본 연구에서는 차가버섯균사체 생장과 세포외 다당체 생산이 \( \mathrm { pH } \) \( 5.5,25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 및 \( 150 \mathrm { rpm } \)의 교반속도에서 Flask 진탕배양 11일 후에 최대치임을 확인하였다. 또한 차가버섯 유래 다당체들의 처리 농도가 높을수록 항보체 활성이 높게 나타나 차가버섯 유래 세포내 · 외 다당체들이 항종양 물질로써의 가능성이 있음을 입증하였다.
<p>교반속도는 \( 150 \mathrm { rpm } \) 에서 가장 높은 균사체 수율과 세포외 다당체 생산이 되었고, 125 와 \( 175 \mathrm { rpm } \) 에서는 비교적 양호한 편이었으나, \( 100 \mathrm { rpm } \) 이하의 교반 속도에서는 급격히 감소하였다. 낮은 교반속도에서는 균사체의 pellet 크기가 증가함에 따라 균사체 내로의 산소 전달 및 배지 영양성분의 홉수나 이용이 곤란하여 균사체의 생장이 저하되기 때문이라 생각된다. Natarajan과 Raman이 Lentinus cladopus의 액체배양시 camp connection에 의한 균사체의 생장 정도가 정치배양에서는 \( 95 \% \) 나 되지만 회전 진탕배양 시에는 \( 51 \% \) 로 떨어진다고 보고한 것으로 보아 교반속도가 높다고 해서 균사체 수율 및 세포외 다당체 생산이 많은 것이 아니라 적정한 교반속도에서 최대의 균사체 생장과 세포외 다당체 생산이 되는 것으로 사료된다. 따라서 상기와 같은 결과로 차가버섯균사체 생장과 세포외 다당체 생산을 위한 최적 배양 \( \mathrm { pH } \), 온도, 및 교반속도는 각각 \( 5.5,25 ^ {\circ } \mathrm { C } \) 및 \( 150 \mathrm { rpm } \) 으로 결정하였다.</p> <h2>배양기간에 따른 균사체 수율과 다당체 생산</h2> <p>배양 완료 시기를 결정하기 위해 상기 조건으로 15일 동안 배양한 결과, 배양 11일째 균사체 수율은 \( 10.89 \mathrm { g } / \mathrm { l } \)로 최대였으며, 이때 세포외 다당체 생산도 \( 1.25 \mathrm { g } / \mathrm { l } \)로 최대치를 나타내었다. 정지기(stationary phase) 이후에 균사체의 생장이 감소하는 현상은 영양분의 고갈로 인한 균사체의 lysis때문이고, 세포외 다당체 생산이 감소하는 것은 영양분 고갈 때문에 이를 재이용하기 위한 효소의 분해 현상으로 추측된다. 따라서 Flask 진탕배양 시에는 11일 후 배양을 끝내고 균사체와 세포외 다당체를 회수하는 것이 가장 효과적으로 나타났다.</p> <h2>항보체 활성</h2> <p>차가버섯 균사체의 액체배양에 의해 생산된 세포내,외 다당체들의 다양한 농도에 따른 항보체 활성에 대한 실험 결과는 Fig. 5와 같다. LPS (양성 대조군)보다는 항보체 활성이 낮게 나타났지만, 차가버섯 유래 다당체들의 처리 농도가 높을 수록 항보체 활성이 높게 나타났으며, \( 1,000 \mu \mathrm { g } / \mathrm { ml } \) 농도에서 세포내 다당체는 \( 64.1 \% \), 세포외 다당체는 \( 70.4 \% \)의 가장 높은 항보체 활성을 보였다. 이는 버섯류의 다당체들이 높은 항보체 활성을 가지고 있다고 보고한 Song 등과 Okuda 등 의 결과들과 유사하다. 또한 Lee 등은 보체 시스템이 면역 시스템의 숙주 방어 메카니즘에 의해 항종양 효과와 밀접한 관련이 있다고 보고하였다. 따라서 차가버섯 유래 세포내 · 외 다당체들은 항종양 물질로써 가능성을 가지고 있을 수 있다고 예상할 수 있다.</p>