PL9fwy3NUQKwZ4sD4inWpJTEYsc71Y3xW0/2273_Su5A5E_postprocess.srt

1
00:00:00,290 --> 00:00:03,370
Applicable to the enumeration of viable aerobic

2
00:00:03,370 --> 00:00:06,770
bacteria in food الهدف من هذه الطريقة هي الطريقة

3
00:00:06,770 --> 00:00:10,090
اللي هي من ال ACC الـ Aerobic Clinic Count أو

4
00:00:10,090 --> 00:00:14,570
مسميها Total Viable Count الهدف منها enumeration

5
00:00:14,570 --> 00:00:20,930
عد لبكتيريا بتكون حية و هوائية بتعتمد على وجود ال

6
00:00:20,930 --> 00:00:25,700
oxygen في النمورح نعدها في ال food سواء كانت هي

7
00:00:25,700 --> 00:00:28,960
البكتيريا psychrophilic إيش هي psychrophilic؟ محبة

8
00:00:28,960 --> 00:00:31,980
لدرجات الحرارة اللي منخفضة أو محبة للبرودة

9
00:00:31,980 --> 00:00:35,680
mesophilic محبة لدرجات الحرارة المعتدلة و

10
00:00:35,680 --> 00:00:40,300
thermophilic محبة لدرجات الحرارة العاليةThe

11
00:00:40,300 --> 00:00:44,280
Aerobic Colon Account الـ ACC استيمت بتقدر number

12
00:00:44,280 --> 00:00:47,580
of viable aerobic bacteria سواء كانت بالجرام أو

13
00:00:47,580 --> 00:00:51,440
بالملح حسب الحالة الفيزيائية لل product a portion

14
00:00:51,440 --> 00:00:54,360
of the product بناخد جزء من العيلة اللي هي عبارة

15
00:00:54,360 --> 00:00:57,920
عن ال analytical unit بعد نعمله سلسلة من التخفيفات

16
00:00:57,920 --> 00:01:02,630
بروح أخد من كل تخفيف و بعملهis mixed with a

17
00:01:02,630 --> 00:01:06,770
specified agar medium بروح أزرعه على الagar and

18
00:01:06,770 --> 00:01:10,510
incubated under a specific condition of time and

19
00:01:10,510 --> 00:01:15,010
temperature بحطه في ال incubator بوفر للبكتيريا ال

20
00:01:15,010 --> 00:01:18,310
time و ال temperature حسب نوع البكتيريا اللي بديها

21
00:01:18,310 --> 00:01:21,530
تنمو it's assumed that each viable aerobic

22
00:01:21,530 --> 00:01:25,370
bacteria will multiply under these conditionsبقول

23
00:01:25,370 --> 00:01:28,670
لي فبالتالي البكتيريا اللي كانت بالأساس ما بقدر

24
00:01:28,670 --> 00:01:31,690
أشوفها بال naked eye لما و أفرلها الظروف هاي من

25
00:01:31,690 --> 00:01:34,850
ناحية ال time و ال temperature راح يصير بإمكانها

26
00:01:34,850 --> 00:01:38,910
multiplication تتضاعف بال binary vision و تنقسم

27
00:01:38,910 --> 00:01:43,430
أكتر و تظهر على شكل visible كلني كلني بقدر أشوفها

28
00:01:43,430 --> 00:01:47,890
بال naked eye و بالتالي بعدها which can be counted

29
00:01:49,640 --> 00:01:52,920
الـ Cycrophilic bacteria هي المكتيريا المحبة

30
00:01:52,920 --> 00:01:58,220
للبرودة which grows optimally at or below 15 which

31
00:01:58,220 --> 00:02:01,380
has an upper limit أقصى درجة حرارة ممكن أنها تنمو

32
00:02:01,380 --> 00:02:06,280
عليها هي 20 وأقل درجة حرارة has a lower limit of

33
00:02:06,280 --> 00:02:10,730
growth 0يعني ده هي البكتيريا بتنمو على درجة حرارة

34
00:02:10,730 --> 00:02:17,310
من 0 ل20 لكن أفضل نمو لإلها على درجة حرارة 15 ال

35
00:02:17,310 --> 00:02:20,910
range من 0 ل20 و الأفضل على درجة حرارة 15 ال

36
00:02:20,910 --> 00:02:23,930
metophilic bacteria an organism whose optimum

37
00:02:23,930 --> 00:02:26,950
growth temperature أفضل نمو لإلها بتكون على درجة

