반추위 혼합 미생물의 기질 부착성 관찰을 위해, SEM 촬영을 위한 전처리를 Ho 등의 방법과 glutaraldehyde, caco-dylic buffer, ethyl alcohol 등을 사용하여 고정하고 탈수한 후 critical point drying method로 mounting하고 gold를 분사하여 시료표면에 증착시킨 후 SEM으로 미생물의 부착양상을 관찰하였다. 반추위 혼합미생물은 8시간 이후로는 모든 처리구에서 건물소화율이 높아졌으나 건물소화율이 증가되는 정도는 NIS 처리구에서 높았다.
<p>반추위 혼합 미생물의 기질 부착성 관찰은 공시된 반추위 혼합 미생물이 공시된 각종 기질에 부착하는 정도나 양상을 관찰하기 위하여 전자현미경 SEM (scanning electron micro-scopy)을 촬영하였다. SEM 촬영을 위한 전처리는 Ho 등의 방법을 응용하여 진공상태에서 시료의 변형을 방지하기 위하여 \( 0.5 \% \) 와 \( 5 \% \) glutaraldehyde용액으로 고정한 후, caco-dylic buffer로 세척하여 유기용매 치환법으로 10, 20, 30, 50, 70, 90 및 \( 100 \% \) 의 ethyl alcohol을 차례로 30분간 통과시켜 탈수 시켰다. 탈수가 끝난 시료를 임계점 건조법(critical point drying method)으로 시료를 내압한 다음 mounting 시켰다. 진공 증착장치에서 금(gold)를 분사하여 시료표면에 증착시킨 후 SEM으로 미생물의 부착양상을 관찰하였다.</p> <h1>결과 및 고찰</h1> <h2>In vitro 건물 소화율</h2> <p>반추위 혼합미생물에 의한 공시시료의 in vitro 건물 소화율은 Table 2에서와 같다. 배양 8시간 이후부터 NIS의 처리여부에 관계없이 모든 처리구에서 건물소화율이 급격히 증가하였다. 그러나 배양시간의 경과에 따라 건물소화율이 증가되는 정도는 NIS 처리구가 무처리구에 비해 유의적으로 높았다 \( ( \mathrm { P }<0.05) \). 발효 48시간대를 기준으로 볏짚, 알팔파 건초, filter paper 및 톨페스큐 건초의 건물 소화율을 비교할때 톨페스큐 건초의 건물 소화율이 \( (52.54 \%) \) 가장 높았고 볏짚이 \( (37.36 \%) \) 가장 낮았다. 48시간대 NIS 첨가구의 건물 소화율은 각각 40.06, 60.74, 61.03 및 \( 64.12 \% \)로 측정 되어 NIS의 첨가로 인하여 건물 소화율이 각각 7.22, 28.74, 45.30 및 \( 22.04 \% \)정도 향상됨을 보였다. 이러한 증가율은 가장 최근에 볏짚에 관해서 review된 Van Soest의 종설결과와 비교해 볼 때, in vitro 상에서 볏짚의 물리적 처리(Steam와 Pressure)에 의한 증가 약 \( + 39 \mathrm { ~ml } ~( \mathrm { g } / \mathrm { kg } ) \sim + 88 ~( \mathrm { g } / \mathrm { kg } ) \)이나 화학적 처리(ammonia 처리와 urea처리)에 의한 증가율 약 \( + 72 \sim + 330~( \mathrm { g } / \mathrm { kg } ) \) 그리고 미생물 처리시 보다도 더 효과적이라는 것을 입증하는 결과라고 생각된다. 또한 국내에서 Lee와 Ha 및 Lee 등의 연구결과를 바탕으로 비이온성 계면활성제 Tween 80은 반추위 미생물의 성장률을 촉진시키고 혐기성 미생물이 분비하는 섬유소 효소의 분비를 촉진시키고 섬유소 소화율을 증가시킴으로써 동물의 생산성을 향상시키기 때문에 사료 첨가제로서의 개발 가능성을 시사하였다. 실제로 Tween 80 은 국내에서 2005년도에 사료첨가제로 개발되어 많은 양이 시판되고 있다.</p>