혈소판의 활성화와 응집을 억제 가능한 물질의 발굴이 심혈관계 질환에 대한 치료 및 예방에 있어서 각광받고 있다. 또한, 세포 내 신호 전달에 작용하는 인산화 효소 중 Mitogen-activated protein kinases (MAPK)의 기능에 대해서 꾸준한 연구가 이루어지고 있다. Artesunate가 collagen으로 유도한 혈소판의 응집 여부, 이 과정에서 중요하게 작동하는 \( \mathrm{Akt} \) 및 \( \mathrm{MAPK} \)의 인산화 단백질 및 \( \mathrm{TXA}_{2} \), 혈소판 과립 분비에 미치는 영향을 밝히고자 한다.
<h1>서 론</h1> <p>사람은 혈액을 통해 각 장기와 조직으로 산소와 영양분을 공급받음과 동시에 폐기물 제거가 이루어지기에 정상적인 혈액순환은 생존에 있어 필수적이다. 만일, 혈관의 손상이 일어나면 우리 몸은 출혈을 최소화하고 정상적인 혈액순환을 유지하고자 지혈 반응이 일어나는데, 혈소판의 활성화 및 응집의 과정이 그 시작점이다. 그러나, 과다하거나 비정상직으로 혈소판의 활성화와 응집이 일어나는 경우, 오히려 뇌졸중, 죽상 동맥 경화증 및 혈전증 등의 심혈관계 질환을 일으키는 원인이 되기도 한다. 그러므로, 혈소판의 활성화와 응집을 직절히 억제할 수 있는 물질의 발굴이 심혈관계 질환에 대한 치료 및 예방에 있어서 중요하다고 알려져 있다. 혈관이 손상 받았을 경우, 혈소판이손상된 부-위에서 노출된 혈소퐌 자극유도제(collagen, thrombin 및 ADP 등)에 의해 활성화된다. 특히, collagen은 혈관 손상 시 혈관 내피 세포에서 방출되는 물질로서, 혈소판 막 수용체인 glycoprotein VI (GP VI)에 결합되어 tyrosin kinase 의존성 기전에 의해 phoshpoliase C-\(\gamma {2} \) (PLC- \( \left.\gamma 2\right) \)의 인산화를 유도하여 혈소판을 강력하게 활성화시키는 것으로 알려져 있다. 인산화된 PLC- \(\gamma 2) \)는 혈소판의 phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate 를 diacylglycerol와 inositol 1,4,5-triphosphate ( \( \left.\mathrm{IP}_{3}\right) \) 로 가수 분 해하여 방출시키고, 세포질 내에 증가된 \( \mathrm{IP}_{3}^{2} \) 는 \( \mathrm{Ca}^{2+} \) 채널로 작 용하는 혈소판 내 dense tubular system의 \( \mathrm{IP}_{3} \) 수용체에 결합하 여 \( \mathrm{Ca}^{2+} \) 채널을 열어줌으로써 세포질 내 \( \mathrm{Ca}^{2+} \) 농도의 증가를 유도한다. 또한, 혈소편의 활성화 과정에서, phospholipase \( \mathrm{A}_{2} \) \( \left(\mathrm{cPLA}_{2}\right) \) 가 활성화되년 인지실을 가수분해하여 arachidonic acid 의 증가를 유도하고, 이는 \( \mathrm{TXA}_{2} \) synthase 및 cyclooxygenase-1 의 효소 작용을 거쳐 \( \mathrm{TXA}_{2} \) 로 만들어져 혈소판 세포 외부로 방출된다. 분-비된 \( \mathrm{TXA}_{2} \) 는 주변의 혈소판 막 수용체에 결합 함으로써 수가직인 혈소간 응집을 족발하는 유노제로 기능한다 . \( \mathrm{TXA}_{2} \) 의 유사물질인 \( \mathrm{U} 46619 \) 가 세포실 내 \( \mathrm{Ca}^{2+} \) 동원을 유발하여 myosin light chains와 pleckstrin같은 세포골격단백질을 인산화함으로써 혈소판 응집을 일으킨다고 보고되었다.</p> <p>세포 내 신호 전달에 작용하는 인산화 효소 중 Mitogen-activated protein kinases (MAPK)의 기능에 대해서 꾸준한 연구가 이루어지고 있다[10], MAPK에 속하는 단백질로 ERK, JNK 및 p38 MAPK로 알려져 있는데 이 신호전달 물질들은 사람 혈소간에서도 확인되고 있으며 혈소판 자극유도세에 의해 인산화 됨으로써 활성을 가진다고 보고된 바 있다. MAPK의 인산 화가 혈소판의 과립 분비를 일으켜 혈소판 응집에노 관여하는 것으로 알려져 있다. 그리고, MAPK가 \( \mathrm{cPLA}_{2} \) 를 인산화를 일으켜 혈소판 막의 인지질로부터 arachidonic acid의 분비를 유도함으로써 \( \mathrm{TXA}_{2} \) 셍성 증가를 통해 추가직인 혈소판 응집을 유도한다고도 알려져 있다. 인산화 단백질 중에서 \( \mathrm{Pl} 3 \mathrm{~K} / \mathrm{Akt} \) 경로에 대한 것도 잘 알려져 있는데, 이들의 활성화가 혈소판의 dense 과립 분비를 촉진하여 혈소판 응집을 포함한 혈소판 기능을 조절하는데 역할을 한다고 보고되었다.</p> <p>Artesunate는 Artemisia 속 식물의 부리에서 유래되는 주요 활성 성분인 artemisinn의 반합성 유도체로 낮은 독성과 내성을 가지는 새로운 항말라리아제로 보고된 바 있다. 또한, artesunate가 항암 활성을 보여 임상에서 전이성 흑색종 환자의 치료에 성공적으로 사용된 바 있다. 앞 선 연구에서 artesunate가 뇌즐중의 범위를 크게 감소시키고 신경학적 회복에 도움을 주어 환자의 생존률을 높인다고 보고된 바도 있다. 그러나, 사람 collagen에 의해 유도한 혈소간 응집에서 artesunate의 기능이나 작용기전에 대해서는 현재까지 알려진 바가 없다. 본 연구는 artesunate가 collagen으로 유도한 혈소판 응집을 억제하는지, 그리고 이 과정에서 중요하게 작용하는 \( \mathrm{Akt} \) 및 \( \mathrm{MAPK} \) 의 인산화 단백질 및 \( \mathrm{TXA}_{2} \), 혈소판 과립 분비에 영향을 미치는지 규명하고자 하였다.</p>