38
00:02:26,950 --> 00:02:31,370
حرارة 37 أو 30 لكنها بتنمو في ال range من 20 ل45

39
00:02:33,210 --> 00:02:35,670
الـ Thermophilic Bakteria هي البكتيريا المحبة

40
00:02:35,670 --> 00:02:39,550
للحرارة المرتفعة فبتقل المعدار الشعراء أكتر من 45

41
00:02:39,550 --> 00:02:46,290
لكنها بتفضل الـ 55 هاي الشو في مواد ممكن نحتاجها

42
00:02:46,290 --> 00:02:50,170
في المعمل راح نحتاج لـ Colonic Counting Device هذا

43
00:02:50,170 --> 00:02:53,750
جهاز بعيد ال Colonies لكن إحنا في ما عملنا هنعيد

44
00:02:53,750 --> 00:02:57,270
باستخدام الـ naked eye يعني إحنا مش بحاجة للجهاز

45
00:02:57,270 --> 00:03:01,750
هذا لـ Stomacher أو لـ Blender جهاز بنستخدمه لطحن

46
00:03:01,750 --> 00:03:08,390
الطعامبحوله من solid إلى liquid الـ pH meter بيعمل

47
00:03:08,390 --> 00:03:14,810
على ضبط الـ pH الـ HCl و الـ NaOH هدول حمض و

48
00:03:14,810 --> 00:03:18,930
القاعدة بيقوللي أول ما بيجيلي ال food بروح أقيس ال

49
00:03:18,930 --> 00:03:23,430
pH لإله لو كان حامضي ال food لو كان حامضي بروح

50
00:03:23,430 --> 00:03:27,850
أضيف عليه NaOH فبالتالي بضني أضيف أضيف لعند ما

51
00:03:27,850 --> 00:03:32,840
يصير الوسط متعدل ال food متعدللو كان الـ Food

52
00:03:32,840 --> 00:03:39,040
جييني قاعدي بضيف عليه HCl عند ما يتعادل طيب ليش

53
00:03:39,040 --> 00:03:44,260
لازم أطبط الـ pH للـ Food؟ بقوللي في وسط اسمه الـ

54
00:03:44,260 --> 00:03:48,220
MSA هاد هتاخدوه بالتفصيل في المعمل القادم ان شاء

55
00:03:48,220 --> 00:03:54,760
الله MSA Media اسمها Manitol Salt Agar تمام؟ هاد

56
00:03:54,760 --> 00:04:00,320
وسط خاص بنمي البكتيريا لـ Staph Aureus اسم الوسط

57
00:04:00,320 --> 00:04:01,260
MSA

58
00:04:04,970 --> 00:04:09,710
الـ Media هي من ضمن مكوناتها pH Indicator فالـ pH

59
00:04:09,710 --> 00:04:18,390
اسمه Phenol Red لما الـ pH يكون حامضي بيعطيني لون

60
00:04:18,390 --> 00:04:23,530
أصفر لو كان الـ pH alkaline أو قاعدي بيعطيني لون

61
00:04:23,530 --> 00:04:29,330
أحمر تمام ال staff aureus راح تيجي وتنمو على هذا

62
00:04:29,330 --> 00:04:34,070
الوسط اللي لونه بالأساس بيكون beigeطبعا البكتيريا

63
00:04:34,070 --> 00:04:38,170
أثناء نموها بتستهلك من السكر الموجود في ال media

64
00:04:38,170 --> 00:04:43,170
بتعمله fermentation بتطلع acid fermentation للسكر

65
00:04:43,170 --> 00:04:48,530
بيعطي acid acid يعني pH منخفضة يعني هيصير الفينول

66
00:04:48,530 --> 00:04:54,770
red أو ال pH هيكون acidic acidic هيعطي لون لون

67
00:04:54,770 --> 00:04:58,230
أصفر ناتج عن شو ان البكتيريا عملت fermentation

68
00:04:58,230 --> 00:05:02,710
فطلعت acidفمن اللون الأصفر بقدر أعرف أن هذه

69
00:05:02,710 --> 00:05:06,330
البكتيريا بتطلع أسد طيب، فيه ملومات كنت عاملة تضبط

70
00:05:06,330 --> 00:05:09,990
الـ pH للـ food وكان مثلا جاينة أنه عينت أنه مثلا

