[VIDÉO] Rocking microtome de Cambridge - - Accessoires du Microscope - Mikroscopia
Rocking microtome de Cambridge
Débuté par savant Cosinus , déc. 16 2016 05:08
Posté 16 décembre 2016 - 05:08
Dans le but de faire des coupes à la paraffine, j'ai hésité devant l'investissement d'un "vrai" microtome (rotatif) et je me suis tourné vers le microtome de Cambridge, très abordable.
Ce microtome dont le mouvement est à bascule date de la fin du 18° siècle... mais est encore fabriqué (en Inde) et se trouve chez Brunel U.K. Les Anglais en disent grand bien... on va essayer.
Quelques images pour vous le montrer, sachant que le plus dur reste à faire... les inclusions et les coupes, ici on est au niveau du technicien de laboratoire, et si c'est réussi, il faudra passer au niveau de l'histologiste... c'est une autre histoire !
Posté 16 décembre 2016 - 05:30
Posté 16 décembre 2016 - 06:37
... ça y est, ça doit marcher, désolé.
Posté 16 décembre 2016 - 07:11
C'est quoi très abordable ?
Et pour ce qui est du solvant de la paraffine ?
Difficile de se procurer du toluène... Une adresse ?
Posté 16 décembre 2016 - 07:23
Bravo Cosinus,
"Go west young man" disait-on au moment de la conquête des grands espaces américains ( mais ne va pas trop loin : l'Atlantique est vite arrivé pour toi !), esprit d'aventure qui t'honore . Comme tu te lances et que si je l'avais fait c'est le microtome vers lequel je me serais tourné je suis preneur de toutes tes impressions et sûr que je ne suis pas le seul.
à DOMI8723 :sur le site de Brunel U.K : 230 livres donc 274 euros sans compter l'envoi.
Posté 16 décembre 2016 - 07:43
Merci, je l'ai trouvé effectivement mais c'est encore cher pour moi !
Posté 16 décembre 2016 - 08:41
C' est aussi un vieux projet que j' avais mais je l' ai mis de coté en partie à cause de la difficulté de s' approvisionner en certains réactifs.
Cosinus fait nous part de ton expérience.
Pour le toluène ou le xylène il y aurait un substitut le Limonène qui a une odeur d ' agrume.
Posté 16 décembre 2016 - 09:11
Bon courage, quand je vois l'engin je m'imagine mal faire une coupe avec, mais c'est peut être parce que j'ai déjà coupé sur des microtomes conventionnels.
Pour les réactifs, tu peux toujours demander à un laboratoire de pathologie médicale
Merci de l'intérêt que vous portez à ce microtome... c'est ce que je pensais... on ose pas ! une visite à Dominique. m'a convaincu.
En effet les microtomes rotatifs sont vraiment chers, 1000 euros chez les hindous et 4 ou 5000 en Europe avec des occasions rares, c'est du matériel de laboratoire professionnel, difficile pour nous.
D'où l'intérêt ce "Rocking microtome", mais il a l'air tellement désuet qu'on hésite... les Anglais qui n'ont pas peur des vieilles choses ont bien raison.
La construction est très correcte, et le fonctionnement d'une simplicité étonnante est très satisfaisant (bien que je ne sois pas spécialiste). Précision: 350 euros TVA et port compris.
La paraffine est facile à trouver en sac de 5 kg... Dutscher (www.dutscher.com) vend en sac d'un kilo.
Pour le Toluène il faut ( chez mon droguiste.com par exemple) justifier d'une "activité professionnel"...? Il faut "laisser une trace" qui leur permet de justifier éventuellement la vente, je pense... à vous de voir... non j'ai pas dis ça ! Vous pouvez aussi faire du charme à votre pharmacienne ou bien soudoyez votre médecin... plus sérieusement en expliquant vos motivations vous devez pouvoir émouvoir un "ayant droit".
