야생주와의 생장 양상을 비교하여 \(ompW\) 유전자 결손 돌연변이주의 특성을 파악한 결과, ompW 유전자의 결손은 Salmonella의 in vitro 생장에 있어서 큰 영향을 미치지 않는 것으로 보인다. CK10은 야생주에 비해 더 높은 zeta-potential 수치가 나타났는데, 이는 야생주에 비해 전하값이 더 낮다는 의미이다. MacConkey 배지에 지나친 \( \mathrm { NaCl } \)이 첨가되면 Salmonella 균주의 생장자체가 저해되어 이러한 방법으로는 \(ompW\) 유전자의 발현을 확인할 수 없었다.
<h2>\( O m p W \) 유전자 결손 돌연변이주의 세포 표면 특성 확인</h2> <p>\( o m p W \) 유전자 결손 돌연변이주의 일반적인 특성을 파악하기 위하여 야생주와의 생장 양상을 비교하였다. 영양배지인 LB 배지와 최소배지 모두에서 CK10의 생장은 야생주와 큰차이를 보이지 않는 것으로 보아 ompW 유전자의 결손은<p>Salmonella의 in vitro 생장에 있어서 큰 영향을 미치지 않는 것으로 판단할 수 있었다(data not shown). 일반적으로 그람 음성 세균의 외막 단백질을 제거하면 표면전하를 포함한 다양한 세포표면 특징들에 변화가 일어나는 경우가 있다. 한 연구에서는 외막 단백질의 한 종류인 \( \mathrm { OmpX } \) 가 결손된 \( E \).coli의 zeta-potential에 변화가 일어났음을 보고한 바가 있다. CK10은 야생주에 비해 더 높은 zeta-potential 수치를나타내었으며, 이는 야생주에 비해 전하값이 더 낮다는 것을 의미한다(Table 2A). 이러한 세포 표면전하의 변화는 SDS와 같이 음성전하를 가지는 물질들과의 교차상호반응에 영향을 미칠 수도 있다. 이를 확인하기 위하여 야생주와 CK10 Salmonella를 \( 0.5 \% \) SDS에 10 분간 노출시킨 후, 적당한 농도로 희석하고 LB 고체배지에서 배양하여 살아남은 균의 수를 측정하였다. SDS에 노출되었을 때 야생주는 노출시키지 않았을 때와 비교하였을 때 \( 10 \% \) 정도의 생존율 감소를을 보였다(Table 2B). 반면, SDS에 노출된 CK10 균주는 SDS에 노출되지 않았을 때와 그 생존율이 거의 비슷한 것으로 보아 \( o m p W \) 유전자가 SDS 내성에 다소 영향을 끼친다고 추측할수 있었다. 이러한 영향은 \( \mathrm { OmpW } \) 단백질과 SDS와의 직접적인 작용이라기보다도 \( \mathrm { OmpW } \) 의 유무에 따른 세포표면구성의 변화로 인한 SDS와의 상호작용의 변화 때문이라고 판단된다.</p> <h2>\( \mathrm { NaCl } \) 의 농도에 따른 \( \mathrm { OmpW } \) 의 발현 변화</h2> <p>그람 음성 세균의 외막 단백질은 세포의 최외곽에 위치하면서 다양한 역할을 수행하게 되는데 이러한 외막 단백질의 발현은 세포 외부의 환경 조건에 따라 다르게 조절된다. 그 중에서도 삼투 환경과 \( \mathrm { OmpW } \) 의 발현에 관한 가능성이 제시되어오고 있다. Salmonella에서 \( \mathrm { OmpW } \) 단백질의 발현이 이러한 삼투환경에 의해 조절되는지 여부를 알아보기 위하여 ompW promoter에 lacZ reporter 유전자를 융합시킨 재조합균주를 제작한 후, 다양한 농도의 \( \mathrm { NaCl } \) 가 첨가된 MacConkey + lac-tose 배지에 배양하여 reporter 유전자의 발현을 조사하고자 하였다. 하지만 MacConkey 배지에 과량의 \( \mathrm { NaCl } \) 이 첨가되면 Salmonella 균주의 생장자체가 저해되는 현상이 관찰되어 이러한 방법으로는 ompW 유전자의 발현을 확인할 수 없었다(data not shown).</p>