71
00:05:09,990 --> 00:05:14,270
لبن و اللبن عدت، هاد حامضي فبالتالي الـ pH

72
00:05:14,270 --> 00:05:17,770
Indicator هيتحسس لوجود الحمض اللي بالـ food و

73
00:05:17,770 --> 00:05:22,110
هيطلع اللون أصفر إحنا هنفكر أن هذا الأصفر ناتج أن

74
00:05:22,110 --> 00:05:25,630
فيه بكتيريا Staph aureus عملت fermentation للسكر

75
00:05:25,630 --> 00:05:30,250
فطلعت أسد لكن لأ هي بالأسد جاية من الـ foodو هيك

76
00:05:30,250 --> 00:05:38,230
هيعطيني رقم كيونيز أكتر من المتوقع حتى

77
00:05:38,230 --> 00:05:43,070
لو كانت ناميا أي بكتيريا غير الـ Staph Aureus وهي

78
00:05:43,070 --> 00:05:47,590
البكتيريا بطبيعتها ما بتعمل fermentation للسكر

79
00:05:47,590 --> 00:05:52,050
فبالتالي هيطلع لون ال كيونيز لهذه البكتيريا أصفر

80
00:05:52,050 --> 00:05:55,950
ليش؟ لأن فيه أسد أتي من الـ food فرح أعد هذه ال

81
00:05:55,950 --> 00:05:58,590
كيونيز على أنها من ضمن ال Staph Aureus وهذا أساساً

82
00:05:58,590 --> 00:06:04,440
خطأالبروسيجر تديرمين أي نوع من البكتيريا الرويكية

83
00:06:04,440 --> 00:06:08,700
اللي بيستخدمها لازم أول اش نعرف شو نوع البكتيريا

84
00:06:08,700 --> 00:06:12,880
اللي راح أنميها ليش؟ مش هنعرف شو نوع الوسط اللي

85
00:06:12,880 --> 00:06:16,600
راح استخدمه فبوفر الوسط أو ال media حسب البكتيريا

86
00:06:16,600 --> 00:06:20,800
اللي راح أنميها analyze each sample unit

87
00:06:20,800 --> 00:06:24,380
individually كل عينة بتيجيلي بدي أتعامل معها بشكل

88
00:06:24,380 --> 00:06:28,190
منفصلthe test shall be carried out in accordance

89
00:06:28,190 --> 00:06:30,630
with the following instructions بدي أمشي على هاي

90
00:06:30,630 --> 00:06:34,050
التعليمات handling of sample unit بالنسبة لها

91
00:06:34,050 --> 00:06:37,030
التعامل مع ال sample unit هي اللي بناخدها من ال

92
00:06:37,030 --> 00:06:41,130
lot during storage and transport أثناء عمليات

93
00:06:41,130 --> 00:06:46,970
النقل والتخزين بدي أتبع الشغلات هاي أول أشي بقولي

94
00:06:46,970 --> 00:06:52,070
أن العينة المتلجة بحافظ عليها متلجة من Zeroلأ

95
00:06:52,070 --> 00:06:56,150
أربعة، العينة المتلجة بحافظ عليها متلجة و بخزّنها

96
00:06:56,150 --> 00:07:00,330
درجة حرارة سالب عشرين لو .. لو بدي أشتغل حاليًا

97
00:07:00,330 --> 00:07:06,650
على عينة frozen مجمدة، شو بعمل؟ بدي أعملها thawing

98
00:07:06,650 --> 00:07:12,750
التسيح، يا إما بنزلها بالتلاجة من إتنين لخمسة لو

99
00:07:12,750 --> 00:07:16,890
كنت مستعجلة عليها، بحطها في ال water bath درجة

100
00:07:16,890 --> 00:07:20,270
حرارة أقل من خمسة و ربعين لمدة لا تزيد عن خمستاشر

101
00:07:20,270 --> 00:07:24,490
minutesSample unit of a frozen product shall be

102
00:07:24,490 --> 00:07:28,190
kept frozen Though frozen sample in a refrigerator

103
00:07:28,190 --> 00:07:31,750
ممكن أحطها بالتلاجة بتسيح أو under time and

104
00:07:31,750 --> 00:07:36,090
temperature أو تحت time و temperature معينين which

105
00:07:36,090 --> 00:07:40,270
prevent microbial growth or deathدرج حر هيدا ال