Pour ma part, c'est le résultat de cette activité qui me parait le plus difficile... l'histologie ! .. je vous tiens au courant.
Modifié par savant Cosinus, 16 décembre 2016 - 10:09 .
Posté 16 décembre 2016 - 10:51
On dirait presque une machine à coudre, mais c'est si beau !!!
On attend tous tes exploits cosinus
Posté 16 décembre 2016 - 11:41
Cosinus tu as surement raison dans ton choix .
La difficulté avec le microtome n'est pas trop le système de coupe que la lame coupante - or il me semble possible de fixer un porte couteau pour lame à usage unique sur ton appareil .
Depuis que j' utilise des lames à usage unique la réalisation des coupes n' est plus source d' angoisse comme avant -
Tous ensembles nous suivons ton expérience avec un grand plaisir
Posté 17 décembre 2016 - 09:50
Merci, je réalise mon rêve de toujours, je vais devenir célèbre... !
@ Pierre, effectivement le coté "Machine SINGER" a du entrer en ligne de compte... aux temps de l'informatique c'est trop rigolo !
Peux tu me rappeler les deux colorants utilisés pour ta tête d'abeille... et éventuellement le moyen de se les procurer ?
Pas du tout, cela ne ressemble pas à un Singer... (Quoi-que !)
Cela m'a servi à ressortir des réserves, mon Singer qui était tout neuf et dont les chromes commencent à se piquer!
(C'est en fait un prétexte pour demander conseil : Si quelqu'un a un remède ?)
J'ai ressorti aussi mon Minot, tout aussi atteint , je vous le présenterais après nettoyage...
Posté 17 décembre 2016 - 11:29
La technique la plus utilisée est la coloration Hématoxyline (pour les noyaux) Eosine pour le cytoplasme
Réhydratation quelques secondes
Bain dans Hématoxyline de Mayer 10 minutes
Bain dans eau bicarbonatée PH 7,8 à 8 3 minutes
Rincer à l’eau courante
Alcool 60° passage
Eosine alcoolique à 2% 3 minutes
Passage dans 2 bains d’eau acétique 1 %
Déshydratation et montage avec Eukit
--Eosine alcoolique chez le pharmacien
--Hématoxyline de Mayer ou de Erhlichs ( noyau bleu clair) ou de Harris ( noyau bleu sombre )
http://www.brunelmic...k/solvents.html 30 ml 3£
http://www.mm-france...ORANTS LIQUIDES mais par 500ml entre 30 et 60 euros ht
Modifié par Dominique., 17 décembre 2016 - 11:36 .
Posté 18 décembre 2016 - 08:36
Il en existe plusieur type
Dichrome de Mann,He
Trichrome de Masson ,HES,Hollande.....
mais pour moi, le plus difficile est la déshydratation et la mise en paraffine environs 48h voir 72h.
deux essais et deux échecs .
Posté 18 décembre 2016 - 10:22
La déshydratation se fait selon le protocole suivant
- Ethanol 30 60 90 environ 12 heures / 24 heures par bain mais cela dépend du volume de l' échantillon .
- Butanol 100 3 bains différents de 12 heures.
3 passages de 2 heures dans le Xylène .
Mise en inclusion dans paraffine liquide 4 jours ( bain à 56 °c )
cela doit te donner de bons résultats
Posté 18 décembre 2016 - 10:56
#18 JPL80
Posté 16 octobre 2017 - 10:13
Je suppose que ce microtome peut fonctionner avec du PEG au lieu de la paraffine.
Peux-tu me le confirmer car de cette possibilité dépend ma décision d'achat.
#19 Jean-Louis Yaïch
Posté 21 mars 2018 - 06:39
Quelqu'un dans cette maison sait-il où on peut se procurer des lames à usage unique à un prix abordable ?
#20 Dominique.
Posté 22 mars 2018 - 02:44
Ici :http://www.brunelmic...ccessories.html