실험에 사용된 시료는 경남 밀양에서 생산되는 대추의 씨를 자연건조 후 저온실에 보관하고 증류수와 함께 끓여서 그 추출액을 사용하였다. 실험동물은 Sprague Dawley계 숫 흰쥐를 기초식이로 10일간 예비사육 후 실험에 들어갔으며 총 3개의 식이조성 및 실험군으로 나누어 실험하였다. 실험 사육 4주 후 마취 하에 채혈을 하고 그것의 혈청을 이용하여 혈당 농도, 혈청 중 총 콜레스테롤, LDL, 중성지질 농도 등을 측정하였다. 또한 혈청 중 aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase 및 lactate dehydrogenase 등의 활성을 측정하였으며 이 결과들은 실험군 당 평균치와 표준오차를 계산하였고 군간의 차이는 Duncan's multiple range test 로 하여 통계처리 하였다.
<h1>재료 및 방법</h1><h2>시료의 추출 및 조제</h2><p>실험에 사용된 시료는 경남 밀양에서 생산되는 대추를 구입하여 과육을 제거한 후 씨를 얻어 그늘에서 자연건조 후, 저온실 \( \left(4^{\circ} \mathrm{C}\right)\)에 보관하며 본 실험에 사용하였으며, 대추씨 \( 35 \mathrm{~g} \)을 \( 1000 \mathrm{~ml}\) 삼각 플라스크에 취해 증류수(D.W) \(700\mathrm{ml} \)를 가하여 \( 450 \mathrm{~ml}\)가 될 때까지 끓인 후 추출액을 다른 용기에 옮기고 다시 삼각 플라스크에 D.W \(500\mathrm{ml}\)를 가하여 \(350\mathrm{ml}\) 될 때까지 가열처리 하였다. 상기와 같이 추출한 후의 잔사에 D.W \( 400 \mathrm{~ml}\) 가하여 \( 200 \mathrm{~ml}\)가 될 때까지 끓인 후 이들을 합하여 \( 1000 \mathrm{~ml} \)로 만들어 \( 3.5 \mathrm{~g} \% \)의 농도로 추출한 후 \( 4^{\circ} \mathrm{C} \)로 냉장 보관하여 본 실험의 시료로 사용하였다.</p><h2>실험동물</h2><p>평균 체중이 \( 60 \pm 5 \mathrm{~g} \)인 Sprague Dawley계 숫 흰쥐를 \( 5 \% \) 옥수수유(동방유량)를 함유하는 기초식이를 10일간 예비사육하여 적응시킨 후 난괴법(Randomized Complete Block Design)에 의해서 6마리씩 3군으로 분군하여 4주간 실험 사육하였다. 예비사육 및 실험사육 기간 중 물 및 대추씨 추출액은 자유로이 섭취시켰으며, 사육실의 온도는 \( 20 \pm 1^{\circ} \mathrm{C} \), 습도는 \( 50 \pm 10 \% \)로 유지시켰고, 명암은 12시간(07:00~19:00)주기로 조명하였다.</p><h2>식이 및 실험군</h2><p>식이조성 및 실험군은 Table 1과 같이, 기본식이에 물만 섭취시킨 1군, streptozotocin (STZ, \(55\mathrm{mg}/\mathrm{kg} \) B.W., I.P. injection)을 \(0.01\mathrm{M}\) citrate buffer ( \( \mathrm{pH} 4.5) \)용액에 용해한 후 복강내 주사하여 당뇨병을 유발시킨 실험군(2군)에 물을 급여하고, 3군은 STZ을 복강 주사한 군에 대추씨 생리활성물질 추출액을 실험 전 기간동안 자유로이 섭취시켰다.</p><h2>실험동물의 처리</h2><p>실험 사육 4주간의 최종일에는 7시간 절식시킨 후 에테르 마취 하에 심장채혈법으로 채혈하였으며, 혈액은 약 1시간정도 빙수 중에 방치한 후 \(3,000 \mathrm{rpm}\)에서 15분간 원심분리하여 혈청을 취하여 실험에 사용하였다.</p><h2>혈당 농도의 정량</h2><p>혈당 농도는 혈당 측정용 kit 시약(GLzyme, Eiken, Tokyo, Japan)으로 측정하였다.</p><h2>혈청 중의 총 콜레스테롤, 유리 콜레스테롤 및 콜레스테롤 에스테르 농도</h2><p>혈청 중의 총콜레스테를 농도는 총콜레스테롤 측정용 kit 시약(Cholestezyme-V, Eiken, Tokyo, Japan), 유리콜레스테롤 농도는 유리콜레스테롤 측정용 kit 시약(Free-choles-tezyme-V555, Eiken, Tokyo, Japan)으로 측정하였으며, 콜레스테롤 에스테르 농도는 총콜레스테롤 농도에서 유리콜레스테롤 농도를 뺀 값으로 표시하였다.</p><h2>LDL, LDL-콜레스테롤 및 HDL-콜레스테롤 농도의 정량</h2><p>혈청 LDL의 농도는 LDL 측정용 kit 시약( \( \beta \)-lipoprotein C-Test, Wako, Osaka, Japan)으로 측정하였으며, LDL-콜레스테롤 농도는 LDL농도에 0.35를 곱한 값으로 표시하였다. HDL-콜레스테롤 농도는 HDL-콜레스테롤 측정용 kit 시약(HDL -C555, Eiken, Tokyo, Japan)으로 측정하였다.</p><h2>중성지질 및 인지질 농도의 정량</h2><p>혈청 중의 중성지질 농도는 중성지질 측정용 kit 시약 (Triglyzyme-V, Eiken, Tokyo, Japan)으로, 인지질 농도는 인지질 측정용 kit 시약 (PLzyme, Eiken, Tokyo, Japan)으로 측정하였다.</p><h2>Aminotransferase의 활성 측정</h2><p>Reitman과 Frankel의 방법에 준해 조제된 kit 시약(혈청 transaminase 측정시약, Eiken, Tokyo, Japan)을 사용하여 혈청중 aspartate aminotransferase(AST, EC 2.6.1.1) 및 alanine aminotransferase (ALT, EC 2.6.1.2) 활성을 측정하였으며 단위는 혈청 \( 1 \mathrm{ml} \)당 unit로 표시하였다.</p><h2>Lactate dehydrogenase의 활성 측정</h2><p>혈청 중 lactate dehydrogenase(LDH, EC 1.1.1.27)활성은 혈청 LDH 측정용 kit 시약(LDH, Neo D, Eiken, Tokyo, Japan)으로 측정하여 혈청 \( 1 \mathrm{ml} \)당 unit로 표시하였다.</p><h2>Alkaline phosphatase의 활성 측정</h2><p>혈청 중 alkaline phosphatase(ALP, EC 3.1.3.1)활성은 혈청 ALP측정용 kit시약(NEW-K-PHOS, Eiken, Tokyo, Japan)을 사용하여 측정하였으며, 혈청 \( 1 \mathrm{ml} \)당 unit로 표시하였다.</p><h2>통계 처리</h2><p>분석결과의 통계 처리는 실험군 당 평균치와 표준오차를 계산하였고 군간의 차이는 \( \mathrm{P}<0.05 \) 수준에서 Duncan's multiple range test 로 하였다.</p>