106
00:07:40,270 --> 00:07:43,910
water bath بأطبطها بحيث أنها ما بتعمل نمو أو قتل

107
00:07:43,910 --> 00:07:46,470
لل micro organism فبتحافظ على العدد زي ما هو

108
00:07:46,470 --> 00:07:50,330
analyze sample unit as soon as possible after

109
00:07:50,330 --> 00:07:52,930
receipt in the laboratory بدي أحلل القي العين

110
00:07:52,930 --> 00:07:57,510
بمجرد متصنيع المعملبالنسبة لتحضير ال media زي ما

111
00:07:57,510 --> 00:08:00,490
عملنا في المعمل الماضي، بدنا نحضر ال media كيف؟

112
00:08:00,490 --> 00:08:03,750
بأجيب أي media أني بديها مثلا للنيوتا يتأجر، بتطلع

113
00:08:03,750 --> 00:08:07,150
على ال instructions من برا قداش بحتاج قلوات من ال

114
00:08:07,150 --> 00:08:10,030
powder، قداش بحتاج عليها ل distilled water، بحطهم

115
00:08:10,030 --> 00:08:12,390
مع بعض في ال flask، و بعدين بحطهم على ال hot

116
00:08:12,390 --> 00:08:15,630
plate، إذا بحتاج لتعقيم، بحققهم بال Autoclave

117
00:08:15,630 --> 00:08:19,850
تمام، بعد هيك بقصبهم and dispense in appropriate

118
00:08:19,850 --> 00:08:25,200
quantities sterilizedبصوبهم في الأطباق قلنا بنصوب

119
00:08:25,200 --> 00:08:29,660
من 15 ل 20 سم مكعب أو مليلتر A clean surface of

120
00:08:29,660 --> 00:08:32,440
working area with a suitable disinfectant بديعقب

121
00:08:32,440 --> 00:08:36,220
المنطقة اللي راح أشتغل عليها باستخدام disinfectant

122
00:08:36,220 --> 00:08:40,640
اللي هو مادة بتعمل على قتل فقط الباثوجينيك بكتيريا

123
00:08:40,640 --> 00:08:45,140
مش جميع أنواع الميكروعجنزم Clearly marked

124
00:08:45,140 --> 00:08:49,830
deduplicate petribletsباستخدام ال marker راح أكتب

125
00:08:49,830 --> 00:08:53,470
على كل طبق التخفيف لإله بقول لي ممكن نستخدم

126
00:08:53,470 --> 00:08:59,350
duplicate لكل تخفيف مثلا لل tube الأول كان تخفيفه

127
00:08:59,350 --> 00:09:03,230
عشرة أساليب اتنين بقدر استخدمله هاد طبقين الطبق

128
00:09:03,230 --> 00:09:06,870
الأول بحط عليه 100 micro الطبق التاني 100 micro

129
00:09:06,870 --> 00:09:13,580
أما الأتنين بحطهم في ال incubator بعد 24 ساعةبعد

130
00:09:13,580 --> 00:09:16,760
الـ QnA في الأتنين و باخد الـ average لإلهم لو

131
00:09:16,760 --> 00:09:21,660
كانت واقعة ضمن ال range من 25 ل 250 بعوض في

132
00:09:21,660 --> 00:09:25,020
القانون ال concentration بيساوي أنا على SVD أو

133
00:09:25,020 --> 00:09:29,920
ممكن أعمل duplicate لكل تخفيف واحد بحطه بالتلاجة

134
00:09:29,920 --> 00:09:33,840
والتاني بحطه بال incubator ليش هاي؟ مش هي ال

135
00:09:33,840 --> 00:09:37,180
interfering particlesأو اللي احنا بدي نمشي عليها

136
00:09:37,180 --> 00:09:41,500
بس بعمل طبق واحد لكل تخفيف بحطه في الـ incubator و

137
00:09:41,500 --> 00:09:45,660
بعد الكيلونز لو كانت واقعة ضمن ال range بعوض في

138
00:09:45,660 --> 00:09:50,500
القانون بالنسبة لـ dilution preparation of

139
00:09:50,500 --> 00:09:53,800
dilutions هم بيحكيني بدي نحضر واحد و عشرة بيبتون

140
00:09:53,800 --> 00:09:56,560
water diluent لكن احنا راح نشتغل عليها في ما عملنا

