비파추출물의 DPPH radical에 의한 소거 활성은 Brand-Williams 등의 방법에 준해 평가했으며, UV/VIS spectrophotometer로 흡광도를 측정했다. pyrogallol의 자동산화를 저해하는 정도인 SOD 유사활성은 Marklund & Marklund의 방법으로 평가했다. 추출물의 polyphenol 화합물 합량의 측정에는 Folin-Denis의 방법을 사용하였으며, 페놀성 화합물 중 flavonoid 화합물의 함량을 측정에는 diethyleneglycol을 혼합하고 rutin을 이용하였다. 모든 실험의 검량값은 동일 실험을 3회 반복 실시하여 결과는 평균\( \pm \)표준편차로 나타냈다.
<h2>DPPH radical 소거활성측정</h2><p>2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) radical에 의한 소거 효과는 Brand-Williams 등의 방법에 준하여 평가하였다. 일정한 농도로 정용한 비파추출물 \( 1 \mathrm{ml} \)에 \( 0.2 \mathrm{mM} \) DPPH를 \( 1 \mathrm{ml} \) 가하였다. 혼합물을 교반하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 30분간 반응시키고 UV/VIS spectrophotometer (U-2000, Hitachi, Japan)로 \( 517 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 기존에 사용되는 합성항산화제 BHT와 BHA를 시료와 같은 농도로 조제하여 같은 방법으로 측정하였으며 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 차이로 free radical 소거활성을 백분율로 표시하였다. 모든 실험은 3회 반복 실시하였으며 결과는 평균\( \pm \)표준편차로 나타내었다.</p><p>DPPH radical scavenging activity \( (\%)=\left(1-\frac{A b s_{\text {sample }}}{A b s_{\text {blank }}}\right) \times 100 \)</p><h2>SOD 유사활성측정</h2><p>SOD 유사활성은 pyrogallol의 자동산화를 저해하는 정도로 Marklund & Marklund의 방법으로 확인하였다. 일정한 농도로 정용된 시료 \( 0.2 \mathrm{ml} \)에 \( \mathrm{pH} 8.5\) 로 보정한 Tris-\( \mathrm{HCl} \) buffer \( 3 \mathrm{ml} \)와 \( 7.2 \mathrm{~mM} \) pyrogallol \( 0.2 \mathrm{ml} \)을 첨가하여 \( 25^{\circ} \mathrm{C} \)에서 10분간 반응시킨 후 \( 1 \mathrm{N}-\mathrm{HCL} \)로 정지시킨다. 반응액 중 산화된 pyrogallol의 양을 UV/VIS spectrophotometer (U-2000, Hitachi, Japan)로 \( 420 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 대조군으로는 기존에 사용되는 합성항산화제 BHT와 BHA를 시료와 같은 농도로 조제하여 같은 방법으로 측정하였으며 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도차이로 SOD 유사활성을 백분율로 표시하였다. 모든 실험은 3회 반복 실시하였으며 결과는 평균\( \pm \)표준편차로 나타내었다.</p><p>SOD-like activity \( (\%)=\left(1-\frac{A b s_{\text {sample }}}{A b s_{\text {blank }}}\right) \times 100 \)</p><h2>Polyphenol 화합물 함량 측정</h2><p>Folin-Denis의 방법을 이용하여 각 추출물의 polyphenol 함량을 측정하였다. test tube에 일정한 농도로 정용된 시료 \( 1 \mathrm{ml} \)와 \( 2 \% \mathrm{~Na}_{2} \mathrm{CO}_{3} \)를 \( 2 \mathrm{ml} \)을 첨가하여 실온에서 3분간 안정화 시킨 후 folin-ciocalteu's phenol reagent \(100 \mu l\)를 첨가하여 30분간 반응시켜 UV/VIS spectrophotometer (U-2000, Hitachi, Japan)로 \( 725 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 표준곡선은 tannic acid를 이용하여 검량선을 작성하고 polyphenol 화합물의함량을 \( \mathrm{mg} / \mathrm{g} \) tannic acid로 나타내었다. 모든 실험의 검량값은 동일한 실험을 3회 반복하여 평균한 값으로 나타내었다.</p><h2>Flavonoid 화합물 함량 측정</h2><p>페놀성 화합물 중 특히 각종 기능성을 나타내는 것으로 알려진 flavonoid 함량을 알아보기 위해 다음과 같이 측정하였다. 일정한 농도로 정용된 시료 \( 1 \mathrm{ml} \)와 diethyleneglycol \( 2 \mathrm{ml} \), \( 1 \mathrm{N}-\mathrm{NaOH} \)를 \( 20 \mu l \)를 혼합하여 \( 37^{\circ} \mathrm{C} \)에서 60분 동안 반응시킨 후 UV/VIS spectrophotometer (U-2000, Hitachi, Japan)로 \( 420 \mathrm{~nm} \)에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질로 rutin을 이용하여 검량선을 작성하고 flavonoid 함량을 \( \mathrm{mg} / \mathrm{g} \)으로 나타내었다. 모든 실험의 검량값은 동일한 실험을 3회 반복하여 평균한 값으로 나타내었다.</p>