 시간 정도블 보였으나, 반응표면 분석을 동해 얻은 최적 조건에서는 약 3 시간 정도의 지연기를 거친 후 대수 성장기에 접어들고 있음을 관찰 할 수 있었다. 최종 O.D. 값은 약 \( 2.3 \) 정도로 반응표면분석법에서 예측한 값과 유사하였다. 이와 같이 반ㅇㅇㅇ표면 분석법을 이용한 배양 조건 최적화를 통해 기존 결과 대비 최종 O.D. 값을 약 \( 80 \% \) 증가시킬 수 있었고, 최종 O.D. 값에 도달되는 시간도 반 정도로 줄일 수 있었다. TTX도 균체 생장이 대수 성장기를 거치면서 생성되기 시작하였으며, 균체 농도가 높아짐에 따라 생성된 \( \mathrm { TTX } \) 의 양도 증가되어 약 \( 87 \% \) 정도 향상된 결과를 얻을 수 있었다.</p> <h1>요 약</h3> <p>본 연구에서는 복어 장내에서 분리하여 TTX 생성능이 확인된 해양 미생물인 Vibrio sp. YE-101의 배양 조건 최적화를 실시하였다. 주요 배양 조건인 \( \mathrm { pH } \), 온도, \( \mathrm { NaCl } \) 농도에 대하여 중심합성계획법울 이용하여 실험점을 결정하였고, 각 조건에서 얻은 실험치를 quadratic least-square re-gression을 실시하여 최적 배양 조건을 결정하였다. 최적 \( \mathrm { pH } \), 온도, \( \mathrm { NaCl } \) 농도는 각가 \( 8.1,29.2 ^ {\circ } \mathrm { C } , 2.6 \%( \mathrm { w } / \mathrm { v } ) \) 로 결성되었으며, 이 조건에서 균체 배양을 실시한 셜과 기존 실험치 대비 최종 O.D. 값이 약 \( 80 \% \) 정도 증가되었다. 또한, 생성된 최종 TTX 농도도 약 \( 15 \mathrm { MU } \) 정도로 약 \( 87 \% \) 정도 증가시킬 수 있었다.</p>