141
00:09:56,560 --> 00:10:01,900
normal saline 85 من 100% بقول لي to ensure truly

142
00:10:04,510 --> 00:10:08,030
مشان أضمن أنه أخد تعيين ممثل من ال analytical unit

143
00:10:08,030 --> 00:10:12,270
لازم أعمل agitation لل sample unit until the

144
00:10:12,270 --> 00:10:16,110
content are homogeneous لو كانت solid بحطها في ال

145
00:10:16,110 --> 00:10:22,570
blender لو كانت liquid بعملها mixIf the sample

146
00:10:22,570 --> 00:10:26,150
unit is solid لو كانت ال sample unit عندي solid زي

147
00:10:26,150 --> 00:10:30,790
مثلا طحين، لحمة، سلطة، شو بعمل؟ obtain the

148
00:10:30,790 --> 00:10:34,150
analytical unit by taking a portion from several

149
00:10:34,150 --> 00:10:37,350
locations within the sample unit راح أخد من كل

150
00:10:37,350 --> 00:10:44,350
مكان، من فوق، من تحت، من الوسط، من الأطراف بيقول

151
00:10:44,350 --> 00:10:48,070
لي prepare واحد لعشرة dilutions of food كيف بقدر

152
00:10:48,070 --> 00:10:52,710
أحضر واحد لعشرة؟ممكن باستخدام 25 إجرام من السمبل و

153
00:10:52,710 --> 00:10:59,650
225 مل من الـ Diluent أو ممكن11 جرام من الـ Sample

154
00:10:59,650 --> 00:11:04,310
و 99 مل من الدولوينت أو 10 جرام Sample و 90 مل من

155
00:11:04,310 --> 00:11:08,770
الدولوينت بغض النظر عن الكيميات بقدر أحضر تخفيف 1

156
00:11:08,770 --> 00:11:13,210
ل 10 ال slide اللي بعده هاي مش مهمة لكن المقصود

157
00:11:13,210 --> 00:11:16,910
فيها إن إحنا بدأ نبدأ بتخفيف 1 ل 10 و بدنا نمشي

158
00:11:16,910 --> 00:11:22,650
على مضاعفة العشرة 1 ل 10 1 ل 100 1 ل 1000 و هكذا

159
00:11:23,930 --> 00:11:27,010
Check the pH of the food suspension بيقول لي لازم

160
00:11:27,010 --> 00:11:30,210
أنه انحافظ على الـ pH للـ food بحيث انها تكون

161
00:11:30,210 --> 00:11:35,690
واقعة من خمس و نص لسبعة point ستةطيب لو كان الـ pH

162
00:11:35,690 --> 00:11:39,350
للفوض لما قصته بالـ pH Meter كان عندي مثلا أربعة

163
00:11:39,350 --> 00:11:42,930
أربعة يعني هاتش مالها acidic بدي أضيف عليها NaOH

164
00:11:42,930 --> 00:11:47,490
بضن أضيف لعند ما يصل عندي ل ال range الموجود هذا

165
00:11:47,490 --> 00:11:50,850
هو ال range بحيث أنه يكون فيه الفوض متعادل لو كان

166
00:11:50,850 --> 00:11:54,510
عندي الفوض الـ pH لإله تمانية شو بعمل؟ بضيف HCl

167
00:11:54,510 --> 00:11:58,310
بحيث أنه ينزل الـ pH للفوض و يصير ضمن ال range

168
00:11:58,310 --> 00:12:02,710
prepare succeeding decimal delution يعني بدي أعمل

169
00:12:02,870 --> 00:12:08,130
سيريال دي لوشن كذا تخفيف as required using a

170
00:12:08,130 --> 00:12:11,370
separate sterile pipet for making H-transfer رح

171
00:12:11,370 --> 00:12:15,190
أستخدم بيبت و أستخدم معاه تب امعقم و رح أاخد من كل

172
00:12:15,190 --> 00:12:19,770
تيوب واحد مل للتيوب اللي بعده mix واحد مل و هكذا

173
00:12:20,960 --> 00:12:24,400
Shake all dilutions immediately prior to making a

174
00:12:24,400 --> 00:12:27,660
transfer يعني أنا كنت عمال بشتغل على أول تيوب

175
00:12:27,660 --> 00:12:32,880
فعملتله mix روحت أخدت منه واحد مل و بعدين للتيوب

