흰쥐를 통한 면역조직화학적 연구를 총해 관찰한 바, Sparmann의 DBTC 투여와 본 연구자의 앞선 췌장염 유발 및 염증 진행 과정의 유사함, van Gieson 염색을 통한 세포 증가 현상은 collagen 형성에 영향을 주지만 야콘 추출물에 의해 역제되고 있음을 확인하였다. 조직에서 prostaglandins (PGs) 를 생성하여 염증과 통증을 유발하는 것으로 보고되는 효소는 Cyclooxygenase (COX)이며 COX-1과 COX-2의 두 개의 isoenzyme가 있다. 췌장염 유발 초기 동안 높은 발현율에는 이들의 발현이 있었고, Ethridge 등은 항염증 사이토카인인 TGF-\( \beta \)1이 급성 췌장염의 극심한 발병 진행을 감소시키고, COX-2를 억제시키는 것을 보였다. 하지만 염증이 진행될 수록 COX-2와 TGF-\( \beta \)1이 증가되는 경향을 보였고 이는 몇몇 질병과정에서 섬유증 발달에 매우 중요한 역할을 하는 것으로 보고되고 있다. 본 연구는 TGF-\( \beta \)1이 췌장에서 collagen 합성을 이끄는 중요한 요소이지만, 이는 반대로 섬유화 진행을 야기시키기에 야콘추출물이 만성췌장염의 염증세포로부터 TGF-\( \beta \)1의 발현을 억제함으로 섬유화 진행을 억제함을 발견하였다.
<h1>고 찰</h1><p>Sparmann 등에 의하면 흰쥐에 DBTC \( (8 \mathrm{mg} / \mathrm{kg}) \)를 투여한지 24시간 후 급성 부종, 7일째는 호중성 백혈구, 단핵구의 증식과 섬유모세포의 수가 증가되고 가끔 샘꽈리세포의 괴사가 관찰되었으며, 14일째 도관주변에 결합조직이 침착되며 사이질로 퍼져나가는 것이 관찰되었다고 보고하였다. 본 연구자의 앞선 실험 결과 또한, 췌장염 유발 및 염증 진행 과정이 유사하게 나타났으며, 본 실험에서 van Gieson 염색을 통한 collagen 변화에서도 췌장조직의 사이질로 증식, 침투하는 단핵구 및 섬유모세포 증가와 비례하였으며, 이들 세포의 증가 현상은 collagen 형성에 영향을 미치고 있음을 알 수 있다. 샘꽈리세포들의 괴사로 인해 collagen이 형성되어 조직의 재구성이 이루어 지고 있으나, 야콘추출물에 의해 그 현상들이 억제되고 있음을 확인할 수 있었다.</p><p>collagen 형성에 미치는 영향을 구체적으로 확인하기 위하여 면역조직화학적 연구를 통해 관찰하였다. Cyclooxygenase (COX)는 COX-1과 COX-2의 두 개의 isoenzyme이 있으며, prostaglandins (PGs)의 합성을 조절하는 효소이기도하다. 또한 PGs는 섬유모세포 증식과 type Ⅰ collagen 생성을 조절할 수 있는 것으로 알려져 있다. COX 중 COX-1은 대부분의 세포에 널리 분포하고 있으며, COX-2는 사이토카인, 성장인자, 종양촉진인자 등의 여러 자극에 의해 유도되며, 주로 조직에서 PGs를 생성하여 염증과 통증을 유발하는 것으로 보고되고 있다. Ethridge 등에 의하면, 정상적인 췌장의 경우 COX-2 발현이 혈관의 평활근세포에서 낮게 나타났으며 샘꽈리세포에서는 확인되지 않았으나, cerulein으로 유도된 마우스의 췌장염에서는 전체 샘꽈리세포에서도 발현이 나타났으며 특히, 세포의 괴사와 염증이 일어난 지역 가까운 곳에 있는 샘꽈리세포에서 더욱 두드러진 발현 현상이 있었고, 이들 발현은 췌장염 유발 초기 동안 높은 발현율을 보였다고한다. Ethridge 등은 항염증 사이토카인인 TGF-\( \beta\)가 실험모델에서 급성 췌장염의 극심한 발병 진행을 감소시키는 것으로 보고하고 있으며, COX-2는 이들 사이토카인에 의해 억제되며, 췌장염으로 인한 염증 진행에 중요한 지표로 작용한다고 보고하였다. 