울금을 열풍건조기로 건조하고 분쇄기로 분쇄하여 증류수로 추출하고, rotary vacuum evaporator로 감압 농축하고 동결건조기로 건조하여 사용하였다. 또한 Sprague-Dawley 종 수컷을 난괴법에 의해 대조군과 실헙군으로 나누어 4주간 사육하고, 12시간 절식 후 ether 마취하에 복부대동맥으로부터 혈액과 간을 채취하여 동결시켜 -80\(^\circ \mathrm{C}\)에 보관하였다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>울금 추출물 분말 제조</h2> <p>본 연구에 사용한 울금은 진도에서 제공받아 열풍건조기를 이용하여 85~80℃로 건조하였다. 울금은 분쇄기(대성파워 믹 서/분쇄기DA-280G, Seoul, Korea)로 분쇄한 울금 당 중량대비 6 배에 해당하는 증류수(w/v)를 가하여 95℃에서 24시간 추출한 후, 위와 같은 조건으로 3회 반복하고 상등액을 모아 여과지(Whatman No. 1)로 여과하였다. 여과한 여액은 rotary vacuum evaporator (HS-2001N, Hanshin Science CO. Korea)를 사용하여 감압 농축하고, 동결건조기(Bondiro, Ilshin, Korea)로 건조하여 사용하였다(각각의 추출물에 대한 수율은 추출 전의 시료 무게에 대한 동결 건조 후 추출물의 무게를 측정하여 나타내었음). 본 연구에서 사용한 울금 분말은 추훌 한 후 동결건조시켜 조제하였다.</p> <h2>실험동물 사육 및 식이조성</h2> <p>본 실험에 사용된 동물은 체중 \( 100 \pm 10 \mathrm { ~g } \) 내외의 Sprague-Dawley 종 수컷을 (주)바이오 제노믹스사(Bio genomics, Inc., Seoul, Korea)에서 구입하여 사용하였다. 실험 식이 시작 전 일주일간 일반배합사료(Purina Co., Seoul, Korea)로 예비사육한 후 평균체중이 유사하도록 난괴법 (randomized complete block design)에 의해 대조군과 실헙 군으로 나눈 후 Table 1 과 같이 나누어 4 주간 사육하였다. 실험기간 중 식이는 4℃ 에서 보관하였으며, 매일 일정 시간 에 공급하여 자유로이 섭취하게 하였다. 사육실의 온도는 \( 22 \pm 2℃ \), 상대습도 \( 50 \pm 10 \% \) 를 유지하였다. 식이 group은 정상군(N group)과 (1%) 고지방 · 고콜레스테롤 식이 실험군으 로 나눈 후 고지방 · 고콜레스테롤 실험군은 고지방 · 고콜 레스테롤 대조군(HF group), 고지방 · 고콜례스테롤식이 + 2.5% 울금분말 공급군(TPA group), 고지방 · 고콜레스테롤 + 5% 울금분말 공급군(TPB group)으로, 군당 10 마리로 총 4군으로 나누어 사육하였다.</p> <h2>체중증가량, 식이섭취량 및 식이효율</h2> <p>식이섭취량은 전 실험기간동안 매일 일정시간에 측정하였 으며, 체중은 3일에 한 번씩 일정시간에 측정하였다. 식이효율(food efficiency ratio, FER)은 전 체중증가량을 같은 기간 동안의 식이섭취량으로 나누어 줌으로 계산하였다.</p> <h2>혈액 및 장기의 채취</h2> <p>사육기간 완료 후 실험동물을 12 시간 절식시키고 가벼운 ether 마취 하에서 복부대동맥으로부터 혈액을 채취하였다. 그 후 즉시 간을 채취하여 생리식염수로 헹군 다음 거즈로 수분을 제거하고 무게를 측정한 후 액체질소로 급속 동결시켜 -80℃ 에 보관하였다.</p> <h2>분변수집 및 배설량 측정</h2> <p>실험기간 중 4 주째에 3 일간 대사 cage에서 분변을 수집하여 건조전의 무게를 칭량하였다. 분변은 -70℃ 급속냉동실에서 항량에 달할 때까지 건조시킨 다음 건조중량을 칭량한 후 분변 sterol 측정 시까지 -80% 냉동고에 보관하였다.</p>