176
00:12:32,880 --> 00:12:36,460
التاني واحد مل و هكذا فطولت أنا هيك على التيوب

177
00:12:36,460 --> 00:12:40,060
الأول بدي أجي حاليا أخد 100 micro من أول تخفيف

178
00:12:40,060 --> 00:12:43,680
أحطه على الطبق طبعا أنا أستنيت عليها فترة لعين ما

179
00:12:43,680 --> 00:12:48,420
أخلص باقي ال tubes معناه للكلام أنه البكتيريا نسلت

180
00:12:48,420 --> 00:12:53,180
تحتصار عندى التوزيع مش متساوي فلازم أعمل vortex

181
00:12:53,180 --> 00:12:58,840
كمان مرة، mix بعمل mix و بعدين باخد 100 micro و

182
00:12:58,840 --> 00:13:02,260
بأزرع على الطبق ليش؟ to ensure uniform

183
00:13:02,260 --> 00:13:06,780
distribution of the microorganism present الشكل

184
00:13:06,780 --> 00:13:10,500
هذا بيقولك كيف لما يكون في عندى أكتر من تخفيف مثلا

185
00:13:10,500 --> 00:13:14,440
1 ل10، 1 ل100، 1 ل1000، شو بعمل؟ باخد 100

186
00:13:14,440 --> 00:13:17,900
microliter من كل .. من كل اتيوب بحطه على الطبق

187
00:13:19,520 --> 00:13:23,780
بزرعه بستنى عليه شوية بعدين بقلبه inverted

188
00:13:23,780 --> 00:13:27,340
position upside down بعدين بحطه في ال incubator 24

189
00:13:27,340 --> 00:13:32,900
ساعة لمدة على .. على 37 بعد الكولونز لاحظوا أن أول

190
00:13:32,900 --> 00:13:37,730
اتيوبين كان عندى الكولونز كتير كبيرة مليانةبدي أجي

191
00:13:37,730 --> 00:13:41,990
عدها هلاحظ أنه عددها already أكثر من 250 فالنتيجة

192
00:13:41,990 --> 00:13:45,070
إليهم هتكون too numerous to count ما بقدر أستخدم

193
00:13:45,070 --> 00:13:51,090
القانون عليهم الـ 2 بالتالت لما عدوها 65 هي واقعة

194
00:13:51,090 --> 00:13:55,730
ضمن ال range من 25 إلى 250 وبالتالي بقدر أعوض في

195
00:13:55,730 --> 00:14:02,280
القانون الـ 4 والخامس 6 colonists و 0 هدولبنسميهم

196
00:14:02,280 --> 00:14:07,440
negative أو too few to count، TFTC ما بقدر أعوض في

197
00:14:07,440 --> 00:14:13,980
القانون بدي أزرح حاليا ل plating يعني بدي أاخد من

198
00:14:13,980 --> 00:14:18,360
ال tube و أحط على الطبق agitate each dilution

199
00:14:18,360 --> 00:14:22,560
bottle to resuspend material that may have settled

200
00:14:22,560 --> 00:14:25,780
out during preparation برضه بروح أحط على ال vortex

201
00:14:25,780 --> 00:14:31,110
تانيلحتى أخد الميت مايكرو و أحطها على البلاد لحتى

202
00:14:31,110 --> 00:14:36,000
يصير uniform distribution of microorganismشو بعمل

203
00:14:36,000 --> 00:14:39,400
بعد هي خلاص فزراعت بحطهم في ال incubator لكن

204
00:14:39,400 --> 00:14:44,600
inverted position مقلبين الغطايا بدها تكون للأسفل

205
00:14:44,600 --> 00:14:48,280
Incubation temperature is dependent on the growth

206
00:14:48,280 --> 00:14:50,740
temperature requirement of the target organism

207
00:14:50,740 --> 00:14:54,160
بيقوللي درجة الحرارة وال time أنا بتحكم فيهم

208
00:14:54,160 --> 00:14:58,080
بأفبطهم حسب نوع البكتيريا اللي بدي أنامي هل هي

209
00:14:58,080 --> 00:15:01,680
psychrophilic محب لدرجة حرارة انما خفضة mesophilic

210
00:15:01,680 --> 00:15:06,480
معتادلة thermophilic عاليةavoid a crowding or

211
00:15:06,480 --> 00:15:10,180
excessive stacking of bloods بدي أمنع أن يكون عندي