본 실험에서 관찰한 COX-2 발현이 DBTC 처리 21일째 유발군에서는 증가를 확인할 수 있었으며 특히, 결합조직에 침윤한 염증관련 세포와 손상이 심한 지역의 샘꽈리세포에서 발현이 명확히 증가되었으나 처리군에서는 감소를 보였다. 또한 샘꽈리세포에서 나타난 COX-2 발현이 유발군에서는 강하게 나타난 반면 TGF-\( \beta \)1의 발현은 거의 관찰되지 않았으며, 처리군의 경우는 샘꽈리세포에서의 COX-2 발현보다 TGF-\( \beta \)1의 발현이 유발군에 비해 강하게 관찰되었다. 이것은 Ethridge 등 보고와 같이, 샘꽈리세포에서 TGF-\( \beta\)1 이 COX-2의 발현을 억제시켜 염증 진행이 억제된 것으로 보인다. 그러나 결합조직에서 침윤, 증식하고 있는 섬유모세포 및 염증관련세포들에는 염증이 진행될 수록 COX-2와 TGF-\( \beta \)1이 증가되는 경향을 나타내었다. 이것은 TGF-\( \beta \)1 이 췌장의 샘꽈리세포에서와 결합조직 즉, 세포사이질 조성에 미치는 영향은 다르게 나타났다. TGF-\( \beta \)1의 발현이 실질조직에서 세포보호 효과를 나타내는 반면 단핵구와 섬유모세포에서 발현되는 경우에는 또 다른 영향을 미친다. 세포사이질 조성 분포는 췌장에서 정상인 경우와 질병으로 인한 경우에 차이가 나며, 그 중 TGF-\( \beta \)1은 섬유조직의 성장에 중요한 역할을 하고, 세포사이질 합성을 자극하고 그것의 퇴화를 억제한다. TGF-\( \beta \)1은 간경변, 사구체신염, 특발성 폐섬유증과 같은 몇몇 질병과정에서 섬유증 발달에 매우 중요한 역할을 하는 것으로 보고되고 있다. 췌장에서의 섬유증은 세포괴사, 염증 또는 도관 폐색과 같은 과정에 의해 유발되며, 이것은 세포사이질 형성, 샘꽈리세포가 사라지거나 도관세포가 손상된 곳에서 나타나 결국, 췌장 소엽의 구조적 소실로 나타나게 된다. Sparmann 등에 의하면 DBTC로 유도된 췌장염에서 7일째 섬유증 발달로 단핵구가 광범위하게 침윤되어 있었으며, messenger RNA-encoding collagen type Ⅰ과 TGF-\( \beta \)1의 상승도 보였다고 보고하였다. 또한 TGF-\( \beta \)1이 췌장에서 collagen 합성을 이끄는 중요한 요소이며, Van Laethem 등은 사람의 만성췌장염에서 단핵구, 섬유모세포, 몇몇 도관세포에서 TGF-\( \beta \)1이 관찰되었다고 보고하였다. 본 연구에서 유발군의 TGF-\( \beta \)1 발현이 대조군과 처리군에 비해 강한 발현을 나타냈으며, 특히 유발 21일째군에서는 섬유화로 진행되면서 섬유모세포, 단핵구에서 TGF-\( \beta \)1의 발현이 쉽게 관찰된 반면, 처리군에서는 이러한 염증세포의 증가도 유발군에 비해 현저히 낮았을 뿐만 아니라 이들 세포에서의 TGF-\( \beta \)1 발현도 거의 관찰되지 않았다. 이는 염증세포로부터 발현되는 TGF-\( \beta \)1에 의해 collagen합성이 유도되고 이로 인해 섬유화로 진행되는데 야콘추출물은 염증세포로부터 TGF-\( \beta \)1의 발현을 억제함으로써 섬유화 진행을 억제하고 있음을 알 수 있다.</p>