본 연구에서는 향장 식물의 추출물을 에탄올로 추출하여, 그람음성균, 그람 양성균, 혐기성 세균들 중 선정된 P. aeruginosa와 S. aureus와 C. albicans와 M. furfur와 P. acenes를 사용하여 피부병을 유발시키는 병원성 미생물의 향장식물 및 한약재의 에탄올 추출물에 대한 항균활성을 한천배지확산법(paper disk diffusion method)으로 측정하였다. 그 후, 통계적으로 분석하여 Table 3에 결과를 나타내었다.
<h1>재료 및 방법</h1> <h2>추출물</h2> <p>본 실험에 사용된 향장 식물 및 한약재는 Table 1에 제시하였다. 이들로부터 에탄올로 추출한 추출물은 (주)핀에서 준비한 것을 제공받아 사용하였다.</p> <h2>균주배양 및 배지</h2> <p>항균활성측정을 위해 사용한 균주는 그람 음성균 Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 (P. aeruginosa), 그람 양성균 Staphylococcus aureus ATCC 6538 (S. aureus), Candida albicans ATCC 10231 (C. albicans), Malassezia furfur ATCC 44338 (M. furfur), 혐기성 세균인 Propionibacterium acnes ATCC 6919 (P.acnes)로 한국 세포주 은행(ATCC)에서 구입하였으며 생육배지로는 Tryptic Soy Agar (TSA, Difco U.S.A.), Patato Dexrose Agar (PDA, Difco U.S.A.), Dixon's Agar (DA, Difco U.S.A.), Brain Hart infusion Agar (BHIA, Difco U.S.A.)를 사용하여 배양하였다.</p> <h2>항균 활성 실험</h2> <p>항균 활성 실험은 한천배지확산법(paper disk diffusion method)을 이용하여 측정하였다. 사면 배양하여 보관중인 시험균주를 여러 번 계대 배양하면서 활성화시켰다. 최적 배지, 온도에 접종하고, 각각의 실험균주 \( 300 \mathrm {\mu l } \left (6 \times 10 ^ { 7 } \mathrm { CFU } / \right . \mathrm { ml } \) )씩을 도말하였다. 완전히 굳은 배지 위에 지름 \( 6 \mathrm { mm } \) filter paper disk를 배지 위에 올려놓고, 추출물을 \( 25 \mathrm {\mu l } \)씩 점적하였다. 각 균주의 최적배양조건에서 배양한 후 dick 주위의 생육저해환(clear zone)의 크기로 항균활성을 측정하였다. 이때 양성대조군으로 페녹시에탄올 \( 20 \mathrm {\mu l } \)를 동일한 방법으로 항균력을 측정하고 다양한 추출물들의 효과를 양성대조군에 대한 백분율로 구하였다.</p> <h1>결 과</h1> <p>본 연구는 항균력이 우수한 천연 항균력 물질을 검색하여 응용제품에 적용할 수 있도록 항균제로 널리 알려진 향장 식물을 에탄올로 추출하여 피부병을 유발시키는 병원성 미생물 중 P. aeruginosa, S. aureus, C. albicans, M. furfur, P. acenes를 선정하여 항균활성도를 측정하였다.</p> <p>양성 대조군인 페녹서에탄올을 처리한 군에서의 저해존의 크기에 대한 실협군의 상대적 비율을 분석한 결과 P. aeruginosa에 대해서는 단삼과 오배자에서 강한 항균력이 나타났으며, S. aureus에 대해서는 소나무추출물 등이 어느 정도의 항균성을 나타냈다. 이러한 항균 실험을 다양한 향장식물 및 한약재의 에탄올 추출물에 대해 반복 수행하여 통계적인 의미성을 분석하고 그 결과를 Table 3에 제시하였다.</p> <p>P. aeruginosa에 대해서는 양성 대조군에서 보인 저해존에 대해 단삼의 경우 \(97 \% \), 황련의 경우 \(84 \% \)에 해당하는 항균력이 보였고, 그 외에도 작약, 스테비아, 때죽나무, 후리지아, 생강나무, 뽕나무, 오배자, 지유, 황금에서 항균력이 나타났다. S. aureus에 대해서는 오배자, 황련, 단삼이 가장 강한 항균력을 나타났는데 이는 양성 대조군에서 보인 저해존의 오배자의 경우 78%,황련의 경우 \(99 \% \), 단삼의 경우 92%에 해당하였다. 또한 작약, 찔레, 스테비아, 창포, 후리지아, 오디, 생강나무, 구절초, 고삼, 관중, 지유, 황금, 은행나무, 소나무, 인동초, 이나무에서 항균력을 나타냈다. C. albicans에 대해서는 황금의 경우 \(35 \% \), 황련의 경우 \(33 \% \)의 항균 활성을 보였다. M. furfur에 대해서는 오배자에서 가장 강한 항균력이 나타났는데 양성 대조군에서 보인 저해존의 \(57 \% \)에 해당하였으며 그 외에도 작약, 찔레, 황련, 진피, 목단피에서 항균력이 나타났다.</p> <p>P. acnes에 대해서는 황련, 단삼, 오배자, 작약에서 가장 강한 항균력이 나타났다. 이는 양성 대조군에서 보인 저해존의 황련과 단삼의 경우 \(99 \% \), 오배자의 경우 \(87 \% \) 에 해당하였으며, 작약의 경우 꽃에서 추출한 경우 \(89 \% \), 줄기에서 추출한 경우 \(35 \% \), 뿌리에서 추출한 \(22 \% \)에 해당하였다. 또한 찔레, 스테비아, 창포, 오디, 오이, 은방울꽃, 생강나무, 구절초, 고삼, 관중, 지유, 후박에서도 항균력이 나타났다. 이상의 결과에서 지리산 자생식물 중에서는 작약, 찔레,생강나무, 구절초, 소나무에서, 한약재 중에서는 황련, 오배자, 지유, 단삼, 황금에서 강한 항균력을 보였다. 하지만 생강나무의 줄기, 계피, 박하, 청미래덩굴, 산초, 복분자는 모든 균에서 항균력을 나타내지 않았다.</p>