212
00:15:10,180 --> 00:15:14,040
الأطباق فوق بعض بشكل كبير أو يكون في عندي أزدحام

213
00:15:14,040 --> 00:15:18,480
في ال incubator ليش؟ لأن هذا الأشي مش راح يسمح أنه

214
00:15:18,480 --> 00:15:23,520
بتوزيع منتظم للحرارة على كل الأطباق فبدي أراعي أنه

215
00:15:23,520 --> 00:15:27,600
ما تكون الأطباق مسفتة فوق بعض وأكتر من ال tubes

216
00:15:27,600 --> 00:15:32,430
أكتر من ال bloodsبالنسبة اللي اعد ال colonies

217
00:15:32,430 --> 00:15:35,850
count colonies promptly after the incubation بيجد

218
00:15:35,850 --> 00:15:39,710
okay انه هي البكتيري بتحتاج 24 ساعة خلاص خلصت ال

219
00:15:39,710 --> 00:15:44,230
24 ساعة مباشرة بروح بعد ال colonies ما بسمح بوقت

220
00:15:44,230 --> 00:15:50,230
إضافي if possible select plants with من 25 ل250

221
00:15:50,230 --> 00:15:53,950
colonies حتى بما فيها يعني ال colonies اللي بتكون

222
00:15:53,950 --> 00:15:57,250
pinpoint اللي صغيرة كتير زي رأس الدبوس هاي برضه

223
00:15:57,250 --> 00:16:00,670
كمان بعدهاإيه في بلايات contain colonies which

224
00:16:00,670 --> 00:16:05,290
spread؟ بقولي لو كان عندى الطبق فيه colonies موزع

225
00:16:05,290 --> 00:16:08,270
بالتساوي أو بانتظام على طول الطبق يعني مش أن يكون

226
00:16:08,270 --> 00:16:12,140
في عندى فيه جهةامكدس فيها الكولونز جهتاني وفاضلة

227
00:16:12,140 --> 00:16:15,840
لو كانت الكولونز موزعة بالتساوي و بانتظام في جميع

228
00:16:15,840 --> 00:16:19,140
الطبق شو بعمل Select representative portion of the

229
00:16:19,140 --> 00:16:21,940
plates free from spreader if possible and count

230
00:16:21,940 --> 00:16:26,060
the kolones in this area بقى شوف بقسم الكل .. بقسم

231
00:16:26,060 --> 00:16:30,440
البلات عندى الى أربع أربع باخد بس ربع واحد بعيد

232
00:16:30,440 --> 00:16:33,960
قدش فيه kolones وبالتالي بقدره في أربع و هيك بصير

233
00:16:33,960 --> 00:16:37,360
زي كإني عديت ال kolones اللى فى الطبق ككلThe total

234
00:16:37,360 --> 00:16:40,400
count of the entire plant is estimated by شو بعمل

235
00:16:40,400 --> 00:16:44,800
multiplying the count بدي أضرب قداش عندي العدد في

236
00:16:44,800 --> 00:16:48,020
المنطقة اللي أنا عديتها في أربعة ع سبيل المثال

237
00:16:48,020 --> 00:16:51,480
بقولي لو طلع منك لو طلع بس تلاتين كيلو نص في ربع

238
00:16:51,480 --> 00:16:55,560
واحد بدي في كل الطبق تلاتين في أربعة بطلع مية

239
00:16:55,560 --> 00:16:59,060
وعشرين كيلو نص العدد هاد واقع ضمن ال range

240
00:16:59,060 --> 00:17:03,850
وبالتالي بطبق القانونdifferentiation of colonies

241
00:17:03,850 --> 00:17:07,090
from interfering particles كيف بدي أميز هل هاي

242
00:17:07,090 --> 00:17:10,470
اللي عندى colonies أو هل هى interfering particles

243
00:17:10,470 --> 00:17:13,590
بقول ليه ال food particles أو ال interfering

244
00:17:13,590 --> 00:17:16,970
particles زى مثلا اللحمة لما ضال في منها جزيقات مش

245
00:17:16,970 --> 00:17:21,390
دائبة أو مثلا ال milk powder البودرة often

246
00:17:21,390 --> 00:17:24,050
interfere with the enumeration of the blood هيصير

247
00:17:24,050 --> 00:17:28,520
فيه تداخل أو في لبس بين عدالـKidneys وعد

248
00:17:28,520 --> 00:17:32,460
الـinterfering particles الكفة دي أتخلص منها عن

249
00:17:32,460 --> 00:17:36,720
طريق by making one extra plate of each dilution

250
00:17:36,720 --> 00:17:41,220
لكل تخفيف بحطله كمان طبق تاني وهذا الطبق تاني قلنا

251
00:17:41,220 --> 00:17:45,840
بحطه في التلاجة كcontrol بشوف قداش طالع عندي شكل

252
00:17:45,840 --> 00:17:50,620
قداش طالع عندي عدد الـinterfering particles وشكلها

253
00:17:50,620 --> 00:17:54,820
وموقعها و بقارنها مع موقعها اللي في الطبق اللي في

254
00:17:54,820 --> 00:17:59,430
ال incubatorAlternatively ممكن طريقة تانية After

255
00:17:59,430 --> 00:18:03,410
incubation بعد ما أطلع الطبق من ال incubator بدي

256
00:18:03,410 --> 00:18:08,270
أجي أعد شو بعمل؟ قبل اللي أعد بحط 2 مل TTC

257
00:18:08,270 --> 00:18:12,330
Triphenyl Tetrazolium Chloride المادة ده هي بحط

258
00:18:12,330 --> 00:18:18,740
منها 2 مل على الطبق ككل و بوزحها على الطبقGently

259
00:18:18,740 --> 00:18:22,240
روك بلات from side to side يعني بدي أحرك الطبق

260
00:18:22,240 --> 00:18:26,120
لحتى إنه هاي المادة تتوزع على كل الطبق اللي عندي

261
00:18:26,120 --> 00:18:32,580
بعد هيك بخليها على ال room temperature لمدة 3

262
00:18:32,580 --> 00:18:36,100
ساعات حطيتها okay بحطها على ال room temperature و

263
00:18:36,100 --> 00:18:41,600
بقلبها بعد كده بدي أطلع على لون ال colonies لو كان

264
00:18:41,600 --> 00:18:44,640
لو كان لونها أحمر معناته هاي colony أو إنها

265
00:18:44,640 --> 00:18:48,360
بكتيريا لو ماتلون معناته interfering particleأيش

266
00:18:48,360 --> 00:18:52,800
بيخليها تتلون أن البكتيريا بتعمل reduction للـ TTC

267
00:18:52,800 --> 00:18:57,100
بتحوليها لحاجة اسمها Formazan وهذه اللي لونها أحمر

268
00:18:57,100 --> 00:19:02,400
فبالتاليand aids in distinguishing the food

269
00:19:02,400 --> 00:19:05,580
particles هتساعد إنها تتميز ال food particles عن

270
00:19:05,580 --> 00:19:09,400
ال kidneys لكن قلنا المشكلة اللي بتواجهني kidneys

271
00:19:09,400 --> 00:19:12,580
cannot be picked for isolation after this method

272
00:19:12,580 --> 00:19:15,600
has been used ما بقدر أستخدم ال kidneys هاي اللي

273
00:19:15,600 --> 00:19:21,120
تم معالجتها بال TTC لإنها هتفقد بعض من خواصها وما

274
00:19:21,120 --> 00:19:25,520
راح تعطيني نتائج صحيحة recording result طبعا هدول

275
00:19:25,520 --> 00:19:31,290
لما نرجع شاء الله على الجامعة هنعمل التقاريرشو

276
00:19:31,290 --> 00:19:35,870
بعمل؟ لو أنا مستخدمة طبقين لكل تخفيف والاتنين في

277
00:19:35,870 --> 00:19:39,070
الـ incubator بروح أعد الكودنس في الأتنين و باخد

278
00:19:39,070 --> 00:19:43,050
الـ average لإلهم بعوت في القانون لو كان العدد

279
00:19:43,050 --> 00:19:46,370
واقع ضمن الـ range الـ concentration بسوء N على S

280
00:19:46,370 --> 00:19:49,330
في دي الـ N هي ال number of kudones الـ S هي ال

281
00:19:49,330 --> 00:19:51,970
volume اللي اتت دي، لازم تكون بالمل و هو ال volume

282
00:19:51,970 --> 00:19:56,530
اللي أخدته من التيوب و حطيته على البلاد و الـ D هو

283
00:19:56,530 --> 00:19:58,970
ال dilution الخاص لكل تيوب